Name: confocal imaging of double-stranded rna and pattern recognition receptors in negative-sense rna virus infection
Uploaded: 2019-01-26T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection at JoVE.com

ברצוננו להודות על מתקני הדמיה UTMB מקסים Ivannikov לסיוע מיקרוסקופ.
עבודה זו נתמכה על ידי שירותי הבריאות הציבוריים להעניק RO1AI093445 ו- RO1AI129198 הוענק ל SP, UTMB מחויבות קרן P84373 כדי CH, T32 AI007526 אל EM.

1. הכנת A549 תאים ולדלקת JUNV
<ol><li>זרע 2 x 105 אמבריולוגיה A549 לתאי האפיתל אל פולי-D-ליזין (PDL) מצופה coverslips זכוכית דקה ב 12-ובכן הצלחות ב- 24 שעות לפני זיהום.</li>
	<li>להכין aliquots של 150 מ ל JUNV13 -כפל של זיהום (MOI) של פלאק 1.0 ויוצרים יחידה בכל תא מדולל בתקשורת בינוני (DMEM) ששינה הנשר של Dulbecco בתוספת 2...

<ol>
	<li>Jensen, S., Thomsen, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensing+of+RNA+viruses:+a+review+of+innate+immune+receptors+involved+in+recognizing+RNA+virus+invasion.">Sensing of RNA viruses: a review of innate immune receptors involved in recognizing RNA virus invasion.</a> Journal of Virology. 86, 2900-2910 (2012).</li><li>Weber, F., Wagner, V., Rasmussen, S. B., Hartmann, R., Paludan, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double-stranded+RNA+is+produced+by+positive-strand+RNA+viruses+and+DNA+viruses+but+not+in+detectable+amounts+by+negative-strand+RNA+viruses.">Double-stranded RNA is produced by positive-strand RNA viruses and DNA viruses but not in detectable amounts by negative-strand RNA viruses.</a> Journal of Virology. 80, 6 (2006).</li><li>Triantafilou, K., Vakakis, E., Kar, S., Richer, E., Evans, G. L., Triantafilou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualisation+of+direct+interaction+of+MDA5+and+the+dsRNA+replicative+intermediate+form+of+positive+strand+RNA+viruses.">Visualisation of direct interaction of MDA5 and the dsRNA replicative intermediate form of positive strand RNA viruses.</a> Journal of Cell Science. 125, 4761-4769 (2012).</li><li>Onomoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+of+an+antiviral+stress+granule+containing+RIG-I+and+PKR+in+viral+detection+and+innate+immunity.">Critical role of an antiviral stress granule containing RIG-I and PKR in viral detection and innate immunity.</a> PLoS One. 7, e43031 (2012).</li><li>Son, K. N., Liang, Z., Lipton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double-stranded+RNA+is+detected+by+immunofluorescence+analysis+in+RNA+and+DNA+virus+infections,+including+those+by+negative-sense+RNA+viruses.">Double-stranded RNA is detected by immunofluorescence analysis in RNA and DNA virus infections, including those by negative-sense RNA viruses.</a> Journal of Virology. 89, 9383-9392 (2015).</li><li>Mateer, E. J., Paessler, S., Huang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+double-stranded+RNA+colocalizing+with+pattern+recognition+receptors+in+arenavirus+infected+cells.">Visualization of double-stranded RNA colocalizing with pattern recognition receptors in arenavirus infected cells.</a> Frontiers Cellular and Infection Microbiology. 8, 251 (2018).</li><li>Buchmeier, M. J., de la Torre, J. C., Peters, C. J., Knipe, D. M., Howley, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arenavirdae:+The+viruses+and+their+replication.">Arenavirdae: The viruses and their replication.</a> Fields Virology. 2, (2006).</li><li>Levis, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+interferon+in+Argentine+hemorrhagic+fever.">Endogenous interferon in Argentine hemorrhagic fever.</a> The Journal of Infectious Diseases. 149, 428-433 (1984).</li><li>Levis, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlation+between+endogenous+interferon+and+the+clinical+evolution+of+patients+with+Argentine+hemorrhagic+fever.">Correlation between endogenous interferon and the clinical evolution of patients with Argentine hemorrhagic fever.</a> Journal of Interferon Research. 5, 383-389 (1985).</li><li>Huang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+pathogenic+new+world+and+old+world+human+arenaviruses+induce+distinct+interferon+response+in+human+cells.">Highly pathogenic new world and old world human arenaviruses induce distinct interferon response in human cells.</a> Journal of Virology. 89, 7079-7088 (2015).</li><li>Huang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Junin+virus+infection+activates+the+type+I+interferon+pathway+in+a+RIG-I-dependent+manner.">Junin virus infection activates the type I interferon pathway in a RIG-I-dependent manner.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 6, e1659 (2012).</li><li>Huang, C., Kolokoltsova, O. A., Mateer, E. J., Koma, T., Paessler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Highly+pathogenic+new+world+arenavirus+infection+activates+the+pattern+recognition+receptor+protein+kinase+R+without+attenuating+virus+replication+in+human+cells.">Highly pathogenic new world arenavirus infection activates the pattern recognition receptor protein kinase R without attenuating virus replication in human cells.</a> Journal of Virology. 91, 20 (2017).</li><li>Emonet, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rescue+from+cloned+cDNAs+and+in+vivo+characterization+of+recombinant+pathogenic+Romero+and+live-attenuated+Candid#1+strains+of+Junin+virus,+the+causative+agent+of+Argentine+hemorrhagic+fever+disease.">Rescue from cloned cDNAs and in vivo characterization of recombinant pathogenic Romero and live-attenuated Candid#1 strains of Junin virus, the causative agent of Argentine hemorrhagic fever disease.</a> Journal of Virology. 85 (4), 1473-1483 (2011).</li><li>Child, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antagonism+of+the+protein+kinase+R+pathway+in+human+cells+by+Rhesus+Cytomegalovirus.">Antagonism of the protein kinase R pathway in human cells by Rhesus Cytomegalovirus.</a> Journal of Virology. 92, 6 (2018).</li><li>Hobro, A. J., Smith, N. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+fixation+methods:+Spatial+and+compositional+cellular+changes+observed+by+Raman+imaging.">An evaluation of fixation methods: Spatial and compositional cellular changes observed by Raman imaging.</a> Vibrational Spectroscopy. 91, 31-45 (2017).</li></ol>

