Name: modified blood collection from tail veins of non-anesthetized mice with a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier
Uploaded: 2019-02-02T14:30:00
Duration: 7 min 42 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier at JoVE.com

Эта работа была поддержана грантом фонда науки природы из провинции Хубэй, Китай [Грант № 2018CFB761].

1. Животноводство
<ol><li>Используйте 12 неделя старый Куньмин мышей. Примечание: Мы использовали мышей (n = 40, 20 мужчин, 37-46 г, означает 42.38 ± 2.39 g) от экспериментальных животных центр Tongji медицинский колледж.</li>
	<li>Дом мышей при стандартных условиях с бесплатным доступом к продовольствию и питьевой воде. Держите две мыши в клетке2 530 см с древесной стружки постельные принадлежности.</li>
	<li>Поддерживать комнатной температуре между 21-23 °C.</li>
	<li>Кормить мышей с нормальной диете соль (0,3% NaCl) на протяжении всего исследования.</li>
</ol>2. кровь проб
<ol><li>Подготовьте следующее оборудование: вакуумной трубки (1 мл), Бабочка иглы, линзы лупы и запретительных держателя. Разместите их на поверхность стерильные (рис. 1).</li>
	<li>Поместите мышь в пластиковый держатель запретительного и мыть его хвост с теплой водой (20-30 °C). Протрите хвост с 70% этанол насыщенный ватные шарики для расширения вен. Выберите правой или левой хвост Вену для забора крови. Аккуратно возьмите Нижняя часть хвоста и держать хвост прямо во время сбора образцов крови.</li>
	<li>Сбор крови. Если сравнение методов, сбора крови в две группы: «экспериментальные» группы, используя процедуры, мы разработали, представленные ниже, и «обычных» группы с помощью обычного метода, также представлены ниже.<ol>
<li>Экспериментальный сборник:<ol>
<li>Надевайте линзы лупы для улучшения просмотра для прокола Вены хвост. Вставьте один из боковых хвост вен в положении примерно половину расстояния дистально от кончика хвоста Ангел примерно 10°, переход к основанию хвоста для нескольких образцов кончик иглы бабочка 22 G.</li>
			<li>Вставьте конец резиновой Бабочка иглы в вакуумной пробирки для сбора крови (рис. 2). Примечание: Если кровь останавливается, выливается во время сбора крови, угол игла должна быть быстро скорректирована. Чтобы избежать коагуляции крови в иглу, еще один прокол положение следует выбирать если кровь останавливается, пропуская вне после 15 s.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Обычный метод:<ol>
<li>Вставьте иглу, подключенных к шприц в одну из боковых жилок примерно одна треть расстояния дистально от кончика хвоста.</li>
			<li>Когда появляется кровь в ступице, потяните поршень медленно для сбора крови (рис. 3)7. Примечание: Для дальнейшего выяснения последствий различной опыт сбора крови, начинающих и экспертов были выбраны для сбора проб крови с использованием экспериментальных и обычных методов одновременно.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
	<li>После сбора крови удалите иглу и нажмите на точку прокола, чтобы остановить кровотечение. Затем отпустите кнопку мыши из держателя запретительного и вернуть указатель мыши к своей клетке. Примечание: Сообщалось, что до 10% всего крови объем могут быть безопасно удалены от здоровых животных на 2 недели интервалы8, так что около 175 мкл крови была собрана каждый раз в соответствии с этическими принципами.</li>
	<li>Используйте трубы с ЭДТА для сбора плазмы и использовать пробирки для сбора сыворотки. Аккуратно перевернуть трубку несколько раз и положил их на льду по вертикали.</li>
