Name: modified blood collection from tail veins of non-anesthetized mice with a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier
Uploaded: 2019-02-02T14:30:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av natur Science Foundation innvilgelse av Hubei Province, Kina [Grant No. 2018CFB761].

1. dyrehold
<ol><li>Bruk 12 uker gammel Kunming mus. Merk: Vi brukte mus (n = 40, 20 menn, 37 – 46 g, mener 42.38 ± 2.39 g) fra Experimental dyr Center for Tongji medisinsk College.</li>
	<li>Huset musene under standard betingelser med fri tilgang til mat og drikkevann. Holde to mus i 530 cm2 bur med tre barbering sengetøy.</li>
	<li>Opprettholde en romtemperatur mellom 21-23 °C.</li>
	<li>Feed mus med en vanlig salt diett (0,3% NaCl) gjennom hele studiet.</li>
</ol>2. blod prøvetaking
<ol><li>Klargjør følgende utstyr: vakuumrør (1 mL), butterfly nål, øyeglasset Forstørrelsesprogram og plast begrensende holderen. Plass dem på en steril overflate (figur 1).</li>
	<li>Plasser musen i en plast begrensende holder og vask halen med varmt vann (20-30 °C). Tørk halen med 70% etanol-mettet bomull baller å utvide venen. Velg høyre eller venstre hale venen for blodprøve. Hold den nedre delen av halen forsiktig og holde halen rett under blod prøvetaking.</li>
	<li>Samle blod. Hvis sammenligne metoder, samle blod i to grupper: "eksperimentelle" grupper ved hjelp av prosedyren har vi utviklet, nedenfor, og "vanlige" gruppe ved hjelp av en vanlig metode, også presentert nedenfor.<ol>
<li>Eksperimentell samling:<ol>
<li>Bruk en øyeglasset forstørrelsesglass for å forbedre visningen for punktering av halen venen. Sett inn 22 G sommerfugl pinne-spissen i en av lateral hale på en posisjon omtrent halve avstanden distally fra spissen av halen på en engel ca 10°, flytte mot bunnen av halen for flere eksempler.</li>
			<li>Gummi slutten av sommerfugl nålen inn vakuum blod samling røret å samle blod (figur 2). Merk: Hvis blodet slutter å strømme ut under blod samling, nål vinkelen bør raskt justeres. For å unngå blodpropp i nålen, punktering Stilgalleri bør velges hvis blodet slutter å strømme ut etter 15 s.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Tradisjonell metoden:<ol>
<li>Sett inn nålen koblet til en sprøyte inn i en av lateral venene omtrent en tredjedel av avstanden distally fra spissen av halen.</li>
			<li>Når blodet vises i senteret, skyv stempelet sakte å samle blod (Figur 3)7. Merk: For å ytterligere belyse effekten av varierende erfaring med blod samling, en nybegynner og ekspert var valgt å samle blodprøvene bruke eksperimentelle og konvensjonelle metoder samtidig.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>Etter blod samling, Fjern nålen og trykk punktering poenget å opphøre blø. Deretter slipper museknappen fra plast begrensende holderen og returnere musen til buret sitt. Merk: Det har blitt rapportert at opp til 10% av total blod volum kan trygg fjernet fra en sunn dyr på 2 ukers mellomrom8, så ca 175 µL av blod ble samlet inn hver gang i samsvar med etiske prinsipper.</li>
	<li>Bruke rør med EDTA samle plasma og bruke rør uten antikoagulanter samle serum. Forsiktig Inverter røret flere ganger og satte dem på is loddrett.</li>
	<li>Sentrifuge blod prøve samling rør i en nedkjølt sentrifuge 1000 x g i 10 min å skille plasma og serum. Merk: Vellykket blod samling er definert som å få et volum på 175 µL hver gang. Mer enn tre punkteringer bør forsøkes, og en mislykket blod samling er definert som en total blodvolum til mindre enn 175 µL etter den tredje punktering. Prøvetaking varigheten er definert som tiden fra halen blodåre punktering til fjerning av nålen etter blod samling.</li>
	<li>Samle blod to ganger i intervaller på to uker8.</li>
</ol>3. statistisk analyse
<ol><li>Bruke kommersielt tilgjengelige statistisk programvare for analyse. Presentere data som middelverdien ± standardavvik, bruker p < 0,05 som cut-off for statistisk betydning.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Grouzmann, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sampling+methodology+is+crucial+for+precise+measurement+of+plasma+catecholamines+concentrations+in+mice.">Blood sampling methodology is crucial for precise measurement of plasma catecholamines concentrations in mice.</a> European Journal of Physiology. 447 (2), 254-258 (2003).</li><li>Heimann, M., Roth, D. R., Ledieu, D., Pfister, R., Classen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublingual+and+submandibular+blood+collection+in+mice:+a+comparison+of+effects+on+body+weight,+food+consumption+and+tissue+damage.">Sublingual and submandibular blood collection in mice: a comparison of effects on body weight, food consumption and tissue damage.</a> Lab Animal. 44 (4), 352-358 (2010).</li><li>Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+collection+from+the+sublingual+vein+in+mice+and+hamsters:+a+suitable+alternative+to+retrobulbar+technique+that+provides+large+volumes+and+minimizes+tissue+damage.">Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage.</a> Lab Animal. 43 (3), 255-260 (2009).</li><li>Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+blood+collection+in+the+mouse.">Methods of blood collection in the mouse.</a> Lab Animal. 29 (10), 47-53 (2000).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).</li><li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter.">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Academic Emergency Medicine. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li><li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+for+collecting+cord+blood.">A new device for collecting cord blood.</a> Obstetrics and Gynecology. 86 (5), 850-852 (1995).</li></ol>

