Name: a murine model of dengue virus-induced acute viral encephalitis-like disease
Uploaded: 2019-04-28T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease at JoVE.com

מחקר זה היה נתמך על ידי מענקים ממשרד המדע והטכנולוגיה (MOST107-2321-B-038-001) ואת מימון הפנים הפנימי 106TMU-CIT-01-2, טאיפיי, טייוואן.

פרוטוקולים ניסיוניים של מחקר בעלי חיים אושרו על ידי טיפול בעלי חיים מוסדיים וועדת המשתמש של המרכז הרפואי הביטחון הלאומי (מספר IACUC: 16-261), על פי ההנחיות שנקבעו על ידי משרד המדע והטכנולוגיה, טייוואן.
1. הליך זיהום
<ol><li>להכין DENV2 לא מותאם (זן PL046) מניות9 (התקבל במקור מן ?...

<ol>
	<li>Guzman, M. G., Gubler, D. J., Izquierdo, A., Martinez, E., Halstead, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+infection.">Dengue infection.</a> Nature Reviews Disease Primers. 2, 16055 (2016).</li><li>Katzelnick, L. C., Coloma, J., Harris, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue:+knowledge+gaps,+unmet+needs,+and+research+priorities.">Dengue: knowledge gaps, unmet needs, and research priorities.</a> Lancet Infectious Diseases. 17 (3), e88-e100 (2017).</li><li>Carod-Artal, F. J., Wichmann, O., Farrar, J., Gascon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurological+complications+of+dengue+virus+infection.">Neurological complications of dengue virus infection.</a> Lancet Neurology. 12 (9), 906-919 (2013).</li><li>Geneva: World Health Organization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dengue: Guidelines for Diagnosis, Treatment, Prevention and Control: New Edition. , (2009).</li><li>Amaral, D. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebral+infection+with+dengue-3+virus+induces+meningoencephalitis+and+behavioral+changes+that+precede+lethality+in+mice.">Intracerebral infection with dengue-3 virus induces meningoencephalitis and behavioral changes that precede lethality in mice.</a> Journal of Neuroinflammation. 8, 23 (2011).</li><li>de Miranda, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue-3+encephalitis+promotes+anxiety-like+behavior+in+mice.">Dengue-3 encephalitis promotes anxiety-like behavior in mice.</a> Behavioural Brain Research. 230 (1), 237-242 (2012).</li><li>Velandia-Romero, M. L., Acosta-Losada, O., Castellanos, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+infection+by+a+neuroinvasive+neurovirulent+dengue+virus.">In vivo infection by a neuroinvasive neurovirulent dengue virus.</a> Journal of Neurovirology. 18 (5), 374-387 (2012).</li><li>Despres, P., Frenkiel, M. P., Ceccaldi, P. E., Duarte Dos Santos, C., Deubel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Apoptosis+in+the+mouse+central+nervous+system+in+response+to+infection+with+mouse-neurovirulent+dengue+viruses.">Apoptosis in the mouse central nervous system in response to infection with mouse-neurovirulent dengue viruses.</a> Journal of Virology. 72 (1), 823-829 (1998).</li><li>Tsai, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+retard+dengue+virus-induced+acute+viral+encephalitis.">Microglia retard dengue virus-induced acute viral encephalitis.</a> Scientific Reports. 6, 27670 (2016).</li><li>Cheng, Y. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+Nrf2+by+the+dengue+virus+causes+an+increase+in+CLEC5A,+which+enhances+TNF-alpha+production+by+mononuclear+phagocytes.">Activation of Nrf2 by the dengue virus causes an increase in CLEC5A, which enhances TNF-alpha production by mononuclear phagocytes.</a> Scientific Reports. 6, 32000 (2016).</li><li>Ho, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+dengue+virus+infection+and+viral+cytotoxicity+in+neuronal+cells+in+vitro+and+in+vivo+by+targeting+endocytic+pathways.">Blockade of dengue virus infection and viral cytotoxicity in neuronal cells in vitro and in vivo by targeting endocytic pathways.</a> Scientific Reports. 7 (1), 6910 (2017).</li><li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-TNF-alpha+restricts+dengue+virus-induced+neuropathy.">Anti-TNF-alpha restricts dengue virus-induced neuropathy.</a> Journal of Leukocyte Biology. 104 (5), 961-968 (2018).