Name: extraction of extracellular vesicles from whole tissue
Uploaded: 2019-02-07T14:30:00
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著者は、博士リチャード ・ スキーと提供し、丁重にこのプロトコルを開発するために使用する動物を気遣うフロリダ州大学研究室動物資源をありがとうございます。我々 は下流の小胞のキャラクタリゼーションと FSU 生物科学イメージング資源施設に使用される質量分析作業と夏 liu さん、博士 Rakesh シンと、フロリダ州立大学並進科学研究所支援のために感謝します。本研究では、透過型電子顕微鏡の使用。最後に、博士 Mandip Sachdeva (フロリダ A & M 大学) は、このメソッドの開発で使用される腫瘍の標本の寄付を感謝いたします。本研究は、授与賞数の下で健康の国民の協会の国立癌研究所と J.M.O (6AZ11) D.G.M. Ed 健康のフロリダ部とエセル ・ ムーア アルツハイマー病研究プログラムからの助成金によって支えられました。R01CA204621 D.G.M. に授与

頭脳全体は、制度上の動物の使用およびフロリダの州立大学のケア委員会 (IACUC) から承認が得られました。12 マウス脳の合計 (各年齢別グループから 3 脳: 2、4、6、および 8 ヶ月) EV 抽出、上記16C57BL/6 J から背景が使用されました。肺の腫瘍の標本は、フロリダの農業および機械大学 IACUC の承認の下で博士 Mandip Sachdeva によって寛大に寄贈しました。肺腫瘍は、ひと癌細胞株 ...

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小型 Ev における器官形成、成熟と機能だけでなく、腫瘍微小環境におけるの役割に関して多くの科学的関心が生成されました。全体的にみて、この研究では、脳全体または腫瘍の標本からそのまま EVs の抽出最適化されたワークフローを提供します。このメソッドが簡単に適応のある小さな分泌小胞の ex vivo 評価さらに機会を提供する他の固体組織の仕事のためかもしれないここで肺腫瘍由?...

