Name: detached leaf assays to simplify gene expression studies in potato during infestation by chewing insect manduca sexta
Uploaded: 2019-05-15T12:30:00
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저자는 이 연구에 사용된 곤충을 제공하고 애벌레 준비에 있는 그들의 전문지식에 대한 밥 패러와 알렉시스 공원에 감사하고 싶습니다. 원고의 비판적 검토에 대한 마이클 블랙번과 Saikat 고쉬에 추가 감사.
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USDA는 평등한 기회 제공자 이자 고용주입니다.

참고: 다음 프로토콜은 한 사람이 설정하고 관찰하고 샘플을 수집할 수 있도록 설계되었습니다. 생물학적 복제를 증가시키기 위해 동일한 설정의 다중 실행이 결합될 수 있다. 실험의 추가 반복은 유전자 발현에 가능한 일주 영향을 제거하기 위해 하루 중 동시에 설정되어야합니다. 이 프로토콜은 5개의 개별 수확 시간 지점에 대해 3개의 '감염된' 잎을 생성하도록 설계되었습니다. 각 시점마다 일...

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Accumulation of plant mRNAs responding to insect-derived cues.</a> Plant Physiology. , 701-710 (2001).</li><li>Halitschke, R., Schittko, U., Pohnert, G., Boland, W., Baldwin, I. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+interactions+between+the+specialist+herbivore+Manduca+sexta+(Lepidoptera,+Sphingidae)+and+its+natural+host+Nicotiana+attenuate.+III.+Fatty+acid-amino+acid+conjugates+in+herbivore+oral+secretions+are+necessary+and+sufficient+for+herbivore-specific+plant+responses.">Molecular interactions between the specialist herbivore Manduca sexta (Lepidoptera, Sphingidae) and its natural host Nicotiana attenuate. III. Fatty acid-amino acid conjugates in herbivore oral secretions are necessary and sufficient for herbivore-specific plant responses.</a> Plant Physiology. 125, 711-717 (2001).</li><li>Lortzing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transcriptomic+responses+of+Solanum+dulcamara+to+natural+and+simulated+herbivory.">Transcriptomic responses of Solanum dulcamara to natural and simulated herbivory.</a> Molecular Ecology Resources. 17, 1-16 (2017).</li><li>Hj&#228;lt&#233;n, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simulating+herbivory:+problems+and+possibilities.">Simulating herbivory: problems and possibilities.</a> Ecological Studies. 173, 243-255 (2004).</li><li>Lehtil&#228;, K., Boalt, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+and+usefulness+of+artificial+herbivory+in+plant-herbivore+studies.">The use and usefulness of artificial herbivory in plant-herbivore studies.</a> Ecological Studies. 173, 257-275 (2004).</li><li>Schittko, U., Preston, C. 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Products Available from: <a target="_blank" href="https://www.greatlakeshornworm.com/products/">https://www.greatlakeshornworm.com/products/</a> (2018)</li><li>. Raising Manduca sexta Available from: <a target="_blank" href="https://acad.carleton.edu/curricular/Biol/resources/rlink/description2.html">https://acad.carleton.edu/curricular/Biol/resources/rlink/description2.html</a> (2018)</li><li>. Teach life cycles with the tobacco hornworm Available from: <a target="_blank" href="https://www.carolina.com/teacher-resources/Interactive/teach-life-cycles-with-the-tobacco-hornworm/tr30179.tr">https://www.carolina.com/teacher-resources/Interactive/teach-life-cycles-with-the-tobacco-hornworm/tr30179.tr</a> (2018)</li><li>Chung, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Host+plant+species+determines+symbiotic+bacterial+community+mediating+suppression+of+plant+defenses.">Host plant species determines symbiotic bacterial community mediating suppression of plant defenses.</a> Scientific Reports. 7, 1-13 (2017).</li></ol>

기존의 전체 식물 약초 방법론의 사용은이 특정 연구의 목표를 달성하기 위해 불필요합니다 (즉, 감염에 대한 반응을위한 후보 유전자세트를 스크리브). 분리 된 잎 정제의 명백한 장점은 허브 분석 을 수행하는 데 걸리는 시간을 단축하는 것입니다. 클립 케이지가있는 전체 식물의 다루기 힘든 특성이 제거되고 2 주 어린 식물이 잎을 수확하는 데 사용할 수 있기 때문에 더 빨리 수행됩니다. 또한 ...

