Name: remote laboratory management: respiratory virus diagnostics
Uploaded: 2019-04-06T14:30:00
Duration: 14 min 56 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics at JoVE.com

محتوى هذه المقالة لا تعكس بالضرورة وجهات نظر أو سياسات "لنا وزارة للصحة والخدمات الإنسانية" أو المؤسسات المنتسبة المؤلفين. وأيد هذا البحث بول غ. ألن الأسرة مؤسسة "المحسن صفر-الأثر، جراب الذكية في حالات الطوارئ". ونحن نقدر جميع المناقشات المثمرة والتعاون مع الزملاء من كلية بايلور للطب والصحة دائرة الأمن العام ومركز جونسون الفضائي التابع لناسا. ونحن ممتنون صدق "سسينتيفيكس فيشر الحرارية" وممثليها للحصول على قرض لالة RT-PCR وأجهزة الطرد المركزي، والماصات الآلي إجراء اختبار تشخيص فيروس تنفسي في مرفق مختبر بعد. الكتاب ممتنون لمارتا ستورل-ديزموند وسيدني ستيفن سوريل لمساعدتها في إعداد المخطوطات والفيديو.

<ol>
	<li>World Health Organization (WHO) Ebola Response Team. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ebola+virus+disease+in+West+Africa+-+the+first+9+months+of+the+epidemic+and+forward+projections.">Ebola virus disease in West Africa - the first 9 months of the epidemic and forward projections.</a> New England Journal of Medicine. 371 (2), 1481-1495 (2014).</li><li>World Health Organization (WHO). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Media Center: Ebola Virus Disease Fact Sheet No. 103. , (2014).</li><li>Fauci, A. S., Morens, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+Virus+in+the+Americas+-+yet+another+arbovirus+threat.">Zika Virus in the Americas - yet another arbovirus threat.</a> New England Journal of Medicine. 374 (7), 601-604 (2016).</li><li>Campos, G. S., Bandeira, A. C., Sardi, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zika+virus+outbreak,+Bahia,+Brazil.">Zika virus outbreak, Bahia, Brazil.</a> Emerging Infectious Diseases. 21 (10), 1885-1886 (2015).</li><li>Aly, M., Elrobh, M., Alzayer, M., Aljuhani, S., Balkhy, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Occurrence+of+the+Middle+East+Respiratory+Syndrome+Coronavirus+(MERS-CoV)+across+the+Gulf+Corporation+Council+countries:+Four+years+update.">Occurrence of the Middle East Respiratory Syndrome Coronavirus (MERS-CoV) across the Gulf Corporation Council countries: Four years update.</a> PLoS ONE. 12 (10), e0183850 (2017).</li><li>World Health Organization (WHO). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Middle+East+respiratory+syndrome+coronavirus+(MERS-CoV)+-+Oman.">Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) - Oman.</a> Media Center: Disease outbreak news. Mar 18. , (2018).</li><li>Ducharme, J., Johnson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=This+flu+map+shows+how+the+biggest+influenza+outbreak+in+years+spread+across+the+U.S.">This flu map shows how the biggest influenza outbreak in years spread across the U.S.</a> Time, Time Health: Public Health. , (2018).</li><li>Gaglani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influenza+vaccine+effectiveness+against+2009+pandemic+influenza+A(H1N1)+virus+differed+by+vaccine+type+during+2013-2014+in+the+United+States.">Influenza vaccine effectiveness against 2009 pandemic influenza A(H1N1) virus differed by vaccine type during 2013-2014 in the United States.</a> Journal of Infectious Diseases. 213 (10), 1546-1556 (2016).</li><li>Gates, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+next+epidemic+-+lessons+from+Ebola.">The next epidemic - lessons from Ebola.</a> New England Journal of Medicine. 372 (15), 1381-1384 (2015).</li><li>Mills, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Health+care+systems+in+low-+and+middle-income+countries.">Health care systems in low- and middle-income countries.</a> New England Journal of Medicine. 370 (15), 552-557 (2014).</li><li>W&#246;lfel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mobile+diagnostics+in+outbreak+response,+not+only+for+Ebola:+a+blueprint+for+a+modular+and+robust+field+laboratory.">Mobile diagnostics in outbreak response, not only for Ebola: a blueprint for a modular and robust field laboratory.</a> Euro Surveillance. 20 (44), 30055 (2015).</li><li>Connelly, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Through+innovation,+education+and+collaboration,+Baylor+Global+Initiatives+seeks+to+transform+health+and+patient+care+worldwide.">Through innovation, education and collaboration, Baylor Global Initiatives seeks to transform health and patient care worldwide.</a> TMC Pulse, Global Perspective. , (2015).</li><li>Hersh, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=USAID+funds+Ebola+'smart+pod'+project.">USAID funds Ebola 'smart pod' project.</a> Federal Times. , (2015).</li><li>Waite, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergency+Smart+Pods+-+Transforming+Containers+into+Modern+Medical+Clinics.">Emergency Smart Pods - Transforming Containers into Modern Medical Clinics.</a> DipNote, U.S. Department of State Official Blog. , (2018).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide to US Department of Health and Human Services Regulations. , (2015).</li><li>Center for Disease Control and Prevention (CDC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Website: Clean up after a Disaster. , (2017).</li><li>Flannery, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+genetic+characterization+of+influenza+A(H3N2)+viruses+and+vaccine+effectiveness+by+genetic+group,+2014-2015.">Enhanced genetic characterization of influenza A(H3N2) viruses and vaccine effectiveness by genetic group, 2014-2015.</a> Journal of Infectious Diseases. 214 (7), 1010-1019 (2016).</li><li>Spencer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+real-time+RT-PCR+cycle+threshold+values+among+medically+attended+influenza+episodes.">Factors associated with real-time RT-PCR cycle threshold values among medically attended influenza episodes.</a> Journal of Medical Virology. 88 (4), 719-723 (2016).</li><li>Cherpillod, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ebola+virus+disease+diagnosis+by+real-time+RT-PCR:+A+comparative+study+of+11+different+procedures.">Ebola virus disease diagnosis by real-time RT-PCR: A comparative study of 11 different procedures.</a> Journal of Clinical Virology. 77, 9-14 (2016).</li><li>Dedkov, V. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+evaluation+of+a+real-time+RT-PCR+assay+for+the+detection+of+Ebola+virus+(Zaire)+during+an+Ebola+outbreak+in+Guinea+in+2014-2015.">Development and evaluation of a real-time RT-PCR assay for the detection of Ebola virus (Zaire) during an Ebola outbreak in Guinea in 2014-2015.</a> Journal of Virological Methods. 228, 26-30 (2016).</li><li>Cnops, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developement,+integration+of+a+quantitative+reverse-transcription+polymerase+chain+reaction+diagnostic+test+for+Ebola+virus+on+a+molecular+diagnostics+platform.">Developement, integration of a quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction diagnostic test for Ebola virus on a molecular diagnostics platform.</a> Journal of Infectious Diseases. 214 (3), S192 (2016).</li><li>Keitel, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+research+response+to+the+2009+A(H1N1)pdm09+influenza+pandemic+(Revised).">Rapid research response to the 2009 A(H1N1)pdm09 influenza pandemic (Revised).</a> BMC Research Notes. 6, 177 (2013).</li><li>Parsons, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+diagnosis+of+tuberculosis+in+resource-poor+countries:+challenges+and+opportunities.">Laboratory diagnosis of tuberculosis in resource-poor countries: challenges and opportunities.</a> Clinical Microbiology Reviews. 24 (6), 314-350 (2011).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Expandable Bicon Shelter. Commercial Manual. Sea Box. , (2019).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lab+Safety.+Operating+the+Glovebox.">Lab Safety. Operating the Glovebox.</a> JoVE Science Education Database. , (2018).</li><li>World Health Organization (WHO). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Collecting, preserving and shipping specimens for the diagnosis of avian influenza A(H5N1) virus infection. , (2006).</li><li>Lorenz, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymerase+Chain+Reaction:+Basic+Protocol+Plus+Troubleshooting+and+Optimization+Strategies.">Polymerase Chain Reaction: Basic Protocol Plus Troubleshooting and Optimization Strategies.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e3998 (2012).</li></ol>

كلية طب بايلور يحمل الولايات المتحدة طلب براءة المؤقت "العيادات المتنقلة" (الولايات المتحدة براءات الاختراع التطبيق رقم 15/523,126، # 620078924). الكتاب يعلن أن لديهم أي مصلحة مالية المتنافسة.

