Name: medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm
Uploaded: 2019-03-01T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

المؤلف يود أن ينوه المختبر من تيمو Strünker للإشراف على ع و DLE أثناء تلك الإقامة في مختبرة. وعلاوة على ذلك، نود أن نشكر زملائنا في إدارة النمو والتكاثر، مستشفى جامعة كوبنهاغن، ريجشوسبيتاليت لمساعدتها بإعداد هذه الاختبارات اثنين. وأيد هذا العمل منح من "صندوق الابتكار" الدانمرك (أرقام المنح 005-2010-3 و 14-2013-4).

جمع وتحليل عينات السائل المنوي البشري في البروتوكولات يتبع المبادئ التوجيهية "اللجنة الأخلاقيات البحثية المنطقة عاصمة" الدانمرك. وحصلت جميع عينات السائل المنوي بعد الموافقة المستنيرة من المانحين المتطوعين. وبعد التسليم، العينات كانت تماما تصبح مجهولة المصدر. للإزعاج تلقي كل جهة مانحة ر...

الإنتاجية المتوسطة Ca2 + إشارات والرزن هو استناداً إلى قياسات للأسفار من كل واحد ميكروويلس تحتوي على حوالي 250,000 الخلايا المنوية. هو المتوسط الإشارات الملتقطة من جميع خلايا الحيوانات المنوية الفردية في البئر. وهكذا تنص المقايسة يتم تغيير أية معلومات مكانية حول مكان على وجه التحديد في ?...

