Name: preparation of gushukang (gsk) granules for in vivo and in vitro experiments
Uploaded: 2019-05-09T12:30:00
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इस अध्ययन चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (81804116, 81673991, 81770107, 81603643, और 81330085) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था, अभिनव टीम के लिए कार्यक्रम, विज्ञान और प्रौद्योगिकी मंत्रालय चीन के (2015RA4002 WYJ), कार्यक्रम के लिए अभिनव टीम, चीन के शिक्षा मंत्रालय (IRT1270 WYJ करने के लिए), शंघाई TCM जीर्ण रोग के चिकित्सा केंद्र (2017-01010 WYJ करने के लिए), तीन साल की कार्रवाई पारंपरिक चीनी चिकित्सा योजना के विकास में तेजी लाने के लिए (YY(2018-2020)-CCCX-3003 WYJ करने के लिए, और राष्ट्रीय प्रमुख अनुसंधान विकास परियोजनाएं (2018YFC1704302)।

सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं को शंघाई विश्वविद्यालय के संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति के अनुमोदन से किया गया था (एसजेडवाई201604005)।
1. जीएसके कार्य समाधान की तैयारी और प्रशासन
<ol><li>माउस के लिए ...

<ol>
	<li>Shu, B., Shi, Q., Wang, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shen+(Kidney)-tonifying+principle+for+primary+osteoporosis:+to+treat+both+the+disease+and+the+Chinese+medicine+syndrome.">Shen (Kidney)-tonifying principle for primary osteoporosis: to treat both the disease and the Chinese medicine syndrome.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 21 (9), 656-661 (2015).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+naturally+derived+small+compound+Osthole+inhibits+osteoclastogenesis+to+prevent+ovariectomy-induced+bone+loss+in+mice.">The naturally derived small compound Osthole inhibits osteoclastogenesis to prevent ovariectomy-induced bone loss in mice.</a> Menopause. 25 (12), 1459-1469 (2018).</li><li>Liu, S. F., Sun, Y. L., Li, J., Dong, J. C., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+Herbal+Medicine:+Er-Xian+Decoction+and+Er-Xian-containing+Serum+for+In+vivo+and+In+vitro+Experiments.">Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In vivo and In vitro Experiments.</a> Journal of Visualized Experiments. (123), e55654 (2017).</li><li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+systemic+bone+protective+effects+of+Gushukang+granules+in+ovariectomized+mice+by+inhibiting+osteoclastogenesis+and+stimulating+osteoblastogenesis.">The systemic bone protective effects of Gushukang granules in ovariectomized mice by inhibiting osteoclastogenesis and stimulating osteoblastogenesis.</a> Journal of Pharmacological Sciences. 136 (3), 155-164 (2018).</li><li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oleanolic+acid+exerts+an+osteoprotective+effect+in+ovariectomy-induced+osteoporotic+rats+and+stimulates+the+osteoblastic+differentiation+of+bone+mesenchymal+stem+cells+in+vitro.">Oleanolic acid exerts an osteoprotective effect in ovariectomy-induced osteoporotic rats and stimulates the osteoblastic differentiation of bone mesenchymal stem cells in vitro.</a> Menopause. 19 (2), 225-233 (2012).</li><li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oleanolic+acid+exerts+bone+protective+effects+in+ovariectomized+mice+by+inhibiting+osteoclastogenesis.">Oleanolic acid exerts bone protective effects in ovariectomized mice by inhibiting osteoclastogenesis.</a> Journal of Pharmacological Sciences. 137 (1), 76-85 (2018).</li><li>Tang, D. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osthole+Stimulates+Osteoblast+Differentiation+and+Bone+Formation+by+Activation+of+&#946;-Catenin-BMP+Signaling.">Osthole Stimulates Osteoblast Differentiation and Bone Formation by Activation of &#946;-Catenin-BMP Signaling.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 25 (6), 1234-1245 (2010).