Name: medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm
Uploaded: 2019-03-01T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

De auteurs wil erkennen het lab van Timo Strünker voor toezicht op de AR en DLE tijdens hun verblijf bij zijn lab. Voorts bedank we onze collega's van het departement van groei en voortplanting, Copenhagen University Hospital, Rigshospitalet voor hun hulp bij het opzetten van deze twee testen. Dit werk werd gesteund door subsidies van het innovatiefonds Denemarken (subsidie cijfers 005-2010-3 en 14-2013-4).

De verzameling en analyse van menselijk sperma monsters in de protocollen volgt de richtsnoeren van de ethische commissie van onderzoek voor de regio van de hoofdstad van Denemarken. Alle sperma monsters zijn verkregen na de geïnformeerde toestemming van vrijwillige donoren. Na de levering, de monsters werden volledig anoniem gemaakt. Voor hun ongemak ontvangen elke donor een vergoeding van 500 DKK (ongeveer $75 dollar) per monster. De monsters werden geanalyseerd op de dag van levering en vervolgens vernietigd onmiddel...

De middellange doorvoer Ca2 + signalering assay is gebaseerd op metingen van de fluorescentie van elk één microwells dat bevat ongeveer 250.000 zaadcellen. Het vastgelegde signaal is gemiddeld van alle individuele zaadcellen in de put. De bepaling vormt dus dat geen ruimtelijke informatie over waar u specifiek in de spermacel [Ca2 +]ik wordt gewijzigd, in hoe groot een deel van de zaadcellen een verandering in [Ca2 +]i vindt plaats, of hoe heterogene het antwoord i...

