Name: uptake of new lipid-coated nanoparticles containing falcarindiol by human mesenchymal stem cells
Uploaded: 2019-02-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

يشكر المؤلفون الدكتور مصطفى قاسم (مستشفى جامعة اودنسي، الدانمرك) للخلايا الجذعية الوسيطة البشرية. يشكر المؤلفون مركز بيويماجينج الطبي الدانمركي للوصول إلى تلك المجاهر. يشكر المؤلفون الأسس Carlsberg وبلوم للدعم المالي (ل E.A.C.). الكتاب الإقرار الدعم المالي المقدم من جائزة "الأستاذية نيلز بور" من "مؤسسة البحوث الوطنية الدانمركية".

1-نانوحبيبات التوليف بالمذيبات السريعة التحول تقنية
<ol><li>قم بإعداد الإجراءات التالية لإعداد جسيمات نانوية: مركز سخان/عينة كتلة، مجفف، الاستغناء عن نظام رقمي مع حقنه زجاجية 1 مل، قنينة زجاج 12 مل، محرض مغناطيسي، برغوث مغناطيسي (15 ملم × 4.5 ملم، في شكل أسطواني مع طلاء تترافلوروايثيلين [PTFE]) داخ...

<ol>
	<li>Firestone, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-Density+Lipoprotein+as+a+Vehicle+for+Targeting+Antitumor+Compounds+to+Cancer+Cells.">Low-Density Lipoprotein as a Vehicle for Targeting Antitumor Compounds to Cancer Cells.</a> Bioconjugate Chemistry. 5 (2), 105-113 (1994).</li><li>Beloribi-Djefaflia, S., Vasseur, S., Guillaumond, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid+metabolic+reprogramming+in+cancer+cells.">Lipid metabolic reprogramming in cancer cells.</a> Oncogenesis. 5 (1), 189 (2016).</li><li>Xin, Y., Yin, M., Zhao, L., Meng, F., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+on+nanoparticle-based+drug+delivery+systems+for+cancer+therapy.">Recent progress on nanoparticle-based drug delivery systems for cancer therapy.</a> Cancer Biology &amp; Medicine. 14 (3), 228 (2017).</li><li>Merriel, S. W. D., Carroll, R., Hamilton, F., Hamilton, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+between+unexplained+hypoalbuminaemia+and+new+cancer+diagnoses+in+UK+primary+care+patients.">Association between unexplained hypoalbuminaemia and new cancer diagnoses in UK primary care patients.</a> Family Practice. 33 (5), 449-452 (2016).</li><li>Yue, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cholesteryl+ester+accumulation+induced+by+PTEN+loss+and+PI3K/AKT+activation+underlies+human+prostate+cancer+aggressiveness.">Cholesteryl ester accumulation induced by PTEN loss and PI3K/AKT activation underlies human prostate cancer aggressiveness.</a> Cell Metabolism. 19 (3), 393-406 (2014).</li><li>dos Santos, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LDL-cholesterol+signaling+induces+breast+cancer+proliferation+and+invasion.">LDL-cholesterol signaling induces breast cancer proliferation and invasion.</a> Lipids in Health and Disease. 13 (16), (2014).</li><li>Gallagher, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elevated+tumor+LDLR+expression+accelerates+LDL+cholesterol-mediated+breast+cancer+growth+in+mouse+models+of+hyperlipidemia+HHS+Public+Access.">Elevated tumor LDLR expression accelerates LDL cholesterol-mediated breast cancer growth in mouse models of hyperlipidemia HHS Public Access.</a> Oncogene. 36 (46), 6462-6471 (2017).</li><li>Needham, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bottom+up+design+of+nanoparticles+for+anti-cancer+diapeutics:+"put+the+drug+in+the+cancer's+food".">Bottom up design of nanoparticles for anti-cancer diapeutics: "put the drug in the cancer's food".</a> Journal of Drug Targeting. 24 (9), 836-856 (2016).</li><li>Lacko, A. G., Mconnathy, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+cancer+chemotherapy+using+synthetic+nanoparticles.">Targeted cancer chemotherapy using synthetic nanoparticles.</a> United States Patent Application Publication. , (2009).</li><li>Nikanjam, M., Gibbs, A. R., Hunt, C. A., Budinger, T. F., Forte, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+nano-LDL+with+paclitaxel+oleate+as+a+targeted+drug+delivery+vehicle+for+glioblastoma+multiforme.">Synthetic nano-LDL with paclitaxel oleate as a targeted drug delivery vehicle for glioblastoma multiforme.</a> Journal of Controlled Release. 124 (3), 163-171 (2007).</li><li>Teerlink, T., Scheffer, P. G., Bakker, S. J. L., Heine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+data+from+LDL+composition+and+size+measurement+are+compatible+with+a+discoid+particle+shape.">Combined data from LDL composition and size measurement are compatible with a discoid particle shape.</a> Journal of Lipid Research. 45 (5), 954-966 (2004).</li><li>Schweizer, M. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+phase+I+study+of+niclosamide+in+combination+with+enzalutamide+in+men+with+castration-resistant+prostate+cancer.">A phase I study of niclosamide in combination with enzalutamide in men with castration-resistant prostate cancer.</a> PLoS ONE. 13 (8), 0202709 (2018).</li><li>Allen, T. M., Hansen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+of+stealth+versus+conventional+liposomes:+effect+of+dose.">Pharmacokinetics of stealth versus conventional liposomes: effect of dose.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Biomembranes. 1068 (2), 133-141 (1991).</li><li>Maeda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Enhanced+Permeability+and+Retention+(EPR)+Effect+in+Tumor+Vasculature:+The+Key+Role+of+Tumor-Selective+Macromolecular+Drug+Targeting.">The Enhanced Permeability and Retention (EPR) Effect in Tumor Vasculature: The Key Role of Tumor-Selective Macromolecular Drug Targeting.</a> Advances in Enzyme Regulation. 41 (1), 189-207 (2001).