Name: improving high viscosity extrusion of microcrystals for time-resolved serial femtosecond crystallography at x-ray lasers
Uploaded: 2019-02-28T14:30:00
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우리 인정 Gebhard Schertler, 라파엘 이탈리아 크리스 Milne PSI에 높은 점도 인젝터의 사용을 지원 합니다. 리처드 Neutze와 그의 팀은 시간 해결 결정학 및 샘플 배달 고 점도 인젝터를 사용 하 여 토론에 대 한 인정 됩니다. 스위스 국립 과학 재단 교부 금 31003A_141235, 31003A_159558 (에 제)에 대 한 재정 지원에 대 한 인정 및 (P.N.)를 PZ00P3_174169. 이 프로젝트는 유럽 연합의 수평선 2020 연구와 마리-Sklodowska-퀴리 부여 계약 아니오 701646 혁신 프로그램에서 자금을 받았다.

1. 단백질 크리스탈 샘플 준비
<ol><li>약 30 분 전에 샘플, 주입 하는 것입니다 monoolein 크리스탈-라덴의 부하 50 µ L 100 µ L 주사기에 LCP을 기반으로.</li>
	<li>대기압에서 주입에 대 한: 부하 10 µ L 주사기를 두 번째의 뒤쪽으로 액체 파라핀의. 수직으로 주사기를 들고, 주사기에서 공기 방울을 추방.<ol>
<li>진공 환경으로 주입에 대 한: 매기 7.9와 두 번째 주사기의 뒤쪽으로 액체 파라핀의 5 µ L의 부하 5...

점성 돌출 인젝터와 TR SFX 메서드 bacteriorhodopsin9,10 , photosystem II13 의 구조 역학 연구에 대 한 가능한 기술을 입증 하 고 지금 공부 단백질 다른 운전 준비가 보인다 사진 빛 구동 이온 전송 등 감각 지 각5,50생물 학적 프로세스. 위에서 설명한 프로토콜 bacteriorhodopsin, TR-SFX 데이터 컬렉션의 성공...

