Name: magnetic resonance imaging assessment of carcinogen-induced murine bladder tumors
Uploaded: 2019-03-29T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Magnetic Resonance Imaging Assessment of Carcinogen-induced Murine Bladder Tumors at JoVE.com

م. ج. ج. وتمول "ميزة الإدارة الصحية قدامى المحاربين في" منح BX0033692-01. م. ج. ج. كما تدعمها مؤسسة هانسون ص جون "أبحاث السرطان" في جامعة "روبرت H. لوري شاملة سرطان مركز من شمال غرب البلاد". ونشكر المركز "التصوير متعدية الجنسيات" لتوفير الحصول على التصوير بالرنين المغناطيسي وتجهيزها. مصادر التمويل لم يكن دور في كتابة المخطوطة أو مقرر أن يقدم للنشر.

عليها جميع الأساليب الموصوفة هنا "رعاية الحيوان المؤسسية" واستخدام اللجنة (إياكوك) من جامعة نورث وسترن.
1-تنظيم دورات تعريفية للأورام مع BBN
<ol><li>الحصول على فئران C57/BL6 الذكور، كل 6 أسابيع على الأقل القديمة. ملاحظة: وضع الفئران الذكور سرطان المثانة أكثر بسرعة وبانتظام من الفئ?...

<ol>
	<li>Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cancer+Statistics,+2017.">Cancer Statistics, 2017.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 67 (1), 7-30 (2017).</li><li>Abdollah, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence,+survival+and+mortality+rates+of+stage-specific+bladder+cancer+in+United+States:+a+trend+analysis.">Incidence, survival and mortality rates of stage-specific bladder cancer in United States: a trend analysis.</a> Cancer Epidemiology. 37 (3), 219-225 (2013).</li><li>Rosenberg, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atezolizumab+in+patients+with+locally+advanced+and+metastatic+urothelial+carcinoma+who+have+progressed+following+treatment+with+platinum-based+chemotherapy:+a+single-arm,+multicentre,+phase+2+trial.">Atezolizumab in patients with locally advanced and metastatic urothelial carcinoma who have progressed following treatment with platinum-based chemotherapy: a single-arm, multicentre, phase 2 trial.</a> The Lancet. 387 (10031), 1909-1920 (2016).</li><li>Sharma, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+monotherapy+in+recurrent+metastatic+urothelial+carcinoma+(CheckMate+032):+a+multicentre,+open-label,+two-stage,+multi-arm,+phase+1/2+trial.">Nivolumab monotherapy in recurrent metastatic urothelial carcinoma (CheckMate 032): a multicentre, open-label, two-stage, multi-arm, phase 1/2 trial.</a> The Lancet Oncology. 17 (11), 1590-1598 (2016).</li><li>Bellmunt, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pembrolizumab+as+Second-Line+Therapy+for+Advanced+Urothelial+Carcinoma.">Pembrolizumab as Second-Line Therapy for Advanced Urothelial Carcinoma.</a> New England Journal of Medicine. 376 (11), 1015-1026 (2017).</li><li>Chan, E., Patel, A., Heston, W., Larchian, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+orthotopic+models+for+bladder+cancer+research.">Mouse orthotopic models for bladder cancer research.</a> BJU International. 104 (9), 1286-1291 (2009).</li><li>Zhang, N., Li, D., Shao, J., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+bladder+cancer:+The+model+establishment+and+evaluation+(Review).">Animal models for bladder cancer: The model establishment and evaluation (Review).</a> Oncology Letters. 9 (4), 1515-1519 (2015).</li><li>Patel, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transabdominal+micro-ultrasound+imaging+of+bladder+cancer+in+a+mouse+model:+a+validation+study.">Transabdominal micro-ultrasound imaging of bladder cancer in a mouse model: a validation study.</a> Urology. 75 (4), 799-804 (2010).</li><li>Chin, J., Kadhim, S., Garcia, B., Kim, Y. S., Karlik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnetic+resonance+imaging+for+detecting+and+treatment+monitoring+of+orthotopic+murine+bladder+tumor+implants.">Magnetic resonance imaging for detecting and treatment monitoring of orthotopic murine bladder tumor implants.