Forfatterne ikke avsløre.

Studien beskriver en enkel å lære blod samling metoden i mus som er bedre enn konvensjonelle teknikker. Først kan metoden være lett mestrer med høy suksessrate. Andre, det er basert på vakuum negative trykket og tillater kontinuerlig tegning blod med mindre utsatt for direkte blod eksponering, som også reduserer sjansen for forurensning og hemolyse9. Tredje, denne metoden er gjennomførbar for hyppige utvalg av blod med tilstrekkelig volumer fra mus over en kort periode for ulike forskningsformål. Videre fremgangsmåten påfører bare minimal skade på mus, og blod samling kan utføres uten bruk av bedøvelse; Dermed kan påvirker stressrespons og bedøvelse blodprøver unngås.
Hale venen er en overlegen plassering for blod prøvetaking etter godkjent protokollen7. Men er det ikke alltid lett å få tilstrekkelig blodvolum fra tynne hale årer med lav blod strømmer. I dette tilfellet huden er vanligvis klippes og vene er gjennomsyret av lancet, eller slutten av halen fjernes raskt av en barberhøvel.
Denne protokollen mål å forbedre metodene for blod samling fra mus ved hjelp av vakuum blod samling system, som krever et vakuum blod prøve samling rør, butterfly nål og øyeglasset Forstørrelsesprogram. Dette vakuum blod prøvetaking systemet brukes vanligvis til å ta fra pasienter i daglige praksis10. Med hjelp av en øyeglasset forstørrelsesglass er perfekt punktering poenget med en hale blodåre enklere å finne. Når spissen av en nål settes i halen venen, vil automatisk blod strømme inn vakuumrør på grunn av negative trykket. Etter uttak nålen fra halen blodåre, vil blod som er blokkert i kateter strømme inn samle vakuumrør på grunn av vakuum.
Følgende tips er viktig for bruk av metoden. Først kroppsvekten av hver musen bør være 40 g eller høyere for å redusere problemer med punktering og få nok blod. Andre ved mislykkede blod samling, bør forskere prøve å trekke nålen sakte til blod fortsetter å strømme ut. Tredje er det viktig å utvide halen for å unngå enhver bevegelse under blodprøve. Holde nålen forsiktig kan bidra til å holde pinne-spissen i venen som musen halen beveger seg. Hvis blodet slutter å strømme ut under blod samling, bør fjerde nål vinkelen justeres i tide. For å unngå blodpropp i nålen, punktering Stilgalleri bør velges hvis blodet slutter å strømme ut etter 15 s. Til slutt, i samarbeid med to operatører anbefales når du bruker denne teknikken for å samle blod fra mus.
Kort sagt, er adopterte vakuum blod samling metoden for bruk i mus sikker, mulig og enkel å praktisere. Dette gjør hyppige utvalg av blod med tilstrekkelig blod volumer fra ikke-anesthetized mus.