</li><li>Tashino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="Serum+pharmacology"+and+"serum+pharmaceutical+chemistry":+from+pharmacology+of+Chinese+traditional+medicines+to+start+a+new+measurement+of+drug+concentration+in+blood.">"Serum pharmacology" and "serum pharmaceutical chemistry": from pharmacology of Chinese traditional medicines to start a new measurement of drug concentration in blood.</a> Therapeutic Drug Monitoring Research. 5, 54-64 (1988).</li><li>Fu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+Stromal+Cell-Derived+Factor+1-Mediated+Differentiation+of+Mouse+Bone+Marrow+Mesenchymal+Stem+Cells+into+Hepatocytes+Is+Enhanced+by+Chinese+Medicine+Yiguanjian+Drug-Containing+Serum.">Ex vivo Stromal Cell-Derived Factor 1-Mediated Differentiation of Mouse Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells into Hepatocytes Is Enhanced by Chinese Medicine Yiguanjian Drug-Containing Serum.</a> Evidence Based Complement Alternative Medicine. , 7380439 (2016).</li><li>Cao, Y., Liu, F., Huang, Z., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effects+of+Guanxin+Shutong+capsule+drug-containing+serum+on+tumor+necrosis+factor-alpha+induced+endothelial+dysfunction+through+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+and+the+nitric+oxide+pathway.">Protective effects of Guanxin Shutong capsule drug-containing serum on tumor necrosis factor-alpha induced endothelial dysfunction through nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase and the nitric oxide pathway.</a> Experimental and Therapeutic. 8 (3), 998-1004 (2014).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+serum+pharmacology+in+evaluating+the+antitumor+effect+of+Fuzheng+Yiliu+Decoction+from+Chinese+Medicine.">Application of serum pharmacology in evaluating the antitumor effect of Fuzheng Yiliu Decoction from Chinese Medicine.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 20 (6), 450-455 (2014).</li><li>Li, X. L., Wang, L., Bi, X. L., Chen, B. B., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gushukang+exerts+osteopreserve+effects+by+regulating+Vitamin+D+and+Calcium+metabolism+in+ovariectomized+mice.">Gushukang exerts osteopreserve effects by regulating Vitamin D and Calcium metabolism in ovariectomized mice.</a> Journal of Bone Mineral Metabolism. , 1-11 (2018).</li><li>Cui, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+study+of+Shen+(Kidney)tonifying+prescription+Gushukang+in+Preventing+and+Treating+Primary+Osteoporosis.">Mechanistic study of Shen (Kidney)tonifying prescription Gushukang in Preventing and Treating Primary Osteoporosis.</a> Journal of Chinese Medical University. 30 (16), 351-354 (2001).</li><li>Wang, Y., Shang, K., Li, Y. K., Tao, X. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+gushukang+on+osteoclast+cultured+from+type+I+diabetic+rat+in+vitro-a+preliminary+study.">Effect of gushukang on osteoclast cultured from type I diabetic rat in vitro-a preliminary study.</a> Chinese Journal of Bone Tumor and Bone Disease. 3 (12), 22-24 (2004).</li><li>Zhang, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Pharmacology Experiment. , (1996).</li><li>Zhao, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cyclophosphamide+causes+osteoporosis+in+C57BL/6+male+mice:+suppressive+effects+of+cyclophosphamide+on+osteoblastogenesis+and+osteoclastogenesis.">Cyclophosphamide causes osteoporosis in C57BL/6 male mice: suppressive effects of cyclophosphamide on osteoblastogenesis and osteoclastogenesis.</a> Oncotarget. 8 (58), 98163-98183 (2017).</li><li>Zhong, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized,+double-blind,+controlled+trial+of+a+Chinese+herbal+formula+(Er-Xian+decoction)+for+menopausal+symptoms+in+Hong+Kong+perimenopausal+women.">A randomized, double-blind, controlled trial of a Chinese herbal formula (Er-Xian decoction) for menopausal symptoms in Hong Kong perimenopausal women.</a> Menopause. 20 (7), 767-776 (2013).