Name: effect of anti-c-fms antibody on osteoclast formation and proliferation of osteoclast precursor in vitro
Uploaded: 2019-03-18T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Effect of Anti-c-fms Antibody on Osteoclast Formation and Proliferation of Osteoclast Precursor In Vitro at JoVE.com

Эта работа частично поддержали JSP-страницы KAKENHI грант от японского общества для содействия развитию науки (№ 16K 11776 Х.к., № 17K 17306 K. S., № 16K 20637 K. K., № 16K 20636 М.с., № 18K 09862 I. м.).

Все животные процедуры и уход за животными были выполнены согласно Университет Тохоку правил и положений.
1. мышиных задних конечностей диссекции и обработка
<ol><li>До вскрытия заполнить тарелку с приблизительно 50 мл α-мкм в зависимости от размера контейнера и поместите е...

<ol>
	<li>Crotti, T. N., Dharmapatni, A. A., Alias, E., Haynes, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoimmunology:+Major+and+Costimulatory+Pathway+Expression+Associated+with+Chronic+Inflammatory+Induced+Bone+Loss.">Osteoimmunology: Major and Costimulatory Pathway Expression Associated with Chronic Inflammatory Induced Bone Loss.</a> Journal of Immunology Research. 2015, 281287 (2015).</li><li>Teitelbaum, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+resorption+by+osteoclasts.">Bone resorption by osteoclasts.</a> Science. 289 (5484), 1504-1508 (2000).</li><li>Azuma, Y., Kaji, K., Katogi, R., Takeshita, S., Kudo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+necrosis+factor-alpha+induces+differentiation+of+and+bone+resorption+by+osteoclasts.">Tumor necrosis factor-alpha induces differentiation of and bone resorption by osteoclasts.</a> Journal of Biological Chemistry. 275 (7), 4858-4864 (2000).</li><li>Kobayashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+necrosis+factor+alpha+stimulates+osteoclast+differentiation+by+a+mechanism+independent+of+the+ODF/RANKL-RANK+interaction.">Tumor necrosis factor alpha stimulates osteoclast differentiation by a mechanism independent of the ODF/RANKL-RANK interaction.</a> Journal of Experimental Medicine. 191 (2), 275-286 (2000).</li><li>Kim, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclast+differentiation+independent+of+the+TRANCE-RANK-TRAF6+axis.">Osteoclast differentiation independent of the TRANCE-RANK-TRAF6 axis.</a> Journal of Experimental Medicine. 202 (5), 589-595 (2005).</li><li>Redlich, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoclasts+are+essential+for+TNF-alpha-mediated+joint+destruction.">Osteoclasts are essential for TNF-alpha-mediated joint destruction.</a> Journal of Clinical Investestigation. 110 (10), 1419-1427 (2002).</li><li>Abu-Amer, Y., Ross, F. P., Edwards, J., Teitelbaum, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide-stimulated+osteoclastogenesis+is+mediated+by+tumor+necrosis+factor+via+its+P55+receptor.">Lipopolysaccharide-stimulated osteoclastogenesis is mediated by tumor necrosis factor via its P55 receptor.</a> Journal of Clinical Investestigation. 100 (6), 1557-1565 (1997).</li><li>Zha, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TNF-alpha+contributes+to+postmenopausal+osteoporosis+by+synergistically+promoting+RANKL-induced+osteoclast+formation.">TNF-alpha contributes to postmenopausal osteoporosis by synergistically promoting RANKL-induced osteoclast formation.