Name: intramucosal inoculation of squamous cell carcinoma cells in mice for tumor immune profiling and treatment response assessment
Uploaded: 2019-04-22T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment at JoVE.com

Todos os procedimentos de animais foram efectuados de acordo com um institucional animal cuidados e uso Comité (IACUC) protocolo aprovado da Universidade de Colorado Denver (protocolo # 00250).
1. cultura de células de tumor
Nota: Linhas de células B4B8 e LY2 foram usadas para gerar tumores HNSCC ortotópico: B4B8 células de tumor foram derivadas de queratinócitos da mucosa cancerígena-transformadas (a partir de camundongos BALB/C)<sup class="xr...

<ol>
	<li>Chaturvedi, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Worldwide+trends+in+incidence+rates+for+oral+cavity+and+oropharyngeal+cancers.">Worldwide trends in incidence rates for oral cavity and oropharyngeal cancers.</a> Journal of Clinical Oncology. 31 (36), 4550-4559 (2013).</li><li>Ang, K. K., Sturgis, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+papillomavirus+as+a+marker+of+the+natural+history+and+response+to+therapy+of+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma.">Human papillomavirus as a marker of the natural history and response to therapy of head and neck squamous cell carcinoma.</a> Seminars in Radiation Oncology. 22 (2), 128-142 (2012).</li><li>Amin, M. 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W., Kiel, D., Van Waes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metastatic+variants+derived+following+in+vivo+tumor+progression+of+an+in+vitro+transformed+squamous+cell+carcinoma+line+acquire+a+differential+growth+advantage+requiring+tumor-host+interaction.">Metastatic variants derived following in vivo tumor progression of an in vitro transformed squamous cell carcinoma line acquire a differential growth advantage requiring tumor-host interaction.</a> Clinical &amp; Experimental Metastasis. 15 (5), 527-537 (1997).</li><li>Euhus, D. M., Hudd, C., LaRegina, M. C., Johnson, F. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+measurement+in+the+nude+mouse.">Tumor measurement in the nude mouse.</a> Journal of Surgical Oncology. 31 (4), 229-234 (1986).</li><li>Tomayko, M. M., Reynolds, C. 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C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humanized+Mouse+Models+of+Clinical+Disease.">Humanized Mouse Models of Clinical Disease.</a> Annual Review of Pathology. 12, 187-215 (2017).</li><li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ionizing+radiation+sensitizes+tumors+to+PD-L1+immune+checkpoint+blockade+in+orthotopic+murine+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma.">Ionizing radiation sensitizes tumors to PD-L1 immune checkpoint blockade in orthotopic murine head and neck squamous cell carcinoma.</a> OncoImmunology. 6 (10), e1356153 (2017).</li><li>Ferris, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Further+evaluations+of+nivolumab+(nivo)+versus+investigator&#8217;s+choice+(IC)+chemotherapy+for+recurrent+or+metastatic+(R/M)+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+(SCCHN):+CheckMate+141.">Further evaluations of nivolumab (nivo) versus investigator&#8217;s choice (IC) chemotherapy for recurrent or metastatic (R/M) squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN): CheckMate 141.</a> Journal of Clinical Oncology. 34, (2016).</li><li>Ferris, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+for+Recurrent+Squamous-Cell+Carcinoma+of+the+Head+and+Neck.">Nivolumab for Recurrent Squamous-Cell Carcinoma of the Head and Neck.