	<li>Центрифугуйте образцы пробирки в охлажденных центрифуги на 1000 g x 10 мин для отделения сыворотки и плазмы. Примечание: Успешное крови определяется как получение объем 175 мкл каждый раз. Не более чем три проколы, должно выполняться, и коллекцию неудачных крови определяется как общего объема крови менее 175 мкл после третьего прокола. Продолжительность проб определяется как время от пункции Вены хвост для удаления иглы после забора крови.</li>
	<li>Сбор крови дважды с интервалом 2 недели8.</li>
</ol>3. Статистический анализ
<ol><li>Использование коммерчески доступных статистического программного обеспечения для анализа. Представить данные как среднее значение ± стандартное отклонение, с помощью p < 0,05 как отсечки для статистической значимости.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Grouzmann, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sampling+methodology+is+crucial+for+precise+measurement+of+plasma+catecholamines+concentrations+in+mice.">Blood sampling methodology is crucial for precise measurement of plasma catecholamines concentrations in mice.</a> European Journal of Physiology. 447 (2), 254-258 (2003).</li><li>Heimann, M., Roth, D. R., Ledieu, D., Pfister, R., Classen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sublingual+and+submandibular+blood+collection+in+mice:+a+comparison+of+effects+on+body+weight,+food+consumption+and+tissue+damage.">Sublingual and submandibular blood collection in mice: a comparison of effects on body weight, food consumption and tissue damage.</a> Lab Animal. 44 (4), 352-358 (2010).</li><li>Heimann, M., Kasermann, H. P., Pfister, R., Roth, D. R., Burki, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+collection+from+the+sublingual+vein+in+mice+and+hamsters:+a+suitable+alternative+to+retrobulbar+technique+that+provides+large+volumes+and+minimizes+tissue+damage.">Blood collection from the sublingual vein in mice and hamsters: a suitable alternative to retrobulbar technique that provides large volumes and minimizes tissue damage.</a> Lab Animal. 43 (3), 255-260 (2009).</li><li>Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+of+blood+collection+in+the+mouse.">Methods of blood collection in the mouse.</a> Lab Animal. 29 (10), 47-53 (2000).</li><li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System.">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), (2017).</li><li>Kilkenny, C., Altman, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improving+bioscience+research+reporting:+ARRIVE-ing+at+a+solution.">Improving bioscience research reporting: ARRIVE-ing at a solution.</a> Lab Animal. 44 (4), 377-378 (2010).</li><li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Diehl, K. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+good+practice+guide+to+the+administration+of+substances+and+removal+of+blood,+including+routes+and+volumes.">A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes.</a> Journal of Applied Toxicology. 21 (1), 15-23 (2001).</li><li>Wollowitz, A., Bijur, P. E., Esses, D., John Gallagher, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+butterfly+needles+to+draw+blood+is+independently+associated+with+marked+reduction+in+hemolysis+compared+to+intravenous+catheter.">Use of butterfly needles to draw blood is independently associated with marked reduction in hemolysis compared to intravenous catheter.</a> Academic Emergency Medicine. 20 (11), 1151-1155 (2013).</li><li>Eder, J. M., Cutter, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+device+for+collecting+cord+blood.">A new device for collecting cord blood.</a> Obstetrics and Gynecology. 86 (5), 850-852 (1995).</li></ol>

