Name: preparation of fungal and plant materials for structural elucidation using dynamic nuclear polarization solid-state nmr
Uploaded: 2019-02-12T14:30:00
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이 작품은 국립 과학 재단 NSF OIA-1833040를 통해 지원 되었다. 국가 높은 자기장 실험실 (NHMFL) DMR 1157490와 플로리다의 상태를 통해 국립 과학 재단에 의해 지원 됩니다. NHMFL에서 매스 DNP 시스템 S10 OD018519 NIH와 NSF 체-1229170에 의해 일부 자금입니다.

1. 13C, 15N 표시 Aspergillus fumigatus 성장의 액체 매체
<ol><li>레이블이 없는의 준비와 13C, 15N 표시 된 성장 매체 참고: 모두 효 모 추출 물 펩 포도 당 매체 (YPD)와 향상 된 최소한의 중간43 곰 팡이 문화 유지 관리를 위해 사용 되었다. 압력가 마로 소독 후 모든 단계는 오염을 최소화 하기 위해 층 류 후드에서 수행 됩니다.<ol>
<li>레이블이 없는 ...

생 화 확 적인 방법에 비해, 고체 NMR 장점이 아닌-파괴 및 고해상도 기술로. NMR 작곡 분석, 양적 이며 또한 대부분의 다른 분석 방법과 달리 않습니다는 불확실성에 의해 소개 되지 biopolymers의 한정 된 가용성. 현재 프로토콜의 탄수화물이 풍부한 바이오 소재 및 기능성된 고분자에 대 한 미래의 연구를 촉진 한다. 그러나, 그것은 유의 공명 할당 및 데이터 분석 시간이 많이 소요 될 수 있습니다 및 ?...