</a> The New England Journal of Medicine. 375 (19), 1856-1867 (2016).</li><li>Harrington, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nivolumab+versus+standard,+single-agent+therapy+of+investigator's+choice+in+recurrent+or+metastatic+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck+(CheckMate+141):+health-related+quality-of-life+results+from+a+randomised,+phase+3+trial.">Nivolumab versus standard, single-agent therapy of investigator's choice in recurrent or metastatic squamous cell carcinoma of the head and neck (CheckMate 141): health-related quality-of-life results from a randomised, phase 3 trial.</a> The Lancet Oncology. 18 (8), 1104-1115 (2017).</li><li>Kiyota, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized,+open-label,+Phase+III+clinical+trial+of+nivolumab+vs.+therapy+of+investigator's+choice+in+recurrent+squamous+cell+carcinoma+of+the+head+and+neck:+A+subanalysis+of+Asian+patients+versus+the+global+population+in+checkmate+141.">A randomized, open-label, Phase III clinical trial of nivolumab vs. therapy of investigator's choice in recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck: A subanalysis of Asian patients versus the global population in checkmate 141.</a> Oral Oncology. 73, 138-146 (2017).</li><li>Ling, D. C., Bakkenist, C. J., Ferris, R. L., Clump, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+Immunotherapy+in+Head+and+Neck+Cancer.">Role of Immunotherapy in Head and Neck Cancer.</a> Seminars in Radiation Oncology. 28 (1), 12-16 (2018).</li><li>Perri, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radioresistance+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+Biological+bases+and+therapeutic+implications.">Radioresistance in head and neck squamous cell carcinoma: Biological bases and therapeutic implications.</a> Head &amp; Neck. 37 (5), 763-770 (2015).</li><li>Yamamoto, V. N., Thylur, D. S., Bauschard, M., Schmale, I., Sinha, U. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+cetuximab+for+locoregionally+advanced+head+and+neck+cancer:+5-year+survival+data+from+a+phase+3+randomised+trial,+and+relation+between+cetuximab-induced+rash+and+survival.">Radiotherapy plus cetuximab for locoregionally advanced head and neck cancer: 5-year survival data from a phase 3 randomised trial, and relation between cetuximab-induced rash and survival.</a> The Lancet Oncology. 11 (1), 21-28 (2010).</li><li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+EphB4-Ephrin-B2+Signaling+Enhances+Response+to+Cetuximab-Radiation+Therapy+in+Head+and+Neck+Cancers.">Inhibition of EphB4-Ephrin-B2 Signaling Enhances Response to Cetuximab-Radiation Therapy in Head and Neck Cancers.</a> Clinical Cancer Research. 24 (18), 4539-4550 (2018).</li><li>Bhatia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+radiosensitization+in+EphB4+receptor-expressing+Head+and+Neck+Squamous+Cell+Carcinomas.">Enhancing radiosensitization in EphB4 receptor-expressing Head and Neck Squamous Cell Carcinomas.</a> Scientific Reports. 6, 38792 (2016).</li><li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+radiation+and+immunotherapy:+a+new+systemic+therapy+for+solid+tumors?.">Combining radiation and immunotherapy: a new systemic therapy for solid tumors?.</a> Cancer Immunology Research. 2 (9), 831-838 (2014).</li><li>Oweida, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+to+radiotherapy+and+PD-L1+blockade+is+mediated+by+TIM-3+upregulation+and+regulatory+T-cell+infiltration.">Resistance to radiotherapy and PD-L1 blockade is mediated by TIM-3 upregulation and regulatory T-cell infiltration.</a> Clinical Cancer Research. , (2018).</li></ol>