</li><li>Zhang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Issues+and+strategies+for+study+of+serum+pharmcology+in+oncology.">Issues and strategies for study of serum pharmcology in oncology.</a> Zhong Yi Yan Jiu. 17 (5), 13-14 (2004).</li><li>Nair, A. B., Jacob, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+practice+guide+for+dose+conversion+between+animals+and+human).">A simple practice guide for dose conversion between animals and human).</a> Journal of Basic and Clinical Pharmacy. 7 (2), 27-31 (2016).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+the+traditional+Chinese+medicine+xuesaitong+on+intestinal+ischemia-reperfusion+injury+in+rats.">Protective effect of the traditional Chinese medicine xuesaitong on intestinal ischemia-reperfusion injury in rats.</a> International Journal of Clinical and Experiments Medicine. 8 (2), 1768-1779 (2015).</li><li>Jiang, Y. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating-blood+and+dispelling-toxin+on+ox-LDL-induced+inflammatory+factors'+expression+in+endothelial+cells.">Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating-blood and dispelling-toxin on ox-LDL-induced inflammatory factors' expression in endothelial cells.</a> Chinese Journal of Integrative Medicine. 18 (1), 30-33 (2012).</li><li>Li, Y., Xia, J. Y., Chen, W., Deng, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Ling+Qi+Juan+Gan+capsule+drug-containing+serum+on+PDGF-induced+proliferation+and+JAK/STAT+signaling+of+HSC-T6+cells.">Effects of Ling Qi Juan Gan capsule drug-containing serum on PDGF-induced proliferation and JAK/STAT signaling of HSC-T6 cells.</a> Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi. 21 (9), 663-667 (2013).</li><li>Guo, C. Y., Ma, X. J., Liu, Q., Yin, H. J., Shi, D. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+Chinese+herbal+drug-containing+serum+for+activating+blood,+activating+blood+and+dispelling+toxin+on+TNF-alpha-induced+adherence+between+endothelial+cells+and+neutrophils+and+the+expression+of+MAPK+pathway.">Effect of Chinese herbal drug-containing serum for activating blood, activating blood and dispelling toxin on TNF-alpha-induced adherence between endothelial cells and neutrophils and the expression of MAPK pathway.</a> Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. 35 (2), 204-209 (2015).</li><li>Li, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+issues+in+methology+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology.">Some issues in methology of Chinese herbs serum pharmcology.</a> Zhong Yao Xin Yao Yu Lin Chuang Yao Li. 10 (5), 263 (1999).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+Chinese+herbs+serum+pharmcology+methodological+study.">A review of Chinese herbs serum pharmcology methodological study.</a> Nan Jing Zhong Yi Yao Da Xue Xue Bao. 18 (4), 254 (2002).</li><li>Pacifici, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen,+cytokines,+and+pathogenesis+of+postmenopausal+osteoporosis.">Estrogen, cytokines, and pathogenesis of postmenopausal osteoporosis.</a> Journal. Bone Mineral Research. 11, 1043-1051 (1996).</li><li>Ammann, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mice+expressing+soluble+tumor+necrosis+factor-receptor+are+protected+against+bone+loss+caused+by+estrogen+deficiency.">Transgenic mice expressing soluble tumor necrosis factor-receptor are protected against bone loss caused by estrogen deficiency.</a> Journal Clinical Investigation. 99, 1699-1703 (1997).</li><li>Kimble, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+block+of+interleukin-1+and+tumor+necrosis+factor+is+required+to+completely+prevent+bone+loss+in+the+early+postovariectomy+period.">Simultaneous block of interleukin-1 and tumor necrosis factor is required to completely prevent bone loss in the early postovariectomy period.</a> Endocrinology. 136, 3054-3061 (1995).</li></ol>