</li><li>Wong, A. D., Ye, M., Ulmschneider, M. B., Searson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Analysis+of+the+Enhanced+Permeation+and+Retention+(EPR)+Effect.">Quantitative Analysis of the Enhanced Permeation and Retention (EPR) Effect.</a> PLoS ONE. 10 (5), 0123461 (2015).</li><li>Khodabandehloo, H., Zahednasab, H., Hafez, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanocarriers+Usage+for+Drug+Delivery+in+Cancer+Therapy.">Nanocarriers Usage for Drug Delivery in Cancer Therapy.</a> Iranian Journal of Psychiatry and Behavioral Sciences. 9 (2), (2016).</li><li>Kobaek-Larsen, M., El-Houri, R. B., Christensen, L. P., Al-Najami, I., Frett&#233;, X., Baatrup, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dietary+polyacetylenes,+falcarinol+and+falcarindiol,+isolated+from+carrots+prevents+the+formation+of+neoplastic+lesions+in+the+colon+of+azoxymethane-induced+rats.">Dietary polyacetylenes, falcarinol and falcarindiol, isolated from carrots prevents the formation of neoplastic lesions in the colon of azoxymethane-induced rats.</a> Food &amp; Function. 8, 964-974 (2017).</li><li>Hervella, P., Parra, E., Needham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encapsulation+and+retention+of+chelated-copper+inside+hydrophobic+nanoparticles:+Liquid+cored+nanoparticles+show+better+retention+than+a+solid+core+formulation.">Encapsulation and retention of chelated-copper inside hydrophobic nanoparticles: Liquid cored nanoparticles show better retention than a solid core formulation.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 102, 64-76 (2016).</li><li>Hervella, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chelation,+formulation,+encapsulation,+retention,+and+in+vivo+biodistribution+of+hydrophobic+nanoparticles+labelled+with+57Co-porphyrin:+Octyl+Amine+ensures+stable+chelation+of+cobalt+in+Liquid+Nanoparticles+that+accumulate+in+tumors.">Chelation, formulation, encapsulation, retention, and in vivo biodistribution of hydrophobic nanoparticles labelled with 57Co-porphyrin: Octyl Amine ensures stable chelation of cobalt in Liquid Nanoparticles that accumulate in tumors.</a> Journal of Controlled Release. , (2018).</li><li>Zhigaltsev, I. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bottom-up+design+and+synthesis+of+limit+size+lipid+nanoparticle+systems+with+aqueous+and+triglyceride+cores+using+millisecond+microfluidic+mixing.">Bottom-up design and synthesis of limit size lipid nanoparticle systems with aqueous and triglyceride cores using millisecond microfluidic mixing.</a> Langmuir. 28 (7), 3633-3640 (2012).</li><li>Aubry, J., Ganachaud, F., Cohen Addad, J. -. P., Cabane, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoprecipitation+of+Polymethylmethacrylate+by+Solvent+Shifting:1+Boundaries.">Nanoprecipitation of Polymethylmethacrylate by Solvent Shifting:1 Boundaries.</a> Langmuir. 25 (4), 1970-1979 (2009).</li><li>Karnik, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+Platform+for+Controlled+Synthesis+of+Polymeric+Nanoparticles.">Microfluidic Platform for Controlled Synthesis of Polymeric Nanoparticles.</a> Nano Letters. 8 (9), 2906-2912 (2008).</li><li>Gaumet, M., Vargas, A., Gurny, R., Delie, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticles+for+drug+delivery:+The+need+for+precision+in+reporting+particle+size+parameters.">Nanoparticles for drug delivery: The need for precision in reporting particle size parameters.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 69 (1), 1-9 (2018).</li><li>Christensen, L. P., Brandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioactive+polyacetylenes+in+food+plants+of+the+Apiaceae+family:+Occurrence,+bioactivity+and+analysis.">Bioactive polyacetylenes in food plants of the Apiaceae family: Occurrence, bioactivity and analysis.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 41 (3), 683-693 (2016).</li><li>Kobaek-Larsen, M., Christensen, L. P., Vach, W., Ritskes-Hoitinga, J., Brandt, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+Effects+of+Feeding+with+Carrots+or+(-)+-Falcarinol+on+Development+of+Azoxymethane-Induced+Preneoplastic+Lesions+in+the+Rat+Colon.">Inhibitory Effects of Feeding with Carrots or (-) -Falcarinol on Development of Azoxymethane-Induced Preneoplastic Lesions in the Rat Colon.</a> Journal of Agricultural and Food Chemistry. 53, 1823-1827 (2005).</li><li>Jin, H. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antitumor+natural+compound+falcarindiol+promotes+cancer+cell+death+by+inducing+endoplasmic+reticulum+stress.">The antitumor natural compound falcarindiol promotes cancer cell death by inducing endoplasmic reticulum stress.</a> CellDeath &amp; Disease. 3, 1-9 (2012).</li><li>Walke, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physico-Chemical+Parameters+of+Nanoparticles+that+Govern+Prodrug+Design+and+Application+in+Anticancer+Nanomedicine+in+Physics,+Chemistry,+Pharmacy.">Physico-Chemical Parameters of Nanoparticles that Govern Prodrug Design and Application in Anticancer Nanomedicine in Physics, Chemistry, Pharmacy.</a> University of Southern Denmark (SDU). , (2018).</li><li>Walke, P. B., Hervella, P., Needham, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-Coated+Stealth+Nanoparticles+of+Novel+Hydrophobic+Prodrug,+Niclosamide+Stearate,+as+Cancer+Therapeutic:+Formulation+and+Physico-Chemical+Characterization+of+Nanoparticles.">Lipid-Coated Stealth Nanoparticles of Novel Hydrophobic Prodrug, Niclosamide Stearate, as Cancer Therapeutic: Formulation and Physico-Chemical Characterization of Nanoparticles.</a> 6th International Pharmaceutical Federation Pharmaceutical Sciences World Congress. , (2017).</li></ol>

