Name: analysis of endocytic uptake and retrograde transport to the trans-golgi network using functionalized nanobodies in cultured cells
Uploaded: 2019-02-21T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network Using Functionalized Nanobodies in Cultured Cells at JoVE.com

यह काम ग्रांट 31003a-१६२६४३ द्वारा स्विस नेशनल साइंस फाउंडेशन द्वारा समर्थित था । हम समर्थन के लिए निकोल beuret और biozentrum इमेजिंग कोर सुविधा (imcf) धंयवाद ।

1. functionalized नैनोबॉडीज के साथ बैक्टीरियल परिवर्तन
नोट: इस प्रोटोकॉल के लिए अनुकूलित किया गया है अभिव्यक्ति, शुद्धिकरण, और के विश्लेषण के लिए क्रियाशील विरोधी gfp nanobodies के रूप में पहले30?...

nanobodies पारंपरिक एंटीबॉडी पर कई फायदे के साथ प्रोटीन बांधने की मशीन मचाने के एक उभरते वर्ग का प्रतिनिधित्व करते हैं: वे छोटे हैं, स्थिर, monomeric, उच्च संबध और कमी के लिए चुना जा सकता है डाइसलफाईड बांड३३<...

कोशिका की सतह से प्रोटीन और लिपिड का प्रतिगामी यातायात विभिन्न इंट्रासेलुलर डिब्बों के लिए झिल्ली होमियोस्टेसिस के रखरखाव के लिए counterbalance स्राव के लिए महत्वपूर्ण है और एंट्रोग्रेड परिवहन मशीनरी के घटकों को रीसायकल करने के लिए1 , 2. clathrin-निर्भर या-स्वतंत्र endocytosis के माध्यम से इंटर्नशिप के बाद, प्रोटीन और लिपिड कार्गो पहले जहां वे आगे भी endo-lysosomal प्रणाली, प्लाज्मा झिल्ली को पुनर्नवीनीकरण के साथ या तो पुनर्निर्देशित कर रहे हैं से जल्दी endosomes आबाद, या ट्रांस गोल्गी नेटवर्क (tgn) को लक्षित । endosomes और/या tgn के लिए सेल सतह से पुनर्चक्रण एंट्रोग्रेड ट्रांसमेम्ब्रेन कार्गो रिसेप्टर्स के एक नंबर के कार्यात्मक चक्र का हिस्सा है, जैसे धनायन निर्भर और धनायन स्वतंत्र मनोस-6-फॉस्फेट रिसेप्टर्स (cdmpr और cimpr) पहुंचाने नए संश्लेषित लाइसोसोमल हाइड्रोलीज़ को टीजीएन से देर से एंडोसोमस और लाइसोसोम3,4,5, सोर्टिलिं और सोरला6,7, और नाहीन (wls) को सेल की सतह पर wntless लिगंडस के परिवहन के लिए 8 , 9 , 10 , 11. अंय प्रोटीन tgn को वापस प्राप्त TGN46 और उसके संबंधित isoforms12,13,14, snares (घुलनशील N-ethylmaleimide संवेदनशील फ्यूजन फैक्टर लगाव रिसेप्टर्स) 15 , 16 , 17, एमीलॉइड प्रणेता प्रोटीन (एपीपी)18,19, प्रगतिशील एंसिलोसिस (ANK) प्रोटीन20, धातु ट्रांसपोर्टरों जैसे ATP7A/बी या DMT121,22, और ट्रांसमेम्ब्रेन कार्बोक्सिपेप्टिडेस डी, फ्रिन या BACE123,24,25सहित प्रोसेसिंग एंजाइम । इन अंतर्जात प्रोटीन के अलावा, जीवाणु और संयंत्र विषाक्त पदार्थों (जैसे, shiga और हैजा विष, ricin और abrin) अपहरण प्रतिगामी परिवहन मशीनरी cytosol26,27में retrotranslocation के लिए ईआर तक पहुँचने के लिए, 28,29.