עבור וירוסי RNA חיוביות-סנס ווירוסים dsDNA, dsRNA מזוהה בקלות עם נוגדן anti-dsRNA J2 נפוץ. עם זאת, וירוסי RNA שלילי-סנס הם האמינו לייצר dsRNA בטמפרטורות נמוכות או מתחת לרמת זיהוי באמצעות נוגדן אותו2. כך, היבטים רבים של אינטראקציה נגיפי RNA ו- PRR הם בעיקר לא ברור של וירוסי RNA שלילי-סנס. ניסינו לשמור ע...

השלב הראשוני האינדוקציה של התגובה החיסונית מולדת הוא זיהוי המארח של גדילי כפול (ds) RNA על ידי קולטני זיהוי דפוס (PRRs) כגון חומצה retinoic (מעטה-אני) כמו רצפטורים (RLRs) מעטה-אני ומלנומה בידול-הקשורים חלבון 5 (מד א-5)1. וירוסים RNA חיוביות-סנס, dsRNA בדרך כלל ניתן בקלות להבחין באמצעות J2 או K1 אנטי-dsRNA נוגדנים חד-שבטיים (Mab)2. האינטראקציה בין dsRNA PRRs חיובי-גדיל RNA וירוסים, כגון נגיף פיקורנה, מאפיין באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית3. עם זאת, עבור שלילי-סנס וירוס רנ א, ויזואליזציה ואפיון של אינטראקציה PRR ו dsRNA יש כבר הפריע על ידי חוסר של נוגדנים רגיש dsRNA. RNA פלורסנט היברידיזציה (דגים) הוחלה על הפריט החזותי של נגיפי RNA ו- PRRs4. בכל זאת, המתודולוגיה דגים דורש ידיעת המטרה רצף ה-RNA, העלול להיות בלתי תואם עם PRR מכתים משותפת. לאחרונה, 9D 5 Mab, אשר פותחה במקור לאבחון של פאן-שכל זיהום, נמצאה להיות רגיש יותר J2 Mab ולא ניתן בקלות לזהות dsRNA במובן שלילי וירוס רנ א-זיהום-5,-6. לפיכך, Mab 9D 5 הוא רומן, כלי שימושי ללמוד שכפול ויראלי ו האינטראקציה בין PRR ו- RNA נגיפי עבור שלילי-סנס וירוס רנ א.
Arenaviruses הם משפחה של חד-גדילי, שלילי-תחושה RNA וירוסים, אשר כוללים מספר פתוגנים אנושי, כגון וירוס לאסה (LASV), חונין וירוס (JUNV), וירוס Machupo (MACV), הגורמים למחלות קשות קדחת דימומית ב בני7. נתונים קליניים של מקרים חמורים, חמורה של ארגנטינאי שפעת נגרמת על ידי העולם החדש arenavirus JUNV התערוכה רמות גבוהות במיוחד של סרום IFN-α8,9. הראינו כי arenaviruses NW פתוגניים (JUNV ו- MACV), אך לא את פתוגניים העולם הישן arenavirus, LASV, זירוז סוג אני בתגובה אינטרפרון (IFN) תאים דנדריטים נגזר מונוציט האנושי10. יתר על כן, מעטה-אני הוא אחד החיישנים תיווכה מסוג I IFN תגובת תאים הנגועים JUNV11. מצאנו גם כי הקולטן R (PKR) קינאז חלבון, אשר ידוע באופן מסורתי לזיהוי dsRNA, מופעל פתוגניים NW arenavirus זיהום12. כדי להבין עוד יותר את מנגנון התגובה IFN וירוס ספציפיים במהלך זיהום arenavirus, כיוונו לפתח פרוטוקול להמחיש את האינטראקציה בין נגיפי dsRNA את PRRs cytoplasmic.
זיהום ניסויים עם פתוגניים JUNV, MACV, LASV חייבת להתבצע באבטחה ברמה 4 מתקנים (BSL-4). לכן, בנוסף לרמת נמוך ככל הנראה dsRNA נוצר זיהום arenavirus, בדרישות אבטחה הוא טכניקה אתגר נוסף בעת ביצוע מחקרי הדמיה אלה וירוסים פתוגני. על ידי ניצול 9D 5 נוגדן, Candid1 # בחיסון מזן JUNV, פרוטוקול מבוסס-מיקרוסקופ קונפוקלי מתואר בדו ח זה, אשר שימש בהצלחה להמחיש dsRNA, חלבון נגיפי, PRR בו זמנית בתאים נגועים על ידי arenavirus ב BSL2 מעבדות. הפרוטוקול מתאים גם עבור ויזואליזציה של התפלגות תאיים של dsRNA ו PRR במהלך זיהום arenavirus פתוגניים במתקני BSL4.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>APEX Alexa Fluor 647 antibody labeling kit</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>A4503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Cell Signaling</td>
