Name: an ex vivo tissue culture model for fibrovascular complications in proliferative diabetic retinopathy
Uploaded: 2019-01-25T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy at JoVE.com

Yazarlar en tıbbi ve cerrahi retina meslektaşları, hemşireler ve diyabetik birim ve vitreus cerrahi birimi Oftalmoloji departmanı, Helsinki Üniversitesi Hastanesi aktif istihdam katıldığınız için tüm personel için minnettarız hastaların. Biomedicum moleküler görüntüleme birimi görüntüleme özellikleri için teşekkür ederiz. Anastasiya Chernenko mükemmel teknik destek için teşekkür ederiz. Bu çalışmada Finlandiya Akademisi (KL), Helsinki Üniversitesi (KL), Sigrid Juselius Vakfı (KL), K. Albin Johansson Vakfı (KL), Finlandiyalı Kanser Enstitüsü (KL), Karolinska Institutet (KL), Finlandiyalı göz Vakfı (SL), göz gelen hibe tarafından desteklenen ve Doku Bankası Vakfı (SL), Mary ve Georg C. Ehrnrooth Vakfı (SL) ve HUCH klinik araştırma hibe sonra TYH2016230, SL (TYH2018127), doktora programı Biyomedikal (EG) yanı sıra diyabet araştırma Vakfı (SL, KL, AK, örneğin).

Bu araştırma Kurumsal değerlendirme Komitesi ve Helsinki Üniversitesi Hastanesi etik kurul tarafından kabul edildi. İmzalı onay her hastadan elde edildi.
1. hazırlık çözümler, medya & donanım
<ol><li>Hızlı işleme emin olmak için fibrovascular doku (FT) topluluğu önce aşağıdaki donanımları hazırlamak.<ol>
<li>Steril-otoklav iki mikrodiseksiyon cımbız.</li>
		<li>1 fosfat tamponlu tuz çözeltisi (PBS) x 1 önceden ağırlığını PBS (0.14 M NaCl, 0.0027 M KCl, 0.0...