직렬 펨 결정학 (SFX)은 대부분의 잡기 동안 수천 마이크로미터 크기의 결정에서에서 x 선 자유 전자 레이저 (XFEL) 실 온 구조 결정의 독특한 속성을 이용 하는 구조 생물학 기술 "파괴 전에 회절" 원리1,2,3방사선 손상.
시간 해결 SFX (TR-SFX) 확장,는 XFEL에서 펨 펄스는 단백질4,5에 구조적인 변화를 공부 하는 데 사용 됩니다. 관심사의 단백질 XFEL 펌프-프로브 설치 프로그램에 의해 총 직전 광학 레이저 (또는 다른 활동 트리거) 활성화 됩니다. 정확 하 게 제어 함으로써 펌프와 프로브 펄스 사이의 지연, 다른 주에서 대상 단백질을 캡처할 수 있습니다. 시간 11 배나 통해 구조 변경의 분자 영화 보여 여러 단백질 목표6,7,,89의 역학을 공부 하는 새로운 XFEL 소스의 힘 10,11,,1213. 주로, 메서드 원자 해상도 근처에서 단백질 역동성으로 엿볼 제공 동적 광 및 정적 구조 기술을 하나로, 조인.
TR-SFX에 대 한 간단한 시스템 bacteriorhodopsin (bR)9,10에 망막, photosystem II12,13, chromophores 같은 사진에 민감한 구성 요소 활성화의 내 생 트리거 포함 될 수 있습니다. 광 노란색 단백질 (PYP)6,7 역 photoswitchable 형광 단백질11또는 myoglobin8일산화 탄소 photolyzable. 기술 개발에 여전히의 흥미로운 변이 혼합에 의존 하 고 주사 제도14,15 효소 반응 또는16구조적인 변화 유도 하는 데 사용 하는 전기 분야를 공부 하. XFEL 소스 겨우 사용할 수 있는 몇 년 동안 하 고 미래에 과거의 성공 바탕, 메서드를 보여 줍니다 방법에 대 한 우리의 이해에 관하여 진짜 게임 체인저로 잠재적인 단백질 기능.
생물 학적 샘플 단일 노출 고성능 XFEL 펄스에 의해 파괴 때문에 단백질 결정학에 새로운 접근 필요 했다. 이러한 절차 중 많은 양의 유니폼 microcrystals 성장 능력 개발된17,,1819필요가 있었다. XFEL에 데이터 컬렉션을 사용 하려면 이러한 결정 전달, 삭제, 고 각 XFEL 펄스에 대 한 다음 갱신 있습니다. XFELs 10-120 Hz에서 사용 가능한 펄스 발생, 샘플 배달 해야 되지, 안정, 빠르고 안정적 또한 유지 결정 그대로 제한 소비 하면서. 가장 성공적인 솔루션 중 continiously 펄스 x-선 빔20통해 실내 온도 크리스탈-라덴 lipidic 입방 단계 (LCP)의 열을 스트리밍을 제공 하는 높은 점성 마이크로 압출 인젝터가입니다. 무작위로 지향된 결정, XFEL 펄스 분산형 엑스레이 회절 패턴을 기록 하는 감지기에 의해 도청 하는 LCP 스트림에 포함. 그것은 자주 막 단백질 결정17,21,,2223, 아직 다른 점도 캐리어 미디어 성장 매체로 사용 LCP 샘플 전달 매체에 대 한 자연 선택은 24,25,26,,2728,29,30 및 수용 성 단백질31 또한 인젝터에 사용 되었습니다. 높은 점도 인젝터와 SFX 막 단백질13,32 G 단백질 결합 된 수용 체 (GPCRs)33,34, 등의 구조를 결정 하는 동안 성공 했습니다. 35,,3637, 네이티브 위상38,39 시간 및 효율적인 샘플 되는 동안에 대 한 충분 한 데이터 품질. 현재,이 인젝터는 사용 되 고 더 정기적으로 더 동안에 뿐만 아니라 싱크 로트 론 소스28,30,,4041 에서 실내 온도 측정에 대 한 기술적으로 XFELs9,10,,1342에서 TR SFX 실험을 요구.
그러나 유사한 TR SFX 실험 진행 되었습니다 밖으로 액체 단계 흐름에서 배달 집중 노즐6,,712같은 다른 인젝터 종류를 사용 하 여,,이 방법은 많은 단백질 양을 사용할 수 없는 필요 합니다. 생물학적으로 목표를 재미 있는. 액체 제트에 대 한 10000 인덱싱된 회절 패턴 9.35 mg에 비해 당 단백질의 0.072 밀리 그램의 평균 소비 점성 돌출을 사용 하 여 정적 구조체의 결정에 대 한 노즐 (즉, 130 배 더 많은 샘플에 대해 보고 되었습니다. 효율적인)20. 고 점도 인젝터만이 샘플 효율43의 일부 희생 하면서 TR SFX를 위한 실행 가능한 샘플 배달 장치를 보였다. Nogly 외. (2018)에10, 예를 들어 샘플 소비는 약 1.5 m g 10000 인덱싱된 패턴 당 평균 샘플 소비는 74 밀리 그램의 10000 당 단백질의 훨씬 더 높은 PYP를 사용 하 여 비슷한 TR SFX 실험을 호의적으로 비교 하는 인덱싱된 패턴6. 고 점도 인젝터는 따라서 사용 가능한 단백질의 양을 제한 하거나 결정 LCP 직접 재배 명확한 장점이 있다.
TR-SFX 높은 점도 사용 하 여에 대 한 몇 가지 기술적인 문제가 가장 신뢰할 수 있는 데이터를 인젝터 해결 해야: 흐름 속도 최소 임계값; 위에 남아 있어야 히트-속도 느린 데이터 컬렉션을 렌더링 하지 않는 수준에서 유지 되어야 한다 (예를 들어, 보다 큰 5%); 샘플 과도 한 중단 없이 전달 했다. 이상적으로, 이러한 조건을 이미 충족 하는 사용 가능한 XFEL 시간을 가능한 한 효율적으로 사용 하는 예약 된 TR SFX 실험 하기. Pricipally, LCP 스트림의 둔화 이상의 광학 레이저 펄스와 혼합된 활성 상태에 결과 활성화 된 결정 프로 빙 또는 umpumped 물자는 빔에 예상 되는 경우 펌핑된 소재를 프로 빙 수. 있습니다 사출 사전 테스트의 추가 혜택은 강등 압출 비 샘플 변경 막힌된 노즐을 교체 하는 시간으로는 XFEL에서 데이터 수집 하는 동안 가동 중지 시간 최소화 및 기타 유지 관리 작업 감소.
여기, 우리는 높은 점도 마이크로 압출 인젝터와 TR SFX 데이터 컬렉션에 대 한 샘플 배달을 최적화 하는 방법을 제시. 편의상, 설명된 방법 의존 하지 마십시오 X-ray 소스에 액세스할 수 있지만 싱크 로트 론 beamline29 일 것 이다 추가 제공 정보 예상된 적중된 속도 크리스탈 회절에. 우리의 프로토콜 양성자 펌프 bacteriorhodopsin10 에 망막 isomerization 캡처 실험을 최적화 하기 위해 개발 되었다 고 돌출을 모니터링 하 여 다음 돌출 크리스탈 샘플을 준비와 함께 시작 하는 두 단계에서 수행 됩니다. 고속 카메라 설치를 사용 하 여. 1 단계에서 결정-라덴 LCP 최종 혼합물은 막힘 또는 감속 없이 배달 샘플 환경에 적합 하도록 추가 LCP, 낮은 전환 온도 지질 또는 다른 첨가제 혼합입니다. 새로운 3 방향 주사 통 커플러는 혼합 성능 및 샘플 동질성을 개선 하기 위해 개발 되었다. 