Авторы не имеют ничего сообщать.

Настоящее исследование описывает метод коллекции легко научиться крови мышей, который превосходит обычные методы. Во-первых этот метод может быть легко освоен с высокий уровень успеха. Во-вторых он основывается на принципе вакуумные отрицательное давление и позволяет для непрерывного нанесения крови с меньшим риском воздействия прямого крови, что также снижает вероятность загрязнения и гемолиз9. В-третьих этот метод является осуществимым для частых проб крови с адекватные объемы от мышей за короткий период времени для различных научно-исследовательских целей. Кроме того процедура причиняет только минимальной травмы на мышей, и забора крови могут быть выполнены без применения обезболивающих средств; Таким образом можно избежать влияния реакции на стресс и анестетиков на образцы крови.
Хвост вен является превосходное местоположение для забора крови согласно утвержденным протоколом7. Однако это не всегда легко получить достаточный объем крови из вен тонкий хвост с низкой кровь потоками. В этом случае кожа является обычно разрезали и вен пронизана Ланцет, или конца хвоста удаляется быстро бритвой.
Этот протокол направлен на совершенствование методологии сбора крови от мышей с использованием системы сбора механотронное крови, которая требует вакуумной пробирки образца, Бабочка иглы и линзы лупы. Эта система выборки механотронное крови обычно используется для сбора проб крови у пациентов в повседневной клинической практике10. С помощью линзы лупы точкой идеальный прокола Вены хвост легче найти. Когда кончик иглы вставляется в Вену хвост, в вакуумной трубки из-за отрицательного давления автоматически прольется кровь. После снятия иглу из Вены хвост, кровь, которая блокируется в катетер будет поступать в собирая ламповый вследствие вакуума.
Следующие советы имеют важное значение для успешного применения метода. Во-первых, вес тела каждой мыши должно быть 40 g или выше, чтобы уменьшить сложность прокола и получение достаточно крови. Во-вторых в случае неудачной крови коллекции, экспериментаторов должны попытаться снять иглу медленно до тех пор, пока продолжает вытекать кровь. В-третьих крайне важно распространить хвост, чтобы избежать каких-либо движение во время проб крови. Нежно держа иглу может помочь держать кончик иглы в Вену как хвост движения мыши. В-четвертых если кровь останавливается, выливается во время сбора крови, иглы угол должны корректироваться на своевременной основе. Во избежание свёртывания крови в иглу, еще один прокол позиции должен быть выбран, если кровь останавливается, пропуская вне после 15 s. Наконец сотрудничество двух операторов рекомендуется при использовании этого метода для сбора крови от мышей.
Короче говоря метод сбора принимается механотронное крови для использования в мышей, безопасной, возможно и легко практике. Этот метод позволяет часто проб крови с тома адекватных крови от мышей наркозом.

Забор крови из животных, участвующих в экспериментах методика фундаментальных исследований. Есть несколько доступных методов для сбора крови от мышей, в том числе хвост СНиПы и проколов сердца, ретро орбиталь сплетения, яремную Вену, хвостового вен и верхней полой вены. В идеале крови должны быть собраны в минимально инвазивной манере, с минимальным воздействием на здоровье животных. Однако наиболее часто используемые методы часто причиняют животных стресс и может повлиять на результаты исследований1. Сбор крови от ретро орбиталь сплетения может использоваться для получения достаточного объема крови от мыши2. Однако это может привести к повреждению тяжелых тканей и не допускает получения крови неоднократно в короткое время интервалов3.
Хвостового Вены это превосходное место для сбора крови, которая причиняет минимальной травмы на мышей. Однако хвост вен мышей тонкие, и иногда бывает трудно получить достаточно крови через обычные Пункционным методом. В некоторых случаях для получения объема требуемой крови необходимы повторные пункции. Анестезия также часто рекомендуется для облегчения забора крови из вен хвост мышей.  Кроме того скальпель, прямой край бритвой или ножницами может быть необходимо удалить концы хвостов для получения образцов крови требуется4. Мы уже ранее сообщали коллекции успешного крови из вен хвост крысы не беспокоить по системе сбора образца механотронное крови, которая снижает риск заражения крови и избежать необходимости повторные пункции5. Это исследование сообщает аналогичный метод сбора крови мышей наркозом.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:585px;" width="583">
	<tbody>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Double-pointed needle</td>
			<td style="width:135px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;">20163151718</td>
			<td style="width:154px;">22G (0.7 mm x 25 mm)</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Eyeglass magnifier</td>
			<td style="width:135px;">Vergroberung</td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">1.5x</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Normal salt diet for mice</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">Mice received a normal salt diet (0.3% NaCl) throughout the study.</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">Plastic holder</td>
			<td style="width:135px;">Shanghai Kang Nong medical instrument co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;"></td>
			<td style="width:154px;">35-45 g rat hoder</td>
		</tr>
		<tr height="78">
			<td height="78" style="height:78px;width:166px;">SPSS software for statistical analysis</td>
			<td style="width:135px;">SPSS Inc, Chicago; USA</td>
			<td style="width:129px;">Version 17.0.</td>
			<td style="width:154px;"></td>
		</tr>
		<tr height="90">
			<td height="90" style="height:91px;width:166px;">Syringe</td>
			<td style="width:135px;">Shandong wego Medical polymer products co. LTD., China</td>
			<td style="width:129px;">20160911A</td>
			<td style="width:154px;">1 mL (Matching needle size: 0.45&#215;16RW LB)</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:166px;">Vacuum blood collection system</td>
			<td style="width:135px;">Wuhan Zhi Yuan, medical science and technology co., LTD, China</td>
			<td style="width:129px;">20171222</td>
			<td style="width:154px;">1 mL (&#934;12.4&#215;L75)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modified blood collection from tail veins of non-anesthetized mice with a vacuum blood collection system and eyeglass magnifier

