Name: xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope
Uploaded: 2019-06-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av JSP KAKENHI (nr. 20120009, 20120010, 19780129, 25292110, 23780190, 23248022, 15H02450, 16H04936, 16H04948, 17H03825, 18H02258)

Merk: et skjematisk diagram av denne protokollen er vist i figur 1.
1. prøvetaking: strekk avslapping innen Vannsøyle av Xylem energibærere
Merk: følgende spenning avslapping behandling anbefales før LN2 -programmet for å unngå både frysing og spenning-indusert gjenstander i xylem vann fordelingen.
<ol><li>Legg en gren og blader for prøvetaking med en svart plastpose for å likevekt vann potensialet mellom xylem og...

The fryse-SEM observasjon metoder innført i dette papiret er praktisk for å tydelig visualisere vann fordelingen på en mobilnettet skala. Gjennom denne metoden, utforske endringene i fordelingen av vann i xylem kan potensielt bidra til å avklare mekanismen av treslag toleranse for abiotiske stress (vannmangel eller frysing) eller biotiske stress (tre sykdom).
Det mest avgjørende skritt i denne metoden er å bevare vann fordelingen karakteristisk for den innfødte vann status under prøvet...

Tilgjengelighet av vannressurser (dvs. nedbør, jord vanninnhold) avgjør strengt dødelighet og Geografisk fordeling av plantearter, siden de trenger å absorbere vann fra jorda og transportere den til bladene for fotosyntetiske produksjon. Planter må opprettholde sitt vann transport system under varierende vannforsyninger. Spesielt, Woody planter generere høye spenninger i sine kanaler langs transpirasjon bekker som, i noen tilfeller, de trenger for å holde sin krone mer enn ~ 100 m over bakken. For å opprettholde vannsøyler under så høyt negativt trykk, består xylem-kanalene av et kontinuum av rørformede celler med stive og hydrofobe lignified celle vegger1. Sårbarheten for å xylem dysfunksjon av xylem-kanaler i hver art er en god avgjørende faktor for arten overlevelse under varierende vannforsyning2. I tillegg studere vann status xylem energibærere er viktig for evalueringen av helsetilstanden til enkelte trær utsatt for abiotiske eller biotiske påkjenninger. Måler SAP flyte eller vann muligheter kanne skaffe anslår av en Woody plante ' vann rang på grunn av det integrert hydraulisk funksjonen av xylem rør. Videre kan visualisering av vann fordelingen i xylem-cellene avklare tilstanden til de enkelte komponentene i hydraulikksystemet i xylem.
Flere teknikker for å visualisere vannet status for xylem energibærere finnes3. Den klassiske og nyttige metoder for å observere vann trasé i Woody vev innebære farging av vannsøylen ved å senke endene av kuttet grener i et fargestoff eller ved å injisere et fargestoff i stående trestammer4. Soft x-ray Photography også tillater visualisering av vann distribusjon av skiver av tre plater på grunn av differensial X-ray absorpsjon intensiteten av fuktigheten i xylem5,6. Disse metodene, men bare gi spor av vann bevegelse eller demonstrere makroskopisk distribusjoner av vann. Nylig, ikke-destruktive observasjons teknikker, slik som Micro Focus X-ray beregnet tomografi (benvolum)7,8,9,10og magnetisk resonans imaging (MRI)11, 12, har blitt betydelig forbedret for å tillate observasjon av vann i xylem-kanaler innenfor intakt saplings. Disse ikke-destruktive metoder har store fordeler i at vi kan observere xylem ' s vann status uten kunstige skjære effekter, og vi kan spore vannstrømmen dynamikk ved sekvensiell Imaging eller innføre en kontrast agent10. Men vi trenger å bruke en tilpasset MRI for anlegget Imaging eller et spesialisert anlegg for Synchrotron-baserte Benvolum for å få bilder som kan identifisere cellulære nivå vanninnhold. I tillegg, selv om den Synchrotron-baserte benvolum system aktivert for å oppnå fine bilder med høy romlig oppløsning, som kan sammenlignes med lys mikroskopi7,8,9, kan levende celler bli skadet av stråling av høy energi X-ray13,14. Ansette en skanning elektronmikroskop der fryse-enheter er installert (fryse-SEM) er en svært nyttig metode for nøyaktig lokalisering av vann i xylem på cellenivå, selv om dette krever ødeleggende måte høsting prøven for observasjon. For å fikse vannet i xylem-kanaler, er en del av stilkene (dvs. kvister, grener eller stengler) frosset in situ av flytende nitrogen (LN2). Observasjoner av overflaten av trimmet, frosne eksemplarer av fryse-SEM gir svært forstørret bilder av xylem strukturen som vi kan identifisere vannet i xylem energibærere som is. En betydelig begrensning av denne metoden er at sekvensiell observasjon av vann bevegelighet innenfor samme prøve er umulig. Imidlertid er anvendelsen av Benvolum eller MRI for sekvensiell observasjon av trær som bor i et felt ekstremt utfordrende fordi disse instrumentene ikke er bærbare. I kontrast, har fryse-SEM et potensial for å bruke denne teknikken på store trær i feltet eksperimenter for å tydelig visualisere vanninnholdet på ikke bare cellenivå, men også på et finere struktur nivå, for eksempel vann i intervascular groper15, vann i intercellulære mellomrom16, eller bobler i vann kolonne17.