			<td>4083</td>
			<td>1:1,000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey-anti rabbit Alexa Fluor 594</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11058</td>
			<td>1:2,000 dilution; Lot #: 1454437</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium</td>
			<td>Corning</td>
			<td>10-013-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Atlanta Bio</td>
			<td>S11150</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass microscope slides</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat-anti mouse Alexa Fluor 488</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A-11029</td>
			<td>1:2000 dilution; Lot #: 1874804</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human lung epithelial A549 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CCL-185</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>A412</td>
			<td>Stored at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse MAb anti-JUNV NP</td>
			<td>BEI</td>
			<td>NA05-AG12</td>
			<td>Conjugated to Alexa-647 at 1:1,000 dilution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse MAb pan-Enterovirus 9D5 Reagent</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>3361</td>
			<td>ready for use; diluted to 1:2; Lot #: 3067445</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS supplemented with Ca and Mg</td>
			<td>Corning</td>
			<td>21-030-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDL Coated coverslips</td>
			<td>Neuvitro</td>
			<td>H-12-1.5-pdl</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ProLong Gold antifade</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P10144</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit MAb MDA-5</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab126630</td>
			<td>1:250 dilution; Lot #: GR97758-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>recombiant Candid#1 strain of JUNV</td>
			<td>Lab generated</td>
			<td>Lab generated</td>
			<td>As previously described in reference 13.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RIG-I mouse MAb conjugated to Alexa-594</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-376845</td>
			<td>1:1000 dilution; Lot #: AO218</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T8787&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal imaging of double-stranded rna and pattern recognition receptors in negative-sense rna virus infection

