Name: xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope
Uploaded: 2019-06-20T12:30:00
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이 작품은 JSPS KAKENHI (아니. 2012009, 20120010, 19780129, 2529210, 23780190, 237848022, 15H02450, 16H04936, 16H04948, 17H03825, 18H2025)

참고: 이 프로토콜의 회로도 차트는 그림1에 나와 있습니다.
1. 샘플링 : 자일렘 도관의 물 기둥 내에서 긴장 완화
참고: 다음 장력 이완 처리는 LN2 적용 전에 실렘 물 분포에서 동결 및 장력 유도 아티팩트를 모두 피하기 위해 권장됩니다.
<ol><li>분기를 동봉하고 자일렘과 샘플링 하기 전에 2 시간 이상 잎 사이의 물 잠재력을...

이 백서에 소개된 극저온-SEM 관찰 방법은 세포 규모의 물 분포를 명확하게 시각화하는 데 실용적입니다. 이 방법을 통해 자일렘 내의 물 분포의 변화를 탐구하는 것은 잠재적으로 비생물적 스트레스 (물 부족 또는 동결) 또는 생물학적 스트레스 (나무 질병)에 대한 수종 내성의 메커니즘을 명확히하는 데 도움이 될 수 있습니다.
이 방법의 가장 중요한 단계는 샘플 수집 및 후?...

