Name: xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope
Uploaded: 2019-06-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

Bu çalışma JSPS KAKENHI tarafından desteklenmektedir (No. 20120009, 20120010, 19780129, 25292110, 23780190, 23248022, 15H02450, 16H04936, 16H04948, 17H03825, 18H02258)

Not: bu protokolün şematik şeması Şekil 1' de gösterilir.
1. örnekleme: xylem boru su sütun içinde gerginlik gevşeme
Not: aşağıdaki gerilim rahatlama tedavisi, LN2 uygulamasından önce, hem donma hem de gerginlik kaynaklı eserler ile xylem su dağıtımında önlemek için önerilir.
<ol><li>Bir şube içine ve siyah plastik bir torba ile örnekleme için yaprakları xylem arasında su potansiyelini doğrultm...

Bu yazıda sunulan Cryo-SEM gözlem yöntemleri, hücresel ölçekte su dağıtımını açıkça görselleştirmeye yönelik pratiktir. Bu yöntem sayesinde, xylem içinde su dağılımı değişiklikleri keşfetmek potansiyel abiyotik stres (su sıkıntısı veya donma) veya biyotik stres (ağaç hastalığı) ağaç türlerinin toleransı mekanizması açıklığa kavuşturmaya yardımcı olabilir.
Bu yöntemde en önemli adım, numune toplama ve sonraki numune hazırlama sırasında yerel ...