مرفق مختبر بعد المذكورة أعلاه لوجستيا المنحى وقابلة للتوسيع، وسرعة الانتشار، متعددة الوظائف، واستنادا إلى مفاهيم التصميم التي تتمحور حول الإنسان التي كانت موجهة لحماية كفاءة الموظفين ومساحة عمل المختبر. ووضع البروتوكول مفصلاً لإنشاء مختبر سريع وعزل الفيروس التنفسي آمنة والتشخيص وقدم.
يجب الحفاظ على الشروط التالية لتشغيل المعدات الأمثل، في وحدات المختبر: درجة الحرارة المحيطة 21 ± 2 درجة مئوية ودرجة الحرارة المسموح بها من 5 إلى 40 درجة مئوية والرطوبة من 14 ± 5% رطوبة نسبية، الرطوبة النسبية القصوى المسموح بها من رطوبة نسبية 80% (بدون تكاثف)، وارتفاع يتراوح بين 0 و 000 2 متر فوق مستوى سطح البحر.
استهلاك الطاقة واحدة من أهم البارامترات للإدارة للمختبرات خارج الشبكة. للمعدات المختبرية الأساسية، يمكن أن تختلف كفاءة الطاقة 15-40 ٪؛ ومع ذلك، يقدر متوسط استهلاك الطاقة هنا لتقديم خدمة مناسبة. أعلى معدل للطاقة (1,500-2,000 W) تتصل بأجهزة تكييف الهواء ونظام الدرج الأمامي وجهاز PCR ومعقم اﻷوتوكﻻف. النظر 8 ساعات عمل المكثف التي تقوم بتنفيذ البروتوكول و 16 ساعة لمراقبة البيئة مختبر، استهلاك الطاقة اليومي لوحدات المختبر ما يقرب 36 كيلووات ساعة/يوم ل BSL-2 وحوالي 43 كيلووات ساعة/يوم ل BSL-3 73 كيلوواط ساعة/يوم بالنسبة متصل BSL-2/BSL-3 + مرافق. لوحدة واحدة، نوصي بتوفير مصدر للطاقة الكهربائية مع قدرة إيه إيت طاقة التشغيل/مستمر/ابتداء من ارتفاع الطاقة كيلوواط، إيه وان زيرو كيلو واط؛ مرفق متصلة، طاقة التشغيل/المستمر إيه وان تو كيلو واط، وبدءا من الطفرة/السلطة إيه وان فور كيلو واط. ملاحظة، في مرفق مختبر BSL-3، ينصح بشدة مصدر طاقة احتياطية لتجنب انقطاع الكهرباء عرضي وضمان العمل المطرد لنظام الضغط السلبي وصندوق قفازات أثناء اختبار تشخيصي.
مولد بنزين بالطاقة كهربائية حل فعالة من حيث التكلفة لإمدادات الطاقة في حالات الطوارئ. نفترض أن كفاءة الوقود للمولدات البنزين حوالي 1.5 غالون في مدار في حمولة 100%. ثم، إذا كان متوسط استهلاك الطاقة اليومي تحميل 8 ساعات من 40% 16 ساعة تحميل 10%، وحدة المختبر BSL-2 أو BSL 3 تتطلب 7-9 غالون من الوقود يوميا، في المقابل، ومرفق متصلة احتياجات غال ~ 15/يوم.
الوحدات مختبر بعد مصممة لتناسب قدرات أنظمة شمسية خارج الشبكة. الألواح الشمسية لا تحتاج إلى وقود إضافي، ويمكن أن تعمل بإنتاجية عالية في المناطق الاستوائية وشبه الاستوائية في أفريقيا وآسيا وأمريكا اللاتينية بسبب الإشعاع الشمسي العالي. في الوقت الراهن، وحدة واحدة من نظام الألواح الشمسية المتاحة تجارياً يسمح استخدام طاقة يومية لتصل إلى 44 كيلوواط ساعة/يوم.
بغض النظر عن النوع المحدد من مصدر بديل للطاقة الكهربائية، أوصى بشدة مرشحات الكهرباء القذرة ومسبقا في مرافق مختبرية لتحسين نوعية الطاقة وحماية المعدات المختبرية. الحفاظ على نظام PCR بعيداً عن مصادر الإشعاع الكهرومغناطيسي القوى ودون رادع لأن الإشعاع الكهرومغناطيسي قوية قد تتداخل مع الأداء السليم للجهاز. كما أنها تفعل المهم عدم استخدام مصادر النظام PCR بالقرب من الاهتزاز القوى، مثل أجهزة الطرد المركزي أو مضخة للاهتزاز المفرط سوف يؤثر على أداء الصك. قد يمكن تثبيت معدات المختبرات فقط في بيئة له نونكوندوكتيفي الملوثات، مثل ذرات الغبار أو رقائق الخشب. ضمان الغرفة بعيداً عن أي فتحات يمكن أن تطرد المواد الجسيمية على مكونات الصك.
استخدام مختبر المياه يتوقف على عدد من الاختبارات التشخيصية التي تعمل يوميا وعدد من فنيي المختبرات العاملة في المنشأة. مطلوب من أجل إعداد خلاطات أثناء إجراء التشخيص بما في ذلك استخراج واختبار PCR نوكلاس المياه مجاناً ويجب أن يتم تسليم اللوازم مقدما عن الأخرى، والمواد الكيميائية. هناك حاجة إلى مالا يقل عن 50 مل مياه مجاناً نوكلاس لتشغيل اختبار تشخيص واحد؛ حجم المطلوب من المياه مجاناً نوكلاس يعتمد على حجم العمل (أي، على عدد من العينات). الماء المقطر هو المطلوب لتشغيل معقم اﻷوتوكﻻف. استهلاك المياه اﻷوتوكﻻف في دورة واحدة 160-180 مل؛ ويوصي في اﻷوتوكﻻف للاستخدام اليومي. معظم المواد البلاستيكية (أنابيب، ونصائح ماصة، إلخ) المتاح، ولكن بعضها يمكن إعادة استخدامها وتحتاج إلى غسلها (حاويات كبيرة، رفوف، إلخ.). يتم استخدام المياه الجارية العادية لغسل اليدين بين الإجراءات ويقدر حجمه الحد الأدنى لتكون 15-20 لتر يوميا. الماء يحتاج إلى ضخ للضغط؛ يوصي بالرواسب قبل تصفية نظام لحماية أجهزة المياه من التأثير الضار للرواسب وتحسين نوعية المياه الجارية.
للتخزين البارد، ثلاجة 5.1 قدم مكعب واحد على الأقل (+ 4 درجة مئوية) وواحد 4.9 قدم مكعب (-20 درجة مئوية إلى-30 درجة مئوية) المجمد مطلوبة في كل وحدة المختبر لتخزين العينات/الجيش الملكي النيبالي.
مختبر التلوث تشمل عدة مستويات: تنظيف > مراجعتان > التطهير > التعقيم. تنظيف بسيطة يمكن أن يؤديها باستخدام الماء والصابون أثناء الغسل مع القفاز اليد أو الفرشاة. ويشمل مراجعتان الغسيل مع مضادات الميكروبات السائلة الكيميائية كي تمنع نمو وتكاثر الجراثيم. حلول الكحول (70%) يمكن استخدامها كسائل مطهر. التعقيم هو تطبيق مادة كيميائية سائلة للقضاء على ما يقرب من جميع الأحياء المجهرية الممرضة (باستثناء الجراثيم البكتيرية) على أسطح العمل والمعدات. وقت التعرض للمواد الكيميائية ودرجات الحرارة، وتركيز المطهرات هامة. محلول هيبوكلوريت الصوديوم (0.5%)، أو التبييض، مطهر فعال على نطاق واسع لتنقية المياه وتنقية السطحية. البنفسجية مبيد للجراثيم طريقة أخرى للتطهير. مصباح مبيد للجراثيم تنتج ضوء الأشعة فوق البنفسجية-C، ويؤدي إلى المنظمة من البكتيريا والفيروسات. التعقيم يستخدم إجراء الفيزيائية أو الكيميائية لتدمير الحياة الجرثومية كافة-بما في ذلك الجراثيم البكتيرية شديدة المقاومة. يمكن إجراء التعقيم مع معقم اﻷوتوكﻻف.
يجب فصل كل مختبر النفايات عند نقطة الجيل. مكان النفايات الصلبة، غير حادة، والمعدية في أكياس النفايات مانعة للتسرب علامة واقية. إذا كانت النفايات المنتجة حادة، فإنه يجب أن توضع في حاويات مقاومة للثقب. جمع النفايات السائلة يحتمل أن تكون معدية في حاويات واقية المسماة بشكل صحيح للسوائل. حاويات وأكياس ينبغي عدم شغل أكثر من 2/3 وحدة التخزين. يجب أن يتم فرز التخلص من جميع منتجات التبييض إلى بن النفايات المعينة الخاصة بهم. يجب معالجة النفايات المخبرية برفق لتجنب توليد الهباء الجوي والكسر من أكياس/الحاويات. يجب أن تكون أكياس/صناديق جمع النفايات واقية مع الأسطح الخارجية ومختومة تطهير بعد الاستخدام مع محلول هيبوكلوريت الصوديوم 0.5%. تعقيم كل معمل النفايات في اﻷوتوكﻻف على 121 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة قبل الحرق. الرجوع إلى دليل عمل للاستخدام السليم اﻷوتوكﻻف. إذا كان ذلك ممكناً، إضافة مؤشر كيماوية أو بيولوجية إلى اﻷوتوكﻻف لضمان التعقيم السليم. يجب أن تكون جميع النفايات الصلبة والسائلة يعقم المسمى بوضوح كتعقيم مع الإعداد والتاريخ، والوقت، والمشغل. ثم يجب أن توضع النفايات المسمى في منطقة آمنة منفصلة قبل الحرق.
كما هو متوقع، يتوقف سير العمل للاختبار التشخيصي على المرض والعينة. إذا كان من المستحسن لتحديد هوية الفيروس لجمع عينات الدم (مثل فيروس إيبولا19)، يمكن تخزين العينة مختبرين في-20 درجة مئوية بدلاً من-80 درجة مئوية (اللازمة للبحث عن فيروسات الجهاز التنفسي). من الأفضل دائماً أن عينة واحدة أو أكثر عند أخذ العينات من مريض من تقسيم العينات في وقت لاحق. إذا كان ذلك ممكناً، يجب اتخاذ العينات اثنين على الأقل لكل نوع من العينات في أنابيب عينات منفصلة. يجب أن تكون العينات الفرعية المقسمة إذا لم يكن ممكناً أخذ العينات الإضافية.
إذا كان لا يمكن تخزين العينات البديلة في درجات الحرارة المناسبة (مثلاً، لا المجمدات متاحة)، يجب تخزين مسحات النقي (100%) الإيثانول أو 99% ميثليته روح (إضافات الميثانول فقط). وفي هذه الحالة، يجب أن يوضع طرف مسحه في قنينة مع 1-2 مل إيثانول. علما بأن هذه العينات مناسبة فقط لبكر. أيضا، علما بأن مقايسة راسخة ضروري لكل8،تشخيص الفيروس خاصة23، ويجب أن ترسل عينات الفيروس غير معروف إلى المختبرات المخصصة لمواصلة التحقيقات19،20، 21.
يجب الاعتراف بالمتطلبات الإلزامية والموصى به إلى القائمة المعدات المختبرية لاختبارات PCR تشخيص الفيروس التنفسي. ويؤكد الجدول 3 المعدات الأساسية والمتقدمة الحد الأدنى (مستحسن) ومتطلبات الاختبار التشخيصي RT-PCR. للممارسة BSL-3، حماية الضغط السلبي إضافية (مثلاً، صندوق قفازات) موظفي حاسمة وضرورية.
وحدات المختبر متصلة الأفضل زيادة عدد الأفراد المشاركين في التجارب المختبرية وتسريع الوقت اللازم لاختبار واحد. الاستعاضة عن استخراج الحمض النووي الريبي اليدوية تستغرق وقتاً طويلاً من الممكن مع qPCR الآلي (مثلاً، قياكوبي). بينما هذا الصك مرهقة (عرض 65 سم، الطول 62 سم، ارتفاع 86 سم)، يمكن أن يصلح مساحة المختبر المتنقل بعد إعادة ترتيب الأثاث في وحدات BSL-2 أو BSL 3.
سوف تركز العمل في المستقبل على تطوير واقع زيادة (ع) ودورات تدريبية في الواقع الافتراضي (VR). نظارات ع/VR ستستخدم لتوفير منصة تفاعلية لتعليم المهارات المطلوبة اللازمة لكي تصبح عامل مختبر المدربين تدريبا جيدا. نصائح مفيدة لتنفيذ بعض الإجراءات صعبة ومتعددة الخطوات في اختبارات التشخيص المختبري ستدرج في دليل البرامج. هذا النهج لتدريب الأفراد ينبغي تحسين نوعية أداء الاختبار التشخيصي وإدارتها في مرافق مختبرية البعيد، لا سيما بعد والمناطق المحدودة الموارد.