Het doel van de twee tests die hier beschreven is het onderzoeken van de effecten op Ca2 +-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma, zoals is aangetoond voor meerdere verbindingen in diverse publicaties met deze testen1,2, 3,4,,5,,6,7. CA2 +-signalering en de Acrosoom reactie zijn beide essentieel voor normale menselijke spermacel functie en mannelijke vruchtbaarheid.
Het algemene doel van een menselijke zaadcel is om te bevruchten het ei. Om te kunnen met succes en natuurlijk bevruchten het ei, moeten de functies van de spermacel strak worden geregeld tijdens de reis van de spermacel tot en met het vrouwelijke voortplantingssysteem8,9. Veel van de functies van de spermacel worden geregeld via de intracellulaire Ca2 +-concentratie [Ca2 +]ik (bijvoorbeeld een sperma motiliteit, chemotaxis en Acrosoom reactie)10. Ook is een rijpingsproces genaamd rechtsbevoegdheid, waardoor de spermacel kan de eicel bevruchten, deels gereguleerd door [Ca2 +]ik10. CA2 +-diepte Ca2 +-ATPase pompen11 handhaven een ongeveer 20.000 vouw Ca2 +-gradiënt over het menselijk sperma celmembraan, met een rust [Ca2 +]ik van 50-100 nM. Als Ca2 + is toegestaan te steken van de celmembraan (bijvoorbeeld door de opening van Ca2 +-kanalen), een flinke toestroom van Ca2 + optreedt, die aanleiding geven tot een hoogte van [Ca2 +]ik. De spermacel draagt echter ook intracellulaire Ca2 +-winkels, die Ca2 vrijkomen kunnen + en, derhalve, ook geven een hoogte van [Ca2 +]i12stijgen. Interessant is dat alle kanaal-gemedieerde Ca2 +-instroom in menselijke zaadcellen tot nu toe is gebleken dat optreden via CatSper (katIonische kanaal van Sperm), die alleen wordt uitgedrukt in zaadcellen11. In menselijke zaadcellen, CatSper wordt geactiveerd door de endogene liganden progesteron en prostaglandines via verschillende ligand bindend sites13,14,15, leiden tot een snelle Ca2 +-instroom in de spermacel. Twee hoofdbronnen in de buurt van het ei bevatten hoge niveaus van deze endogene liganden. Een is de folliculaire vloeistof die hoge niveaus van progesteron16 bevat. De folliculaire vloeistof wordt vrijgelaten uit de rijpe follikels samen met de eicel bij ovulatie en mixen met de vloeistof binnen de oviducts17. De andere belangrijkste bron is de cumulus cellen die omringen het ei en vrijgeven van hoge niveaus van progesteron en prostaglandines. De progesteron geïnduceerde Ca2 +-instroom in de zaadcellen heeft aangetoond dat bemiddelen chemotaxis naar de ei9,18,19,20 van de beweeglijkheid van de zaadcellen bepalen en stimuleren het Acrosoom reactie21. Triggering van deze individuele [Ca2 +]ik-gereglementeerde sperma functies in de juiste volgorde en op het juiste moment is van cruciaal belang voor de bevruchting van de eicel8. In overeenstemming met deze, een suboptimaal progesteron geïnduceerde Ca2 +-instroom is gebleken dat geassocieerd met verminderde mannelijke vruchtbaarheid22,23,24,25,26 ,27,28,29 en functionele CatSper is essentieel voor de mannelijke vruchtbaarheid26,30,31,32, 33,34,35,,36.
Als de zaadcellen de eicel te bereiken, een opeenvolging van gebeurtenissen moet plaatsvinden voor bevruchting optreden: 1) de zaadcellen moeten doordringen in de omringende cellaag van cumulus, 2) binden aan de zona zitten, 3) de acrosomal inhoud, de zogenaamde Acrosoom reactie exocytose 37, 4) dringen de zona zitten, en 5) zekering met het membraan van de eicel te voltooien bevruchting38. Om te kunnen deze stappen doorlopen en bevruchten het ei, moet de spermacel eerst rechtsbevoegdheid11, die begint als de zaadcellen verlaten de zaadvocht vloeistof met "decapacitating" factoren39 en in het vocht van de vrouw zwemmen ondergaan voortplantingssysteem met hoge niveaus van bicarbonaat en albumine37. Rechtsbevoegdheid maakt kundig voor hyperactivering, een vorm van beweeglijkheid met een krachtige gewonnen van het flagellum en Acrosoom reactie37ondergaan de zaadcellen. De beweeglijkheid van de Hyperactivated is vereist voor de penetratie van de zona zitten40, en de Acrosoom bevat verschillende hydrolytische enzymen die deze penetratie proces41 helpen. Bovendien maakt de Acrosoom reactie de zaadcellen kunnen versmelten met het ei door specifieke membraaneiwitten op het sperma oppervlak nodig voor sperma-ei fusion42bloot te leggen. Bijgevolg, het vermogen om te hyperactivering en Acrosoom reactie ondergaan zijn beide nodig zijn voor een succesvolle bevruchting van de eicel40,42. In tegenstelling tot wat is gezien voor muis zaadcellen43,44,45, kunt alleen menselijk sperma cellen die Acrosoom-intacte binden aan de zona zitten46. Wanneer de menselijke zaadcellen zijn gebonden aan de zona zitten die zij moeten ondergaan de Acrosoom reactie te doordringen van de zona zitten41 zowel specifieke membraaneiwitten die nodig zijn voor de fusie met de ei-38bloot te stellen. De timing van de Acrosoom reactie in het menselijk sperma is dus essentieel voor bevruchting optreden.
Zoals hierboven beschreven, Ca2 +-signalering is van vitaal belang voor sperma van normale cel functie8, en het is daarom van groot belang voor zitten kundig voor scherm groot aantal compounds voor effecten op Ca2 +-signalering in menselijke zaadcellen. Op dezelfde manier zoals alleen menselijke zaadcellen die ondergaan Acrosoom reactie op de juiste tijd en plaats kan doordringen van de zona zitten en het ei46,47 bevruchten, is het ook van groot belang om het testen van de verbindingen om hun vermogen om te kunnen invloed op de reactie van de Acrosoom in menselijk sperma. Te dien einde twee medium-throughput screening tests worden beschreven: 1) een bepaling voor effecten op Ca2 +-signalering in menselijke zaadcellen, en 2) een bepaling voor de capaciteit voor het opwekken van Acrosoom reactie in menselijke zaadcellen.
Assay 1 is een medium-doorvoer Ca2 +-signalering assay. Deze fluorescentie plaat lezer gebaseerde techniek registreert wijzigingen in fluorescentie als functie van de tijd gelijktijdig in meerdere wells. De Ca2 +-gevoelige fluorescente kleurstof, Fluo-4 heeft een Kd voor Ca2 +≈ 335 nM en is cel-permeant in de vorm van de ester AM (acetoxymethyl). Met behulp van Fluo-4, is het mogelijk voor het meten van veranderingen in [Ca2 +]i na verloop van tijd en na toevoeging van verbindingen van belang zijn voor de zaadcellen. De test werd ontwikkeld door het laboratorium van Timo Strünker in 201113 en wordt sindsdien gebruikt in verschillende studies naar scherm verbindingen voor effecten op Ca2 +-signalering in menselijk sperma1,2,3, 4,5. Ook is een gelijkaardige methode gebruikt om het scherm van meerdere drugs kandidaten48. Bovendien, is deze test ook nuttig voor de beoordeling van de farmacologische modus van actie1,2,3,4,5, dosis / respons-curven1, 2,3,4,5, competitieve remming1,2, additiviteit1,2en synergie3 van verbindingen van belang.
Assay 2 is een medium-doorvoer Acrosoom reactie test. Deze afbeelding cytometer gebaseerde techniek meet de hoeveelheid levensvatbare Acrosoom reageerde zaadcellen in een monster met behulp van drie fluorescente kleurstoffen: propidium jodide (PI), FITC-coupled lectine van Pisum sativum (FITC-PSA) en Hoechst-33342. De bepaling van een gelijkaardige stroom cytometry gebaseerde methode is bewerkt door Zoppino et al.49 en is gebruikt in diverse studies6,7. Wat betreft de Ca2 +-signalering assay, deze Acrosoom reactie test kan ook worden gebruikt om te beoordelen van de dosis / respons-curven, remming, additiviteit en synergie van stoffen van belang.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m pore filter</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>296-4545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L measuring cylinder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>3662-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4 and 2 mL plastic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>30120086 and 0030120094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-channel pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4861000813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 multi-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One, Germany</td>
			<td>781096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 and 50 mL platic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>0030122151 and 30122178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A2-slide</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>942-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic repeater pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4987000010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean wide-mouthed plastic container for semen sample</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-coupled lectin of Pisum sativum (FITC-PSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>L0770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluo-4 AM</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>F14201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLUOstar OMEGA fluorescence microplate reader</td>
			<td>BMG Labtech, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose anhydrous</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst-33342</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin (HSA)</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>For addition to HTF+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilizing solution containing 0.6 M NaHCO3 and 0.37% (v/v) formaldehyde in distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Lactate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NC-3000 image cytometer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>970-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes and piptting tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack for placing 50 mL plastic tubes in 45&#176; angle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S100 buffer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP1-cassette</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>941-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric flasks of appropriate sizes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm

CA2 +-signalering is essentieel voor normale spermacel functie en mannelijke vruchtbaarheid. Ook is de Acrosoom reactie essentieel voor het vermogen van een menselijke spermacel bevruchten van de eicel te doordringen van de zona zitten. Het is daarom van groot belang voor het testen van de verbindingen (bijvoorbeeld milieu chemicaliën of drugkandidaten) voor hun effect op Ca2 +-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma te onderzoeken van de potentiële schadelijke effecten op de menselijke spermacel functie of om te onderzoeken een mogelijke rol als een voorbehoedsmiddel. Hier twee medium-throughput assays worden beschreven: 1) een fluorescentie gebaseerde assay voor de beoordeling van effecten op Ca2 +-signalering in menselijk sperma, en 2) een kwantitatieve analyse van beeld, cytometrische voor beoordeling van Acrosoom reactie in het menselijk sperma. Deze tests kunnen worden gebruikt om een groot aantal compounds voor effecten op Ca2 +scherm-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma. Bovendien, de testen te genereren zeer specifieke dosis / respons-curven van afzonderlijke verbindingen, potentiële additiviteit/synergie voor twee of meer verbindingen bepalen, en te bestuderen van het farmacologische werkingsmechanisme via competitieve remming kunnen worden gebruikt experimenten met CatSper-remmers.