탄수화물은 에너지 저장, 구조 건물, 및 세포 인식 및 접착 등 다양 한 생물학 과정에서 중심 역할을 한다. 그들은 세포 벽에 식물, 균 류, 조류, 박테리아1,2,3의 기본적인 구성 요소는 농축 됩니다. 세포 벽 역할을 항균 요법4,,56,7,8 대 유망 대상으로 바이오 연료 및 바이오 소재의 생산에 대 한 중앙 소스 , 9.
이러한 복잡 한 자료의 현대 이해는 수 십년의 4 개의 주요 생 화 확 적인 또는 유전자 방법을 사용 하 여 구조적 특성에 전념 했다 노력에 의해 실질적으로 고급 되었습니다. 첫 번째 주요 방법 의존 순차적 치료 가혹한 화학 물질이 나 효소를 사용 하 여 다른 부분으로 세포 벽을 무 너 뜨 리는 뒤에 작곡 및 각 분수10에서 설탕의 연계 분석. 이 방법은 고분자, 도메인 배포에 광명 하지만 해석 생체의 화학 및 물리적 특성으로 인해 오해의 소지가 있을 수 있습니다. 예를 들어 알칼리 추출 물 분수 유래와 비교 해도 덜 구조화 된 분자의 단일 도메인에서 또는 공간적으로 분리 된 분자에서 여부를 결정 하기가 어렵습니다. 둘째, 추출 된 부분 또는 전체 세포 벽 또한 측정 될 수 있다 또한 다른 분자11,12,13, 사이의 가교 되 나 공유 결합을 솔루션 NMR을 사용 하 여 14,15. 이 방법에서는, 화학식 앵커의 상세한 구조를 탐색할 수, 있지만 제한 류, 상대적으로 적은 수의 가교 사이트 및 안정화 비 공유 효과의 무지의 낮은 용 해도 인해 있을 수 있습니다. 다 당 류 패킹, 수소 결합, 반 데르 발스 힘, 정전기 상호 작용 및 폴리머 녹 채를 포함 하 여. 셋째, 바인딩 선호도 결정 있다 생체 외에서 사용 하 여 절연된 류16,,1718,19, 정화 절차를 실질적으로 변경할 수 있습니다. 구조와 이러한 생체의 속성입니다. 이 메서드는 또한 정교한 증 착 및 생 합성 후 고분자의 어셈블리를 복제 하도록 실패 합니다. 마지막으로, 표현 형, 세포 형태학 및 특정 세포 벽 구성 요소의 감쇠 생산 유전 돌연변이의 기계적 성질 류의 구조 기능에 조명 하지만 더 분자 증거 이러한 다리 필요 단백질 기계20의 조작된 기능을 가진 거시적인 관측.
개발 및 응용 프로그램 다차원 고체 NMR 분광학의 최근 발전 구조 퍼즐을 해결 하기 위한 독특한 기회를 도입 했습니다. 2D/3D 고체 NMR 실험 구성의 고해상도 조사 및 주요 섭 동 하지 않고 기본 상태에서 탄수화물이 풍부한 재료의 아키텍처를 사용합니다. 1 차 및 2 차 세포 벽 식물, 촉매로 처리 바이오 매스의 구조 연구가 성공적으로 실시 되어 세균의 biofilm 안료 유령 버섯에 그리고, 최근에 작가, 병원 성 균 류에서 그대로 세포 벽에 의해 Aspergillus fumigatus 21 , 22 , 23 , 24 , 25 , 26 , 27 , 28 , 29 , 30 , 31. 동적인 핵 분극 (DNP)32,33,34,35,36,,3738 의 개발 , 39 , 40 , 41 , DNP로 감도 향상 현저 하 게 단축에 이러한 복잡 한 생체 실험 시간 42 실질적으로 NMR 구조 설명을 촉진 한다. 여기에 설명 된 프로토콜 동위 원소 레이블 A. fumigatus 곰 팡이 및 곰 팡이 준비 절차 및 공장 샘플 고체 NMR 및 DNP 특성화에 대 한 자세히 설명 합니다. 유사한 라벨 절차 변경 된 매체와 다른 균에 적용 되어야 합니다 그리고 샘플 준비 절차 다른 탄수화물이 풍부한 생체 재료에 일반적으로 적용 되어야 합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Ammonium Molybdate Tetrahydrate</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>12054-85-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AMUPol</td>
			<td>Cortecnet</td>
			<td>C010P002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytical weighing balance</td>
			<td>Ohaus</td>
			<td>B730439218</td>
			<td>Model PA84C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioclave 16 L</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470230-598</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biosafety Cabinet</td>
			<td>Labconco corporation</td>
			<td>302319100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Boric acid</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9222</td>
			<td>store at 15-30 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cobalt(II) Chloride Hexahydrate</td>
			<td>Honeywell|Fluka</td>
			<td>60820</td>
			<td>&#8805;98 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Copper(II) Sulfate Pentahydrate</td>
			<td>BDH</td>
			<td>BDH9312</td>
			<td>&#8805;98 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning LSE shaking incubator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>7202152</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D2O</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151882</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>d6-DMSO</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>151874</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>d8-glycerol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>447498</td>
			<td>&#8805;99 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dialysis tubing 3.2 kDa</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D2272</td>
			<td>132724</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dipotassium Phosphate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>BDH9266</td>
			<td>&#8805;98 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glycerol</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>G5516</td>
			<td>&#8805;99.5 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heraus Megafuge 16R Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fischer Scientific</td>
			<td>750004271</td>
			<td>Maximum RCF 25,830 x g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HR-MAS Disposable Insert Kit</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>B4493</td>
			<td>Kel-F</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iron(II) Sulfate Heptahydrate</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>14498</td>
			<td>&#8805;99+ %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Sulfate Heptahydrate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>10034998</td>
			<td>store at 18-26 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Manganese(II) Chloride Tetrahydrate</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>11563</td>
			<td>&#8805;99 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monopotassium Phosphate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470302-254</td>
			<td>&#8805;99 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH Meter</td>
			<td>Mettler Toledo</td>
			<td>B706689216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetrasodium Ethylenediaminetetraacetate</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>13235-36-9</td>
			<td>&#8805;99.5 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zinc Sulfate Heptahydrate</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>33399</td>
			<td>&#8805;98 %</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12C3, d8-glycerol</td>
			<td>Cambridge Isotope Laboratory</td>
			<td>CDLM-8660</td>
			<td>12C3, 99.95%; D8, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>13C6-glucose</td>
			<td>Sigma Alrdrich</td>
			<td>364606</td>
			<td>&#8805;99 % (CP)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15N-sodium nitrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>364606</td>
			<td>&#8805;98 % 15N, &#8805;99 (cp)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3.2 mm sapphire NMR rotor</td>
			<td>Cortecnet</td>
			<td>B6939</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3.2 mm Silicone plug</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>B7089</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4 mm MAS Rotor Kit</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>H14355</td>
			<td>Zirconia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of fungal and plant materials for structural elucidation using dynamic nuclear polarization solid-state nmr