</a> The Journal of Urology. 145 (6), 1297-1301 (1991).</li><li>Jurczok, A., Fornara, P., Soling, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+imaging+to+monitor+bladder+cancer+cell+adhesion+in+vivo:+a+new+approach+to+optimize+a+syngeneic,+orthotopic,+murine+bladder+cancer+model.">Bioluminescence imaging to monitor bladder cancer cell adhesion in vivo: a new approach to optimize a syngeneic, orthotopic, murine bladder cancer model.</a> BJU International. 101 (1), 120-124 (2008).</li><li>Vandeveer, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+Immunotherapy+of+Non-Muscle+Invasive+Mouse+Bladder+Cancer+with+Avelumab,+an+Anti-PD-L1+Immune+Checkpoint+Inhibitor.">Systemic Immunotherapy of Non-Muscle Invasive Mouse Bladder Cancer with Avelumab, an Anti-PD-L1 Immune Checkpoint Inhibitor.</a> Cancer Immunology Research. 4 (5), 452-462 (2016).</li><li>Kikuchi, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+and+quantitative+analysis+of+early+stage+orthotopic+murine+bladder+tumor+using+in+vivo+magnetic+resonance+imaging.">Detection and quantitative analysis of early stage orthotopic murine bladder tumor using in vivo magnetic resonance imaging.</a> Journal of Urology. 170, 1375-1378 (2003).</li><li>Chung, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T2-weighted+fast+MR+imaging+with+true+FISP+versus+HASTE:+comparative+efficacy+in+the+evaluation+of+normal+fetal+brain+maturation.">T2-weighted fast MR imaging with true FISP versus HASTE: comparative efficacy in the evaluation of normal fetal brain maturation.</a> American Journal of Roentgenology. 175 (5), 1375-1380 (2000).</li><li>Miyamoto, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Promotion+of+bladder+cancer+development+and+progression+by+androgen+receptor+signals.">Promotion of bladder cancer development and progression by androgen receptor signals.</a> Journal of the National Cancer Institute. 99 (7), 558-568 (2007).</li><li>Bertram, J. S., Craig, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Specific+induction+of+bladder+cancer+in+mice+by+butyl-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine+and+the+effects+of+hormonal+modifications+on+the+sex+difference+in+response.">Specific induction of bladder cancer in mice by butyl-(4-hydroxybutyl)-nitrosamine and the effects of hormonal modifications on the sex difference in response.</a> European Journal of Cancer. 8 (6), 587-594 (1972).</li><li>Nagao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutagenicity+of+N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine,+a+bladder+carcinogen,+and+related+compounds.">Mutagenicity of N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine, a bladder carcinogen, and related compounds.</a> Cancer Research. 37, 399-407 (1977).</li><li>Hirose, M., Fukushima, S., Hananouchi, M., Shirai, T., Ogiso, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+susceptibilities+of+the+urinary+bladder+epithelium+of+animal+species+to+three+nitroso+compounds.">Different susceptibilities of the urinary bladder epithelium of animal species to three nitroso compounds.</a> Gan. Gann; The Japanese Journal of Cancer Research. 67 (2), 175-189 (1976).</li><li>Shin, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+origin+of+bladder+neoplasia+and+tissue+dynamics+of+its+progression+to+invasive+carcinoma.">Cellular origin of bladder neoplasia and tissue dynamics of its progression to invasive carcinoma.</a> Nature Cell Biology. 16 (5), 469-478 (2014).