Name: xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope
Uploaded: 2019-06-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי JSPS KAKENHI (מ20120009, 20120010, 19780129, 25292110, 23780190, 23248022, 15H02450, 16H04936, 16H04936, 17H03825, 18H02258)

הערה: תרשים סכמטי של פרוטוקול זה מוצג באיור 1.
1. דגימה: הרפיה מתיחות בתוך עמודת המים של קסיאו-תעלות
הערה: טיפול ההרפיה הבאה מומלץ לפני היישום LN2 כדי להימנע מהקפאה וממתחים-חפצים המושרה בהפצת המים הקפילאם.
<ol><li>הקף ענף ועלים לדיגום עם שקית נ...

שיטות ההתבוננות ב-"קריו-SEM" שהוצגו במסמך זה מעשיות לצורך המחשה מהירה של חלוקת המים בקנה מידה תאי. באמצעות שיטה זו, לחקור את השינויים בחלוקת המים בתוך עצה יכול לעזור להבהיר את המנגנון של מינים העצים סובלנות ללחץ אביוטיים (מחסור במים או הקפאה) או מתחים ביוטי (מחלת עץ).
הצעד המכרי?...

זמינות של משאבי מים (כלומר, משקעים, תוכן אדמה) קובעת בקפדנות את התמותה ואת ההתפלגות הגיאוגרפית של מינים צמחיים, שכן הם צריכים לקלוט מים מהאדמה ולהעביר אותו לעלים לייצור פוטוסינתטי. הצמחים חייבים לשמור על מערכת התחבורה. המים שלהם תחת תנודות המים בפרט, צמחים וודי ליצור מתחים גבוהים התעלות שלהם לאורך הזרמים דיות כמו, במקרים מסוימים, הם צריכים להחזיק את הכתר שלהם יותר מ ~ 100 m מעל הקרקע. כדי לשמור על עמודי המים בלחץ שלילי כה גבוה, מורכבות התעלות ברצף של תאים צינורי עם קירות תאים קשיחים והידרופוביות מסוג1. הפגיעות בתפקוד הלקוי של המין השני במינים היא הדטרמיננטה טובה של הישרדות המינים תחת אספקתהמים. בנוסף, לימוד מעמד המים של התעלות הוא חשוב להערכת מצבם הבריאותי של העצים הבודדים החשופים ללחצים בריאותיים או ביוטיים. מדידת זרימת sap או פוטנציאל מים יכול לספק הערכות של מעמד המים של צמח וודי בשל הפונקציה הידראולי משולבת של התעלות עצה. יתר על כן, להמחיש את התפלגות המים בתאי עצה יכול להבהיר את המצב של רכיבים בודדים של מערכת הידראולי עצה.
מספר טכניקות להמחיש את מצב המים של התעלות האלה הם3. השיטות הקלאסיות והשימושיות להתבוננות במסלולי המים ברקמת העור כרוכות בצביעת עמודת המים על-ידי הטבאתה בקצות הענפים החתוכים לצבע או על-ידי הזרקת צבע לתוך עץ עומד. צילומי רנטגן רכים מאפשרים גם הדמיה של הפצת מים של דיסקי עץ חתוכים בשל עוצמת הספיגה הדיפרנציאלי של קרני רנטגן של הלחות ב-עצה5,6. שיטות אלו, עם זאת, מספקות רק שירים של תנועת מים או הפגנת הפצות מאקרוסקופי במים. לאחרונה, טכניקות תצפית שאינן הרסניות, כגון מיקרו מיקוד רנטגן טומוגרפיה ממוחשבת (μct)7,8,9,10ודימות תהודה מגנטית (MRI)11, 12, שופרו באופן משמעותי כדי לאפשר השגחה של מים בתוך שתילים שלמים. לשיטות אלה שאינן הרסניות יש יתרונות גדולים בכך שאנו יכולים להתבונן במצב המים של xylem ללא אפקטים מלאכותיים, ואנו יכולים לעקוב אחר הדינמיקה של זרימת המים באמצעות הדמיה רציפה או החדרת סוכן ניגודיות10. עם זאת, אנחנו צריכים להשתמש ב-MRI מותאם אישית עבור הדמיה של הצמח או מתקן מיוחד עבור Μסינכרוטרון מבוסס-Ct כדי לקבל את התמונות אשר יכול לזהות תוכן המים ברמה התאית. בנוסף, למרות מערכת μct מבוסס סינכרוטרון לקבל תמונות משובחות עם רזולוציה מרחבית גבוהה, הדומה למיקרוסקופיה קלה7,8,9, תאים חיים יכולים להיפגע על ידי ה קרינה של אנרגיה גבוהה X-ray13,14. שימוש במיקרוסקופ אלקטרוני סריקה שבו יחידות ההקפאה מותקנות (ההקפאה-SEM) היא שיטה שימושית מאוד לאיתור בדיוק את המים ב-עצה ברמה התאית, למרות שהדבר דורש לקצור את הדגימה להסתכלות. כדי לתקן את המים ב-עצה, חלק מהגבעולים (כלומר, זרדים, ענפים או גבעולים) קפואים באתרו על ידי חנקן נוזלי (LN2). תצפיות של פני השטח של גזוז, יצורים קפואים על ידי ההקפאה-SEM לספק תמונות מוגדלות ביותר של מבנה עצה שממנו אנו יכולים לזהות את המים ב-עצה כקרח. הגבלה משמעותית של שיטה זו היא כי התבוננות רציפה על מתנוכי המים בתוך אותה דוגמית היא בלתי אפשרית. עם זאת, היישום של μCT או MRI עבור התבוננות רציפה של עצים החיים בשדה הוא מאוד מאתגר משום שמכשירים אלה אינם ניידים. לעומת זאת, לבית-SEM יש פוטנציאל לשימוש בטכניקה זו על עצים גדולים בניסויים בשטח כדי להמחיש בבהירות את תוכן המים במישור הסלולר בלבד, אלא גם ברמת מבנה עדינה יותר, למשל, מים בבורות בין-כלים15, מים ב החללים הבינתאיים16, או בועות בעמודת המים17.