이 프로토콜 보여줍니다 얼마나 균일 하 게 13C, 15N 표시 된 곰 팡이 자료 수 생산과 실험 어떻게이 부드러운 소재 고체 NMR 및 감도 향상 DNP 진행 한다. 식물 바이오 매스의 샘플 처리 절차 또한 상세한입니다. 이 방법을 사용 하면 일련의 1d 및 2D 13C-13C의 측정 /15N 상관 관계 스펙트럼, 최소한의 섭 동으로 그들의 네이티브 국가에서 복잡 한 생체 재료의 고해상도 구조 설명 있습니다. 동위 원소 라벨 1d 스펙트럼의 강도 및 2D 상관 관계 스펙트럼에 분극 전송 효율을 측정 하 여 시험 될 수 있다. 동적인 핵 분극 (DNP) 샘플 준비의 성공 감도 향상 요인에 의해 평가할 수 있습니다. 다 당 류와 단백질의 구조적 측면을 검토 하는 추가 실험 3 차원 구조의 모델 이어질 것입니다. 이러한 메서드를 수정 및 탄수화물이 풍부한 재료, 식물, 균 류, 조류, 박테리아의 자연 세포 벽을 포함 하 여 뿐 아니라 합성 또는 탄수화물 중합체 및 다른 그들의 복잡 한 디자인의 넓은 범위를 조사 하기 위해 적응 수 있습니다. 분자입니다.

실질적으로 NMR 감도 강화 하 고 2D 13C-13C와 13C-15N 상관 관계 스펙트럼 분석 구성, 수 화, 이동성을 일련의 측정 및 포장의 가능 하 게 동위 원소 라벨 중합체 세포 벽 구조 (그림 1)의 3 차원 모델을 생성 하는 통합 된 것입니다. 성공 하면 균일 한 라벨 1 D 13C와 15N 스펙트럼의 완전 한 세트는 1 시간 이내 ?...

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Preparation of Fungal and Plant Materials for Structural Elucidation Using Dynamic Nuclear Polarization Solid-State NMR

곰 팡이의 준비 및 동적인 핵 분극 고체 NMR을 사용 하 여 구조 설명에 대 한 식물 재료

다차원 고체 NMR 분광학 및 동적인 핵 분극 (DNP) 조사 13C,15N 표시 된 곰 팡이 및 식물 견본을 준비 하기 위한 프로토콜 제공 됩니다.

This protocol shows how uniformly 13C, 15N-labeled fungal materials can be produced and how these soft materials should be proceeded for solid-state NMR ...