</li><li>Epstein, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+17:+Immunohistology+of+the+Bladder,+Kidney,+and+Testis.">Chapter 17: Immunohistology of the Bladder, Kidney, and Testis.</a> Diagnostic Immunohistochemistry. , 624-661 (2019).</li><li>Cohen, S. M., Ohnishi, T., Clark, N. M., He, J., Arnold, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigations+of+rodent+urinary+bladder+carcinogens:+collection,+processing,+and+evaluation+of+urine+and+bladders.">Investigations of rodent urinary bladder carcinogens: collection, processing, and evaluation of urine and bladders.</a> Toxicologic Pathology. 35 (3), 337-347 (2007).</li><li>Wood, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumors+of+the+bladder.">Tumors of the bladder.</a> Campbell-Walsh Urology. 11 (92), 2184-2204 (2016).</li><li>Zitvogel, L., Pitt, J. M., Daillere, R., Smyth, M. J., Kroemer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+in+oncoimmunology.">Mouse models in oncoimmunology.</a> Nature Reviews Cancer. , (2016).</li><li>Kaneko, S., Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=X+chromosome+protects+against+bladder+cancer+in+females+via+a+KDM6A-dependent+epigenetic+mechanism.">X chromosome protects against bladder cancer in females via a KDM6A-dependent epigenetic mechanism.</a> Science Advances. 4 (6), eaar5598 (2018).</li><li>Smilowitz, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+of+gold+nanoparticles+in+BBN-induced+muscle-invasive+bladder+cancer+in+mice.">Biodistribution of gold nanoparticles in BBN-induced muscle-invasive bladder cancer in mice.</a> International Journal of Nanomedicine. 12, 7937-7946 (2017).</li><li>Dai, Y. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+interaction+of+arsenic+and+N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine+on+urothelial+carcinogenesis+in+mice.">The interaction of arsenic and N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine on urothelial carcinogenesis in mice.</a> PLoS One. 12 (10), e0186214 (2017).</li><li>Williams, P. D., Lee, J. K., Theodorescu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+Credentialing+of+Rodent+Bladder+Carcinogenesis+Models.">Molecular Credentialing of Rodent Bladder Carcinogenesis Models.</a> Neoplasia. 10 (8), (2008).</li><li>Fantini, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Carcinogen-induced+mouse+model+recapitulates+the+molecular+alterations+of+human+muscle+invasive+bladder+cancer.">A Carcinogen-induced mouse model recapitulates the molecular alterations of human muscle invasive bladder cancer.</a> Oncogene. 37 (14), 1911-1925 (2018).</li><li>. NCCN Guidelines in Clinical Oncology - Bladder Cancer 5.2018 Available from: <a target="_blank" href="https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/bladder.pdf">https://www.nccn.org/professionals/physician_gls/pdf/bladder.pdf</a> (2018)</li><li>Costa, M. J., Delingette, H., Novellas, S., Ayache, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Automatic+segmentation+of+bladder+and+prostate+using+coupled+3-D+deformable+models.">Automatic segmentation of bladder and prostate using coupled 3-D deformable models.</a> Medical Image Computing and Computer-Assisted Intervention. 10 (Pt 1), 252-260 (2007).</li><li>Rosenkrantz, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+quantitative+MRI+metrics+for+assessment+of+stage+and+grade+of+urothelial+carcinoma+of+the+bladder:+preliminary+results.">Utility of quantitative MRI metrics for assessment of stage and grade of urothelial carcinoma of the bladder: preliminary results.</a> American Journal of Roentgenology. 201 (6), 1254-1259 (2013).</li></ol>