직접 압출 속도 안정성을 측정 하는 고속 카메라에 의해 기록 된 압출 테스트 두 번째 단계에 의하여 이루어져 있다. 비디오 데이터의 분석에 따라 조정 할 수 있다 샘플 준비 프로토콜에 실험 결과 개선 하기 위해. 이 절차는 최소한의 수정, TR-SFX 데이터 수집을 위해 준비 하는 다른 단백질을 적응 시킬 수 있다 및 제한 XFEL beamtime의 효율적인 사용에 기여할 것입니다. 그냥 그들의 작업44,45 synchrotrons28,30,40,41 인젝터 기반 직렬 데이터 수집 방법의 전송 시작 하는 새로운 XFEL 시설 , 다음 몇 년 동안 확실 하 게 계속 제공할 것 이다 단백질 목표의 적 넓은 범위의 구조 역학에 대 한 흥미로운 새로운 통찰력.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:745px;" width="744">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Mosquito LCP Syringe Coupling</td>
			<td style="width:175px;">TTP labtech store</td>
			<td style="width:101px;">3072-01050</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Hamilton Syringe 1710 RNR, 100 &#181;l</td>
			<td style="width:175px;">Hamilton</td>
			<td style="width:101px;">HA-81065</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Hamilton Syringe 1750 RNR, 500 &#181;l</td>
			<td style="width:175px;">Hamilton</td>
			<td style="width:101px;">HA-81265</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Monoolein</td>
			<td style="width:175px;">Nu-Chek Prep, Inc.</td>
			<td style="width:101px;">M-239</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">7.9 MAG</td>
			<td style="width:175px;">Avanti Polar Lipids Inc.</td>
			<td style="width:101px;">850534O</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">50% w/v PEG 2000</td>
			<td style="width:175px;">Molecular Dimensions</td>
			<td style="width:101px;">MD2-250-7</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Paraffin (liquid)</td>
			<td style="width:175px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:101px;">1.07162</td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">High speed camera</td>
			<td style="width:175px;">Photron</td>
			<td style="width:101px;"></td>
			<td style="width:224px;">Photron Mini AX</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">High magnification lens</td>
			<td style="width:175px;">Navitar</td>
			<td style="width:101px;"></td>
			<td>12X Zoom Lens System</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Three axis stage</td>
			<td style="width:175px;">ThorLabs</td>
			<td style="width:101px;">PT3/M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Fiber light</td>
			<td style="width:175px;">Thorlabs</td>
			<td style="width:101px;">OSL2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Fused silica fiber</td>
			<td style="width:175px;">Molex/Polymicro</td>
			<td style="width:101px;">TSP-505375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Lite touch ferrule</td>
			<td style="width:175px;">IDEX</td>
			<td style="width:101px;">LT-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">ASU high viscosity injector</td>
			<td style="width:175px;">Arizona State University</td>
			<td style="width:101px;"></td>
			<td>Purchasable from Uwe Weierstall (weier@asu.edu)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">HPLC pump</td>
			<td style="width:175px;">Shimadzu</td>
			<td style="width:101px;">LC-20AD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:245px;">Electronic gas regulator</td>
			<td style="width:175px;">Proportion Air</td>
			<td style="width:101px;">GP1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

