Name: medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm
Uploaded: 2019-03-01T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

המחברים רוצה להכיר את המעבדה של טימו Strünker על הפיקוח של AR, הזוהמה שלכם במהלך השהייה שלהם במעבדה שלו. יתר על כן, ברצוננו להודות עמיתינו המחלקה של גדילה, רבייה, בית החולים האוניברסיטאי קופנהגן, Rigshospitalet לסיוע שלהם עם הגדרת מבחני שני אלה. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מדנמרק חדשנות קרן (גרנט מספרים 005-2010-3 ו- 14-2013-4).

איסוף וניתוח של דגימות זרע אנושי של הפרוטוקולים עוקב אחר הקווים המנחים של ועדת האתיקה במחקר של אזור הבירה של דנמרק. כל דגימות זרע הושגו אחרי מדעת מתורמים מתנדבים. לאחר הלידה, הדגימות היו מלא תשוחררנה. על הנוחות שלהם כל תורם קיבל תשלום של 500 DKK (בערך $75 דולר ארה ב) עבור כל דגימה. הדגימות היו נות?...

התפוקה בינוני Ca2 + איתות assay מבוסס על מדידות של זריחה של יחיד microwells המכיל תאי זרע וכ-250,000. האות שנתפסו בממוצע של כל תאי זרע בודדים בתוך הבאר. וזמינותו ובכך מספק שמידע מרחבי לגבי איפה בפרט תא הזרע [Ca2 +]אני משתנה, כמה גדול שיעור של תאי הזרע בשינוי [Ca2 +]אני לוקח מקום או ...