تصوير دقيق لنماذج الورم ضروري للمناسبة قبل القتل الرحيم التدريج والحيوان والعشوائية قبل الشروع في العلاج التجريبي. استخدام الإجراء المعروضة هنا، علينا أن نبدي المنهجية (1) توليد أورام المثانة باستخدام مادة مسرطنة BBN و (2) التجهيزة عبء ورم المثانة عن طريق استخدام منطقة المستمدة من "السيد ال?...

سرطان المثانة هو السرطان الأكثر شيوعاً من الخامس عموما، مسؤولة عن حوالي 000 80 حالة جديدة و 000 16 حالة وفاة في الولايات المتحدة في عام 20171. بعد حوالي 30 سنة دون تقدما كبيرا في علاج سرطان المثانة2النظمية، أثبتت المحاكمات المانع حاجز المضادة-PD-1 ومكافحة-PD-L1 الأخيرة ردود مثيرة وأحيانا دائمة في المرضى الذين يعانون من متقدمة urothelial سرطان3،،من45. ومع ذلك، فقط حوالي 20% مرضى وتظهر استجابة موضوعية لهذه العلاجات، وكذلك الدراسات مطلوبة لتوسيع الاستخدام الفعال للعلاج المناعي في المرضى الذين يعانون من سرطان المثانة.
نماذج سرطان المثانة مورين أدوات حاسمة في التقييم السريري لعلاجات رواية6،7. من أجل التحكم لحجم الورم عند التعشئه الفئران للعلاجات المختلفة، يجب تقييم عبء الورم والتحكم بين مجموعات العلاج. الدراسات السابقة استخدمت الموجات فوق الصوتية أو الإضاءة الحيوية لتقييم أورثوتوبيك المثانة المستندة إلى خط خلية سرطان8،نماذج9،10،11. ومع ذلك، يقدم كلا تقنيات عدة عيوب. قياسات الموجات فوق الصوتية يمكن أن يتأثر بالمهارات للمشغل وتفتقر إلى ميزات ثلاثية الأبعاد وعالية الدقة المكانية. أساليب الإضاءة الحيوية يمكن أن يوفر تقييم شبه كمي للخلايا السرطانية فقط، ولا تسمح للتصور من مورفولوجيا وتشريح المثانة. وعلاوة على ذلك، يمكن فقط استخدام الإضاءة الحيوية مع النماذج المستندة إلى خط الخلية، التي تعبر عن طرحه الجينات في الفئران أصلع أو الفئران بمعاطف بيضاء.
التصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي)، من ناحية أخرى، يوفر مرونة فريدة من نوعها في الحصول على صور عالية الدقة التشريحية، نستعرض طائفة واسعة من التباين الأنسجة يمكن التصور الدقيق والتقييم الكمي لعبء الورم دون الحاجة إلى التعبير عن خصائص طرحه. صور السيد استنساخه بسهولة أكبر مع خطوط الأنابيب التحليل المناسبة وتضمن التصور ثلاثي الأبعاد للمثانة. أكبر القيود المفروضة على التصوير بالرنين المغناطيسي هي طول الفترة الزمنية اللازمة لفحص وارتفاع التكاليف المرتبطة بها التي تحد من فحوصات عالية الإنتاجية. ومع ذلك، لقد بينت دراسات عديدة أن سقونسس يمكن أن توفر صور عالية الجودة التشخيصية التي يمكن استخدامها للكشف عن فعالية ورصد أورام المثانة المستندة إلى خط الخلية؛ وهكذا، يمكن لتحليل الإنتاجية العالية9،12.
هنا، يمكننا وصف أسلوب المستندة إلى السيد غير الغازية لموثوقية وكفاءة تميز الأورام الناجمة عن مادة مسرطنة المثانة في الفئران. ولتحقيق ذلك، نحن نستخدم تصوير سريع مع حالة ثابتة الحركة البدارية MR تقنية (صحيح [فيسب])، الذي تضمن دورات قصيرة المدة في المسح في حين لا يزال توفير جودة عالية وعالية الدقة المكانية (~ 100 ميكرون) لكشف وقياس المثانة 13من الأورام. وعلاوة على ذلك، التأكد من دقة هذا الفحص بالرنين المغناطيسي غير الغازية، يصف لنا الترابط بين المعلمات المستمدة من التصوير بالرنين المغناطيسي و السابقين فيفو وزن المثانة، فضلا عن مرحلة الورم أكد مرضية.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>C57BL/6 mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>664</td>
			<td>Mice</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>N-butyl-N-(4-hydroxybutyl)nitrosamine carcinogen (BBN)</td>
			<td>TCI American</td>
			<td>B0938</td>
			<td>Carcinogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.9% normal saline</td>
			<td>Hospira, Inc</td>
			<td>NDC 0409-488-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Piramal HealthCare</td>
			<td>60307-120-25</td>
			<td>Anesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7Tesla ClinScan MRI</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>NA</td>
			<td>Dedicated Small Animal Imaging MRI</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syngo</td>
			<td>Siemens</td>
			<td>NA</td>
			<td>MR Integrated Imaging Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Model 1030 Monitoring &#38; Gating System</td>
			<td>Small Animal Instruments, Inc. (SAII)</td>
			<td>NA</td>
			<td>Small animal physiologic monitoring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formalin, Neutral Buffered, 10%</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>HT501128</td>
			<td>Fixative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>NC1093844</td>
			<td>Histologic staining agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>23-245651</td>
			<td>Histologic staining agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jim7</td>
			<td>Xinapse Systems</td>
			<td>NA</td>
			<td>Medical image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GraphPad Prism v7.04</td>
			<td>Graphpad</td>
			<td>NA</td>
			<td>Graphing software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R v3.4.2</td>
			<td>The R Project for Statistical Computing</td>
			<td>NA</td>
			<td>Statistical software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>R package pROC v1.10.0.</td>
			<td>The R Project for Statistical Computing</td>
			<td>NA</td>
			<td>ROC analysis</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

magnetic resonance imaging assessment of carcinogen-induced murine bladder tumors