التشخيص السريع أداة بالغة الأهمية في مكافحة العدوى الفيروسية في الوقت المناسب، لا سيما إذا كانت الأعراض المبكرة يمكن تمييزها لمجموعة متنوعة من الأمراض المعدية. تفشي فيروس إيبولا مؤخرا (2014-2015) في غرب أفريقيا1،2، أوبئة فيروس Zika (2015-2016) في آسيا وأمريكا اللاتينية43،، وظهور الفيروس التاجي المتلازمة التنفسية الشرق الأوسط (الصرف) التهابات5،6، والأوبئة الفتاكة غير عادي الإنفلونزا (الإنفلونزا) (2017-2018) في7،الولايات المتحدة8 كشفت الحاجة إلى مرافق المختبرات السريعة-الانتشار، التي تتناول العديد من القضايا من وسائل النقل، والوصول، ومرافق ومعدات، والاتصالات.
القدرة خارج الشبكة (سلطة الحكم الذاتي، وإمدادات المياه، إلخ) أمر حاسم في إعدادات عمومية من المناطق الريفية، والمحدودة الموارد9،،من1011. أن تجربتنا في العمليات السريرية، والبرامج العالمية في "كلية طب بايلور" استخدمت لتصميم وبناء مختبر متنقل المستندة إلى الحاوية مع قدرات للنشر سهلة الإعداد والاستخدام المتعدد الوظائف (BSL-2 و BSL-3). صور لهذا المرفق مختبر تنوعاً، وعزز لوجستيا يرد في الشكل 1.
هذا--الانتشار السريع، يحتوي مرفق مختبر تصميم قابلة لتوسيع مماثلة إلى العيادة حاوية تم وصفه مسبقاً ('"جراب الطوارئ الذكية"')12،13،14، وضعتها "كلية بايلور للطب" و تحت رعاية الوكالة الأمريكية للتنمية. وحدة وجبات واحدة (في وضع النقل) بإبعاد 9 أقدام 9 بوصات × 8 متر × 8 أقدام (الشكل 1 أ، ب)، ويوسع على مساحة 170 متر مربع (15.75 م2) (الشكل 1، د). يمكن نشر الوحدة من اثنين إلى أربعة أشخاص في أقل من عشر دقائق.
بنيت المختبر البعيد لإنشاء مرفق مختبر BSL-2 (الشكل 2A) مع منفصلة، وحدات، إلحاقه، BSL-3 وحدة (الشكل 2) مصممة للعمل مع العوامل المعدية التي قد تسبب أمراض خطيرة أو يمكن أن تكون مميتة عن طريق الاستنشاق 15-تمكن اتصال وحدات المختبر هما الأمثل لسير العمل التجريب، وتقاسم الموارد، وفورات (الشكل 2 ج-ه).
الوحدات النمطية يتم الغلق والمياه محكم لإنشاء ملجأ الطاقة متنقلة كفاءة مريحة،. يتم استخدام التدفئة والتهوية والتكييف (HVAC) نظام الهواء لوحدات مركزية والتحكم في درجة الحرارة. وبصفة عامة، تصميم وحدات المختبر تقلل استهلاك الطاقة باستخدام مصادر الطاقة البديلة الخاصة بهم مثل الألواح الشمسية و/أو مولد كهربائي مستقل. ويشمل كل وحدة بالوعة ومحطة ايوش والطاقة الكهربائية والمياه موصلات (الشكل 3 أ-ج). منهاج تكنولوجيا المعلومات والاتصالات توفر اختيارية، المستندة إلى الكمبيوتر اللوحي (الهاتف/حي الروبوت أو فون/باد) وثائق التطبيق لتتبع العرض ووثائق النتائج المختبرية (الشكل 3D) وضعت في شراكة مع تكنولوجيا المعلومات (IT بايلور) فريق البحث الذي لديه خبرة جيدة في العمل في بيئات نائية مع إمكانية اتصال محدودة. النظام يمكن أن تعمل باستخدام الإشارات الخلوية أو لاسلكية، وتسمح الوثائق دون اتصال، مع النسخ الاحتياطي الفوري أو الإرسال إلى ملقم يستند إلى تأمين سحابة عند إعادة تأسيس الاتصال.
المختبر لديها العديد من الميزات الرئيسية لمكافحة العدوى، بما في ذلك: (أ) ضغط التدفق، (ب) صندوق قفازات أو السلامة الأحيائية مجلس الوزراء، (ج) إدارة مخاطر صحية نظام الهواء السلبية: مبيد للجراثيم الأشعة فوق البنفسجية (الأشعة فوق البنفسجية-ج) نظام إضاءة استخدام التسلسلات الهرمية 4 الدفاع ثبت للقضاء على 99.7 في المائة من مسببات الأمراض التي تسبب العدوى المتعلقة بالرعاية الصحية. هو تطهيرها المرفق بسهولة باستخدام بيروكسيد الهيدروجين أو هيبوكلوريت الصوديوم (التبييض) نظم لتطهير كفؤة وفعالة. 16
ضمان جودة النتائج المختبرية يعتمد على التزام بتقييم جميع جوانب عملية اختبار التشخيص الكامل. وهنا، نقدم قائمة مرجعية لسير العمل المختبري BSL-2، و BSL 3، ووضع بروتوكول لاختبار التشخيص السريع فيروس الالتهاب الرئوي. تشخيص الأمراض الفيروسية المقترحة تعتمد على الكشف عن الحمض النووي الريبي أو الحمض النووي الفيروسي في العينة (غسل الآنف، والدم، والبراز، والبول، إلخ) من خلال الوقت الحقيقي عكس النسخ تفاعل البوليميراز المتسلسل (RT-PCR). القدرة على سرعة تقدير الأحمال الفيروسية في عينة يجعل PCR أداة فعالة للأمراض الفيروسية فحص17،18. تنفيذ الرواية، فحوصات التشخيص الجزيئي يتيح توسيع قدرات التشخيص للفيروسات مثل فيروس إيبولا19،،من2021والإنفلونزا8،22والدرن (السل )23.
والهدف من هذا العمل هو للتحقق من صحة منشأة رواية مختبرية معيارية والانتشار السريع وتقديم دليل تدريب لموظفي المختبرات العاملة في بيئات نائية، منخفضة الموارد أثناء وباء أو الكوارث الطبيعية أو غيرها الإغاثة في حالات الطوارئ الحالة. نقدم هنا، بروتوكولا لتشخيص الإنفلونزا الالتهاب الرئوي في هذا المختبر المبتكر، والمحمولة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Autoclave Sterilizer &#39;BioClave&#39;</td>
			<td>Benchmark Scientific, Edison, NJ, USA</td>
			<td>B4000-16</td>
			<td>16 liter, Benchtop, Dims: 22x17.5x15.7 in, Fully automatic, Extremely Compact</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barcode Scanner</td>
			<td>Zebra Technologies ZIH Corp., Lincolnshire, IL, USA</td>
			<td>Symbol LS2208</td>
			<td>Handheld, lightweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breaker Box Panelboard Enclosure</td>
			<td>Square D (Schneider Electric), France&#160;</td>
			<td>MH62WP&#160;</td>
			<td>NEMA 3R/5/12, Dims: 20 W x 62 H x 6-1/2 in. D, Electrical distribution board</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge - Microcentrifuge 17,000 x g</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>75002440</td>
			<td>Holds 24 x1.5 or 2 ml tubes, Dims: 8.9x9.6x13.8 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td>NuAire, Inc., Plymouth, MN, USA</td>
			<td>NU-602-400</td>
			<td>4 Ft. Class II Type A2 Cage Changing Biological Safety Cabinet, 12&#34; Access Opening, HEPEX Pressure Duct&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class III Biological Safety Cabinet (Glove box)</td>
			<td>Germfree Laboratories, Ormond Beach, FL, USA</td>
			<td>Model #PGB-36, Serial #C-2937</td>
			<td>Glove box, Portable, 36&#34;, Class III BSC. Dims: 36x20x23.75 in, Includes 2 interior outlets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryo Coolers</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>414004-286</td>
			<td>0.5 or 1.5 ml tube benchtop coolers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer (30&#176;C freezer)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>Model ULT430A</td>
			<td>To occupy 4.9 Cubic feet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Cabinet</td>
			<td>NuAire, Inc., Plymouth, MN, USA</td>
			<td>NU-126-300</td>
			<td>3 Ft. Vertical Laminar Airflow Cabinet, 8&#34; Access Opening, HEPA filter supply, 99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>75004061</td>
			<td>Dims: 4.1x5.0x6.0 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes automated</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>05-403-151</td>
			<td>Pipet 4-pack (2.5,10, 100 and 1,000&#956;L volume)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes automated &#39;Finnpipette&#39;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4700880</td>
			<td>Pipet 4-pack (2, 20, 200 and 1,000&#956;L volume), Advanced Volume Gearing(AVG), Ultra durable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Generator</td>
			<td>Cummins Power Generation, Minneapolis, MN, USA</td>
			<td>C60 D6</td>
			<td>60 kW, 60 Hz, 1 Phase, 120/240V, Diesel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>BioMedical Solutions, Inc., Stafford, TX, USA</td>
			<td>BSI-HC-UCFS-0504W</td>
			<td>Standard Undercounter Refrigerators &#38; Freezers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>05LRAETSA&#160;</td>
			<td>To occupy&#160; 5.1 Cubic feet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RT-PCR machine &#39;Step-one plus&#39;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4376598</td>
			<td>Holds 96 samples, Dims: 9.7x16.8x20.2 in&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>88880017TS</td>
			<td>Dims: 6.1x8.3x3.3 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AgPath-ID One-Step RT-PCR Reagents</td>
			<td>Applied Biosystems, Foster City, CA, USA</td>
			<td>4387391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol Koptec Pure 200 Proof</td>
			<td>Decon Labs, Inc., King of Prussia, PA, USA</td>
			<td>V1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease-free Water</td>
			<td>Ambion, Inc., Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>AM9906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAamp Viral RNA Mini Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>52906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript III Platinum One-Step qRT- PCR Kit</td>
			<td>Invitrogen, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>11732-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL cryogenic tubes</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>03-337-7X&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL tubes</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>10025-726</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Neptune, VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>Neptune, BT10XLS3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Multimax, BioExpress, VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>MultiMax, P-3243-30X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>ART, Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>ART, 2770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Phenix Research Products, Candler, NC, USA</td>
			<td>TS-059BR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AB custom probes</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom probes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combitips</td>
			<td>Eppendorf, Hauppauge, NY, USA</td>
			<td>89232-972</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Integrated DNA Technology (IDT) custom probes and primer</td>
			<td>IDT</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom probes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Fast Optical 96-Well Reaction Plate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>490003-978 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Fast Reaction Tubes (8 tubes/strip)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4358293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Optical 8-Cap Strip</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4323032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Optical Adhesive Film</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4311971</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biohazard waste bags</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>14220-046</td>
			<td>20.3 x 30.5 cm Biohazard bags</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Denville Scientific, Holliston, MA, USA</td>
			<td>G4162-250</td>
			<td>Small, meduim or large Nitrile or latex gloves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab coat</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Customizable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masks</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>414004-663</td>
			<td>Advanced protection mask</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protective shoes</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Customizable</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