מטרת מבחני שני המתוארים כאן היא לבחון את ההשפעות על Ca2 +-התגובה באיתות, acrosome זרע אנושי, כפי שהוצגה עבור מספר תרכובות מספר פרסומים העסקת אלו מבחני1,2, 3,4,5,6,7. Ca2 +-איתות התגובה acrosome הם פונקציה חיונית לחיי שגרה תא הזרע האנושי והן פוריות הגבר.
המטרה הכוללת של תא זרע אנושי הוא כדי להפרות את הביצית. כדי להיות מסוגל בהצלחה וישר להפרות את הביצית, הפונקציות של תא הזרע חייב להיות מוסדר בחוזקה במהלך המסע של תא הזרע דרך באיברי הרבייה הנקביים8,9. מהפונקציות תא הזרע מוסדרים באמצעות תאיים Ca2 +-ריכוז [Ca2 +]אני (למשל, זרע תנועתיות כימוטקסיס, acrosome התגובה)10. כמו כן, תהליך התבגרות שנקרא capacitation, אשר הופך את תא הזרע מסוגלים להפרות את הביצית, הוא מוסדר באופן חלקי על ידי [Ca2 +]אני10. Ca2 +-הבלטת ממד Ca2 +-ATPase משאבות11 לשמור על קיפול כ 20.000 Ca2 +-מעבר צבע על פני קרום תאי זרע אדם, עם מנוחה [Ca2 +]אני של 50-100 ננומטר. אם Ca2 + מותר לעבור את קרום התא (למשל, דרך הפתח של Ca2 +-ערוצי), זרם גדולה למדי של Ca2 + מתרחשת, והוליד העלאת [Ca2 +]אני. עם זאת, גם נושאת תא הזרע Ca תאיים2 +-חנויות, אשר יכול לשחרר Ca2 + ו, לכן, גם לתת לעלות העלאת [Ca2 +]אני12. מעניין, כל ערוץ בתיווך Ca2 +-זרם בתאי זרע אדם כה נמצאה להתרחש באמצעות CatSper (חתוליוניים ערוץ של Sperm), אשר מתבטאת רק תאי זרע11. בתאי זרע אנושי, CatSper מופעל על ידי ליגנדים אנדוגני פרוגסטרון פרוסטגלנדינים דרך ליגנד ברורים, מחייב אתרי13,14,15, שמוביל מהיר Ca2 +-זרם לתוך תא הזרע. שני מקורות עיקריים ליד הביצה מספקים רמות גבוהות של אלה ליגנדים אנדוגני. אחד הוא נוזל הזקיקים מכיל רמות גבוהות של פרוגסטרון16. הנוזל הזקיקים הוא שוחרר מן בוגרת זקיקים יחד עם הביצה-ביוץ, mixes עם הנוזל בתוך ה-oviducts17. המקור העיקרי הוא תלולית התאים המקיפים את הביצית ולשחרר רמות גבוהות של פרוגסטרון פרוסטגלנדינים. הפרוגסטרון-induced Ca2 +-זרם בתוך תאי הזרע הוכח לתווך כימוטקסיס לקראת9,ביצה18, לשלוט19,תנועתיות הזרע20 ולעורר את acrosome תגובה21. מפעילה של אלה בודדים [Ca2 +]אני-פונקציות זרע מוסדר בסדר הנכון, בזמן הנכון הוא קריטי עבור הפריה של ביצה8. בקו זה, שיוצרת פרוגסטרון-induced Ca2 +-זרם נמצאה שיש לשייך מופחתת פוריות הגבר22,23,24,25,26 ,27,28,29 ו CatSper תפקודית הוא חיוני עבור פוריות הגבר26,30,31,32, 33,34,35,36.
כמו תאי הזרע להגיע הביצה, רצף אירועים חייב להתבצע לדישון להתרחש: 1) תאי הזרע חייב לחדור את שכבת תאים cumulus שמסביב, 2) לאגד zona pellucida, 3) exocytose את התוכן acrosomal, התגובה acrosome כביכול 37, 4) לחדור את zona pellucida, ו- 5) מיזוג עם קרום ביצה כדי להשלים דישון38. כדי להיות מסוגל לעבור את השלבים, להפרות את הביצית, תא זרע קודם לעבור capacitation11, שמתחיל כמו תאי הזרע לעזוב את נוזל הזרע המכיל גורמים "decapacitating"39 לשחות לתוך הנוזלים של הנקבה באיברי הרבייה עם רמות גבוהות של ביקרבונט, אלבומין37. Capacitation מעבד את תאי הזרע יכול לעבור hyperactivation, צורה של תנועתיות עם מכות נמרצת של שוטון, וכן acrosome תגובה37. תנועתיות Hyperactivated נדרש עבור חדירה של40zona pellucida, acrosome מכיל אנזימים hydrolytic שונים לסייע בתהליך זה חדירה41. בנוסף, התגובה acrosome מעבד את תאי הזרע מסוגלים פיוזינג עם הביצה על ידי חשיפת חלבונים ספציפיים קרום על פני הזרע הכרחי עבור זרע-ביצה פיוז'ן42. כתוצאה מכך, יכולת לעבור התגובה hyperactivation ו- acrosome הם שניהם נדרש להפריה מוצלחת של ביצה40,42. בניגוד מה כבר ראיתי עבור העכבר תאי זרע43,44,45, תאי זרע אנושי רק כי הם acrosome-שלם ניתן לאגד zona pellucida46. כאשר תאי הזרע האנושי מאוגדים את pellucida zona להם לעבור את התגובה acrosome לחדור zona pellucida41 והן לחשוף חלבונים ספציפיים ממברנה הנדרשים עבור המיזוג עם ביצה38. העיתוי של התגובה acrosome זרע אנושי ולכן קריטי להפריה להתרחש.
כמתואר לעיל, Ca2 +-מערכת אזעקה היא חיונית עבור זרע נורמלי תא פונקציה8, זה, לכן, עניין רב כדי שניתן יהיה מסך מספר רב של תרכובות עבור אפקטים על Ca2 +-איתות בתאי זרע אדם. באופן דומה, ככל האנושי היחיד תאי הזרע עוברים acrosome התגובה בבית המקום והזמן הנכון יכול לחדור את pellucida zona לדשן את הביצה46,47, זה גם עניין רב כדי שניתן יהיה לבדוק את תרכובות ביכולתם להשפיע על התגובה acrosome זרע אנושי. לשם כך, מתוארים שני תפוקה בינונית מבחני המיון: 1) assay עבור אפקטים על Ca2 +-איתות תאי זרע אנושי, ואת וזמינותו 2) על היכולת לגרום תגובה acrosome תאי זרע אנושי.
Assay 1 הוא בינוני-תפוקה Ca2 +-איתות וזמינותו. טכניקה המבוססת על הקורא צלחת זו קרינה פלואורסצנטית עוקב אחר שינויים בזריחה כפונקציה של הזמן בו זמנית בבארות מרובים. Ca2 +-רגיש הפלורסנט, Fluo-4 ישד K עבור Ca2 +≈ 335 ננומטר הוא תא-permeant בדמות אסתר AM (acetoxymethyl). באמצעות Fluo-4, זה אפשרי למדוד שינויים [Ca2 +]i לאורך זמן, לאחר התוספת של תרכובות לעניין תאי הזרע. וזמינותו פותחה על ידי המעבדה של טימו Strünker 201113 , מאז שימש במספר מחקרים כדי תרכובות מסך עבור אפקטים על Ca2 +-איתות זרע אנושי1,2,3, 4,5. גם שיטה דומה שימש למסך סמים מספר מועמדים48. בנוסף, וזמינותו זו היא שימושית גם עבור הערכת מצב תרופתי של פעולה1,2,3,4,5, עקומות מנה-תגובה1, 2,3,4,5, עיכוב תחרותי1,2, additivity1,2והסינרגטיות3 של תרכובות של עניין.
Assay 2 הוא assay התגובה תפוקה בינונית acrosome. טכניקה זו מבוססת על cytometer התמונה מודדת את הכמות של קיימא acrosome הגיב תאי זרע מדגם, באמצעות שלושה צבעי פלורסנט: propidium יודיד (PI), מצמידים FITC לקטין של אפון השדה (FITC-PSA) ולאחר Hoechst-33342. וזמינותו היה שונה מכל שיטה דומה מבוססי cytometry זרימה על-ידי Zoppino et al.49 , שימש ב מחקרים מספר6,7. באשר Ca2 +-איתות assay, assay התגובה acrosome הזה יכול לשמש גם כדי להעריך עקומות מנה-תגובה, עיכוב, additivity והסינרגטיות של תרכובות של עניין.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m pore filter</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>296-4545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L measuring cylinder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>3662-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4 and 2 mL plastic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>30120086 and 0030120094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-channel pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4861000813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 multi-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One, Germany</td>
			<td>781096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 and 50 mL platic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>0030122151 and 30122178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A2-slide</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>942-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic repeater pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4987000010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean wide-mouthed plastic container for semen sample</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-coupled lectin of Pisum sativum (FITC-PSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>L0770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluo-4 AM</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>F14201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLUOstar OMEGA fluorescence microplate reader</td>
			<td>BMG Labtech, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose anhydrous</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst-33342</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin (HSA)</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>For addition to HTF+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilizing solution containing 0.6 M NaHCO3 and 0.37% (v/v) formaldehyde in distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Lactate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NC-3000 image cytometer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>970-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes and piptting tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack for placing 50 mL plastic tubes in 45&#176; angle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S100 buffer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP1-cassette</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>941-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric flasks of appropriate sizes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm

Ca2 +-איתות חיונית כדי תפקוד נורמלי תא הזרע ואת פוריות הגבר. באופן דומה, התגובה acrosome חיוני על היכולת של תא זרע אנושי כדי לחדור את pellucida zona להפרות את הביצית. לכן זה עניין רב לבדיקת תרכובות (למשל, כימיקלים סביבתיים או מועמדים סמים) על השפעתם על Ca2 +-התגובה באיתות, acrosome זרע אנושי גם לבחון את ההשפעות השליליות פוטנציאליים על תפקוד תאי זרע אדם או לחקור תפקיד אפשרי כמו מניעה. כאן, מתוארים שני מבחני תפוקה בינונית: 1) מבוסס על-ידי קרינה פלואורסצנטית assay עבור הערכה של השפעות על Ca2 +-איתות זרע אנושי, ואת וזמינותו cytometric 2) על התמונה להערכה של תגובה acrosome זרע אנושי. מבחני אלה יכולים לשמש מסך מספר רב של תרכובות עבור אפקטים על Ca2 +-התגובה באיתות, acrosome זרע אנושי. יתר על כן, מבחני ניתן להשתמש כדי ליצור עקומות מנה-תגובה מאוד ספציפי של תרכובות בודדים, לקבוע additivity/הסינרגטיות פוטנציאליים עבור תרכובות שניים או יותר, וכדי ללמוד את מצב תרופתי של פעולה באמצעות עיכוב תחרותי ניסויים עם מעכבי CatSper.

