Name: medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm
Uploaded: 2019-03-01T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

Yazarlar Timo Strünker laboratuvar laboratuarına onların kalır sırasında AR ve DLE gözetiminin kabul etmek istiyorum. Ayrıca, bizim meslektaşları bölümü büyüme ve üreme, Kopenhag Üniversitesi Hastanesi, Rigshospitalet kadar bu iki deneyleri ayarı ile onların yardım için teşekkür etmek istiyorum. Bu eser hibe yenilik Fonu Danimarka (grant numaraları 005-2010-3 ve 14-2013-4) tarafından desteklenmiştir.

Toplama ve analiz protokolleri insan meni örnekleri Danimarka başkenti bölge araştırma Etik Komitesi kuralları takip eder. Tüm sperm örneği Onam sonra gönüllü bağış elde edilmiştir. Doğumdan sonra örnekleri tam anonimleştirilir. Onların rahatsızlık için her donör 500 DKK (yaklaşık $75 dolar) örnek başına bir ücret aldı. Örnekleri teslim günü analiz ve laboratuvar deneyleri hemen sonra yok etti.
Not: Orta verimi Ca2 +-tahlil adım 4-5 ve 6 ile 7 orta...

Tahlil Floresans tek microwells üzerinden tedavinin temel sinyal orta üretilen iş Ca2 + yaklaşık 250.000 sperm hücreleri içeren. Yakalanan sinyal iyi tüm bireysel sperm hücrelerinden ortalama. Tahlil böylece sperm hücre [Ca2 +]ben özellikle neresinde hakkında bilgi kayma yok değişti, [Ca2 +]i bir değişiklik yer, ya da ne kadar türdeş olmayan yanıttır alır sperm hücrelerinin bir kısmı ne büyüklükte sağlar tek tek hücreleri arasında. Bu t...