Su kaynaklarının kullanılabilirliği (yani, yağış, toprak suyu içeriği) kesinlikle bitki türlerinin mortalite ve coğrafi dağılımını belirler, çünkü topraktan su absorbe etmek ve fotosentetik üretim için yaprakları taşımak gerekir. Bitkiler su taşıma sistemini dalgalanan su kaynakları altında tutmalıdır. Özellikle, odunsu bitkiler, bazı durumlarda, onların taç daha ~ 100 m zemin üzerinde tutmak gerekir gibi transpirasyon akışları boyunca kendi kanallarında yüksek gerginlik üretir. Bu kadar yüksek negatif basınç altında su sütunları korumak için, xylem kanallar sert ve hidrofobik-lignified hücre duvarları ile tübüler hücrelerin bir süreklilik oluşur1. Her türün xylem boru disfonksiyonunun xylem bozukluğu için güvenlik açığı, dalgalanan su kaynağı altında türlerin hayatta kalmasının iyi bir belirleyici olduğunu2. Buna ek olarak, xylem kanallarının su durumunun incelenmesi, Abiotik veya biyotik gerilmelere maruz kalan ayrı ağaçların sağlık durumunun değerlendirilmesi için önemlidir. SAP akışını veya su potansiyelini ölçmek, xylem kanallarının Entegre hidrolik fonksiyonu nedeniyle odunsu bir bitkinin suyun durumunun tahminlerini sağlayabilir. Ayrıca, xylem hücrelerinde suyun dağılımını görselleştirerek xylem Hidrolik sisteminin bireysel bileşenlerinin durumunu açıklığa kavuşturabilirsiniz.
Xylem kanallarının su durumunu görselleştirmeye yarayan çeşitli teknikler var3. Ahşap doku su yolları gözlemleme için klasik ve yararlı yöntemler bir boya içine kesim dalları uçları daldırarak veya ayakta ağaca bir boya enjekte ederek su sütunu boyama içerir4kaynaklanıyor. Soft x-ışını fotoğrafçılığı, xylem5,6' da nem diferansiyel x-ışını emilimi yoğunluğu nedeniyle dilimlenmiş ahşap diskler su dağılımı görselleştirme sağlar. Bu yöntemler, ancak, sadece su hareketi parçaları sağlamak veya su makroskopik dağılımları göstermek. Son zamanlarda, mikro odaklama X-Ray bilgisayarlı tomografi (μct)7,8,9,10ve manyetik rezonans görüntüleme (MRG)11 gibi tahribatsız gözlem teknikleri, 12, önemli ölçüde sağlam fidanlar içinde xylem kanallar su gözlem sağlamak için geliştirilmiştir. Bu yıkıcı olmayan yöntemler biz yapay kesme efektleri olmadan xylem su durumunu gözlemlemek ve biz ardışık görüntüleme veya bir kontrast Ajan10tanıtmak su akışı dinamikleri izleyebilirsiniz büyük avantajları vardır. Ancak, hücresel düzeyde su içeriğini tanımlayabilen görüntüleri elde etmek için bitki görüntüleme veya Synchrotron tabanlı μCT için özel bir tesis için özelleştirilmiş bir MRI kullanmanız gerekir. Buna ek olarak, Synchrotron tabanlı μct sistemi, ışık mikroskobu7,8,9ile karşılaştırılabilir yüksek uzamsal çözünürlüğe sahip ince görüntüler elde etmek için etkin olsa da, yaşam hücreleri tarafından yaralanabilir yüksek enerji X-ışını13,14radyasyon. Hangi Cryo-birimleri yüklü bir tarama elektron mikroskop istihdam (Cryo-SEM) tam bir hücresel düzeyde xylem su bulmak için çok yararlı bir yöntemdir, bu yıkıcı gözlem için örnek hasat gerektirir rağmen. Xylem kanalları su düzeltmek için, (yani, dallar, dalları veya kaynaklanıyor) kaynaklanan bir kısmı sıvı nitrojen (LN2) tarafından situ dondurulmuş. Cryo-SEM tarafından kesilmiş, dondurulmuş numunelerin yüzeyinin gözlemleri, biz buz olarak xylem kanallarının su tanımlayabilir hangi xylem yapısının yüksek büyütülmüş görüntüler sağlar. Bu yöntemin önemli bir sınırlama, aynı numune içinde su taşınabilirlik sıralı gözlem imkansız olmasıdır. Ancak, bu aletler taşınabilir olmadığından bir alanda yaşayan ağaçların sıralı gözlem için μCT veya MRI uygulaması son derece zordur. Buna karşılık, Cryo-SEM açık bir şekilde sadece hücresel düzeyde değil, aynı zamanda daha ince bir yapı düzeyinde su içeriğini görselleştirmek için alan deneylerinde büyük ağaçlar bu tekniği kullanarak bir potansiyele sahiptir, örneğin, intervasküler çukurlarda su15, su içinde hücre içi alanlar16, veya su sütununda Bubbles17.