आदेश में सीधे प्रतिगामी यातायात का विश्लेषण करने के लिए, हम पहले से एक nanobody-आधारित toolkit विकसित किया है लेबल और सेल की सतह से इंट्रासेल्युलर डिब्बों30के लिए कार्गो प्रोटीन का पालन करें । नैनोबॉडीज प्रोटीन के एक नए परिवार का प्रतिनिधित्व करते हैं, जो कि स्वाभाविक रूप से camelids और उपास्थि मछलियों31,३२में पाए जाने वाले समलैंगिकता भारी-श्रृंखला-केवल एंटीबॉडी (एचकेबीएस) से व्युत्पंन हैं वे चर भारी श्रृंखला hcabs के डोमेन (vhh) का गठन और पारंपरिक एंटीबॉडी (उदाहरण के लिए, iggs) पर कई फायदे हैं: वे monomeric हैं, छोटे (~ 15 केडीए), अत्यधिक घुलनशील, डिसल्फाइड बांड से रहित, जीवाणुरोधी व्यक्त किया जा सकता है, और के लिए चयनित उच्च-संबध बाइंडिंग३३,३४,३५,३६। हमारे nanobody उपकरण बहुमुखी और मोटे तौर पर लागू करने के लिए, हम सतह लेबल करने के लिए क्रियाशील विरोधी gfp nanobody कार्यरत है और उनके extracellular/lumenal डोमेन पर gfp के साथ टैग की गईं प्रोटीन ट्रैक । mcherry, एस्कॉर्बेट peroxidase 2 (APEX2)३७, या tyrosine सल्फेशन (टीएस) दृश्यों, वास्तविक ट्रांसमेम्ब्रेन कार्गो प्रोटीन के प्रतिगामी परिवहन के साथ nanobodies के functionalization द्वारा या तो फिक्स्ड और लाइव सेल इमेजिंग द्वारा विश्लेषण किया जा सकता है, द्वारा इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी, या biochemically । tyrosylprotein सल्फोट्रांसटोरिज़ (TPST1 और TPST2) द्वारा मध्यस्थता के बाद से टायरोसिन सल्फेशन ट्रांस गोल्गी/tgn के लिए प्रतिबंधित एक posttranslational संशोधन है, हम सीधे सेल सतह से इस के लिए ब्याज की प्रोटीन की परिवहन और कैनेटीक्स का अध्ययन कर सकते हैं आंतरकोशिकीय गोलगी डिब्बा३८,३९,४०.
इस तरीके लेख में, हम क्रियाशील नैनोबॉडीज (vhh-2xts,-APEX2,-mcherry और डेरिवेटिव) के उत्पादन में आसानी का वर्णन आवेदनों की एक संख्या के लिए उपयुक्त स्तनधारी कोशिकाओं में प्रतिगामी परिवहन का विश्लेषण करने के लिए30. हम मुख्य रूप से सेल की सतह से सल्फेशन के डिब्बे के लिए इंट्रासेलुलर यातायात के विश्लेषण के लिए टीएस साइट-संशोधित नैनोबॉडी के उपयोग पर ध्यान केंद्रित करते हैं ।