</a> Biomedicine &amp; Pharmacotherapy. 102, 369-374 (2018).</li><li>Kitaura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M-CSF+mediates+TNF-induced+inflammatory+osteolysis.">M-CSF mediates TNF-induced inflammatory osteolysis.</a> Journal of Clinical Investigation. 115 (12), 3418-3427 (2005).</li><li>Kimura, K., Kitaura, H., Fujii, T., Hakami, Z. W., Takano-Yamamoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-c-Fms+antibody+inhibits+lipopolysaccharide-induced+osteoclastogenesis+in+vivo.">Anti-c-Fms antibody inhibits lipopolysaccharide-induced osteoclastogenesis in vivo.</a> FEMS Immunology and Medical Microbiology. 64 (2), 219-227 (2012).</li><li>Kimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+anti-c-Fms+antibody+inhibits+osteoclastogenesis+in+a+mouse+periodontitis+model.">An anti-c-Fms antibody inhibits osteoclastogenesis in a mouse periodontitis model.</a> Oral Diseases. 20 (3), 319-324 (2014).</li><li>Kitaura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+M-CSF+receptor+c-Fms+antibody+inhibits+mechanical+stress-induced+root+resorption+during+orthodontic+tooth+movement+in+mice.">An M-CSF receptor c-Fms antibody inhibits mechanical stress-induced root resorption during orthodontic tooth movement in mice.</a> Angle Orthodontist. 79 (5), 835-841 (2009).</li><li>Kitaura, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+anti-c-Fms+antibody+inhibits+orthodontic+tooth+movement.">An anti-c-Fms antibody inhibits orthodontic tooth movement.</a> Journal of Dental Research. 87 (4), 396-400 (2008).</li><li>Bettina, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=M-CSF+Mediates+Host+Defense+during+Bacterial+Pneumonia+by+Promoting+the+Survival+of+Lung+and+Liver+Mononuclear+Phagocytes.">M-CSF Mediates Host Defense during Bacterial Pneumonia by Promoting the Survival of Lung and Liver Mononuclear Phagocytes.</a> Journal of Immunology. 196 (12), 5047-5055 (2016).</li><li>Dougall, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RANK+is+essential+for+osteoclast+and+lymph+node+development.">RANK is essential for osteoclast and lymph node development.</a> Genes &amp; Develpoment. 13 (18), 2412-2424 (1999).</li><li>Wiktor-Jedrzejczak, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Total+absence+of+colony-stimulating+factor+1+in+the+macrophage-deficient+osteopetrotic+(op/op)+mouse.">Total absence of colony-stimulating factor 1 in the macrophage-deficient osteopetrotic (op/op) mouse.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 87 (12), 4828-4832 (1990).</li><li>Yang, P. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+expression+of+macrophage+colony-stimulating+factor+in+ankylosing+spondylitis+and+rheumatoid+arthritis.">Increased expression of macrophage colony-stimulating factor in ankylosing spondylitis and rheumatoid arthritis.</a> Annals of the Rheumatic Diseases. 65 (12), 1671-1672 (2006).</li><li>Takei, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+macrophage-colony+stimulating+factor+levels+in+synovial+fluid+of+loose+artificial+hip+joints.">High macrophage-colony stimulating factor levels in synovial fluid of loose artificial hip joints.</a> The Journal of Rheumatology. 27 (4), 894-899 (2000).</li></ol>