초초는 식물이 공격을 식별하고 생존을위한 적절한 반응을 탑재 할 수있는 일련의 분자 이벤트를 움직입니다. 식물은 곤충을 먹어도 두 가지 기본 단서를 받습니다. 하나는 조직에 물리적 인 손상에서 다른 하나는 곤충 특정 물질에서. 손상 관련 분자 패턴(DAMPs)은 애벌레 입부분에 의해 생성된 손상에 반응하여 방출되고 호르몬 자스몬산 및 방어 유전자의 전사증가를 초래하는 잘 정의된 상처 반응을 유발한다1. 가장 잘 알려진 DAMPs 중 하나는 체계인이며, 잎이 상처입은 후 더 큰 프로젠틴단백질의 절단에 의해 형성되는 폴리펩티드는 2,3. 자스몬산 상처 반응은 애벌레 타액, 장 내 분당 (역류제) 및 대변 (frass)에서 유래 될 수있는 허브 관련 분자 패턴 (HAMPs)에 의해 더욱 변조된다. 곤충은 이러한 물질을 사용하여 방어 반응을 향상시거나 회피합니다5. 전사 인자는 다운스트림 방어 유전자 6,7,8의조절을 통해 방어 반응에서 호르몬 신호로부터 메시지를 전달한다.
실험실 설정에 사용되는 일부 식물 - 곤충 상호 작용 연구는 곤충에 의해 공급의 자연적인 방법을 근사하는 것을 목표로, 시뮬레이션 유형입니다. 모의 초본은 일반적으로 곤충 마우스 부품의 특정 메커니즘을 모방하는 다양한 도구를 사용하여 식물 조직에 인공 손상을 만들어 Damps의 방출을 유발하고 방어 유전자의 생산을 유발합니다. 경구 분비물 또는 역류제와 같은 다른 곤충 특이적 성분은종종 HAMPs 9,10,11에서기여를 복제하기 위해 첨가된다. 특정 크기와 유형의 상처를 생성하고 정확한 양의 HAMPs를 적용하면 이러한 유형의 연구에 대한 한 가지 장점이 있으며 보다 재현 가능한 결과를 제공할 수 있습니다. 식물 조직에 손상을 달성 하는 자연 초원 연구, 필드 획득 또는 실험실 사육 곤충의 응용 프로그램에 의해 달성 되는, 상처 크기와 HAMP 금액 곤충 행동에 의해 제어 되 고 에 가변성을 추가 하기 때문에 종종 더 도전 데이터. 자연 대 시뮬레이션 방법과 그 장점과 단점은 문헌12,13,14에서잘 논의된다.
전사 인자와 같은 초기 신호 이벤트를 연구하려면 잎의 일정 비율이 비교적 짧은 시간 내에 소비되어야하므로 유충은 분석을 위해 잎이 얼어 붙을 때까지 즉시 츄를 시작하고 소비를 유지해야합니다. M. sexta는 애벌레 단계의 많은 동안 여러 solanaceous 식물에 탐욕스러운 피더, 시간의 상대적으로 짧은 금액에 최대 피해를 부여에 이상적 만들기15. 이는 곤충이 잎표면(16,17)에접촉한 직후식물반응이 거의즉시 발생하기 때문에 조기 시그널링 이벤트를 연구할 때 편리하다. 일반적으로 사용되는 클립 케이지 의 봉쇄 방법은 여러 케이지가 애벌레의 제거 또는 추가를 허용하기 위해 실험 전반에 걸쳐 지속적인 조정을 필요로하기 때문에 서투른 증명한다. 잎은 또한 동시에 여러 곤충 먹이를 지원하기에 충분히 크고 강한해야합니다. 감자 식물의 이러한 유형은 먹이를 관찰하기 위해 많은 양의 공간이 필요합니다. 애벌레는 종종 잎 표면의 밑면으로 옮겨지며 먹이 관찰을 매우 어렵게 만듭니다. 이러한 실험을 수행 하기 위해 전체 식물을 사용 하 여 명확 하 게 성가신.
현재 연구는 전체 식물보다는 페트리 접시에 고립 된 분리 된 잎을 사용하여 허브를 연구하는 전체 식물 접근 방식을 간소화하고 단순화합니다. 본 연구에서 프로토콜의 적용은 M. sexta 애벌레에 의한 초식성 손상 후 감자 잎에서 초기에 유도된 C2H2 전사 인자의 군의 관찰에 제한된다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1140px;" width="1139">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">agar substitute</td>
			<td style="width:217px;">PhytoTechnology Laboratories</td>
			<td style="width:173px;">G3251</td>
			<td style="width:471px;">product is Gelzan</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">containment vessel (6,12 or 24 well dish)</td>
			<td style="width:217px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:173px;">08-772-49, 08-772-50, 08-72-51</td>
			<td>many other companies sell these products</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">manduca eggs&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Carolina Biological Supply Company</td>
			<td style="width:173px;">143880</td>
			<td>30-50 eggs</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">manduca eggs&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Great Lakes Hornworm</td>
			<td style="width:173px;">NA</td>
			<td>50, 100, 250 or 500 eggs</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">manduca larvae</td>
			<td style="width:217px;">Carolina Biological Supply Company</td>
			<td style="width:173px;">call for specific larval instar requests</td>
			<td>any instar</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">manduca larvae</td>
			<td style="width:217px;">Great Lakes Hornworm</td>
			<td style="width:173px;">call for specific larval instar requests</td>
