Med Sniper-Cas9 att minimera Off-target effekter av CRISPR-Cas9 utan förlust av på målet aktiviteten Via riktad Evolution

Här presenterar vi ett protokoll för att optimera CRISPR-Cas9 för att uppnå en högre specificitet utan förlust av på målet aktivitet. Vi använder en riktad evolution strategi kallas Sniper-skärmen för att hitta en mutant Cas9 med de önskade egenskaperna. Sniper-Cas9 är kompatibel med trunkerade singel-guide RNAs och leverans i ribonukleoprotein format, välkända strategier för att uppnå högre särdrag.