Blodprøve er fra dyr involvert i eksperimenter en grunnleggende forskningsteknikk. Det er noen tilgjengelige teknikker for blod samling fra mus, inkludert halen klipp og punktering av hjertet, retro-orbital plexus, vena jugularis, caudal vene og vena cava. Ideelt sett bør blod samles i en minimalt invasiv måte, med minimal innvirkning på dyrets helse. Men den mest brukte teknikker ofte stress påføre dyr og kan påvirke forskning resultater1. Blod samling fra retro-orbital plexus kan brukes til å få nok blodvolum fra mus2. Men det kan føre til alvorlig vevsskade og tillater ikke å få blodet gjentatte ganger i kort tid intervaller3.
Caudal venen er en overlegen plassering for blod samling, som påfører minimal skade på mus. Imidlertid hale venene mus er tynne, og noen ganger er det vanskelig å få nok blod gjennom konvensjonelle punktering teknikken. I noen tilfeller må gjentatte punkteringer få ønsket blod volumet. Anestesi er også ofte anbefalt å lette blod utvalg fra halen årer av mus.  Videre kan en skalpell, rette kant razor eller skarp saks være nødvendig å fjerne endene av mynt å få den nødvendige blod prøver4. Vi har tidligere rapportert vellykket blod samling fra halen årer av ikke-anaesthetized rotter av vakuum blod prøve samling systemet, som redusert risikoen for blod forurensning og unngås behovet for gjentatt punkteringer5. Denne studien rapporterer en lignende blod samling metoden i ikke-anesthetized mus.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:585px;" width="583">
	<tbody>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Double-pointed needle</td>
			<td style="width:135px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;">20163151718</td>
			<td style="width:154px;">22G (0.7 mm x 25 mm)</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Eyeglass magnifier</td>
			<td style="width:135px;">Vergroberung</td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">1.5x</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Normal salt diet for mice</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study.</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Plastic holder</td>
			<td style="width:135px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">35-45 g rat hoder</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">SPSS software for statistical analysis</td>
			<td style="width:135px;">SPSS Inc, Chicago; USA</td>
			<td style="width:129px;">Version 17.0.</td>
			<td style="width:154px;"></td>
		</tr>
		<tr height="90">
			<td height="90" style="height:91px;width:166px;">Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China</td>
			<td style="width:129px;">20160911A</td>
			<td style="width:154px;">1 mL (Matching needle size: 0.45&#215;16RW LB)</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:166px;">Vacuum blood collection system</td>
			<td style="width:135px;">Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;">20171222</td>
			<td style="width:154px;">1 mL (&#934;12.4&#215;L75)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modified blood collection from tail veins of non-anesthetized mice with a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier

Eksempel blodgivning er grunnlaget for eksperimentell Forsøksdyrutvalget. Det er viktig å få tilstrekkelig blodprøver for ulike forskningsformål. Hale venene mus er små, og det er noen ganger vanskelig å få den nødvendige blodvolum konvensjonelle punktering metoder. Denne studien undersøker overlegenhet gjentatte blod prøvetaking fra halen årer av musene gjennom bruk av et vakuum blod samling system og øyeglasset forstørrelsesglass (forsøksgruppen) sammenlignet med konvensjonelle blod Prøvetaking metoder (konvensjonelle gruppe) , utført av nybegynnere og eksperter, henholdsvis. Med hjelp av en øyeglasset forstørrelsesglass settes en sommerfugl pinne-spissen i halen venen hver mus i forsøksgruppen. Når venen er gjennomsyret med hell, samles det en blodprøve i vakuum samling røret ved innsetting av gummi slutten av en sommerfugl nål inn i vakuum blod samling røret. Stempelet brukes deretter til å samle blod uten hjelp av øyeglasset forstørrelsesglasset i den konvensjonelle gruppen. Suksessrate av blod eksemplar innsamling av kollekt av nybegynnere og eksperter ble vist å være 70% vs 100% (p < 0,01) i forsøksgruppen og 35% vs 85% (p < 0,01) i konvensjonelle gruppen. For både nybegynnere og eksperter var punktering ganger kreves for å oppnå nødvendig blodprøve betydelig lavere i forsøksgruppen forhold til den konvensjonelle gruppen (2.40 ± 0,75 vs 2,90 ± 0.31, p < 0,05, 1,15 ± 0,37 vs 1.55 ± 0.76, p < 0,05). Avslutningsvis presentert blod prøvetaking teknikken er mulig og lett å praksis og gir hyppige utvalg av tilstrekkelig blod volumer fra ikke-anesthetized mus.