Коллекция образцов крови является основой экспериментальных исследований на животных. Это имеет важное значение для получения адекватного крови для различных научно-исследовательских целей. Хвост вен мышей малы, и это иногда трудно получить необходимые кровь объем обычных прокол методами. Это исследование расследует превосходство проб неоднократные крови из вен хвост мышей через использование механотронное крови коллекции системы и линзы лупы (экспериментальная группа) по сравнению с обычными крови методами (обычные группы) , исполненная новичков и экспертов, соответственно. С помощью линзы лупы кончик иглы бабочка вставляется в духе хвост каждой мыши в опытной группе. Когда Вену проникли успешно, образец крови собирается в трубки вакуумные коллекции путем вставки резиновые конца Бабочка иглы в вакуумной пробирки. Поршень затем используется для сбора крови без помощи линзы лупы в группе обычных. Успех ставки сбора образцов крови начинающих и экспертов было показано 70% против 100% (p < 0.01) в экспериментальной группе и 35% против 85% (p < 0.01) в группе обычных. Для новичков, так и экспертов раз прокол, необходимых для получения требуемых крови были значительно ниже в экспериментальной группе, по сравнению с обычными группы (2,40 ± 0,75 против 2,90 ± 0.31, p < 0,05; 1,15 ± 0,37 против 1.55 ± 0,76, p < 0,05). В заключение метод отбора проб представленных крови является осуществимым и легко практике и позволяет частой выборки объемов адекватных крови от мышей наркозом.