מחקרים רבים התבוננות מים עצה על ידי ההקפאה-SEM דווחו 5,12,18,19,20,21,23. Utsumi ואח ' (1996) הקים בתחילה את הפרוטוקול להתבוננות של עצה באתרו על ידי הקפאת קיבעון של גזע חי באמצעות מילוי LN2 לתוך מיכל להגדיר על גזע21. הטמפרטורה של המדגם נשמרה למטה-20 ° c במהלך איסוף המדגם במהלך הכנת ההקפאה-SEM כדי למנוע המסת הקרח בתוך התעלות עצה. שיטה זו שימש להתבונן במים ב-עצה כדי להבהיר את הפצת המים תחת שינוי משטר המים11,12,24,25,26, 27,28, הווריאציה העונתית של הפצת מים21,29,30, ההשפעה של מחזורים להפשיר הקפאה17,31, 32, התפלגות המים בעץ רטוב5, שינויים בחלוקת המים במהלך המעבר מ סאפרווד לשמוע20, קורס הזמן העונתי של פעילות הקמשוקה והבידול של כלי33, והתוצאה הנגרמת על ידי מתחים ביוטיים מסוימים23,34. מוליכות הידראולית ופגיעות תעלות כדי קוויטציה גם אומתו באמצעות ההקפאה-SEM35,36. המלון שימש לחקר התפלגות אלמנט על פני השטח של מדגם המכיל מים37, והוא מצויד באנרגיה המדלדת בעזרת הספקטרומטריה.
הקפאת קיבוע של גזע חי אשר מכיל תעלות תחת מתח הידראולי גבוה לעיתים גורם cavitations אשר נצפו על ידי המקפיא-SEM כמו גבישי קרח שבורות לומן של תעלות38,39. במיוחד, מינים ברועלים עם תעלות ארוכות ורחבות יותר פגיעים לחפצים הנובעים ממתח, כגון הפחתת החיתוך של המדגם, גם אם בוצעו מתחת למים3,40. הממצאים החזותיים להיות בולט לאחר הדגימה של עץ הטרנס (כלומר, הדגימה בזמן היום) או בתנאים חמורים בצורת והם יכולים להטעות הערכה יתר של מופע מוגזם3,38, 39. לפיכך, יש לשחרר את המתח העובד בתעלות כדי למנוע את האפשרות הארטיטיבית3,12,39.
טכניקת שבר ההקפאה באמצעות סכין מותקן בחדר דגימה מועסק לעתים קרובות כדי לחשוף את משטח הדגימה עבור התבוננות ההקפאה-SEM. עם זאת, הקפאת שבורה מטוסים של רקמות הצמח וודי, במיוחד בחלקים רוחבי של xylem משני, הם גסים מדי כדי להתבונן בבהירות תכונות אנטומית ומים ברקמה6. היישום של קריוסטט עבור זמירה דגימה מאפשר הכנה מהירה ובאיכות גבוהה של משטחים לדוגמה20,23. המטרה הכוללת של שיטה זו היא מתן ראיות עם הרזולוציה אלקטרון מיקרוסקופ של התפלגות המים בסוגים שונים של תאים עצה באתרו ללא התרחשות של חפצי הדגימה. אנו מציגים את ההליך המעודכן שלנו, אשר כבר השתפר בהתמדה מאז שאימצנו אותו לראשונה, לגבי הדגימה, זמירה וניקוי משטח הדגימה להשגת מיקרוגרפים אלקטרונים באיכות גבוהה של דגימות מתקן ההקפאה של xylem.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:904px;" width="904">
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:249px;">coating material</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">Gold wire, 0.50 &#215; 1000 mm, 99.99 %, Parts No. 125000499&#160;</td>
			<td style="width:192px;"></td>
		</tr>
		<tr height="58">
			<td height="58" style="height:59px;width:249px;">cryo scanning electron microscope</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">JSM-6510 installed with MP-Z09085T / MP-51020ALS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:48px;width:249px;">cryostat</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">CryoStar NX70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">microtome blade</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">HP35 ULTRA Disposable Microtome Blades, 3153735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">tissue freezing embedding medium</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">Shandon Cryomatrix embedding resin, 6769006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope

מיקרוסקופ אלקטרוני סריקה מותקן מותקנת-יחידת (ההקפאה-SEM) מאפשר תצפית דגימה בטמפרטורות מתחת ושימש לחקר הפצת מים ברקמות הצמח בשילוב עם הקפאת טכניקות קיבוע באמצעות חנקן נוזלי ( ב 2). עבור מינים וודי, עם זאת, ההכנות להתבוננות במשטח החתך הרוחבי של עצה כרוכות בקשיים כתוצאה מכיוון של סיבי עץ. בנוסף, מתח גבוה יותר בעמודת המים ב-עצה יכול מדי פעם לגרום לשינויים העובדתיים בהפצת המים, במיוחד במהלך קיבוע המדגם והגבייה. במחקר זה, אנו להפגין הליך יעיל להתבונן התפלגות המים בתוך עצה של צמחים וודי באתרו באמצעות קריוסטט ו-הקפאה-SEM. בתחילה, במהלך איסוף המדגם, מדידת פוטנציאל המים עצה צריך לקבוע אם המתח הגבוה נמצא בתעלות עצה. כאשר הפוטנציאל הגלום במים נמוך (< ca. 0.5 MPa), נדרש הליך הרפיה במתח כדי לאפשר שימור טוב יותר של מעמד המים ב-עצה במהלך דגימת קיבוע ההקפאה. בשלב הבא, צווארון המים האטומה מוצמד מסביב לגבעול העץ ומתמלא ב-LN2 לצורך הקפאת הקיבעון של מעמד המיים של xylem. לאחר הקציר, יש לנקוט כדי להבטיח כי המדגם נשמר קפוא תוך השלמת ההליכים של הכנה לדוגמה להתבוננות. קריוסטט מועסק בבירור לחשוף את המשטח הרוחבי עצה. בתצפיות ההקפאה, התאמת הזמן לחריטה בהקפאה נדרשת כדי להסיר אבק כפור ולהדגיש את קצה קירות התא על משטח הצפייה. התוצאות שלנו להפגין את תחולת טכניקות ההקפאה-SEM להתבוננות של הפצת מים בתוך עצה ברמות סלולר ו subcellular. השילוב של ההקפאה-SEM עם שאינם הרסניים טכניקות תצפית באתרו יהיה מאוד לשפר את החקירה של הדינמיקה זרימת מים צמח וודי.

תמונות מייצגות של משטחי חיתוך רוחבי של עץ מחטניים וברועלים, שנצפתה על ידי המקפיא-SEM, מוצגים באיור 2. בהגדלה הנמוכה, האזור השחור בתמונות מציין את החללים שמהם המים לחלוטין או בחלקו נעלמים, והאזור האפור מצביע על קירות תא מסוימים, ציטופלסמה ומים (איו...

Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope

התבוננות בחלוקת המים בתוך העצה מספקת מידע משמעותי בנוגע לדינמיקה של זרימת מים בצמחי הודי. במחקר זה, אנו מדגימים את הגישה המעשית להתבונן הפצת מים עצה באתרו באמצעות קריוסטט ו-הקפאה-SEM, אשר מבטלת שינויים מעשיים במצב המים במהלך הכנת המדגם.