			<td>any instar</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">microcentrifuge tubes, 1.7 ml&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Thomas Scientific</td>
			<td style="width:173px;">1158R22</td>
			<td>these have been tested in liquid N2 and will not explode</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">Murashige &#38; Skoog (MS) Basal Medium w/Vitamins</td>
			<td style="width:217px;">PhytoTechnology Laboratories</td>
			<td style="width:173px;">M519</td>
			<td>used to make propagation medium</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">nutrient agar mix</td>
			<td style="width:217px;">PhytoTechnology Laboratories</td>
			<td style="width:173px;">M5825</td>
			<td>product is Murashige &#38; Skoog Basal Medium with vitamins, sucrose, and Gelzan</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">paper filter discs</td>
			<td style="width:217px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:173px;">09-805A</td>
			<td>Whatman circles-purchase to fit in petri dish</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">petri dish, 60X15 mm or 100X15 mm</td>
			<td style="width:217px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:173px;">FB0875713A or FB0875712</td>
			<td>purchase size appropriate for leaf size</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">potato tubers&#160;</td>
			<td style="width:217px;">any</td>
			<td style="width:173px;">B size (not organic)</td>
			<td style="width:471px;">suggest Maine Farmer&#8217;s Exchange</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">pots, 10&#34;&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Griffin Greenhouse Supplies, Inc.</td>
			<td style="width:173px;">41PT1000CN2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">preservative/biocide</td>
			<td style="width:217px;">Plant Cell Technology</td>
			<td style="width:173px;">NA</td>
			<td>product is PPM (Plant Preservative Mixture)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">seed potatoes for explant source</td>
			<td style="width:217px;">any</td>
			<td style="width:173px;">B size (not organic)</td>
			<td style="width:471px;">suggest Maine Farmer&#8217;s Exchange</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">slow release fertilizer (14-14-14 )</td>
			<td style="width:217px;">any</td>
			<td style="width:173px;">NA</td>
			<td>Osmocote is a popular brand name</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">soft touch forceps</td>
			<td style="width:217px;">BioQuip</td>
			<td style="width:173px;">4750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:279px;">soil mix</td>
			<td style="width:217px;">Griffin Greenhouse Supplies, Inc.</td>
			<td style="width:173px;">65-51121</td>
			<td>product is Sunshine LC1 mix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">sterile culture vessel&#160;</td>
			<td style="width:217px;">PhytoTechnology Laboratories</td>
			<td style="width:173px;">C2100</td>
			<td>Magenta-type vessel, PTL-100</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">sterile culture vessel&#160;</td>
			<td style="width:217px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:173px;">ICN2672206</td>
			<td>product is MP Biomedicals Plantcon</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