بروتوكول مفصل لاختلاق جسيمات نانوية المغلفة بالدهن لإيصال الأدوية مع البسيطة، أسلوب الحقن السريع سريع واستنساخه، وقابلة التحول المذيبات كان يتبع27،في الفترة من28 ويرد في هذه الورقة، كما تطبيق فالكارينديول. التحكم في سرعة حقن المرحلة العضوية في المرحلة الم...

جسيمات نانوية المغلفة بدهن نشهد اهتماما متزايداً فيما يتعلق بوظيفتها كنظم إيصال العقاقير ل علاج السرطان1. السرطان قد غيرت إعادة برمجة دهن الأيض2 وازدياد حاجة الكولسترول تنتشر3. أوفيريكسبريس LDLs1 ، وتأخذ في LDLs أكثر من الخلايا الطبيعية، بقدر ما عد LDL مريض السرطان يمكن أن تنخفض حتى4. ويعزز امتصاص LDL تعمل العدوانية5 مما أدى إلى انتشار وغزو في سرطان الثدي6. وفرة مستقبلات LDL (لدلرس) مؤشر تنبؤاتها المحتملة النقيلي7. مستوحاة من LDL وفي امتصاص الخلايا السرطانية، تم وضع استراتيجية جديدة تسمى: جعل المخدرات تبدو مثل الأغذية السرطان8. وهكذا، هذه نانوحبيبات المخدرات تسليم التصاميم الجديدة8،،من910 ولقد استلهمت التصميم الأساسية والدهن استقرت LDLs الطبيعية11 كآلية لإيصال الأدوية السرطان للخلايا السرطانية. وتؤيد هذا السلبي استهداف نظام التسليم تغليف، لا سيما، المخدرات مسعور، والتي ترد عادة في شكل الجرعة الفموية ولكن توفر فقط كمية صغيرة من المخدرات إلى مجرى الدم، حتى تحد من فعالية المتوقعة على12. كما مع الشبح الدهنية13، طلاء البولي إثيلين غليكول (شماعة) يساعد على تقليل أي استجابة مناعية ويمتد التداول في مجرى الدم لامتصاص الورم الأمثل بالمفترض تعزيز تخلل وأثر الاحتفاظ (EPR) 14 , 15-ومع ذلك، بالإضافة إلى في بعض الحالات، وعدم الاستقرار في التداول والتوزيع غير المرغوب فيها في نظام16، بعض العقبات التي تظل دون حل، مثل كيف وإلى أي مدى هذه الجسيمات النانوية هي اتخذتها الخلايا، وما هو مصيرهم داخل الخلايا. ومن هنا أن تتناول هذه الورقة استيعاب نانوحبيبات خاصة المخدرات السرطان مسعور فالكارينديول واستخدام [كنفوكل] وتقنيات التصوير ابيفلوريسسينسي.
الهدف من هذه الدراسة هو اختﻻق جسيمات نانوية المغلفة بالدهن من فالكارينديول ودراسة عن امتصاص داخل الخلايا في همسكس. وبالتالي، يحتمل أن استقرار إدارته، والتغلب على التحديات المرتبطة بإيصال وتحسين التوافر الأحيائي. ومن ثم تقييم نظام توصيل جديد لهذه المخدرات السرطان. سابقا، فالكارينديول قد تم تدار شفويا عن طريق فالكارينديول تركيز عال تنقيته ك تكملة أغذية17. ومع ذلك، هناك الحاجة إلى اتباع نهج أكثر تنظيماً لتقديم هذا الدواء تبشر بالخير. لذلك، صممت جسيمات نانوية فالكارينديول، مع فسفوليبيد وتغليف أحادي الطبقة مع تنقية المخدرات التي تشكل جوهر الجسيمات، نسبة الكولسترول في الدم. أسلوب الحقن السريع للمذيبات التحول، وضعتها مؤخرا نيدام et al. 8، يستخدم في هذه الدراسة لتغليف فالكارينديول بولياسيتيليني.
الأسلوب قد استخدمت سابقا لتصنيع جسيمات نانوية الدهن لتغليف18،وكلاء التصوير التشخيصي19، فضلا عن اختبار جزيئات (تريولين)27 والمخدرات (orlistat، ستيرات niclosamide)8 ،،من2728. وأسلوب بسيط نسبيا عندما تنفذ بالجزيئات الصحيحة. أشكال الجسيمات نانوسيزيد، في حدود على التنو الحرجة (~ 20 نانومتر القطر)، غير قابلة للذوبان العالية الذوائب مسعور المذابة في المذيبات قطبية. يتم إنجاز تبادل المذيبات بحقنه سريع للحل الأساسي في وجود فائض أنتيسولفينت (عادة، مرحلة مائي في عضوية 1:9: نسبة حجم مائي)20،21.
تصميم التركيبية جسيمات نانوية تؤدي إلى مزايا متعددة. توفر مكونات DSPC:Chol أحادي الطبقة جداً ضيق وتقريبا كتيمة ومتوافق حيويا والقابلة للتحلل. شماعة يوفر واجهة ستيريكالي استقرار الذي يعمل كدرع من أوبسونيزاتيون بالنظام المناعي، وإبطاء امتصاص أي نظام شبكي (الكبد والطحال) وحماية ضد النظام بلعمية وحيدات النوى، ومنع ما استبقاء وتدهور بنظام المناعة، ومن ثم زيادة تداولها نصف الوقت في الدم22. وهذا يسمح للجزيئات أن يعمم حتى أنهم اكسترافاساتي في مواقع المريضة، مثل الأورام، وحيث أن نظام الأوعية الدموية راشح، السماح للجيش الثوري الشعبي-تأثير أن تؤدي إلى تراكم سلبي للجسيمات. بالإضافة إلى ذلك، يسمح معطف الدهن واحد لتحسين السيطرة على حجم جسيمات نانوية بمحاصرة كينيتيكالي الأساسية في27،البعد نواة الحرجة في28. حمل الدهون الخصائص السطحية المختلفة (بما في ذلك الببتيد الاستهداف، التي لم تكن متاحة لهذا المشروع) ونواة المخدرات نقية و27،22،بوليديسبيرسيتي انخفاض28. الطريقة المستخدمة لتحليل حجم الجسيمات من دائرة الأراضي والمساحة، أسلوب الذي يسمح للباحثين لقياس حجم عدد كبير من الجسيمات في نفس الوقت. ومع ذلك، هذا الأسلوب يمكن التحيز القياسات لأحجام أكبر، إذا لم تكن جسيمات نانوية مونوديسبيرسيد23. ويتم تقييم هذه المسألة مع معطف الدهن كذلك. تعطي مزيدا من التفاصيل عن هذه التصاميم الأساسية والتحديد الكمي لكل الخصائص في سائر المنشورات27،28.
