Name: simultaneous electrocardiography recording and invasive blood pressure measurement in rats
Uploaded: 2019-01-31T14:30:00
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Questo studio è stato sostenuto da Taiwan Ministero della scienza e tecnologia concede più 104-2314-B-037-080-MY3 e più 107-2314-B-037-110 di HCL e istituti nazionali di ricerca di salute di Taiwan concedere vi-EX107-10724SC.

Tutti gli esperimenti sugli animali descritti sono stati approvati dal istituzionale Animal Care e uso Comitato di Kaohsiung Medical University.
1. animal Care
<ol><li>Per evitare l'incannulamento difficile a causa di piccole dimensioni arteriosa, utilizzare ratti con oltre 200 g di peso corporeo.</li>
	<li>Rimuovere chow dalla gabbia e veloce ratti durante la notte.</li>
	<li>Offrono acqua ad libidum a meno che non vi è una speciale progettazione sperimentale.</li>
</ol><p class="jove_titl...

<ol>
	<li>Shiou, Y. -. L., Huang, I. C., Lin, H. -. T., Lee, H. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+fat+diet+aggravates+atrial+and+ventricular+remodeling+of+hypertensive+heart+disease+in+aging+rats.">High fat diet aggravates atrial and ventricular remodeling of hypertensive heart disease in aging rats.</a> Journal of the Formosan Medical Association. , (2017).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+invasive+blood+pressure+in+rats.">Measurement of invasive blood pressure in rats.</a> Journal of Pharmacology, Pharmacotherapeutics. 3 (2), 172-177 (2012).</li><li>Fink, G. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+Tail-Cuff+Plethysmography+Provide+a+Reliable+Estimate+of+Central+Blood+Pressure+in+Mice?.">Does Tail-Cuff Plethysmography Provide a Reliable Estimate of Central Blood Pressure in Mice?.</a> Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), e006554 (2017).</li><li>Wilde, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tail-Cuff+Technique+and+Its+Influence+on+Central+Blood+Pressure+in+the+Mouse.">Tail-Cuff Technique and Its Influence on Central Blood Pressure in the Mouse.</a> Journal of the American Heart Association: Cardiovascular and Cerebrovascular Disease. 6 (6), (2017).</li><li>Braga, V. A., Prabhakar, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Refinement+of+Telemetry+for+Measuring+Blood+Pressure+in+Conscious+Rats.">Refinement of Telemetry for Measuring Blood Pressure in Conscious Rats.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science : JAALAS. 48 (3), 268-271 (2009).</li><li>Kaese, S., Verheule, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+electrophysiology+in+mice:+a+matter+of+size.">Cardiac electrophysiology in mice: a matter of size.</a> Frontiers in Physiology. 3 (345), (2012).</li><li>Okamoto, K., Aoki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+strain+of+spontaneously+hypertensive+rats.">Development of a strain of spontaneously hypertensive rats.</a> Japanese Circulation Journal. 27, 282-293 (1963).</li><li>Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+and+indirect+methods+used+to+study+arterial+blood+pressure.">Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 44 (2), 361-373 (2000).</li><li>Alam, M. A., Parks, C., Mancarella, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+Blood+Pressure+Measurement+in+Freely+Moving+Mice+Using+Telemetry.">Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e53991 (2016).</li><li>Irvine, R. J., White, J., Chan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+restraint+on+blood+pressure+in+the+rat.">The influence of restraint on blood pressure in the rat.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 38 (3), 157-162 (1997).</li><li>Nvd Vosse, F., Stergiopulos, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulse+Wave+Propagation+in+the+Arterial+Tree.">Pulse Wave Propagation in the Arterial Tree.</a> Annual Review of Fluid Mechanics. 43 (1), 467-499 (2011).</li><li>Cosson, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stiffness+and+pulse+pressure+amplification+in+Wistar-Kyoto+and+spontaneously+hypertensive+rats.">Aortic stiffness and pulse pressure amplification in Wistar-Kyoto and spontaneously hypertensive rats.</a> The American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 292 (5), H2506-H2512 (2007).</li></ol>