수자원의 가용성 (즉, 강수량, 토양 수분 함량)은 토양에서 물을 흡수하고 광합성 생산을 위해 잎으로 운반해야하기 때문에 식물 종의 사망률과 지리적 분포를 엄격하게 결정합니다. 플랜트는 변동하는 물 공급 하에서 물 수송 시스템을 유지해야 합니다. 특히, 우디 식물은 증발 스트림을 따라 자신의 도관에 높은 장력을 생성, 어떤 경우에는, 그들은 지상 ~ 100m 이상 자신의 크라운을 개최해야합니다. 이러한 높은 음압 하에서 물 기둥을 유지하기 위해 자일렘 도관은 단단하고 소수성 결찰 된 세포벽1을가진 관형 세포의 연속체로 구성됩니다. 각 종에서 자일렘 도관의 자일렘 기능 장애에 대한 취약성은 변동하는 물 공급 하에서종 생존의 좋은 결정자이다 2. 또한, 자일렘 도관의 물 상태를 연구하는 것은 비생물성 또는 생체 학적 응력을 받는 개별 나무의 건강 상태를 평가하는 데 중요합니다. 수액 유량 또는 물 전위를 측정하면 자일렘 도관의 통합 유압 기능으로 인해 우디 플랜트의 물 상태를 추정할 수 있습니다. 또한, 자일렘 셀에서 물의 분포를 시각화하면 자일렘 유압 시스템의 개별 구성 요소의 상태를 명확히 할 수 있습니다.
자일렘 도관의 물 상태를 시각화하기위한 몇 가지 기술이 존재3. 우디 조직에서 물 통로를 관찰하기위한 고전적이고 유용한 방법은 염색에 절단 가지의 끝을 침지하거나 서있는 나무 줄기에 염료를 주입하여 물 기둥을 염색하는 것을 포함한다4. 소프트 엑스레이 사진은 또한 xylem5,6의수분의 차동 X 선 흡수 강도로 인해 슬라이스 된 나무 디스크의 물 분포를 시각화 할 수 있습니다. 그러나 이러한 방법은 물의 움직임만을 제공하거나 물의 거시적 분포를 보여줍니다. 최근에는 마이크로 포커스 X선 컴퓨터 단층 촬영(μCT) 7,8,9,10및 자기 공명 영상(MRI)11과 같은 비파괴 관찰 기술 도12는, 그대로 의 묘목 내에서 자일렘 도관에서 물의 관찰을 허용하도록 크게 개선되었다. 이러한 비파괴적 방법은 인공 절단 효과 없이 자일렘의 수상태를 관찰할 수 있고, 순차적 이미징 또는 조영제(10)를 도입하여 물 흐름 역학을 추적할 수 있다는 점에서 큰 장점이 있다. 그러나, 우리는 세포 수준 수분 함량을 확인할 수 있는 심상을 얻기 위하여 식물 화상 진찰을 위한 주문을 받아서 만들어진 MRI 또는 싱크로트론 기지를 둔 μCT를 위한 전문화한 시설을 사용할 필요가 있습니다. 또한, 싱크로트론 기반 μCT 시스템은 광 현미경 7,8,9에필적하는 높은 공간 해상도로 미세한 이미지를 얻을 수 있지만, 살아있는 세포는 고에너지 X 선13,14의방사선 . 저온 단위가 설치되는 주사 전자 현미경 (cryo-SEM)을 사용하는 것은 관찰을 위해 샘플을 파괴적으로 수확해야하지만 세포 수준에서 자일렘에서 물을 정확하게 찾는 데 매우 유용한 방법입니다. 자일렘 도관에 물을 고정하기 위해, 줄기의 일부 (즉, 나뭇 가지, 가지 또는 줄기)는 액체 질소 (LN 2)에 의해 그 자체로 동결된다. 저온-SEM에 의해 트리밍, 냉동 표본의 표면의 관측은 우리가 얼음으로 자일렘 도관에서 물을 식별 할 수있는 자일렘 구조의 고도로 확대 된 이미지를 제공합니다. 이 방법의 현저한 한계는 동일한 샘플 내에서 물 이동성의 순차적 관찰이 불가능하다는 것입니다. 그러나, 이러한 기기는 휴대용이 아니기 때문에 필드에 살고있는 나무의 순차적 관찰을위한 μCT 또는 MRI의 적용은 매우 도전적이다. 대조적으로, cryo-SEM은 세포 수준뿐만 아니라 더 미세한 구조 수준(예: 혈관 간 구덩이15,물)에서 수분 함량을 명확하게 시각화하기 위해 현장 실험에서 큰 나무에 이 기술을 사용할 수 있는 잠재력을 가지고 있습니다. 세포간 공간16,또는 물 열(17)의거품.
저온-SEM에 의한 자일렘물을 관찰하는 많은 연구가 5,12,18,19,20,21,23으로보고되었다. Utsumi et al. (1996)은 처음에 LN 2를 스템(21)에 설정된 용기에 채우는 것을 통해 살아있는 트렁크의 동결 고정에 의해 소자렘의 관찰을 위한 프로토콜을 확립하였다. 시료의 온도는 자일렘 도관 내에서 얼음이 녹는 것을 피하기 위해 시료 수집 및 냉동-SEM 준비 동안 -20°C 이하로 유지되었다. 이 방법은 변화하는 물 정권11,12,24,25,26,변화 하의 물 분포를 명확히하기 위해 실렘에서 물을 관찰하는 데사용되었습니다. 27,28,물 분포의 계절 변화21,29,30,동결 해동 주기의 효과17,31, 32,젖은 나무5에있는 물의 분포, 수액에서 하트우드(20)로의 전환 시 물 분포의 변화, 암비 활동및 선박의 분화의 계절적 시간과정(33) 및 특정 생체 스트레스에 의해 유도 된 캐비테이션23,34. 캐비테이션에 대한 유압 전도도 및 도관 취약성도 저온-SEM35,36을사용하여 검증되었습니다. 에너지 분산X선분광법(EDX 또는 EDS)을 구비한 극저온-SEM은 물(37)을 함유하는 시편의표면에 대한 원소 분포를 연구하는데 사용되어 왔다.
높은 유압 장력 하에서 도관을 포함하는 살아있는 트렁크의 동결 고정은 때때로 도관38,39의내강에서 골절 된 얼음 결정으로 극저온 -SEM에 의해 관찰되는 인공 캐비테이션을 유발합니다. 특히, 더 길고 넓은 도관을 가진 광엽종은 수중에서실시하더라도 시료 절단에 의한 캐비테이션과 같은 장력 유발 아티팩트에 취약하다. 캐비테이션 아티팩트는 발생하는 나무 (즉, 낮 동안 샘플링) 또는 심한 가뭄 조건에서 샘플링 한 후 눈에 띄게되며 캐비테이션 발생 3,38의과대 평가로 이어질 수 있습니다. 39. 따라서, 도관에서 작동하는 장력은 예술적 캐비테이션3,12,39를피하기 위해 방출되어야한다.
시편 챔버에 설치된 칼을 사용하는 동결 파괴 기술은 종종 저온 -SEM 관찰을위해 시편 표면을 노출하는 데 사용됩니다. 그러나, 우디 식물 조직의 동결 골절 평면, 특히 보조 자일렘의 횡절편은 조직 내의 해부학적 특징과물을 명확하게 관찰하기에는 너무 거칠다 6. 시편을 다듬기위한 저온 극저온의 응용 프로그램은 샘플 표면(20,23)의신속하고 고품질의 준비를 할 수 있습니다. 이 방법의 전반적인 목표는 샘플링 아티팩트의 발생없이 현장에서 다양한 종류의 자일렘 세포에서 물 분포의 전자 현미경 해상도를 제공하는 것입니다. 우리는 자일렘의 고품질 전자 현미경 을 얻기 위한 표본 표면의 샘플링, 트리밍 및 세척과 관련하여 처음 채택된 이래로 꾸준히 개선된 업데이트된 절차를 소개합니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:904px;" width="904">
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:249px;">coating material</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">Gold wire, 0.50 &#215; 1000 mm, 99.99 %, Parts No. 125000499&#160;</td>
			<td style="width:192px;"></td>
		</tr>
		<tr height="58">
			<td height="58" style="height:59px;width:249px;">cryo scanning electron microscope</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">JSM-6510 installed with MP-Z09085T / MP-51020ALS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:48px;width:249px;">cryostat</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">CryoStar NX70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">microtome blade</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">HP35 ULTRA Disposable Microtome Blades, 3153735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">tissue freezing embedding medium</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">Shandon Cryomatrix embedding resin, 6769006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope

스캐닝 전자 현미경 설치 저온 장치(cryo-SEM)는 영하의 온도에서 시편 관찰을 가능하게 하며 액체 질소(LN)를 이용한 동결 고정 기술과 함께 식물 조직의 물 분포를 탐색하는 데 사용되어 왔습니다. 2). 우디 종의 경우, xylem 가로 절단 표면을 관찰하기위한 준비는 나무 섬유의 배향으로 인해 몇 가지 어려움을 수반한다. 또한, 자일렘 도관의 물 기둥의 높은 장력은 특히 샘플 고정 및 수집 중에 물 분포에 예술적 변화를 일으킬 수 있습니다. 본 연구에서, 우리는 저온 극저온 및 저온 -SEM을 사용하여 현장에서 우디 식물의 자일렘 내에서 물 분포를 관찰하는 효율적인 절차를 입증한다. 처음에, 샘플 수집 하는 동안, 자일렘 물 전위를 측정 하는 높은 장력이 자일렘 도관에 존재 여부를 결정 한다. 자일렘 물 전위가 낮을 때(ca. -0.5 MPa), 시료 동결 고정 중에 자일렘 도관에서 물 상태를 더 잘 보존하기 위해 장력 완화 절차가 필요합니다. 다음으로, 나무 줄기 주위에 방수 칼라가 부착되고 자일렘의 물 상태의 동결 고정을 위해 LN 2로 채워져 있습니다. 수확 후, 관찰을위한 샘플 준비 절차를 완료하는 동안 샘플이 동결 보존되도록주의를 기울여야합니다. 실렘 가로 절단 표면을 명확하게 노출시키기 위해 저온 극저온이 사용됩니다. 저온-SEM 관측에서, 동결 에칭을 위한 시간 조정은 서리 먼지를 제거하고 보기 표면에 세포벽의 가장자리를 강조하기 위하여 요구됩니다. 우리의 결과는 세포 및 세포 이하 수준에서 자일렘 내의 물 분포의 관찰을 위한 저온-SEM 기술의 적용성을 보여줍니다. 극저온-SEM과 비파괴적 관측 기법의 조합은 우디 식물의 물 흐름 역학의 탐사를 심오하게 향상시킬 것입니다.

극저온-SEM에 의해 관찰된 응비및 활엽수 자일렘의 가로 절단 표면의 대표적인 이미지는 그림2에 나와 있다. 낮은 배율에서 이미지의 검은 영역은 물이 완전히 또는 부분적으로 사라지는 구멍을 나타내고 회색 영역은 자일렘 세포벽, 세포질 및 물을 나타냅니다(그림2A). 높은 배율에서, 물은 3개의 기관지의 루미나로...