Cryo-SEM tarafından xylem su gözlem birçok çalışmalar bildirilmiştir 5,12,18,19,20,21,23. Utsumi ve ark. (1996) başlangıçta bir konteyner içine kök21üzerine set içine LN2 doldurma yoluyla bir yaşam gövdesinin dondurma-fiksasyonu ile situ içinde xylem gözlem için protokol kuruldu. Numune toplama sırasında ve Cryo-SEM hazırlığı sırasında, kıt kanallarının içindeki buzu erime önlemek amacıyla, numunenin sıcaklığı-20 °C ' nin altında tutulur. Bu yöntem, değişen su rejimi11,12,24,25,26, altında su dağılımı açıklığa kavuşturmak için xylem su gözlemlemek için kullanılmıştır 27,28, su dağıtımı mevsimsel varyasyonu21,29,30, Freeze-çözülme döngüleri etkisi17,31, 32, ıslak ahşaptan su dağılımı5, diri odun 'dan kalp ağacından20' ye geçiş sırasında su dağıtımında değişiklikler, cambial aktivite ve damarları33farklılaşma mevsimsel zaman ders, ve kavitasyon bazı biyotik gerilimler tarafından indüklenen23,34. Hidrolik iletkenlik ve boruları kavitasyon için güvenlik açığı da Cryo-SEM35,36kullanılarak doğrulandı. Enerji Dispersif X-ışını spektrometresi (EDX veya EDS) ile donatılmış Cryo-SEM, su37içeren bir numunenin yüzeyi üzerinde eleman dağılımını incelemek için kullanılmıştır.
Yüksek hidrolik gerginlik altında kanallar içeren bir yaşam gövdesinin donma-fiktasyonu bazen Cryo-SEM ' i hangi boru hatlarının lümeninde kırık buz kristalleri tarafından gözlenen yapay kavimlere neden olur38,39. Özellikle, daha uzun ve daha geniş kanallara sahip geniş türler, su3,40altında yürütülse bile, numune kesiminin neden olduğu kavitasyon gibi gerginlik kaynaklı eserler için savunmasız. Kavitasyon eserler bir nirengi ağacının örnekleme sonra göze çarpan olur (yani, gün boyunca örnekleme) veya şiddetli kuraklık koşulları altında ve kavitasyon oluşumu bir aşırı tahmin yanıltabilir3,38, 39. Bu nedenle, borular içinde çalışan gerginlik artifaktüel kavitasyon önlemek için serbest bırakılmalıdır3,12,39.
Bir numune odasına takılı bir bıçağı kullanan donma-kırılma tekniği genellikle Cryo-SEM gözlem için numune yüzeyini açığa çıkarmak için kullanılmaktadır. Ancak, odunsu bitki dokularının Freeze-kırık uçaklar, ikincil xylem özellikle enine bölümleri, doku6anatomik özellikleri ve suyu açıkça gözlemlemek için çok kaba. Bir numunenin kırpması için bir kriyostat uygulaması, örnek yüzeylerin hızlı ve yüksek kalitede hazırlanması20,23sağlar. Bu yöntemin genel hedefi, numune alma oluşumları olmadan situ 'daki çeşitli Ksilem hücrelerinde su dağılımının Elektron Mikroskopisi çözünürlüğüne sahip kanıt sağlar. Biz ilk kabul beri sürekli olarak geliştirilmiş olan güncel prosedürü tanıtmak, örnekleme ile ilgili, kırpma ve yüksek kaliteli elektron MİKROGRAFİ elde etmek için numune yüzeyi Temizleme xylem Cryo-sabit numuneler.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:904px;" width="904">
	<tbody>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:249px;">coating material</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">Gold wire, 0.50 &#215; 1000 mm, 99.99 %, Parts No. 125000499&#160;</td>
			<td style="width:192px;"></td>
		</tr>
		<tr height="58">
			<td height="58" style="height:59px;width:249px;">cryo scanning electron microscope</td>
			<td style="width:179px;">JOEL Ltd., Japan</td>
			<td style="width:284px;">JSM-6510 installed with MP-Z09085T / MP-51020ALS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="47">
			<td height="47" style="height:48px;width:249px;">cryostat</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">CryoStar NX70</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">microtome blade</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">HP35 ULTRA Disposable Microtome Blades, 3153735</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:38px;width:249px;">tissue freezing embedding medium</td>
			<td style="width:179px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:284px;">Shandon Cryomatrix embedding resin, 6769006</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