</li><li>Kao, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+antiparasitic+drug+niclosamide+inhibits+dengue+virus+infection+by+interfering+with+endosomal+acidification+independent+of+mTOR.">The antiparasitic drug niclosamide inhibits dengue virus infection by interfering with endosomal acidification independent of mTOR.</a> PLoS Neglected Tropical Diseases. 12 (8), e0006715 (2018).</li><li>Tsai, T. T., Chen, C. L., Tsai, C. C., Lin, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+heat+shock+factor+1+as+an+antiviral+strategy+against+dengue+virus+replication+in+vitro+and+in+vivo.">Targeting heat shock factor 1 as an antiviral strategy against dengue virus replication in vitro and in vivo.</a> Antiviral Research. 145, 44-53 (2017).</li><li>Jhan, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue+virus+infection+increases+microglial+cell+migration.">Dengue virus infection increases microglial cell migration.</a> Scientific Reports. 7 (1), 91 (2017).</li><li>Benskey, M. J., Manfredsson, F. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraparenchymal+Stereotaxic+Delivery+of+rAAV+and+Special+Considerations+in+Vector+Handling.">Intraparenchymal Stereotaxic Delivery of rAAV and Special Considerations in Vector Handling.</a> Methods in Molecular Biology. , 199-215 (2016).</li><li>Fong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mild+encephalitis/encephalopathy+with+reversible+splenial+lesion+(MERS)+due+to+dengue+virus.">Mild encephalitis/encephalopathy with reversible splenial lesion (MERS) due to dengue virus.</a> Journal of Clinical Neuroscience. 36, 73-75 (2017).</li><li>Sarathy, V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lethal+murine+infection+model+for+dengue+virus+3+in+AG129+mice+deficient+in+type+I+and+II+interferon+receptors+leads+to+systemic+disease.">A lethal murine infection model for dengue virus 3 in AG129 mice deficient in type I and II interferon receptors leads to systemic disease.</a> Journal of Virology. 89 (2), 1254-1266 (2015).</li><li>Schul, W., Liu, W., Xu, H. Y., Flamand, M., Vasudevan, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dengue+fever+viremia+model+in+mice+shows+reduction+in+viral+replication+and+suppression+of+the+inflammatory+response+after+treatment+with+antiviral+drugs.">A dengue fever viremia model in mice shows reduction in viral replication and suppression of the inflammatory response after treatment with antiviral drugs.</a> The Journal of Infectious Diseases. 195 (5), 665-674 (2007).</li><li>Tyler, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+Viral+Encephalitis.">Acute Viral Encephalitis.</a> New England Journal of Medicine. 379 (6), 557-566 (2018).</li><li>Yauch, L. E., Shresta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+dengue+virus+infection+and+disease.">Mouse models of dengue virus infection and disease.</a> Antiviral Research. 80 (2), 87-93 (2008).</li><li>Assir, M. Z., Jawa, A., Ahmed, H. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expanded+dengue+syndrome:+subacute+thyroiditis+and+intracerebral+hemorrhage.">Expanded dengue syndrome: subacute thyroiditis and intracerebral hemorrhage.</a> BMC Infectious Diseases. 12, 240 (2012).</li><li>Kumar, R., Prakash, O., Sharma, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracranial+hemorrhage+in+dengue+fever:+management+and+outcome:+a+series+of+5+cases+and+review+of+literature.">Intracranial hemorrhage in dengue fever: management and outcome: a series of 5 cases and review of literature.</a> Surgical Neurology. 72 (4), 429-433 (2009).</li><li>Simanjuntak, Y., Liang, J. J., Lee, Y. L., Lin, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repurposing+of+prochlorperazine+for+use+against+dengue+virus+infection.">Repurposing of prochlorperazine for use against dengue virus infection.</a> Journal of Infectious Diseases. 211 (3), 394-404 (2015).</li><li>Rocha, B. A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dengue-specific+serotype+related+to+clinical+severity+during+the+2012/2013+epidemic+in+centre+of+Brazil.">Dengue-specific serotype related to clinical severity during the 2012/2013 epidemic in centre of Brazil.</a> Infectious Disease Poverty. 6 (1), 116 (2017).</li></ol>