小さな細胞小胞 (Ev) は、エンドソーム派生エクソソームと広範な生物医学的関心のある小さな膜小屋ミクロベシクルに含まれます。小型 Ev は、生物活性タンパク、脂質、および病気プロセスの多数の重要な役割を果たすと考えられている総称して核酸を含む 50 250 nm 膜結合型ベシクルの異種集団で構成されます。神経変性疾患とプリオン疾患、感染プロセス、自己免疫・炎症性条件と腫瘍の増殖や転移1,2,3にこれらの小胞を特に関与して研究を進めています。,4,5,6,7,8,9,10,11,12,13。 分離そしてこれらの小胞の浄化のための再現性・厳格な方法の開発に平行関心を生成している病因における EVs の意義に急速な生物医学研究。
EV の特性の歴史と現在の挑戦は、小型 EV のサブポピュレーションを完全に分離することができないことをされています。この課題は、異なる小胞の形成を支配する異なる分子メカニズムの私達の限られた理解の主因です。これらの区別を convolutes サイズ、密度、およびさらに集団間の生物学的製剤の貨物を重複します。このような課題の一部には広く濃縮技術を異なる所で隔離された小胞の下流における矛盾を提供する、カテゴリの EV 集団を照らすに世界的な努力を損なう使用もされました。
それは動物や人間の体液、血漿、尿を含む小胞を分離する技術を記述する生体内での最近の研究と in vitro における細胞培養上清、集から EV の特性の大半が実行されていることは注目に値する、と唾。一方、EVs が流通に大量に存在するこれらの小胞が細胞間コミュニケーション イベントで重要な役割を果たして、細胞組織の間質に存在をも認識します。癌の中では、間質性の EVs が癌細胞播種、転移性成長14,15がん微小環境を調節する際に特に重要な可能性があります。したがって、開発と最適化の固体組織標本から小胞を抽出する手法で価値があります。これらのメソッドは、直接研究器官に手段を提供するまたは腫瘍由来の EVs 小さな生検と部分的または完全臓器切除を含む、臨床検体から収穫されます。
この研究と当社研究所16刊以前のレポートでは、EV 濃縮方法論のいくつかの主要な現在の懸念に対処を目指して: 1) を分離し、現在最高の基準に EVs を浄化する再現性のある手法について説明するにはフィールドで受け入れ2) 小型 EV subpopulations エンドソーム派生エクソソーム; 高濃縮を分離しようとする・ 3) さらに評価の目的のための固体組織標本からこれらの小胞の抽出のためのプロトコルを提供します。
最近、Kowal と同僚は、分離し、匹敵するショ糖密度勾配17より大きい有効性によって EV subpopulations を浄化する比較的小規模な iodixanol の密度勾配を説明します。引用における密度 1.1 g/mL、一貫性のある比較的軽い密度分数でキャプチャされた樹状細胞由来 EVs 高エクソソームこの存在の割合が高いと最も一致する信じられるエンドソーム蛋白質で濃縮しました。割合です。作者によれば、これら「善意」exosomal 蛋白質はいくつかアネキシン タンパク質17、EHD4、ADAM10 CD81 腫瘍感受性遺伝子 101 (TSG101) syntenin 1 を含まれています。我々 はその後ペレス ・ ゴンザレスら18と全く脳由来 EVs16を分離する続く差動遠心分離のプロトコルで記述された組織解離法を成功するためにこの手法を適応しました。また、下流定量的および比較私たちの研究所の19に記載された小胞タンパク質の質量分析のための連続したプロトコルを組み合わせることによって EV プロテオームの特性でこのメソッドの有用性を示した。この仕事20脳の前頭葉から EVs が豊かな丘の研究室からあった。
本研究では、この手法に手の込んだ、EVs の固体腫瘍から分離に当研究室から最近公開されたプロトコルのアプリケーションを拡張します。私たちの知る限り、これは生体内の腫瘍の標本 ex から EVs を豊かにするためのプロトコルを記述する最初の研究です。このメソッドは、新規の診断バイオ マーカーとその腫瘍形成における役割として EVs で広範な関心を与え、科学研究者の数が増えている貴重なを可能性が高い証明します。臨床的観点から間質性 EVs は組織学的評価は限られた標本を中心に、素晴らしい診断的価値を抱くことが。私たちの希望は、ここで概説している方法は再現手法が新鮮なまたは冷凍動物または人間手術標本から、明らかに病気の発症に重要な役割これら小さな将来の仕事のための道を舗装 EVs を収穫するための基盤を提供小胞を再生可能性があります。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1017px;" width="1017">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">0.45 &#181;m filter</td>
			<td style="width:183px;">VWR</td>
			<td style="width:176px;">28145-505</td>
			<td style="width:355px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">12 mL ultracentrifuge tubes</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">331372</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">5.5 mL ultracentrifuge tubes</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">344057</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-Alix antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-7129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-Calnexin antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-11397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-CD63 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Abcam</td>
			<td style="width:176px;">ab59479</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-CD81 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-9158</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-Flotillin 2 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-25507</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-HSC70 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-7298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-Syntenin-1 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-100336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">anti-TSG101 antibody</td>
			<td style="width:183px;">Santa Cruz</td>
			<td style="width:176px;">sc-7964</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Dounce homogenizer</td>
			<td style="width:183px;">DWK Life Sciences</td>
			<td style="width:176px;">885300-0015</td>
			<td>Loose-fit pestle (clearance of 0.889&#8211;0.165&#8239;mm) used.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">EZQ protein quantification kit</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:176px;">R33200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">FA-45-6-30 rotor&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:176px;">5820715006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">FEI CM120 Electron Microscope</td>
			<td style="width:183px;">TSS Microscopy</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">goat anti-rabbit IgG (Fab fragment)</td>
			<td style="width:183px;">Genetex</td>
			<td style="width:176px;">27171</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">HALT phosphatase inhibitor (100x solution)</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:176px;">78420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">HALT protease inhibitor (100x solution)</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:176px;">78438</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Hibernate E medium</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:176px;">A1247601</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">MLS-50 swinging-bucket rotor</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">367280</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">NanoSight LM10</td>
			<td style="width:183px;">Malvern</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Optima MAX-XP Benchtop Ultracentrifuge&#160;</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">393315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Optima XE-100 ultracentrifuge</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">A94516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Optiprep</td>
			<td style="width:183px;">Sigma</td>
			<td style="width:176px;">D1556</td>
			<td>60% iodixanol in sterile water solution</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Q Exactive HF Mass Spectrometer</td>
			<td style="width:183px;">ThermoFisher Scientific</td>
			<td style="width:176px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">rabbit anti-goat IgG</td>
			<td style="width:183px;">Genetex</td>
			<td style="width:176px;">26741</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">rabbit anti-mouse IgG</td>
			<td style="width:183px;">Genetex</td>
			<td style="width:176px;">26728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Refracto 30PX (refractometer)</td>
			<td style="width:183px;">Mettler Toledo</td>
			<td style="width:176px;">51324650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">S-4-104 rotor</td>
			<td style="width:183px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:176px;">5820759003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">SW 41 Ti swinging-bucket Rotor</td>
			<td style="width:183px;">Beckman Coulter</td>
			<td style="width:176px;">333790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:304px;">Tabletop 5804R centrifuge</td>
			<td style="width:183px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:176px;">22623508</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