improving high viscosity extrusion of microcrystals for time-resolved serial femtosecond crystallography at x-ray lasers

높은 점도 마이크로 압출 인젝터는 극적으로 x 선 자유 전자 레이저 (XFELs)에서 직렬 펨 결정학 실험 (SFX)에서 샘플 소비를 감소 했습니다. 일련의 실험 빛 구동 양성자 펌프 bacteriorhodopsin를 사용 하 여 추가 설정한이 인젝터의 구조 변화를 해결 하려면 시간 해결 직렬 펨 결정학 (TR-SFX)에 대 한 결정을 제공 하는 기본 옵션으로 photoactivation 후 단백질입니다. 높은 품질의 여러 구조 스냅샷, 많은 양의 데이터를 수집 하 고 모든 펌프 레이저 펄스 사이의 결정의 보장에 필수적 이다. 여기, 우리가 어떻게 우리가 우리의 최근 TR SFX 실험 Linac 일관 된 빛 소스 (LCLS)에서 bacteriorhodopsin microcrystals의 입체 최적화 자세히 설명 합니다. 방법의 목표 속도 증가 하는 결정의 높은 밀도 유지 하면서 안정적이 고 지속적인 흐름에 대 한 압출을 최적화 하는 실험에서 TR SFX에 데이터를 수집할 수 있습니다. 우리 커플링 장치는 고속으로 찍은 압출 안정성의 측정에 따라 샘플 구성 조정 하 여 다음 소설 3-방법으로 주사기를 사용 하 여 결정의 균일 분포 lipidic 입방 단계를 준비 하 여이 목표를 달성 카메라 설정입니다. 방법론은 다른 microcrystals의 흐름을 최적화 하기 위해 적용할 수 있습니다. 설치는 새로운 스위스 자유 전자 레이저 시설 사용자가 가능할 것 이다.

여기에 설명 된 절차 (그림 3)에 대 한 이상적인 시작 물자는 인젝터를 위한 점성 운반대 매체에 통합 하는 microcrystals의 높은 밀도 이다. 절차의 크리스탈 라덴 각 준비를 위해 약 50 µ L에 대 한 호출합니다. 이러한 bR9,10 여기, 예를 들어 (그림 4), 사용 또는 기존의 증기 확산 설정에서 ?...

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Improving High Viscosity Extrusion of Microcrystals for Time-resolved Serial Femtosecond Crystallography at X-ray Lasers

시간이 해결 직렬 펨 결정학 실험의 성공 효율적인 샘플에 따라 달라 집니다. 여기, 우리는 프로토콜 최적화 높은 점도 마이크로 압출 인젝터에서 bacteriorhodopsin microcrystals의 입체 면을 설명 합니다. 방법론은 소설 3 방향 커플러와 샘플 균질 및 고속 카메라와 시각화에 의존합니다.

X 선 레이저에서 직렬 펨 결정학 시간 해결에 대 한 Microcrystals의 고 점도 압출을 개선

High-viscosity micro-extrusion injectors have dramatically reduced sample consumption in serial femtosecond crystallographic experiments (SFX) at X-ray ...