Uma análise rigorosa e caracterização do microambiente do tumor representam uma importante estratégia para os mecanismos de compreensão do desenvolvimento do tumor, progressão e metástases e para o desenvolvimento de terapias eficazes. Câncer de cabeça e pescoço é uma doença complexa que pode originar-se de vários locais anatômicos dentro da região de cabeça e pescoço. Um impedimento importante para compreender os mecanismos da doença e melhorar a terapia tem sido a falta de linhas de células de rato m...

HNSCC é a quinto mais comum malignidade globalmente, com mais de 600.000 pacientes diagnosticados anualmente1. Apesar do tratamento agressivo, envolvendo quimioterapia e radioterapia (RT), a taxa global de sobrevivência (OS) para pacientes com HNSCC sem infecção pelo papilomavírus humano (HPV) continua a ser inferior a 50% após 5 anos2. Isto é atribuído em grande parte para um microambiente do tumor altamente complexo como tumores podem se originar de vários sítios anatômicos distintos dentro da região de cabeça e pescoço, incluindo a mucosa bucal, língua, assoalho da boca, cavidade nasal, cavidade oral, faringe, orofaringe e hipofaringe. Além disso, a região da cabeça e pescoço é altamente vascularizada e contém quase a metade de todos os nós de linfa no corpo3. A maioria dos estudos investigando a biologia de tumor de cabeça e pescoço contam com modelos de tumor na região do flanco. Tais modelos podem oferecer insights sobre mecanismos intrínsecos tumor, mas a falta do microambiente nativo de cabeça e pescoço pode ter impacto significativamente o potencial translacional de tais achados. Um método que tem sido usado para induzir tumores orais é através da exposição ao carcinógeno 9,10-dimetil-1,2-benzanthracene (DMBA)4. No entanto, este método está associado com um processo demorado, induz tumores em ratos e hamsters, mas não em ratos, e os tumores resultantes não possuem muitas das características histológicas de diferenciada SCCs5,6. A introdução do carcinogen4-nitroquinoleína 1-óxido (4-NQO), um derivado hidrossolúvel quinolona, resultou em tumores orais do rato quando aplicado por via oral, mas também sofria de longos tempos de exposição (16 semanas) e um número limitado tomar taxa dentro e entre lotes de ratos7,8,9. A fim de desenvolver modelos clinicamente relevantes, vários grupos utilizaram modelos geneticamente modificados, que envolve a manipulação dos oncogenes motorista ou genes supressores de tumor, incluindo TP53, TGFB, KRAS, HRAS e SMAD410. Estes modelos podem oferecer insights sobre tumores com genes de motorista conhecido mas não recapitular a complexa heterogeneidade da HNSCCs humanas.
Neste trabalho, vamos demonstrar a viabilidade de realizar uma intramucosal inoculação de células de carcinoma de células escamosas em camundongos. Células inoculadas se desenvolvem em tumores agressivos dentro de 1 semana da injeção. Semelhante a HNSCCs humanas, os tumores metastatizam para os linfonodos regionais. Podemos caracterizar características clínicas e histológicas da doença e fornecer insights sobre o microambiente imune do tumor. Propomos que este modelo ortotópico de HNSCC tem aplicações em biologia do câncer, imunologia de tumor e estudos pré-clínicos. Mecanismos de evasão imune, progressão do tumor, metástases e resistência de tratamento representam áreas de significância clínica que podem ser abordados usando o modelo proposto.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:991px;" width="991">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:327px;">Collagenase III</td>
			<td style="width:217px;">Worthington Biochemical Corp.</td>
			<td style="width:120px;">LS004183</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">DNase I</td>
			<td>Worthington Biochemical Corp.</td>
			<td>LS006328</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Fc Block (CD16/32)</td>
			<td>BD Biosciences</td>
			<td>553141</td>
			<td style="width:327px;">&#160;Clone 2.4G2&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Flow Cytometry Staining Buffer</td>
			<td>eBioscience</td>
			<td>00-4222-26</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">HBSS</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>14175079</td>
			<td style="width:327px;">no calcium, no magnesium, no pheno red</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Helois mass cytometer</td>
			<td>Fluidigm</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Matrigel membrane matrix</td>
			<td>Corning&#160;</td>
			<td>CB-40234B</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">MRI Scanner</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>NA</td>
			<td>7.4 Tesla</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">RBC lysis buffer</td>
			<td>BioLegend</td>
			<td>420301</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Trypsin inhibitor</td>
			<td>Worthington Biochemical Corp.</td>
			<td>LS002830</td>
			<td style="width:327px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

intramucosal inoculation of squamous cell carcinoma cells in mice for tumor immune profiling and treatment response assessment