المخدرات مغلفة بجسيمات نانوية فالكارينديول، polyacetylene غذائية الموجودة في النباتات من عائلة خيمية. وهو المستقلب ثانوية من نوع بولياسيتيلينيس17ج الاليفاتيه التي تم العثور عليها لعرض آثار تعزيز الصحة، بما في ذلك الأنشطة المضادة للالتهابات والآثار المضادة للبكتيريا سيتوتوكسيسيتي ضد طائفة واسعة من خطوط خلايا السرطان. تفاعلية عالية تتصل بقدرتها على التفاعل مع الجزيئات الحيوية المختلفة، بوصفها عامل الكيلاتينج جداً من رد الفعل ضد ميركاتو والمجموعات الأمينية24. فالكارينديول سابقا قد ثبت للحد من عدد الآفات الورمية في القولون17،25، على الرغم من أن الآليات البيولوجية التي لا تزال غير معروفة. بيد أن من يعتقد أن يتفاعل مع الجزيئات الحيوية مثل NF-κB، COX1، كوكس-2، ونشدد على السيتوكينات، التي تحول دون ورم الخلية وتطور انتشار عملياتها، مما أدى إلى اعتقال خلية دورة، هيولى (ER)، والمبرمج 17،26 في الخلايا السرطانية. ويستخدم فالكارينديول في هذه الدراسة كما مثال المخدرات السرطان بسبب إمكاناتها السرطان وآلية هي قيد الدراسة حاليا، ونظرا لأنه يظهر آثار السرطان واعدة. يتم اختبار في همسكس على الإقبال جسيمات نانوية الهاتف الخلوي وتصويرها باستخدام ابيفلوريسسينسي والفحص المجهري [كنفوكل]. واختير هذا النوع الخلية بسبب كبر حجمها، يجعلها مثالية للفحص المجهري.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:965px;" width="966">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:255px;">12 mL Screw Neck Vial (Clear glass, 15-425 thread, 66 X 18.5 mm)</td>
			<td style="width:384px;">Microlab Aarhus A/S</td>
			<td style="width:160px;">ML 33154LP</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">6 well plates</td>
			<td>Greiner Bio One International GmbH</td>
			<td style="width:160px;">657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Absolute Ethanol</td>
			<td>EMD Millipore (VWR)</td>
			<td>EM8.18760.1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Chloroform</td>
			<td>Rathburn Chemicals Ltd.</td>
			<td>RH1009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Cholesterol</td>
			<td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td>
			<td>700000P</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Confocal Microscope</td>
			<td style="width:384px;">Zeiss LSM510</td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Cover Slips thickness #1.5</td>
			<td>Paul Marienfeld GmbH &#38; Co</td>
			<td>117650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Desiccator</td>
			<td style="width:384px;">Self-build</td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">DiI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td style="width:160px;">D282</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:255px;">DLS</td>
			<td style="width:384px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:160px;">DelsaMAXpro 3167-DMP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">DSPC (Chloroform stock)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td>
			<td>850365C&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">DSPE PEG 2000 (Chloroform stock)</td>
			<td>Avanti Polar Lipids, Inc.</td>
			<td>880120C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:255px;">eVol XR</td>
			<td>SGE analytical science, Trajan Scientific Australia Pty Ltd.</td>
			<td>2910200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Fetal Bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td style="width:160px;">10270-106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Fluorescence Miccroscope</td>
			<td style="width:384px;">Olymous IX81</td>
			<td style="width:160px;"></td>
			<td>With Manual TIRF and Andor iXon EMCCD</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Incubator</td>
			<td style="width:384px;">Panasonic&#160;</td>
			<td style="width:160px;">MCO-18AC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Magnetic flea</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>15 x 4.5 mm</td>
			<td>Cylindrical shape with PTFE coating</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Magnetic stirrer</td>
			<td>IKA</td>
			<td style="width:160px;">RT-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Minimum Essential Media</td>
			<td>Gibco</td>
			<td style="width:160px;">32561-029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:255px;">PBS tablets for cell culture</td>
			<td style="width:384px;">VWR Chemicals</td>
			<td>97062-732</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Pen/strep</td>
			<td>VWR Chemicals</td>
			<td>97063-708</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:255px;">Phosphate Buffer Saline (PBS, pH 7.4)</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>10010031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Rotary Evaporator</td>
			<td>Rotavapor, B&#252;chi Labortechnik AG</td>
			<td style="width:160px;">R-210</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Sample concentrator&#160;</td>
			<td>Stuart, Cole-Parmer Instrument Company, LLC</td>
			<td style="width:160px;">SBHCONC/1</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