نماذج ورم المثانة موريني حاسمة لتقييم الخيارات العلاجية الجديدة. أورام المثانة التي يسببها مع مسرطن النيتروسامين (BBN) N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) مفيدة أكثر النماذج المستندة إلى خط الخلية نظراً لأنها عن كثب تكرار الملامح المجينية الأورام البشرية، وخلافا لنماذج الخلية وتكثيفها، أنها توفر فرصة جيدة لدراسة إيمونوثيرابيس. ومع ذلك، توليد ورم المثانة غير المتجانسة؛ ولذلك يلزم إجراء تقييم دقيق لعبء الورم قبل التعشيه للعلاج التجريبي. الموصوفة هنا هو نموذج الماوس BBN وبروتوكول لتقييم المثانة سرطان الورم العبء في فيفو استخدام تسلسل رنين المغناطيسي سريعة وموثوق بها (السيد) (صحيح [فيسب]). هذا الأسلوب بسيط ويمكن الاعتماد عليها لأنه، خلافا للموجات فوق الصوتية، السيد عامل مستقل ويسمح بمعالجة مباشرة بعد اقتناء الصور والاستعراض. استخدام صور محورية من المثانة، تحليل للمناطق ذات الاهتمام على طول الجدار المثانة وورم السماح لحساب مساحة الجدار وورم المثانة. يرتبط هذا القياس مع السابقين فيفو وزن المثانة (rs= 0.37، ف = 0.009) ومرحلة الورم (p = 0.0003). وفي الختام، BBN يولد الأورام غير المتجانسة التي تعتبر مثالية لتقييم إيمونوثيرابيس، والتصوير بالرنين المغناطيسي بشكل سريع وموثوق بها تقييم عبء الورم قبل التوزيع العشوائي للأسلحة العلاج التجريبي.

باستخدام بروتوكول وصف (الشكل 1)، كانت الناجم عن أورام المثانة في الفئران الذكور C57/B6. تم إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي في 16 أسبوعا، وقد euthanized الفئران في 20 أسبوعا. وسجلت السابقين فيفو المثانة الأوزان (الأسلحة البيولوجية) لكل الماوس. كانت الملون الشر?...

Watch this Scientific Journal Video about Magnetic Resonance Imaging Assessment of Carcinogen-induced Murine Bladder Tumors at JoVE.com

Magnetic Resonance Imaging Assessment of Carcinogen-induced Murine Bladder Tumors

هي الناجمة عن أورام المثانة مورين مع مسرطن النيتروسامين N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) (BBN). يتم توليد ورم المثانة غير المتجانسة؛ ولذلك يلزم إجراء تقييم دقيق لعبء الورم قبل التعشيه للعلاج التجريبي. نقدم هنا بروتوكولا التصوير بالرنين المغناطيسي سريعة وموثوق بها لتقييم حجم الورم والمرحلة.

تقييم التصوير بالرنين المغناطيسي لاورام المثانة مورين المستحثة مسرطن

Murine bladder tumor models are critical for the evaluation of new therapeutic options. Bladder tumors induced with the N-butyl-N-(4-hydroxybutyl) ...