TCM एजेंटों के Granules योगों या नुस्खे के लिए आम विकल्पों में से एक बन गए हैं. GSK granules नैदानिक अनुभवों या TCM सिद्धांत के आधार पर कई हर्बल दवाओं से बना रहे हैं, और वे कम साइड इफेक्ट के साथ बेहतर उपचारात्मक प्रभाव लाग?...

पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) ऑस्टियोपोरोसिस के इलाज के लिए महत्वपूर्ण पूरक और वैकल्पिक तरीकों में से एक है1,2. जल का काढ़ा सूत्र3का मूल और सबसे अधिक उपयोग किया जाने वाला रूप है. हालांकि, कमियां भी मौजूद हैं: बुरा स्वाद, गाड़ी के लिए असुविधा, कम शेल्फ जीवन और असंगत प्रोटोकॉल, उपयोग ों को सीमित करने के साथ ही उपचारात्मक प्रभाव. उपर्युक्त नुकसानों से बचने के साथ-साथ बेहतर प्रभावों को आगे बढ़ाने के लिए, कणिकाओं का विकास किया गया और इसका व्यापक रूप से उपयोग किया गया है4. हालांकि कई अध्ययनों से granules से एक या एक से अधिक प्रभावी घटकों के औषधीय तंत्र का पता लगाया है5,6,7, सटीक तंत्र और अंतर्निहित औषधीय प्रक्रियाओं अभी भी कर रहे हैं की पहचान करने के लिए मुश्किल है. इसका कारण यह है कि एक कण से बहुत अधिक प्रभावी घटक एक साथ समान या विरोधित प्रभाव डाल सकतेहैं 4. इसलिए, एक मानक प्रोटोकॉल के विकास के लिए शरीर को देने से पहले granules तैयार न केवल चिकित्सीय परिणामों पर एक बड़ा प्रभाव पड़ेगा, लेकिन यह भी दोनों में विवो और इन विट्रो परख के लिए आवश्यक है.
इसके अलावा, क्लिनिक में granules के उपचारात्मक प्रभाव की पुष्टि करने के लिए मुश्किल कर रहे हैं और वास्तव में इन विट्रो या पूर्व vivo अध्ययन में उपयोग की पहचान, जो एक चुनौती पैदा करता है क्योंकि औषधीय तंत्र बहुत जटिल हैं. इसे हल करने के लिए, दवा युक्त सीरम की तैयारी पहली बार 1980 के दशक8में तशीनो द्वारा प्रस्तावित की गई थी। तब से, कई शोधकर्ताओं ने हर्बल दवा के लिए दवा युक्त सीरम लागू किया , जिसमें ग्रेन्युल्स9,10,11शामिल हैं . वर्तमान में, इन विट्रो जांच के लिए दवा युक्त सीरम का चुनाव एक रणनीति के रूप में माना जाता है जो शारीरिक स्थितियों की बारीकी से नकल करता है।
Gusukang (GSK) granules TCM के सिद्धांत के प्रकाश में नैदानिक अभ्यास के आधार पर postmenopausal ऑस्टियोपोरोसिस (पीओपी) के इलाज के लिए विकसित किए गए थे। GSK granules अंडाणु में ovariectomized (OVX) चूहों में हड्डी की हानि को रोकने, ऑस्टियोब्लास्टी हड्डी अवशोषण को बाधित, और ऑस्टियोब्लास्टिक हड्डी गठन को प्रोत्साहित4. नतीजतन, ली एट अल12 ने पाया कि GSK granules हड्डी गठन को प्रोत्साहित करने के लिए कैल्शियम रिसेप्टर की गतिविधियों को बढ़ाने के द्वारा OVX चूहों में हड्डी सुरक्षात्मक प्रभाव है. हड्डी की सुरक्षा के प्रभाव के साथ ही GSK granules के औषधीय प्रभाव की पुष्टि करने के लिए, लेखक यहाँ काम समाधान और दवा (GSK granule) युक्त सीरम की तैयारी के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया प्रदान करते हैं. इसके अलावा, यह लेख एक OVX प्रेरित ऑस्टियोपोरोटिक माउस मॉडल और जी एस के कणिका युक्त सीरम में इन विट्रो ऑस्टियोक्लेस्टोजेनेसिस/ऑस्टियोब्लास्टोजेनेसिस में जीएसके ग्रैन्युल्स के आवेदन का वर्णन करता है।
GSK granules कई जड़ी बूटियों से बना रहे हैं13,14 और पूरी तरह से नमकीन में आसानी से भंग किया जा सकता है. इसलिए, नमकीन वाहन के रूप में कार्य करता है. शाम संचालित चूहों (शाम) और OVX चूहों कणिका प्रशासित चूहों के रूप में नमकीन की एक ही मात्रा प्रशासित किया गया. माउस के लिए जीएसके ग्रेन्युल्स की समतुल्य खुराक की गणना मीह-रूबनर समीकरण15के आधार पर की गई थी। इस समीकरण न केवल सुरक्षित खुराकों प्राप्त करने का लाभ है, लेकिन यह भी औषधीय प्रभाव की गारंटी देताहै 15. GSK granules के तीन खुराकों निम्नानुसार उत्पन्न किए गए थे: (1) GSKL: OVX + कम खुराक GSK granules, 2 ग्राम / (2) GSKM: OVX + मध्यम खुराक GSK granules, 4 ग्राम / (3) GSKH: OVX + उच्च खुराक GSK granules, 8 g/ जीएसकेएल, जीएसकेएम और जीएसकेएच समूहों में चूहे को इंट्रागैस्ट्रिक रूप से जीएसके ग्रेन्युल्स प्रशासित किया गया था। कैल्शियम कार्बोनेट (600 mg/tablet) विटामिन डी 3 (125 अंतरराष्ट्रीय इकाई/टेबलेट) के साथ, उदाहरण के लिए, एक परिपक्व और विपणन उत्पाद में (उदाहरण के लिए, ऑस्टियोपोरोसिस के इलाज और रोकथाम के लिए Caltrate [CAL]), एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में इस्तेमाल किया गया था।