Mange studier observere xylem Water av fryse-SEM har blitt rapportert 5,12,18,19,20,21,23. Utsumi et al. (1996) etablerte først protokollen for observasjon av xylem in situ ved å fryse-fiksering av en levende stamme via fylling LN2 inn i en beholder satt på stammen21. Temperaturen på prøven ble opprettholdt under-20 ° c under prøvetaking og under fryse-SEM forberedelse for å unngå å smelte isen i xylem-kanaler. Denne metoden har blitt brukt til å observere vannet i xylem for å klargjøre vann fordelingen under skiftende vannregime11,12,24,25,26, 27,28, den sesongmessige variasjonen av vann distribusjon21,29,30, effekten av fryse-tine sykluser17,31, 32, fordelingen av vann i vått tre5, endringer i vann fordelingen under overgangen fra yteved til kjerne ved20, sesongmessige tid løpet av cambial aktivitet og differensiering av fartøy33, og kavitasjon indusert av visse biotiske spenninger23,34. Hydrauliske ledningsevne og rør sårbarhet for kavitasjon har også blitt verifisert ved hjelp av fryse-SEM35,36. Den er utstyrt med energi dispersive X-ray-massespektrometri (EDX eller EDS) som har blitt brukt til å studere element fordeling over overflaten av en prøve som inneholder vann37.
Freeze-fiksering av en levende stamme som inneholder rør under høy hydraulisk spenning noen ganger fører til kunstige kavitasjoner som er observert av Frys-SEM som brukket iskrystaller i lumen av energibærere38,39. Spesielt er løvtrær arter med lengre og bredere energibærere sårbare for spennings induserte artefakter, slik som kavitasjon forårsaket av prøve kutting, selv om det ble utført under vann3,40. Kavitasjon artefakter blir iøynefallende etter prøvetaking av et transpiring tre (dvs. prøvetaking i løpet av dagtid) eller under alvorlige tørke forhold, og de kan villede til en overvurdering av kavitasjon forekomst3,38, i 39. Derfor må spenningen som arbeider i energi rør frigis for å unngå artifactual kavitasjon3,12,39.
Den fryse-brudd teknikk ved hjelp av en kniv installert i et prøve kammer er ofte brukt for å avdekke prøveoverflaten for Freeze-SEM observasjon. Men fryse-brukket flyene av Woody plante vev, spesielt tverrgående deler av sekundær xylem, er for grovt til å tydelig observere Anatomiske egenskaper og vann i vevet6. Anvendelsen av en kryostaten for trimming av en prøve tillater rask og høy kvalitet utarbeidelse av prøve overflater20,23. Det overordnede målet med denne metoden er å gi bevis med elektron mikroskopi oppløsning av vann fordelingen i ulike typer xylem-celler in situ uten forekomst av prøvetaking gjenstander. Vi introduserer vår oppdaterte prosedyre, som har blitt stadig bedre siden vi først vedtok det, om prøvetaking, trimming og rengjøring av prøveoverflaten for å oppnå høy kvalitet elektron micrographs av fryse-faste prøver av xylem.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:904px;" width="904">
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:249px;">coating material</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">Gold wire, 0.50 &#215; 1000 mm, 99.99 %, Parts No. 125000499&#160;</td>
			<td style="width:192px;"></td>
		</tr>
		<tr height="58">
			<td height="58" style="height:59px;width:249px;">cryo scanning electron microscope</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">JSM-6510 installed with MP-Z09085T / MP-51020ALS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:48px;width:249px;">cryostat</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">CryoStar NX70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">microtome blade</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">HP35 ULTRA Disposable Microtome Blades, 3153735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">tissue freezing embedding medium</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">Shandon Cryomatrix embedding resin, 6769006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope

Et skanner elektronmikroskop som er installert på fryse enheten (Frys-SEM) gjør det mulig å observere prøven ved Subzero temperaturer og har blitt brukt til å utforske vannfordeling i plante vev i kombinasjon med fryse fiksering teknikker ved hjelp av flytende nitrogen (LN 2). for Woody arter, men forberedelser for å observere xylem tverrgående-cut overflaten innebære noen vanskeligheter på grunn av retningen av tre fibre. I tillegg kan høyere spenning i vannsøylen i xylem-kanaler av og til forårsake artifactual endringer i vann fordelingen, spesielt under prøve fiksering og-oppsamling. I denne studien, viser vi en effektiv prosedyre for å observere vann fordelingen i xylem av Woody planter in situ ved hjelp av en kryostaten og fryse-SEM. Ved første, under prøvetaking samling, måle xylem vann potensialet bør avgjøre om høy spenning er til stede i xylem rør. Når vann potensialet i xylem er lavt (< ca. − 0,5 MPa), er det nødvendig med en spennings hvile prosedyre for å tilrettelegge for bedre bevaring av vann statusen i xylem-rør under prøve fryse fiksering. Deretter festes en vanntett krage rundt trestammen og fylles med LN2 for fryse fiksering av vann statusen til xylem. Etter høsting, forsiktighet bør utvises for å sikre at prøven er bevart frosset mens fullføre prosedyrene for prøven forberedelse til observasjon. En kryostaten er ansatt for å tydelig avdekke xylem tverrgående overflate. I Freeze-SEM observasjoner, tid justering for fryse-etsing er nødvendig for å fjerne frost støv og fremheve kanten av celleveggene på visningsflaten. Våre resultater viser anvendelsen av fryse-SEM teknikker for observasjon av vann distribusjon innen xylem på mobilnettet og subcellulære nivåer. Kombinasjonen av fryse-SEM med ikke-ødeleggende in situ observasjon teknikker vil dypt forbedre utforskningen av Woody plante vannstrømmen dynamikk.

Representative bilder av tverrgående overflater av bartre og løvtrær Tree xylem, observert av fryse-SEM, er vist i figur 2. Ved lav forstørrelse, viser det svarte området i bildene hulrom som vannet helt eller delvis forsvinner, og det grå området indikerer xylem celle vegger, cytoplasma, og vann (figur 2A). Ved høy forstørrelse, er det tydelig at vannet ikke er helt tapt fra Lumina av tre tracheids, ind...

Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope

Observere vann fordelingen i xylem gir betydelig informasjon om vannstrømmen dynamikk i Woody planter. I denne studien viser vi den praktiske tilnærmingen til å observere vannfordeling i xylem ved hjelp av en kryostaten og en fryse-SEM, som eliminerer artifactual endringer i vann statusen under prøve forberedelsen.

Vann fordelingen fra Xylem i Woody Plants

A scanning electron microscope installed cryo-unit (cryo-SEM) allows specimen observation at subzero temperatures and has been used for exploring water ...