<ol>
	<li>Cho, N. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IDF+Diabetes+Atlas:+Global+estimates+of+diabetes+prevalence+for+2017+and+projections+for+2045.">IDF Diabetes Atlas: Global estimates of diabetes prevalence for 2017 and projections for 2045.</a> Diabetes Research and Clinical Practice. 138, 271-281 (2018).</li><li>Liew, G., Wong, V. W., Ho, I. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini+Review:+Changes+in+the+Incidence+of+and+Progression+to+Proliferative+and+Sight-Threatening+Diabetic+Retinopathy+Over+the+Last+30+Years.">Mini Review: Changes in the Incidence of and Progression to Proliferative and Sight-Threatening Diabetic Retinopathy Over the Last 30 Years.</a> Ophthalmic Epidemiology. 24 (2), 73-80 (2017).</li><li>Loukovaara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Indications+of+lymphatic+endothelial+differentiation+and+endothelial+progenitor+cell+activation+in+the+pathology+of+proliferative+diabetic+retinopathy.">Indications of lymphatic endothelial differentiation and endothelial progenitor cell activation in the pathology of proliferative diabetic retinopathy.</a> Acta Ophthalmologica. 93 (6), 512-523 (2015).</li><li>Stitt, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+progress+in+understanding+and+treatment+of+diabetic+retinopathy.">The progress in understanding and treatment of diabetic retinopathy.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 51, 156-186 (2016).</li><li>Duh, E. J., Sun, J. K., Stitt, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetic+retinopathy:+current+understanding,+mechanisms,+and+treatment+strategies.">Diabetic retinopathy: current understanding, mechanisms, and treatment strategies.</a> JCI Insight. 2 (14), (2017).</li><li>Gross, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Five-Year+Outcomes+of+Panretinal+Photocoagulation+vs+Intravitreous+Ranibizumab+for+Proliferative+Diabetic+Retinopathy:+A+Randomized+Clinical+Trial.">Five-Year Outcomes of Panretinal Photocoagulation vs Intravitreous Ranibizumab for Proliferative Diabetic Retinopathy: A Randomized Clinical Trial.</a> JAMA Ophthalmology. 136 (10), 1138-1148 (2018).</li><li>Robinson, R., Barathi, V. A., Chaurasia, S. S., Wong, T. Y., Kern, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Update+on+animal+models+of+diabetic+retinopathy:+from+molecular+approaches+to+mice+and+higher+mammals.">Update on animal models of diabetic retinopathy: from molecular approaches to mice and higher mammals.</a> Disease Models, Mechanisms. 5 (4), 444-456 (2012).</li><li>Villacampa, P., Haurigot, V., Bosch, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proliferative+retinopathies:+animal+models+and+therapeutic+opportunities.">Proliferative retinopathies: animal models and therapeutic opportunities.</a> Current Neurovascular Research. 12 (2), 189-198 (2015).</li><li>Cox, T. R., Erler, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Remodeling+and+homeostasis+of+the+extracellular+matrix:+implications+for+fibrotic+diseases+and+cancer.">Remodeling and homeostasis of the extracellular matrix: implications for fibrotic diseases and cancer.</a> Disease Models, Mechanisms. 4 (2), 165-178 (2011).</li><li>Sharma, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+treatment+for+diabetic+vitreoretinal+diseases:+a+review.">Surgical treatment for diabetic vitreoretinal diseases: a review.</a> Clinical, Experimental Ophthalmology. 44 (4), 340-354 (2016).</li><li>Gucciardo, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+microenvironment+of+proliferative+diabetic+retinopathy+supports+lymphatic+neovascularization.">The microenvironment of proliferative diabetic retinopathy supports lymphatic neovascularization.</a> The Journal of Pathology. 245 (2), 172-185 (2018).</li><li>Rezzola, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+endothelial+cell+spheroid/human+vitreous+humor+assay+for+the+characterization+of+anti-angiogenic+inhibitors+for+the+treatment+of+proliferative+diabetic+retinopathy.">3D endothelial cell spheroid/human vitreous humor assay for the characterization of anti-angiogenic inhibitors for the treatment of proliferative diabetic retinopathy.</a> Angiogenesis. 20 (4), 629-640 (2017).</li><li>Pepper, M. S., Montesano, R., Mandriota, S. J., Orci, L., Vassalli, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis:+a+paradigm+for+balanced+extracellular+proteolysis+during+cell+migration+and+morphogenesis.">Angiogenesis: a paradigm for balanced extracellular proteolysis during cell migration and morphogenesis.</a> Enzyme, Protein. 49 (1-3), 138-162 (1996).</li><li>Lafleur, M. A., Handsley, M. M., Knauper, V., Murphy, G., Edwards, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+tubulogenesis+within+fibrin+gels+specifically+requires+the+activity+of+membrane-type-matrix+metalloproteinases+(MT-MMPs).">Endothelial tubulogenesis within fibrin gels specifically requires the activity of membrane-type-matrix metalloproteinases (MT-MMPs).