הזיהום denv זוהה ב-cn של מטופלים חמורים דנגה3,17, מציע את האפשרות של ביטוי של דלקת קרום המוח נגיפי חריפה התרחשה במהלך פתוגנזה דנגה. כאן, אנו מדווחים על מודל vivo murine של זיהום DENV לחקר מעורבות של התפקוד העצמי של ה-CN דנגה, במיוחד עם דגש על DENV המושרה דלקת קרום המוח ויראלי ...

DENV, וירוס המועברות על ידי משפחת פליורידיי , מכיל גנום ה-RNA הגיוני מקודד שלושה חלבונים מבניים נגיפי (capsid, טרום קרום, מעטפה) ו שבעה חלבונים לא מבניים ויראלי (NS1, NS2A, NS2B, NS3, NS4A, NS4B , ו-NS5). ארבעת סוגי הסרווים של DENV (DENV1-4), אשר להדביק כ 390,000,000 אנשים מדי שנה, לגרום נטל גלובלי אף על פי ממשלות ביים מאמצים משמעותיים לקראת וקטור יתושים ושליטה מחלות1. כיום, חיסונים להגנה ותרופות אנטי-ויראליות טיפוליות בשלבי פיתוח ודורשות אימות לטווח ארוך יותר2. בתחום הקליני, למרות חולה דנגה עם זיהום של ה-CN הוא נדיר, זה צריך להיות בחקר נוסף כדי להבין את הגיוון של פיתוח מחלת דנגה3. יש צורך בחקירה ובאימות נוספים; בעיקר, ארגון הבריאות העולמי (אשר) כלל את המעורבות של ליקוי המוח, כגון ליקוי קוגניטיבי, עוויתות, אנצפלופתיה, ודלקת קרום המוח, בסיווג חמור דנגה3,4. בניית מודלים בעלי חיים של זיהום DENV היא הכרחית לחקר נוירופתוגנזה של זיהום DENV.
ליצירת זיהום ה-CN של DENV, מספר מחקרים ביצעו מסלולים שונים של זיהום DENV, כולל (1) גרם חיסונים של C57BL/6 עכברים שקיבלו 4 x 103 פלאק-להרכיב יחידות (pfu) של DENV3 המותאם ל5, 6, (2) הצפק פנימי של עכברים balb/c שקיבלו 7 x 104 pfu של מבחנה נוירומותאמת DENV47, (3) גרם החיסון של עכברים שוויצריים שקיבלו 1 x 105 pfu של vivo neuroadapted DENV18, ו (4) גרם ו-הצפק משותפת של עכברי מוצצים ICR שהתקבלו 1 x 106 pfu של לא מותאם DENV29. על פי ממצאי מחקרים אלה5,6,7,8,9, הזיהום denv בעכברים התוצאה שכפול נגיפי במוח, המוביל נגיפי חריפה תסמונות של דלקת קרום המוח, שינויים התנהגותיים מלווים בשיתוק איברים וחוסר יציבות, מערכת העצבים העצבית והדלקת, דליפת פלזמה כללית ומקומית באמצעות מחסום הדם-מוחי (BBB) וללא השפעה. כל התוצאות ממחקרים אלה5,6,7,8,9 הראו את היכולת של denv להדביק את המוח ואת אינדוקציה של דלקת קרום המוח הנגיפי חריפה כמו מחלה לאחר הידבקות.
בהתבסס על הממצאים הנוכחיים שלנו9,10,11,12,13,14,15, יצרנו מודל murine של זיהום denv כמו ב vivo פלטפורמה כדי לבחון את היעילות הטיפולית של סוכני ממוקדות/גורמים נגד שכפול נגיפי, כמו גם רעילות נוירו. כאן, אנו מדווחים על פרוטוקול מנוצל כדי ליצור העכבר icr מוסמך החוצה כדי ללמוד זיהום של הפונקציה וכלה לפקח על פיתוח נזקי עם הרבה הקצבאות שנגרמו על ידי denv. התוצאות מציגות את ההתקדמות המשמעותית של המחלה כמו דלקת קרום המוח בעכברים נגועים DENV באופן תלוי זמן.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:745px;" width="746">
	<tbody>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">Roswell Park Memorial Institute 1640 medium (RPMI)</td>
			<td style="width:211px;">Gibco</td>
			<td style="width:119px;">11875-085</td>
			<td style="width:200px;">Diluting virus</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">0.3-mL Insulin Syringe&#160;</td>
			<td style="width:211px;">BD Ultra-Fine&#173;II</td>
			<td style="width:119px;">328838</td>
			<td style="width:200px;">Intracerebral and intraperitoneal injection</td>
		</tr>
		<tr height="46">
			<td height="46" style="height:47px;width:216px;">Microbalance</td>
			<td style="width:211px;">METTLER TOLEDO&#39;s LabX</td>
			<td style="width:119px;">AL104</td>
			<td style="width:200px;">Weight mouse</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Non-adapted DENV2 (strain PL046)</td>
			<td style="width:211px;">The Centers for Disease Control of Taiwan</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:200px;">Infect mouse</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Institute of Cancer Research (ICR) suckling mouse</td>
			<td style="width:211px;">BioLASCO Taiwan Co., Ltd</td>
			<td style="width:119px;">-</td>
			<td style="width:200px;">Our murine model</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a murine model of dengue virus-induced acute viral encephalitis-like disease