غرض فحوصات اثنين الموصوفة هنا دراسة الآثار على Ca2 +-رد فعل الإشارات وأكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية، كما أظهرت لمركبات متعددة في العديد من المنشورات التي توظف هذه فحوصات،1،2 3،،من45،،من67. Ca2 +-إشارات ورد فعل acrosome هي وظيفة الخلية المنوية البشرية الحيوية إلى وضعها الطبيعي وخصوبة الذكور.
والهدف العام لخلية الحيوانات المنوية البشرية تخصيب البويضة. لتكون قادراً على بنجاح وبشكل طبيعي تخصب البيضة، يجب أن ينظم وظائف الخلية المنوية محكم أثناء رحلة الخلية المنوية من خلال8،الأنثى التناسلي9. وتخضع العديد من وظائف الخلية المنوية عبر داخل الخلية Ca2 +-تركيز [Ca2 +]أنا (مثل الحيوانات المنوية حركية وانزيمية أكروسومي رد فعل)10. أيضا، هو عملية نضج تسمى تأهيلية، مما يجعل الخلية المنوية قادرة على إخصاب البيضة، ينظمها جزئيا [Ca2 +]أنا10. Ca2 +-البثق Ca2 +-ATPase مضخات11 الاحتفاظ إضعاف ما يقرب من 20.000 Ca2 +-التدرج عبر غشاء الخلية المنوية البشرية، مع يستريح [Ca2 +]أنا من 50-100 نانومتر. إذا Ca2 + يسمح بعبور غشاء الخلية (مثلاً، من خلال فتح Ca2 +-قنوات)، يحدث بتدفق إعداد كبيرة من Ca2 + ، مما أدى إلى ارتفاع من [Ca2 +]أنا. ومع ذلك، يحمل أيضا الخلية المنوية Ca داخل الخلية2 +-مخازن، والتي يمكن إصدار Ca2 + و، ولذلك، كما ترتفع تعطي ارتفاع من [Ca2 +]أنا12. من المثير للاهتمام، كل قناة بوساطة Ca2 +-حتى الآن تم العثور على التدفق في خلايا الحيوانات المنوية البشرية تحدث عن طريق كاتسبير (القطالقناة الأيونية جمعية مهندسي البترولrm)، التي يعبر عنها فقط في خلايا الحيوانات المنوية11. في خلايا الحيوانات المنوية البشرية، تنشيط كاتسبير البروجسترون يغاندس الذاتية والبروستاغلاندينات عن طريق يجند متميزة ملزم مواقع13،،من1415، مما أدى إلى كاليفورنيا سريع2 +-تدفق إلى الخلية المنوية. مصدرين رئيسيين قرب البيض توفير مستويات عالية من هذه يغاندس الذاتية. واحد هو سائل جرابي يحتوي على مستويات عالية من البروجسترون16. يتم تحرير السائل الجريبي من المسام ناضجة جنبا إلى جنب مع البيض في التبويض وتختلط مع السائل داخل أوفيدوكتس17. المصدر الرئيسي الآخر هو الخلايا الركام التي تحيط البيض والإفراج عن ارتفاع مستويات البروجسترون والبروستاغلاندينات. البروجسترون الناجمة عن Ca2 +-تدفق في خلايا الحيوانات المنوية قد ثبت للتوسط به نحو9،البيض18ومراقبة الحيوانات المنوية حركية19،20 وتحفز أكروسومي 21من رد الفعل. تحريك لهذه الفردية [Ca2 +[أنا-وظائف الحيوانات المنوية الخاضعة للتنظيم في الترتيب الصحيح وفي الوقت الصحيح أمر حاسم لاخصاب البيض8. وتمشيا مع هذا، دون المستوى الأمثل التي يسببها البروجسترون Ca2 +-تدفق تم العثور عليها لتكون مرتبطة مع انخفاض خصوبة الذكور22،،من2324،25،26 ،27،،من2829 وكاتسبير الفنية ضروري لخصوبة الذكور26،30،،من3132، 33،34،،من3536.
كما خلايا الحيوانات المنوية الوصول إلى البويضة، سلسلة أحداث يجب أن تتم للاخصاب تحدث: 1) خلايا الحيوانات المنوية يجب أن تخترق طبقة الخلايا الركام المحيطة، 2) ربط بيلوسيدا زونا، 3) اكسوسيتوسي محتوى أكروسومال، رد فعل ما يسمى أكروسومي 37, 4) اختراق بيلوسيدا زونا، و 5) تلتحم مع الغشاء البيض لإتمام الإخصاب38. لتكون قادرة على الذهاب من خلال هذه الخطوات وتخصب البيضة، الخلية المنوية أولاً يجب أن يخضع تأهيلية11، الذي يبدأ كما ترك السائل المنوي الذي يحتوي على "ديكاباسيتاتينج" عوامل39 خلايا الحيوانات المنوية وتسبح في السوائل للإناث المسالك التناسلية مع مستويات عالية من بيكربونات والزلال37. تأهيلية يجعل خلايا الحيوانات المنوية قادرة على الخضوع هايبراكتيفيشن، شكلاً من أشكال حركية مع ضربة قوية السوط، و رد فعل acrosome37. حركية هايبراكتيفاتيد مطلوب لتغلغل zona pellucida40، وأكروسومي يحتوي على الإنزيمات هيدروليكي المختلفة أن تساعد هذه العملية اختراق41. بالإضافة إلى ذلك، يجعل رد فعل acrosome خلايا الحيوانات المنوية القادرة على الصمامات مع البيض بتعريض بروتينات الغشاء محددة على سطح الحيوانات المنوية اللازمة للحيوانات المنوية-البيض الانصهار42. ونتيجة لذلك، القدرة على الخضوع لرد فعل هايبراكتيفيشن وأكروسومي على حد سواء اللازمة للاخصاب الناجح من40،البيض42. خلافا لما شهد للماوس الخلايا المنوية43،،من4445، يمكن ربط الخلايا المنوية البشرية إلا أن أكروسومي سليمة zona pellucida46. عندما خلايا الحيوانات المنوية البشرية بد أن بيلوسيدا زونا لديهم الخضوع لرد فعل أكروسومي لاختراق zona pellucida41 ولفضح بروتينات الغشاء محددة مطلوبة للانصهار مع البيض38. وهكذا توقيت رد الفعل أكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية أمر حاسم للتسميد بحيث تحدث.
كما هو موضح أعلاه، Ca2 +-مما يشير إلى أمر حيوي للحيوانات المنوية طبيعية الخلية الدالة8، وأنها، لذلك، أهمية كبيرة تكون قادرة على شاشة إعداد كبيرة من المركبات للآثار على Ca2 +-الإشارات في خلايا الحيوانات المنوية البشرية. وبالمثل، يمكن اختراق بيلوسيدا زونا خلايا الحيوانات المنوية إلا البشرية التي يخضع لها رد فعل أكروسومي في الوقت المناسب والمكان وتسميد46،البيض47، كما أنها ذات أهمية كبيرة لتكون قادرة على اختبار المركبات لقدرتها على تؤثر على رد فعل أكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية. وتحقيقا لهذه الغاية، يتم وصف اثنين الفرز الإنتاجية المتوسطة فحوصات: 1) تحليل للآثار على Ca2 +-الإشارات في خلايا الحيوانات المنوية البشرية، ومقايسة 2) لقدرته على الحث على رد فعل أكروسومي في خلايا الحيوانات المنوية البشرية.
هو مقايسة 1 إنتاجية متوسطة Ca2 +-يشير التحليل. هذا الأسلوب القائم على قارئ لوحة fluorescence ترصد التغيرات في الأسفار كدالة للزمن في آبار متعددة في وقت واحد. Ca2 +-صبغة الفلورسنت الحساسة، فلوو-4 قد أ كد ل Ca2 +≈ 335 نيوتن متر وهو خلية بيرمينت على شكل إستر صباحا (أسيتوكسيميثيل). استخدام فلوو-4، من الممكن لقياس التغيرات في [Ca2 +[i مع مرور الوقت، وبعد إضافة مركبات للاهتمام بخلايا الحيوانات المنوية. المقايسة وضع المختبر من تيمو Strünker في 201113 واستخدم منذ ذلك الحين في عدة دراسات لمركبات الشاشة للآثار على Ca2 +-إشارات في الحيوانات المنوية البشرية1،2،3، 4،5. كما تم استخدام أسلوب مشابه لفحص المخدرات متعددة المرشحين48. وبالإضافة إلى ذلك، هذا التحليل أيضا مفيدة لتقييم طريقة العمل1،2،3،،من45، منحنيات الاستجابة للجرعة1، الدوائي 2،3،،من45وتثبيط المنافسة1،2، والجمع1،2، و التعاضد3 من المركبات ذات الأهمية.
المقايسة 2 مقايسة رد فعل acrosome الإنتاجية المتوسطة. هذا الأسلوب القائم على سيتوميتير صورة تدابير كمية قابلة للتطبيق acrosome رد فعل الخلايا المنوية في عينة، استخدام الأصباغ الفلورية ثلاثة: يوديد propidium (PI)، إلى جانب فيتك يكتين بسام بيسوم (فيتك-PSA)، و 33342 هويشت. تم تعديله من أسلوب يستند إلى قياس تدفق مماثل من قبل زوبينو et al.49 الفحص وقد استخدمت في عدة دراسات6،7. أما بالنسبة Ca2 +-يشير التحليل، يمكن أيضا استخدام هذا الفحص رد فعل أكروسومي لتقييم منحنيات الاستجابة للجرعة وتثبيط، والجمع، والتآزر من المركبات ذات الأهمية.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m pore filter</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>296-4545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L measuring cylinder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>3662-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4 and 2 mL plastic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>30120086 and 0030120094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-channel pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4861000813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 multi-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One, Germany</td>
			<td>781096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 and 50 mL platic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>0030122151 and 30122178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A2-slide</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>942-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic repeater pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4987000010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean wide-mouthed plastic container for semen sample</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-coupled lectin of Pisum sativum (FITC-PSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>L0770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluo-4 AM</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>F14201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLUOstar OMEGA fluorescence microplate reader</td>
			<td>BMG Labtech, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose anhydrous</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst-33342</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin (HSA)</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>For addition to HTF+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilizing solution containing 0.6 M NaHCO3 and 0.37% (v/v) formaldehyde in distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Lactate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NC-3000 image cytometer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>970-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes and piptting tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack for placing 50 mL plastic tubes in 45&#176; angle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S100 buffer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP1-cassette</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>941-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric flasks of appropriate sizes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm

Ca2 +-مما يشير إلى أمر ضروري لوظيفة الخلية المنوية العادية وخصوبة الذكور. وبالمثل، رد فعل acrosome حيوية بالنسبة لقدرة خلية الحيوانات المنوية البشرية لاختراق بيلوسيدا زونا وتخصب البويضة. ولذا أهمية كبيرة لاختبار المركبات (مثلاً، المواد الكيميائية البيئية أو المرشحين المخدرات) لتأثيرها على Ca2 +-رد فعل الإشارات وأكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية أما إلى دراسة الآثار السلبية المحتملة على وظيفة الخلية المنوية البشرية أو للتحقيق في دور محتمل كوسائل منع الحمل. ويرد هنا، هما الإنتاجية المتوسطة فحوصات: 1) تحليل القائم على الأسفار لتقييم الآثار على Ca2 +-إشارات في الحيوانات المنوية البشرية، ومقايسة سيتوميتريك صورة 2) لتقييم رد الفعل أكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية. يمكن استخدام هذه الاختبارات لفحص عدد كبير من المركبات للآثار على Ca2 +-رد فعل الإشارات وأكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية. وعلاوة على ذلك، يمكن استخدامها في فحوصات إنشاء منحنيات الاستجابة للجرعة محددة للغاية للمركبات الفردية، وتحديد الجمع/التآزر المحتملة لمركبات اثنين أو أكثر، ودراسة الوضع الدوائي للعمل عن طريق تثبيط المنافسة تجارب مع مثبطات كاتسبير.