</a> Journal of Cell Science. 115 (Pt 17), 3427-3438 (2002).</li><li>Loukovaara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Proteomics+Analysis+of+Vitreous+Humor+from+Diabetic+Retinopathy+Patients.">Quantitative Proteomics Analysis of Vitreous Humor from Diabetic Retinopathy Patients.</a> Journal of Proteome Research. 14 (12), 5131-5143 (2015).</li><li>Abu El-Asrar, A. M., Struyf, S., Opdenakker, G., Van Damme, J., Geboes, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+stem+cell+factor/c-kit+signaling+pathway+components+in+diabetic+fibrovascular+epiretinal+membranes.">Expression of stem cell factor/c-kit signaling pathway components in diabetic fibrovascular epiretinal membranes.</a> Molecular Vision. 16, 1098-1107 (2010).</li><li>Loukovaara, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ang-2+upregulation+correlates+with+increased+levels+of+MMP-9,+VEGF,+EPO+and+TGFbeta1+in+diabetic+eyes+undergoing+vitrectomy.">Ang-2 upregulation correlates with increased levels of MMP-9, VEGF, EPO and TGFbeta1 in diabetic eyes undergoing vitrectomy.</a> Acta Ophthalmologica. 91 (6), 531-539 (2013).</li><li>Sugiyama, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EphA2+cleavage+by+MT1-MMP+triggers+single+cancer+cell+invasion+via+homotypic+cell+repulsion.">EphA2 cleavage by MT1-MMP triggers single cancer cell invasion via homotypic cell repulsion.</a> Journal of Cell Biology. 201 (3), 467-484 (2013).</li><li>Tatti, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MMP16+Mediates+a+Proteolytic+Switch+to+Promote+Cell-Cell+Adhesion,+Collagen+Alignment,+and+Lymphatic+Invasion+in+Melanoma.">MMP16 Mediates a Proteolytic Switch to Promote Cell-Cell Adhesion, Collagen Alignment, and Lymphatic Invasion in Melanoma.</a> Cancer Research. 75 (10), 2083-2094 (2015).</li><li>Zudaire, E., Gambardella, L., Kurcz, C., Vermeren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+computational+tool+for+quantitative+analysis+of+vascular+networks.">A computational tool for quantitative analysis of vascular networks.</a> PLoS One. 6 (11), e27385 (2011).</li><li>Senger, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+framework+for+angiogenesis:+a+complex+web+of+interactions+between+extravasated+plasma+proteins+and+endothelial+cell+proteins+induced+by+angiogenic+cytokines.">Molecular framework for angiogenesis: a complex web of interactions between extravasated plasma proteins and endothelial cell proteins induced by angiogenic cytokines.</a> American Journal of Pathology. 149 (1), 1-7 (1996).</li><li>Senger, D. R., Davis, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis.">Angiogenesis.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 3 (8), a005090 (2011).</li><li>Bishop, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structural+macromolecules+and+supramolecular+organisation+of+the+vitreous+gel.">Structural macromolecules and supramolecular organisation of the vitreous gel.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 19 (3), 323-344 (2000).</li><li>Marmorstein, A. D., Marmorstein, L. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+challenge+of+modeling+macular+degeneration+in+mice.">The challenge of modeling macular degeneration in mice.</a> Trends in Genetics. 23 (5), 225-231 (2007).</li><li>Kim, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+cells+from+patient-derived+fibrovascular+membranes+in+proliferative+diabetic+retinopathy.">Characterization of cells from patient-derived fibrovascular membranes in proliferative diabetic retinopathy.</a> Molecular Vision. 21, 673-687 (2015).</li><li>Avery, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravitreal+bevacizumab+(Avastin)+in+the+treatment+of+proliferative+diabetic+retinopathy.">Intravitreal bevacizumab (Avastin) in the treatment of proliferative diabetic retinopathy.</a> Ophthalmology. 113 (10), e1691-e1615 (2006).</li><li>Zhao, L. Q., Zhu, H., Zhao, P. Q., Hu, Y. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+systematic+review+and+meta-analysis+of+clinical+outcomes+of+vitrectomy+with+or+without+intravitreal+bevacizumab+pretreatment+for+severe+diabetic+retinopathy.">A systematic review and meta-analysis of clinical outcomes of vitrectomy with or without intravitreal bevacizumab pretreatment for severe diabetic retinopathy.</a> The British Journal of Ophthalmology. 95 (9), 1216-1222 (2011).</li><li>Carrion, B., Janson, I. A., Kong, Y. P., Putnam, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+safe+and+efficient+method+to+retrieve+mesenchymal+stem+cells+from+three-dimensional+fibrin+gels.">A safe and efficient method to retrieve mesenchymal stem cells from three-dimensional fibrin gels.</a> Tissue Engineering. Part C, Methods. 20 (3), 252-263 (2014).</li></ol>