וירוס דנגה (DENV), וירוס המועבר על-ידי היתושים המועברים על ידי יתוש, עלול לגרום למחלה חמורה הידועה בשם קדחת דנגה מדמם, אשר מאופיין על ידי סיבוכים קטלניים עקב דליפת פלזמה, מיימת, היתוך, מצוקה נשימתית, . דימום חמור וליקוי איברים כמה מקרים של זיהום DENV להציג ביטויים נוירולוגיים; עם זאת, מחקרים לא חקרו באופן נוירופתוגנזה המושרה של DENV יותר. במחקר זה, אנו מציגים פרוטוקול להשתמש חיסוני מוסמך ICR (המכון לחקר הסרטן) העכבר לחקירת אינדוקציה של מערכת העצבים המרכזית (CN) זיהום עם DENV, ואחריו את ההתקדמות של דלקת קרום המוח נגיפי חריפה כמו מחלה.

חמור קדחת דנגה הקשורים סיבוכים נוירולוגיים דווחו בחולים עבור פתוגנזה דנגה4. למרות המקרים האלה הם נדירים במרפאה, יצירת מודל מורלא מוסמך של זיהום DENV ניתן להשתמש לא רק לימוד immunopathogenesis אלא גם לחקירת זיהום של הפונקציה, נוירודלקת, נוירורעילות, ו ויראלי חריפה מחלה ?...

Watch this Scientific Journal Video about A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease at JoVE.com

A Murine Model of Dengue Virus-induced Acute Viral Encephalitis-like Disease

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ליצירת ICR מוסמך (המכון לחקר הסרטן) מודל murine של זיהום מערכת העצבים המרכזית כדי להציג את ההתפתחות של נוירופתיה. ניטור ויראלי חריפה הפרעות נצאליטיות על ידי עשרות מחלה זהה יכול להתבצע על מראה דנגי וירוס המושרה נוירופתיה ב vivo.

מודל Murine של וירוס דנגה-הנגרמת חריפה דלקת קרום המוח-כמו מחלה

Dengue virus (DENV), an arthropod-borne virus transmitted by mosquitoes, may cause the severe disease known as dengue hemorrhagic fever, which is ...