xylem water distribution in woody plants visualized with a cryo-scanning electron microscope

Bir tarama elektron mikroskop yüklü Kriyo-birimi (Cryo-SEM) Subzero sıcaklıklarda numune gözlem sağlar ve sıvı nitrojen kullanarak dondurma fiktasyon teknikleri ile birlikte bitki dokularında su dağıtımı keşfetmek için kullanılmıştır (LN 2). odunsu türler için, ancak, xylem enine kesme yüzeyi gözlem hazırlıkları ahşap liflerin oryantasyonu nedeniyle bazı zorluklar içerir. Ayrıca, xylem kanallarının su sütununda daha yüksek gerilim, özellikle örnek fiktasyon ve toplama sırasında su dağıtımında artifaktüel değişikliklere neden olabilir. Bu çalışmada, bir kriyostat ve Cryo-SEM kullanarak situ 'daki odunsu bitkilerin xylem içerisindeki suyun dağılımını gözlemlemek için etkili bir prosedür sergiliyoruz. İlk başta, numune toplama sırasında, xylem su potansiyelinin ölçülmesi, xylem kanalında yüksek gerilimin bulunup bulunmadığını belirlemelisiniz. Xylem su potansiyeli düşükken (< CA. − 0,5 MPa), numune dondurulması sırasında xylem kanallarında su durumunun daha iyi korunmasını kolaylaştırmak için bir gerginlik rahatlama prosedürü gereklidir. Sonra, bir su geçirmez yaka ağaç kökü etrafında eklenir ve LN ile dolu2 xylem su durumunun donması için sabitleme. Hasat sonrası, örnek gözlem için numune hazırlama prosedürlerini tamamlarken numunenin donmuş şekilde korunduğundan emin olmak için bakım alınmalıdır. Xylem enine kesilmiş yüzeyi açıkça açığa çıkarmak için bir kriyostat kullanılmaktadır. Cryo-SEM gözlemlerde, donma-aşındırma için zaman ayarlaması, Frost tozunu kaldırmak ve izleme yüzeyinde hücre duvarlarının kenarını vurgulamak için gereklidir. Sonuçlarımız, hücresel ve hücre altı seviyelerinde xylem içinde su dağılımı gözlem için Cryo-SEM tekniklerinin uygulanabilirliğini göstermektedir. Cryo-SEM ile tahribatsız in situ gözlem teknikleri ile kombinasyonu derin odunsu bitki suyu akış dinamiklerinin keşfi geliştirmek olacaktır.

Cryo-SEM tarafından gözlenen, iğne kesimli ve yaylı ağaç xylem 'in Transverse kesilmiş yüzeylerinin temsili görüntüleri Şekil 2' de gösterilir. Düşük büyütmede, görüntüdeki siyah alan, suyun tamamen veya kısmen kaybolacağı boşlukları gösterir ve gri alan Ksil hücresi duvarları, sitoplazması ve suyu gösterir (Şekil 2A). Yüksek büyütme, bu su tamamen üç tracheids Lumina kayıp d...

Watch this Scientific Journal Video about Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope at JoVE.com

Xylem Water Distribution in Woody Plants Visualized with a Cryo-scanning Electron Microscope

Körte su dağılımının gözlemlenmesi, odunsu bitkilerde suyun akış dinamikleri ile ilgili önemli bilgiler sağlar. Bu çalışmada, örnek hazırlama sırasında su durumundaki artifaktüel değişiklikleri ortadan kaldıran bir kriyostat ve Cryo-SEM kullanarak situ 'da xylem su dağıtımını gözlemlemek için pratik bir yaklaşım gösteririz.

Cryo-scanning Electron mikroskop ile görselleştirilen Woody bitkilerde xylem su dağılımı

A scanning electron microscope installed cryo-unit (cryo-SEM) allows specimen observation at subzero temperatures and has been used for exploring water ...