remote laboratory management: respiratory virus diagnostics

Uptick في الأخيرة الأوبئة (الإيبولا، زكى، أسعار الصرف السوقية، الإنفلونزا، إلخ) يؤكد الحاجة مزيد 'ذكيا،' تنسيق الاستجابة التي تتناول العديد من القضايا التي تتراوح بين النقل والوصول، المرافق، المعدات، والاتصال بموفر التدريب. ولتلبية هذه الحاجة، قمنا بتطوير مرفق مختبر مبتكرة، قابلة للتطوير، والمزودة بالخدمات اللوجستية، المتنقلة، لحالات الطوارئ والأوبئة في إعدادات عمومية ذات الموارد المحدودة. استخدام خلفية في العمليات السريرية كمركز أكاديمية طبية، صممنا على الانتشار السريع، ووحدات BSL-2 و BSL-3 مرفق مع البرمجيات سهلة الاستخدام لتتبع وإدارة الأدوية والإمدادات في المناطق النائية خلال الأوبئة و حالات التفشي. نقدم هنا، لدينا وحدات المختبر حاوية الشحن المتعدد الوسائط، ومتحركة، وقابلة للتوسيع. ويسهل تصميم المختبر الاستخدام خارج الشبكة بالتقليل من استهلاك الطاقة، والسماح لمصادر المياه البديلة. المعلومات الوحدة منصة لتكنولوجيا الاتصالات ويوفر الوثائق (ط) سهلة الاستخدام المستندة إلى الكمبيوتر اللوحي، (ثانيا) تعزيز تتبع للمرضى، واللوازم، و (ثالثا) إدماج الاتصالات في الموقع مع قدرات مضمنة الرعاية الصحية عن بعد. لضمان الجودة في بيئات نائية، قمنا بتطوير قائمة مرجعية لسير عمل مختبرات أساسية ووضع بروتوكول لتشخيص الفيروسية التنفسية باستخدام النسخ العكسي تفاعل البوليميراز المتسلسل (RT-PCR). كما هو موضح، يسمح هذا النهج المبتكرة والشاملة لتوفير قدرات المختبرات في بيئات عالمية ذات الموارد المحدودة.