detached leaf assays to simplify gene expression studies in potato during infestation by chewing insect manduca sexta

곤충 초본의 유전자 발현 연구의 다영양 성질은 많은 수의 생물학적 복제본을 요구하며, 더 간단하고 능률적인 허브 프로토콜에 대한 필요성을 만듭니다. 츄잉 곤충의 교란은 일반적으로 전체 식물 시스템에서 연구된다. 이 전체 유기체 전략이 대중적이지만, 유사한 관찰이 단일 분리 된 잎에서 복제 될 수 있다면 필요하지 않습니다. 가정은 신호 변환에 필요한 기본 요소가 리프 자체 내에 존재한다는 것입니다. 신호 전달에 있는 초기 사건의 경우에, 세포는 섭동으로부터 신호를 수신하고 유전자 발현을 위해 분석되는 이웃 세포에 그 신호를 전송하기 만 하면 됩니다.
제안 된 방법은 단순히 분리의 타이밍을 변경합니다. 전체 식물 실험에서, 애벌레는 결국 식물에서 분리 되고 유전자 발현을 위해 분석되는 단 하나 잎에 수감됩니다. 절제의 순서가 반전되면, 전체 식물 연구에서 마지막에서, 분리 된 연구에서 첫 번째로, 공급 실험이 단순화됩니다.
솔라눔 튜트로섬 var. 케네벡은 간단한 조직 배양 배지에서 절달 전달에 의해 전파되고 원하는 경우 추가 성장을 위해 토양으로 옮겨질 수 있다. 잎은 모 공장에서 절제되어 페트리 접시로 옮겨져 먹이 분석이 M. sexta의애벌레 단계로 수행됩니다. 손상된 잎 조직은 신호 환전에서 비교적 초기 사건의 발현을 위해 분석된다. 유전자 발현 분석은 감염 특이적 Cys2-His2(C2H2) 전사 인자를 확인하, 초기 반응 연구에서 분리된 잎을 사용하는 성공을 확인하였다. 이 방법은 전체 식물 감염보다 수행하기 쉽고 적은 공간을 사용합니다.

리프 소비는 프로토콜의 성공을 정의합니다. 건강하고 정확하게 준비된 유충은 잎 표면에 배치 한 직후에 먹이를 시작해야하며 수유는 감염 시간 내내 상당히 일관된 방식으로 계속되어야합니다. 비디오1에서, 상단의 애벌레는 배치 직후에 먹기 시작하고 먹이를 주는 동안 일관된 속도를 유지한다. 이것은 감염 후에 초기 유전자 발현 사건을 계산하는 경우에...

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Detached Leaf Assays to Simplify Gene Expression Studies in Potato During Infestation by Chewing Insect Manduca sexta

제시 된 방법은 감자의 분리 된 잎에 만두카 sexta 애벌레의 응용 프로그램을 통해 자연 초식 동물 손상된 식물 조직을 만듭니다. 식물 조직은 곤충 허브에 대한 초기 반응에 관여하는 6개의 전사 인자 호몰로그의 발현을 위해 분석된다.

분리 된 잎 어설아는 곤충 만두카 sexta를 츄잉에 의해 감염 하는 동안 감자에 유전자 발현 연구를 단순화 하기 위해

The multitrophic nature of gene expression studies of insect herbivory demands large numbers of biological replicates, creating the need for simpler, more ...