Det overordnede målet med denne protokollen er å gi oss elektromikroskopi oppløsning av vannfordelingen i ulike typer xylem celler in situ. Denne metoden har blitt brukt til å observere vannet i xylem for å avklare vanndistribusjon og skiftende vannregimer, den sesongmessige variasjonen av vanndistribusjon, effekten av fryse / tine sykluser, fordeling av vann i vått tre, og kavitasjon indusert av visse biotiske påkjenninger. Frysefiksering av en levende stamme under høye hydrauliske spenninger forårsaker noen ganger kunstige kavitasjoner, som observeres av cryo-SEM som sprukket iskrystaller i lumen av rør.Denne oppdaterte prosedyren fokuserer på å oppnå aerotommikrografer av høy kvalitet av xylem uten artefakt i prøvetakingsprosedyren. Levedyktig demonstrasjon er kritisk fordi det finnes en rekke viktige detaljer som ikke lett kan forklares. Samtidig er det ikke lett å få opplæring fordi bare noen få laboratorier rundt om i verden praktiserer denne metoden.For å begynne denne prosedyren, legg ved en gren og blader for prøvetaking med en svart plastpose for å likevekte vannpotensialet mellom xylem og blader mer enn to timer før prøvetaking. Ved hjelp av et trykkkammer, bestemme vannpotensialet på minst to blader fra prøven. Når vannpotensialet er høyere enn ca. minus 0,5 megapascals, kan en prøve høstes etter frysing.Når vannpotensialet er lavere enn minus 0,5 megapascals, fortsett med behandlingen for avslapning. Fest en vanntett krage rundt stammen, som vil bli fylt med vann. Bruk beskjæringssaks eller en sag, kutt stammen under vannoverflaten og hold den kuttede enden av prøven under vann.Overfør prøven til en annen beholder med vann så raskt som mulig for å minimere utsette den kuttede enden til luft. For bred-leaved arter, sørg for at lengden fra stedet der cryo prøve for SEM vil bli oppnådd til den kuttede kanten av høstet stammen er lengre enn prøvens maksimale fartøyets lengde for å hindre spenning-indusert artefakter i krysoample. Deretter dekker prøven med en svart plastpose for å redusere transpirasjon.Hold den kuttede enden av prøven i vannet og oppretthold denne tilstanden i ca. 30 minutter for å slappe av xylem-spenningen. Etter dette, måle vannpotensialet igjen for å bekrefte avslapning av xylem spenning. Bruk først saks eller en verktøykniv til å klippe og åpne den ene siden av en vanntett krage.Fest kragen tett rundt stammen med tape mens du holder blenderåpningen horisontalt. Sett på isolerende hansker, og hold trygt fartøyet av flytende nitrogen. Kjør flytende nitrogen inn i kragen til den er full og hold det fylt ved å jevnt tilsette ekstra flytende nitrogen for å fryse vannet helt i xylem.Etter tilstrekkelig frysetid, koble kragen fra den frosne delen av prøvestammen for å fjerne det flytende nitrogenet. Bruk umiddelbart en fin håndsag for å høste prøven. Dekk deretter den frosne prøven med et stykke aluminiumsfolie eller legg den tilbake i et prøverør.Plasser raskt den høstede prøven i en beholder fylt med flytende nitrogen. Oppbevar prøvene på minus 80 grader Celsius til de er klare til å utføre observasjonen. For å begynne, sett temperaturen på kryostatens prøvekammer til minus 30 grader Celsius, som vanligvis er kaldt nok til å holde xylem sap av de fleste planter i frossen tilstand.Bruk en skarp kniv eller en fintanset sag til å trimme prøven i et lite stykke som kan justeres for prøveholderen til en kryo-SEM. Monter det trimmede stykket på en chuck, en holder for en kryostat, med vevfrysende innebyggingsmedium for kryoseksjon. Fest chucken til en prøveholder av en mikrotom av kryostaten.Trim overflaten ved gjentatte ganger barbering av fem til syv mikrometer tykke seksjoner. Å kutte bort mer enn 1 000 til 2 000 mikrometer i total dybde til den opprinnelige overflaten er nyttig for å elminere den skadede delen av prøven forårsaket av forhåndsskjæring. Etter å ha trimmet en overflate av prøven grovt, justerer du en ubrukt del av mikrotombladet over prøvens overflate.Utvid avstanden mellom overflaten av prøven og bladet. Og kutt overflaten bare en eller to ganger. Skyv deretter bladet igjen og plasser en ubrukt del av bladet på prøveoverflaten.Gjenta denne skjærebehandlingen tre til fire ganger for å oppnå en klar overflate uten knivmerker. Etter det endelige snittet setter du bladets posisjon langt fra prøven for å hindre at støv stikker på prøven. Og koble chucken fra mikrotomen.Deretter fester du prøven til en kryo-SEM-prøveholder med vevfrysende innebyggingsmedium i kryostatkammeret. Bruk først flytende nitrogen til å opprettholde en temperatur under minus 120 Celsius i kryo-SEM-prøvekammeret i henhold til utstyrets brukerhåndbok. Deretter plasserer du prøveholderen med den tilberedte prøven i en isolerende beholder fylt med flytende nitrogen i kryostatkammeret.Bruk en prøveutskiftende stang til å holde prøveholderen under det flytende nitrogenet. Overfør raskt prøveholderen til pre-evakueringskammeret i kryo-SEM-prøvekammeret så snart evakueringen av pre-evakueringskammeret. For å begynne, slå på akselerasjonsspenningen til den elektriske pistolen.Deretter øker temperaturen på prøvestadiet til minus 100 grader Celsius. Vent i flere minutter til froststøvet fjernes og for at isens overflatenivå i xylemcellene skal minke litt sammenlignet med celleveggene. Deretter senker temperaturen på speiumen scenen til minus 120 grader Celsius.I denne studien brukes kryo-SEM observasjonsmetoder til å tydelig visualisere vanndistribusjon på cellulær skala. Ved lav forstørrelse indikerer det svarte området i bildene hulrommene som vann helt eller delvis forsvinner fra, mens gråsonen indikerer xylem cellevegger, cytoplasma og vann. Ved høy forstørrelse blir det tydelig at vannet ikke er helt tapt fra lumina av tre tracheider, noe som indikerer forekomsten av makrobobler i xylem sap in situ.Med hensyn til bred-leaved arter, kavitasjon forekomst er lett oppdages i fartøy, mens vann eksistens er vanskelig å skille mellom fibre, spesielt ved lav forstørrelse. Cytoplasma og parenchyma celler kan skilles fra vann i tracheids eller fartøy gjennom isplan teksturer. Analyse av effekten av temperatur på fryseetsingsprosessen viser at froststøv gradvis sublimeres, og endotracehid pit membraner blir klarere gjennom utviklingen av sublimering med økende temperatur.Gjenværende store froststøvpartikler kan elimineres ved ytterligere fryseetsing. Men dette kan være problematisk som det unødvendig reduserer overflatenivået av is i xylem rør. Den høye kvaliteten på observasjon oppnås i stor grad gjennom nøyaktig prøveforberedelse.Utjevning av overflaten med det skarpe bladet av mikrotomen er spesielt viktig. Utilstrekkelig utjevning av et brukt blad kan noen ganger skape en grov overflate som ligner knivmerker, eller kan skape mange forekomster av støv fra kuttene. Prøve frysing uten avslapning av negativ vann kolonne trykk vil føre til artefaktuell induksjon av kavitasjon i xylem rør.Klyngede iskrystaller observeres i prøver hvor prøven ikke var avslappet. Kontrasterende, ingen klyngede iskrystaller observeres i de avslappede prøveprøvene med et lignende vannpotensial. Anvendelsen av frysefiksering til transpirerende levende planter som lider tørke kan indusere resultatbaserte gjenstander som klyngede iskrystaller.Disse artefaktene fører til feiltolkninger av vannstatusen i xylem-kanalen. Så det er viktig å først bekrefte vannpotensialet til prøver før frysefiksering. Selv om denne prosedyren gir et bilde av hvilken status i xylem-kanal, må et levende tre ødelegges for observasjonen.Ved å kombinere andre ikke-invasive observasjonsmetoder som MR eller mikro-CT med bildeobservasjon på datterselskapsnivå, vil vår forståelse av arten mellom vanntransport og bruk. Observasjonen av vannstatus introdusert av dette papiret vil også gi en metode for avklaring av forholdet mellom vann som blandes i celler og andre anatomiske reaksjoner på abiotisk eller biotisk stress. Cryo-SEM utstyrt med energidispergeriv røntgenspektroskopi eller topp sim har blitt brukt til å studere elementfordeling over overflaten av en prøve som inneholder vann.Kombinere elementanalyse og denne prosedyren i den lignende rammen kan gi oss dyp kunnskap om xylem celle atferd knyttet til vann status. Når du bruker flytende nitrogen til frysefiksering av prøver i et rom, ikke glem å ventilere rommet for å unngå oksygenmangel.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