В этом исследовании мы исследовали эффект анти c-fms антитела на формирование RANKL-индуцированной остеокластов, ФНО α-индуцированной остеокластов формирование и распространение прекурсоров M-CSF-индуцированной остеокластов. Мы обнаружили, что эффективное количество антител анти c ФМС для ...

Остеокласты являются высоко специализированные клетки, и они дифференцируют от гемопоэтических стволовых клеток через слияние нескольких остеокластов прекурсоров. Они имеют важное значение для здорового костного ремоделирования и способствовать патологического костной резорбции, связанных с воспалительными заболеваниями литического как ревматоидный артрит и пародонта1.
Функции Osteoclastogenesis и остеокластов опосредовано двумя ключевыми факторами; макрофагальный колонии стимулирующий фактор (M-CSF) и рецепторов активатор ядерного фактора Каппа B лиганда (RANKL). M-CSF и RANKL имеют важное значение для дифференциации остеокластов2. Еще одним фактором, который было показано, чтобы побудить остеокластов формирования от костного макрофагов в пробирке является фактор некроза опухоли альфа (TNF-α)3,4,5. ФНО α опосредованной остеокластов формирования было показано, быть критическим для остеолиза в разрушительной костных заболеваний, таких как ревматоидный артрит6, заболевания пародонта7и постменопаузальный остеопороз8.
C-ФМС это мембранных рецепторов M-CSF и опосредует его действий. Роль c-fms хорошо документированы в литературе, как это было продемонстрировано, что администрация антитело против c-fms (антитела анти c ГПС) полностью арестован osteoclastogenesis в модели артрита, а также в ФНО α индуцированной кости эрозий при osteoclastogenesis отдаленные от воспаление сустава был по-прежнему надежный9. Администрация антитела анти c-fms тормозится остеокластов формирования и костной резорбции, вызванных липополисахарида (LPS) в мыши calvariae10 также как периодонтит LPS-индуцированной модели11. Кроме того антитела анти c-fms препятствует резорбции механические стресс индуцированного корень во время ортодонтического зуб движения12, а также движение ортодонтического зуб и костной резорбции, связанные с ортодонтического зуб движения13.
M-CSF сообщило иметь другие функции, которые необходимы для иммунного ответа. Отсутствие M-CSF в op/ОП мышей с бактериальной пневмонии приведет к увеличение бактериальной нагрузки и бактериальных распространения в печень с некроз печени14. Таким образом M-CSF имеет важное значение для иммунологической реакции в защите от инфекции.
Это исследование демонстрирует эффект анти c-fms антитела на M-CSF и RANKL или ФНО α индуцированной остеокластов формирования в пробирке и M-CSF вызванного распространением прекурсоров остеокластов. Этот протокол демонстрирует изоляции клеток костного мозга мышиных от длинных костей и шаги для создания костного макрофагов (BMM), которые рассматриваются в качестве прекурсоров остеокластов и побудить дифференцировка BMM на мультипотоковый остеокласты двумя методы; RANKL или ФНО α. Протокол также сравнивает арест osteoclastogenesis в обоих методах, с помощью антител анти c-fms.
Этот процесс, по которому костного извлекается и затем используется для создания остеокластов прекурсоров является надежным в производстве большого количества чистой остеокластов культуры, которые могут использоваться в нескольких приложениях течению например тестирования на наркотики. Использование RANKL или ФНО α, чтобы побудить osteoclastogenesis в этом протоколе отличает osteoclastogenesis как физиологический процесс (RANKL) от osteoclastogenesis как патологический процесс (TNF-α), который в свою очередь обеспечивает две альтернативные процедуры для руководства решение, из которых один улучшенный с точки зрения реагентов, которые будут использоваться в нисходящие приложения. Этот протокол также предоставляет метод, который мы можем определить подходящие концентрации антител анти c-fms, который может безопасно использоваться для более поздних исследований участвующих в костную резорбцию и литического заболеваний.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-c-Fms antibody</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>AFS98, a rat monoclonal, antimurine, c-Fms antibody (IgG2a)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TNF-&#945;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Recombinant murine TNF-&#945; prepared in our laboratory. TNF-&#945; cDNA fragment cloned by RT-PCR and cloned into a pGEX-6P-I (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ) to generate a GST-fusion protein. GST-TNF-&#945; was expressed in Escherichia coli BL21 cells cells (Stratagene, La Jolla, CA). The cells were lysed under nondenaturing conditions and GST-TNF-&#945; was purified over a glutathione-Sepharose column. GST was cleaved off by PreScission Protease (Amersham Biosciences) by manufacturer&#8217;s directions and was removed by a glutathione-Sepharose column.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>PEPROTECH</td>
			<td>315-11</td>
			<td>Recombinant Murine sRANK Ligand, Source: E.coli</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Recombinant human M-CSF. 1/10 vol of CMG14&#8211;12 cell line culture supernatant at 5X106&#160;cells in a 10-cm suspension culture dish.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-MEM</td>
			<td>Wako</td>
			<td></td>
			<td>with L-Glutamine and phenol red</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>s1820-500</td>
			<td>Fetal Bovine Serum French Origin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td>100 mm x 20 mm style dish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well plate</td>
			<td>Thermofischer Scientific</td>
			<td></td>
			<td>Nun clon Delta surface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell counting kit-8</td>
			<td>Dojindo, Kumamoto, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate reader</td>
			<td>Sunrise REMOTE; Tekan Japan, Kawasaki, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td>40 &#956;m Nylon</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge tube</td>
			<td>Corning</td>
			<td></td>
			<td>50 mL CentriStar cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Wako</td>
			<td></td>
			<td>Polyoxyethylene (10) Octyphenyl ether</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

effect of anti-c-fms antibody on osteoclast formation and proliferation of osteoclast precursor in vitro