Kroppens masse, blod samling volumer og prøvetaking varigheten for de to gruppene Blodprøver ble samlet fra 20 mus (10 menn) to ganger med 2 ukers mellomrom i hver gruppe. Gjennomsnittlig masse mus var likt mellom eksperimentelle og konvensjonelle gruppene for nybegynnere og eksperter, henholdsvis (42.40 g ± 1,42 g g. 42.65 g ± 1.14 g, p > 0,05, 42.55 g ± 2,91 g g. 43.20 g ± 2,69 g, p > 0,05). Samlet blod volum og prøvetaking varigheter lignet mellom de to gruppene i eksperter (184.25 µL ± 11.95 µL vs 171.75 µL ± 25.61 µL, p > 0,05, 1,85 min ± 0.68 min g. 2.17 min ± 0.80 min, p > 0,05). Imidlertid ble høyere samlet blod volum og kortere prøvetaking varigheter sett i forsøksgruppen forhold til den konvensjonelle gruppen i beginners (172.00 µL ± 15.17 µL vs 148.50 µL ± 30.22 µL, p < 0.01; 3.11 min ± 0.44 min g. 4.08 min ± 0,61 min, p < 0,01). Sammenlignet med nybegynnere, eksperter samlet høyere blod volum og viste lavere prøvetaking timene benytter eksperimentelle og konvensjonelle metoder (184.25 µL ± 11.95 µL vs 172.00 µL ± 15.17 µL, p < 0.01, 171.75 µL ± 25.61 µL vs 148.50 µL ± 30.22 µL, p < 0,05, 1,85 min ± 0,68 min g. 3.11 min ± 0.44 min, p < 0.01; 2.17 min ± 0.80 min g. 4.08 min ± 0,61 min, p < 0,05) (tabell 1).
Suksess priser og punktering ganger to gruppene Sammenligning av suksess priser mellom nybegynnere og eksperter var 70% (14/20) vs 100% (20/20) (p < 0,01) i forsøksgruppen og 35% (7/20) vs 85% (17/20) (p < 0,01) i konvensjonelle gruppen. Høyere suksessrate ble også sett i forsøksgruppen sammenlignet med konvensjonelle gruppen i nybegynnere [70% (14/20) vs 35% (7/20), p < 0,05]. I både nybegynnere og eksperter var antall punkteringer betydelig lavere i forsøksgruppen forhold til den konvensjonelle gruppen (2.40 ± 0,75 vs 2,90 ± 0.31, p < 0,05, 1,15 ± 0,37 vs 1.55 ± 0.76, p < 0,05). Sammenlignet med nybegynnere, ble lavere punktering ganger for eksperter observert med eksperimentelle og konvensjonelle metoder. (1,15 ± 0,37 vs 2.40 ± 0,75, p < 0.01, 1.55 ± 0.76 vs 2,90 ± 0.31, p < 0,01) (Tabell 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig1.jpg"> Figur 1: utstyr. Vises 1 mL vakuum blod samling rør og en 22 G sommerfugl nål (venstre), en øyeglasset forstørrelsesglass (midten) og en plast begrensende holderen (høyre). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig1large.jpg" target="_blank">Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig2.jpg"> Figur 2: vellykket blodgivning i forsøksgruppen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig2large.jpg" target="_blank">Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig3.jpg"> Figur 3: vellykket blodgivning i gruppen konvensjonelle. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig3large.jpg" target="_blank">Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2">Forsøksgruppen</td>
			<td colspan="2">Konvensjonelle gruppen</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>nybegynner</td>
			<td>ekspert</td>
			<td>nybegynner</td>
			<td>ekspert</td>
		</tr>
<tr>
<td>Kroppsmasseindeks (g)</td>
			<td>42.4±1.42</td>
			<td>42.55±2.91</td>
			<td>42.65±1.14</td>
			<td>43.20±2.69</td>
		</tr>
<tr>
<td>Samlet blodvolum (µL)</td>
			<td>172.00±15.17</td>
			<td>184.25±11.95#
</td>
			<td>148.50±30.22*
</td>
			<td>171.75±25.61#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>Prøvetaking varighet</td>
			<td>3.11±0.44</td>
			<td>1.85±0.68#
</td>
			<td>4.08±0.61*
</td>
			<td>2.17±0.80#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>Blod samling ganger</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
		</tr>
<tr>
<td>Gjennomsnittlig antall punkteringer</td>
			<td>2.40±0.75</td>
			<td>1.15±0.37#
</td>
			<td>2.90±0.31*
</td>
			<td>1.55±0.76## *
</td>
		</tr>
<tr>
<td>En gang punktering</td>
			<td>3</td>
			<td>17</td>
			<td>0</td>
			<td>12</td>
		</tr>
<tr>
<td>To ganger punktering</td>
			<td>6</td>
			<td>3</td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>Tre ganger punktering</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Mislyktes</td>
			<td>6</td>
			<td>0</td>
			<td>13</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>Suksessraten</td>
			<td>70%</td>
			<td>100%#
</td>
			<td>35%*
</td>
			<td>85%#
</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabell 1: sammenligning av resultater mellom eksperimentelle og konvensjonelle. * p < 0,05, ** p < 0.01, eksperimentell metode vs tradisjonell metoden. #p < 0,05, ##p < 0.01, nybegynner vs ekspert.