İlgili doku microenvironment güvenilir işlevsel hücre ve moleküler mekanik sonuçları için önemi göz önüne alındığında, bu doku ortamı sağlamak uygun deneysel modelleri bulmak için zorunludur. Burada açıklanan ex vivo PDR kültür modeli fibrin gömülü FTs için PDR patofizyolojisi mekanizmalarının incelenmesi PDR klinik örnekler yerel, karmaşık ve çok hücreli bağlamında verir.
Kritik iletişim kuralına uygun fibrin jel oluşumu, FT ve boyama sırasınd...

DR diyabet, son üç yılda1büyük oranlarda ulaştı bir hastalık ciddi bir oküler komplikasyondur. Yirmi yıl sonra tanı, diyabet tip 1 ve tip 2 diyabet retinopati şeker hastalığı başına bir lider yapmak, mevcut belirtileri ile % 60 hastaların hemen hemen her hastada yaş yetişkin2çalışma körlüğü neden olur. Mikrovasküler dejenerasyon ve iskemik hasar düzeyine göre DR Proliferatif DR (non-PDR) ve Proliferatif DR (PDR) sınıflandırılır. Son aşama hastalığı, PDR, iskemi ve inflamasyon indüklenen neovaskülarizasyon ve fibrotik vitreus arayüzü ile karakterizedir. Tedavi edilmemiş koşullarında, bu işlemlerin körlüğü nedeniyle vitreus kanaması, Retina fibrozis, tractional Retina dekolmanı ve neovasküler glokom3,4yol açar. Son gelişmeler rağmen mevcut tedavi seçenekleri sadece DR aşamaları Retina hasar zaten ortaya çıkan zaman Diyabetik Makula ödemi ve PDR, dahil olmak üzere, hedef. Ayrıca, DR hastaların büyük oranda gelişmiş tedaviler4,5,6için acil bir ihtiyaç gösteren geçerli tedavi armamentarium yarar değil.
Tarihi için birden çok diğer benn vivo hastalık/gelişimsel modeller ve diyabetik hayvan modelleri geliştirilmiştir, ama hiç biri tam kapsamlı patolojik özellikleri insan PDR7,8' gözlenen beyannamedir. Ayrıca, kanıt artan ECM kompozisyon yanı sıra mekansal düzenleme ve hücresel ve acellular microenvironment9arasındaki etkileşimi tedavi yanıt sıkıca bağlı olduğunuzu belirtir. Biz bu nedenle, genelde vitrektomi PDR10cerrahi yönetiminin bir parçası olarak gören gözlerinden eksize FT patolojik malzeme insan PDR klinik bir model geliştirmek üzere yola çıktı.
Bu el yazması için 3D ex vivo kültür protokolünü açıklar ve cerrahi-varlığına, PDR karakterizasyonu hasta patolojik FT kaynaklı. Burada açıklanan yöntemi gösterdi yerli 3D PDR doku peyzaj başarılı deconstruction ve tekrarlama PDR patofizyolojisi anjiogenik ve fibrotik anormal gibi özelliklerinden son yayında kullanılan vasküler yapılar11. Bu model ayrıca apoptozis ve yayılması gibi vasküler adacık oluşumu11kolayca--dan ince histolojik kesitler, gibi dağınık şekilde takdir edemez roman özellikleri sınırlı saptandı. Vitreus sıvısı başarıyla başkaları tarafından kendi anjiogenik potansiyel değerlendirmek için 3D endotel küresel kültür ve angiostatic molekülleri12etkinliği üzerinde kullanılmıştır. PDR vitre uyarıcı kullanarak tahlil çimlenme vitro 3D lenfatik endotel hücre (LEC) küresel ile birleştirildiğinde, bizim model as için neovasküler doku içinde de yerel olarak ipuçları her iki çözünür vitreal katkısını faktörler ortaya Henüz kötü anlaşılır LEC katılımı PDR patofizyolojisi3,11. PDR yönetiminde, vitreus cerrahi düzenli olarak gerçekleştirilen henüz zorlu işlemdir. Cerrahi cihazların ve teknikleri sofistike ve sürekli ilerleme görmek gibi fibrovascular proliferatif numune zamanında ve muhafazakar kaldırılması sadece vizyon sonucu artırır ama da için paha biçilmez doku materyalleri sağlar canlı insan dokusu microenvironment karmaşık translasyonel yönleriyle PDR patofizyolojisi ve tedavi yanıtlarının incelenmesi.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Material</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microforceps</td>
			<td>Medicon</td>
			<td>07.60.03</td>
			<td>Used for handling the FTs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable Scalpels - Sterile</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>0513</td>
			<td>Used for FT dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture dish, vented, 28 ml (60mm)</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>391-3210</td>
			<td>Used for dissection and for testing fibrin gel formation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates, 12-well</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>392-0049</td>
			<td>Used for FT dissection and whole-mount immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent/centrifuge tube with screw cap, 15 mL</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>391-3477</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent/centrifuge tube with screw cap, 50 mL</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>525-0384</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Millex-GV Syringe Filter Unit, 0.22&#160;&#181;m, PVDF</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGV033RS</td>
			<td>Used to sterile-filter the fibrinogen solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 10 mL</td>
			<td>Braun</td>
			<td>4606108V</td>
			<td>Used to sterile-filter the fibrinogen solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polypropylene Microcentrifuge Tubes, 1.5 mL</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>FB74031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell-Culture Treated Multidishes, 24-well</td>
			<td>Nunc</td>
			<td>142475</td>
			<td>Used for casting the FT/fibrin gels for native FT characterization and ex vivo culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture plates, 96-well, U-bottom</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>392-0019</td>
			<td>Used for whole-mount immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Round/Flat Spatulas, Stainless Steel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-528</td>
			<td>Used for whole-mount immunofluorescence</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Coverslips 22x22mm #1</td>
			<td>Menzel/Fisher</td>
			<td>15727582</td>
			<td>Used for mounting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>Kindler K102</td>
			<td>Used for mounting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Absorbent paper</td>
			<td>VWR</td>
			<td>115-0202</td>
			<td>Used for mounting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagents</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS tablets</td>
			<td>Medicago</td>
			<td>09-9400-100</td>
			<td>Used for preparing 1x PBS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibrinogen, Plasminogen-Depleted, Human Plasma</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>341578</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hanks Balanced Salt Solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H9394-500ML</td>
			<td>Used for preparing the fibrinogen and TA solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10270106</td>
			<td>Used for preparing the blocking solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Serum</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>H4522</td>
			<td>Aliquoted in -20 &#176;C, thaw before preparing the ex vivo culture media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamicin Sulfate 10mg/ml</td>
			<td>Biowest</td>
			<td>L0011-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial cell media MV Kit</td>
			<td>Promocell</td>
			<td>C-22120</td>
