Name: remote laboratory management: respiratory virus diagnostics
Uploaded: 2019-04-06T14:30:00
Duration: 14 min 56 s
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この資料の内容は、ビューまたはポリシーの米国の保健社会福祉省の著者と所属機関を必ずしも反映しません。この研究は、ポール G アレンファミリー財団「エンハンス 0-インパクト、緊急スマートポッド」によって支えられました。すべての有意義な議論と GSS 健康薬の Baylor の大学、NASA のジョンソン宇宙センターから同僚とのコラボレーションをお願い申し上げます。リモートの研究施設の呼吸器ウイルスの診断テストを実行するサーモ フィッシャー科学的と RT-PCR 機械、遠心分離機、自動ピペット ・ ローンの代表に心から感謝しております。著者は原稿のビデオ撮影に彼らの支援のためマルタ Storl デズモンドとシドニー スティーヴン ・ ソレルに感謝しています。

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G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+evaluation+of+a+real-time+RT-PCR+assay+for+the+detection+of+Ebola+virus+(Zaire)+during+an+Ebola+outbreak+in+Guinea+in+2014-2015.">Development and evaluation of a real-time RT-PCR assay for the detection of Ebola virus (Zaire) during an Ebola outbreak in Guinea in 2014-2015.</a> Journal of Virological Methods. 228, 26-30 (2016).</li><li>Cnops, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developement,+integration+of+a+quantitative+reverse-transcription+polymerase+chain+reaction+diagnostic+test+for+Ebola+virus+on+a+molecular+diagnostics+platform.">Developement, integration of a quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction diagnostic test for Ebola virus on a molecular diagnostics platform.</a> Journal of Infectious Diseases. 214 (3), S192 (2016).</li><li>Keitel, W. 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(63), e3998 (2012).</li></ol>

薬の Baylor の大学は、モバイル クリニック (米国特許アプリケーション第 15/523,126、# 620078924) の米国仮特許出願を保持しています。著者は、彼らが競合する財務持分を有してないことを宣言します。