Массы, тела крови коллекции томов и выборки длительностей двух групп Дважды каждые 2 недели в каждой группе из 20 мышей (10 мужчин) были собраны пробы крови. Массы тела Средний мышей был похож между экспериментальной и обычных групп для новичков и экспертов, соответственно (42.40 g ± 1,42 г против 42.65 g ± 1.14 g, p > 0.05; 42.55 g ± 2,91 g против 43.20 g ± 2,69 г, p > 0.05). Объемы собранной крови и длительности выборки были похожи между двумя группами экспертов (184.25 ± 11,95 мкл мкл vs. 171.75 мкл ± 25.61 мкл, p > 0.05; 1,85 мин ± 0,68 мин против 2.17 мин ± 0,80 мин, p > 0.05). Однако более высокие объемы собранной крови и коротких длительностей выборки были замечены в экспериментальной группе, по сравнению с обычными группы в начинающих (172.00 мкл ± 15.17 мкл против 148.50 мкл ± 30.22 мкл, p < 0,01; 3.11 мин ± 0,44 мин против 4.08 мин ± 0,61 мин, p < 0.01). По сравнению с новичков, эксперты собрали более высоких объемах крови и показан ниже выборки раз с использованием экспериментальных и обычных методов (184.25 ± 11,95 мкл мкл против 172.00 мкл ± 15.17 мкл, p < 0,01 171.75 мкл ± 25.61 мкл против 148.50 мкл ± 30.22 мкл, p < 0,05; 1,85 мин ± 0,68 мин против 3.11 мин ± 0,44 мин, p < 0,01; 2.17 мин ± 0,80 мин против 4.08 мин ± 0,61 мин, p < 0,05) (Таблица 1).
Показатели успеха и прокол раз двух групп Сравнение показателей успеха между новичков и экспертов было 70% (14/20) против 100% (20/20) (p < 0.01), в экспериментальной группе и 35% (7/20) — 85% (17/20) (p < 0.01) в группе обычных. Более высокие показатели были также замечены в экспериментальной группе, по сравнению с обычными группы в начинающих [(14/20) 70% против 35% (7/20), p < 0,05]. В обоих новичков и экспертов количество проколов был значительно ниже в экспериментальной группе, по сравнению с обычными группы (2,40 ± 0,75 против 2,90 ± 0.31, p < 0,05; 1,15 ± 0,37 против 1.55 ± 0,76, p < 0,05). По сравнению с новичков, Нижняя раз прокол для экспертов были замечены с использованием экспериментальных и обычных методов. (1,15 ± 0,37 против 2,40 ± 0,75, p < 0,01; 1.55 ± 0,76 против 2,90 ± 0.31, p < 0,01) (Таблица 1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig1.jpg"> Рисунок 1: оборудование. Изображены 1 мл вакуумной пробирки и 22 G Бабочка иглы (слева), линзы лупы (в середине) и пластиковая запретительных (справа). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig1large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig2.jpg"> Рисунок 2: успешный крови коллекции в экспериментальной группе. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig2large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59136/59136fig3.jpg"> Рисунок 3: успешный крови коллекции в группе обычных. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59136/59136fig3large.jpg" target="_blank">Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td></td>
			<td colspan="2">Экспериментальная группа</td>
			<td colspan="2">Обычные группы</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>новичок</td>
			<td>Эксперт</td>
			<td>новичок</td>
			<td>Эксперт</td>
		</tr>
<tr>
<td>Масса тела (g)</td>
			<td>42.4±1.42</td>
			<td>42.55±2.91</td>
			<td>42.65±1.14</td>
			<td>43.20±2.69</td>
		</tr>
<tr>
<td>Объем собранной крови (мкл)</td>
			<td>172.00±15.17</td>
			<td>184.25±11.95#
</td>
			<td>148.50±30.22*
</td>
			<td>171.75±25.61#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>Выборки длительность (мин)</td>
			<td>3.11±0.44</td>
			<td>1.85±0.68#
</td>
			<td>4.08±0.61*
</td>
			<td>2.17±0.80#
</td>
		</tr>
<tr>
<td>Время сбора крови</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
			<td>20</td>
		</tr>
<tr>
<td>Среднее количество проколов</td>
			<td>2.40±0.75</td>
			<td>1.15±0.37#
</td>
			<td>2.90±0.31*
</td>
			<td>1.55±0.76## *
</td>
		</tr>
<tr>
<td>Один раз прокол</td>
			<td>3</td>
			<td>17</td>
			<td>0</td>
			<td>12</td>
		</tr>
<tr>
<td>Прокол в два раза</td>
			<td>6</td>
			<td>3</td>
			<td>2</td>
			<td>5</td>
		</tr>
<tr>
<td>Прокол в три раза</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
			<td>5</td>
			<td>0</td>
		</tr>
<tr>
<td>Не удалось</td>
			<td>6</td>
			<td>0</td>
			<td>13</td>
			<td>3</td>
		</tr>
<tr>
<td>Показатель успеха</td>
			<td>70%</td>
			<td>100%#
</td>
			<td>35%*
</td>
			<td>85%#
</td>
		</tr>
</tbody></table>Таблица 1: сравнение результатов между экспериментальной и обычными группами. * p < 0,05, ** p < 0.01, экспериментальный метод против обычного метода. #p < 0,05, ##p < 0.01, новичок или эксперт.

Watch this Scientific Journal Video about Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier at JoVE.com

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Это исследование сообщает забор крови из Вены хвост у мышей с использованием системы трубки вакуум-экстракции с линзы лупы. Наш метод легко практику и могут быть использованы для выборки повторить крови мышей.