Watch this Scientific Journal Video about Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier at JoVE.com

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Denne studien rapporterer blod utvalg fra halen blodåre i mus bruker vakuum utvinning rør system med øyeglasset Forstørrelsesprogram. Vår metode er lett å praksis og kan brukes for gjenta blod prøvetaking i mus.

Endret blod samling fra halen årer av ikke-anesthetized mus med et vakuum blod samling System og øyeglasset Forstørrelsesprogram

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

Denne studien rapporterer blodprøvetaking fra halevenen hos mus ved hjelp av et vakuumekstraksjonsrørsystem med brillerforstørrelsesglass. Vår metode er lett å øve og kan brukes til gjentatt blodprøvetaking hos mus. En mus er plassert i plastholderen først.Halen rengjøres og tørkes med 70% etanol. Deretter bærer operatøren glassforstørrelsesglasset for å forbedre visningen av musehalen. En sommerfugl nål tips settes deretter inn i en av de utvidede laterale hale årer, og blodet samles inn i vakuum samlingsrøret gjennom gummi enden av sommerfuglnålen.Til slutt fjernes nålen og blodinnsamlingsprosessen er ferdig. Halevenen er et foretrukket sted for blodprøvetaking. Denne blodprøvemetoden er relatert til minimal skade på mus, men halevenen til musene er veldig tynn, så det er noen ganger vanskelig å punktere, her beskriver vi en enkel halevene blodprøvemetode på laboratorietestmus ved hjelp av et vakuumutvinningsrørsystem.Denne metoden er enkel og effektiv, og den kan brukes til å oppnå nødvendig blod gjentatte ganger hos mus. Prosedyren vil bli demonstrert av to medlemmer av laboratoriet vårt, Xiaoyan Liu og Wusong Zou For å starte, plasserer vi en plastavslutningsholder, vakuumrør med gummipropp og en dobbeltsp spiss nål, og briller forstørrelsesglass på en steril overflate. Deretter plasserer du en mus i plastens holde holder.Foran og bak poter av musen skal være i en komfortabel posisjon. For å få blodprøve, vask halen med varmt vann 20 til 30 Celsius grader, tørk halen med 70% etanol mettet bomullsballer for å utvide venen. Velg høyre eller venstre hale vene for blodprøvetaking.Ta forsiktig tak i den nedre delen av halen og hold halen rett under blodprøveoppsamlingen. Bruk briller forstørrelsesglass for å forbedre visningen for å lette punktering av halevenen. Sett 22 gauge butterfly nål spissen i en av de laterale hale årer rundt en halv distal fra spissen av halen i vinkel på ca 10 grader, beveger seg mot bunnen av halen for flere prøver.Samle blod inn i vakuumoppsamlingsrøret ved å sette gummienden av sommerfuglnålen inn i vakuumblodoppsamlingsrøret. Halen av mus kan brukes til flere blodsamlinger, så ofte som nødvendig, i henhold til den godkjente protokollen. Det er ikke alltid lett å oppnå nok blodvolum fra den tynne og lave blodstrømmen halevenen til mus med den tradisjonelle metoden.Vår metode er enkel og effektiv og kan brukes til å oppnå tilstrekkelig blodvolum gjentatte ganger hos mus. Det er rapportert at opptil 10% av det totale blodvolumet trygt kan fjernes fra et sunt dyr med to ukers intervaller, så ca 175 mikroliter blodprøve av mus ble samlet hver gang i samsvar med etikkprinsipper. To, det er viktig å forlenge halen for å unngå bevegelsen i ferd med blodprøvetaking.For å unngå blodkoagulasjon i nålen, bør en annen punkteringsposisjon velges hvis blodet slutter å strømme ut over 15 sekunder. Vellykket blodsamling ble definert som å skaffe 175 mikroliter blod hver gang. Maksimal punkteringstid ble satt til tre forsøk.Hvis det totale blodvolumet var lavere enn 175 mikroliter etter den tredje punkteringen, ble det definert som en mislykket blodsamling. Når tilstrekkelig prøvevolum er samlet inn, trekk nålen ut av venen og påfør kort trykk på innsettingsstedet for å stoppe blødningen. For å samle plasma, bruk rør som inneholder EDTA, et antikoagulant, forsiktig invertere røret flere ganger for å blande antikoagulant med blodet og plassere prøvene på is vertikalt.Spinn hele blodprøveoppsamlingsrørene i den nedkjølte sentrifugen i 10 minutter. Trekk ut plasmaet, og ta vare på å ikke forstyrre de røde og hvite blodlegemerlagene. For å samle serin, bruk rør uten antikoagulant.Begge typer prøver kan brukes umiddelbart eller lagres på under 80 grader Celsius i opptil ett år. Denne studien tok sikte på å undersøke overlegenheten av gjentatt blodprøvesamling fra halevenen av mus gjennom vakuumblodoppsamlingssystem og brillerforstørrelsesprogram. Eksperimentell gruppe i sammenligning med den konvensjonelle blodprøvemetoden.Konvensjonell gruppe, av henholdsvis nybegynnere og eksperter, samlet blodvolum og prøvetaking varighet var lik mellom to grupper for eksperter, men økt samlet blodvolum og kortere prøvetaking varighet ble sett i eksperimentell gruppe sammenlignet med den konvensjonelle gruppen for nybegynnere. Høyere suksessrate ble også sett i den eksperimentelle gruppen sammenlignet med den konvensjonelle gruppen for nybegynnere. Denne blodprøvemetoden er lett å mestre og har en høy suksessrate.Antall mislykkede punktering kan reduseres til en sammenlignet med å bruke tradisjonell metode. Videre forårsaker denne prosedyren bare minimal skade på mus, det er bare halebåndet til musene uten behov for anestetika, at påvirkning av stressrespons i anestetika på blodprøven kan unngås.