Incannulamento arterioso invasivo permette di misura ad alta precisione di BP. Può essere fatto con un tubo di PE senza richiedere un catetere costoso. Misurazione di BP invasiva può essere eseguita anche contemporaneamente con una registrazione di ECG di superficie.
La curva di apprendimento più importante per questo metodo è l'abilità sperimentale necessaria per incannulare piccoli vasi sanguigni. In mani esperte, il tasso di successo per l'incannulamento dell'arteria femorale può ragg...

Pressione sanguigna (BP) ed elettrocardiografia (ECG) sono parametri fondamentali per la medicina e la fisiologia del sistema cardiovascolare. Modelli animali sperimentali sono stati ampiamente applicati nella ricerca biomedica per varie malattie cardiovascolari quali ipertesi insufficienza cardiaca1 e procedure per la registrazione di ECG e misurazione della PA può essere eseguita in ratti sperimentali.
Ci sono tre metodi per la misurazione della PA in ratti: inserimento di una canula intra-arteriosa (invasiva)2, coda polsino pletismografia (non invasiva)3e radio telemetria (invasiva). L'affidabilità della misurazione della PA da pletismografia del polsino di coda può essere influenzata da animale manipolazione durante la registrazione. Ad esempio, il bracciale di coda sottovaluta le modifiche di BP di nucleo che si verificano simultaneamente durante la fasi per la moderazione e misura4. Telemetria radio è considerata la migliore tecnica di "gold standard" per monitoraggio BP e frequenza cardiaca in sveglio e muoversi liberamente gli animali5. Tuttavia, poiché radio telemetria hardware e software sono costose, inserimento di una canula intra-arteriosa è anche ampiamente usato come alternativa economica.
Inserimento di una canula intra-arteriosa richiede una notevole abilità microsurgical ma produce le forme d'onda reale di pressione arteriosa. BP può essere registrato tramite un catetere di soluzione salina inserito nell'arteria brachiale o radiale, femorale. Questo metodo di misurazione diretta di BP invasiva richiede preparazione animale pre-chirurgica, anestesia, immobilizzazione degli animali da laboratorio, abilità chirurgica nella dissezione del tessuto e l'incannulamento arterioso e calibrazione corretta prima di acquisire la misura .
ECG di superficie del roditore è simile all'ECG umano. Un ratto ECG ha sequenze di onde P, complessi QRS, onde T e QT intervalli6. L'onda P, intervallo PR, complesso QRS e T onde riflettono depolarizzazione atriale, conduzione di impulso da atriale per il nodo di avoirdupois, depolarizzazione ventricolare e ripolarizzazione, rispettivamente. L'intervallo QT è definito come il periodo dalla data di inizio dell'onda Q al punto finale dell'onda T dove torna per la previsione iso-elettrico1.
L'ECG indica il cardiaco sistole e diastole fasi; Pertanto, la registrazione simultanea di ECG di superficie correla con la misurazione invasiva di BP. Utilizzando una combinazione di metodologie, è possibile delucidare cambiamenti patofisiologici in un modello di malattia o gli effetti farmacologici di un farmaco o terapia in medicina cardiovascolare.
Un ceppo di ratto (SHR) iperteso spontaneo era stato ottenuto da consanguineità dei ratti Wistar con alta BP in Giappone. La BP sale da 5 a 10 settimane di età e diventa fermo da 30 a 35 settimane di età7. Ratti Wistar-Kyoto (WKY) hanno BP sistolico circa 130 mmHg7 e sono comunemente usati come controllo normo-tensive. Abbiamo utilizzato SHR e WKY per dimostrare il risultato della registrazione di BP ed ECG di inserimento di una canula intraarterial.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1101px;" width="1102">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Polyethylene tube</td>
			<td style="width:212px;">BECTON DICKINSON</td>
			<td style="width:131px;">427401</td>
			<td style="width:544px;">internal diameter of 0.5 mm, outer diameter of 0.9 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">26G x 1/2&#34;&#34; needle</td>
			<td style="width:212px;">TERUMO</td>
			<td style="width:131px;">160426D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Adson Forceps</td>
			<td style="width:212px;">TOP Line</td>
			<td>12-540</td>
			<td style="width:544px;">12 cm (4.75&#34;) Long, Straight, 1 x 2 Teeth</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Bulldog vascular clamp</td>
			<td style="width:212px;">Teleflex</td>
			<td style="width:131px;">357581</td>
			<td>8 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Computer&#160;</td>
			<td style="width:212px;">AUSUS</td>
			<td style="width:131px;">X453M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Exernal analog signal recording device</td>
			<td style="width:212px;">iWorx</td>
			<td style="width:131px;">T5141538</td>
			<td>This allows the recording of up to three channels of ECG, EMG or EEG as well as GSR (skin conductance) from a single iWire input on the recording Module.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Graefe Forceps</td>
			<td>AESCULAP Surgical Instruments</td>
			<td>BD312R</td>
			<td>MICRO DRESSING FORCEPS, CURVED, SERRATED, 105 mm, 4 1/8&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Mecury sphygmomanometer</td>
			<td style="width:212px;">Spirit</td>
			<td style="width:131px;">CK-101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Pressure transducer</td>
			<td style="width:212px;">iWorx</td>
			<td style="width:131px;">IworxBP100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Semken Forceps</td>
			<td>MEDE TECHNIK</td>
			<td>10-104</td>
			<td>100 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Software</td>
			<td style="width:212px;">LabScribe3</td>
			<td style="width:131px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Surgical scissors</td>
			<td>HEBU</td>
			<td style="width:131px;">1714</td>
			<td>14.5 cm long</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Syringe (1 mL)</td>
			<td style="width:212px;">TERUMO</td>
			<td style="width:131px;">160426D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Three-way stopcocks</td>
			<td style="width:212px;">Cole-Parmer</td>
			<td>EW-30600-23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Tipped forceps</td>
			<td style="width:212px;">World Precision Instruments</td>
			<td style="width:131px;">504506</td>
			<td>11 cm long, 0.1x0.06 mm Tips</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Vannas Scissors</td>
			<td style="width:212px;">World Precision Instruments</td>
			<td>500086</td>
			<td>8.5 cm long, Straight, 0.025 x 0.015 mm Tips, 7mm super fine Blades</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simultaneous electrocardiography recording and invasive blood pressure measurement in rats