Vertegenwoordiger resultaten van een experiment dat het testen van het effect van 4 verbindingen (A, B, C en D) samen met een positieve (progesteron) en negatieve (buffer) controle op [Ca2 +]i in menselijk sperma met behulp van de middellange-doorvoer Ca2 +-signalering bepaling kan worden gezien in figuur 4a. In figuur 4b, wordt een dosis-responscurve van progesteron weergegeven, die was afgeleid ...

Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Medium-throughput Screening tests voor de beoordeling van effecten op Ca2 +-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma

Hier, twee medium-throughput assays voor de beoordeling van effecten op Ca2 +-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma worden beschreven. Deze tests kunnen worden gebruikt om te sluiten snel en eenvoudig grote hoeveelheden compounds voor effecten op Ca2 +-signalering en Acrosoom reactie in het menselijk sperma.

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...

Onze tests kunnen worden gebruikt om verbindingen te testen op hun effecten op de menselijke spermacelfunctie. Specifiek, kunnen deze methodes worden gebruikt om grote aantallen samenstellingen snel en gemakkelijk voor hun gevolgen op het signaleren van calcium en acrosome reactie in menselijke spermacellen te screenen. Visuele demonstraties van deze methode zal het gemakkelijker maken voor anderen om het opzetten van soortgelijke experimenten in hun eigen laboratoria.Begin met het plaatsen van een 50 milliliter buis per een milliliter van ruwe sperma monster in een buis rek in een hoek van 45 graden en het toevoegen van vier milliliter van 37 graden Celsius Human Tubal Fluid of HTF positief medium aan elke buis. Vervolgens voorzichtig pipette een milliliter van vloeibaar sperma monster aan de onderkant van elke buis en plaats de buizen op 37 graden Celsius voor een uur. Gebruik aan het einde van de incubatie een aangepaste pipettip die in een hoek van 45 graden wordt gehouden om zo veel van de bovenste fractie van de motile spermacel met HTF-positief medium zo veel mogelijk over te brengen in een nieuwe plastic buis van 15 milliliter.Om de verzamelde spermacellen te tellen, verdun een 20 microliter aliquot tot een factor van 10, 20, 30, 50, of 90 in S100 buffer in een ronde bodem twee milliliter buis volgens de verwachte concentratie. Vortex de verdunde spermacellen gedurende 10 seconden bij 700 rotaties per minuut. Vervolgens dompel je een SP1-cassette onder in het monster en druk je de witte zuiger volledig in om een aliquot van het monster in de cassette te dompelen.Plaats vervolgens de cassette in de image cytometerlade en voer de PI bevlekte menselijke zaadceltest uit volgens de toegepaste verdunningsfactor. Om veranderingen in de vrije intracellulaire calciumconcentratie te meten, pipette het spermamonster een keer op en neer en gebruik een automatische repeaterpipet om 50 microliters fluorofofoorcellen te aliquot tot 24 putten van een rij van een 384 microputplaat. Plaats de microputplaat in de fluorescentieplaatlezer op 30 graden Celsius en selecteer het juiste protocol voor fluorofoof.Selecteer een put in de rij spermacellen en pas de winst aan op een doelwaarde van 20%Start vervolgens met de meting. Na 10 basislijncycli pauzeert u het experiment en werpt u de lade uit met de microputplaat. Met behulp van een 12-kanaals pipet, snel 25 microliters van de voorbereide oplossingen van verbindingen en controles van belang in de 12 dubbele putten in de rij en onmiddellijk terug de plaat aan de lezer om de meting zo snel mogelijk voort te zetten.Eventuele veranderingen in fluorescentie in reactie op de toevoeging van de verbindingen of controles zullen worden vastgelegd door het instrument. Voor acrosome reactieanalyse, na het uitbroeden van de capacitated spermacellen met de aangewezen fluorescerende kleurstoffen, samenstellingen of controles, meng de steekproeven door pipetting en voeg 50 microliter van elk testmonster aan 100 microliter van immobilisatieoplossing toe. Meng de monsters opnieuw en laad de kamers van één A2-dia per monster met ongeveer 30 microliter monster per kamer.Plaats vervolgens de eerste geladen dia op de lade van de afbeelding cytometer. Selecteer het FlexiCyte-protocol en druk op Uitvoeren. Hier representatieve resultaten van een experiment testen van het effect van vier verbindingen, een positieve progesteron controle en een negatieve buffer controle met behulp van de gemiddelde doorvoer calcium signalering test als aangetoond kan worden waargenomen.In deze grafiek wordt een dosisresponscurve van progesteron weergegeven die is afgeleid van piekprocenten veranderingen in de intracellulaire vrije calciumconcentratie veroorzaakt door serieel verdunde concentratie progesteron. Deze gegevens illustreren de effecten van een negatieve of een van de twee positieve controles op de inductie van een acrosome reactie in capacitated menselijke spermacellen in een medium doorvoer acrosome reactietest. Om te voorkomen dat de pieken van de geïnduceerde signalen ontbreken, is het van cruciaal belang om de chemicaliën snel toe te voegen aan de replicerende putten en de meting daarna onmiddellijk voort te zetten.Door het type fluoroforen en kleurstoffen te veranderen, kunnen onze tests eenvoudig worden aangepast om verschillende wetenschappelijke vragen te beantwoorden. Deze tests zijn al gebruikt in verschillende studies om grote groepen verbindingen te testen op hun effecten op de menselijke spermafunctie.