Коллекция модифицированных крови из вен хвост-наркоз мышей с системой сбора механотронное крови и линзы лупы

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

В этом исследовании сообщается о выборке крови из хвостовой вены у мышей с помощью системы вакуумной трубки извлечения с увеличенным стеклом. Наш метод прост в практике и может быть использован для повторного отбора проб крови у мышей. Мышь помещается в пластиковый удерживающее держатель на первый взгляд.Хвост очищается и протирается 70%этанолом. Затем оператор носит увеличитель очков, чтобы улучшить просмотр хвоста мыши. Кончик иглы бабочки затем вставляется в одну из расширенных вен бокового хвоста, и кровь собирается в вакуумную трубку сбора через резиновый конец иглы бабочки.Наконец игла удаляется и процесс сбора крови закончен. Хвост вены является предпочтительным местом для отбора проб крови. Этот метод отбора проб крови связан с минимальной травмой мышей, однако хвостовая вена мышей очень тонкая, так что иногда трудно проколоть, здесь мы описываем простой метод отбора проб крови хвостовой вены на лабораторных мышах с помощью системы вакуумной извлечения трубки.Этот метод прост и эффективен, и он может быть использован для получения необходимой крови неоднократно у мышей. Процедура будет продемонстрирована двумя членами нашей лаборатории, Сяоян Лю и Усон Цзоу Для начала, мы поместим пластиковый удерживающее держатель, вакуумные трубки с резиновой пробкой, и двойной остроконечной иглой, и очки увеличитель на стерильной поверхности. Затем поместите мышь в пластиковый удерживающее держатель.Передние и задние лапы мыши должны быть в удобном положении. Чтобы получить образец крови, мыть хвост теплой водой от 20 до 30 градусов по Цельсию, протрите хвост с 70% этанола насыщенных хлопчатобумажных шариков, чтобы расширить вену. Выберите правую или левую вену хвоста для взятия проб крови.Аккуратно возьмите нижнюю часть хвоста и держите хвост прямо во время сбора образцов крови. Носите очки увеличитель для улучшения просмотра для облегчения прокола хвостовой вены. Вставьте 22 калибра иглы бабочки кончик в один из боковой хвост вены около одной половины дистальной от кончика хвоста под углом около 10 градусов, двигаясь к основанию хвоста для нескольких образцов.Соберите кровь в трубку вакуумной коллекции, вставив резиновый конец иглы бабочки в вакуумную трубку сбора крови. Хвост мышей может быть использован для нескольких коллекций крови, так часто, как это необходимо, в соответствии с утвержденным протоколом. Не всегда легко получить достаточное количество крови из тонкой и низкой вены хвоста кровотока мышей традиционным методом.Наш метод прост и эффективен и может быть использован для получения достаточного объема крови неоднократно у мышей. Сообщается, что до 10% от общего объема крови можно безопасно удалить у здорового животного с интервалом в две недели, поэтому каждый раз в соответствии с принципами этики собирается около 175 микролитров крови мышей. Во-ве, очень важно расширить хвост, чтобы избежать его движения в процессе взятия проб крови.Для того, чтобы избежать свертывания крови в игле, другое положение прокола должно быть выбрано, если кровь перестает вытекать в течение 15 секунд. Успешный сбор крови был определен как получение 175 микролитров крови каждый раз. Максимальное время прокола было установлено до трех испытаний.Если общий объем крови был ниже, чем 175 микролитров после третьего прокола, он был определен как неудачный сбор крови. Когда будет собран достаточный объем образца, вывихните иглу из вены и кратко нанесите давление на место вставки, чтобы остановить кровотечение. Для сбора плазмы используйте трубки, содержащие ЭДТА, антикоагулянт, несколько раз аккуратно инвертировать трубку, чтобы смешать антикоагулянт с кровью и поместить образцы на лед вертикально.Спин весь образец крови сбора труб в охлажденной центрифуге в течение 10 минут. Извлекайте плазму, заботясь о том, чтобы не нарушить красные и белые слои клеток крови. Для сбора серина используйте трубки без антикоагулянта.Оба типа образцов могут быть использованы немедленно или храниться при температурах до 80 градусов по Цельсию в течение одного года. Это исследование было направлено на изучение превосходства повторного сбора образцов крови из хвостовой вены мышей через вакуумную систему сбора крови и увеличитель очков. Экспериментальная группа по сравнению с обычным методом отбора проб крови.Обычная группа, по начинающим и экспертам, соответственно, собранный объем крови и продолжительность выборки были похожи между двумя группами для экспертов, однако, увеличение собранного объема крови и более короткая продолжительность выборки были замечены в экспериментальной группе по сравнению с обычной группой для начинающих. Более высокий уровень успеха был также замечен в экспериментальной группе по сравнению с обычной группой для начинающих. Этот метод отбора проб крови прост в освоении и имеет высокий уровень успеха.Число неудачных проколов можно было бы сократить по сравнению с использованием традиционного метода. Более того, эта процедура наносит лишь минимальные травмы мышам, это просто хвостовая лента мышей без необходимости анестезии, что влияния стрессовой реакции при анестезии на образец крови можно было бы избежать.