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Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope

xylem 내의 물 분포를 관찰하면 우디 식물의 물 흐름 역학에 관한 중요한 정보를 제공합니다. 이 연구에서는 시료 준비 중 물 상태의 실제 적 변화를 제거하는 저온 유지 및 저온 SEM을 사용하여 현장에서 자일렘 물 분포를 관찰하는 실용적인 접근 법을 보여줍니다.

극저온 스캐닝 전자 현미경으로 시각화된 우디 식물의 자일렘 물 분포

A scanning electron microscope installed cryo-unit (cryo-SEM) allows specimen observation at subzero temperatures and has been used for exploring water ...

이 프로토콜의 전반적인 목표는 우리에 게 전자 현미경 해상도 는 situ에서 자일렘 세포의 다양 한 종류에 물 분포의 해상도. 이 방법은 물 분포와 변화하는 물 정권, 물 분포의 계절적 변화, 동결/해동 주기의 효과, 습식 목재의 물 분포 및 특정 생물학적 스트레스에 의해 유도된 캐비테이션을 명확히 하기 위해 자일렘으로 물을 관찰하는 데 사용되어 왔다. 높은 유압 장력 하에서 살아있는 트렁크의 고정은 때때로 인공 캐비테이션을 발생, 이는 도관의 루멘에서 파열 된 얼음 결정으로 냉동 SEM에 의해 관찰된다.이 업데이트 된 절차는 샘플링 절차에서 아티팩트없이 자일렘의 고품질 의 항공 우주 현미경 그래프를 얻는 데 중점을 둡니다. 쉽게 설명 할 수없는 중요한 세부 사항이 많기 때문에 실행 가능한 데모는 매우 중요합니다. 동시에, 훈련을 얻는 것은 전 세계의 몇몇 실험실만이이 방법을 연습하기 때문에 쉽지 않습니다.이 절차를 시작하려면 검은 색 비닐 봉지로 샘플링을 위해 가지와 잎을 둘러싸서 자일렘과 샘플링 2 시간 이상 남깁니다. 압력 챔버를 사용하여 샘플에서 적어도 두 잎의 물 전위를 결정합니다. 물 전위가 약 0.5 메가파스칼보다 높을 때, 샘플을 동결 후 수확할 수 있다.물 전위가 마이너스 0.5 메가파스칼보다 낮을 때, 이완치료를 진행한다. 물로 채워질 줄기 주위에 방수 칼라를 고정합니다. 가지 치기 가위 또는 톱을 사용하여 수면 아래에서 줄기를 자르고 샘플의 절단 끝을 수중으로 유지하십시오.샘플을 가능한 한 빨리 다른 물 용기로 옮기면 절단 끝이 공기에 노출되는 것을 최소화합니다. 활엽종의 경우, 극저온 내에 장력 유도된 유물을 방지하기 위해 수확된 줄기의 절단 가장자리까지 SEM에 대한 냉동고 샘플이 수득되는 지점에서 길이가 샘플의 최대 용기 길이보다 길다는 것을 확인하십시오. 다음으로 샘플을 검은 색 비닐 봉지로 덮어 발생을 줄입니다.자일렘 장력을 이완시키기 위해 시료의 절단 끝을 물에 유지하고 약 30 분 동안이 상태를 유지하십시오. 그 후, 자일렘 장력의 이완을 확인하기 위해 다시 물 전위를 측정한다. 먼저 가위나 유틸리티 나이프를 사용하여 물가밀칼라의 한쪽을 자르고 엽니다.조리개를 수평으로 유지하면서 접착제 테이프로 줄기 주위에 칼라를 단단히 부착하십시오. 절연 장갑을 착용하고 액체 질소의 용기를 안전하게 보관하십시오. 액체 질소가 가득 차때까지 칼라에 넣고 자일렘의 물을 완전히 동결하기 위해 액체 질소를 꾸준히 추가하여 채우십시오.충분한 동결 시간 후, 액체 질소를 제거하기 위해 샘플 줄기의 냉동 부분에서 칼라를 분리한다. 즉시 미세 한 손 톱을 사용하여 샘플을 수확하십시오. 그런 다음 냉동 샘플을 알루미늄 호일로 덮거나 샘플 튜브에 다시 넣습니다.수확한 샘플을 액체 질소로 채워진 용기에 빠르게 넣습니다. 관찰을 수행할 준비가 될 때까지 샘플을 영하 80도에서 저장합니다. 시작하려면, 냉동 상태에서 대부분의 식물의 자일렘 수액을 유지하기에 충분히 추운 영하 30도 극저온의 표본 챔버의 온도를 설정합니다.날카로운 칼이나 미세톱을 사용하여 샘플을 극저온-SEM의 시편 홀더에 맞게 조정할 수 있는 작은 조각으로 다듬어보도록 한다. 다듬어진 조각을 극저온 홀더인 척에 장착하고, 극저온 단면에 티슈 동결 포함 배지를 장착합니다. 척을 극저온의 미세절의 표본 홀더에 부착합니다.5~7마이크로미터 두께의 단면을 반복적으로 면도하여 표면을 다듬습니다. 초기 표면에 대한 총 깊이1, 000 내지 2, 000 마이크로미터 이상 절단하는 것은 사전 절단으로 인한 시료의 손상된 부분을 용인시키는 데 유용하다. 