extraction of extracellular vesicles from whole tissue

循環と格子間原子小さな膜結合型細胞小胞 (Ev) 新規診断や予後バイオ マーカーのアッセイの開発のための有望なターゲットを表し、可能性の広大なスペクトルの進行での重要なプレーヤーとして病気。現在の研究は複数の細胞から分泌される小胞のキャラクタリゼーションに焦点を当ててより良い組織の種類は神経変性、炎症、癌などの条件の病因に EVs の役割を理解します。しかし、グローバルに一貫した、再現性のあるテクニックを分離し、小胞を浄化は進行中のまま。また前のヴィヴォ固体ティッシュから EVs の抽出方法、やっとのことで説明します。ここでは、さらに特性評価のための脳、腫瘍標本を含む全体の新鮮なまたは冷凍の組織から関心の小型 Ev を抽出するための詳しいプロトコルを提供します。この電子顕微鏡および小胞の肺浸潤特性だけでなく、EV 蛋白質の量的な質量を含む複数のダウン ストリーム解析法の適応性を示します。

組織解離、差動遠心分離および小胞のグラデーションの浄化の概要は、図 1に表示されます。グラデーション精製 EVs の形態学的及び肺浸潤の確認は、図 2でハイライトされます。再現可能な密度の 10-30 %iodixanol の勾配超遠心法を次の図が表示されます、上方に移行する 2 (光 Ev) の分数と割合 5 (密な Ev)、2 つの異なる小胞集...

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Extraction of Extracellular Vesicles from Whole Tissue

全体組織からの細胞の小胞の抽出

ここでは、我々 は脳、腫瘍標本を含む全体の組織から小さな細胞小胞 (Ev) を分離するための詳しいプロトコルを提供します。このメソッドでは、さらに下流解析の固体ティッシュから EVs を抽出する再現性のある手法を提供しています。

Circulating and interstitial small membrane-bound extracellular vesicles (EVs) represent promising targets for the development of novel diagnostic or ...