ويمكن استخدام هذه المنهجية لتوليد أورام المثانة بشكل مستنسخ باستخدام مادة BBN المسرطنة ولصور حجم وامتداد عبء ورم المثانة من خلال التصوير بالرنين المغناطيسي. تستخدم هذه التقنية نهج التصوير السريع المستقل للمشغل مع أوقات اقتناء قصيرة بجودة تشخيصية عالية لإجراء مقايسات عالية الإنتاجية للفئران في المراحل المتوسطة لتطوير الورم. للحث على تشكيل سرطان المثانة الورم، إضافة 0.05٪ BBN إلى وعاء مياه الشرب المبهمة وتوفير المياه إلى 6 أسابيع من العمر C57 أسود ستة الفئران الإعلانية libitum.ثم مراقبة الحيوانات مرتين في الأسبوع لعلامة الاستغاثة المرتبطة بأورام المثانة وفقا للمبادئ التوجيهية IACUC المحلية. 16 إلى 24 أسابيع بعد التعرض، تحميل حقنة ملليلتر واحدة مجهزة إبرة قياس 25-27 مع 100 إلى 200 ميكرولترات من المالحة العقيمة وحقن تحت الجلد المالحة في المعالجة BBN. بعد 10 دقائق، قم بنقل الفأرة إلى حامل التصوير لمصور الرنين المغناطيسي وأدخل مسبار درجة حرارة المستقيم متصل بجهاز الكمبيوتر الفسيولوجي لتسجيل البيانات لمراقبة درجة حرارة جسم الحيوان.المقبل، وضع 4 قنوات لفائف استقبال رباعية على أسفل البطن من الماوس وبدء التعديلات التلقائية في برنامج التصوير المتكامل للحصول على مجموعة ثلاثية الأبعاد من الصور من الجسم الماوس كله. من هذه المجموعة المرجعية من الصور، وتحديد المنطقة ذات الاهتمام والحصول على ثلاث مجموعات من الصور المقطعة متعامدة على طول محوري، والإكلية، والطائرات القوس. باستخدام التصوير السريع الحقيقي مع تسلسل التصوير تطور ثابت الحالة، تعيين TR إلى 900 ميلي ثانية، وTE إلى ميلي ثانية اثنين، وFAFA إلى 70، 14 المتوسطات.ثم حدد المعلمات الهندسية المناسبة داخل برنامج منصة التصوير للحصول على سلسلة من الشرائح عبر المثانة كلها من 0.5 ملليلتر سمك ودقة في الطائرة من 0.148 ملليمتر. عندما يتم الحصول على جميع الصور، تصدير مجموعة من شرائح تغطي المثانة كلها إلى برنامج تحليل الصور الطبية المناسبة والتمرير من خلال الصور التي تم إنشاؤها لتحديد موقع شريحة في نقطة الوسط من المثانة التي تسمح التصور من جدار المثانة والتجويف لتحديد وجهة النظر المحورية التمثيلية في وسط المثانة للتحليل الكمي. ثم تتبع الحدود حول الحافة الخارجية والتجويف الداخلي للمثانة لتحديد بعناية المنطقة ذات الاهتمام داخل وجهة النظر المحورية الممثل المحدد وطرح التجويف الداخلي من الحافة الخارجية لحساب مساحة السطح من جدار المثانة.بعد 20 أسبوعا من التعرض BBN، وتنظيف منطقة شق مع 70٪ الإيثانول واستخدام ملقط لرفع الجلد جدار البطن. جعل شق خط الوسط من التكافل العانة لعملية xiphoid وفهم الصفاق للسماح شق حاد من تجويف البريتوني. تحديد المثانة في خط الوسط أسفل البطن، وذلك باستخدام ملقط لفهم قبة المثانة.تشريح المثانة بعيدا عن الهياكل المحيطة بها بما في ذلك vesicles المنوية، المستقيم، والدهون. قطع الرباط السري المتوسط الذي يربط قبة المثانة إلى جدار البطن وumbilicus. قطع الحالبين على مقربة من المثانة ورفع المثانة cephalad، وقطع مجرى البول لإزالة المثانة.ثم شطف المثانة ختان مع برنامج تلفزيوني وعلى الفور تزن الأنسجة على التوازن. هنا ، يتم عرض تصوير سريع حقيقي تمثيلي مع صور الرنين المغناطيسي ثابت الحالة من إعادة بناء جدار المثانة ثلاثي الأبعاد وصور الأمراض للماوس مع ورم كبير وماوس تحكم بدون ورم. سمك جدار المثانة كما المستمدة من التصوير بالرنين المغناطيسي يرتبط أسبوعيا مع vivo السابقين التي حصلت على قياسات وزن المثانة.فحص سمك جدار المثانة المستمدة من التصوير بالرنين المغناطيسي و السابق vivo الحصول على بيانات وزن المثانة أيضا إثبات وجود ارتباط مع مرحلة الورم وكذلك جمعية عند تصنيف علم الأمراض عن طريق سرطان المثانة غير العضلات الغازية وسرطان المثانة الغازية العضلات. ضع في اعتبارك أنه من الأفضل الحصول على الصور في الفئران عندما يكون لديهم كامل المثانة. بعد التصوير بالرنين المغناطيسي لأورام المثانة، يمكن تقسيم الفئران إلى أفواج ذات خصائص ورم مماثلة، حسب الاقتضاء.تسمح هذه التقنية للباحثين باستكشاف العلاجات المناعية الجديدة وغيرها من العلاجات لتحسين النتائج لمرضانا. من المهم أن نتذكر أن BBN هو مادة مسرطنة وأنه ينبغي دائما اتخاذ الاحتياطات المناسبة عند التعامل مع هذا المركب.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Hyperpolarized 13C Metabolic Magnetic Resonance Spectroscopy and Imaging