Bu protokolün genel amacı, çeşitli ksilem hücrelerinde su dağılımının elektromikroskobu çözünürlüğü sağlamaktır. Bu yöntem, su dağılımını ve değişen su rejimlerini, su dağılımının mevsimsel değişimini, donma/çözülme döngülerinin etkisini, ıslak odunlarda suyun dağılımını ve bazı biyotik streslerin neden olduğu kavitasyonu netleştirmek için ksilemdeki suyu gözlemlemek için kullanılmıştır. Yüksek hidrolik gerilimler altında yaşayan bir gövdenin donma fiksasyonu bazen kondüblülüde yırtık buz kristalleri olarak kriyo-SEM tarafından gözlenen yapay kavitasyonlara neden olur.Bu güncelleştirilmiş prosedür örnekleme prosedüründe artifakı olmadan ksilemin yüksek kaliteli aerotom mikrograflarını elde etmeye odaklanır. Kolayca açıklanamayan bir dizi önemli ayrıntı olduğundan, uygun gösteri çok önemlidir. Aynı zamanda, eğitim almak kolay değildir, çünkü dünya çapında sadece birkaç laboratuvar bu yöntemi uygular.Bu yordamı başlatmak için, bir dal içine ve ksilem arasındaki su potansiyelini dengelemek için siyah bir plastik torba ile örnekleme için yaprakları ve örnekleme iki saatten fazla bırakır. Bir basınç odası kullanarak, örnekten en az iki yaprağın su potansiyelini belirleyin. Su potansiyeli yaklaşık eksi 0,5 megapascal'dan yüksek olduğunda, bir numune dondurulduktan sonra hasat edilebilir.Su potansiyeli eksi 0,5 megapascal'dan daha düşük olduğunda, rahatlama tedavisine devam edin. Su ile doldurulacak kök etrafında bir su geçirmez yaka düzeltmek. Budama makası veya testere kullanarak, su yüzeyinin altındaki sapı kesin ve numunenin kesme ucunu su altında tutun.Kesme ucunu nisasına en aza indirmek için numuneyi mümkün olan en kısa sürede başka bir su kabına aktarın. Geniş türler için, SEM için kriyo numunesinin elde edeceği noktadan hasat sapının kesme kenarına kadar olan uzunluğun, crysoample içinde gerilime bağlı objeleri önlemek için numunenin maksimum damar uzunluğundan daha uzun olduğundan emin olun. Daha sonra, transpirasyonu azaltmak için numuneyi siyah plastik bir torbaile kaplayın.Numunenin kesme ucunu suda tutun ve ksilem gerilimini rahatlatmak için bu durumu yaklaşık 30 dakika koruyun. Bundan sonra, ksilem geriliminin gevşemesini onaylamak için su potansiyelini tekrar ölçün. İlk olarak, su geçirmez bir yakanın bir tarafını kesip açmak için makas veya yardımcı bıçak kullanın.Diyafram açıklığını yatay olarak tutarken, tasmayı yapışkan bantla sapın etrafına sıkıca takın. Yalıtım eldivenleri takın ve sıvı nitrojen damarını güvenli bir şekilde tutun. Tam olana kadar yaka içine sıvı nitrojen çalıştırın ve tamamen ksilem su dondurmak için sürekli ek sıvı nitrojen ekleyerek dolu tutmak.Yeterli donma süresinden sonra, sıvı nitrojeni çıkarmak için yakayı numunenin donmuş kısmından ayırın. Hemen örnek hasat için ince bir el testere kullanın. Daha sonra dondurulmuş numuneyi bir parça alüminyum folyo ile kaplayın veya numune tüpüne geri koyun.Hasat edilen numuneyi sıvı nitrojen dolu bir kap içine hızla yerleştirin. Gözlemi yapmaya hazır olana kadar örnekleri eksi 80 derecede saklayın. Başlamak için, kriyostat numune odasının sıcaklığını eksi 30 santigrat dereceye ayarlayın, ki bu genellikle çoğu bitkinin ksilem özsuyunu donmuş durumda tutacak kadar soğuktur.Numuneyi kriyo-SEM numune tutucusu için ayarlanabilen küçük bir parçaya börmek için keskin bir bıçak veya ince dişli testere kullanın. Kesilmiş parçayı bir chuck'a, bir kriyostat tutucuya, doku dondurucu katıştırma ortamına monte edin. Chuck'ı kriyostat bir mikrotomun numune tutucuya takın.Beş ila yedi mikrometre kalınlığındaki bölümleri tekrar tekrar tıraş ederek yüzeyi kırpın. İlk yüzeye toplam derinliği 1,000 ila 2,000 mikrometreden fazla kesmek, numunenin ön kesimden kaynaklanan hasarlı kısmının elmininatating için yararlıdır. Numunenin yüzeyini kabaca kestikten sonra, mikrotom bıçağının kullanılmayan bir kısmını numunenin yüzeyinin üzerinde ayarlayın.Numunenin yüzeyi ile bıçak arasındaki mesafeyi biraz genişletin. Ve yüzeyi sadece bir ya da iki kez kesin. Daha sonra bıçağı tekrar kaydırın ve bıçağın kullanılmayan bir kısmını numune yüzeyine yerleştirin.Bıçak izi olmadan net bir yüzey elde etmek için bu kesme işlemini 3-4 kez