Cabeça e pescoço carcinoma de células escamosas (HNSCC) é uma doença debilitante e mortal com uma elevada prevalência de recidiva e falha do tratamento. Para desenvolver melhor estratégias terapêuticas, compreensão tumor microenvironmental fatores que contribuem para a resistência de tratamento é importante. Um impedimento importante para compreender os mecanismos da doença e melhorar a terapia tem sido a falta de linhas de celulares murino que se assemelham a natureza agressiva e metastática da HNSCCs humanas. Além disso, a maioria dos modelos murino empregar implantes subcutâneos de tumores que não possuem características fisiológicas importantes da região da cabeça e pescoço, incluindo alta densidade vascular e extensa vascularização linfática residente flora da mucosa. O objetivo deste estudo é desenvolver e caracterizar um modelo ortotópico de HNSCC. Nós empregamos duas linhas de células geneticamente distintas de murino e tumores estabelecidas na mucosa bucal de ratos. Otimizamos a métodos de digestão tumor colagenase-baseado para a recuperação ideal de células únicas de tumores estabelecidas. Os dados aqui apresentados mostram que ratos desenvolvem tumores altamente vascularizados que metastatizam para linfonodos regionais. Análise de citometria de massa Multiparamétrico monocelulares mostra a presença de diversas populações imunes com células mieloides, que representa a maioria de todas as células do sistema imunológico. O modelo proposto neste estudo tem aplicações em biologia do câncer, imunologia de tumor e desenvolvimento pré-clínico da novela terapêutica. A semelhança do modelo ortotópico para características clínicas da doença humana irá fornecer uma ferramenta para tradução melhorada e melhorou os resultados dos pacientes.

A avaliação in vitro da proliferação celular de LY2 e B4B8 mostrou que ambas as linhas de célula têm tempos de duplicação similares (21h e 23h, respectivamente). In vivo, ambas as linhas de célula formaram uma massa única, visível e palpável dentro de 1 semana de inoculação (figura 1A). Em camundongos com tumores LY2, o maxilar foi deslocado por 3 semanas devido a carga do tumor (figura 1A). Ratos de controle que n?...

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Intramucosal Inoculation of Squamous Cell Carcinoma Cells in Mice for Tumor Immune Profiling and Treatment Response Assessment

Aqui nós apresentamos um método reprodutível para desenvolver um modelo murino ortotópico de cabeça e pescoço carcinoma de células escamosas. Tumores demonstram clinicamente relevantes características histopatológicas da doença, incluindo necrose, pobre diferenciação, metástases nodais e infiltração imune. Tumor-rolamento ratos desenvolvem sintomas clinicamente relevantes, incluindo disfagia, deslocamento da mandíbula e perda de peso.

Intramucosal inoculação de células de Carcinoma de células escamosas em ratos para perfil imune de Tumor e tratamento avaliação de resposta

Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is a debilitating and deadly disease with a high prevalence of recurrence and treatment failure. To develop ...