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>&#945;-MEM</td>
			<td>Hyclone 
			laboratories</td>
			<td>SH30265.018</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-Glycerophosphate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>G5422</td>
			<td>Osteoblastogenesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caltrate (CAL)</td>
			<td>Wyeth</td>
			<td>L96625</td>
			<td>Animal interventation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C57BL/6 mice</td>
			<td>SLAC Laboratory 
			Animal Co. Ltd.</td>
			<td>Random</td>
			<td>Ainimal preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dexamethsome</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D4902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D2438</td>
			<td>Cell frozen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA)</td>
			<td>Sangon Biotech</td>
			<td>60-00-4</td>
			<td>Samples treatmnet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal bovine serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>FL-24562</td>
			<td>For cell culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gushukang granules</td>
			<td>kangcheng companyin china</td>
			<td>Z20003255</td>
			<td>Herbal prescription</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Olympus BX50</td>
			<td>Olympus BX50</td>
			<td>Images for osteoclastogenesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Ascorbic acid 2-phosphate sequinagneium slat hyclrate</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A8960-5G</td>
			<td>Osteoblastogenesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica</td>
			<td>DMI300B</td>
			<td>Osteocast and osteoblast imagine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M-CSF</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>AF-300-25-10</td>
			<td>Osteoclastogenesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#924;icro-CT</td>
			<td>Scanco 
			Medical AG</td>
			<td>&#956;CT80 radiograph microtomograph</td>
			<td>Bone Structural analsysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RANKL</td>
			<td>Peprotech</td>
			<td>11682-HNCHF</td>
			<td>Osteoclastogenesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley</td>
			<td>SLAC Laboratory 
			Animal Co. Ltd.</td>
			<td>Random</td>
			<td>Blood serum collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tartrate-Resistant Acid Phosphate (TRAP) Kit</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>387A-1KT</td>
			<td>TRAP staining</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation of gushukang (gsk) granules for in vivo and in vitro experiments