התפלגות המים xylem במפעלי וודי דמיינו בעזרת מיקרוסקופ אלקטרוני לסריקת ההקפאה

A scanning electron microscope installed cryo-unit (cryo-SEM) allows specimen observation at subzero temperatures and has been used for exploring water ...

המטרה הכוללת של פרוטוקול זה היא לספק לנו רזולוציה אלקטרומיקרוסקופית של חלוקת המים בסוגים שונים של תאים xylem במקום. שיטה זו שימשה להתבוננות במים בקסים על מנת להבהיר את חלוקת המים ומשטרי המים המשתנים, את השונות העונתית של חלוקת המים, את השפעת מחזורי ההקפאה/ההפשרה, את חלוקת המים בעץ רטוב ואת cavitation הנגרמת על ידי לחצים ביוטיים מסוימים. הקפאה-קיבעון של גזע חי תחת מתחים הידראוליים גבוהים לפעמים גורם cavitations מלאכותי, אשר נצפו על ידי cryo-SEM כמו גבישי קרח קרועים בלומן של צינור.הליך מעודכן זה מתמקד בהשגת מיקרוגרפים אווירוטום באיכות גבוהה של xylem ללא החפץ בהליך הדגימה. הדגמה בת קיימא היא קריטית מכיוון שיש מספר פרטים חשובים שלא ניתן להסביר בקלות. יחד עם זאת, קבלת הכשרה אינה קלה כי רק כמה מעבדות ברחבי העולם לתרגל שיטה זו.כדי להתחיל בהליך זה, יש להקיף ענף ועלים לדגימה בשקית ניילון שחורה כדי לצייד את פוטנציאל המים בין קסלם לעלים יותר משעה לפני הדגימה. באמצעות תא לחץ, לקבוע את פוטנציאל המים של לפחות שני עלים מהדגימה. כאשר פוטנציאל המים גבוה יותר ממינוס 0.5 מגה פסקל, ניתן לקצור דגימה לאחר ההקפאה.כאשר פוטנציאל המים נמוך ממינוס 0.5 מגה פסקל, להמשיך עם הטיפול עבור הרפיה. לתקן צווארון אטום למים סביב הגבעול, אשר יהיה מלא במים. באמצעות גיזום גיזום או מסור, לחתוך את הגבעול מתחת לפני המים ולשמור על הקצה החתך של המדגם מתחת למים.מעבירים את הדגימה למכל מים אחר במהירות האפשרית כדי למזער את חשיפת הקצה החתך לאוויר. עבור מינים בעלי עלים רחבים, ודא כי האורך מהנקודה שבה דגימת קריו עבור SEM תושג לקצה החתך של הגבעול שנקטף ארוך יותר מאורך הכלי המרבי של המדגם על מנת למנוע ממצאים הנגרמים על ידי מתח בתוך crysoample. לאחר מכן, מכסים את הדגימה בשקית ניילון שחורה כדי להפחית את התרחשותה.שמור על הקצה החתך של המדגם במים ולשמור על מצב זה במשך כ 30 דקות על מנת להרגיע את המתח xylem. לאחר מכן, למדוד את פוטנציאל המים שוב כדי לאשר את הרפיה של המתח xylem. ראשית, השתמש במספריים או בסכין שירות כדי לחתוך ולפתוח צד אחד של צווארון הדוק למים.חבר את הצווארון בחוזקה סביב הגבעול עם סרט דבק תוך החזקת הצמצם אופקית. לשים על כפפות בידוד, בבטחה להחזיק את כלי החנקן הנוזלי. הפעל חנקן נוזלי לתוך הצווארון עד שהוא מלא ולשמור אותו מלא על ידי הוספת בהתמדה חנקן נוזלי נוסף כדי להקפיא לחלוטין את המים בקסילם.לאחר זמן הקפאה מספיק, לנתק את הצווארון מן החלק הקפוא של גזע המדגם על מנת להסיר את החנקן הנוזלי. מיד להשתמש ביד יפה מסור כדי לקצור את הדגימה. ואז לכסות את המדגם הקפוא עם חתיכת רדיד אלומיניום או לשים אותו בחזרה לתוך צינור מדגם.מניחים במהירות את הדגימה שנקטפו לתוך מיכל מלא חנקן נוזלי. לאחסן את הדגימות במינוס 80 מעלות צלזיוס עד מוכן לבצע את התצפית. כדי להתחיל, להגדיר את הטמפרטורה של תא הדגימה של cryostat למינוס 30 מעלות צלזיוס, אשר בדרך כלל קר מספיק כדי לשמור על sap xylem של רוב הצמחים במצב קפוא.השתמש בסכין חדה או במסור דק כדי לקצץ את הדגימה לחתיכה קטנה שניתן להתאים למחזיק הדגימה של cryo-SEM. הר את החתיכה הגזוצה לצ'אק, מחזיק להקפאת קריוסטט, עם מדיום הטבעה המקפיא רקמות לחיתוך קריו. חבר את הצ'אק למחזיק דגימה של מיקרוטום של ההקפאה.חותכים את פני השטח על ידי גילוח חוזר ונשנה של חמישה עד שבעה חלקים בעובי מיקרומטר. חיתוך יותר מ-1,000 עד 2,000 מיקרומטר בעומק כולל לפני השטח ההתחלתיים שימושי להדגשת החלק הפגום של המדגם שנגרם על ידי חיתוך מראש. לאחר גיזום גס של משטח הדגימה, התאימו חלק לא שימוש של להב המיקרוטום מעל פני השטח של הדגימה.