このプロトコルは、下流の元生体分析のために組織全体の標本から小さな細胞外小胞を抽出および分離するための厳格で再現可能な技術を提供します。現在達成可能な最高レベルの純度の中で、この方法は腫瘍を含む様々な組織標本に分泌される間質性小胞の直接的形態学的、免疫性の特徴、および深い特徴付けを促進する。ここでは、脳および肺腫瘍標本からの組織EVの分離を実証する。しかし、この技術は、多様な、良性、または他の腫瘍標本を用いた研究にも適用することができる。まず、Hibernate-E培地で、0.4〜1.0グラムの組織ごとに10ミリリットルの解離バッファーを調製します。50ミリリットルチューブのバッファーに新鮮または凍結した組織全体を追加し、20分間摂氏37度の温水浴でインキュベートします。この後、解離緩衝液中の最終的な1倍濃度に対するプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を添加する。ティッシュと溶液をホモジナイザーを緩いフィットダウンに注ぎます。サンプルあたり約30の遅いストロークを使用して、組織を穏やかに解約します。次いで、解約組織と緩衝液を50ミリリットル円錐形チューブに移す。500x gで遠心分離機を5分間摂氏4度で、細胞と残りの繊維または凝集組織断片をペレットする。上清をきれいな50ミリリットルの円錐形チューブに移し、遠心分離機を2,000x gで、摂氏4度で10分間ペレットにして大きな細胞破片を捨てます。この上清をきれいな50ミリリットルの円錐形チューブに移し、遠心分離機を10,000x gで40分間摂氏40分間移し、望ましくない大きな小胞または小さなアポトーシス体をペレットにします。0.45マイクロメートルフィルターを通して上澄みをきれいな12ミリリットルの超遠心チューブにデカントします。次に、サンプルを100,000x gで、摂氏4度で2時間超遠心分離し、小さなEVをペレットにする。上清をデカントし、超遠心チューブを5〜10分間反転させ、頻繁にタップしてチューブの側面に残留液を取り除きます。その後、EVペレットを0.25モルショ糖緩衝液の1.5ミリリットルに再懸濁する。パラフィルムでチューブを覆い、その後、EVを溶液に渦を出します。超遠心管を室温で10~15分揺らす。そして、もう一度渦。チューブの下部にある液体懸濁液を回収するために、1,000x g未満の速度でチューブを短く遠心分離します。必要に応じて、一晩で摂氏4度で保管してください。まず、60%イオデキサノールの1.5ミリリットルを、EVを含むスクローストリスバッファーの1.5ミリリットルに加え、30%イオデキサノールを含む最終的な溶液を作成します。ピペットは数回上下して溶液を完全に混合する。この溶液を5.5ミリリットルの超遠心チューブの底に移します。次に、60%のiodiキサノールストックと超純水を混ぜ、20%と10%の両方の溶液を調製します。注射器と18ゲージ針を使用して、20%iodiキサノール溶液の1.3ミリリットルを測定し、慎重に底の勾配の上に重ねます。針のベベルをチューブの内側と接触させ、メニスカスのすぐ上に置き、密度インターフェイスで層を混合しないように溶液をドロップする必要があります。次いで、10%のiodiキサノール溶液の層1.2ミリリットルを20%層の上に、同じ技術を用いた。慎重にバランスをとり、ローターバケットに超遠心チューブをロードします。スイングバケットローターの加速と減速速度を最低速度に、遠心分離機を268,000x g、摂氏4度に50分間設定します。サンプルが遠心分離されている間、密度勾配の1から10の分数に対応する各サンプルのラベル10 1.5ミリリットルマイクロ遠心分離管。遠心分離が完了したら、ローターバケットからチューブをそっと取り出し、安定したホルダーに入れます。ピペット10の490マイクロリットルのシリアル分画は、勾配の上部から対応するチューブに入った。屈折計を使用して、分数の屈折率を測定する。次いで、各分画をクリーン12ミリリットルの超遠心チューブに移す。各チューブに1x PBSの5ミリリットルを加え、ピペットをゆっくりと上下に加え、混ぜます。チューブの上部に1x PBSの追加6ミリリットルを追加し、慎重に再び混ぜます。100,000x gで、摂氏4度でチューブを超遠心分離し、小さな小胞を再ペレットします。上清をデカントし、タンパク質分析のために小胞をライシングする前にチューブを乾燥させたり、形態解析のためにEVを再懸濁させます。タンパク質分析のためにEVを分解するには、プロテアーゼ阻害剤を含む強力なリシスバッファーの40マイクロリットルをEVペレットに加えます。パラフィルムを各チューブの上に置き、渦を激しくする。次に、室温で20分間チューブを揺らし、再び渦を起させます。サンプルを1,000x gで30~60秒間短遠分化し、サンプルボリューム全体を回収する。各サンプルを新しい1.5ミリリットルマイクロ遠心分離チューブに移し、さらに処理できるようになるまで20~80°Cの温度で保管します。精製したライセートを免疫ブロット分析用に調製するには、5xレムリサンプルバッファーをサンプルに加えて、最終濃度の1xを得ます。サンプルを摂氏95度で5~10分煮ます。次に、1 から 10 の等量の分数を 10% SDS ページゲルにロードします。均質な組織の等しい質量をロードする。精製したライゼート中のEVタンパク質を確認し、相対EVの比率を比較するために、電気泳動とウェスタンブロット分析を行います。本研究では、細胞外小胞を抽出し、組織全体から精製する。10~30%のiodiキサノール勾配の超遠心化の後、光EVの集団は2分の2まで移動し、密集したEVの集団は組織の種類に応じて5分の5まで移動するのを見ることができます。この勾配画分の代表的な免疫ブロットは、小さな腫瘍由来のEVを分数5で効率的に分離および精製することを示す。特に、肺腫瘍標本は、以前に脳組織全体から採取された光EVと比較して、密集したEVで濃縮されているように見える。代表的なナノ粒子追跡分析と分数を含む主要な小胞中の組織由来小胞の電子顕微鏡検査は、小胞全体の濃縮および保存を示す。小さなEVの既知のサイズと構造と一致しています。インタースティシャルEVは、新しい診断または予後バイオマーカーアッセイの開発のための有望なターゲットを表します。この技術は、下流の有用性のための小胞の抽出と精製のためのツールを研究者に提供します。全体またはリズされた組織のEVの抽出後、プロテオーム、ゲノム、およびリピドミック分析を含む小胞の広範な特徴付けが行われ得る。さらに、サンプルは、よりターゲットを絞ったアプローチに使用することができます。組織標本から直接分離された小胞は、腫瘍の起源を含む疾患メカニズムに関するさらなる洞察を提供することができ、将来的に重要な診断または予後のツールを提供する可能性があります。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Neutrophil Extracellular Traps Generated by Low Density Neutrophils Obtained from Peritoneal Lavage Fluid Mediate Tumor Cell Growth and Attachment