uptake of new lipid-coated nanoparticles containing falcarindiol by human mesenchymal stem cells

جسيمات نانوية هي محط اهتمام متزايد في أنظمة توصيل العقاقير لعلاج السرطان. جسيمات نانوية المغلفة بالدهن هي مستوحاة في هيكل وحجم من البروتينات الدهنية low-density (LDLs) لأن الخلايا السرطانية بحاجة متزايدة الكولسترول آخذة في الانتشار، وهذا تم استغلاله كآلية لإيصال الأدوية السرطان بالسرطان الخلايا. وعلاوة على ذلك، تبعاً لكيمياء العقاقير، تغليف المخدرات يمكن أن تكون مفيدة لتجنب تدهور للمخدرات خلال الدورة الدموية المجراة. ولذلك، في هذه الدراسة، يستخدم هذا التصميم اختﻻق جسيمات نانوية المغلفة بالدهن من فالكارينديول المخدرات السرطان، توفير نظام التسليم جديدة محتملة فالكارينديول من أجل استقرار هيكلها الكيميائية ضد التدهور وتحسين به الامتصاص بالأورام. جسيمات نانوية فالكارينديول، مع أحادي الطبقة فسفوليبيد والكولسترول، تغليف المخدرات المنقي جوهر الجسيمات، وقد صممت. يتكون الطلاء أحادي الطبقة الدهنية 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine (دسبك)، ونسبة الكولسترول في الدم (شول) و 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000] (دسب شماعة 2000) جنبا إلى جنب مع فلوري التسمية دي (نسب المولى من 43:50:5:2). ملفقة جسيمات نانوية استخدام أسلوب الحقن السريع، وتقنية سريعة وبسيطة يعجل جسيمات نانوية بواسطة مذيب جيد للمذيبات المضادة تبادل. وهو يتألف من حقنه السريع محلول الإيثانول التي تحتوي على مكونات نانوحبيبات إلى مرحلة مائي. ويقاس حجم جسيمات نانوية الفلورية استخدام تشتت الضوء الحيوي (DLS) في شمال البحر الأبيض المتوسط ± 6.7 74.1. يتم اختبار الخلايا الجذعية البشرية الوسيطة (همسكس) على الإقبال جسيمات نانوية وتصويرها باستخدام الأسفار والفحص المجهري [كنفوكل]. ويلاحظ على الإقبال جسيمات نانوية في همسكس، مما يوحي باحتمال هذه المخدرات مستقر نظام توصيل فالكارينديول.