पारंपरिक चीनी हर्बल दवा कई बीमारियों के इलाज में एक वैकल्पिक विधि के रूप में एक भूमिका निभाता है, जैसे रजोनिवृत्ति के बाद ऑस्टियोपोरोसिस (पीओपी)। गुसुकांग (GSK) granules, चीन में एक विपणन पर्चे, पॉप के इलाज में हड्डी की सुरक्षा त्मक प्रभाव पड़ता है. शरीर के लिए प्रशासन से पहले, एक मानक तैयारी प्रक्रिया आमतौर पर आवश्यक है, जो कच्चे जड़ी बूटियों से सक्रिय घटकों की रिहाई को बढ़ावा देने और औषधीय प्रभाव के रूप में के रूप में अच्छी तरह से चिकित्सीय परिणामों को बढ़ाने के उद्देश्य. इस अध्ययन में वीवो में और इन विट्रो प्रयोगात्मक परख में GSK granules का उपयोग करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल का प्रस्ताव है. वजन, भंग, भंडारण, और प्रशासन: लेखकों पहले vivo जांच में के लिए granules के पशु उपयुक्त खुराकों की गणना करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं. दूसरा, यह आलेख माइक्रो-सीटी स्कैनिंग और हड्डी पैरामीटर की माप के लिए प्रोटोकॉल का वर्णन करता है। नमूना तैयारी, माइक्रो-सीटी मशीन चलाने के लिए प्रोटोकॉल और हड्डी मानकों के परिमाणीकरण का मूल्यांकन किया गया। तीसरा, सीरम युक्त जीएसके ग्रेन्युल्स तैयार किए जाते हैं, और दवा युक्त सीरम इन विट्रो ऑस्टियोक्लेस्टोजेनेसिस और ऑस्टियोब्लास्टोजेनेसिस के लिए निकाला जाता है। जीएसके ग्रेन्युल्स को लगातार तीन दिनों तक चूहों को प्रतिदिन दो बार प्रशासित किया जाता था। रक्त तो एकत्र किया गया था, centrifuged, निष्क्रिय, और फ़िल्टर. अंत में, सीरम पतला था और ऑस्टियोक्लेस्टोजेनेसिस और ऑस्टियोब्लास्टोजेनेसिस के प्रदर्शन के लिए इस्तेमाल किया गया था। यहाँ वर्णित प्रोटोकॉल हर्बल पर्चे दवाओं के औषधीय जांच के लिए एक संदर्भ माना जा सकता है, इस तरह के granules के रूप में.

माइक्रो-सीटी स्कैनिंग परिणामों से संकेत मिलता है कि OVX चूहों लवण नियंत्रण चूहों की तुलना में महत्वपूर्ण हड्डी हानि दिखाया (चित्र 1A). जीएसके ग्रेन्युल्स के हस्तक्षेप (90 दिनों) ने ब?...

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Preparation Of Gushukang GSK Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

यह लेख पशु अध्ययन और इन इन विट्रो प्रयोगों के लिए सीरम युक्त GSK granule sausukang granules के एक काम समाधान तैयार करने के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करता है. इस प्रोटोकॉल हर्बल दवाओं के औषधीय जांच के लिए लागू किया जा सकता है के रूप में के रूप में अच्छी तरह से दोनों vivo में और इन विट्रो प्रयोगों के लिए नुस्खे.

विवो और इन विट्रो प्रयोगों के लिए गुशुकंग (जीएसके) ग्रंथों की तैयारी

Traditional Chinese herbal medicine plays a role as an alternative method in treating many diseases, such as postmenopausal osteoporosis (POP). Gushukang ...