이 프로토콜은 시간 해결 된 직렬 결정 실험 중에 자주 발생하는 문제가 데이터 품질을 손상시키지 않도록 설계되었습니다. 이 방법의 한 가지 주요 장점은 개별 결정 시스템에 대한 적응성입니다. 고속 카메라 압출 테스트를 통해 압출 안정성을 직접 측정할 수 있습니다.첫째, 주사 30분 전에 100 마이크로리터 주사기에 결정적 모노올렌 기반 LCP의 50 마이크로리터를 적재한다. 진공 환경에 주입하기 위해 MAG 7.9의 마이크로리터 5개와 액체 파라핀 5마이크로리터를 두 번째 주사기 뒤쪽에 적재합니다. 주사기를 수직으로 잡고 주사기에서 기포를 추방합니다.주사기를 MAG 7.9및 파라핀과 연결하여 표준 주사기 커플러에 연결합니다. 그리고 혼합물의 작은 양이 커플러 바늘의 끝에 보일 때까지 플런저를 부드럽게 눌러 커플러에서 공기를 제거합니다. 시료 주사기를 시료에 공기를 유입시키지 않는 자동차를 복용하는 주사기 커플러에 연결합니다.커플러를 여러 번 통과하여 지질과 파라핀에 섞는다. 다음으로, 다른 100 마이크로 리터 주사기에 미리 혼합 된 LCP의 20 마이크로 리터를로드합니다. 커플러에서 빈 주사기를 제거하고 표준 주사기 커플러를 사용하여 주사기를 함유하는 크리스탈에 미리 혼합된 LCP를 부착합니다.그런 다음, 커플러를 통해 샘플을 100 번 전달합니다. 입방 상에 샘플을 가져오려면 모노올렌 3 마이크로 리터를 넣고 50 번 섞습니다. 과도한 모노올렌을 피하기 위해 투명한 단계가 형성될 때까지 이 절차를 반복하십시오.시료 강성 및 압출가능성에 대한 예비 테스트로서, 주사기 커플러로부터 빈 주사기를 분리하고 주사기를 수직으로 잡고, 커플러를 통해 소량의 샘플러를 짜냅니다. 압출된 샘플이 직립 원통을 형성하면 샘플이 압출 테스트를 위한 준비가 되었습니다. 미리 혼합된 LCP를 추가하여 샘플의 총 부피를 100 마이크로리터로 조정합니다.샘플 주사기와 두 개의 빈 주사기를 3방향 주사기 커플러에 부착합니다. 샘플의 절반을 두 번째 주사기로 전달한 다음 샘플의 두 절반을 동시에 세 번째 주사기로 눌러 50회 이상 섞는다. 결정의 균일한 분포를 확인하기 위해 스테레오 현미경의 밑에 혼합 된 샘플을 포함하는 주사기를 놓습니다.HPLC 펌프와 모든 수로를 제거하여 유량이 정확한지 확인합니다. 그런 다음 인젝터의 유압 단계를 제거합니다. 그런 다음 카메라를 켜고 제공된 소프트웨어에 연결합니다.시각적 피드백을 위해 라이브 비디오를 실행하면 노즐 팁을 프레임 중앙에 배치하고 3축 스테이지에 초점을 맞춥니다. 카메라의 프레임 속도를 초당 1, 000 프레임으로 설정합니다. 그런 다음 해상도를 512x 512픽셀로 설정합니다.이제 프레임 속도에 의해 설정된 노출 시간을 통해 노즐이 표시될 때까지 조명 레벨을 조정합니다. 노즐 팁을 왼쪽에서 오른쪽으로 중앙에 배치하고 프레임의 상위 3분의 1에 위치합니다. 시간 경과 모드에서 카메라를 설정합니다.간격을 30초로 설정하고 반복을 40번으로 설정합니다. 트리거 모드를 임의로 설정합니다. 그리고 1, 000으로 기록할 프레임 수를 입력합니다.이제 시험 샘플의 20 마이크로리터로 저장소를 적재하고 모세관 노즐을 부착합니다. 채워진 저장소를 인젝터에 부착합니다. 그런 다음, 노즐의 포트에 가스 라인을 부착하고 가스 흐름을 시작합니다.이에 따라 펌프와 카메라 레코딩을 동시에 시작합니다. 펌프 압력이 예상 종료 시간 가까이 급격히 상승할 때까지 압출을 모니터링합니다. 그런 다음, 레코딩을 멈추고 펌프를 차단하고 릴리프 밸브를 열어 시스템 압력을 배출합니다.그런 다음 분석 소프트웨어로 비디오 파일을 열고 측정 도구를 보정합니다. 압출에 추적 가능한 기능이 있는 비디오에서 프레임을 찾습니다. 프레임 번호를 기록합니다.다음으로 동일한 기능이 표시되지만 이전 단계에서 위치에서 이동한 프레임으로 비디오를 진행합니다. 프레임 번호를 기록합니다. 직선 측정 도구를 사용하여 분석 측정을 통해 피쳐의 시작점과 끝점에서의 거리를 측정합니다.비디오의 모든 세그먼트에 대해 이전 단계를 몇 번 반복합니다. 마지막으로 데이터 계열을 플롯합니다. 여기에 설명된 절차에 이상적인 시작 재료는 인젝터를 위한 점성 담체 배지에 통합된 미세 결정의 높은 밀도이다.단백질 결정은 양성자 펌핑 박테리아 rhodopsin에 TRSFX 데이터를 수집하는 데 사용되었으며, 이는 광자 흡수 후 발생하는 매우 빠른 변화를 드러냈다. 3방향 커플러를 이용한 시료 준비 후, 주사기 내의 소재의 육안 검사는 시료 균질성을 나타낸다. 그리고 현미경 심시경 심은 결정의 밀도를 확인할 수 있습니다.샘플은 전달 매체가 명확하고 점성이 있을 때 입방 상에 있습니다. 탁하 혼합물은 샘플이 스폰지 또는 라멜라 상에 있다는 것을 나타내지만 고결정 밀도가 LCP의 선명도를 모호하게 할 수 있기 때문에 결정적이지 않습니다. 스폰지 위상을 식별하는 저압 테스트는 샘플에서 주사기 플런저를 당겨 수행 할 수 있습니다.제트 테스트 중에 샘플은 거의 일정한 속도로 이동하는 LCP의 긴 연속 열을 돌출해야 합니다. 드립 모드에서 실행되는 샘플은 점도가 너무 낮다는 것을 나타냅니다. 열을 형성하는 샘플의 데이터는 압출이 실험 매개 변수에 의해 지시된 최소 속도 이상으로 유지된다는 것을 보여줘야 합니다.이 프로토콜을 사용하여 최적화한 후 직렬 결정 데이터를 전문가 시설에서 수집할 수 있습니다. 이것은 그것의 기능을 수행할 때 전체 단백질에 있는 형성 변경을 밝힐 것입니다.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Preparing Adherent Cells for X-ray Fluorescence Imaging by Chemical Fixation