وكانت نوعين مختلفين من جسيمات نانوية جسيمات نانوية فالكارينديول ملفقة، إلا وهي نقية وجسيمات نانوية فالكارينديول المغلفة بالدهن. تم اختبار تركيزات مختلفة من الدهون والكوليسترول في الدم. كما هو مبين في الجدول 1، جسيمات نانوية غير المصقول تشكلت في المياه، ويقاس ف...

Watch this Scientific Journal Video about Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells at JoVE.com

Uptake of New Lipid-coated Nanoparticles Containing Falcarindiol by Human Mesenchymal Stem Cells

الامتصاص من جديد جسيمات نانوية المغلفة بالدهون التي تحتوي على فالكارينديول بالخلايا الجذعية البشرية الوسيطة

توضح هذه المقالة تغليف فالكارينديول في المغلفة بالدهن 74 نانومتر جسيمات نانوية. ويرصد على الإقبال جسيمات نانوية من الخلايا الجذعية البشرية إلى قطيرات الدهن الخلوية التصوير الفلورسنت و [كنفوكل]. جسيمات نانوية ملفقة بطريقة الحقن السريع للمذيبات التحول، ويقاس حجمها مع تقنية تشتت الضوء الحيوي.

Nanoparticles are the focus of an increased interest in drug delivery systems for cancer therapy. Lipid-coated nanoparticles are inspired in structure and ...