Hyperpolarized 13C Metabolic Magnetic Resonance Spectroscopy and Imaging

In the past decades, new methods for tumor staging, restaging, treatment response monitoring, and recurrence detection of a variety of cancers have ...

A Murine Orthotopic Bladder Tumor Model and Tumor Detection System

والفئران مثلي المثانة نموذج ورم والورم نظام لكشف

This protocol describes the generation of bladder tumors in female C57BL/6J mice using the murine bladder cancer cell line MB49, which has been modified ...

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

نموذج الفأر من التعب المستحث بواسطة الطرفية تشعيع

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

Development of a Human Preclinical Model of Osteoclastogenesis from Peripheral Blood Monocytes Co-cultured with Breast Cancer Cell Lines

وضع نموذج الإكلينيكية البشرية من أوستيوكلاستوجينيسيس من الدم المحيطية وحيدات مثقف يشترك مع خطوط خلايا سرطان الثدي

The crosstalk between tumor cells and bone cells in the bone microenvironment is crucial to understanding the mechanism of bone metastasis formation. We ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

في فيفو تقييم الجيش الشعبي الثوري لدرجة الحموضة، فس2، حالة الأكسدة والاختزال، وتركيزات الفوسفات والجلوتاثيون في "ورم المكروية"

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Enrichment and Characterization of the Tumor Immune and Non-immune Microenvironments in Established Subcutaneous Murine Tumors

تخصيب اليورانيوم وتوصيف ميكرونفيرونمينتس المناعي والمناعة غير ورم في المنشأة الأورام مورين تحت الجلد

The tumor immune microenvironment (TIME) has recently been recognized as a critical mediator of treatment response in solid tumors, especially for ...

Surface-enhanced Resonance Raman Scattering Nanoprobe Ratiometry for Detecting Microscopic Ovarian Cancer via Folate Receptor Targeting

رامان الرنين المزودة بسطح نثر راتيوميتري نانوبروبي للكشف عن سرطان المبيض المجهرية عن طريق مستقبلات حمض الفوليك استهداف

Ovarian cancer represents the deadliest gynecologic malignancy. Most patients present at an advanced stage (FIGO stage III or IV), when local metastatic ...

Murine Model of Metastatic Liver Tumors in the Setting of Ischemia Reperfusion Injury

نموذج مورين من أورام الكبد النقيلي في وضع إصابة نقص تروية التسريب

Liver ischemia and reperfusion (I/R) injury, a common clinical challenge, remains an inevitable pathophysiological process that has been shown to induce ...

In Vivo Immunofluorescence Localization for Assessment of Therapeutic and Diagnostic Antibody Biodistribution in Cancer Research

في فيفو الفلورة المناعية توطين لتقييم التوزيع الحيوي للجسم المضاد العلاجي والتشخيصي في أبحاث السرطان

Monoclonal antibodies (mAbs) are important tools in cancer detection, diagnosis, and treatment. They are used to unravel the role of proteins in ...

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

نمذجة الانبثاث الدماغ من خلال الحقن داخل الجمجمة والتصوير بالرنين المغناطيسي

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are ...