Research

JoVE Journal

Behavior

Method for Simultaneous fMRI/EEG Data Collection during a Focused Attention Suggestion for Differential Thermal Sensation

Metode for samtidig fMRI/EEG-datainnsamling under et fokusert oppmerksomhetsforslag for differensial termisk sensasjon

In the present work, we demonstrate a method for concurrent collection of EEG/fMRI data. In our setup, EEG data are collected using a high-density ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Bygging av Microdrive Arrays for Kroniske Neural Recordings i Awake Behaving Mus

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Kontekstuell og spolt Fear Conditioning Test Bruke en video Analysere System i Mus

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Vurdering av Murint trening utholdenhet uten bruk av et sjokk Grid: Et alternativ til Tvungen Exercise

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

The Attentional Set Shifting Task: A Measure of Cognitive Flexibility in Mice

Oppmerksomheten Set Shifting Oppgave: Et mål på kognitiv Fleksibilitet i Mus

Cognitive impairment, particularly involving dysfunction of circuitry within the prefrontal cortex (PFC), represents a core feature of many ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

Forandringer Hole Board - Måling Behavior, kognisjon og sosialt samspill i mus og rotter

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Protocol for Data Collection and Analysis Applied to Automated Facial Expression Analysis Technology and Temporal Analysis for Sensory Evaluation

Protokoll for datainnsamling og analyse for automatiserte Facial Expression Analysis Teknologi og Temporal analyse for sensorisk evaluering

We demonstrate a method for capturing emotional response to beverages and liquefied foods in a sensory evaluation laboratory using automated facial ...

The Treadmill Fatigue Test: A Simple, High-throughput Assay of Fatigue-like Behavior for the Mouse

Den tredemølle Fatigue Test: En enkel, High-throughput analyse av Fatigue-lignende oppførsel for Mouse

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of ...

A Method for Manipulating Blood Glucose and Measuring Resulting Changes in Cognitive Accessibility of Target Stimuli

En metode for å manipulere blodsukker og Måling resulterende endringer i kognitiv tilgjengelighet av Target Stimuli

Much research in social psychology has investigated the impact of bodily energy need on cognition and decision-making.  As such, blood glucose, the body's ...

Short Session High Intensity Interval Training and Treadmill Assessment in Aged Mice

Kort økt høy intensitet intervalltrening og tredemølle vurdering i alderen mus

High intensity interval training (HIIT) is emerging as a therapeutic approach to prevent, delay, or ameliorate frailty. In particular short session HIIT, ...