上記で説明したリモートの研究施設はロジスティック指向、拡張、急速に配置可能な多機能、実験室の人員およびワークスペースの効率を保護するために連動になった人間中心設計概念に基づいて。迅速検査の設定と安全な呼吸器ウイルス分離と診断の詳細なプロトコルを開発、発表します。
最適な装置が機能するため次の条件は、研究室単位で維持されなければならない: 21 ± 2 ° C ・許容温度 5 ~ 40 ° C の許容最大相対湿度 80 %rh (結露しないこと)、相対湿度 14 ± 5% の湿度・温度0 と海抜 2,000 m の高度。
エネルギー消費は、オフグリッド研究室管理の最も重要なパラメーターの 1 つです。コア実験装置、電力効率が異なる 15-40%。しかし、平均エネルギー消費量は、適切なサービスを提供するここで推定されます。力率 (1,500-2,000 W) はエアコン、グローブ ボックス システム、PCR 機、オートクレーブ滅菌装置に関する。プロトコルと 16 時間研究室環境制御の実施集中的な仕事の 8 時間を考慮した研究室単位の毎日のエネルギー消費は約 36 kWh/日 BSL 2、BSL - 3、約 43 kWh/日、接続の 73 kWh/日BSL-2/BSL-3 + 設備。単一ユニットの実行/連続電力 ≥8 の容量を持つ電力のソースを提供することをお勧めします kW、≥10 kW の電源サージ/開始。接続されている設備、ランニング/連続電力の電力 ≥14 kW の ≥12 kW とサージ/開始。注意: BSL 3 研究所施設のバックアップ エネルギー源は偶発的な停電を避けるために、診断テスト中にグローブ ボックスと負圧システムの安定した作業を保証する強くお勧めします。
電気のガソリン発電機は、緊急エネルギー供給のためのコスト効率の高いソリューションです。ガソリン発電機の燃料効率が 100% の負荷で 1 時間あたり約 1.5 ガロンであると仮定します。平均毎日のエネルギー消費量は、する場合 40% の 8 時間し 16 時間の負荷が 10%、ラボユニット BSL 2 または BSL 3 7 9 日あたりの燃料のガロンが必要です同様に、し、接続施設 〜 15 ガロン/日を必要とします。
リモート研究ユニットは、オフグリッド ソーラー パネル システムの機能に合うように設計されています。ソーラー パネルは、付加的な燃料を必要としないし、高い太陽光照射によるアフリカ、アジアおよびラテン アメリカの熱帯および亜熱帯地域で生産性の高い操作ことができます。現在、市販の太陽電池パネル システムの 1 つのユニットは、最大 44 kWh/日の毎日の電力使用量をことができます。
電気の代替エネルギー源の選択した種類に関係なくダーティ電気フィルターが強く推奨し、電源の品質を改善するために実験装置を保護するために、研究所の施設にプリインストールされています。強い電磁波がデバイスの適切な動作を妨げる可能性がありますので、PCR システムを強くてシールド電磁波源から離して保管します。また、強い振動に近い PCR システム源、遠心分離機やポンプなど過度の振動が計測器の性能に影響を与えるので使用しないでくださいが重要です。実験装置は、ダスト粒子や木材チップなどの非導べ電性の汚染物質を含む環境でのみインストール可能性があります。機器部品の上に粒子状物質を追い払うことができる任意の通気孔から部屋を確認します。
研究所の水使用量は、毎日実行する診断テストの数と技工士施設での作業の数に依存します。ヌクレアーゼ フリー水抽出、PCR 検査など診断のプロシージャの間にミキサーの準備のため必要で、事前に、他の消耗品や化学物質に配信する必要があります。ヌクレアーゼ フリー水の少なくとも 50 mL は; 1 つの診断テストを実行するために必要なヌクレアーゼ フリー水の必要量は、(すなわち、上のサンプルの数) の作業負荷によって異なります。蒸留水は、オートクレーブ滅菌装置を実行する必要です。1 つのサイクルでオートクレーブ水消費量は 160-180 mL;毎日の使用には、オートクレーブをお勧めします。プラスチック (管、ピペット チップ、等) のほとんどは使い捨てが、いくつかは再利用可能な (大型コンテナー、ラック等) を洗浄する必要があります。プロシージャの間に手を洗浄するため定期的に実行している水が使用され、その最小限のボリュームが毎日 15-20 L と推定されています。水は圧力のために励起される必要があります。堆積物の有害な効果から水機器を保護するために、水道水の質を改善するためには、底質の前処理フィルター システムをお勧めします。
冷蔵、冷凍庫 4.9 立方フィート (-30 ° C に-20 ° C) 1 つと、少なくとも 1 つ 5.1 立方フィート冷蔵庫 (+4 ° C) する必要が各研究室単位でサンプルを格納/RNA。
除染研究室に複数のレベルが含まれています: クリーニング > 消毒 > 消毒 > 滅菌。簡単なクリーニングは、手袋をはめた手やブラシでスクラブしながら石鹸と水を使用して実行できます。消毒には、成長と細菌の増殖を抑制するために液体抗菌化学洗浄が含まれています。アルコール溶液 (70%)消毒液として使用できます。消毒は、作業面・機器 (細菌の胞子) を除くほぼすべての病原微生物を排除するために液体化学品のアプリケーションです。消毒薬の濃度、温度、化学物質の暴露時間は、重要です。次亜塩素酸ナトリウム溶液 (0.5%)、または漂白剤は、大規模表面の浄化と水の浄化のために有効な殺菌剤です。紫外線殺菌は、消毒の別方法です。殺菌ランプは、UV-C の光を生成し、細菌やウイルスの不活性化に 。滅菌耐性細菌胞子を含む - すべての微生物生命を破壊する物理的または化学的手順を採用しています。オートクレーブ滅菌器で滅菌できます。
すべての実験廃棄物は、世代の時点で分離する必要があります。場所の固体、非シャープ、感染性の廃棄物防漏こみ袋では、バイオハザードとしてマークされます。発生した廃棄物がシャープの場合は、耐穿刺性容器に配置する必要があります。液体用コンテナーを正しくラベル付けされたバイオハザードの感染の危険性の液体廃棄物を収集します。容器や袋は埋めてはならない 2/3 以上のボリューム。漂白剤製品がすべての処分は、自分の指定されたゴミ箱に並べ替える必要があります。実験廃棄物は生成エアロゾルや袋や容器の破損を避けるために優しく扱われなければなりません。バイオハザード廃棄物のコレクション袋/箱は、0.5% 次亜塩素酸ナトリウム溶液で使用後染シールおよび外部の表面をする必要があります。すべての研究室の廃棄物を滅菌 30 分焼却前の 121 ° c のオートクレーブで。オートクレーブの適切な使用のための機能のマニュアルを参照してください。可能であれば、適切な滅菌を確実にオートクレーブに化学的または生物学的インジケーターを追加します。設定、日付、時刻、および演算子の滅菌、すべてオートクレーブ固体および液体廃棄物を明確に表示する必要があります。ラベルの廃棄物を焼却する前にセキュリティで保護された、独立したエリアに配置されますする必要があります。
予想通り、診断テストのワークフローは、病気と試料によって異なります。ウイルス同定血液サンプル (エボラ19など) を収集するためにお勧めのサンプル因数が-80 ° C (呼吸器ウイルスに必要) ではなく-20 ° C で保存できます。常に、後で標本を分割するよりも患者からサンプリングを行う 1 つ以上の標本を取ることをお勧めします。可能であれば、試料の種類ごとに、少なくとも 2 つの標本は、個別検体チューブで取られなければなりません。追加サンプリングが可能でない場合、標本は分割ある必要があります。
適切な温度で代替の標本を格納できない場合 (例えば、冷凍庫が利用できない) 綿棒は、純粋な (100%) に格納されている必要がありますエタノールまたは 99% メチル化された精神 (メタノール添加物のみ)。この場合、エタノールの 1-2 ml バイアルに綿棒の先端を置く必要があります。そのような標本が PCR にのみ適していることに注意してください。また、メモ、老舗アッセイは各特定のウイルス診断8、23に必要な未知のウイルスのサンプルは、さらに調査19,20、割り当てられた所に送られなければなりません。 21。
呼吸器ウイルス診断 PCR テストのための実験装置のリストに必須および推奨要件を認識する必要があります。表 3は、基本的な最小限度 (推奨) 機器と RT-PCR 診断テストの要件を強調します。BSL 3 練習のため人員の余分な負圧保護 (グローブ ボックスなど) が重要かつ必要です。
接続された実験室モジュールは、ラボにおけるテストおよび 1 つのテストに必要な時間を高速化に関与する人員の数を増やすことが望ましい。時間のかかる手動の RNA の抽出を交換自動 qPCR (例えば、QiaCube) で可能です。この楽器は面倒 (幅 65 cm、長さ 62 cm、高さ 86 cm)、BSL 2 または BSL 3 単位で家具の転位後モバイル研究所ワークスペースを合うことができます。
今後の作業は、拡張現実感 (AR) の開発に焦点を当てたが、バーチャルリアリティ (VR) のトレーニング。AR/VR メガネは、よく訓練された実験室労働者になるための必要な技能を教えるためのインタラクティブなプラットフォームを提供するために使用されます。検査診断の困難、マルチ ステップの手順の一部を実行するヒントは、ソフトウェア ガイドに含まれます。人材育成へのこのアプローチは、診断テストのパフォーマンスとリモートの研究施設、特にリモートのリソースも制約領域管理の質を改善すべき。