Per studi relazionati alla fisiologia cardiovascolare o patofisiologia, la pressione sanguigna (BP) ed elettrocardiografia sono parametri fondamentali d'osservazioni. Ricerca concentrandosi su modelli di malattia cardiovascolare, potenziali bersagli terapeutici cardiovascolari o agenti farmaceutici richiede la valutazione dei cambiamenti di ritmo arteriose sistemiche di pressione e cuore. In situazioni dove i sistemi di telemetria radio non sono disponibili o accessibili, la tecnica di inserimento di una canula dell'arteria femorale è un modo alternativo per ottenere registrazioni di forma d'onda di pressione intra-arteriosa e sistemica BP misurazioni. Questa tecnica è economica e può essere eseguita con attrezzatura standard in strutture per animali. Tuttavia, la registrazione invasivo della pressione arteriosa richiede inserimento di una canula di piccole arterie, che può essere un'abilità chirurgica. Qui, presentiamo protocolli passo-passo per arteria femorale procedure di inserimento di una canula. Le procedure chiave includono la calibrazione del sistema di acquisizione dati, inserimento di una canula dell'arteria femorale e la dissezione del tessuto e configurare il sistema di inserimento di una canula arterioso per la registrazione di pressione. Sono incluse anche le procedure di registrazione di elettrocardiografia di superficie. Siamo presenti anche esempi di registrazioni di BP da ratti normotesi che ipertesi. Questo protocollo permette le registrazioni dirette affidabile di BP sistemico con elettrocardiografia simultanea.