גדילי כפול (ds) RNA מופק כמו replicative ביניים במהלך זיהום בנגיף ה-RNA. זיהוי של dsRNA על-ידי המחשב המארח דפוס זיהוי קולטנים (PRRs) כגון חומצה retinoic (מעטה-אני) כמו רצפטורים (RLRs) מעטה-אני ומלנומה חלבונים הקשורים בידול 5 (מד א-5) מוביל תנאי הגיוס של התגובה החיסונית מולדת. היווצרות והפצה תאיים של dsRNA במובן חיובי להדבקת וירוס RNA טוב התאפיין מיקרוסקופ. וירוסים RNA שלילי-סנס רבים, כולל חלק arenaviruses, לעורר את התגובה החיסונית מולדת במהלך זיהום. עם זאת, וירוסי RNA שלילי-סנס נחשבו לייצר רמות נמוכות של dsRNA, שפוגעת המחקר הדמיה של הכרה PRR של dsRNA ויראלי. בנוסף, ניסויים זיהום עם arenaviruses פתוגני יש לבצע בלימה גבוהה רמת אבטחה במתקני (BSL-4). האינטראקציה בין נגיפי RNA ו PRRs עבור וירוס רנ א פתוגני לא ידוע בעיקר בשל האתגרים הטכניים נוספים חוקרים צריכים להתמודד במתקני BSL-4. לאחרונה, נוגדן חד שבטי (Mab) (שיבוט 9D 5) ששימש במקור לגילוי פאן-שכל נמצאה במיוחד לזהות dsRNA עם רגישות גבוהה יותר מאשר נוגדנים anti-dsRNA J2 או K1 מסורתיים. במסמך זה, על ידי ניצול 9D 5 נוגדן, נתאר פרוטוקול מיקרוסקופיה קונפוקלית שימש בהצלחה כדי להמחיש dsRNA, חלבון נגיפי, PRR בו זמנית בתאים בודדים נגוע arenavirus. הפרוטוקול מתאים גם הדמיה מחקרים של dsRNA והפצה PRR בתאים arenavirus פתוגניים נגוע BSL4 מתקנים.

פרוטוקול זה הוחל ללמוד את התפלגות ו colocalization בין RLRs (מעטה-אני ל מד א-5) ו dsRNA בתאים נגועים JUNV. כפי שמוצג באיור 1 ו- 2 איור, ההצטברות של dsRNA מגביר לאורך זמן כמו זיהום נגיפי מתקדם. מרוכז מד א-5 (איור 1) ושמא -אני (איור 2) א...

Watch this Scientific Journal Video about Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection at JoVE.com

Confocal Imaging of Double-Stranded RNA and Pattern Recognition Receptors in Negative-Sense RNA Virus Infection

כפול גדילי RNA שהופק במהלך שכפול וירוס רנ א ניתן לזהות על ידי קולטנים זיהוי תבנית כדי ליצור תגובה חיסונית מולדת. וירוסים RNA שלילי-סנס, האינטראקציה בין dsRNA ברמה נמוכה PRRs עדיין לא ברור. פיתחנו שיטה מיקרוסקופיה קונפוקלית להמחיש arenavirus dsRNA ו- PRR בתאים בודדים.

הדמיה קונאפוקלית של זוגיות גדילי RNA ודפוס זיהוי רצפטורים להדבקת וירוס RNA שלילי-סנס

Double-stranded (ds) RNA is produced as a replicative intermediate during RNA virus infection. Recognition of dsRNA by host pattern recognition receptors ...

מסורתי כפול גדיל RNA זיהוי הראיה בדרך כלל אינו רגיש מספיק כדי לזהות RNA כפול גדיל נוצר זיהום וירוס RNA במובן שלילי. לכן האינטראקציה בין RNA כפול תקוע קולטני זיהוי דפוס המארח נשאר חמקמק במידה רבה עבור וירוסים אלה. באמצעות פרוטוקול זה אנו מסוגלים לדמיין ולאפיין את האינטראקציה בין חלבון גרעיני ויראלי, RNA כפול גדיל ולארח PRRs ברמה של תא יחיד עבור וירוס RNA תחושה שלילית. זוהי תכשיר מולטיפלקס המאפשר הכתמות בו זמנית של רנ"א דו-תקע ושני מטרות חלבון ויראליות או מארחות בתאים בודדים. שלא כמו בדיקת RNA-FISH טכניקה זו היא עצמאית רצף RNA ובדרך כלל תואם עם זיהוי נוגדנים של מטרות חלבון. התחל 24 שעות לפני ההדבקה על ידי זריעת 200, 000 תאי אפיתל ריאות אנושיים A549 על גבי כיסוי זכוכית מצופה פולי-D-לי לסין בצלחות 12 בארות והגידול שלהם ב 37

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

RNA Interference in Ticks

RNA התערבות קרציות

Ticks are obligate hematophagous ectoparasites of wild and domestic animals and humans, and are considered to be second worldwide to mosquitoes as vectors ...