迅速な診断はタイムリーなウイルス感染制御の重要な器械特に初期症状は様々 な感染症の区別がつかない。西アフリカ1,2, アジア、ラテン アメリカの3、4でジカのウイルス感染症 (2015-2016), 中東呼吸器症候群 (MERS) コロナ ウイルスの出現で最近のエボラ出血熱流行 (2014-2015)感染症5,6、および米国7、8に非常に致命的なインフルエンザ (インフルエンザ) 伝染病 (2017-2018) 明らかに対処する多数の急速に展開、研究所の施設・設備の必要性交通、アクセス、設備、機器、通信からの問題。
グリッドをオフ機能 (自律的な電力と水の供給、等) は地方の限られたリソースのグローバル設定9,10,11重要です。臨床業務と薬の Baylor の大学グローバル プログラムでの経験は、設計、容易な導入、セットアップ、および多機能の使用 (BSL-2 および BSL 3) の機能を持つコンテナ ベースの携帯電話の研究を構築する使用されました。この汎用性の高い、ロジスティック強化研究所施設のイメージは図 1に示します。
この急速に展開、研究所施設は拡張可能な設計を前述のコンテナー クリニックと同様 (' 緊急スマート ポッド ')12,13,14, 薬の Baylor の大学によって開発されたと米国国際開発庁が主催。(トランスポート モード) でパックされた単位が 9 フィート 9 インチ × 8 フィート × 8 のサイズ フィート (図 1 a, B)、170 平方フィート (15.75 m2) の領域を展開し、(図 1、D)。ユニットは、2 〜 4 人で 10 分以内で展開できます。
個別のモジュラー、アタッチ可能な BSL 3 ユニット (図 2 b) 向け仕事感染性病原体の吸入を介して深刻なまたは潜在的に致命的な病気を引き起こす可能性がありますリモート研究所 BSL 2 ラボ施設 (図 2 a) に最適します。15します。 2 つの実験モジュールの接続実験ワークフロー、リソースの共有、コスト削減 (図 2 C E) の最適化を有効にします。
モジュールは、気密と水密快適で、エネルギー効率の高いモバイル避難所を作成します。暖房、換気および空気調節 (HVAC) システムは、集中および温度制御ユニットに使用されます。一般的に、研究室単位の設計は、太陽電池パネルおよび独立した電気発電機など独自の代替電源の使用状況によって消費電力を最小化します。各ユニットには、シンクと洗眼、電力、水コネクタ (図 3 a C) が含まれています。ICT プラットフォームを実現するオプション、タブレット ベース (iPhone/iPad または Android 携帯電話/タブレット) 供給追跡と (図 3 D) 研究室結果ドキュメントにドキュメント アプリはベイラーの情報技術 (IT) との提携で開発限られた接続とリモート環境で働くことで経験豊富な研究グループ。システムは、携帯電話または無線信号を使用して機能することができます、即時バックアップまたはセキュリティで保護されたクラウド ベースのサーバー接続が再確立されたときにトランス ミッションと接続することがなくドキュメントをことができます。
研究室でを含むいくつかの重要な感染症-制御機能: (a) 負圧空気流、(b) のグローブ ボックスやバイオ セーフティ キャビネット、(c) 健康リスク管理システム: 実績のある防衛の 4 階層を使用した殺菌紫外線 (UV-C) 照明システム医療関連感染症を引き起こす病原体の 99.7% をなくす。施設は、効率的かつ効果的な除染用過酸化水素または次亜塩素酸ナトリウム (漂白剤) システムを使用して簡単に消毒です。16
品質検査結果の保証は、全体の診断テスト プロセスのあらゆる側面を評価するためのコミットメントに依存します。ここでは、BSL-2 および BSL 3 室のワークフローのためのチェックリストと急速な呼吸器ウイルス診断テストのためのプロトコルを提案します。ウイルス疾患の提案された診断は、リアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) を介して試験片 (鼻洗浄、血液、便、尿等) のウイルスの RNA または DNA の検出に依存します。急速に標本のウイルスの負荷を推定する機能は、ウイルス性疾患17,18のスクリーニングのための効率的なツールを PCR になります。小説の実装では、分子診断アッセイ エボラ19,20,21インフルエンザ8,22, 結核などウイルスの診断機能の拡張が可能します。)23。
この作業の目的は、新規にモジュール化され、急速に配置可能なラボを検証し、流行、自然災害やその他の救援中にリモート、低リソース環境研究所職員のトレーニング ガイドを提供状況。この革新的な携帯用の研究室で呼吸器系インフルエンザ診断プロトコルを紹介します。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Autoclave Sterilizer &#39;BioClave&#39;</td>
			<td>Benchmark Scientific, Edison, NJ, USA</td>
			<td>B4000-16</td>
			<td>16 liter, Benchtop, Dims: 22x17.5x15.7 in, Fully automatic, Extremely Compact</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barcode Scanner</td>
			<td>Zebra Technologies ZIH Corp., Lincolnshire, IL, USA</td>
			<td>Symbol LS2208</td>
			<td>Handheld, lightweight</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Breaker Box Panelboard Enclosure</td>
			<td>Square D (Schneider Electric), France&#160;</td>
			<td>MH62WP&#160;</td>
			<td>NEMA 3R/5/12, Dims: 20 W x 62 H x 6-1/2 in. D, Electrical distribution board</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge - Microcentrifuge 17,000 x g</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>75002440</td>
			<td>Holds 24 x1.5 or 2 ml tubes, Dims: 8.9x9.6x13.8 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class II Biological Safety Cabinet</td>
			<td>NuAire, Inc., Plymouth, MN, USA</td>
			<td>NU-602-400</td>
			<td>4 Ft. Class II Type A2 Cage Changing Biological Safety Cabinet, 12&#34; Access Opening, HEPEX Pressure Duct&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Class III Biological Safety Cabinet (Glove box)</td>
			<td>Germfree Laboratories, Ormond Beach, FL, USA</td>
			<td>Model #PGB-36, Serial #C-2937</td>
			<td>Glove box, Portable, 36&#34;, Class III BSC. Dims: 36x20x23.75 in, Includes 2 interior outlets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryo Coolers</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>414004-286</td>
			<td>0.5 or 1.5 ml tube benchtop coolers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Freezer (30&#176;C freezer)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>Model ULT430A</td>
			<td>To occupy 4.9 Cubic feet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminar Flow Cabinet</td>
			<td>NuAire, Inc., Plymouth, MN, USA</td>
			<td>NU-126-300</td>
			<td>3 Ft. Vertical Laminar Airflow Cabinet, 8&#34; Access Opening, HEPA filter supply, 99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mini Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>75004061</td>
			<td>Dims: 4.1x5.0x6.0 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes automated</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>05-403-151</td>
			<td>Pipet 4-pack (2.5,10, 100 and 1,000&#956;L volume)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes automated &#39;Finnpipette&#39;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4700880</td>
			<td>Pipet 4-pack (2, 20, 200 and 1,000&#956;L volume), Advanced Volume Gearing(AVG), Ultra durable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power Generator</td>
			<td>Cummins Power Generation, Minneapolis, MN, USA</td>
			<td>C60 D6</td>
			<td>60 kW, 60 Hz, 1 Phase, 120/240V, Diesel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>BioMedical Solutions, Inc., Stafford, TX, USA</td>
			<td>BSI-HC-UCFS-0504W</td>
			<td>Standard Undercounter Refrigerators &#38; Freezers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Refrigerator</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>05LRAETSA&#160;</td>
			<td>To occupy&#160; 5.1 Cubic feet</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RT-PCR machine &#39;Step-one plus&#39;</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4376598</td>
			<td>Holds 96 samples, Dims: 9.7x16.8x20.2 in&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortex Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>88880017TS</td>
			<td>Dims: 6.1x8.3x3.3 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chemicals</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AgPath-ID One-Step RT-PCR Reagents</td>
			<td>Applied Biosystems, Foster City, CA, USA</td>
			<td>4387391</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol Koptec Pure 200 Proof</td>
			<td>Decon Labs, Inc., King of Prussia, PA, USA</td>
			<td>V1001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease-free Water</td>
			<td>Ambion, Inc., Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>AM9906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>QIAamp Viral RNA Mini Kit</td>
			<td>Qiagen, Hilden, Germany</td>
			<td>52906</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript III Platinum One-Step qRT- PCR Kit</td>
			<td>Invitrogen, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>11732-088</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL cryogenic tubes</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>03-337-7X&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL tubes</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>10025-726</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Neptune, VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>Neptune, BT10XLS3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Multimax, BioExpress, VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>MultiMax, P-3243-30X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>ART, Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>ART, 2770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L Filter Tips</td>
			<td>Phenix Research Products, Candler, NC, USA</td>
			<td>TS-059BR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AB custom probes</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom probes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Combitips</td>
			<td>Eppendorf, Hauppauge, NY, USA</td>
			<td>89232-972</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Integrated DNA Technology (IDT) custom probes and primer</td>
			<td>IDT</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom probes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Fast Optical 96-Well Reaction Plate</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>490003-978 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Fast Reaction Tubes (8 tubes/strip)</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4358293</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Optical 8-Cap Strip</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4323032</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MicroAmp Optical Adhesive Film</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, Carlsbad, CA, USA</td>
			<td>4311971</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Supplies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biohazard waste bags</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>14220-046</td>
			<td>20.3 x 30.5 cm Biohazard bags</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gloves</td>
			<td>Denville Scientific, Holliston, MA, USA</td>
			<td>G4162-250</td>
			<td>Small, meduim or large Nitrile or latex gloves</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lab coat</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Customizable</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Masks</td>
			<td>VWR, Radnor, PA, USA</td>
			<td>414004-663</td>
			<td>Advanced protection mask</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protective shoes</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Customizable</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