Research

JoVE Journal

Behavior

Method for Simultaneous fMRI/EEG Data Collection during a Focused Attention Suggestion for Differential Thermal Sensation

Метод одновременного сбора данных МРТ/ЭЭГ во время целенаправленного внимания к дифференциальной тепловой сенсации

In the present work, we demonstrate a method for concurrent collection of EEG/fMRI data. In our setup, EEG data are collected using a high-density ...

Construction of Microdrive Arrays for Chronic Neural Recordings in Awake Behaving Mice

Строительство Microdrive массивы для нейронной Хронический Записи в Awake Поведение мышей

State-of-the-art electrophysiological recordings from the brains of freely behaving animals allow researchers to simultaneously examine local field ...

Contextual and Cued Fear Conditioning Test Using a Video Analyzing System in Mice

Контекстная и подают реплики Страх принадлежности Тест Использование видео параметры системы у мышей

The contextual and cued fear conditioning test is one of the behavioral tests that assesses the ability of mice to learn and remember an association ...

Assessment of Murine Exercise Endurance Without the Use of a Shock Grid: An Alternative to Forced Exercise

Оценка мышиной упражнений на выносливость без применения ударной сетке: альтернатива принудительной упражнения

Using laboratory mouse models, the molecular pathways responsible for the metabolic benefits of endurance exercise are beginning to be defined. The most ...

The Attentional Set Shifting Task: A Measure of Cognitive Flexibility in Mice

К вниманию набор Переход Задача: Мера когнитивной гибкости у мышей

Cognitive impairment, particularly involving dysfunction of circuitry within the prefrontal cortex (PFC), represents a core feature of many ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

Модифицированный Совет Hole - Измерение поведения, познания и социального взаимодействия у мышей и крыс

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Protocol for Data Collection and Analysis Applied to Automated Facial Expression Analysis Technology and Temporal Analysis for Sensory Evaluation

Протокол для сбора и анализа данных прикладной к автоматизированным мимические технологии анализа и временного анализа для сенсорной оценке

We demonstrate a method for capturing emotional response to beverages and liquefied foods in a sensory evaluation laboratory using automated facial ...

The Treadmill Fatigue Test: A Simple, High-throughput Assay of Fatigue-like Behavior for the Mouse

Бегущая испытания на усталость: Простой, высокая пропускная способность Количественный анализ Усталость типа поведения для мыши

Fatigue is a prominent symptom in many diseases and disorders and reduces quality of life for many people. The lack of clear pathogenesis and failure of ...

A Method for Manipulating Blood Glucose and Measuring Resulting Changes in Cognitive Accessibility of Target Stimuli

Метод Манипулирование глюкозы крови и измерение соответствующие изменения в когнитивной доступности Target раздражители

Much research in social psychology has investigated the impact of bodily energy need on cognition and decision-making.  As such, blood glucose, the body's ...

Short Session High Intensity Interval Training and Treadmill Assessment in Aged Mice

Короткие сессии высокая интенсивность тренировки интервала и беговая дорожка оценки в возрасте мышей

High intensity interval training (HIIT) is emerging as a therapeutic approach to prevent, delay, or ameliorate frailty. In particular short session HIIT, ...