<table >
	
		
		
		
		
	
	<tbody>
		<tr >
			<td >Anti-GFP antibody</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >118144600001</td>
			<td >Product is distributed by Sigma-Aldrich, but manufactured by Roche</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-His6 antibody</td>
			<td >Bethyl Laboratories</td>
			<td >A190-114A</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Anti-actin antibody</td>
			<td >EMD Millipore</td>
			<td >MAB1501</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Goat anti-rabbit HRP</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >A-0545</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Goat anti-mouse HRP</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >A-0168</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4&#39;,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >D9542</td>
			<td >dissolved in 1 x PBS/1%BSA</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A3672</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >D-biotin</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >B4501</td>
			<td >dissolved in sterile 500 mM NaH2PO4 or DMSO</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >5-aminolevuilnic acid (dALA) hydrochloride</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >A3785</td>
			<td >dissolved in sterile water</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >DNase I</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A3778</td>
			<td >dissolved in sterile water</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Lysozyme</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >18037059001</td>
			<td >Product is distributed by Sigma-Aldrich, but manufactured by Roche</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brefeldin A (BFA)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >B5936</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Puromycin</td>
			<td >Invivogen</td>
			<td >ant-pr-1</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Penicillin/Streptomycin</td>
			<td >Bioconcept</td>
			<td >4-01F00-H</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >L-glutamine</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A3704</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dulbecco&#8217;s modified Eagle&#8217;s medium (DMEM)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >D5796</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fetal calf serum (FCS)</td>
			<td >Biowest</td>
			<td >S181B-500</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sulfur-35 as sodium sulfate</td>
			<td >Hartmann Analytics</td>
			<td >ARS0105</td>
			<td >Product contains 5 mCi</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Earle&#39;s balanced salts</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >E6267</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MEM amino acids (50 x) solution</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >M5550</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >MEM vitamin solution (100 x)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >M6895</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >cOmplete, Mini Protease inhibitor cocktail</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >11836153001</td>
			<td >Product is distributed by Sigma-Aldrich, but manufactured by Roche</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Isopropyl-&#946;-D-thiogalactopyranosid (IPTG)</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A1008</td>
			<td >dissolved in sterile water, stock is 1 M</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Carbenicillin disodium salt</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A1491</td>
			<td >dissolved in sterile water, stock is 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Kanamycin sulfate</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A1493</td>
			<td >dissolved in sterile water, stock is 100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Coomassie-R (Brilliant Blue)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >B-0149</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A3813</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >A2153</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Fluoromount-G</td>
			<td >Southern Biotech</td>
			<td >0100-01</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ni Sepharose High Performance</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td >17-5268-01</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >His GraviTrap columns</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td >GE11-0033-99</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >His buffer kit</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td >GE11-0034-00</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Disposable PD10 desalting columns</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td >GE17-0851-01</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Mini-Protean TGX gels, 4-20%, 15-well</td>
			<td >Bio-Rad</td>
			<td >456-1096</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Dulbecco&#8217;s phosphate buffered saline (DPBS) w/o Ca2+/Mg2+</td>
			<td >Sigma-Aldrich</td>
			<td >D8537</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >35-mm dishes</td>
			<td >Falcon</td>
			<td >353001</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >6-well plates</td>
			<td >TPP</td>
			<td >92406</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Glass coverslips (No. 1.5H)</td>
			<td >VWR</td>
			<td >631-0153</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF)</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A0999.0025</td>
			<td >dissolved in 40% DMSO 60% isopropanol, stock in 500 mM</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tryptone</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A1553</td>
			<td ></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Yeast extract</td>
			<td >Applichem</td>
			<td >A1552</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Magnesium chloride hexahydrate</td>
			<td >Merck Millipore</td>
			<td >105833</td>
			<td>dissolved in sterile water, stock is 1 M</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Calcium chloride dihydrate</td>
			<td >Merck Millipore</td>
			<td >102382</td>
			<td>dissolved in sterile water, stock is 1 M</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sodium chloride</td>
			<td >Merck Millipore</td>
			<td >106404</td>
			<td>dissolved in sterile water, stock is 5 M</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of endocytic uptake and retrograde transport to the trans-golgi network using functionalized nanobodies in cultured cells

कोशिका की सतह से गोलगी के लिए प्रोटीन और झिल्ली का परिवहन और परे होमियोस्टेसिस, अंगक पहचान और शरीर क्रिया विज्ञान के लिए आवश्यक है । प्रतिगामी प्रोटीन ट्रैफ़िक का अध्ययन करने के लिए, हमने हाल ही में एक बहुमुखी nanobody-आधारित टूलकिट विकसित किया है ताकि सेल की सतह से गोलगी कॉम्प्लेक्स तक परिवहन का विश्लेषण हो, या तो फिक्स्ड और लाइव सेल इमेजिंग द्वारा, इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा, या बायोकैमिकली । हम क्रियाशील विरोधी हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (gfp) nanobodies इंजीनियर-छोटे, monomeric, उच्च संबध प्रोटीन बाँधने-कि सेल के लिए लागू किया जा सकता है एक extracellular gfp मोइटी के साथ ब्याज की झिल्ली प्रोटीन व्यक्त लाइनों । derivatized gfp पत्रकारों को बाध्य nanobodies विशेष रूप से भली भांति और ' पत्रकारों छंटाई मार्गों के साथ piggyback परिवहन कर रहे हैं । नैनोबॉडीज को फ्लोरोप्रेसेंस माइक्रोस्कोपी और लाइव इमेजिंग द्वारा प्रतिगामी परिवहन के साथ क्रियाशील किया गया था, एस्कॉर्बेट peroxidase 2 (APEX2) के साथ, इलेक्ट्रॉन द्वारा रिपोर्टर-नैनोबॉडी परिसरों के अल्ट्रास्ट्रक्चरल स्थानीयकरण की जांच करने के लिए माइक्रोस्कोपी, और tyrosine सल्फेशन (टीएस) के साथ ट्रांस-गोल्गी नेटवर्क (tgn) आगमन की गतिकी का आकलन करने के लिए रूपांकनों । इस methodological लेख में, हम बैक्टीरियोली व्यक्त करने के लिए सामान्य प्रक्रिया रूपरेखा और क्रियाशील नैनोबॉडीज को शुद्ध । हम हमारे उपकरण के शक्तिशाली उपयोग का वर्णन mcherry-और टीएस संशोधित nanobodies का उपयोग करने के लिए endocytic उत्थान और कार्गो प्रोटीन के tgn आगमन का विश्लेषण ।