시료의 표면을 대략 트리밍한 후, 시편 표면 위에 마이크로톤 블레이드의 사용하지 않은 부분을 조정합니다.시편표면과 블레이드 사이의 거리를 약간 넓어진다. 그리고 표면을 한두 번만 자른다. 그런 다음 블레이드를 다시 밀어 서 칼날의 사용하지 않은 부분을 시편 표면에 배치합니다.이 절단 처리를 3~4회 반복하여 칼 자국이 없는 맑은 표면을 얻습니다. 마지막 절단 후, 먼지가 샘플에 달라붙지 않도록 샘플에서 멀리 떨어진 블레이드의 위치를 설정합니다. 그리고 마이크로 토메에서 척을 분리합니다.다음으로, 저온-SEM 표본 홀더에 저온-SEM 표본 홀더에 저온-SEM 표본 홀더에 저온체 챔버에 조직 동결 포함 배지를 부착한다. 첫째, 장비 사용자의 매뉴얼에 따라 냉동-SEM 표본 챔버에서 영하 120°C 이하의 온도를 유지하기 위해 액체 질소를 사용합니다. 다음으로, 준비된 표본을 가진 표본 홀더를 저온챔버에 액체 질소로 채워진 절연 용기에 넣습니다.막대를 교환하는 표본을 사용하여 액체 질소 아래에 시편 홀더를 잡습니다. 시편 홀더를 냉동-SEM 표본챔버의 사전 피난실로 신속하게 이송하여 피난 전 챔버의 대피를 시작한다. 먼저 전기건의 가속 전압을 켭니다.다음으로, 표본 단계의 온도를 영하 100도까지 올립니다. 서리 먼지가 제거되고 자일렘 세포의 얼음 표면 수준이 세포벽에 비해 약간 감소할 때까지 몇 분 정도 기다립니다. 그런 다음 스페우미엔 스테이지의 온도를 섭씨 영하 120도로 낮춥습니다.이 연구에서는 극저온-SEM 관측 방법이 세포 척도에서 물 분포를 명확하게 시각화하는 데 사용됩니다. 낮은 배율에서 이미지의 검은 색 영역은 물이 완전히 또는 부분적으로 사라지는 구멍을 나타내고 회색 영역은 자일렘 세포벽, 세포질 및 물을 나타냅니다. 높은 배율에서, 물이 완전히 세 기관의 루미나에서 손실되지 않는 것이 명백해진다, 현장에서 자일렘 수액에 매크로 거품의 발생을 나타내는.넓은 잎 종에 관해서는, 캐비테이션 발생은 선박 내에서 쉽게 감지되며, 물 존재는 섬유 내에서 구별하기 어렵고, 특히 낮은 배율에서 구별하기 가 어렵습니다. 세포질과 빈혈세포는 얼음 비행기 질감을 통해 기관이나 혈관 내의 물과 구별될 수 있습니다. 동결 에칭 공정에 대한 온도의 효과를 분석한 결과, 서리 먼지가 점차 승화되고, 내세피 구덩이 막은 온도가 증가함에 따라 승화의 진행을 통해 더 명확해진다.남은 큰 서리 먼지 입자는 추가 동결 에칭에 의해 제거 될 수있다. 그러나 자일렘 도관의 얼음 표면 수준을 불필요하게 감소시킬 때 문제가 될 수 있습니다. 높은 수준의 관찰은 대체로 정확한 시편 준비를 통해 달성됩니다.마이크로톤의 날카로운 블레이드로 표면의 스무딩은 특히 중요합니다. 사용된 블레이드에 의한 스무딩이 부족하면 때로는 칼 자국과 유사한 거친 표면을 만들거나 상처에서 수많은 먼지가 발생할 수 있습니다. 음의 물 기둥 압력의 이완없이 샘플 동결은 자일렘 도관에서 캐비테이션의 관절 유도를 일으킬 것이다.클러스터된 얼음 결정은 시료가 완화되지 않은 시편 용기에서 관찰됩니다. 대조적으로, 유사한 물 잠재력을 가진 편안한 견본에서 클러스터된 얼음 결정은 관찰되지 않습니다. 가뭄을 겪고있는 살아있는 식물을 발생에 동결 고정의 응용 프로그램은 클러스터 된 얼음 결정과 같은 결과 기반 유물을 유도 할 수 있습니다.이러한 유물은 자일렘 도관의 물 상태를 오해합니다. 따라서 동결 고정 전에 먼저 시료의 물 전위를 확인하는 것이 중요합니다. 이 절차는 자일렘 도관의 상태를 이미지로 제공하지만 관찰을 위해 살아있는 나무를 파괴해야합니다.MRI 또는 micro-CT와 같은 다른 비침습적 관찰 방법과 자회사 수준의 이미지 관찰을 결합하면 물 운송과 사용 사이의 특성에 대한 이해가 깊어질 것입니다. 이 논문에 의해 도입된 수분 상태의 관찰은 또한 세포및 생물학적 또는 생물학적 스트레스에 대한 다른 해부학적 반응에서 혼합되는 물의 관계의 명확화를 위한 방법을 제공할 것이다. 에너지 분산 X선 분광법 또는 상단 시뮬레이션을 탑재한 Cryo-SEM은 물을 함유한 시편의 표면을 통해 원소 분포를 연구하는 데 사용되었습니다.원소 분석과 이 절차를 유사한 프레임에 결합하면 물 상태와 관련된 자일렘 세포 행동에 대한 심오한 지식을 제공할 수 있습니다. 실내에서 시료를 동결 고정하기 위해 액체 질소를 사용하는 경우 산소 결핍을 피하기 위해 방을 환기시키는 것을 잊지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