remote laboratory management: respiratory virus diagnostics

最近の流行 (エボラ、ジカ、MERS、インフルエンザ等) 下線で上向い詳細 '軽快、' の必要性調整交通、アクセス、設備、機器、通信プロバイダーに至るまでの問題の多くに対処する応答トレーニング。これに対処するには、限られたリソースのグローバル設定で緊急事態と伝染病の革新的で拡張性の高い、物流強化、モバイル、研究室設備を開発しました。学術の医療センターとして臨床操作のバック グラウンドを活かし、我々 施設を設計、急速に配置可能なモジュール式 BSL-2 および BSL 3 薬および供給の追跡および管理のための使いやすいソフトウェアを遠隔地域の流行時に、発生。私たちインター モーダル、携帯電話、拡張の出荷コンテナー研究ユニットを紹介します。研究所のデザイン、消費電力を抑え、代替水源を許可してオフ グリッド使用が促進します。ユニットの情報通信技術 (ICT) プラットフォーム (i) 使いやすいタブレット ベースのドキュメントを提供します (ii) 患者および消耗品貨物追跡の向上、(iii) 組み込み遠隔機能を持つ通信オンサイトを統合します。リモート環境の品質を確保する、基本的な検査のワークフローのためのチェックリストと逆転写ポリメラーゼ連鎖反応 (RT-PCR) を使用してウイルスの呼吸器の診断のためのプロトコルを開発しました。前述のように、この革新的で包括的なアプローチは、グローバル環境でリソースの限られた研究所機能の提供のためことができます。