הרחב מעט את המרחק בין פני השטח של הדגימה לבין הלהב. וחותכים את פני השטח רק פעם או פעמיים. לאחר מכן, החלק שוב את הלהב והצב חלק לא שימוש של הלהב על משטח הדגימה.חזור על עיבוד חיתוך זה שלוש עד ארבע פעמים כדי להשיג משטח ברור ללא סימני סכין. לאחר החתך הסופי, הגדר את מיקום הלהב הרחק מהדגימה כדי למנוע מאבק להידבק לדגימה. ותנתק את הצ'אק מהמיקרוטום.לאחר מכן, חבר את הדגימה למחזיק דגימת קריו-SEM עם מדיום הטבעה המקפיא רקמות בתא ההקפאה. ראשית, השתמש בחנקן נוזלי כדי לשמור על טמפרטורה מתחת למינוס 120 צלזיוס בתא הדגימה cryo-SEM על פי המדריך למשתמש הציוד. לאחר מכן, מניחים את מחזיק הדגימה עם הדגימה המוכנה לתוך מיכל בידוד מלא חנקן נוזלי בתא ההקפאה.השתמש במוט החלפת דגימה כדי להחזיק את מחזיק הדגימה מתחת לחנקן הנוזלי. העבר במהירות את בעל הדגימה לתא טרום הפינוי של חדר הדגימה cryo-SEM ברגע שמתחילים בפינוי של חדר טרום הפינוי. כדי להתחיל, הפעל את מתח התאוצה של האקדח החשמלי.לאחר מכן, להעלות את הטמפרטורה של שלב הדגימה למינוס 100 מעלות צלזיוס. המתן מספר דקות עד שאבק הכפור יוסר ושרמת פני השטח של הקרח בתאי הקסים תרד מעט בהשוואה לקירות התא. לאחר מכן, להוריד את הטמפרטורה של שלב speiumen למינוס 120 מעלות צלזיוס.במחקר זה, שיטות תצפית cryo-SEM משמשים כדי לדמיין בבירור את חלוקת המים בקנה מידה תאי. בהגדלה נמוכה, האזור השחור בתמונות מציין את החללים שממנו נעלמים מים לחלוטין או בחלקם, בעוד שהאזור האפור מציין קירות תא קסילם, ציטופלסמה ומים. בהגדלה גבוהה, מתברר כי המים אינם אבודים לחלוטין מן הלומינה של שלוש קנה, המציין את התרחשותן של בועות מאקרו בסאפ xylem במקום.ביחס למינים בעלי עלים רחבים, התרחשות cavitation מזוהה בקלות בתוך כלי, בעוד קיומו של מים קשה להבחין בתוך סיבים, במיוחד בהגדלה נמוכה. ניתן להבדיל בין תאי ציטופלסמה ופרנצ'ימה לבין מים בתוך קנה ים או כלי שיט באמצעות מרקמי מישור קרח. ניתוח השפעת הטמפרטורה על תהליך תחריט ההקפאה מגלה כי אבק כפור סובלימציה בהדרגה, קרום בור אנדוטרקהיד מתבהר באמצעות התקדמות סובלימציה עם עליית הטמפרטורה.חלקיקי אבק כפור גדולים שנותרו יכולים להיות מסולקים על ידי הקפאת תחריט נוסף. אבל זה יכול להיות בעייתי כפי שהוא שלא לצורך מקטין את פני השטח של קרח בתעלות xylem. איכות התצפית הגבוהה מושגת במידה רבה באמצעות הכנת דגימה מדויקת.החלקת פני השטח עם הלהב החד של המיקרוטום חשובה במיוחד. החלקה לא מספקת על-ידי להב משומש יכולה לעיתים ליצור משטח מחוספס הדומה ל סימני סכין, או ליצור מופעים רבים של אבק מהחתכים. הקפאת מדגם ללא הרפיה של לחץ עמוד מים שלילי יגרום אינדוקציה חפץ של cavitation בצינורות xylem.גבישי קרח מקובצים נצפו בכלי דגימה שבהם המדגם לא היה רגוע. לעומת זאת, לא נצפו גבישי קרח מקובצים בדגימות המדגם הנינוחות עם פוטנציאל מים דומה. היישום של קיבוע הקפאה לצמחים חיים הסובלים מבצורת עלול לגרום לחפצים מבוססי תוצאה כגון גבישי קרח מקובצים באשכולות.החפצים האלה מובילים לפירוט מוטעה של מצב המים בצינור קסלם. לכן חשוב לאשר תחילה את פוטנציאל המים של דגימות לפני הקפאת קיבעון. למרות שהליך זה מספק תמונה של מה מצב בצינור xylem, עץ חי חייב להיהרס לתצפית.שילוב שיטות תצפית לא פולשניות אחרות כגון MRI או מיקרו-CT עם תצפית תמונה ברמת חברת הבת יעמיק את הבנתנו את הטבע בין הובלת מים לשימוש. התצפית על מצב המים שהוצגה על ידי נייר זה תספק גם שיטה לבירור הקשר של מים המעורבים בתאים ותגובות אנטומיות אחרות ללחץ אביוטי או ביוטי. Cryo-SEM מצויד בספקטרוסקופיית רנטגן פיזור אנרגיה או סים העליון שימשו לחקר הפצת אלמנטים על פני השטח של דגימה המכילה מים.שילוב של ניתוח יסודי והליך זה במסגרת דומה זו יכול לתת לנו ידע מעמיק על התנהגות התא הקסילם הקשורה למצב המים. בעת שימוש בחנקן נוזלי להקפאת קיבוע דגימות בחדר, אל תשכח לאוורר את החדר כדי למנוע מחסור בחמצן.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