화학 고정하여 X-ray 형광 이미징 부착 세포를 준비

X-ray fluorescence imaging allows us to non-destructively measure the spatial distribution and concentration of multiple elements simultaneously over ...

연구

화학

X-ray Powder Diffraction in Conservation Science: Towards Routine Crystal Structure Determination of Corrosion Products on Heritage Art Objects

보존 과학의 X 선 분말 회절 : 문화 예술에 부식 제품의 일상적인 결정 구조 결정을 향해

The crystal structure determination and refinement process of corrosion products on historic art objects using laboratory high-resolution X-ray powder ...

Sediment Core Extrusion Method at Millimeter Resolution Using a Calibrated, Threaded-rod

교정, 스레드로드를 사용하여 미터 해상도에서 퇴적물 코어 압출 방법

Aquatic sediment core subsampling is commonly performed at cm or half-cm resolution. Depending on the sedimentation rate and depositional environment, ...

High Pressure Single Crystal Diffraction at PX^2

고압 PX에서 단결정 회절 ^ 2

In this report we describe detailed procedures for carrying out single crystal X-ray diffraction experiments with a diamond anvil cell (DAC) at the ...

Quantifying X-Ray Fluorescence Data Using MAPS

지도 사용 하 여 x 선 형광 데이터 측정

The quantification of X-ray fluorescence (XRF) microscopy maps by fitting the raw spectra to a known standard is crucial for evaluating chemical ...

Time-resolved Photophysical Characterization of Triplet-harvesting Organic Compounds at an Oxygen-free Environment Using an iCCD Camera

시간 해결 Photophysical 특성화 Triplet 수확 유기 화합물은 산소가 없는 환경을 사용 하 여는 iCCD 카메라

Here, we present a sensible method of the acquisition and analysis of time-resolved photoluminescence using an ultrafast iCCD camera. This system enables ...

An Experimental Protocol for Femtosecond NIR/UV - XUV Pump-Probe Experiments with Free-Electron Lasers

실험 프로토콜에 대 한 펨 NIR/UV-자유 전자 레이저와 진공 극 자외선 펌프-프로브 실험

This protocol describes key steps in performing and analyzing femtosecond pump-probe experiments that combine a femtosecond optical laser with a ...

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

Microfluidic Chips for In Situ Crystal X-ray Diffraction and In Situ Dynamic Light Scattering for Serial Crystallography

현장에서 크리스탈 x-선 회절 및 현장에서 직렬 결정학에 대 한 동적 빛 산란에 대 한 미세 칩

This protocol describes fabricating microfluidic devices with low X-ray background optimized for goniometer based fixed target serial crystallography. The ...

Essential Metal Uptake in Gram-negative Bacteria: X-ray Fluorescence, Radioisotopes, and Cell Fractionation

그램 음성 박테리아에 필수 금속 통풍 관: 형광, Radioisotopes, x 선 및 세포 분별 법

We demonstrate a scalable method for the separation of the bacterial periplasm from the cytoplasm. This method is used to purify periplasmic protein for ...

Elemental-sensitive Detection of the Chemistry in Batteries through Soft X-ray Absorption Spectroscopy and Resonant Inelastic X-ray Scattering

소프트 x 선 흡수 분광학 및 공명 탄력 x 선 산란을 통해 배터리에 화학의 원소 구분 검색

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