本研究の目的は BSL 2、BSL 3 の携帯電話の研究設備を提案ができるように呼吸器ウイルス代表的な結果を持つ診断テスト高品質の検査と同じ十分な環境を提供することを示すことです。静止した所。研究所の施設は、衛生と安全 (OHS) に関する推奨事項は、テストの要件に準拠する設計されています。すぐにリモートの研究施設は配置した (図 4)、すべての機器、装置がインストールされている (図 5)、実験室のテストを実行できます。
研究室に従い標準操作手順、PPE (白衣、安全靴、手袋、マスク、保護メガネ等を高度な) 適した BSL 2 練習が必要です。BSL 3 練習のため負圧の PCR 実験モジュールに認定されたグローブ ボックスが備わっています。研究ユニットは、サンプル受信の段階で人員を保護するために外部のパススルー windows でアップグレードされます。登録プロセスは、(図 3 D) 開発済みタブレット ベースのアプリケーションを簡略化できます。ラップトップ上で実行される他の受け入れ可能なアプリケーションにも使用できます。
別の影響を与えるかもしれない生化学的な試薬の汚染または潜在的な干渉を回避する目的で診断手順の接続実験室モジュールでこの特定の呼吸器ウイルスの診断テストを実行できます、テストの結果。診断の質を最大にするには、急速な診断テストの練習は (i) 両方の基礎実習 BSL 2 と接続トラバース PCR ルーム (セクション 3) またはパススルー ウィンドウ (セクション 4) によって接続されている (ii) の GB と PCR ルームを利用しています。本研究室のワークフローの図は図 6で示される、個人保護を強調します。図は、特に場合は、遠隔地の研究室のスタッフは訓練されて最小限人員を保護するため各示される手順の重要性を認識しています。
インフルエンザの迅速診断は、RT-PCR の技術を介して行われます。プロシージャには、4 つの主な手順が含まれています。個々 のワークスペースがプロトコルの各段階に割り当てられていることに注意してください。
最初のステップは、サンプルを取得し、いくつかの因数に分割することです。採取しデータ コントロールの有効性を改善するためにバーコードが付いて、さらに調査のため冷凍庫に保存されています。2 番目のステップは、換散バッファーのサンプルを遠心分離、加熱によって不活化することです。最初と 2 番目のステップは、バイオ セーフティ キャビネットで実施する必要があります。個々 のピペット セットおよび装置を利用します。PCR テストを提案するは、可能であれば PCR 部屋で実行することです。3 番目のステップは、結果のドキュメントです。ステップ 4 は、機器の使用方法、および実験の終わりに人体保護のアラームの後、メンテナンスです。
供試体は BSL として分類される予定としているかどうか-3 + (e.g.,Ebola、ジカ、MERS、TB) グローブ ボックス機能を使用する必要があります。GB ルームがあるリモート研究所標本とラップトップまたはサンプル登録のためのタブレットを受け取る独自のパススルー ウィンドウ。サンプル分注とウイルス不活化をグローブ ボックス室で実行する必要があります。UV-C 照明は手順時の汚染を避けるためにお勧めします。後サンプルの不活化、さらにプロトコルの手順に似ています基本的な研究所 BSL 2 BSL 3 テストおよび次のチェックリスト パート III (表 1、図 6).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig1.jpg"> 図 1。研究所施設プロトタイプ。(A, B)トランスポート モード;(C) 配置モード: 外で;(D) 配置モード: インテリア。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig1large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig2.jpg"> 図 2.回路図。(A) 基礎実験 BSL-2;(B)「BSL 3 モジュールにには、グローブ ボックスと保護された試料移送のパススルー ウィンドウが共通 PCR 所が含まれています(C) 接続実験施設 (A) と (B) 共有ユーティリティを使用します。(D,E)反対側から接続されているユニットの写真。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig3.jpg"> 図 3。BSL 3 施設 (A) インテリアは、(1) パススルー ウィンドウ、シンク、(2) 入口; 洗眼ステーション(B) 電気電源コネクタ、コネクタ (C) 水(D) 供給追跡および実験室の結果タブレット ベースのソフトウェア ドキュメンテーション。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig4v2.jpg"> 図 4.研究所施設の展開。パネルのようにユニットの片側に展開 (A ~ D) のための命令。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig4v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig5.jpg"> 図 5.接続可能な実験室の模式図:(A) BSL 2 モジュール 1;(B) グローブ ボックスおよび PCR モジュール 2。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig5large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。 
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59188/59188fig6.jpg"> 図 6.リモートの研究施設の呼吸器ウイルス診断 RT-PCR テストのためのフロー チャート。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59188/59188fig6large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するのにはここをクリックしてください</a>。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>遠隔実験システム BSL-2</td>
			<td>遠隔実験システム BSL-3</td>
		</tr>
<tr>
<td>パート I</td>
			<td>パート I</td>
		</tr>
<tr>
<td>i. 研究室のドアを通って入力する技術の入り口と入り口のドアの横にあるラックに掛かっている実験用の上着を着た。開いている靴は禁止されて、高度なマスクと保護メガネを奨励します。</td>
			<td>i. 負圧を保証するために単位の外からグローブ ボックス ウィンドウに見て研究室の技術はアクティブになります。(ピンクのボールは負圧の作業を表示する単位で表示する必要があります)。</td>
		</tr>
<tr>
<td>流しで手を洗うし、使い捨て手袋を入れてサンプルの摂取で始まる ii 研究室の技術。</td>
			<td>ii. 否定的な圧力は、唯一のドアを通って入力して入り口のドアの横にあるラックに掛かっている白衣を着た研究室の技術を動作している場合 開いている靴は禁止されて、高度なマスクと保護メガネが望ましい。</td>
		</tr>
<tr>
<td>iii. パススルー ウィンドウにドロップされる前に次亜塩素酸お風呂に浸漬した試料は、実験室の技術の通過点に座っています。</td>
			<td>流しで手を洗う iii 研究室の技術は使い捨て手袋、PPE を入れて、サンプルの摂取量から始まります。</td>
		</tr>
<tr>
<td>iv. 検体受付で受け取った。</td>