Abbiamo acquistato SHR e ratti normotesi di Wistar-Kyoto WKY del National Laboratory Animal Center (Taipei, Taiwan). Tutti gli animali sono stati alloggiati in una struttura a temperatura controllata (20−22 ° C) con libero accesso all'acqua e cibo standard su un ciclo luce/buio di 12 h.
Abbiamo usato sei 47-settimana-vecchi ratti e sono stati pesati prima della misurazione BP ed ECG. I rappresentante tracciati da registrazion...

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Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

Qui, descriviamo una configurazione per la registrazione simultanea di elettrocardiografia e pressione sanguigna intra-arteriosa (BP) in ratti sperimentali, che possono essere fatto con attrezzatura standard in strutture per animali e possono essere applicati a fisiologiche o farmacologiche studi per studiare i meccanismi patogeni o terapeutici nella medicina cardiovascolare.

Elettrocardiografia simultanea registrazione e invasiva sangue pressione misura in ratti

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

Studi incentrati su modelli di malattie cardiovascolari, obiettivi terapeutici cardiovascolari o agenti farmaceutici richiedono la valutazione della pressione arteriosa sistemica e dei cambiamenti del ritmo cardiaco. La cannula dell'arteria femorale è un metodo economico per registrare forme d'onda a pressione intraarteriale che possono essere eseguite con apparecchiature standard in una struttura animale. A dimostrare la procedura sarà Hsin-Ting Lin, un tecnico del mio laboratorio.Prima di iniziare l'esperimento, posizionare il ratto anestetizzato in posizione supina su una tavola chirurgica e confermare la mancanza di risposta al pizzico. Fissare le gambe con elastici per immobilizzare il corpo e impostare la pressione sanguigna e gli strumenti elettrocardiogramma per la registrazione, tra cui un'unità di ingresso analogica per acquisire i segnali, un trasduttore di pressione con un hub compatibile, tre cavi elettrocardiogrammi bipolari con punta ad ago e un computer con software adatto. Prima dell'inizio della registrazione della pressione sanguigna, rimuovere il polsino a pressione da uno sphygmomanometro standard e collegare il fermagli a tre rapporti sul tubo di gonfiaggio al trasduttore di pressione del sistema di acquisizione dati.Avvitare la valvola di rilascio dell'aria in senso orario, tenendo d'occhio il misuratore durante il pompaggio della lampadina di gonfiaggio. Quando il misuratore mostra 100 millimetri di mercurio, aprire il fermacock a tre per collegarsi al trasduttore di pressione. Il fattore di conversione per il calcolo della pressione sanguigna verrà determinato automaticamente.Per rilasciare la pressione, avvitare la valvola di rilascio dell'aria in senso antiorario fino a quando la pressione dello sphygmomanometer non è tornata a zero. Ripetere la calibrazione con 200 millimetri di pressione del mercurio, quindi staccare il trasduttore di pressione dallo sfgmomanometro al mercurio. Collegare il trasduttore di pressione al punto di arresto a tre strade del catetere PE e controllare le giunzioni di connessione del fermagore a tre strade.Per l'identificazione del punto di riferimento della superficie, individuare la piega inguinale alla giunzione tra l'addome e la coscia e sollevare l'intero strato di pelle al centro della piega. Utilizzare le forbici per tagliare la pelle sollevata con un orientamento approssimativamente parallelo alla coscia ipsilaterale. Il nervo femorale e i vasi si trovano sotto il tessuto sottocutaneo esposto.Utilizzando forcelle a punta fine, sezionare il tessuto strato per strato, fermando la dissezione a livello dei vasi femorali. Cancellare con cura il tessuto molle lungo il nervo femorale e i vasi per ottenere una