يؤدي الممثل من تجربة اختبار تأثير مركبات 4 (ألف، باء، جيم ودال) جنبا إلى جنب مع إيجابية (البروجسترون) والسلبية (المخزن) السيطرة على [Ca2 +[i في الحيوانات المنوية البشرية باستخدام متوسط الإنتاجية Ca2 +-إشارات التحليل يتبين في الشكل 4a. في <strong class="...

Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

الإنتاجية المتوسطة فحص فحوصات لتقييم الآثار على Ca2 +-إشارات ورد فعل أكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية

هنا، واثنين من فحوصات الإنتاجية المتوسطة لتقييم الآثار على Ca2 +-يرد وصف رد فعل الإشارات وأكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية. يمكن استخدام هذه الاختبارات للشاشة بسرعة وسهولة كميات كبيرة من مركبات للآثار على Ca2 +-رد فعل الإشارات وأكروسومي في الحيوانات المنوية البشرية.

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...

يمكن استخدام مقايساتنا لاختبار المركبات لآثارها على وظيفة خلايا الحيوانات المنوية البشرية. على وجه التحديد، يمكن استخدام هذه الطرق بسرعة وسهولة فحص أعداد كبيرة من المركبات لآثارها على إشارات الكالسيوم والتفاعل acrosome في خلايا الحيوانات المنوية البشرية. و سوف تسهل العروض التوضيحية البصرية لهذه الطريقة على الآخرين إعداد تجارب مماثلة في مختبراتهم الخاصة.تبدأ من خلال وضع واحد 50 ملليلتر أنبوب لكل ملليلتر واحد من عينة من السائل المنوي الخام في رف أنبوب في زاوية 45 درجة وإضافة أربعة ملليلتر من 37 درجة مئوية السائل الأنبوبي الإنسان أو HTF المتوسطة الإيجابية لكل أنبوب. بعد ذلك ، بعناية ماصة واحدة ملليلتر من عينة السائل إلى الجزء السفلي من كل أنبوب ووضع الأنابيب في 37 درجة مئوية لمدة ساعة واحدة. في نهاية الحضانة، استخدم تلميح ماصة معدلة عقد في زاوية 45 درجة لنقل بلطف أكبر قدر من الجزء العلوي من خلية الحيوانات المنوية motile التي تحتوي على HTF المتوسطة الإيجابية ممكن في أنبوب جديد 15 ملليلتر البلاستيك.لحساب الخلايا المنوية التي تم جمعها، تمييع 20 ميكرولتر aliquot إلى عامل من 10، 20، 30، 50، أو 90 في المخزن المؤقت S100 في أسفل جولة أنبوب ملليلتر وفقا للتركيز المتوقع. دوامة خلايا الحيوانات المنوية المخففة لمدة 10 ثوان في 700 دوران في الدقيقة الواحدة. بعد ذلك ، غمر كاسيت SP1 في العينة والاكتئاب تماما المكبس الأبيض لpireate aliquot من العينة في الكاسيت.ثم ضع الكاسيت في علبة قياس الخلايا الصورة وتشغيل PI ملطة الحيوانات المنوية البشرية الخلية المقايسة وفقا لعامل التخفيف تطبيقها. لقياس التغيرات في تركيز الكالسيوم الحر داخل الخلايا، الماصات بلطف عينة الحيوانات المنوية صعودا وهبوطا مرة واحدة واستخدام ماصة مكرر التلقائي إلى aliquot 50 ميكرولترات من خلايا الحيوانات المنوية الملطخة بالفلوروهور إلى 24 آبار من صف واحد من لوحة بئر 384 ميكرو. ضع لوحة البئر الصغيرة في قارئ لوحة الفلوريسين في 30 درجة مئوية وحدد البروتوكول المناسب لفلوروفور.حدد بئر في صف من خلايا الحيوانات المنوية وضبط كسب إلى قيمة الهدف من 20٪ ثم بدء القياس. بعد 10 دورات خط الأساس، وقفة التجربة وإخراج الدرج مع لوحة بئر ميكرو. باستخدام ماصة 12 قناة، بسرعة إضافة 25 ميكرولترات من الحلول المعدة من المركبات والضوابط ذات الاهتمام في 12 آبار مكررة في الصف والعودة على الفور لوحة للقارئ لمواصلة القياس في أسرع وقت ممكن.أي تغييرات في الفلوريسك ردا على إضافة المركبات أو الضوابط سيتم التقاطها من قبل الصك. لتحليل التفاعل الاجناض ، بعد احتضان خلايا الحيوانات المنوية ذات القدرات مع الأصباغ الفلورية المناسبة أو المركبات أو الضوابط ، اخلط العينات عن طريق الأنابيب وإضافة 50 ميكرولترات من كل عينة اختبار إلى 100 ميكرولترات من محلول شل الحركة. اخلط العينات مرة أخرى ثم قم بتحميل الغرف من شريحة A2 واحدة لكل عينة مع ما يقرب من 30 ميكرولترات من العينة لكل غرفة.ثم ضع الشريحة الأولى المحملة على علبة مقياس صوت الصورة. حدد بروتوكول FlexiCyte واضغط تشغيل. هنا نتائج تمثيلية من تجربة اختبار تأثير أربعة مركبات، ويمكن ملاحظة عنصر تحكم البروجسترون إيجابية والتحكم العازلة السلبية باستخدام متوسط الإنتاجية الكالسيوم إشارة التحاليل كما هو موضح.في هذا الرسم البياني، يتم عرض منحنى استجابة جرعة من البروجسترون المستمدة من التغيرات في نسبة الذروة في تركيز الكالسيوم الحر داخل الخلايا الناجم عن تركيز مخففة تسلسليا من البروجسترون. توضح هذه البيانات آثار واحدة سلبية أو واحدة من اثنين من الضوابط الإيجابية على تحريض رد فعل acrosome في خلايا الحيوانات المنوية البشرية مكثفة في متوسطة الإنتاجية acrosome تحليل التفاعل. ولتجنب تفويت قمم الإشارات المستحثة، من الأهمية بمكان إضافة المواد الكيميائية بسرعة إلى الآبار المتماثلة ومواصلة القياس فوراً بعد ذلك.عن طريق تغيير نوع من الفلوروفور والأصباغ، يمكن بسهولة أن يتم تعديل لدينا مقايسات للإجابة على الأسئلة العلمية المختلفة. وقد استخدمت هذه المقايسات بالفعل في العديد من الدراسات لاختبار مجموعات كبيرة من المركبات لآثارها على وظيفة الحيوانات المنوية البشرية.