			<td>iv. 以前パス ・ スルー ・ ウィンドウにドロップされる前に次亜塩素酸お風呂に浸漬されたサンプルは実験室の技術の通過点に座っています。</td>
		</tr>
<tr>
<td>パート II</td>
			<td>v. 検体受付でを受け取った。</td>
		</tr>
<tr>
<td>v. 診断の手順にによって標本バイオ セーフティ キャビネットに移動し、不活化します。</td>
			<td>パート II</td>
		</tr>
<tr>
<td>vi. 標本は顕微鏡、遠心分離機、腐敗を準備中。</td>
			<td>vi. グローブ ボックスの中に不活性の標本。</td>
		</tr>
<tr>
<td>vii. 適切な診断テストを実行します。</td>
			<td>vii. 標本核酸分離の実行します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>viii. 4 ° C の冷却装置または適切な冷凍庫に標本を格納します。</td>
			<td>viii. 抽出後の標本はパススルー ウィンドウに移動。</td>
		</tr>
<tr>
<td>パート III</td>
			<td>ix. 研究室の技術は、ユニット (正圧) の PCR 側の入口から入ります。</td>
		</tr>
<tr>
<td>ix. 染色アイテムの洗浄用シンクを使用します。</td>
			<td>研究室の入り口の横にラックから白衣にかける技術、x. 手袋を入れて流しで手を洗います。</td>
		</tr>
<tr>
<td>x. ドキュメントや分析するためノート パソコン & counterpace を使用します。</td>
			<td>xi. パススルー ウィンドウでグローブ ボックス ルームからの受信サンプル。</td>
		</tr>
<tr>
<td>xi. オートクレーブを実行することにより機器を滅菌します。</td>
			<td>xii. 場合必要な試料は、層流キャビネットで準備中。</td>
		</tr>
<tr>
<td>xii. バイオハザード廃棄物コンテナーに任意の汚染廃棄物の処分します。</td>
			<td>xiii。 適切な診断テストを実行します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>xiii。 流しで手を洗います。</td>
			<td>(14) 4 ° C の冷却装置または適切な冷凍庫に標本を格納します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>xiv。 バックアップ白衣をラックに掛けます。</td>
			<td>パート III</td>
		</tr>
<tr>
<td>第 xv 章同じドアを通って終了します。</td>
			<td>xv 染色アイテムの洗浄用シンクを使用します。</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>xvi のドキュメントや分析するためノート パソコン & counterpace を使用します。</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>十七 PCR の部屋にバイアルをパススルー ウィンドウに転送し、機器を滅菌するオートクレーブを実行することによって。</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>xviii. バイオハザード廃棄物コンテナーに任意の汚染廃棄物の処分します。</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>xix。 流しで手を洗います。</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>xx を同じ入り口ドアを通って終了します。</td>
		</tr>
</tbody></table>表 1。PCR 診断ワークフローのためのチェックリスト。
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td colspan="3">メンテナンスと校正</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">リアルタイム PCR システム</td>
			<td>毎月</td>
			<td>毎月背景校正を実行します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>18 ヶ月</td>
			<td>背景、空間を行い、染料の校正 18回ヶ月ごと</td>
		</tr>
<tr>
<td>遠心分離</td>
			<td>1 年間</td>
			<td>分と外部または内部校正サービスを通じて温度あたりの回転数の調整します。</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">グローブ ボックス</td>
			<td>毎日</td>
			<td>特に HEPA フィルター、手袋、o リング、ホースの表面への損傷のための要素を目視で確認します。管クランプはしっかりと場所を確認します。リーク圧テストを実行します。圧アラームをテストします。</td>
		</tr>
<tr>
<td>6 ヶ月</td>
			<td>HEPA フィルターを変更します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>1 年間</td>
			<td>システムを校正します。</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="3">オートクレーブ</td>
			<td>毎週</td>
			<td>きれいな水槽や軽度の研磨剤を使用してラック</td>
		</tr>
<tr>
<td>3 ヶ月</td>
			<td>タイマーとゲージを調整します。</td>
		</tr>
<tr>
<td>1 年またはすべての 50 サイクル</td>
			<td>検査、徹底的に掃除、テストおよびキャリブレーション</td>
		</tr>
<tr>
<td rowspan="2">冷蔵庫、Freeezer</td>
			<td>6 ヶ月</td>
			<td>ファン、モーター蒸化器コイル、凝縮コイルおよびコンデンサーのフィルターを掃除機をチェックし、必要に応じて電池を置き換える</td>
		</tr>
<tr>
<td>1 年間</td>
			<td>内部または外部の校正サービスを冷凍庫を調整します。</td>
		</tr>
</tbody></table>表 2。リアルタイム PCR 機器のメンテナンス。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td>必須</td>
			<td>お勧めします</td>
		</tr>
<tr>
<td>白衣、安全靴、手袋</td>
			<td>白衣、安全靴、手袋、マスク、メガネ</td>
		</tr>
<tr>
<td>冷蔵庫冷凍庫-20 ° C、4 ° C</td>
			<td>冷蔵庫 4 ° C、-20 ° C、冷凍庫冷凍庫-80 ° C</td>
		</tr>
<tr>
<td>自動ピペットの 1 セット</td>
			<td>自動ピペットの 3 つのセット</td>
		</tr>
<tr>
<td>遠心分離機、シェーカー、たち</td>
			<td>ロボット システム</td>
		</tr>
<tr>
<td>RT-PCR マシン、氷浴</td>
			<td>RT-PCR 温度制御、凍らないクーラー</td>
		</tr>
<tr>
<td>バイオハザード廃棄物バッグ</td>
			<td>バイオハザード廃棄物を処分するオートクレーブ</td>
		</tr>
</tbody></table>表 3。RT-PCR の呼吸器ウイルス診断の最小要件は、BSL 2 をテストします。