이 프로토콜은 고체 핵 자기 공명, 또는 NMR, 및 동적 핵 편광, 또는 DNP, 복잡한 생물 시스템 특성화를 위한 실험을 위한 곰팡이 및 식물 물질을 준비하는 데 사용될 수 있습니다. 이 기술은 우리가 그들의 네이티브 환경에서 원자 해상도 수준에 생물 물질을 조사 할 수 있습니다, 예를 들어, 전체 세포에서. 곰팡이 재료에 대한 고해상도 구조 정보의 수집은 항진균 제 개발에 도움이 될 것입니다.이 방법은 곰팡이 세포벽에서 복잡한 탄수화물의 구성 및 구조에 대한 통찰력을 제공하며 식물, 곰팡이, 조류 및 박테리아를 포함한 많은 탄수화물이 풍부한 유기체에 적용 될 수 있습니다. 몇몇 조사자는 그들의 세포 문화에 있는 곰팡이 오염으로 투쟁할 수 있습니다. 내 조언은이 오염을 방지하기 위해 사용하기 전에 매체와 장비를 철저히 살균하는 것입니다.이 데모는 NMR 또는 세포 배양에 경험이 거의 없는 조사관이 곰팡이 및 식물 시스템에서 이러한 기술을 구현하는 방법을 배우는 데 도움이 될 것입니다. 라벨이 없는 액체 성장 매체를 준비하려면 6.5그램의 효모 추출물 펩톤 덱스트로스 또는 YPD 분말을 증류수 100밀리리터에 녹인 다음 134°C에서 25분 동안 생성된 용액을 오토클레이브하십시오. 라벨이 부착되지 않은 고체 성장 매체를 준비하려면 6.5그램의 YPD 한천 분말을 증류수 100밀리리터에 넣고 중간을 섭씨 121도에서 25분 동안 오토클레이브한 후 중간을 섭씨 약 50도까지 냉각시킵니다.그런 다음, 녹은 고체 성장 매체의 13~15밀리리터를 개별 멸균 플라스틱 페트리 접시에 옮기고, 즉시 뚜껑을 접시에 놓습니다. 탄소-13, 질소-15 라벨 액체 성장 매체를 준비하기 위해, 필요에 따라 산 또는 염기로 6.6의 pH에 최소 배지를 함유하는 동위원소의 100밀리리터 부피를 조정한다. 다음으로, 테이블에 나열된 소금을 증류수 100밀리리터에 녹이고, 탄소-13, 질소-15 라벨액체 성장 매체에 추가하고, 121°C에서 25분 동안 생성된 용액을 오토클레이브한다.용액이 실온으로 냉각되면 100 마이크로리터의 미량 원소 용액을 탄소-13, 질소-15 라벨최소 배지의 전체 부피에 추가합니다. 곰팡이 재료를 성장시키기 위해, YPD 접시에 저장에서 곰팡이의 소량을 전송하는 접종 루프를 사용하고, 30섭씨 인큐베이터에서 이틀 동안 곰팡이를 배양. 인큐베이션의 끝에서, 탄소-13, 질소-15 라벨 액체 성장 매체에 활성 성장 곰팡이 가장자리를 전송하고, 흔들리는 인큐베이터에서 3 ~ 5 일 동안 분당 30도 및 220 회전에 문화를 배치하는 새로운 접종 루프를 사용합니다.다량의 곰팡이가 플라스크 바닥을 덮고 액체에 떠있는 경우 원심 분리로 곰팡이를 수집하고 상퍼를 폐기하십시오. 적절한 용액으로 펠릿을 수화하고, 포셉을 사용하여 NMR 및 DNP 분석을 위해 잘 수화된 펠릿의 약 0.5 그램을 수집합니다. 그런 다음, 나머지 물질을 원물 튜브에 20% 글리세롤 용액과 혼합하고 곰팡이 샘플을 영하 80도의 영하로 배치하여 장기 보관을 합니다.고체 NMR 분석을 위해 A.fumigatus를 준비하기 위해 먼저 3.5킬로달톤의 분자량 차단이 있는 투석 백을 사용하여 0.5그램 탄소-13, 질소-15 라벨이 부착된 곰팡이 샘플을 3일 동안 섭씨 4도에서 10밀리머 포산염 버퍼1리터에 투석합니다. 투석이 끝나면 원심분리를 위해 15밀리리터 튜브로 샘플을 옮기고, 균일하게 탄소-13 라벨이 부착되고 수분이 잘 수화된 샘플 페이스트를 70~80밀리그램으로 4mm 지르코늄 이산화저로 포장합니다. 