			<td>Contains 500 ml of Endothelial Cell Growth Medium MV, 25 mL of fetal calf serum, 2 mL of endothelial cell growth supplement,&#160; 500 &#956;L of recombinant human epidermal growth factor (10 &#956;g/ mL) and 500 &#956;L of hydrocortisone (1 g/ mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium azide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2002</td>
			<td>Used for storage of the native and ex vivo cultured FTs. TOXIC: wear protective gloves and/or clothing, and eye and/or face protection. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetone</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>32201-2.5L-M</td>
			<td>Used to prepare the post-fixation solution. HARMFUL: wear protective gloves and/or clothing. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>32213</td>
			<td>Used to prepare the post-fixation solution. TOXIC: wear protective gloves and/or clothing. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100 (octyl phenol ethoxylate)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9284</td>
			<td>Used for whole-mount immunofluorescence. HARMFUL: wear protective gloves and/or clothing.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst 33342, 20mM</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>62249</td>
			<td>For nuclei counterstaining. HARMFUL: wear protective gloves and/or clothing, and eye and/or face protection.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>Wear protective gloves and/or clothing, and eye protection. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASHIELD Antifade Mounting Medium with DAPI</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1200</td>
			<td>Mounting medium with nuclei counterstaining. Wear protective gloves and/or clothing, and eye protection. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eukitt Quick-hardening mounting medium</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>03989-100ml</td>
			<td>TOXIC: Wear protective gloves and/or clothing, and eye protection. Use in fume hood.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thrombin from bovine plasma, lyophilized powder</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9549-500UN&#160;</td>
			<td>Dissolve at 100 units/ mL, aliquote and store at -20 &#176;C, avoid repeated freeze/ thaw</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aprotinin from bovine lung, lyophilized powder</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A3428</td>
			<td>Dissolve at 50 mg/ mL, aliquote and store at -20 &#176;C, avoid repeated freeze/ thaw</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Growth factors</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human VEGFA</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>293-VE-010</td>
			<td>50 ng/ mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human VEGFC</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>752-VC-025</td>
			<td>200 ng/ mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human TGF&#946;</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>GF346</td>
			<td>1 ng/ mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant human bFGF</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>01-106</td>
			<td>50 ng/ mL final concentration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primary antibodies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD31 (JC70A)</td>
			<td>Dako</td>
			<td>M0823</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Mouse Alexa 488 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD34 (QBEND10)</td>
			<td>Dako</td>
			<td>M716501-2</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Mouse Alexa 488 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD45 (2B11+PD7/26)</td>
			<td>Dako</td>
			<td>M070129-2</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Mouse Alexa 488 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD68</td>
			<td>ImmunoWay</td>
			<td>RLM3161</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Mouse Alexa 488 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cleaved caspase-3 (5A1E)</td>
			<td>Cell Signalling</td>
			<td>9664</td>
			<td>Used at 1:200 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ERG (EP111)</td>
			<td>Dako</td>
			<td>M731429-2</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GFAP</td>
			<td>Dako</td>
			<td>Z0334</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ki67</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>NCL-Ki67p</td>
			<td>Used at 1:1500 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lyve1</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AF2089</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Goat Alexa 568 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NG2</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>AB5320</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prox1</td>
			<td>ReliaTech</td>
			<td>102-PA32</td>
			<td>Used at 1:200 dilution, Goat anti Rabbit Alexa 568 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prox1</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>AF2727</td>
			<td>Used at 1:40 dilution, Chicken anti Goat Alexa 594 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VEGFR3 (9D9F9)</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>MAB3757</td>
			<td>Used at 1:100 dilution, Donkey anti Mouse Alexa 488 Secondary Ab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#945;-SMA (1A4)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C6198</td>
			<td>Used at 1:400 dilution, Cy3 conjugated</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Secondary antibodies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor488 Donkey Anti-Mouse IgG</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A-21202</td>
			<td>Used at 1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor594 Goat Anti-Rabbit IgG</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11012</td>
			<td>Used at 1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor568 Donkey anti-Goat IgG</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A-11057</td>
			<td>Used at 1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor568 Goat anti-Rabbit IgG</td>
			<td>Thermo Scientific</td>
			<td>A-11036</td>
			<td>Used at 1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alexa Fluor594 Chicken Anti-Goat IgG</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>A-21468</td>
			<td>Used at 1:500 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Name</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalog Number</td>
			<td>Comments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Axiovert 200 inverted epifluorescence microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>For imaging of the fresh and fibrin-embedded FT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SZX9 upright dissection stereomicroscope</td>
			<td>Olympus</td>
			<td></td>
			<td>For FT dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LSM 780 confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>For imaging of whole-mount immunostained FT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AxioImager.Z1 upright epifluorescence microscope with Apotome</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td>For imaging of whole-mount immunostained FT</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an ex vivo tissue culture model for fibrovascular complications in proliferative diabetic retinopathy