Os cânceres da região da cabeça e pescoço estão se tornando cada vez mais prevalentes. No entanto, há uma compreensão limitada do microambiente tumoral e dos mecanismos de resistência ao tratamento nesta região. Esta técnica pode ser usada para recapitular o microambiente nativo de tumores de cabeça/pescoço de forma acessível e produz manifestações clínicas semelhantes às vistas em humanos.Quando a cultura das células tumorais atingir 70% de confluência, lave as células três vezes com PBS frio por lavagem e conecte as células com 0,25% de trippsina suficiente para cobrir a superfície inferior do frasco de cultura. Após três a quatro minutos na incubadora de cultura celular, confirme o desprendimento sob um microscópio leve e neutralize a trippsina com 12 mililitros de meio DMEM F12, suplementado com soro bovino fetal. Transfira a suspensão celular para um tubo cônico de 50 mililitros e misture as células três a quatro vezes por inversão.Em seguida, colete as células por centrifugação e suspenda novamente a pelota em DMEM sem soro e antibióticos em uma única vez 10 a sexta células tumorais por 50 microliters de concentração média no gelo. Imediatamente antes da injeção, misture as células em uma suspensão de células tumorais de um a um com a relação de matriz de membrana no gelo. Carregue uma seringa de 0,5 mililitro equipada com uma agulha de calibre 23 com 100 microliters de células por animal receptor.Coloque as seringas no gelo e confirme a falta de resposta ao aperto do dedo do pé em um rato anestesiado. Em seguida, insira a agulha na região bucal direita ou esquerda através do espaço aberto disponível em ambos os lados da boca mantendo a seringa paralela à região bucal enquanto ela está dentro da cavidade oral para facilitar a injeção do volume total de 100 microliter da suspensão da matriz da membrana do porão celular durante um período de cinco segundos. Mantenha a seringa no lugar por mais cinco segundos para garantir que todo o material tenha sido injetado antes de retirar a seringa suavemente.Os tumores se tornarão grosseiramente visíveis em cerca de uma semana. Uma semana após a injeção, use pinças para medir o comprimento e largura de cada tumor para determinar o volume do tumor de uma a duas vezes por semana. E medir o peso de cada animal para avaliar os efeitos do crescimento do tumor na alimentação.No ponto final experimental apropriado, use tesouras afiadas e fórceps contundentes para fazer uma incisão da pele através da linha média no pescoço. E insira a tesoura suavemente sob a pele cobrindo o tumor para criar bolsões de ar empurrando a tesoura através e para dentro da pele. Uma vez que a pele esteja suficientemente afastada do tumor, extiride os linfonodos drenantes para evitar que o tecido tumoral seja confundido pela presença de tecido linfático e corte as bordas do tumor até que todo o volume seja desconectado.Para processar o tumor para análise a jusante, corte o tumor em pedaços de tamanho de um a dois milímetros e coloque os pedaços em um tubo cônico de 50 mililitros contendo colagenase três, DNAs um e inibidor de trippsina. Depois de incubar as peças tumorais a 37 graus Celsius por 30 minutos, com agitação a cada 10 minutos, adicione 20 mililitros de HBSS ao tubo e passe a suspensão contendo as peças tumorais através de um filtro de nylon de 70 micrômetros. Use um êmbolo de seringa de cinco mililitros para amassar as peças tumorais no coador e adicionar mais 10 mililitros de HBSS através do coador.Gire as células por centrifugação. Suspenda a pelota em dois a três mililitros de tampão de lise de glóbulos vermelhos com tubulação rigorosa, neutralizando a lise com 20 mililitros de HBSS frescos após dois minutos em temperatura ambiente. Em seguida, suspenda novamente as células em um adicional de 20 mililitros de HBSS para outra centrifugação e coe as células através de um filtro de derramamento de 40 micrômetros para remover quaisquer detritos finais da suspensão da célula tumoral.Os tumores LY2 crescem em uma taxa maior, em comparação com os tumores B4B8. E camundongos que exibem deslocamento da mandíbula rapidamente desenvolvem perda de peso, devido à disfagia. A sobrevida mediana em camundongos LY2 também é menos da metade do observado para camundongos portadores de tumor B4B8.A ressonância magnética de camundongos portadores de tumores mostra tumores bem demarcados que se estendem até a camada interna da mucosa bucal, mas não na língua ou em outros órgãos próximos. O exame histológico indica que todos os camundongos portadores de tumor LY2 desenvolvem carcinoma de células escamosas pouco diferenciados, enquanto os camundongos com tumores B4B8 desenvolvem carcinoma celular escamoso moderadamente diferenciado. Todos os camundongos portadores de tumor LY2 também têm necrose histologicamente confirmada, com a maioria demonstrando necrose moderada a grave.Neste experimento representativo, um tumor LY2 foi colhido e processado três semanas após a injeção de células tumorais da região bucal, como demonstrado. As células imunes cd45 positivas representaram 7,3% da população total de células tumorais. As células mielóides mielóides positivos do CD11b representaram 37,8% de todas as células CD45 positivas, a maioria das quais foram determinadas como macrófagos f480 positivos, com pequenas populações de neutrófilos e células supressoras derivadas de mielóide também observadas.As células T constituíam 15,9% da população de células imunes CD45 positivas, das quais 53,4% eram células T reguladoras de CD4 positivos FoxP3. As células assassinas naturais compunham menos de 2% de todas as células CD45 positivas. É importante praticar a injeção para desenvolver confiança e conforto na retenção da agulha e do rato receptor e na exposição da boca do animal.Uma vez realizado o procedimento, experimentos envolvendo a avaliação da resposta tumoral à terapia ou avaliação dos fatores intrínsecos e microambientais do tumor podem ser realizados. Esta técnica abriu caminho na concepção de um ensaio clínico iniciado por pesquisadores, avaliando os efeitos da combinação da radioterapia com a terapia anti-PL1 em pacientes com câncer de cabeça e pescoço.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Murine Experimental Model of Original Tumor Development and Peritoneal Metastasis via Orthotopic Inoculation with Ovarian Carcinoma Cells