Research

JoVE Journal

Biology

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

Monitoring Acupunctuur effecten op de menselijke hersenen door fMRI

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

Fluorescentie In situ Hybridisatie (FISH) Protocol in menselijk sperma

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Technieken voor Imaging Ca 2 + Signalering in Human Sperm

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction

Twee Soorten Assays voor het detecteren van Kikker Sperma chemoattractie

Sperm chemoattraction in invertebrates can be sufficiently robust that one can place a pipette containing the attractive peptide into a sperm suspension ...

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualisatie van vasculaire Ca 2 + Signalering Geactiveerd door Paracriene Derived ROS

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

Mapping the After-effects of Theta Burst Stimulation on the Human Auditory Cortex with Functional Imaging

Het in kaart brengen van de na-effecten van Theta Burst stimulatie over de menselijke auditieve cortex met Functionele Beeldvorming

Auditory cortex pertains to the processing of sound, which is at the basis of speech or music-related processing1. However, despite considerable recent ...

Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes

Toxicologische Testen voor Testing Effecten van een epigenetische Drug ontwikkelingssamenwerking, Vruchtbaarheid en Survivorship van malariamuggen

Insecticidal resistance poses a major problem for malaria control programs. Mosquitoes adapt to a wide range of changes in the environment quickly, making ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Methode voor de evaluatie van de effecten van een golflengtebereik en intensiteiten van Rood / nabij-infrarood Lichttherapie op oxidatieve stress<em&gt; In Vitro</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Kwantificering van endotheelcellen Hechtvermogen<em&gt; In Vitro</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

Gap Junctionele intercellulaire communicatie: Een functionele Biomarker om de negatieve gevolgen van de Giftige stoffen en toxines te beoordelen, en gezondheidsvoordelen van Natural Products

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...