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Remote Laboratory Management: Respiratory Virus Diagnostics

急速に展開可能、オフグリッドの実験室を設計されており、リモートのリソースに制約のあるグローバル設定の構築します。機能とロジスティック強化、拡張可能な多機能の実験モジュールの重要な側面が検討されます。基本的な実験室のワークフローのためのチェックリストと呼吸器ウイルス診断テストのためのプロトコルを開発・発表します。

遠隔実験システム管理: 呼吸器ウイルス診断

An uptick in recent pandemics (Ebola, Zika, MERS, influenza, etc.) underlines the need for a more 'nimble,' coordinated response that addresses a ...

ジカやエボラウイルスなどの最近の流行の急増は、世界規模でより協調的で軽快な対応の必要性を強調している。これを達成するために、我々はそのような発生時に世界中の資源制約地域で使用される革新的でスケーラブルな、内部モーダル実験室ユニットを設計しました。ここでは、モーダル、拡張可能なモバイル出荷コンテナ研究所を紹介します。そして、以下の論文では、BSL-2とBSL-3のアプローチを呼吸器インフルエンザウイルス診断に紹介します。RCT-PCRによる迅速なインフルエンザウイルス診断設置された実験室ユニットに入る準備をする前に、BSL-2の安全要件をすべて考慮する必要があることに注意してください。これには、適切な個人用保護具付きのドレッシング、手洗い、手袋の着用、使用する予定のワークスペースの除染が含まれます。あなたのワークスペースや供給を除染するために漂白剤を使用する場合は、漂白剤が有毒な煙を作成するためにワークスペース内の他の化学物質と混合することができるので、漂白剤にさらされたすべての領域をきれいにするために70%エタノールを使用する必要があります。すべての漂白剤製品を独自の指定されたゴミ箱に処分します。サンプル綿棒は患者から採取され、現場または診療所から実験室施設に運ばれ、パススルーウィンドウを介してラボ技術者に渡されます。このウィンドウは両側から開くことができません。BSL-2パススルーウィンドウでは、サンプルを含むチューブの外部表面を漂白剤で完全に消毒し、2分間座るために放置する必要があります。パススルー・ウィンドウを開き、登録するサンプルを収集します。漂白剤の残骸を含むサンプルを拭き取り、パススルーウィンドウの内部を漂白剤で拭き取り、続いて70%エタノール溶液を拭き取ります。各サンプルチューブにバーコードを追加し、アリコート用に指定された4つの空のチューブを追加します。サンプルをベントフードに移動します。各チューブのバーコードをスキャンし、適切なサンプル識別情報がタブレットベースのシステムまたはラップトップ画面に表示されることを確認します。登録プロセスを完了します。サンプルアリコート。試験管に標識が付いたら、認定および除染クラスIIバイオセーフティキャビネットを使用してサンプルのアリコートを採取します。アリコートを取るときは、各サンプルに新鮮な無菌または使い捨てのピペットを使用し、クロス汚染を避けるためにバイオ有害廃棄物容器に廃棄してください。すべてのチューブが密閉されていることを確認してください。即時抽出のために標本ごとの1つのアリコートを利用しなさい。将来の使用のために冷凍庫に他のアリコートを保管してください。ワークステーションに移動する前に、漂白剤と70%エタノール溶液が続くすべてのワークスペース表面と機器を洗浄してください。バーコード PCR サンプルをアリクォートしたら、抽出用に指定されたワークステーションに移動します。リシスステップ用のバッファー AVL キャリア RNA 混合物を準備します。サンプルおよびリシスバッファーマスターミックスは室温で保つべきである。1.5ミリリットルの遠心分離チューブにラベルを付けます。ピペットチップを560マイクロリットルに設定します。きれいなピペットチップを塗布します。各チューブにリシスバッファーを追加します。廃棄物容器の先端を捨てます。次に、PCR アリコートサンプルを取ります。アリコート1用に指定された準備されたリシスバッファーチューブに入れ、追加のサンプルに対してこれを繰り返します。古いピペットの先端を捨て、きれいなピペットの先端を適用します。きれいなピペットチップを塗布します。140マイクロリットルのバッファーをコントロールチューブに加えます。各チューブをしっかりと閉じます。パルス渦を15秒間。追加のアリコートまたはサンプルを使用して繰り返します。各サンプルを5秒間マイクロ遠心分離します。室温で10分間インキュベートします。10分後、チューブを少し遠心分離して、各チューブの蓋の内側から滴を取り除きます。サンプル1に560マイクロリットルのエタノールを加えます。ピペットチップを交換します。残りのサンプルまたは追加サンプルを繰り返します。各サンプルチューブをしっかりと閉じます。各サンプルのパルス渦を15秒間サンプルを5秒間マイクロ遠心分離します。きれいな2ミリリットルのコレクションチューブを得る。スピン列を追加します。サンプルに合わせてラベルを付けます。サンプルの630マイクロリットルをそれに応じてカラムに合わせて移します。キャップを固定します。遠心分離機に移動します。サンプルを遠心分離機に均等に分配します。6000 gで遠心分離機を1分間、リシスバッファーを除去する。ワークステーションに戻ります。あなたのコレクションの管を取り替えます。残りのリシスバッファーを追加し、遠心分離ステップを繰り返します。元のアリコートサンプルチューブを捨て、その後、溶出液を処分し、スピンカラムをバッファAW1で洗います。すべてのサンプルまたは追加のサンプルでこの手順を繰り返します。