Isolation of Fidelity Variants of RNA Viruses and Characterization of Virus Mutation Frequency

בידוד של פידליטי גרסאות של וירוסים RNA ו אפיון תדירות המוטציה וירוס

RNA viruses use RNA dependent RNA polymerases to replicate their genomes. The intrinsically high error rate of these enzymes is a large contributor to the ...

Development of Cell-type specific anti-HIV gp120 aptamers for siRNA delivery

פיתוח נייד מסוג ספציפי נגד HIV gp120 aptamers למסירה siRNA

The global epidemic of infection by HIV has created an urgent need for new classes of antiretroviral agents. The potent ability of small interfering ...

Separation of Single-stranded DNA, Double-stranded DNA and RNA from an Environmental Viral Community Using Hydroxyapatite Chromatography

ההפרדה של ה-DNA חד גדילי, פעמיים תקועים DNA ו-RNA מהקהילה ויראלי הסביבה באמצעות כרומטוגרפיה hydroxyapatite

Viruses, particularly bacteriophages (phages), are the most numerous biological entities on Earth1,2.  Viruses modulate host cell abundance and diversity, ...

Monitoring Activation of the Antiviral Pattern Recognition Receptors RIG-I And PKR By Limited Protease Digestion and Native PAGE

הפעלת ניטור של התבנית אנטי רצפטורים ההכרה RIG-I ו PKR ידי מוגבל פרוטאז עיכול ועמוד Native

Host defenses to virus infection are dependent on a rapid detection by pattern recognition receptors (PRRs) of the innate immune system. In the cytoplasm, ...

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis (NAME) Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

Nucleocapsid Annealing-Mediated Electrophoresis NAME Assay Allows the Rapid Identification of HIV-1 Nucleocapsid Inhibitors

חישול בתיווך Nucleocapsid אלקטרופורזה (NAME) Assay מאפשר זיהוי המהיר של HIV-1 Nucleocapsid המעכבים

RNA or DNA folded in stable tridimensional folding are interesting targets in the development of antitumor or antiviral drugs. In the case of HIV-1, viral ...

Neutrophil Isolation and Analysis to Determine their Role in Lymphoma Cell Sensitivity to Therapeutic Agents

בידוד נויטרופילים וניתוח כדי לקבוע את תפקידם רגישות תאים לימפומה לסוכנים טיפוליים

Neutrophils are the most abundant (40% to 75%) type of white blood cells and among the first inflammatory cells to migrate towards the site of ...

The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

The Ex Vivo Culture and Pattern Recognition Receptor Stimulation of Mouse Intestinal Organoids

ה<em&gt; Ex Vivo</em&gt; גירוי קולטן הכרת תרבות תבנית של עכבר המעיים Organoids

Primary intestinal organoids are a valuable model system that has the potential to significantly impact the field of mucosal immunology. However, the ...

Combining Analysis of DNA in a Crude Virion Extraction with the Analysis of RNA from Infected Leaves to Discover New Virus Genomes

שילוב ניתוח של דנ א ב מיצוי Virion גולמי עם הניתוח של RNA של עלים נגועים לגלות הגנום וירוס חדש

This metagenome approach is used to identify plant viruses with circular DNA genomes and their transcripts. Often plant DNA viruses that occur in low ...

Imaging Cell Interaction in Tracheal Mucosa During Influenza Virus Infection Using Two-photon Intravital Microscopy

אינטראקציה תא הדמיה ב רירית והכו אותי במהלך זיהום בנגיף שפעת באמצעות מיקרוסקופ שני הפוטונים Intravital

The analysis of cell-cell or cell-pathogen interaction in vivo is an important tool to understand the dynamics of the immune response to infection. ...