Костного ремоделирования представляет собой сложный процесс, и она включает в себя периоды осаждения и резорбции. Костной резорбции представляет собой процесс, в котором кости с разбивкой по остеокласты в ответ на различные стимулы. Остеокластов прекурсоров дифференцироваться в мультипотоковый остеокласты в ответ макрофагальный колонии стимулирующий фактор (M-CSF) и рецепторов активатор ядерного фактора Каппа-B лиганда (RANKL). В патологических условиях Цитокиновый профиль отличается и включает в себя смесь воспалительных цитокинов. Фактор некроза опухоли альфа (TNF-α) является одним из наиболее важных цитокинов, как он найден в больших количествах в областях, связанных с воспалительным остеолиза. Цель настоящего Протокола заключается в предоставляют метод, по которому мышиных костного изолирован для создания остеокласты через индукции с M-CSF и RANKL или ФНО α, который будет впоследствии тормозится путем увеличения доз антител анти c-fms, рецептор для M-CSF. Этот эксперимент свидетельствует терапевтическую ценность антитела анти c-fms при заболеваниях воспалительного костную резорбцию.

Целью настоящего Протокола является оценить эффект анти c-fms антитела на формирование остеокластов присутствии RANKL или ФНО α и определить воздействие M-CSF на распространение прекурсоров остеокластов. В этом протоколе мы обеспечили надежный процесс, по которому генерир...

Watch this Scientific Journal Video about Effect of Anti-c-fms Antibody on Osteoclast Formation and Proliferation of Osteoclast Precursor In Vitro at JoVE.com

Effect of Anti-c-fms Antibody on Osteoclast Formation and Proliferation of Osteoclast Precursor In Vitro

Этот протокол включает диссекции мышиных длинных костей и костного изоляции, генерировать костного макрофагов и производить остеокласты, используя макрофагальный колонии стимулирующий фактор (M-CSF) и рецепторов активатор ядерного фактора Каппа-B лиганда (RANKL) или фактор некроза опухоли альфа (TNF-α) и их арест антитела анти c-fms, M-CSF рецептора.

Влияние антитела анти c-fms на формирование остеокластов и распространение остеокластов прекурсоров в пробирке

Bone remodeling is a complex process and it involves periods of deposition and resorption. Bone resorption is a process by which bone is broken down by ...