करने के लिए प्रतिगामी प्रोटीन परिवहन की जांच करने के लिए विभिंन इंट्रासेलुलर स्थलों, हम हाल ही में एक विरोधी gfp nanobody आधारित उपकरण की स्थापना की है और लेबल के लिए सेल की सतह30से पुनः सं?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network Using Functionalized Nanobodies in Cultured Cells at JoVE.com

Analysis of Endocytic Uptake and Retrograde Transport to the Trans-Golgi Network Using Functionalized Nanobodies in Cultured Cells

संपोषित कोशिकाओं में प्रकार्यीकृत नैनोबॉडीज का उपयोग करते हुए ट्रांस-गोल्गी नेटवर्क में एन्डोसिटिक के उत्थान और प्रतिगामी परिवहन का विश्लेषण

कोशिका की सतह से गोलगी के लिए प्रोटीन का प्रतिगामी परिवहन झिल्ली होमियोस्टेसिस को बनाए रखने के लिए आवश्यक है । यहां, हम एक विधि का वर्णन करने के लिए biochemically सेल सतह का विश्लेषण करने के लिए-पुनः संयोजक प्रोटीन के golgi परिवहन HeLa कोशिकाओं में क्रियाशील नैनोबॉडीज का उपयोग ।

Transport of proteins and membranes from the cell surface to the Golgi and beyond is essential for homeostasis, organelle identity and physiology. To ...

यह विधि कोशिका की सतह से अंतरकोशिकीय डिब्बों तक प्रतिगामी प्रोटीन परिवहन का विश्लेषण करने के लिए उत्पाइल्सिकन, कार्यात्मक नैनो निकायों के उत्पादन और अनुप्रयोग को सक्षम बनाती है। विशेष रूप से ट्रांस-गोलगी नेटवर्क। इस तकनीक का मुख्य लाभ सल्फास का उपयोग है। डीटीएन डिब्बे में रिपोर्टर नैनो-बॉडी कॉम्प्लेक्स आगमन का आकलन करने के लिए एक अत्यधिक विशिष्ट, विभाजित और संवेदनशील पोस्ट-ट्रांसलेशन संशोधन। जीवन सेल इमेजिंग और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए अन्य व्युत्पन्न नैनो निकायों के संयोजन में इस विधि का उपयोग रोग से संबंधित कोशिका सतह रिसेप्टर्स की एंडोसिटिक प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए भी किया जा सकता है। कार्यात्मक नैनो निकायों के हमारे प्रदर्शनों की सूची को सुसंस्कृत कोशिकाओं में प्रतिगामी परिवहन का अध्ययन करने के लिए इंजीनियर किया गया है । हालांकि, इन उपकरणों को बहुकोशिकीय जीवों में भी लागू किया जा सकता है। इस प्रक्रिया को शुरू करने के लिए, प्लेट से ब्याज के वेक्टर युक्त एक जीवाणु कॉलोनी चुनें और एंटीबायोटिक दवाओं के साथ पूरक एलबी माध्यम के 20 मिलीलीटर युक्त फ्लास्क का टीका लगाएं। ३७ पर रात भर इनक्यूबेट

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Cell Biology

Biochemistry

Unit 1

Intracellular Membrane Traffic

SCIENTISTS IN ACTION

Nitrogen Cavitation and Differential Centrifugation Allows for Monitoring the Distribution of Peripheral Membrane Proteins in Cultured Cells

नाइट्रोजन Cavitation और अवकलन केंद्रापसारक संस्कृतिपूर्ण कोशिकाओं में परिधीय झिल्ली प्रोटीन के वितरण की निगरानी के लिए अनुमति देता है

Cultured cells are useful for studying the subcellular distribution of proteins, including peripheral membrane proteins. Genetically encoded fluorescently ...