פרוטוקול זה של מודל מחלה אתה רואה זיהום וירוס דנגי במוח להפוך פלטפורמה in vivo להקרנת וקטורים ויראליים מארחים הקשורים נוירופתוגנזה. שלא כמו מודלים קודמים, המודלים שלנו משתמשים בכלים של הזיהום עם טיטר ויראלי נמוך, כדי להדביק את המכון immunocompetent לחקר הסרטן יונק עכברים עבור אינדוקציה של הולדת מחלה דמוית אנצפליטית. הדגמת ההליך תהיה לינג-ג'ינג שן, מועמד לדוקטורט מהמעבדה שלי.לפני תחילת הליך ההדבקה, לדלל וירוס דנגי לא מותאם שני מלאי, כדי אחד פעמים 10 כדי לוח החמישי להרכיב יחידות לכל 40 microliters של ריכוז בינוני RPMI 1640. לאחר מכן, לטעון מזרק אחד 0.3 מיליליטר מצויד מחט 30 מד עם 10 microliters של וירוס מדולל. ומזרק אחד של 0.3 מיליליטר המצויד במחט 30 מד, עם 30 מיקרוליטרים של וירוס לכל בעל חיים.למסירה בין-מערכתית של הנגיף, לחצו על הנביאה שבין האגודל לאצבע המורה כדי לרסן בעדינות עכבר בן שבעה ימים של המכון לחקר הסרטן במצב נוטה ולהזריק את נפח ה-10 מיקרוליטר של הנגיף המדולל לאזור למדה, בצומת התפר הסגיטלי והלדואידי. לאחר הזרקת intercerebral, להשתמש באגודל ובאצבע המורה להחזיק את העכבר במצב supine, בעדינות תוך ניתוחית, להזריק את נפח 30 microliter של וירוס מדולל, לתוך הבטן מורין. לקבלת ניקוד של התקדמות המחלה, להקצות ציון של אפס עד חמש לכל עכבר מחוסן מדי יום, על פי הציון של מחלות דלקת המוח נגיפית חריפה, ולתכנן את הציונים עבור כל יום כדמות מבוססת עקומה, באמצעות פלוס הממוצע מינוס סטיית התקן של ציוני המבחן היומי בכל קבוצה.בהשוואה לשינויים במשקל הגוף שנמדדו בעכברים מחוסנים מדומים ובינוניים בלבד, בעלי חיים מחוסנים של נגיף דנגי מפגינים ירידה במשקל הגוף בכל נקודת זמן במהלך הניסוי. בנוסף, בעלי חיים נגועים בנגיף דנגי מדגימים עלייה משמעותית בתותבות הגב של תחושת הבטן, התקפים לימביים, חולשה לימבית, שיתוק ומוות בהשוואה לתסמינים המוצגים על ידי בעלי חיים מחוסנים מדומים. ואכן, עכברים נגועים דנגי להפגין ירידה תלוית זמן בשיעורי ההישרדות כי הוא לא נצפה בבעלי חיים מחוסנים מדומה, המאשר את הקמתו של מודל זיהומיות של וירוס דנגי בתוך מערכת העצבים המרכזית המדגים את ההתקדמות של מחלות דלקת המוח נגיפית חריפה כמו בעכברים.לנקב את האתר הלא נכון עלול לגרום חסימת מחט על ידי הציון ואת הצפה של פתרון הנגיף מחוץ לראש, וכתוצאה מכך זריקה נכשלה זיהום נכשל. בעקבות ההליך, דגימות מוח ניתן לקצור עבור נזק פתולוגי, חדירת תאים חיסוניים, וניתוח שכפול ויראלי על ידי המטוקסילין ו אאוסין הכתמת זרימת ציטומטריה, ו assay היווצרות פלאק, בהתאמה. מודל המורין החיסוני שלנו, מספק פלטפורמה לחקר המנגנונים הפתוגניים של הידבקות בנגיף דנגי, לפיתוח חיסונים נגד וירוס דנגי, או תרופות נגד וירוסים דנגי.וירוס דנגי הוא פתוגן ברמה ביו-בטיחותית 2, וככזה, יש להשלים את כל הניסויים בנגיף זה במעבדה מוסמכת בתחום הביו-בטיחות של בעלי חיים.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