Этот эксперимент подчеркивает терапевтическую ценность антител Anti-c-fms при заболеваниях воспалительных нарушений костей, таких как ревматоидный артрит и пародонтит. Процесс, с помощью которого костный мозг извлекается и используется для генерации прекурсоров остеокласта, дает большое количество чистых остеокластов, которые могут быть использованы в нескольких приложениях вниз по течению. Этот протокол предоставляет два альтернативных метода остеокластогенеза, либо с использованием RANKL лиганд или TNF альфа.В дополнение к этому, этот метод дает представление о влиянии антител Anti-c-fms на остеокластогенез. Визуальная демонстрация этой процедуры знакомит исследователя с процессом вскрытия и получения клеток костного мозга в больших количествах. Для начала заполните пластину, которая будет служить в качестве контейнера для сбора с примерно 50 миллилитров альфа MEM, в зависимости от размера контейнера, и поместите его на лед.Используйте булавки, чтобы пробить через ладони и ноги усыпляемой мыши, чтобы исправить его в положении на спине, и спрей тщательно с 70% этанола. Используйте стерильные хирургические ножницы и пинцет, чтобы сделать разрез кожи на уровне бедра и расширить его до ног, подвергая мышцы. Найдите и вырежьте сухожилие, прикрепляя четырехглавую мышцу.Очистите мышцу и вырежьте ее на уровне бедра. Затем найдите сухожилие, прикрепляя мышцу подколенного сухожилия к кости. Очистите мышцы подвергая кости, и освободить подколенное сухожилие от его привязанности, убедившись, что не разрезать на кости.Распоить ножницы между головой бедренной кости и суставного пространства. Нарежьте его, освободив бедренную кость, но сохраняя кость нетронутой, что позволит отслоить кости без риска разоблачения костного мозга. Отрежьте мышцы, прикрепленные к голени аналогичным образом.Затем вырезать голени свободной от его вложения в голеностопный сустав, сохраняя при этом кости нетронутыми, чтобы избежать загрязнения. Используйте ножницы лезвия и лабораторные салфетки, чтобы соскребать любые оставшиеся мягкие ткани из бедренной кости и голени и поместить их в подготовленную тарелку с альфа-MEM размещены на льду. Вскрытие должно проводиться тщательно, чтобы свести к минимуму загрязнение.Именно поэтому тщательное удаление мягких тканей и локализация костей имеют решающее значение. Заполните шприц иглы 30-го калибра альфа-MEM. Отключите голени и бедренной кости от коленного сустава, и сократить концы длинной кости с обеих сторон с помощью ножниц.Используйте пинцет, чтобы держать кость от вала. Вставьте иглу в пространство костного мозга к кости и медленно промыть содержимое костного мозга в шесть сантиметров культуры блюдо и повторить для всех костей. Кость побелеет, что указывает на извлечение всего содержимого костного мозга.Используйте 40-метровый нейлоновый клеточный ситечко, чтобы процедить экстракт костного мозга в 50-миллилитровую коническую центрифугу. Центрифуга трубки при 300 раз G в течение пяти минут. Откажитесь от супернатанта.Для мытья добавьте в гранулы пять миллилитров альфа-MEM. Пипетт клетки, чтобы отделить их, центрифуга, и повторить мыть в общей сложности два раза. После подсчета этих изолированных клеток, как описано в рукописи, семя 10 миллионов клеток на 10 миллилитров, в 10 сантиметров культуры блюдо, и добавить M-CSF в клетки.Инкубировать культуру при 37 градусах по Цельсию, 5%углекислого газа в течение трех дней. Удалить среды через три дня, и мыть клетки дважды энергично с 10 миллилитров PBS для удаления неадхерентных клеток. Добавьте пять миллилитров комнатной температуры 0,02%трипсина-ЭДТА и PBS, и инкубировать при 37 градусах по Цельсию, 5%углекислого газа в течение пяти минут.Тщательно пипетки клетки, чтобы отделить их. Наблюдайте за культурой под микроскопом, чтобы убедиться, что клетки были отделены и появляются округлые и плавающие в средствах массовой информации. Когда клетки были отделены, инактивировать реакцию, добавив пять миллилитров альфа-MEM.Соберите клетки в 50 миллилитров конической трубки и центрифуги в 300 раз G в течение пяти минут. После отбрасывания супернатанта, мыть с пятью миллилитров альфа MEM, и центрифуга снова в 300 раз G в течение пяти минут. Повторно приостанавливайте гранулы в 10 миллилитров альфа-MEM.Семя 1 миллион клеток на 10 миллилитров в 10 сантиметров культуры блюдо, и добавить M-CSF. Инкубировать культуру при 37 градусах по Цельсию, 5%углекислого газа в течение трех дней. Урожай прикрепленных клеток, которые представляют BMMs как прекурсоры остеокласта после трех дней, как это было сделано ранее во время генерации BMMs.Семя BMMs на 50000 клеток на 200 микролитров альфа-MEM в 96 пластины хорошо на колодец. К каждому хорошо, добавить желаемые стимулы. А затем добавьте M-CSF для окончательной концентрации 100 нанограмм на миллилитр.Добавьте антитела Anti-c-fms к каждому наилучшим образом. Инкубировать пластину при 37 градусах по Цельсию, 5%углекислого газа в течение четырех дней, при изменении средств массовой информации через день в течение четырех дней. А затем приступить к окрашивания и анализы, как описано в рукописи.Оценивалось образование остеокласта в обработанных культурах M-CSF и RANKL с антителами Anti-c-fms. При 101 000 нанограммах на миллилитр анти-c-fms антитела, значительное снижение числа остеокластов наблюдалось по сравнению с контролем. В то время как, с одним из 10 нанограмм на миллилитр Анти-C-FMs антитела, не было значительного снижения.Затем было оценено образование остеокласта в альфа-культуре M-CSF и TNF с антителами Anti-c-fms. С 10, 100, 1000 нанограммов на миллилитр Анти-c-fms антитела, значительное снижение числа остеокластов наблюдалось по сравнению с контролем, без существенного снижения на один нанограмм на миллилитр. И культура M-CSF с 1, 10, 100 нанограммами на миллилитр анти-c-fms антитела, не было никакого значительного снижения числа предшественников остеокласта по сравнению с контролем.Тем не менее, на 1000 нанограмм на миллилитр, было значительное снижение числа прекурсоров остеокласта, что свидетельствует о том, что концентрация выше, чем 1000 нанограмм на миллилитр необходимо значительно ингибировать распространение прекурсоров остеокласта. Убедитесь в том, чтобы освободить облигации, сохраняя при этом кости нетронутыми, что позволит свести к минимуму вероятность загрязнения.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