buona vista del nervo simile a una fibra. La vena è viola scuro e l'arteria è pulsatile.Quando la dissezione tissutale raggiunge i vasi femorali, cambiare e andare a cambiare le forcelle per prevenire i vasi danneggiati. Quindi utilizzare le forcep con punte angolate per estendere la lunghezza esposta dell'arteria e della vena femorale. Per cannucolare l'arteria femorale, utilizzare le pinze per separare la vena femorale dall'arteria e applicare un morsetto bulldog all'arteria femorale il più cranicamente possibile.Fai una cravatta sciolta delle due corde di seta, una appena sotto il morsetto bulldog e l'altra al terminale caudale dell'arteria femorale esposta. Utilizzare microscissori per fare un piccolo foro sul lato ventrale dell'arteria femorale e inserire la punta di un catetere in polietilene o PE attraverso il piccolo foro. Avanzare il catetere cranialmente.Uno scarico posteriore di sangue nel catetere dopo aver rimosso il morsetto indica che la punta del catetere ha raggiunto il lume dell'arteria femorale. Stringere la seta superiore per fissare la posizione del catetere e stringere la seta inferiore per evitare sanguinamento dal lato caudale dell'arteria femorale. Per confermare il successo della cannula, utilizzare una siringa da un millilitro per iniettare da 0,1 a 0,2 millilitri di salina eparinizzata nell'arteria femorale.Quindi controlla di trasudare intorno al sito di cannula e copri il sito con un batuffolo di cotone bagnato. Per eseguire una registrazione della pressione sanguigna, collegare il catetere PE e il fermagante a tre via al fermago del trasduttore di pressione e assicurarsi che non ci siano bolle d'aria nel sistema di cannulazione. Quindi controlla gli incroci di collegamento del fermafiai a tre strade.Quando l'apparecchiatura è pronta, avviare il sistema di acquisizione dati con una frequenza di campionamento di 1000 hertz. Verranno visualizzate onde di pressione arteriosa. Lasciare che l'intero set-up si stabilizzi per almeno tre o cinque minuti, controllando periodicamente il sito di cannulazione per confermare che non c'è sanguinamento.Per eseguire un elettrocardiogramma di superficie, controllare prima i tre cavi dell'ECG bipolare per assicurarsi che gli elettrodi di platino positivi, negativi e di riferimento siano intatti e inserire i cavi per via sottocutanea alla parte anteriore sinistra, anteriore destra e gamba posteriore destra. Quindi collegare i mozzi degli elettrodi a un amplificatore ECG personalizzato con una frequenza di campionamento di 1000 hertz e una frequenza di filtro da tre a 500 hertz. Le registrazioni simultanee della pressione sanguigna e dell'ECG in sei ratti normotensivi e ipertesi di 47 settimane hanno rivelato una pressione sanguigna sistolica e media significativamente più elevata negli animali spontaneamente ipertesi rispetto ai ratti normali.I parametri di onda P, intervalli PR, larghezza QRS e intervallo QT misurati dalle registrazioni ECG non hanno dimostrato alcuna differenza tra i due gruppi. È possibile eseguire la calibrazione del sistema di pressione e impostare il trasduttore di pressione e il sistema di acquisizione dati prima di anestetizzare gli animali. I dati acquisiti sulla forma d'onda a pressione arteriosa grezza e sull'elettrocardiogramma possono essere analizzati sul software.La radiotelemetria è considerata una tecnica gold standard per il monitoraggio della BP e della frequenza cardiaca, ma la tecnica è costosa. La cannula intraarteriale con ECG simultaneo è un'alternativa economica. L'anestesia per inalazione di isoflurane è facile da eseguire, ma può essere pericolosa se si verifica una perdita sostanziale.Pertanto, controllare sempre l'attrezzatura e i tubi prima dell'uso.

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