נציג תוצאות ניסוי בדיקת ההשפעה של תרכובות 4 (A, B, C ו- D) יחד עם חיובי (פרוגסטרון) ושליטה שלילי (מאגר) על [Ca2 +]i זרע אנושי באמצעות של תפוקה בינונית Ca2 +-איתות assay ניתן לראות באיור 4a. ב- איור 4b, עקומת תגובת המינון של פרוגסטרון מוצג, אש...

Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

הקרנת מבחני עבור הערכה של השפעות על Ca2 +תפוקה בינונית-איתות ותגובה Acrosome זרע אנושי

הנה, שני מבחני תפוקה בינונית עבור הערכה של השפעות על Ca2 +-התגובה באיתות, acrosome זרע אנושי מתוארים. מבחני אלה יכולים לשמש בקלות ובמהירות מסך כמויות גדולות של תרכובות עבור אפקטים על Ca2 +-התגובה באיתות, acrosome זרע אנושי.

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...

ניתן להשתמש בבדיקה שלנו כדי לבדוק תרכובות עבור ההשפעות שלהם על תפקוד תאי הזרע האנושיים. באופן ספציפי, שיטות אלה ניתן להשתמש כדי לסנן במהירות ובקלות מספר גדול של תרכובות עבור ההשפעות שלהם על איתות סידן ותגובת אקרום בתאי זרע אנושיים. הדגמות חזותיות של שיטה זו יקלו על אחרים להקים ניסויים דומים במעבדות שלהם.התחל על ידי הצבת צינור אחד 50 מיליליטר לכל מיליליטר אחד של דגימת זרע גלם לתוך מתלה צינור בזווית של 45 מעלות והוספת ארבעה מיליליטר של 37 מעלות צלזיוס נוזל תובל אנושי או מדיום חיובי HTF לכל צינור. לאחר מכן, בזהירות pipette מיליליטר אחד של דגימת זרע נזילות לתחתית של כל צינור ולה מניחים את הצינורות ב 37 מעלות צלזיוס במשך שעה אחת. בסוף הדגירה, השתמש בקצה פיפטה שונה שנערך בזווית של 45 מעלות כדי להעביר בעדינות חלק גדול מהשבר העליון של תא הזרע המניע המכיל מדיום חיובי HTF ככל האפשר לתוך צינור פלסטיק חדש 15 מיליליטר.כדי לספור את תאי הזרע שנאספו, לדלל aliquot 20 microliter לגורם של 10, 20, 30, 50, או 90 ב S100 חיץ בצינור עגול התחתון שני מיליליטר על פי הריכוז הצפוי. מערבולת תאי הזרע מדולל במשך 10 שניות ב 700 סיבובים לדקה. לאחר מכן, לטבול קלטת SP1 לתוך המדגם ולדכא באופן מלא את הבוכנה הלבנה כדי לשוכך aliquot של המדגם לתוך הקלטת.לאחר מכן מניחים את הקלטת במגש ציטומטר התמונה ולהפעיל את PI מוכתם תא זרע אנושי assay על פי גורם דילול להחיל. כדי למדוד שינויים בריכוז הסידן תאי חינם, בעדינות pipette דגימת הזרע למעלה ולמטה פעם אחת ולהשתמש פיפטה חוזר אוטומטי aliquot 50 microliters של תאי זרע מוכתמים פלואורופור ל 24 בארות של שורה אחת של צלחת 384 מיקרו באר. מניחים את צלחת המיקרו היטב אצל קורא לוחיות הפלואורסצנטיות ב-30 מעלות צלזיוס ובחרו את הפרוטוקול המתאים ל פלואורופור.בחר באר בשורה של תאי זרע והתאם את הרווח לערך יעד של 20% ולאחר מכן התחל את המדידה. לאחר 10 מחזורי בסיס, השהה את הניסוי ופלט את המגירה עם צלחת המיקרו באר. באמצעות פיפטה של 12 ערוצים, הוסף במהירות 25 מיקרוליטרים של הפתרונות המוכנים של תרכובות ובקרות עניין לתוך 12 בארות כפולות בשורה ומיד להחזיר את הלוח לקורא להמשיך את המדידה מהר ככל האפשר.כל שינוי פלואורסצנטי בתגובה לתוספת של תרכובות או פקדים יילכדו על ידי המכשיר. לניתוח תגובה אקרוסום, לאחר דגירה של תאי הזרע קיבולי עם צבעים פלואורסצנטיים המתאימים, תרכובות או פקדים, לערבב את הדגימות על ידי pipetting ולהוסיף 50 microliters של כל מדגם בדיקה ל 100 microliters של פתרון immobilizing. מערבבים שוב את הדגימות ועומסים את התאים של שקופית A2 אחת לדגימה עם כ-30 מיקרוליטרים של דגימה לתא.לאחר מכן מקם את השקופית הראשונה שנטענה על המגש של ציטומטר התמונה. בחר את פרוטוקול FlexiCyte והקש על הפעל. כאן תוצאות מייצגות מניסוי בדיקת ההשפעה של ארבע תרכובות, בקרת פרוגסטרון חיובית ובקרת חיץ שלילית באמצעות בדיקת איתות סידן בתפוקה בינונית כפי שהוכח ניתן לראות.בגרף זה, עקומת תגובה מנה של פרוגסטרון נגזר שיא אחוזים שינויים בריכוז הסידן החופשי תאיים המושרה על ידי ריכוז מדולל סדרתי של פרוגסטרון מוצג. נתונים אלה ממחישים את ההשפעות של שלילי אחד או אחד משני פקדים חיוביים על אינדוקציה של תגובה acrosome בתאי זרע אנושיים קיבוליים בתגובת תפוקה בינונית. כדי למנוע החמצת פסגות האותות המושרים, חיוני להוסיף את הכימיקלים במהירות לתכפל בארות ולהמשיך מיד את המדידה לאחר מכן.על ידי שינוי סוג הפלואורופורים והצבעים, ניתן לשנות בקלות את הראיה שלנו כדי לענות על שאלות מדעיות שונות. אלה assays כבר שימשו במספר מחקרים כדי לבדוק קבוצות גדולות של תרכובות עבור ההשפעות שלהם על תפקוד הזרע האנושי.