이 프로토콜은 곤충 약초보에 반응하여 식물 유전자 발현을 측정하기 위한 간소화된 접근법을 사용합니다. 페트리 접시에서 분리된 분리된 잎을 사용하여, 곤충은 상대적으로 짧은 기간 동안 감염이 재발할 수 있는 유전자 발현 데이터에 기여하는 동안 쉽게 적용하고 모니터링할 수 있다. 이 프로토콜은 많은 식물/곤충 상호 작용에 적응될 수 있다.전체 플랜트 시스템의 기준 관측이 고려되는 경우. 곤충 먹이의 예측할 수없는 특성은 어려울 수 있습니다. 따라서 제대로 준비된 애벌레와 건강한 식물을 신뢰할 수 있는 공급은 성공의 가장 좋은 기회를 제공합니다.건강한 식물과 곤충이 어떻게 나타나고 행동해야 하는지 시각화하는 것은 특히 연구 분야의 새로운 연구자에게 최적의 결과를 달성하는 데 도움이 됩니다. 저와 함께 절차를 시연하는 것은 과일과 채소 실험실의 유전자 개선에 있는 분자 생물학자 프랜시스 페레즈가 될 것입니다. 노드 전파 조직 배양 감자 식물을 준비하려면 먼저 3 ~ 4 개의 노드가있는 절제 물질에서 재배 된 Kennebec plantlets를 얻습니다.멸균 블레이드를 사용하여 나뭇가지를 주 줄기 에 가깝게 자르고 잎 당 약 2 밀리미터의 가지 조직을 남겨 둡니다. 각 노드 위와 아래약 2밀리미터를 잘라 줄기에서 절개를 제거하고 분지와 함께 절달 전달 배지를 포함하는 멸균 조직 배양 용기에 노달 절단을 배치합니다. 그런 다음 24섭씨24도에서 2~3주 동안 식물 조직 배양실로 노달 절단을 옮기고 16시간 의 빛, 8시간 어두운 사진 기간을 옮는다.먹이를 위해 곤충을 준비하려면, M.sexta의 원하는 애벌레 단계를 얻고 애벌레의 크기에 따라 적절한 봉쇄 용기의 각 우물에 하나의 애벌레를 전송합니다. 흰색 종이줄 지어 여섯 적절하게 크기의 페트리 접시 세트를 개최 할 수있는 다섯 튼튼한 트레이를 사용하여 각 수확 시간 지점에 대한 배치 템플릿을 확인합니다. 각 트레이의 용지에 적당히 크기의 Petri 접시를 사용하여 6개의 원 세트를 추적하고 한 세트의 원 컨트롤 A, B 및 C와 감염된 A, B 및 C.에 레이블을 지정한 다음 각 배치 템플릿에 적절한 수확 시간을 표시합니다.다음으로, 배치 템플릿의 각 원에 대해 1.7 밀리리터 미세센심분리기 튜브를 라벨로 지정하여 변투, 식물 복제 편지 및 수확 시점을 적절하게 식별합니다. 모든 튜브가 라벨이 붙었을 때 멸균 필터 종이 디스크를 템플릿 당 하나의 페트리 접시에 넣고 각 접시에 과도한 액체 풀을 두지 않고 멸균물로 디스크를 적시십시오. 그런 다음 각 배치 템플릿의 각 원에 하나의 접시를 놓고 각 배치 템플릿 옆에 같은 연령과 상대 크기의 감자 식물 세 개를 놓습니다.감염을 시작하려면 멸균 가위를 사용하여 각 식물의 상위 2 가지 크기의 일치하는 잎을 제거하고 제어 페트리 접시에 잎 한 개와 각 식물의 감염 된 페트리 접시에 한 잎을 가능한 한 빨리 놓습니다. 모든 잎을 배치한 경우 소프트 터치 포셉을 사용하여 적어도 하나의 애벌레를 각 감염 된 접시에 가능한 한 빨리 옮기고 원하는 감염 시간에 대한 타이머를 설정합니다. 모든 애벌레가 먹고 있는지 확인하기 위해 먹이를 관찰하여 필요에 따라 먹이지 않는 애벌레를 대체하십시오.감염 시간의 끝에 있는 모든 잎에서 애벌레를 모두 제거하고 수확 타이머를 시작합니다. 각 수확 시점의 끝에서, 각 잎을 해당 튜브로 옮기고 즉시 튜브를 액체 질소로 떨어뜨려 RNA 가 절연될 때까지 영하 80도에서 저장하기 전에 잎 샘플을 동결한다. 건강 정확하게 준비 된 애벌레는 잎 표면에 배치 한 직후 공급을 시작해야하며, 공급은 감염 기간 동안 상당히 일관된 방식으로 계속해야합니다.이 잎의 바닥에있는 애벌레는 식물 물질을 소비하지 않았으며 감염에 실패한 예입니다. 이 잎은 2 주 된 nodal 전파 조직 배양 식물에서 분리 하 고 각 애벌레 단계에 대 한 다른 속도 및 먹이 스타일에 소비. 이러한 결과에 기초하여, 네 번째 인스타 애벌레는 더 밀접하게 식물 성장 감자 식물을 더 성숙한 토양 재배 감자 식물잎에 대한 손상을 평가하기 위해 선택되었다.이러한 유전자 발현 연구에서, M.sexta herbivory에 강력하게 반응하는 2개의 새로운 C2H2 아연 손가락 전사 인자는 감염 성 소사를 위한 분리된 잎의 사용을 지원하는 것으로 확인되었습니다. 나이와 크기일치 잎을 사용하고 균일성이 더 재현 가능한 데이터를 초래하기 때문에 각 실험에 대한 애벌레를 올바르게 무대에 올리는 것을 기억하십시오. 잎 조직은 스트레스 유도 반응성 산소 종 과 자스몬산 호르몬 유도체에 대해 분석 될 수있다.전체 전사, 프로테오메 또는 미생물군유전체 연구는 잎 조직에서도 수행될 수 있다.