والهدف من هذه الدراسة إثبات أن مرافق المختبرات المتنقلة BSL-2، و BSL 3 المقترحة توفر بيئة مناسبة السماح الفيروس التنفسي الاختبارات التشخيصية مع الممثل نتائج مطابقة للاختبارات التي أجريت في عالية الجودة مختبرات ثابتة. مرافق مختبرية مصممة للوفاء بمتطلبات اختبار النظر في توصيات "الصحة المهنية" والسلامة (الصحة والسلامة المهنيتين). أقرب مرفق مختبر البعيد هو المنتشرة (الشكل 4) وجميع المعدات واللوازم مثبتة (الشكل 5)، يمكن تشغيل الاختبارات المعملية.
وفقا للمختبر المناسب إجراءات التشغيل القياسية، معدات الوقاية الشخصية (المعاطف مختبر، أحذية واقية، وقفازات ومتقدمة القناع، والنظارات الواقية، إلخ) للممارسة BSL-2 مطلوب. للممارسة BSL-3، مجهزة بصندوق القفازات مصدقة وحدة مختبر بكر من الضغط السلبي. تتم ترقية وحدات المختبر قبل windows التمريري خارجي لحماية الأفراد في خطوة استلام العينة. يمكن تبسيط عملية التسجيل مع التطبيقات المستندة إلى الكمبيوتر اللوحي المتقدمة سابقا (الشكل 3D). يمكن استخدام التطبيقات الأخرى المقبولة التي يتم تشغيلها على جهاز كمبيوتر محمول، وكذلك.
يمكن إجراء هذا الاختبار التشخيصي الفيروس التنفسي خاصة في وحدات المختبر متصلة لفصل خطوات الإجراء التشخيصي عن قصد لتجنب التلوث أو احتمال التداخل بين الكواشف الكيميائية الحيوية، مما قد يؤثر على اختبار النتائج. لتحقيق أقصى قدر من جودة التشخيص، يستخدم ممارسة اختبار التشخيص السريع (ط) على حد سواء المختبرية الأساسية BSL-2 والغرفة PCR الاعتراضية متصلة (الفرع 3) أو (ثانيا) جيجابايت وبكر غرف متصلة بواسطة نافذة التمريري (القسم 4). ويرد في الشكل 6 الرسم التخطيطي لسير العمل المختبري المقترحة وتشدد على حماية شخصية. الرسم التخطيطي تعترف بأهمية كل خطوة المشار إليها لحماية الأفراد، ولا سيما إذا كان الحد الأدنى هو تدريب موظفي المختبرات في المناطق النائية.
ويتم إنجاز اختبار التشخيص السريع للأنفلونزا عن طريق تقنية RT-PCR. يحتوي الإجراء على أربع خطوات رئيسية. لاحظ أنه يتم تعيين مساحات العمل الفردية لكل مرحلة من البروتوكول.
الخطوة الأولى هي الحصول على عينة ودون تقسيمه إلى مختبرين عدة. مختبرين يمكن ثم ملحوظ مع الرموز الشريطية لتحسين فعالية الرقابة على البيانات وتخزينها في الثلاجة لإجراء مزيد من التحقيقات. والخطوة الثانية لإلغاء تنشيط نموذج في المخزن المؤقت لتحلل سينتريفوجينج والتدفئة. ويجب أن تنفذ الخطوات الأولى والثانية في خزانات السلامة البيولوجية. استخدام مجموعات ماصة الأفراد والمعدات. ويقترح اختبار PCR المراد تنفيذها في الغرفة بكر، إذا كانت متوفرة. والخطوة الثالثة هي الوثائق المتعلقة بالنتائج. الخطوة الرابعة هي الصيانة بعد استخدام المعدات، وتذكير لحماية الأفراد في نهاية التجربة.
إذا كانت العينة من المتوقع أن تصنف باعتبارها BSL-3 + (e.g.,Ebola، Zika، الصرف، السل) يجب استخدام مرفق صندوق قفازات. في المختبر البعيد، قد الغرفة غيغابايت إطاره تمريري الحصول على العينات والكمبيوتر المحمول أو الكمبيوتر اللوحي لنموذج التسجيل. عينة الكوة والفيروسات المنظمة يجب أن يؤديها في قاعة صندوق قفازات. الإضاءة البنفسجية يوصي بتجنب التلوث أثناء الإجراء. بعد المنظمة عينة، كذلك خطوات للبروتوكول مشابهة للمختبرات الأساسية BSL-2 واختبار BSL-3 وفيما يلي "قائمة الجزء الثالث" (الجدول 1، الشكل 6)-
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig1.jpg"> الشكل 1. نموذج مرفق المختبر. (أ وب) وضع النقل؛ (ج) وضع نشرة: في الخارج؛ (د) وضع نشرة: الداخلية. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig2.jpg"> الشكل 2 . تخطيطات. (أ) المختبرية الأساسية BSL-2؛ (ب) وحدة نمطية BSL-3 يتضمن صندوق قفازات ومختبرات بكر، لها نافذة تمريري مشتركة لنقل العينة المحمية؛ (ج) مرافق المختبرات متصلة (أ) و (ب) مع المرافق المشتركة. (د،ه) صور فوتوغرافية لوحدات متصلة من طرفي نقيض. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a> 
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig3.jpg"> الشكل 3. الداخلية (أ) مرفق BSL-3 وقد (1) نافذة تمريري، بالوعة ومحطة ايوش (2) في المدخل؛ (ب) موصلات الطاقة الكهربائية، الموصلات الماء (ج)؛ (د) البرامج المستندة إلى الكمبيوتر اللوحي للإمدادات نتيجة مختبر وتتبع الوثائق. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig3large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig4v2.jpg"> الشكل 4 . النشر مرفق المختبر. تعليمات للوحات التي تتكشف في جانب واحد للوحدة كما هو موضح (أ-د). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig4v2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a> 
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig5.jpg"> الشكل 5 . الخطط للمختبر قابل للاتصال: (أ) BSL-2 الوحدة النمطية 1؛ (ب) صندوق قفازات وبكر 2 وحدة. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig5large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a> 
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig6.jpg"> الرقم 6 . الرسم البياني لاختبار فيروس تنفسي RT-PCR تشخيص في مرفق مختبر بعد. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig6large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>مختبر بعد BSL-2</td>
			<td>مختبر بعد BSL-3</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء الأول</td>
			<td>الجزء الأول</td>
		</tr>
<tr>
<td>أولاً التكنولوجيا مختبر بالدخول من خلال الباب المسمى مدخل ومعطف المعمل، الذي هو معلق على الرف بجوار باب المدخل. أحذية مفتوحة محظورة، وتشجع قناع متقدمة والنظارات الواقية.</td>
			<td>أولاً يتم تنشيط التكنولوجيا مختبر للنظر في إطار صندوق قفازات من خارج الوحدة لضمان الضغط السلبي. (الوردي الكرة يجب أن تكون مرئية في وحدة لإظهار يعمل الضغط السلبي).</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثانيا-مختبر التكنولوجيا غسل اليدين في الحوض ووضع قفازات القابل للصرف وتبدأ مع كمية عينات.</td>
			<td>ثانيا-إذا كان يعمل بالضغط السلبي، مختبر التكنولوجيا للدخول عن طريق الباب الوحيد ووضع على معطف المعمل، الذي هو معلق على الرف بجوار باب المدخل.  أحذية مفتوحة محظورة، قناع متقدمة والنظارات الواقية ومن المستصوب.</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثالثا-العينات التي كانت انخفضت في حمام هيبوكلوريت قبل السقوط في نافذة التمريري يجلسون في تمرير من خلال لمختبر التكنولوجيا.</td>