금속 막대를 사용하여 샘플을 부드럽고 반복적으로 짜서 종이를 사용하여 여분의 물을 흡수합니다.그런 다음 로터를 단단히 캡하고 샘플을 분광계에 삽입하여 솔리드 스테이트 NMR 특성화를 합니다. DNP 분석을 위한 A.fumigatus를 준비하려면 탄소-13당 1.5밀리리터 미세센심분리기 튜브에 100마이크로리터를 추가하고, 탄소-15라벨이 부착된 진균 샘플, 각 튜브에 0.7밀리그램의 편광제를 용해하여 10mm+라디칼 스톡 솔루션을 형성합니다. 라디칼이 용액에 완전히 용해되도록 2~3분 동안 소용돌이를 일으키고, 편광제 용액의 50마이크로리터에 투석된 탄소 13, 질소-15 라벨이 부착된 곰팡이 샘플을 담그고, 유봉과 박격포를 사용하여 다공성 세포 벽에 래디칼의 침투를 보장하기 위해 혼합물을 약간 연마합니다.진균 샘플을 더 수화하고 펠릿을 3.2mm 사파이어 로터에 포장하기 위해 진층 펠릿에 급진적 인 용액30 마이크로 리터를 추가합니다. 시연된 대로 약간 짜서 과도한 DNP 용매를 제거하고 3.2mm 실리콘 플러그를 추가하여 수분 공급손실을 방지합니다. 그런 다음 일상적인 실험을 위해 NMR 분광계또는 전자레인지 조사 하에서 DNP 강화 스펙트럼을 측정하기 위한 DNP 분광계에 로터를 추가합니다.DNP 연구를 위한 식물 재료를 준비하려면 면도날을 사용하여 균일하게 탄소 13라벨이 부착된 식물 재료를 1~2mm 조각으로 자른다. 박격포와 유봉을 사용하여 최종 분말이 균일한 모양이 될 때까지 조각을 작은 입자로 갈아냅니다. 10밀리머 라디칼 스톡 솔루션 40마이크로리터를 식물 소재에 추가하고, 5분 동안 샘플을 가볍게 갈아서 라디칼과 균일한 혼합을 보장합니다.고지 샘플을 라디칼 스톡 솔루션의 20 마이크로리터로 수화하고, DNP 분석을 위해 3.2밀리미터 사파이어 로터에 평형 식물 샘플을 포장합니다. 그런 다음, 수분 공급의 손실을 방지하기 위해 실리콘 플러그를 삽입하고, DNP 분광계에 샘플을로드합니다. 동위원소 라벨링은 NMR 민감도를 실질적으로 향상시키고 세포벽 건축의 3차원 모델 의 생성을 위한 조성, 수분, 이동성 및 포장을 분석하기 위해 일련의 2차원 탄소-13-탄소-13 및 탄소-13-질소-15 상관 스펙트럼을 측정할 수 있게 한다.2D 탄소-13-탄소-13 스펙트럼에서 오프 대각선 신호를 얻기 어려운 경우 통계 라벨링이 발생했을 수 있습니다. 2개의 탄소-13 봉우리96 및 백만당 92 부(parts)는 포도당의 대표적인 탄소-1 신호입니다. 따라서, 35초의 긴 재활용 지연으로 측정된 정량적 탄소-13 직접 편광 스펙트럼에서의 강한 강도는 전형적으로 불완전한 투석 또는 세척으로 인한 소분자의 지배력을 나타낸다.잘 표지된 시료를 사용하면 생체 분자의 공간 근접성을 감지하고 그대로 세포벽의 구조 모델을 구성하기 위해 장거리 상관 관계를 더 측정할 수 있습니다. 이 기술은 많은 자연 발생 및 엔지니어링 재료의 구조 기능을 탐구할 수 있게 해주며, 탄수화물이 풍부한 생체 재료 및 기능성 폴리머에 대한 향후 연구를 용이하게 합니다. 일부 곰팡이는 인간에 있는 감염 또는 체계적인 질병을 일으키는 원인이 될 수 있기 때문에, 보호를 위해 라미나르 흐름 후드에 있는 곰팡이 물질을 취급하고 노출을 최소화하십시오.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Preparation and Delivery of Protein Microcrystals in Lipidic Cubic Phase for Serial Femtosecond Crystallography