Analyses of Mitochondrial Calcium Influx in Isolated Mitochondria and Cultured Cells

अलग Mitochondria और प्रसंस्कृत कोशिकाओं में Mitochondrial कैल्शियम आमद का विश्लेषण

Ca2+ handling by mitochondria is a critical function regulating both physiological and pathophysiological processes in a broad spectrum of cells. The ...

Proofreading and DNA Repair Assay Using Single Nucleotide Extension and MALDI-TOF Mass Spectrometry Analysis

एक न्यूक्लियोटाइड विस्तार और मालदी-तोफ मास स्पेक्ट्रोमेट्री विश्लेषण का उपयोग कर ठीक करना और डीएनए मरंमत परख

The maintenance of the genome and its faithful replication is paramount for conserving genetic information. To assess high fidelity replication, we have ...

Dissipative Microgravimetry to Study the Binding Dynamics of the Phospholipid Binding Protein Annexin A2 to Solid-supported Lipid Bilayers Using a Quartz Resonator

अपव्यय Microgravimetry फॉस्फोलिपिड बाइंडिंग प्रोटीन की बाइंडिंग गतिशीलता का अध्ययन करने के लिए Annexin A2 करने के लिए ठोस-समर्थित लिपिड Bilayers एक क्वार्ट्ज प्रतिध्वनि का उपयोग

The dissipative quartz crystal microbalance technique is a simple and label-free approach to measure simultaneously the mass uptake and viscoelastic ...

Analysis of Protein Folding, Transport, and Degradation in Living Cells by Radioactive Pulse Chase

प्रोटीन तह, परिवहन, और रेडियोधर्मी पल्स चेस द्वारा जीवित कोशिकाओं में क्षरण का विश्लेषण

Radioactive pulse-chase labeling is a powerful tool for studying the conformational maturation, the transport to their functional cellular location, and ...

Quantification of Protein Interaction Network Dynamics using Multiplexed Co-Immunoprecipitation

मल्टीप्लेक्स्ड सह-प्रतिरक्षा का उपयोग कर प्रोटीन इंटरेक्शन नेटवर्क गतिशीलता का परिमाणीकरण

Dynamic protein-protein interactions control cellular behavior, from motility to DNA replication to signal transduction. However, monitoring dynamic ...

Density Gradient Ultracentrifugation for Investigating Endocytic Recycling in Mammalian Cells

स्तनधारी कोशिकाओं में एंडोसाइटिक रीसाइक्लिंग की जांच के लिए घनत्व ढाल अल्ट्रासेंट्रफ्यूगेशन

Endosomal trafficking is an essential cellular process that regulates a broad range of biological events. Proteins are internalized from the plasma ...

JUMPn: A Streamlined Application for Protein Co-Expression Clustering and Network Analysis in Proteomics

जेयूएमपीएन: प्रोटिओमिक्स में प्रोटीन सह-अभिव्यक्ति क्लस्टरिंग और नेटवर्क विश्लेषण के लिए एक सुव्यवस्थित अनुप्रयोग

With recent advances in mass spectrometry-based proteomics technologies, deep profiling of hundreds of proteomes has become increasingly feasible. ...

Routine Collection of High-Resolution cryo-EM Datasets Using 200 KV Transmission Electron Microscope

200 केवी ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप का उपयोग करके उच्च-रिज़ॉल्यूशन क्रायो-ईएम डेटासेट का नियमित संग्रह

Cryo-electron microscopy (cryo-EM) has been established as a routine method for protein structure determination during the past decade, taking an ...

Extracellular Glucose Depletion as an Indirect Measure of Glucose Uptake in Cells and Tissues Ex Vivo

Extracellular Glucose Depletion as an Indirect Measure of Glucose Uptake in Cells and Tissues Ex Vivo

कोशिकाओं और ऊतकों में ग्लूकोज अपटेक के अप्रत्यक्ष उपाय के रूप में बाह्य ग्लूकोज की कमी पूर्व विवो

The ongoing worldwide epidemic of diabetes increases the demand for the identification of environmental, nutritional, endocrine, genetic, and epigenetic ...