Diabetik retinopati (DR) diyabet en yaygın mikrovasküler komplikasyon ve bir çalışma çağındaki erişkinlerde körlük neden olur. Diyabet ve oksijen kaynaklı retinopati geçerli hiçbir hayvan modelleri insan proliferatif diyabetik retinopati (PDR) tecelli tam menzilli ilerici değişiklikleri geliştirmek. Bu nedenle, hastalığın patogenezi ve patofizyolojisi anlayışı histolojik kesitler ve yalnızca ilgili patojenik etkenlere kararlı durum bilgi sağlayan yaklaşımlar vitreus örnekleri üzerinde büyük ölçüde güvendi. Kanıt artan dinamik hücre-hücre ve hücre-hücre dışı matriks (ECM) etkileşimleri bağlamında üç boyutlu (3D) microenvironments yeni mekanik ve fonksiyonel çalışmalar geliştirilmesi için gerekli olduğunu gösterir tedavi stratejileri. Bu nedenle, cerrahi olarak PDR ile gözlerden eksize patolojik fibrovascular doku yıkıcı bu hastalığın hücresel ve moleküler mekanizmaları güvenilir bir şekilde çözmeye ve Roman klinik için potansiyel test etmek için yararlanılabilir ki biz olan müdahaleler. Bu sonlarına doğru biz ex vivo kültür insan PDR patofizyolojisi ilgili bir model olarak hizmet edecek cerrahi olarak eksize hasta kaynaklı fibrovascular doku (FT), 3D için yeni bir yöntem geliştirdi. FTs explants disseke ve ex vivo kültür ve 3D karakterizasyonu fibrin matris için gömülü. Bütün Dağı ayirt yerli FTs ve son nokta kültürlerin kapsamlı soruşturma doku kompozisyon ve 3D doku düzeyinde karakterizasyonu ortaya çıkarılması ilgili özellikleri için önemini vurgulayarak çok hücreli süreçlerin sağlar PDR patofizyolojisi. Bu model moleküler mekanizmaları, cep/doku süreç ve tedaviye yanıt-e doğru aynı zamanda yapılan değerlendirme PDR doku mimarisi ve microenvironment içinde dinamik biyokimyasal ve fiziksel etkileşimleri karmaşık bağlamında sağlayacaktır. Bu model PDR patofizyolojisi beyannamedir yana Ayrıca sınama veya yeni tedaviler geliştirmek için müsait olacak.