各サンプルのキャップを固定し、遠心分離機を6 gで固定します。20gで2番目の洗浄バッファAW2で繰り返します。最後に、カラムを清潔な1.5ミリリットルのチューブに入れます。カラムを開き、60マイクロリットルのバッファーAVEを加え、室温で1分間インキュベートし、6 gで遠心分離機を1分間インキュベートします。サンプルは、PCR 分析の準備ができました。BSL-3条件下では、実験プロトコルは同じままですが、安全対策は何よりも前例があります。BSL-3ラボに入る前に透明な窓から見て、グローブボックスユニットに負圧が確立されていることを確認してください。壁のボールが見える時に負の圧力が確立していることは明らかでしょう。負圧が確立されたらドアを開け、単位に入ります。すぐに手を洗ってからPPEチェックリストに進んでください。次の順序でPPEに置くことに進みます:手袋、ガウン、靴カバー、マスク、フェイスシールド、手袋の第二のペアの下。機械の電源を入れ、グローブボックス内の圧力を安定させます。漂白剤スプレーソリューションを使用して、グローブボックスの内側と外側で使用する予定のすべてのエリアと電源を除染します。漂白剤のみの容器に漂白剤廃棄物を処分します。70%エタノール溶液を使用して、漂白剤が使用されているあらゆる領域を洗浄してください。パススルーウィンドウを介してサンプルを転送します。サンプルは、漂白剤溶液を噴霧し、BSL-3ユニットの内部でそれらを受け取る前に、パススルーで少なくとも1分間放置する必要があります。次に、BSL-3ユニットの内部でサンプルを受け取り、登録とラベリングのステップに進む前に、それらを徹底的に清掃してください。サンプルを登録してチューブにラベルを付けたら、エアロックトレイを介してサンプルをグローブボックスに入れます。両方のドアを同時に開けないでください。安全上の注意のために、2つの異なるステップで各ドアを開閉します。サンプルをグローブボックス内部に安全に移動したら、グローブボックスにサンプルアリコートを作成する場合と同じ手順に従います。サンプルがアリクォートされたら、サンプルを気密容器に移動させます。グローブボックス内に漂白剤溶液をスプレーして、チューブやその他すべての表面を除染します。5分間待ってから、70%エタノール溶液を塗布して漂白剤を洗浄します。徹底的な除染後、リシスのPCR分析に必要なサンプルのみをグローブボックスに戻します。グローブボックスでは抽出手順のみのリシスステップを実行します。細胞を取り付けたら、各サンプルのキャップをしっかりと密封し、加圧エアロック通路に入れる。漂白剤に続いて70%エタノール溶液で再びグローブボックスを除染します。サンプルをグローブボックスから移動し、抽出手順の残りのステップのためにワークステーションに転送します。抽出後、サンプルをパススルーウィンドウに転送して PCR 分析を行います。サンプルを取り外して転送した後、ラボワークスペースをグローブボックスの外に除染します。PPEを取り外す前に、ユニットの空気循環が適切な数のフィルタリングサイクルに達するまで待ってから、PPEを取り外してください。PPE廃棄物容器に全PPEを取り出して処分した直後に、ユニットを出る前に石鹸と水でラボシンクで手洗いに進みます。PCR増幅および検出。抽出したRNAサンプルをパススルーウィンドウから取り出します。1.5ミリリットルチューブに、対象となるアッセイごとに次の成分を含むマスターミックスを準備します:水、プライマーとプローブ、アタック混合物、および2Xバッファー。渦とスピンマスターミックス、その後、ストリップチューブのそれぞれにマスターミックスをアリコート。マスターミックスを準備したら、推奨温度でPCRキットを保管してください。各ストリップチューブの間に別々の先端を使用して、各ストリップチューブにサンプルを追加します。1,500 rpmで1分間サンプルをスピンし、その後、サンプルをリアルタイムPCRユニットにロードする準備が整います。サンプルが PCR 装置にロードされると、1 回の実行が完了するまでに約 90 分かかります。リアルタイムPCRアッセイは、ウイルスの強い検出のための高感度な方法です。これは、PCR 分析結果というラベルの付いた表で確認できます。結果を収集してラボを離れる前に、PPE を削除し、次の診断テストに備えて各ワークステーションを適切に除染してください。代表結果。実験室のワークフローは、個人の保護を重視した図で表されています。インフルエンザの迅速な診断テストは、RT-PCR分析によって行われます。この手順は 4 つの主要な手順で構成され、プロトコルの各ステージに個別のワークスペースが割り当てられます。このプロジェクトの目的は、新しいモジュール式の急速に展開可能な実験室施設を検証し、我々はこれを成功させただけでなく、流行や流行の間に低資源環境で働く実験室職員のためのトレーニングプログラムを開発することです。

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Management of Meatal Stenosis with Meatoplasty

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Absorption of Nasal and Bronchial Fluids: Precision Sampling of the Human Respiratory Mucosa and Laboratory Processing of Samples

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Methodology for Sputum Induction and Laboratory Processing

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