यह प्रोटोकॉल वीवो अध्ययनों के लिए कणिकाओं के एक काम समाधान की तैयारी के साथ-साथ इन विट्रो प्रयोगों के लिए कणिका युक्त सीरम की तैयारी की सुविधा देता है। इस तकनीक का एक फायदा यह है कि सामग्री की कम लागत और आपके द्वारा प्रयोगों के लिए बनाए गए जानवरों के कारण विधि को आसानी से दोहराया जा सकता है। आठ, 16, और 24 ग्राम गुशुकांग, या जीएसके, कणिकाओं को व्यक्तिगत 50-मिलीलीटर ट्यूबों में जोड़कर शुरू करें।प्रत्येक ट्यूब में 48 मिलीलीटर पानी जोड़ें, और कणिकाओं को पूरी तरह से भंग करने के लिए ट्यूबों को हिलाएं। फिर, कैल्शियम कार्बोनेट की 1.6 गोलियों को विटामिन डी 3 के साथ एक और 50-मिलीलीटर ट्यूब में रखें, और गोलियों को मिलाते हुए नमकीन के 48 मिलीलीटर में भंग करें। समाधान के इंट्रागैस्ट्रिक प्रशासन के लिए, पहले धीरे लेकिन दृढ़ता से मैन्युअल रूप से दो से तीन मिनट के लिए एक महीने की उम्र, महिला, C57 काले 6 माउस को नियंत्रित करते हैं।जब माउस शांत हो जाता है, तो जीएसके कणिकाओं के एक कार्य समाधान के 0.24 मिलीलीटर के साथ 40 मिलीमीटर, संख्या 12 गैवेज सुई लोड करें, और जब तक सुई प्रतिरोध महसूस न हो जाए तब तक उसके मुंह के एक तरफ के माध्यम से माउस में गैव सुई रखें, यह दर्शाता है कि सुई पेट तक पहुंच गई है। जानवर में काम करने के समाधान की पूरी मात्रा इंजेक्ट करें। फिर, गैवेज सुई को वापस लें, और माउस को अपने पिंजरे में वापस करें, जबकि अन्य चूहों को एक ही तरीके से प्रत्येक माउस में कैल्शियम कार्बोनेट और विटामिन डी 3 समाधान के 0.24 मिलीलीटर इंजेक्शन से पहले जीएसके प्रशासित किया जा रहा है।जीएसके युक्त रक्त सीरम संग्रह के लिए, जीएसके की उचित सांद्रता को गैवेज द्वारा चूहे तक पहुंचाने के बाद, पिछले जीएसके कणिका प्रशासन के एक घंटे बाद एक घंटे तक चुटकी लेने के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करें। पेट की त्वचा और पेरिटोनियल चीरा बनाएं, और पेट को छाती के नीचे बेनकाब करें। पोत को स्पष्ट रूप से बेनकाब करने के लिए पेट महाधमनी के संयोजी ऊतक को हटाने के लिए ऊतक कागज का उपयोग करें, और महाधमनी से रक्त आकर्षित करने के लिए 22 गेज सुई से लैस 10 मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग करें।रक्त को बाँझ 15 मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें, और ट्यूब को 30 से 60 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर सीधा रखें। जब रक्त का थक्का होता है, तो सीरम को अलग करने के लिए ट्यूब को अपकेंद्रित्र करें, और छह चूहों को एक नए 50-मिलीलीटर ट्यूब में स्थानांतरित करें। 30 मिनट के लिए 56 डिग्री सेल्सियस पानी स्नान में सीरम घटकों को निष्क्रिय करने से पहले सीरा को मिलाने के लिए ट्यूब को हिलाएं।फिर, एक साल तक के लिए शून्य से 80 डिग्री सेल्सियस पर भंडारण के लिए 0.22 माइक्रोमीटर-पोर आकार हाइड्रोफिलिक पॉलीएथर्सल्फोन सिरिंज फिल्टर के माध्यम से सीरम को फ़िल्टर करें। इन विट्रो ऑस्टियोसास्टाटोजेनेसिस के लिए, जीएसके युक्त सीरम की तीन खुराकों को एक-से-चार अनुपात में पतला करें, जिसमें न्यूनतम ईगल के माध्यम एल-ग्लूटामाइन, राइबोन्यूकोमोक्लियोसाइड्स और डिऑक्सीरिबोक्यूकोन्यूकोसाइड्स के साथ पूरक हैं। एक 96-अच्छी तरह से प्लेट में एक अस्थि मज्जा मैक्रोफेज संस्कृति के प्रत्येक कुएं में प्रत्येक कमजोर पड़ने के 200 माइक्रोलीटर जोड़ें।फिर, न्यूक्लियर फैक्टर-कापा बी लिगांड के लिए मैक्रोफेज कॉलोनी-उत्तेजक कारक और रिसेप्टर एक्टिवेटर के साथ प्रत्येक अच्छी तरह से उत्तेजक करके ऑस्टियोक्लास्ट पीढ़ी शुरू करें। इन विट्रो ऑस्टियोब्लास्टोजेनेसिस के लिए, 24-अच्छी प्लेट बोन मेसेन्चिमल स्टेम सेल कल्चर के प्रत्येक कुएं में पतला जीएसके युक्त सीरम के दो मिलीलीटर जोड़ें। माइक्रो-कंप्यूटेड टोमोग्राफी स्कैनिंग परिणामों से संकेत मिलता है कि ओवारेक्टोमिज्ड चूहे खारा नियंत्रण चूहों की तुलना में महत्वपूर्ण हड्डी हानि प्रदर्शित करते हैं।जीएसके कणिका उपचार के 90 दिनों के साथ हस्तक्षेप से बोन मैरो घनत्व में काफी वृद्धि होती है, विशेष रूप से मध्यम खुराक जीएसके-उपचारित जानवरों में। जीएसके कणिका उपचार भी एक वृद्धि हुई ट्रॉबेकुलर हड्डी संख्या, कुल मात्रा में हड्डी की मात्रा, और trabecular हड्डी मोटाई की ओर जाता है, लेकिन एक कम हड्डी-trabecular हड्डी जुदाई । टार्ट्रेट प्रतिरोधी एसिड फॉस्फेट, या ट्रैप, धुंधला नियंत्रण जानवरों की तुलना में ओवेरेक्टोमाइज्ड चूहों में ऑस्टियोक्लास्ट की संख्या में वृद्धि का पता चलता है, जबकि जीएसके कणिका उपचार ओवेरेक्टोमिज्ड जानवरों की तुलना में जाल-सकारात्मक ऑस्टियोक्लास्ट भेदभाव को कम करते हैं।जीएसके कणिका युक्त सीरम भी नियंत्रण जानवरों से एकत्र सीरम की तुलना में जाल-सकारात्मक ऑस्टियोक्लास्ट की संख्या को कम करता है। पेट महाधमनी में सुई का सफल प्रवेश यह गारंटी देने के लिए महत्वपूर्ण है कि प्रत्येक चूहे से उच्च पर्याप्त मात्रा में रक्त काटा जाता है। इस विधि के सफल निष्पादन को 15 से 20 मिलीमीटर रक्त के संचय को आवंटित करना चाहिए, इन विट्रो प्रयोगों के लिए पर्याप्त सामग्री का उपयोग किया जाना चाहिए।