PDR fibrovascular doku özellikleri ve protein ifade daha derin bir anlayış esas olarak vitreus örnekleri ve ince histolojik FT bölümleri3,15,16,17güvendi. Cerrahi olarak eksize yararlanmak için biz yola 3D doku organizasyon ayrıntılı incelenmesi ve PDR, çok hücreli fizyopatolojik süreçleri için bir yöntem geliştirmek için hasta patolojik FTs e...

Watch this Scientific Journal Video about An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy at JoVE.com

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Burada, proliferatif diyabetik retinopati Patofizyoloji üç boyutlu yerel doku karakterizasyonu ve ex vivo kültürü için hasta kaynaklı, cerrahi olarak eksize, fibrovascular dokuları kullanarak eğitim için bir iletişim kuralı mevcut. Bu ex vivo kültür modeli sınama veya yeni tedaviler geliştirmek için mükellef da.

Bir Ex Vivo doku kültürü modeli Fibrovascular komplikasyon proliferatif diyabetik retinopati

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Diyabetik retinopati diyabetin en sık görülen mikrovasküler komplikasyonudur. Bu yöntem, son dönem hastalığı proliferatif diyabetik retinopati patofizyolojisi ile ilgili anahtar soruların cevapsız yardımcı olabilir. Bu teknik, yerli üç boyutlu doku peyzaj yapısızlaştırma ve doğrudan klinik alaka ile canlı hasta materyalinde doku patofizyolojisi araştırılması sağlar. Ameliyat ve diseksiyonda kullanılan enstrümantasyon hakkında ayrıntılar için metin protokolüne bakın. Başlamak için, steril PBS içeren bir hücre kültürü çanak transkonjonktival mikroinsizyon vitreoretinal cerrahi geçiren insan deneklerden çıkarılan fibrovasküler doku yerleştirin. Dik bir diseksiyon stereo mikroskop kullanarak, yaklaşık bir milimetre kare parçalar halinde fibrovasküler doku kesti. PBS doku batırın ve mikro diseksiyon cımbız ile yerinde doku tutun. Fibrovasküler doku yırtılma önlemek için özen gösteren steril bir neşter ile dokuda net kesikler olun. Steril PBS bir mililitre içeren bir 12 kuyu hücre kültür plakası bir kuyu içine doku her bir parça yerleştirin. İlk olarak, oda sıcaklığında fibrinojen çözeltisi 25 mikrolitre aliquots hazırlayın. Bir 24 kuyu plaka kuyunun merkezine fibrovasküler doku bir parça yerleştirin ve herhangi bir fazla PBS kaldırın. Daha sonra, hazırlanan fibrinojen aliquots birine TA çözeltisi 25 mikrolitre ekleyin. Ve başka bir pipet kullanarak 50 mikrolitre pipetleme ile karıştırın ayarlayın. Karışımı fibrovasküler doku ve pipet parçasına dağıtın ve doku parçasının damlacık içinde olduğundan emin olun. Ex vivo kültürünün üç boyutluluk için kritik fibrinojen oluşumu süresi, protokolde açıklandığı gibi boş bir damlacık önceki doku gömme test edilir. Bir hücre kültürü kuluçka makinesinde plaka kuluçka. 30 ila 60 dakika sonra fibrin jeltamamen oluşmuş olup olmadığını kontrol etmek için plaka yıkın. Sonra, ex vivo kültür orta aprotinin ile desteklenen fibrovasküler doku fibrin jelleri bindirme. Bundan sonra, istenilen süre için hücre kültürü kuluçka için kültür plakaları iade. İlk olarak, kültürleri düzeltmek için iyi başına paraformaldehit çözeltisi bir mililitre ex vivo kültür ortamı değiştirin. Bir saat sonra, üç beş dakikalık PBS yıkayımı ile jelleri durula. Daha sonra, pbs yıkama yıkın ve her kuyuda iki mililitre sodyum azit çözeltisi ile değiştirin. Sabit jelleri dört santigrat derecede saklayın.Damlacık ların merkezini kaldırmadan önce kenarlardan başlayarak damlacıkları dikkatlice plakadan kaldırmak için paslanmaz çelik kare kenar spatula kullanın. Yuvarlak kenarlı spatula kullanarak pbs bir mililitre içeren 12 kuyu plaka bireysel kuyulara damlacıkları aktarın. Bundan sonra, bir destek plaka yatırın ve bir dakika boyunca buz gibi aseton metanol çözeltisi bir mililitre ile damlacıkları postfix. Daha sonra, PBS üç ila beş iki mililitre yıkıntı ile durulayın. Herhangi bir enkaz kaldırmak için 15 dakika boyunca engelleme çözeltisi santrifüj. Daha sonra, bir destek üzerine plaka yatırın ve oda sıcaklığında iki saat boyunca engelleme çözeltisi 500 mikrolitre damlacıkları kuluçkaya yatırın. Ana antikor karışımını metin protokolüne göre hazırlayın. Sonra yuvarlak bir alt 96 iyi plaka damlacıkları aktarmak için yuvarlak kenarlı spatula kullanın. Damlacıkları bir gecede damlacık başına 30 mikrolitre birincil antikor karışımına 4 derece de inkübedin. Ertesi gün, damlacıkları kuyu başına iki mililitre yıkama çözeltisi içeren 12 kuyuluk plakasına aktarın. Damlacıkları üç beş dakikalık yıkıntılarla durula. Daha sonra damlacıkları 9 30 dakikalık yıkama ile yıkayın. Ertesi gün, pbs ile damlacıkları üç kez durulayın. Metin protokolüne uygun florofor konjuge sekonder antikor karışımını hazırlayın. Damlacıkları daha önce gösterildiği gibi yuvarlak bir alt 96 kuyu plakasına aktarın ve plakayı 30 mikrolitre ikincil antikor karışımıyla oda sıcaklığında ışıktan korunan dört saat kuluçkaya yatırın.Dört saat sonra, damlacıkları kuyu başına iki mililitre yıkama çözeltisi içeren 12 kuyuluk bir tabağa aktarın. İlk olarak, damlacıkları üç beş dakikalık yıkıntılarla durula. Daha sonra damlacıkları 30 dakikalık dört yıkama ile yıkayın. Ertesi gün damlacıkları 30 dakika yıkama solüsyonuyla beş kez, PBS ile ise 30 dakika durulayın. Ertesi gün, daha önce gösterildiği gibi, yuvarlak bir alt 96 iyi plaka damlacıkları aktarın. Oda sıcaklığında 30 dakika Hoechst nükleer leke ile damlacıkları karşı leke. Damlacıkları kuyu başına iki mililitre PBS içeren 12 kuyuplakasına aktarın ve PBS ile üç kez durulayın. Daha sonra, bir kare kapak cam kenarları boyunca hızlı sertleştirme montaj ortamı dar bir tabaka uygulayın ve bir dakika kurumasını bekleyin. Daha sonra damlacığı deiyonize su içeren 12 kuyuluk bir kuyuya daldırarak durulayın. Ve damlacık'ı mikroskop slaytına aktarın. Daha sonra, damlacık üzerine sertleşmeyen 15 mikrolitre sertleşme önleyici montaj ortamı dağıtın. Kapak camı yavaşça damlacık üzerinde, montaj ortamı kaydıratekle bakacak şekilde yerleştirin ve yerleşmesine izin verin. Slaytlar oda sıcaklığında iki saat kuru ve bir gecede dört derece santigrat onları saklayın. Son olarak, 20x veya 40x hedefinde optik kesit fonksiyonu ile donatılmış dik epifloresan mikroskopile slaytları görüntüleyin. Bu protokolde fibrovasküler doku hazırlandı ve görüntülendi. Temsili veriler PDR ex vivo kültürlerin VEGFA yanıt olarak CD-31 pozitif endotel ve vaskülatür korunması filizlenme neden gösterdi. Tersine, TGF