호수 퇴적물에서 실험실 결정 인 플럭스 내부 인 로딩의 측정으로

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

연구

환경과학

Measuring Fluxes of Mineral Nutrients and Toxicants in Plants with Radioactive Tracers

방사성 트레이서와 식물에 미네랄 영양 성분 및 독성 물질의 플럭스를 측정

Unidirectional influx and efflux of nutrients and toxicants, and their resultant net fluxes, are central to the nutrition and toxicology of plants. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

엔테로 바이러스 및 문화 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 바이러스 샘플의 I. 컬렉션

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

엔테로 바이러스 및 문화와 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 파트 III. RT-qPCR에 의한 바이러스 검출

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

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방목 접지가 작은 반추 동물과 우디 작물에 커버에 대해 어떻게 조절 맛 혐오감을 만드는 방법

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결합 문학, 지구 화학 및 미생물 조사를위한 토양 모형 매립 발굴

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

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A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

많은 샘플을 이용한 실험에서 토양 미생물을 특성화하기위한 지질 추출 및 분석 방법

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A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

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Sample Preparation Method of Scanning and Transmission Electron Microscope for the Appendages of Woodboring Beetle

목공 딱정벌레의 부속물을 위한 주사 및 투과 전자 현미경의 시료 제조 방법

This report described sample preparation methods that scanning and transmission electron microscope observations, demonstrated by preparing appendages of ...