Murino Experimental Modelo de desenvolvimento do tumor original e Peritoneal Metástase<em&gt; via</em&gt; Ortotópico injetar células do ovário Carcinoma

Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is associated with a poor prognosis because it shows peritoneal dissemination. To improve the prognosis, it is ...

Pesquisa do câncer

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Um Modelo para Perineural Invasion em cabeça e pescoço carcinoma espinocelular

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

Imuno-histoquímica de fluorescência de quatro cores das subpopulações de células T em amostras de carcinoma de células escamosas humano oftaríngeas fixadas em formalina, arquivadas, formadas por formalina

The four-color fluorescence immunohistochemistry (IHC) technique is a method to quantify cell populations of interest while taking into account their ...

Transplantation of Zebrafish Pediatric Brain Tumors into Immune-competent Hosts for Long-term Study of Tumor Cell Behavior and Drug Response

Transplante de Tumores Cerebrais Pediátricos de Zebrafish em Hospedeiros Imune-competentes para Estudo a Longo Prazo do Comportamento de Células Tumorais e Resposta a Medicamentos

Tumor cell transplantation is an important technique to define the mechanisms controlling cancer cell growth, migration, and host response, as well as to ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

Na Vivo Avaliação de EPR de pH, pO2, Status Redox e as concentrações de fosfato e glutationa no microambiente do Tumor

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Therapy Testing in a Spheroid-based 3D Cell Culture Model for Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Terapia de testes em um modelo de cultura celular 3D baseado no Spheroid para cabeça e pescoço Carcinoma de células escamosas

Current treatment options for advanced and recurrent head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) enclose radiation and chemo-radiation approaches with ...

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabrication of Tongue Extracellular Matrix and Reconstitution of Tongue Squamous Cell Carcinoma In Vitro

Fabricação de língua matriz extracelular e reconstituição da língua Carcinoma de células escamosas In Vitro

In order to construct an effective and realistic model for tongue squamous cell carcinoma (TSCC) in vitro, the methods were created to produce ...

Enrichment and Characterization of the Tumor Immune and Non-immune Microenvironments in Established Subcutaneous Murine Tumors

Enriquecimento e caracterização do microambiente que imune e não imune Tumor em tumores murino subcutâneos estabelecidas

The tumor immune microenvironment (TIME) has recently been recognized as a critical mediator of treatment response in solid tumors, especially for ...

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

Real Time Detection of In Vitro Tumor Cell Apoptosis Induced by CD8+ T Cells to Study Immune Suppressive Functions of Tumor-infiltrating Myeloid Cells

Detecção de tempo real em Vitro Tumor celular apoptose induzida por CD8+ T células para estudar as funções imunológicas supressora de Tumor infiltrando células mieloides