低密度の好中球によって生成された好中球細胞外トラップは仲介する腹腔洗浄液から得られた腫瘍細胞の増殖と添付ファイル

Activated neutrophils release neutrophil extracellular traps (NETs), which can capture and destroy microbes. Recent studies suggest that NETs are involved ...

Studying Normal Tissue Radiation Effects using Extracellular Matrix Hydrogels

細胞外マトリックスヒドロゲルを用いた正常組織放射線効果の研究

Radiation is a therapy for patients with triple negative breast cancer. The effect of radiation on the extracellular matrix (ECM) of healthy breast tissue ...

Extraction of Aqueous Metabolites from Cultured Adherent Cells for Metabolomic Analysis by Capillary Electrophoresis-Mass Spectrometry

毛細血管電気泳動質量分析によるメタボロミクス解析のための培養付着細胞からの水性代謝産物の抽出

Metabolomic analysis is a promising omics approach to not only understand the specific metabolic regulation in cancer cells compared to normal cells but ...

Isolation of Exosome-Enriched Extracellular Vesicles Carrying Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor from Embryonic Stem Cells

胚性幹細胞からの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子を運ぶ外生エンリッチ細胞小胞の分離

Embryonic stem cells (ESCs) are pluripotent stem cells capable of self-renewal and differentiation into all types of embryonic cells. Like many other cell ...

Isolation and Functional Assessment of Human Breast Cancer Stem Cells from Cell and Tissue Samples

細胞および組織サンプルからのヒト乳がん幹細胞の単離と機能評価

Breast cancer stem cells (BCSCs) are cancer cells with inherited or acquired stem cell-like characteristics. Despite their low frequency, they are major ...

In Vivo Immunogenicity Screening of Tumor-Derived Extracellular Vesicles by Flow Cytometry of Splenic T Cells

In Vivo Immunogenicity Screening of Tumor-Derived Extracellular Vesicles by Flow Cytometry of Splenic T Cells

インビボ 脾臓T細胞のフローサイトメトリーによる腫瘍由来細胞外小胞の免疫原性スクリーニング

Immunogenic cell death of tumors, caused by chemotherapy or irradiation, can trigger tumor-specific T cell responses by releasing danger-associated ...

Generating and Imaging Mouse and Human Epithelial Organoids from Normal and Tumor Mammary Tissue Without Passaging

継代なしの正常および腫瘍乳腺組織からのマウスおよびヒト上皮オルガノイドの生成とイメージング

Organoids are a reliable method for modeling organ tissue due to their self-organizing properties and retention of function and architecture after ...

An Enrichment Method for Small Extracellular Vesicles Derived from Liver Cancer Tissue

肝癌組織由来の微小細胞外小胞の濃縮法

Small extracellular vesicles (sEVs) derived from tissue can reflect the functional status of the source cells and the characteristics of the tissue's ...

Pancreatic Cancer-Derived Tumor Organoids and Fibroblasts from Fresh Tissue

Establishment of Pancreatic Cancer-Derived Tumor Organoids and Fibroblasts From Fresh Tissue

Establishment of Pancreatic Cancer-Derived Tumor Organoids and Fibroblasts From Fresh Tissue (Video) | JoVE 

膵臓癌由来腫瘍オルガノイドおよび線維芽細胞の新鮮組織からの樹立

Tumor organoids are three-dimensional (3D) ex vivo tumor models that recapitulate the biological key features of the original primary tumor tissues. ...

Diagnosis of Vitreoretinal Lymphoma Using Cell-Free DNA

Cell-Free DNA Extraction of Vitreous and Aqueous Humor Specimens for Diagnosis and Monitoring of Vitreoretinal Lymphoma

Advancing VRL Diagnosis Using Cell-Free DNA Extraction from Vitreous Humor (Video) | JoVE

網膜硝子体リンパ腫の診断とモニタリングのための硝子体および房水検体の無細胞DNA抽出

Vitreoretinal lymphoma (VRL) represents an aggressive lymphoma, often categorized as primary central nervous system diffuse large B-cell lymphoma. To ...