إن تصنيع الجسيمات النانوية المغلفة بالدهون باستخدام طريقة الحقن السريع يوفر نظام تسليم دواء مستقر لعلاج السرطان. هذه التقنية هي تقنية بسيطة وسريعة وقابلة للتطوير وقابلة للاستنساخ لتصنيع الجسيمات النانوية التي تغلف الأدوية المسببة للدهر. هذه التقنية قابلة للتطبيق لاختلاق جسيمات نانوية تشخيصية وعلاجية من المواد الهيدروسيبية التي يمكن استخدامها بشكل فعال في العديد من حالات المرض.ويمكن استخدام تقنية التصنيع هذه، إلى جانب تقنية DLS، لدراسة نوات ونمو المواد الناعورة، مثل الدهون والبروتينات والبوليمرات. معرفة الخصائص الكيميائية الفيزيائية للمادة المخدرات الخاصة بك أمر بالغ الأهمية قبل تصنيع الجسيمات النانوية. أيضا، تأكد من استخدام التركيزات الصحيحة من الدهون طلاء.إن العرض المرئي لهذه الطريقة أمر بالغ الأهمية لإظهار بساطة تقنية التصنيع وإظهار التسليم الناجح للدواء كجسيمات نانوية للخلايا. يجب اتخاذ الاحتياطات عند العمل مع الكلوروفورم والفورمالديهايد، والعمل تحت غطاء الدخان مطلوب. للبدء، الاستغناء 2.4 ملليلتر من 250 محلول مخزون فلكارينديول ميكرومولار حل في 70٪ الإيثانول في قارورة التلألؤ.باستخدام مركز العينة، يتبخر الكسر السائل لمدة أربع ساعات تقريبًا للحصول على الفكارينديول الجاف. باستخدام مركز العينة، تسليم الغاز على العينة في درجة حرارة الغرفة لتركيز العينة. مرة واحدة المجففة، إضافة المكونات المعروضة هنا إلى قارورة التلألؤ في غطاء الدخان، والتأكد من تنظيف الحقنة مع الكلوروفورم بعد إضافة كل مكون لتجنب التلوث عبر.ثم أغلق على الفور قارورة تحتوي على الدهون بحيث لا يتبخر المذيب وبالتالي تعديل التركيز. التفاف القارورة مع رقائق الألومنيوم لحماية DiI من الضوء وترك العينة بين عشية وضحاها في مجفف لتبخر الكلوروفورم. في اليوم التالي، قم بحل العينة المجففة في الإيثانول المطلق لجعل حجم النهائي من 1.2 ملليلتر.يمثل هذا الحل المرحلة العضوية. خذ قارورة زجاجية 12 ملليلتر وملأها بتسعة ملليلترات من الماء النقي. ثم تضاف برغوث مغناطيسي في القارورة التي تحتوي على تسعة ملليلتر من الماء.ضع القارورة على مُحرك مغناطيسي وحركه عند 500 دورة في الدقيقة. المقبل إرفاق حقنة زجاجية ملليلتر واحد إلى نظام الاستغناء وسحب الكلوروفورم ببطء داخل وخارج الحقنة الزجاجية على الأقل 10 مرات. الاستغناء عن الكلوروفورم في جامع النفايات في كل مرة.تنظيف الحقنة مع الكلوروفورم يساعد على تجنب أي تلوث. الآن رئيس حقنة مع الإيثانول. فتيلة يستبدل المذيب القديم وكذلك يزيل أي فقاعات الهواء.باستخدام الحقنة ، يُفطن مليلتر واحد من المرحلة العضوية ، وأدخل الحقنة في القارورة الزجاجية حتى منتصف علامة الماء التسعة ملليلتر. الحفاظ على ثابت في منتصف القارورة، وحقن الحل في 833 ميكرولترس في الثانية عن طريق الضغط على زر الاستغناء على نظام الاستغناء. وهذا يولد 10 ميكرولترات من 50 جسيمات نانوية مغلفة الدهون الدقيقةمولار من فالكارينديول في 10٪ الإيثانول.وقد تم العثور على هذه السرعة الحقن لتحقيق أجود الجسيمات النانوية مع توزيع حجم الجسيمات الضيقة. أثناء الحقن ، من المهم التأكد من إدخال الإبرة في المركز ، ثابتة ومستقيمة. مباشرة بعد الحقن، وإزالة القارورة من المزال ونقل العينة إلى قارورة 50 ملليلتر أسفل مستديرة.هجوم على قارورة إلى المبخر الدوار، وتتبخر ملليلتر واحد من المذيبات العضوية في درجة حرارة الغرفة. كن حذرا لتجنب تشكيل فقاعة الزائدة. نقل تعليق الجسيمات النانوية من القارورة إلى قارورة زجاجية أخرى 12 ملليلتر.تأكد من أن وحدة التخزين هي تسعة ملليلتر، ثم تقسيم العينة في قارين زجاج 12 ملليلتر. ثم إضافة 0.5 ملليلتر من المياه النقية جدا في واحدة من قوارير و 0.5 ملليلتر من الفوسفات 10X المخزنة المالحة في القارورة الأخرى. قم بتشغيل أداة تشتت الضوء الرقمي، واضبط درجة الحرارة المطلوبة إلى 20 درجة مئوية حتى تستقر.ثم تعيين المعلمات الصك كما هو مبين هنا. ملء cuvette البلاستيك مع ملليلتر واحد من تعليق الجسيمات النانوية، وبدء القياس. الإبلاغ عن حجم قياس اعتمادا على المذيبات التي تم استخدامها.بذور ما يقرب من 50،000 الخلايا على 1.5 زلة غطاء عقيمة وضعت في لوحة ستة جيدا للحصول على كثافة الخلية من حوالي 30٪، ثم إضافة ثقافة المتوسطة من أجل أن يكون حجم النهائي من ثلاثة ملليلتر في كل بئر. احتضان الخلايا لمدة 24 ساعة في ظل ظروف الثقافة القياسية. في اليوم التالي، إضافة ثلاثة ميكرولترات من محلول الجسيمات النانوية لتركيز فالكارينديول النهائي من خمسة ميكرومولار.ثم ارجع الخلايا إلى الحاضنة لمدة 24 ساعة. بعد 24 ساعة من العلاج، وغسل الخلايا مرتين مع برنامج تلفزيوني، ومن ثم إصلاحها في الفورمالديهايد 4٪ لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد التثبيت، قم بإضفاء الشرعية على الخلايا بنسبة 0.1٪ Triton X-100 لمدة 30 دقيقة.ثم غسلها مرتين مع برنامج تلفزيوني، وصمة عار لهم مع 250 ميكرولترات من 300 نانومولار DAPI لمدة خمس دقائق، وحمايتها من الضوء. ضع زلة الغلاف على شريحة باستخدام قطرة من برنامج تلفزيوني. انتقل إلى ذاتي 150x ، ونقل الشريحة إلى مرحلة مجهر الفلورانس واسع المجال مجهز بكاميرا CCD الإلكترونية مضروبة.خلايا الصورة باستخدام قناة GFP-LP. بالإضافة إلى ذلك، تحقق من امتصاص الجسيمات النانوية في الخلايا عن طريق التقاط صور المجهر الكونكنتال باستخدام هدف زيت 63x مع فتحة رقمية قدرها 1.4. صورة DiI باستخدام ليزر الأرجون في 514 نانومتر وDAPI باستخدام ليزر فوتون اثنين في 780 نانومتر.وأظهرت الجسيمات النانوية غير المصقولة من فالكارينديول التي تشكلت في الماء وتقاس في برنامج تلفزيوني تعدداً عالياً، مع مؤشر PD من 0.571. وتشير هذه القيمة إلى التوزيع الواسع وغير المُتّمَس لأحجام الجسيمات. في المقابل، كانت الجسيمات النانوية المغلفة بالدهون من فالكارينديول المفبركة في هذا الفيديو من 74.1 نانومتر مع مؤشر تعدد التخصصات من 0.182، وأشار إلى توزيع أحادية نسبيا وموحدة من أحجام الجسيمات.كملاحظة أولى للجسيمات النانوية داخل الخلايا ، تم الحصول على صور المجهر epifluorescence بعد 24 ساعة من العلاج. تم تصور الجسيمات النانوية على أنها نقاط بيضاء ومشرقة ، ويمكن افتراض أن الجسيمات النانوية كانت موجودة داخل الخلايا المحيطة بالنواة. للتحقق من أن جسيمات نانوية فالكارينديول قد دخلت الخلايا، تم إجراء المجهر confocal على الخلايا أيضا.يظهر عدد كبير من الجسيمات النانوية هنا، متناثرة في السيتوبلازم في كل خلية. وتظهر هذه النتائج أن الجسيمات النانوية بمثابة نظام تسليم المخدرات مستقرة للفالكارينديول. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم حقن الحل بسرعة الحقن الصحيحة ، مع الحفاظ على البذر ثابتًا ، في المركز ، لضمان الخلط السليم.يمكن استخدام هذا الإجراء لأي دواء مُزَمِر للماء لصياغة جسيمات نانوية علاجية أو لعوامل التصوير لصياغة جسيمات نانوية تشخيصية يمكن استخدامها في حالات مرضية مختلفة، مثل السرطان. وقد مكنت هذه التقنية من إجراء المزيد من البحوث حول الآلية التي يتم من خلالها تناول الجسيمات النانوية من قبل الخلايا ، وكذلك تصوير الخلايا الحية ودراسة تأثير مكافحة الانسان للدواء.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells (hESC) to Different Lineages