			<td>ثالثا-مختبر التكنولوجيا غسل اليدين في الحوض، وضع قفازات المتاح، معدات الوقاية الشخصية وتبدأ مع كمية عينات.</td>
		</tr>
<tr>
<td>رابعا-وردت في استقبال العينة.</td>
			<td>رابعا-العينات التي كانت سابقا انخفض في حمام هيبوكلوريت قبل السقوط في تمرير من خلال نافذة يجلسون في تمرير من خلال لمختبر التكنولوجيا.</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء الثاني</td>
			<td>خامسا – تلقي في استقبال العينة.</td>
		</tr>
<tr>
<td>خامسا – اعتماداً على الإجراء التشخيصي، انتقلت إلى مجلس الوزراء السلامة الأحيائية العينات ومعطّل.</td>
			<td>الجزء الثاني</td>
		</tr>
<tr>
<td>سادسا-عينات هيأهم للفحص المجهري، وأجهزة الطرد المركزي، أو التعفن.</td>
			<td>سادسا-العينات غير نشط في علبة القفازات.</td>
		</tr>
<tr>
<td>تشغيل اختبارات التشخيص سابعا المناسبة.</td>
			<td>سابعا-العينات المنفذة لعزل الحمض النووي.</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثامنا-تخزين العينات في الثلاجة 4 درجات مئوية أو الثلاجة المناسبة.</td>
			<td>ثامنا بعد الاستخراج، نقل العينات إلى نافذة التمريري.</td>
		</tr>
<tr>
<td>الجزء الثالث</td>
			<td>تاسعا-مختبر التكنولوجيا تدخل عن طريق مدخل في الجانب بكر وحدة (الضغط الإيجابي).</td>
		</tr>
<tr>
<td>تاسعا-استخدام الحوض لتلطيخ & الغسيل من العناصر.</td>
			<td>عاشرا-فني مختبر وضع على معطف مختبر من الرف بجوار المدخل، غسل اليدين في الحوض، وضع قفازات.</td>
		</tr>
<tr>
<td>عاشرا – استخدام الكمبيوتر المحمول & كونتيربيس لإجراء التحليلات والوثائق.</td>
			<td>حادي عشر-تلقي عينات من الغرفة صندوق قفازات في إطار التمريري.</td>
		</tr>
<tr>
<td>حادي عشر-تعقيم المعدات عن طريق تشغيل اﻷوتوكﻻف.</td>
			<td>ثاني عشر-إذا هيأهم العينات اللازمة في تدفق رقائقي مجلس الوزراء.</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثاني عشر-التخلص من أي نفايات اوتوكلاف في حاوية النفايات واقية.</td>
			<td>تشغيل اختبارات التشخيص الثالث عشر. المناسبة.</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثالث عشر-غسل اليدين في الحوض.</td>
			<td>رابع عشر-تخزين العينات في الثلاجة 4 درجات مئوية أو الثلاجة المناسبة.</td>
		</tr>
<tr>
<td>رابع عشر-شنق معطف مختبر مرة أخرى على الرف.</td>
			<td>الجزء الثالث</td>
		</tr>
<tr>
<td>خامس عشر-أخرج من خلال الباب نفسه.</td>
			<td>خامس عشر-استخدام الحوض لتلطيخ & الغسيل من العناصر.</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>سادس عشر-استخدام الكمبيوتر المحمول & كونتيربيس لإجراء التحليلات والوثائق.</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>سابع عشر-نقل قنينات نافذة تمريري إلى غرفة بكر وتعقيم المعدات عن طريق تشغيل اﻷوتوكﻻف.</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>ثامن عشر-التخلص من أي نفايات اوتوكلاف في حاوية النفايات واقية.</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>تاسع عشر-غسل اليدين في الحوض.</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>xx. الخروج عن طريق نفس باب المدخل.</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 1. قائمة مرجعية لتشخيص بكر سير العمل.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="3">الصيانة والتحديدات</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">أنظمة PCR الوقت الحقيقي</td>
			<td>الشهري</td>
			<td>إجراء معايرات خلفية كل شهر</td>
		</tr>
<tr>
<td>18 شهرا</td>
			<td>أداء الخلفية، المكانية وصبغ معايرات كل الأشهرال 18</td>
		</tr>
<tr>
<td>أجهزة الطرد المركزي</td>
			<td>السنة 1</td>
			<td>معايرة للثورات في الدقيقة ودرجة الحرارة من خلال خدمات المعايرة الخارجية أو الداخلية</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">صندوق قفازات</td>
			<td>اليومية</td>
			<td>فحص العناصر، خاصة بالنسبة للأضرار على الأسطح المكشوفة مرشحات HEPA، والقفازات، وسين بين عصابات وخراطيم بصريا. تأكد من مجرى الهواء المشابك ضيق وفي المكان. إجراء اختبار الضغط تسرب. اختبار الضغط ناقوس الخطر.</td>
		</tr>
<tr>
<td>6 أشهر</td>
			<td>تغيير عامل تصفية هيبا</td>
		</tr>
<tr>
<td>السنة 1</td>
			<td>معايرة نظام</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">اﻷوتوكﻻف</td>
			<td>التنزيلات</td>
			<td>تنظيف خزان الماء ورفوف استخدام مطهر غير الكاشطة معتدل</td>
		</tr>
<tr>
<td>3 أشهر</td>
			<td>معايرة جهاز ضبط الوقت والمقاييس</td>
		</tr>
<tr>
<td>1 سنة أو كل 50 دورة</td>
			<td>فحص وتنظيف جيدا، واختبار ومعايرة</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">ثلاجة وفرييزر</td>
			<td>6 أشهر</td>
			<td>فحص مروحة موتور، مبخر لفائف، كنس لفائف التكثيف ومرشحات [كندنسر] واستبدال البطاريات حسب الحاجة</td>
		</tr>
<tr>
<td>السنة 1</td>
			<td>معايرة المجمد من خلال خدمات المعايرة الداخلية أو الخارجية</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 2. صيانة المعدات PCR الوقت الحقيقي.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>إلزامية</td>
			<td>وأوصى</td>
		</tr>
<tr>
<td>معطف مختبر، وأحذية واقية، وقفازات</td>
			<td>معطف مختبر، أحذية واقية، والقفازات، والأقنعة، نظارات</td>
		</tr>
<tr>
<td>ثلاجة 4 درجة مئوية، والمجمد-20 درجة مئوية</td>
			<td>ثلاجة 4 درجة مئوية، والمجمد-20 درجة مئوية، المجمد-80 درجة مئوية</td>
		</tr>
<tr>
<td>مجموعة واحدة من الماصات الآلي</td>
			<td>ثلاث مجموعات من الماصات الآلي</td>
		</tr>
<tr>
<td>أجهزة الطرد المركزي، وشاكر، ثيرموسيكلير</td>
			<td>نظام الروبوتية</td>
		</tr>
<tr>
<td>RT-PCR الجهاز، حمام الثلج</td>
			<td>RT-PCR مع التحكم في درجة الحرارة، برودة خاليا من الجليد</td>
		</tr>
<tr>
<td>أكياس النفايات واقية</td>
			<td>اﻷوتوكﻻف للتخلص من النفايات واقية</td>
		</tr>
</tbody></table>الجدول 3. اختبار الحد الأدنى من المتطلبات لتشخيص الفيروس التنفسي RT-PCR BSL-2.