tekrarlayın. Son kesimden sonra, tozun numuneye yapışmasını önlemek için bıçağın konumunu numuneden çok uzak bir şekilde ayarlayın. Ve chuck'ı mikrotomdan ayır.Daha sonra, örneği kriyostat haznesinde doku dondurucu katıştırma ortamına sahip bir kriyo-SEM numune tutucuya takın. İlk olarak, ekipman kullanım kılavuzuna göre kriyo-SEM numune odasında eksi 120 santigrat derecenin altında bir sıcaklık korumak için sıvı nitrojen kullanın. Daha sonra, hazırlanan numune ile numune tutucuyu kriyostat haznesinde sıvı nitrojenle dolu bir yalıtım kabına yerleştirin.Numune tutucuyu sıvı nitrojenin altında tutmak için numune alışverişi çubuğu kullanın. Numune tutucuyu, tahliye öncesi odanın tahliyesine başlar başlamaz kriyo-SEM numune odasının ön tahliye odasına hızla aktarın. Başlamak için, elektrik tabancasının hızlanma gerilimini açın.Daha sonra, numune aşamasının sıcaklığını eksi 100 dereceye yükseltin. Don tozunun temizlenmesi ve ksilem hücrelerindeki buzun yüzey seviyesinin hücre duvarlarına göre biraz düşmesi için birkaç dakika bekleyin. Daha sonra, speiumen sahnesıcaklığını eksi 120 santigrat dereceye düşürün.Bu çalışmada, kriyo-SEM gözlem yöntemleri hücresel ölçekte su dağılımını açıkça görselleştirmek için kullanılmaktadır. Düşük büyütmede, görüntülerdeki siyah alan suyun tamamen veya kısmen kaybolduğu boşlukları gösterirken, gri alan ksilem hücre duvarlarını, sitoplazmayı ve suyu gösterir. Yüksek büyütme de, su tamamen üç tracheids lumina kayıp olmadığı belirgin hale gelir, yerinde ksilem sap makro kabarcıklar oluşumunu gösteren.Geniş-terk türler ile ilgili olarak, kavitasyon oluşumu damarlar içinde kolayca tespit edilir, su varlığı lifler içinde ayırt etmek zor iken, özellikle düşük büyütme. Sitoplazma ve parankim hücreleri buz düzlemi dokular aracılığıyla tracheids veya kaplar içinde sudan ayırt edilebilir. Sıcaklığın donma-gravür işlemi üzerindeki etkisinin analizi, don tozunun kademeli olarak süblimhale geldiğini ve endotracehid pit membranlarının artan sıcaklıkla süblimleşmenin ilerlemesi ile daha net hale geldiğini ortaya koymaktadır.Kalan büyük don tozu parçacıkları daha fazla donma-gravür ile ortadan kaldırılabilir. Ama bu, ksilem kanallarındaki buzun yüzey seviyesini gereksiz yere düşürtteği için sorunlu olabilir. Yüksek kaliteli gözlem, büyük ölçüde doğru numune hazırlama ile elde edilir.Mikrotomun keskin bıçağı ile yüzeyin düzitilmesi özellikle önemlidir. Kullanılmış bir bıçak tarafından yetersiz yumuşatma bazen bıçak işaretleri benzer pürüzlü bir yüzey oluşturabilir, ya da kesikler toz çok sayıda oluşumlar oluşturabilirsiniz. Negatif su sütunu basıncıgevşemeden numune dondurma ksilem kanallarında kavitasyon artifif indüksiyon neden olacaktır.Kümelenmiş buz kristalleri, numunenin rahat olmadığı numune kaplarında görülür. Buna karşılık, benzer su potansiyeline sahip rahat numune örneklerinde kümelenmiş buz kristalleri gözlenmez. Kuraklık çeken transpiring canlı bitkileriçin donma fiksasyon uygulaması kümelenmiş buz kristalleri gibi sonuç tabanlı eserler neden olabilir.Bu eserler ksilem kanalındaki su durumunun yanlış yorumlanmasına yol açar. Bu nedenle, öncelikle donma fiksasyonundan önce numunelerin su potansiyelini doğrulamak önemlidir. Bu yordam, ksilem kanalının durumunun bir görüntüsünü sağlasa da, gözlem için yaşayan bir ağacın yok edilmesi gerekir.MRG veya mikro-BT gibi diğer non-invaziv gözlem yöntemlerinin yan düzey görüntü gözlemiyle birleştirilmesi, su taşıma ve kullanım arasındaki doğa anlayışımızı derinleştirecektir. Bu kağıt tarafından tanıtılan su durumunun gözlemi de hücrelerde karışık su ilişkisi ve abiyotik veya biyotik strese diğer anatomik tepkiler için bir yöntem sağlayacaktır. Cryo-SEM enerji dağılımlı x-ışını spektroskopisi veya üst sim ile donatılmış su içeren bir numunenin yüzeyinde element dağılımı çalışma için kullanılmıştır.Elementanalizi ve bu prosedürü benzer çerçevede birleştirmek bize su durumu ile ilgili ksilem hücre davranışı hakkında derin bilgi verebilir. Bir odada numunelerin dondurulması için sıvı nitrojen kullanırken, oksijen eksikliğini önlemek için odayı havalandırmayı unutmayın.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