Induction of Graft-versus-host Disease and In Vivo T Cell Monitoring Using an MHC-matched Murine Model

אינדוקציה של מחלת שתל נגד מארח ו<em&gt; In Vivo</em&gt; ניטור תא T תוך שימוש במודל Murine MHC התאמה

Graft-versus-host disease (GVHD) is the limiting barrier to the broad use of bone marrow transplant as a curative therapy for a variety of hematological ...

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

Establishing a Liquid-covered Culture of Polarized Human Airway Epithelial Calu-3 Cells to Study Host Cell Response to Respiratory Pathogens In vitro

הקמת תרבות הנוזלית מכוסית של Airway האנושי המקוטב-3 Calu תאי אפיתל ללמוד תגובת תא מארחת לפתוגנים נשימה<em&gt; במבחנה</em

The  apical and basolateral surfaces of airway epithelial cells demonstrate  directional responses to pathogen exposure in  vivo. Thus, ideal in vitro ...

A Mouse Model for Pathogen-induced Chronic Inflammation at Local and Systemic Sites

מודל של עכברים של דלקת כרונית הנגרם על ידי פתוגן באתרים מקומיים ומערכתיים

Chronic inflammation is a major driver of pathological tissue damage and a unifying characteristic of many chronic diseases in humans including ...

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

The Development of Lyophilized Loop-mediated Isothermal Amplification Reagents for the Detection of Coxiella burnetii

התפתחות Lyophilized Loop בתיווך ריאגנטים הגברה איזו תרמים לצורך זיהוי של<em&gt; Burnetii Coxiella</em

Coxiella burnetii, the agent causing Q fever, is an obligate intracellular bacterium. PCR based diagnostic assays have been developed for detecting C. ...

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

A Murine Model of Group B Streptococcus Vaginal Colonization

מודל Murine של הקבוצה B<em&gt; סטרפטוקוקוס</em&gt; נרתיקי Colonization

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS), is a Gram-positive, asymptomatic colonizer of the human gastrointestinal tract and vaginal tract of ...

Swab Sampling Method for the Detection of Human Norovirus on Surfaces

שיטת הדגימה ספוגית לצורך זיהוי של norovirus האדם על משטחים

Human noroviruses are a leading cause of epidemic and sporadic gastroenteritis worldwide. Because most infections are either spread directly via the ...

Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

טיהור של ה-DNA הנגיפי לצורך זיהוי חלבונים הקשורים ויראלי וסלולריות

The goal of this protocol is to isolate herpes simplex virus type 1 (HSV-1) DNA from infected cells for the identification of associated viral and ...

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

Evaluation of Zika Virus-specific T-cell Responses in Immunoprivileged Organs of Infected Ifnar1-/- Mice

הערכה של תגובות T-cell Zika וירוס ספציפיים באיברים Immunoprivileged של עכברים נגועים Ifnar1- / -

The Zika virus (ZIKV) can induce inflammation in immunoprivileged organs (e.g., the brain and testis), leading to the Guillain-Barr&#233; syndrome and ...

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

In Vivo Imaging of Reactive Oxygen Species in a Murine Wound Model

אין ויוו הדמיה של מינים חמצן תגובתי ב מאתר פצע מודל

The generation of reactive oxygen species (ROS) is a hallmark of inflammatory processes, but in excess, oxidative stress is widely implicated in various ...

Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR

אינדוקציה והבקיע של מחלת השתל מול מארחים ב מודל Murine מורה Xenoic ו כימות האדם תאים T ברקמות העכבר באמצעות PCR דיגיטלי

Acute graft-versus-host disease (GVHD) is a significant limitation for patients receiving hematopoietic stem cell transplant as therapy for hematological ...