준비 및 직렬 펨토초 결정학에 대한 지질 큐빅 단계에서 단백질 미세 배달

Membrane proteins (MPs) are essential components of cellular membranes and primary drug targets. Rational drug design relies on precise structural ...

연구

생화학

A Protein Preparation Method for the High-throughput Identification of Proteins Interacting with a Nuclear Cofactor Using LC-MS/MS Analysis

LC-MS / MS 분석을 이용하여 핵 공동 인자와 상호 작용 단백질의 높은 처리량 식별 단백질 제조 방법

Transcriptional coregulators are vital to the efficient transcriptional regulation of nuclear chromatin structure. Coregulators play a variety of roles in ...

Atomic Scale Structural Studies of Macromolecular Assemblies by Solid-state Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy

Supramolecular protein assemblies play fundamental roles in biological processes ranging from host-pathogen interaction, viral infection to the ...

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

Growing Protein Crystals with Distinct Dimensions Using Automated Crystallization Coupled with In Situ Dynamic Light Scattering

사용 하 여 다른 크기와 성장 단백질 결정 자동화 현장에서 동적 산란과 함께 결정 화

The automated crystallization device is a patented technique1 especially developed for monitoring protein crystallization experiments with the aim to ...

Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

Calibration-free In Vitro Quantification of Protein Homo-oligomerization Using Commercial Instrumentation and Free, Open Source Brightness Analysis Software

생체 외에서 교정 무료 단백질 호모-oligomerization 상업 계측 및 무료, 오픈 소스 밝기 분석 소프트웨어를 사용 하 여의 정량화

Number and brightness is a calibration-free fluorescence fluctuation spectroscopy (FFS) technique for detecting protein homo-oligomerization. It can be ...

Modifying Baculovirus Expression Vectors to Produce Secreted Plant Proteins in Insect Cells

식물 단백질 곤충 세포에서 분 비 생산 잠재 식 벡터를 수정

It has been a challenge for scientists to express recombinant secretory eukaryotic proteins for structural and biochemical studies. The ...

Measuring Interactions of Globular and Filamentous Proteins by Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (NMR) and Microscale Thermophoresis (MST)

Measuring Interactions of Globular and Filamentous Proteins by Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy NMR and Microscale Thermophoresis MST

Filamentous proteins such as vimentin provide organization within cells by providing a structural scaffold with sites that bind proteins containing plakin ...

Fast Grid Preparation for Time-Resolved Cryo-Electron Microscopy

시간 해결 된 극저온 전자 현미경 검사법을 위한 빠른 그리드 준비

The field of cryo-electron microscopy (cryo-EM) is rapidly developing with new hardware and processing algorithms, producing higher resolution structures ...

Preparation of Sample Support Films in Transmission Electron Microscopy using a Support Floatation Block

지원 부동 블록을 사용하여 전송 전자 현미경 검사법에서 샘플 지원 필름의 준비

Structure determination by cryo-electron microscopy (cryo-EM) has rapidly grown in the last decade; however, sample preparation remains a significant ...

Large-Scale Multi-Omics Genome-Wide Association Studies (Mo-GWAS): Guidelines for Sample Preparation and Normalization

Large-Scale Multi-Omics Genome-Wide Association Studies Mo-GWAS: Guidelines for Sample Preparation and Normalization

대규모 다중 오믹스 게놈 전체 연관 연구 (Mo-GWAS) : 샘플 준비 및 정상화에 대한 지침

Both gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) are widely used metabolomics approaches to detect ...