Göl tortulları Laboratuvar belirlenen Fosfor Flux İç Fosfor Yükleniyor bir tedbir olarak

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Measuring Fluxes of Mineral Nutrients and Toxicants in Plants with Radioactive Tracers

Radyoaktif izleyiciler ile Bitkilerde Mineral Besin ve Toksikantların Değişimler Ölçme

Unidirectional influx and efflux of nutrients and toxicants, and their resultant net fluxes, are central to the nutrition and toxicology of plants. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

Enterovirus Kültür ve RT-qPCR Su Norovirüs Oluşum EPA Metot 1615 Ölçüm. Virüs Örneklerinin I. Koleksiyonu

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

Enterovirüs Kültür ve RT-qPCR Su Norovirus Oluşum EPA Method 1615 Ölçümü. Bölüm III. RT-qPCR Virüs Algılama

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

How to Create Conditioned Taste Aversion for Grazing Ground Covers in Woody Crops with Small Ruminants

Otlatma Zemin Küçükbaş Hayvan ile Woody Bitkilerinde Kapakları için ne Koúullanmıú tat kaçınma oluşturma

Conditioned taste aversion (CTA) is a learning behavior process where animals are trained to reject certain feed after gastrointestinal discomfort has ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

Coupled Hidrolojik, jeokimyasal ve Mikrobiyolojik Araştırmalar Toprak Lizimetre Kazı

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Su Kullanımı Endokrin Aktivitesi Tarama Piyasada satılan<em&gt; İn Vitro</em&gt; Transaktivasyon biyolojik tayinler

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

A Lipid Extraction and Analysis Method for Characterizing Soil Microbes in Experiments with Many Samples

Çok Örnekli Deneylerde Toprak Mikroplarını Karakterize Etmek İçin Bir Lipid Ekstraksiyon ve Analiz Metodu

Microbial communities are important drivers and regulators of ecosystem processes. To understand how management of ecosystems may affect microbial ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

Bir basit tekniği sık su baskını/taşkın oluştuğu için yeniden kurulması ağaç dikme

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Sample Preparation Method of Scanning and Transmission Electron Microscope for the Appendages of Woodboring Beetle

Woodboring Böceği uzantıları için Tarama ve İletim Elektron Mikroskobu Örnek Hazırlama Yöntemi

This report described sample preparation methods that scanning and transmission electron microscope observations, demonstrated by preparing appendages of ...