Research

JoVE Journal

Medicine

Ex Vivo Culture of Patient Tissue &amp; Examination of Gene Delivery

Ex Vivo Culture of Patient Tissue & Examination of Gene Delivery

Hasta Doku ve Gen Teslimat Sınav Ex Vivo Kültür

This video describes the use of patient tissue as an ex vivo model for the study of gene delivery.  Fresh patient tissue obtained at the time of surgery ...

Ex Vivo Infection of Live Tissue with Oncolytic Viruses

Ex Vivo Infection of Live Tissue with Oncolytic Viruses

Ex Vivo Enfeksiyon Oncolytic Virüsler Canlı Doku

Oncolytic Viruses (OVs) are novel therapeutics that selectively replicate in and kill tumor cells1. Several clinical trials evaluating the effectiveness ...

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

An Ex vivo Model to Study Hormone Action in the Human Breast

Bir<em&gt; Ex vivo</em&gt; Model İnsan Meme Hormon Eylem Eğitim için

The study of hormone action in the human breast has been hampered by lack of adequate model systems. Upon in vitro culture, primary mammary epithelial ...

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

Human Dupuytren's Ex Vivo Culture for the Study of Myofibroblasts and Extracellular Matrix Interactions

İnsan Dupuytren en<em&gt; Ex vivo</em&gt; Miyofibroblastların Çalışması ve Ekstrasellüler Matriks Etkileşimleri Kültür

Organ fibrosis or &#8220;scarring&#8221; is known to account for a high death toll due to the extensive amount of disorders and organs affected (from ...

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell (ASC) Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Creation and Transplantation of an Adipose-derived Stem Cell ASC Sheet in a Diabetic Wound-healing Model

Oluşturma ve diyabetik yara iyileşmesi manken bir yağ elde edilen kök hücre (ASC) Sheet nakli

Artificial skin has achieved considerable therapeutic results in clinical practice. However, artificial skin treatments for wounds in diabetic patients ...

Breast Milk Enhances Growth of Enteroids: An Ex Vivo Model of Cell Proliferation

Breast Milk Enhances Growth of Enteroids: An Ex Vivo Model of Cell Proliferation

Anne sütü artırır büyüme Enteroids: hücre çoğalması bir Ex Vivo modeli

Human small intestinal enteroids are derived from the crypts and when grown in a stem cell niche contain all of the epithelial cell types. The ability to ...

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Assessment of Plasma Coagulation on Liver Tissue in a Large Animal Model In Vivo

Plazma koagülasyon büyük hayvan modeli Vivo içinde karaciğer dokusu üzerinde değerlendirilmesi

Plasma coagulation as a form of electrocautery is used in liver surgery for decades to seal the large liver cut surface after major hepatectomy to prevent ...

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion

Ex Vivo Normothermic karaciğer perfüzyon küçük bir hayvan Model

There is a significant shortage of liver allografts available for transplantation, and in response the donor criteria have been expanded. As a result, ...

Ex Vivo Corneal Organ Culture Model for Wound Healing Studies

Ex vivo kornea Organ kültür modeli için yaranın çalışmaları

The cornea has been used extensively as a model system to study wound healing. The ability to generate and utilize primary mammalian cells in two ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...