Alginate Microcapsule as a 3D Platform for Propagation and Differentiation of Human Embryonic Stem Cells hESC to Different Lineages

Microcapsule الجينات كمنصة 3D لإكثار وتمايز الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESC) إلى أنساب مختلفة

Human embryonic stem cells (hESC) are emerging as an attractive alternative source for cell replacement therapy since they can be expanded in culture ...

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells (hESCs) and Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs)

Development, Expansion, and In vivo Monitoring of Human NK Cells from Human Embryonic Stem Cells hESCs and Induced Pluripotent Stem Cells iPSCs

التنمية، والتوسع، و<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; رصد خلايا NK الإنسان من الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs) وافرة القوة والتي يسببها الخلايا الجذعية (iPSCs)

We present a method for deriving natural killer (NK) cells from undifferentiated hESCs and iPSCs using a feeder-free approach. This method gives rise to ...

Programming Stem Cells for Therapeutic Angiogenesis Using Biodegradable Polymeric Nanoparticles

الخلايا الجذعية العلاجية البرمجة لتكوين الأوعية الدموية عن طريق تحلل البوليمر النانوية

Controlled vascular growth is critical for successful tissue regeneration and wound healing, as well as for treating ischemic diseases such as stroke, ...

Ordering Single Cells and Single Embryos in 3D Confinement: A New Device for High Content Screening

طلب خلايا واحدة والأجنة واحدة في 3D الحبس: جهاز جديد لفحص المحتوى العالي

Biological cells are usually observed on flat (2D) surfaces. This condition is not physiological, and phenotypes and shapes are highly variable. Screening ...

Optimizing Attachment of Human Mesenchymal Stem Cells on Poly(&#949;-caprolactone) Electrospun Yarns

تحسين مرفق من الوسيطة الإنسان الخلايا الجذعية على بولي (ε-caprolactone) خيوط Electrospun

Research into biomaterials and tissue engineering often includes cell-based in vitro investigations, which require initial knowledge of the starting cell ...

Correlative Light- and Electron Microscopy Using Quantum Dot Nanoparticles

المتلازم الخفيفة والمجهر الإلكتروني عن طريق الكم دوت النانوية

A method is described whereby quantum dot (QD) nanoparticles can be used for correlative immunocytochemical studies of human pathology tissue using ...

Isolation of Mesenchymal Stem Cells from Human Alveolar Periosteum and Effects of Vitamin D on Osteogenic Activity of Periosteum-derived Cells

عزل الخلايا الجذعية الوسيطة من السمحاق السنخية البشرية وآثار فيتامين د على نشاط الخلايا المستمدة من السمحاق أوستيوجينيك

Mesenchymal stem cells (MSCs) are present in a variety of tissues and can be differentiated into numerous cell types, including osteoblasts. Among the ...

Scalable Generation of Mature Cerebellar Organoids from Human Pluripotent Stem Cells and Characterization by Immunostaining

التوليد القابل للتحجيم من العضيات الدماغية الناضجة من الخلايا الجذعية البشرية المتعددة القدرات والتوصيف عن طريق المناعة

The cerebellum plays a critical role in the maintenance of balance and motor coordination, and a functional defect in different cerebellar neurons can ...

Single-Cell Optical Action Potential Measurement in Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocytes

قياس إمكانات العمل البصري أحادي الخلية في خلايا القلب المشتقة من الخلايا الجذعية المتعددة القدرات

Conventional intracellular microelectrode techniques to quantify cardiomyocyte electrophysiology are extremely complex, labor intensive, and typically ...

A Culture Method to Maintain Quiescent Human Hematopoietic Stem Cells

طريقة ثقافية للحفاظ على الخلايا الجذعية الدموية البشرية الكويسنت

Human hematopoietic stem cells (HSCs), like other mammalian HSCs, maintain lifelong hematopoiesis in the bone marrow. HSCs remain quiescent in vivo, ...