Watch this Scientific Journal Video about Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics at JoVE.com

Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics

مختبر للانتشار السريع، وخارج الشبكة تم تصميمها وبناؤها للإعدادات العمومية البعيدة، ذات الموارد المحدودة. يتم استكشاف الميزات والجوانب الحرجة من وحدات المختبر لوجستيا محسنة، وقابلة للتوسيع، ومتعددة الوظائف. وضع قائمة مرجعية لسير عمل مختبرات أساسية ووضع بروتوكول لاختبار تشخيص فيروسية تنفسية وقدم.

إدارة مختبر بعد: تشخيص الفيروس التنفسي

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a ...

وقد أبرز حدوث زيادة في الأوبئة التي حدثت مؤخراً، مثل فيروس زيكا والإيبولا، الحاجة إلى استجابة أكثر تنسيقاً وسرعة على نطاق عالمي. ولتحقيق ذلك، صممنا وحدة مختبرية مبتكرة وقابلة للتطوير وداخل الوسائط لاستخدامها في المناطق المحدودة الموارد في جميع أنحاء العالم خلال هذه الفاشيات. هنا نقدم لدينا داخل مشروط، قابلة للتوسيع، ومختبرات حاويات الشحن المتنقلة.وفي الورقة التالية، نقدم نهج BSL-2 و BSL-3 لتشخيص فيروس الأنفلونزا التنفسية. تشخيص فيروس الإنفلونزا السريع بواسطة RCT-PCR. قبل الاستعداد لدخول وحدة المختبرات المثبتة، يجب أن تدرك أنه يجب حساب جميع متطلبات السلامة BSL-2.وهذا يشمل ارتداء الملابس مع معدات الحماية الشخصية المناسبة، وغسل اليدين، وارتداء القفازات، وإزالة التلوث أي مساحات العمل كنت تخطط لاستخدام. لاحظ، إذا كنت تستخدم التبييض لإزالة التلوث مساحة العمل الخاصة بك واللوازم، يجب عليك أيضا استخدام 70٪ الإيثانول لتنظيف جميع المناطق المعرضة للتبييض، كما يمكن أن تختلط التبييض مع المواد الكيميائية الأخرى في مساحة العمل لخلق أبخرة سامة. تخلص من جميع منتجات التبييض في سلة النفايات الخاصة بها.كما يتم أخذ عينات من المرضى، يتم نقلها إلى منشأة المختبر من الحقل أو العيادة وتمريرها إلى فني المختبر عن طريق نافذة المرور. لا يمكن فتح هذا الإطار من كلا الجانبين. في نافذة المرور BSL-2، يجب تطهير السطح الخارجي للأنبوب التي تحتوي على عينات بالكامل مع التبييض وتركه وحده للجلوس لمدة دقيقتين.فتح نافذة التمرير وجمع العينات ليتم تسجيلها. مسح أسفل أي عينات التي لديها بقايا التبييض، ومسح أسفل المناطق الداخلية من نافذة تمرير من خلال مع التبييض، تليها 70٪ حل الإيثانول. إضافة رموز شريطية إلى كل أنبوب عينة، والأنابيب الفارغة الأربعة المخصصة لـ aliquots.نقل العينات الخاصة بك إلى غطاء التهوية. قم بمسح الباركود على كل أنبوب وتأكد من ظهور معلومات تحديد العينة المناسبة على شاشة النظام المستندة إلى الكمبيوتر اللوحي أو الكمبيوتر المحمول. أكمل عملية التسجيل.عينة aliquot. مرة واحدة وقد تم تسمية أنابيب الاختبار، واستخدام مجلس الوزراء السلامة البيولوجية من الفئة الثانية المعتمدة والمفككة لأخذ aliquots من العينات. عند أخذ aliquots تأكد من استخدام الماصات الطازجة المعقمة أو المتاح لكل عينة والتخلص منها في حاويات النفايات الخطر الحيوي من أجل تجنب التلوث عبر.تأكد من أن كل أنبوب مغلق ومغلق بإحكام. الاستفادة من aliquot واحد لكل عينة لاستخراج فوري. تخزين أي aliquots أخرى في الثلاجة للاستخدام في المستقبل.قبل الانتقال إلى محطة العمل، قم بتنظيف جميع أسطح مساحة العمل والمعدات مع التبييض متبوعاً بمحلول الإيثانول بنسبة 70٪. مرة واحدة وقد تم ونقلت عينات PCR الباركود الخاص بك على نقلها إلى محطة عمل مخصصة لاستخراج. إعداد الخاص بك العازلة AVL الناقل RNA خليط لخطوة تحلل.يجب الاحتفاظ بالمزيج الرئيسي للعينة والتحلل في درجة حرارة الغرفة. تسمية أنبوب جهاز طرد مركزي 1.5 ملليلتر. تعيين تلميح ماصة إلى 560 ميكروليترس.تطبيق طرف ماصة نظيفة. إضافة عازلة تحلل إلى كل أنبوب. تجاهل الطرف في حاوية النفايات.المقبل, خذ الخاص بك PCR aliquot العينة. وضعه في أنبوب عازلة تحلل المعدة المعينة لألكوت واحد، وتكرار هذا لأي عينات إضافية. تجاهل طرف الماصات القديمة وتطبيق طرف ماصة نظيفة.تطبيق طرف ماصة نظيفة. أضف 140 ميكرولترات من المخزن المؤقت إلى أنبوب التحكم. أغلق كل أنبوب بشكل آمن.نبض الدوامة لمدة 15 ثانية. كرر مع أي aliquots إضافية أو عينات. ميكروcentيريفوج كل عينة لمدة خمس ثوان.احتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد 10 دقائق لفترة وجيزة الطرد المركزي الأنابيب الخاصة بك لإزالة أي قطرات من داخل غطاء كل أنبوب. إضافة 560 ميكرولترات من الإيثانول عينة واحدة.تغيير الخاص بك ماصة تلميح. كرر مع أي عينات المتبقية أو إضافية. أغلق كل عينة أنبوب بشكل آمن.نبض الدوامة كل عينة لمدة 15 ثانية. اِفَرِيّرَ العينات لخمس ثواني الحصول على أنبوب جمع 2 ملليلتر نظيفة.إضافة أعمدة الدوران. تسمية لهم لتتناسب مع العينات الخاصة بك. نقل 630 ميكرولترات من العينة لمطابقة العمود وفقا لذلك.تأمين القبعات الخاصة بك. الانتقال إلى جهاز الطرد المركزي. توزيع عينات بالتساوي في جهاز الطرد المركزي.أجهزة الطرد المركزي في 6000 غرام لمدة دقيقة واحدة لإزالة العازلة تحلل. العودة إلى محطة العمل. استبدل أنابيب التجميع الخاصة بك.إضافة المخزن المؤقت تحلل المتبقية وكرر خطوة الطرد المركزي. تجاهل أنابيب عينة aliquot الأصلية، وبعد ذلك، تخلص من الـ eluate واغسل عمود الدوران مع المخزن المؤقت AW1. كرر هذا الإجراء مع كل عينة أو أي عينات إضافية.تأمين القبعات على كل عينة والطرد المركزي في ستة ز. كرر مع عازلة غسل الثاني AW2 في 20 غرام. وأخيرا، ضع العمود في أنبوب 1.5 ملليلتر نظيفة.افتح العمود وأضف 60 ميكروليتر من العازلة AVE. احتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة واحدة والطرد المركزي في ستة غرام لمدة دقيقة واحدة. وقد أصبحت العينة جاهزة الآن لتحليل نظام تحليل الـ PCR.وبموجب شروط BSL-3، سيبقى البروتوكول التجريبي على حاله، ولكن تدابير السلامة سوف تتخذ سابقة فوق أي شيء آخر. قبل الدخول إلى مختبر BSL-3 ننظر من خلال نافذة شفافة للتأكد من أن تم تأسيس الضغط السلبي في وحدة صندوق القفازات. وسيكون من الواضح أن الضغط السلبي قد ثبت عندما تكون الكرة في الجدار مرئية.مرة واحدة تم إنشاء الضغط السلبي فتح الباب وأدخل وحدة. اغسل يديك على الفور ثم انتقل إلى قائمة التحقق من معدات الحماية الشخصية. المضي قدما في وضع على معدات الوقاية الشخصية في الترتيب التالي: تحت قفازات، ثوب، أغطية الأحذية، قناع، درع الوجه، الزوج الثاني من القفازات.بدوره على الجهاز والسماح للضغط في القفازات لتحقيق الاستقرار. استخدام محلول رذاذ التبييض لتطهير جميع المناطق والإمدادات كنت تخطط لاستخدام داخل وخارج صندوق القفازات. تخلص من أي منتجات نفايات التبييض في حاوية التبييض فقط.استخدام 70٪ من محلول الإيثانول لتنظيف أكثر من أي مناطق حيث تم استخدام التبييض. نقل العينات الخاصة بك عبر نافذة التمرير. كان ينبغي رش العينات بمحلول التبييض وتركها وحدها لمدة دقيقة واحدة على الأقل في التمرير قبل استلامها داخل وحدة BSL-3.بعد ذلك، تلقي العينات الخاصة بك داخل وحدة BSL-3 وتنظيفها جيدا قبل الشروع في التسجيل ووضع العلامات الخطوة. بمجرد تسجيل العينات وتسمية الأنابيب ، ضع العينات في صندوق القفازات عبر علبة airlock. لا تفتح البابين في وقت واحد.افتح وأقفل كل باب في خطوتين مختلفتين لاحتياطات السلامة. مرة واحدة وقد تم نقل عينات بأمان إلى الداخل صندوق القفازات، اتبع نفس الخطوات كما سبق وصفها لإنشاء aliquots عينة في صندوق القفازات. مرة واحدة يتم نقل عينات aliquoted العينات إلى حاوية محكم الإغلاق.رذاذ محلول التبييض داخل صندوق القفازات لإزالة التلوث الأنابيب وجميع الأسطح الأخرى. انتظر خمس دقائق ثم تطبيق 70٪ من محلول الإيثانول لغسل التبييض. بعد إزالة التلوث شامل نقل العينات اللازمة فقط لتحليل PCR لتحلل خطوة إلى الوراء في صندوق القفازات.في صندوق القفازات تنفيذ فقط خطوة تحلل من إجراء الاستخراج. مرة واحدة قد تم lysed الخلايا، ختم بإحكام قبعات على كل عينة ووضعها في ممر قفل الهواء المضغوط. تطهير صندوق القفازات مرة أخرى مع التبييض تليها 70٪ حل الإيثانول.نقل العينات خارج علبة القفازات ونقلها إلى محطة العمل للخطوات المتبقية من إجراء الاستخراج. بعد استخراج نقل العينات الخاصة بك إلى نافذة تمرير من خلال لتحليل PCR. بعد إزالة العينات ونقلها، انظف مساحة العمل المختبرية خارج صندوق القفازات.قبل إزالة معدات الوقاية الشخصية، انتظر حتى تصل دورة الهواء في الوحدة بأمان إلى عدد مناسب من دورات التصفية قبل أن تبدأ في إزالة معدات الوقاية الشخصية. مباشرة بعد إزالة والتخلص من جميع معدات الوقاية الشخصية في حاوية النفايات معدات الوقاية الشخصية، انتقل إلى غسل يديك في بالوعة المختبر بالصابون والماء قبل الخروج من الوحدة. PCR التضخيم والكشف.إزالة عينات RNA المستخرجة من النافذة التمريرية. إعداد مزيج رئيسي في أنبوب 1.5 ملليلتر مع المكونات التالية لكل المقايسة المستهدفة: الماء، التمهيديات والتحقيقات، وخليط الهجوم، و2X العازلة. دوامة وتدور المزيج الخاص بك الرئيسي، وبعد ذلك، aliquot مزيج سيد في كل من أنابيب الشريط.أعد مجموعة PCR إلى التخزين في درجات الحرارة الموصى بها بمجرد إعداد المزيج الرئيسي. إضافة العينات إلى كل من أنابيب الشريط باستخدام طرف منفصل بين كل أنبوب الشريط. تدور العينات في 1, 500 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة, وبعد ذلك عينات جاهزة ليتم تحميلها على وحدة PCR في الوقت الحقيقي.مرة واحدة يتم تحميل العينات على صك PCR، فإنه يأخذ حوالي 90 دقيقة لإكمال تشغيل واحد. في الوقت الحقيقي PCR فحص هو وسيلة حساسة للكشف عن الفيروس قوية. ويمكن رؤية هذا في الجدول المسمى: نتائج تحليل PCR.قبل جمع النتائج الخاصة بك وترك المختبر، وإزالة معدات الوقاية الشخصية وإزالة التلوث بشكل كاف كل محطة عمل استعدادا للاختبار التشخيص المقبل. نتائج تمثيلية. يتم تمثيل سير العمل في المختبر في الرسم التخطيطي الذي يؤكد على الحماية الشخصية.ويتم إجراء الاختبار التشخيصي السريع للأنفلونزا عن طريق تحليل RT-PCR. يتكون الإجراء من أربع خطوات رئيسية ويتم تعيين مساحات العمل الفردية لكل مرحلة من مراحل البروتوكول. والهدف من هذا المشروع هو التحقق من صحة منشأة مختبرية جديدة قابلة للنشر السريع، وقد نجحنا في ذلك، فضلا عن تطوير برامج تدريبية للعاملين في المختبرات العاملين في بيئات منخفضة الموارد أثناء الأوبئة وتفشي الأمراض.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Management of Meatal Stenosis with Meatoplasty