Laboratory bestemt Fosfor Flux fra innsjøsedimentene som et mål på intern Fosfor Loading

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Measuring Fluxes of Mineral Nutrients and Toxicants in Plants with Radioactive Tracers

Måle fluks av mineral næringsstoffer og miljøgifter i Planter med radioaktive tracere

Unidirectional influx and efflux of nutrients and toxicants, and their resultant net fluxes, are central to the nutrition and toxicology of plants. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615. Måling av Enterovirus og Norovirus Forekomst i Water av Kultur- og RT-qPCR. I. Innsamling av virusprøver

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615. Måling av Enterovirus og Norovirus Forekomst i Water av Kultur- og RT-qPCR. Del III. Virus Detection ved RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

How to Create Conditioned Taste Aversion for Grazing Ground Covers in Woody Crops with Small Ruminants

Hvordan lage kondisjonerte Taste Avsky for Beite Ground Covers i Woody Avlinger med småfe

Conditioned taste aversion (CTA) is a learning behavior process where animals are trained to reject certain feed after gastrointestinal discomfort has ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

Jord Lysimeter Graving for Coupled Hydrologiske, Geokjemiske, og mikrobiologiske undersøkelser

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for endokrin aktivitet i vann ved hjelp av kommersielt tilgjengelig<em&gt; In Vitro</em&gt; Trans bioassay

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

En lipidekstraksjons- og analysemetode for karakterisering av jordmikrober i eksperimenter med mange prøver

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

En enkel plante teknikk for å etablere trær hvor hyppig oversvømmelse oppstår

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Sample Preparation Method of Scanning and Transmission Electron Microscope for the Appendages of Woodboring Beetle

Prøveforberedelsemetode for skanning og overføring elektron mikroskop for vedlegg av treboring beetle

This report described sample preparation methods that scanning and transmission electron microscope observations, demonstrated by preparing appendages of ...