Research

JoVE Journal

Medicine

Preparation Of Gushukang (GSK) Granules for In Vivo and In Vitro Experiments

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

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सेल ट्रैकिंग के लिए विवो 19 एफ एमआरआई में

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

चूहे में Taxanes के फार्माकोकाइनेटिक और pharmacodynamic विश्लेषण के लिए मन्या धमनी आधान

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Evaluating the Effectiveness of Cancer Drug Sensitization In Vitro and In Vivo

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Validation of Nanobody and Antibody Based In Vivo Tumor Xenograft NIRF-imaging Experiments in Mice Using Ex Vivo Flow Cytometry and Microscopy

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Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

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Optimized Analysis of In Vivo and In Vitro Hepatic Steatosis

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Preparation and In Vitro Characterization of Magnetized miR-modified Endothelial Cells

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तैयार करना और<em&gt; इन विट्रो</em&gt; चुम्बकीय की विशेषता मीर संशोधित अंतर्कलीय कोशिकाओं

To date, the available surgical and pharmacological treatments for cardiovascular diseases (CVD) are limited and often palliative. At the same time, gene ...

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

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Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

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इन विट्रो में और Vivo में मानव कोशिकाओं में Mitophagy का पता लगाने, सी. एलिगेंस, और चूहों

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Use of a Linear Accelerator for Conducting In Vitro Radiobiology Experiments

इन विट्रो रेडियोबायोलॉजी प्रयोगों के संचालन के लिए एक रैखिक त्वरक का उपयोग

Radiation therapy remains one of the cornerstones of cancer management. For most cancers, it is the most effective, nonsurgical therapy to debulk tumors. ...