Research

JoVE Journal

Environment

Transient Gene Expression in Tobacco using Gibson Assembly and the Gene Gun

깁슨 조립 및 유전자 총을 사용하여 담배 일시적인 유전자 발현

In order to target a single protein to multiple subcellular organelles, plants typically duplicate the relevant genes, and express each gene separately ...

연구

환경과학

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect Cryptococcus fagisuga Lind.

비치 스케일 곤충에 대한 저항에 대한 미국 밤나무를 (화면에 기술<em&gt; 크립토 fagisuga</em&gt; 린드.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

Measuring Rates of Herbicide Metabolism in Dicot Weeds with an Excised Leaf Assay

절제 잎 분석과 쌍자엽 잡초의 제초제 대사의 요금을 측정

In order to isolate and accurately determine rates of herbicide metabolism in an obligate-outcrossing dicot weed, waterhemp (Amaranthus tuberculatus), we ...

Double-stranded RNA Oral Delivery Methods to Induce RNA Interference in Phloem and Plant-sap-feeding Hemipteran Insects

체 관 부 식물 수액 공급 Hemipteran 곤충에 RNA 간섭을 유도 하 이중 가닥 RNA 구두 전달 방법

Phloem and plant sap feeding insects invade the integrity of crops and fruits to retrieve nutrients, in the process damaging food crops. Hemipteran ...

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

The Barnacle Balanus improvisus as a Marine Model - Culturing and Gene Expression

해양 모델-따개 비 Balanus improvisus 경작 및 유전자 발현

Barnacles are marine crustaceans with a sessile adult and free-swimming, planktonic larvae. The barnacle Balanus (Amphibalanus) improvisus is particularly ...

Experimental Protocol for Examining Behavioral Response Profiles in Larval Fish: Application to the Neuro-stimulant Caffeine

애벌레에서 행동 응답 프로필을 조사 하기 위한 실험 프로토콜: 신경 흥분 제 카페인에 응용

Fish models and behaviors are increasingly used in the biomedical sciences; however, fish have long been the subject of ecological, physiological and ...

A Precise and Autonomous System for the Detection of Insect Emergence Patterns

곤충 출현 패턴의 검출을 위한 정확 하 고 자치 시스템

Existing systems to measure insect emergence patterns have limitations; they are only partially automated and are limited in the maximum number of ...

Agrobacterium tumefaciens and Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation of Potato and the Promoter Activity of a Suberin Gene by GUS Staining

Agrobacterium tumefaciens and Agrobacterium rhizogenes-Mediated Transformation of Potato and the Promoter Activity of a Suberin Gene by GUS Staining

Agrobacterium tumefaciens 및 Agrobacterium rhizogenes-감자의 변환 중재와 거 스 얼룩에 의해 Suberin 유전자의 발기인 활동

Agrobacterium sp. is one of the most widely used methods to obtain transgenic plants as it has the ability to transfer and integrate its own T-DNA into ...

Leaf Area Index Estimation Using Three Distinct Methods in Pure Deciduous Stands

순수 낙엽 스탠드에서 세 가지 뚜렷한 방법을 사용한 잎 영역 지수 추정

Accurate estimations of leaf area index (LAI), defined as half of the total leaf surface area per unit of horizontal ground surface area, are crucial for ...

Potato Virus X-Based microRNA Silencing (VbMS) In Potato.

Potato Virus X-Based microRNA Silencing VbMS In Potato.

감자에서 감자 바이러스 X 기반 마이크로RNA 침묵 (VbMS)

Virus-based microRNA silencing (VbMS) is a rapid and efficient tool for functional characterization of microRNAs (miRNAs) in plants. The VbMS system has ...