Research

JoVE Journal

Biology

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

رصد تأثيرات الوخز بالإبر في الدماغ بواسطة الرنين المغناطيسي الوظيفي الإنسان

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

مضان في الموقع التهجين (FISH) البروتوكول في الحيوانات المنوية البشرية

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

تقنيات التصوير كاليفورنيا 2 + في اشارة الى الحيوانات المنوية البشرية

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction

نوعان من فحوصات الكشف عن الضفدع Chemoattraction الحيوانات المنوية

Sperm chemoattraction in invertebrates can be sufficiently robust that one can place a pipette containing the attractive peptide into a sperm suspension ...

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

تصور كا الأوعية الدموية 2 + اشارة سببها ريوس المشتقة نظير الصماوي

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

Mapping the After-effects of Theta Burst Stimulation on the Human Auditory Cortex with Functional Imaging

تعيين آثار ما بعد من ثيتا انفجار تحفيز على القشرة السمعية الإنسان مع التصوير الوظيفي

Auditory cortex pertains to the processing of sound, which is at the basis of speech or music-related processing1. However, despite considerable recent ...

Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes

فحوصات السمية للاختبار تأثيرات جينية من المخدرات للتنمية، الخصوبة والوراثة من الملاريا البعوض

Insecticidal resistance poses a major problem for malaria control programs. Mosquitoes adapt to a wide range of changes in the environment quickly, making ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

طريقة لتقييم الآثار المترتبة على مجموعة من موجات وشدة الأحمر / الأشعة تحت الحمراء القريبة العلاج بالضوء على الإجهاد التأكسدي<em&gt; في المختبر</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

الكميات من البطانية الإلتصاق الخليوي<em&gt; في المختبر</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

الفجوة صلي بين الخلايا الاتصالات: العلامات البيولوجية الوظيفية لتقييم التأثيرات السلبية للالسميات والسموم، والصحة فوائد المنتجات الطبيعية

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...