נקבע מעבדה זרחן שטף מאגם המשקעים כמדד לטעינה הפנימית זרחן

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Measuring Fluxes of Mineral Nutrients and Toxicants in Plants with Radioactive Tracers

מדידת שטפים של חומרים מזינים ומינרליים רעלים בצמחים עם חומרים רדיואקטיביים

Unidirectional influx and efflux of nutrients and toxicants, and their resultant net fluxes, are central to the nutrition and toxicology of plants. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. I. איסוף דגימות וירוסים

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. חלק שלישי. איתור וירוסים על ידי RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

How to Create Conditioned Taste Aversion for Grazing Ground Covers in Woody Crops with Small Ruminants

כיצד ליצור סלידת טעם הותנה מַרעִית העטיפות בגידולים וודי עם מעלי גירה קטנות

Conditioned taste aversion (CTA) is a learning behavior process where animals are trained to reject certain feed after gastrointestinal discomfort has ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

חפירה באדמה Lysimeter עבור ההידרולוגי מצמידים, גיאוכימיות, וחקירות מיקרוביולוגיות

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

סיקור הפעילות האנדוקרינית במים באמצעות מסחרי-זמין<em&gt; במבחנה</em&gt; Transactivation bioassays

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

ליפיד הפקת וניתוח שיטה לאפיון קרקע חיידקים בניסויים עם דוגמאות רבות

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

פשוט לשתול טכניקה מחדש הקמת עצי שבו מתרחשת בתדירות מושאן

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Sample Preparation Method of Scanning and Transmission Electron Microscope for the Appendages of Woodboring Beetle

הכנה לדוגמה שיטת סריקה ומיקרוסקופ אלקטרון שידור לתוספות של החיפושית המשעממת

This report described sample preparation methods that scanning and transmission electron microscope observations, demonstrated by preparing appendages of ...