In vitro Biofilm Formation in an 8-well Chamber Slide

В пробирке образование биопленки в 8-и палаты слайдов

The chronic nature of many diseases is attributed to the formation of bacterial biofilms which are recalcitrant to traditional antibiotic therapy. ...

Measurement of Antibody Effects on Cellular Function of Isolated Cardiomyocytes

Измерение антител воздействие на клеточные функции кардиомиоцитов изолированного

Dilated cardiomyopathy  (DCM) is one of the main causes for heart failure in younger adults1.  Although genetic disposition and exposition to toxic ...

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

The Synergistic Effect of Visible Light and Gentamycin on Pseudomona aeruginosa Microorganisms

Синергетический эффект от видимого света и гентамицин на<em&gt; Pseudomona палочки</em&gt; Микроорганизмы

Recently there were several publications on the  bactericidal effect of visible light, most of them claiming that blue part of  the spectrum (400 nm-500 ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Исследование действия пробиотиков на пневмококковой колонизации Использование<em&gt; Экстракорпоральное</em&gt; Соблюдение Анализ

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Methods for Quantitative Detection of Antibody-induced Complement Activation on Red Blood Cells

Методы количественного определения антител-индуцированной активации комплемента по ЭРИТРОЦИТОВ

Antibodies against red blood cells (RBCs) can lead to complement activation resulting in an accelerated clearance via complement receptors in the liver ...

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans

Макрофагов Холестерин истощение и ее влияние на фагоцитоз<em&gt; Cryptococcus neoformans</em

Cryptococcosis is a life-threatening infection caused by pathogenic fungi of the genus Cryptococcus. Infection occurs upon inhalation of spores, which are ...

Generation of Lymphocytic Microparticles and Detection of their Proapoptotic Effect on Airway Epithelial Cells

Генерация лимфобластный микрочастиц и выявление их проапоптозный Влияние на эпителиальными клетками дыхательных путей

Interest in the biological roles of cell membrane&#8211;derived vesicles in cell&#8211;cell communication has increased in recent years. Microparticles ...

High Throughput Measurement of Extracellular DNA Release and Quantitative NET Formation in Human Neutrophils In Vitro

High Throughput Measurement of Extracellular DNA Release and Quantitative NET Formation in Human Neutrophils In Vitro

Высокая пропускная способность измерения внеклеточной ДНК-релиз и количественный NET Формирование в нейтрофилах человека<em&gt; In Vitro</em

Neutrophil granulocytes are the most abundant leukocytes in the human blood. Neutrophils are the first to arrive at the site of infection. Neutrophils ...

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Расшифровка и визуализации патогенез и запи-<em&gt; Микобактерии abscessus</em&gt; У эмбрионов данио рерио

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as an infection model to study the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Zika Virus Infectious Cell Culture System and the In Vitro Prophylactic Effect of Interferons

Зика Вирус Система Инфекционный Культура клеток и<em&gt; In Vitro</em&gt; Профилактический эффект интерферонов

Zika Virus (ZIKV) is an emerging pathogen that is linked to fetal developmental abnormalities such as microcephaly, eye defects, and impaired growth. ZIKV ...