الجراحية إدارة تضيق الصماخ مع Meatoplasty

Meatal stenosis is a common urologic complication after circumcision.  Children present to their primary care physicians with complaints of deviated ...

Mouse Eye Enucleation for Remote High-throughput Phenotyping

سمل العيون الماوس لPhenotyping عالي الإنتاجية عن بعد

The mouse eye is an important genetic model for the translational study of human ophthalmic disease. Blinding diseases in humans, such as macular ...

Remote Magnetic Navigation for Accurate, Real-time Catheter Positioning and Ablation in Cardiac Electrophysiology Procedures

الإنتقال المغناطيسي عن بعد للدقة، في الوقت الحقيقي لتحديد المواقع القسطرة وتذرية في القلب الكهربية الإجراءات

New remote navigation systems have been developed to improve current limitations of conventional manually guided catheter ablation in complex cardiac ...

Breathing-controlled Electrical Stimulation (BreEStim) for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

Breathing-controlled Electrical Stimulation BreEStim for Management of Neuropathic Pain and Spasticity

التنفس التي تسيطر عليها تحفيز الكهربائية (BreEStim) لإدارة ألم الأعصاب والتشنج

Electrical stimulation (EStim) refers to the application of electrical current to muscles or nerves in order to achieve functional and therapeutic goals. ...

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment (RMCA) in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment RMCA in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

تقييم تنشيط العضلات التنفسية عن طريق الجهاز التنفسي التحكم في المحركات تقييم (RMCA) في الأشخاص الذين يعانون المزمنة اصابات الحبل الشوكي

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

أطرافهم بعد الدماغية شروط مسبقة: تقنية اعصاب في القوارض

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Novel Diagnostics in Revision Arthroplasty: Implant Sonication and Multiplex Polymerase Chain Reaction

تشخيص الرواية في مراجعة تقويم مفاصل: زرع Sonication ومتعدد تفاعل البوليميراز المتسلسل

In orthopedic patients, foreign body-associated infections, especially periprosthetic joint infections (PJIs), are a devastating complication of ...

A Component-resolved Diagnostic Approach for a Study on Grass Pollen Allergens in Chinese Southerners with Allergic Rhinitis and/or Asthma

مقاربة تشخيصية حلها المكون لدراسة عن مسببات الحساسية لحبوب اللقاح في الصينيين الجنوبيين الذين يعانون من التهاب الأنف و / أو الربو التحسسي

Sensitization to grass pollen imposes a global risk for allergic airway diseases. Although prevention relies on local investigation of the pollen ...

Absorption of Nasal and Bronchial Fluids: Precision Sampling of the Human Respiratory Mucosa and Laboratory Processing of Samples

امتصاص السوائل الآنف والشعب الهوائية: دقة أخذ العينات البشرية الغشاء المخاطي للجهاز التنفسي وتجهيز مختبر عينات

The methods of nasal absorption (NA) and bronchial absorption (BA) use synthetic absorptive matrices (SAM) to absorb the mucosal lining fluid (MLF) of the ...

Methodology for Sputum Induction and Laboratory Processing

منهجية الاستقراء البصاق وتجهيز المختبرات

The technique of sputum induction and processing is a recognized non-invasive method allowing the collection and analysis of cells from the airways, which ...