Research

JoVE Journal

Biology

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

דיקור ניטור השפעות על המוח האנושי על ידי fMRI

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

פלואורסצנציה באתרו הכלאה (FISH) פרוטוקול של זרע אדם

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

טכניקות הדמיה Ca 2 + איתות זרע אנושי

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction

שני סוגים של מבחני עבור Chemoattraction גילוי זרע צפרדע

Sperm chemoattraction in invertebrates can be sufficiently robust that one can place a pipette containing the attractive peptide into a sperm suspension ...

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

ויזואליזציה של כלי דם Ca 2 + איתות מופעלות על ידי ROS נגזר אוטוקריני

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

Mapping the After-effects of Theta Burst Stimulation on the Human Auditory Cortex with Functional Imaging

מיפוי לאחר הלוואי של תטא Burst גירוי בקורטקס השמיעתי האנושי בהדמיה תפקודית

Auditory cortex pertains to the processing of sound, which is at the basis of speech or music-related processing1. However, despite considerable recent ...

Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes

מבחני לבדיקת השפעות רעילים של תרופות אפיגנטיים בפיתוח, פוריות והישרדות של יתושים מלריה

Insecticidal resistance poses a major problem for malaria control programs. Mosquitoes adapt to a wide range of changes in the environment quickly, making ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

שיטה להערכת ההשפעות של טווח של אורכי גל ועוצמות של אדום / טיפול באור האינפרה-אדום קרוב בסטרס חמצוני<em&gt; במבחנה</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

כימות של דביקות תא האנדותל<em&gt; במבחנה</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

גאפ junctional אינטר תקשורת: ביומרקר פונקציונלית להערכת תופעות לוואי של toxicants ורעלים, ואת היתרונות הבריאותיים של מוצרים טבעיים

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...