Burada açıklanan iki deneyleri amacı Ca2 +etkileri incelemektir-sinyalizasyon ve acrosome tepki insan sperm için gösterildiği gibi çeşitli yayınlar bunlar istihdam içinde birden çok bileşikleri deneyleri1,2, 3,4,5,6,7. CA2 +-sinyalizasyon ve acrosome tepki hayati normal insan sperm hücre işlevi ve erkek üreme vardır.
Bir insan sperm hücre genel yumurtayı döllemek için hedeftir. Başarıyla ve doğal olarak yumurtayı döllemek için sperm hücre fonksiyonları sıkıca sperm hücresi ile kadın üreme sistemi8,9yolculuk sırasında düzenlenmiş olması gerekir. Sperm hücresi işlevlerin çoğunu düzenlenmektedir intrasellüler Ca2 +-konsantrasyon [Ca2 +]10ben (örneğin, sperm hareketliliği, kemotaksis ve acrosome reaksiyon). Ayrıca, sperm hücresi yumurtayı dölleme yeteneğine işler, capacitation denilen bir olgunlaşma sürecini kısmen düzenlenmiş tarafından [Ca2 +]ben10' dur. CA2 +-ekstrüzyon Ca2 +-ATPaz pompalar11 korumak bir yaklaşık 20.000 kat Ca2 +-bir dinlenme [Ca2 +]ben 50-100 nm ile insan sperm hücre zarı üzerinde gradyan. CA2 + hücre zarı geçmeye izin verilip verilmediğini (örneğin, Ca2 +delikten-kanalları), Ca2 + bir büyükçe akını oluşur, sebebiyet veren [Ca2 +]benbir ayrıcalık. Ancak, sperm hücresi de intrasellüler Ca2 +taşır-Ca2 + serbest bırakabilirsiniz mağazaları ve bu nedenle, da vermek bir ayrıcalık yükselmesi [Ca2 +]ben12artış. İlginçtir, tüm kanal-aracılı Ca2 +-akın insan sperm hücrelerinde CatSper (kediiyonik kanal SpeRM), sadece sperm hücresi11' de gösterilen üzerinden gerçekleşmesi için defa bulunmuştur. İnsan sperm hücrelerinde CatSper endojen ligandlar progesteron ve prostaglandin ayrı ligand siteleri13,14,15, bağlama aracılığıyla bir hızlı Ca2 +için önde gelen harekete-akını içine sperm hücresi. İki ana kaynağı yumurta yakınındaki bu endojen ligandlar yüksek düzeyde sağlar. Progesteron16yüksek düzeyde içeren foliküler sıvı biridir. Foliküler sıvı olgun foliküller yumurta yumurtlama ve karışımları oviducts17içinde sıvı ile birlikte yayımlanır. Diğer ana yumurta surround ve progesteron ve prostaglandin yüksek düzeyde yayın kümülüs hücreleri kaynağıdır. Progesteron kaynaklı Ca2 +-akın sperm hücresi içinde yumurta9,18doğru kemotaksisi aracılık, sperm hareketliliği19,20 kontrol ve acrosome teşvik gösterilen reaksiyon21. Bu bireysel [Ca2 +]benuyarının harekete geçirilmesine karşılık-düzenlenmiş sperm fonksiyonları doğru sırada ve doğru zamanda8yumurta döllenme için önemlidir. Bu, bir suboptimal progesteron kaynaklı Ca2 +doğrultusunda-akın bulundu ilişkili olmak azaltılmış erkek üreme22,23,24,25,26 ,27,28,29 ve fonksiyonel CatSper erkek üreme26,30,31,32için, temel 33,34,35,36.
Sperm hücresi yumurtayı ulaştığı fertilizasyon oluştuğu için olaylar dizisi gerçekleşmesi gerekir: 1) sperm hücreleri çevreleyen kümülüs hücre katmanı nüfuz gerekir, 2) bağlamak için zona pelusida, 3) exocytose acrosomal içerik, sözde acrosome tepki 37, 4) zona pelusida ve 5 nüfuz) sigorta fertilizasyon38tamamlamak için yumurta membran ile. Bu adım adım gitmek ve yumurtayı döllemek muktedir, sperm hücresi ilk olarak sperm hücresi "decapacitating" faktörler39 içeren meni bırakın ve dişi sıvı yüzmek başlar capacitation11, geçmeleri gerekir üreme yolu düzeyi yüksek olan bikarbonat ve albümin37. Capacitation hyperactivation, hareketliliği ile kamçı ve acrosome tepki37dinç dayak şeklinde geçmesi mümkün sperm hücreleri oluşturur. Hyperactivated motilite zona pelusida40penetrasyon için gereklidir ve acrosome bu penetrasyon süreci41yardım çeşitli hydrolytic enzimler içerir. Ayrıca, acrosome reaksiyonu sperm hücresi yumurta ile sperm yumurta füzyon42için gerekli sperm yüzeyinde belirli zar proteinleri açarak eritme yeteneğine işler. Sonuç olarak, hyperactivation ve acrosome reaksiyon geçmesi yeteneği vardır ikisi de yumurta40,42başarılı gübreleme için gereklidir. Ne için fare sperm hücresi43,44,45görülmüştür aksine, acrosome olduğu gibi sadece insan sperm hücreleri zona pelusida46için bağlayabilirsiniz. İnsan sperm hücreleri zona pelusida bağlı acrosome tepki zona pelusida41 nüfuz ve yumurta38ile fusion için gerekli olan belirli zar proteinleri ortaya çıkarmak için geçmesi gerekmektedir. Zamanlaması acrosome tepki olarak insan sperm böylece fertilizasyon oluştuğu önemlidir.
CA2 +yukarıda açıklandığı gibi-sinyal hayati için normal sperm hücre işlevi8ve bu nedenle, bileşenleri, Ca2 +etkileri için çok sayıda ekran için büyük ilgi olduğunu-insan sperm hücreleri sinyal. Doğru zaman ve yerde acrosome tepki tabi sadece insan sperm hücreleri zona pelusida nüfuz ve yumurta46,47döllemek benzer şekilde, aynı zamanda bileşiklerin onların yetenek-e doğru için test edebilmek için büyük ilgi olduğu insan sperm acrosome tepki etkiler. Bu amaçla, iki orta-den geçerek tarama deneyleri açıklanmıştır: etkileri üzerinde Ca2 +1) bir tahlil-insan sperm hücreleri ve 2) bir tahlil acrosome tepki insan sperm hücrelerinde ikna yeteneği için sinyal.
Tahlil 1 olduğunu orta-den geçerek Ca2 +-tahlil sinyal. Bu floresan plaka okuyucu tabanlı teknik Floresans zaman aynı anda birden fazla wells bir işlev olarak yapılan değişiklikleri izler. Ca2 +-hassas floresan boya, Fluo-4 Kd Ca2 +≈ 335 için vardır nM ve hücre-AM (acetoxymethyl) ester formunda permeant. Fluo-4 kullanarak, zamanla ve bileşikleri sperm hücresi ilgilendiren yanı sıra sonra [Ca2 +]i değişiklikleri ölçmek mümkündür. Tahlil Timo Strünker laboratuarda 201113 tarafından geliştirilen ve beri ekran bileşikler için çeşitli çalışmalarda etkisi Ca2 +için kullanılmıştır-insan sperm1,2,3' te, sinyal 4,5. Ayrıca benzer bir yöntem birden çok uyuşturucu adaylar48ekran kullanılmaya başlanmıştır. Buna ek olarak, bu tahlil de farmakolojik modu eylem1,2,3,4,5, doz-yanıt eğrileri1değerlendirmek için yararlı olduğunu, 2,3,4,5, rekabetçi inhibisyon1,2, additivity1,2ve synergism3 bileşikler ilgi.
Tahlil 2 Orta-den geçerek acrosome tepki tahlil olduğunu. Bu görüntü sitometresi tabanlı teknik uygun miktarını ölçer acrosome tepki sperm hücresi üç floresan boyalar kullanarak bir örnek: propidium iyodür (PI), FITC birleştiğinde lektin Pisum sativum (FITC-PSA) ve Höchst-33342. Tahlil bir benzer Akış Sitometresi tabanlı yönteminden Zoppino vd.49 tarafından değiştirildi ve kullanılmış içinde çeşitli çalışmalar6,7. Gelince Ca2 +-sinyal tahlil, bu acrosome tepki tahlil doz-yanıt eğrileri, inhibisyon, additivity ve synergism ilgi bileşiklerin değerlendirmek için de kullanılabilir.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 &#181;m pore filter</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>296-4545</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 L measuring cylinder</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>3662-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1,4 and 2 mL plastic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>30120086 and 0030120094</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>12-channel pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4861000813</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>384 multi-well plates</td>
			<td>Greiner Bio-One, Germany</td>
			<td>781096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 and 50 mL platic tubes</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>0030122151 and 30122178</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>A2-slide</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>942-0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automatic repeater pipette</td>
			<td>Eppendorf, Germany</td>
			<td>4987000010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean wide-mouthed plastic container for semen sample</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-coupled lectin of Pisum sativum (FITC-PSA)</td>
			<td>Sigma-Aldrich, Germany</td>
			<td>L0770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluo-4 AM</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific, USA</td>
			<td>F14201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FLUOstar OMEGA fluorescence microplate reader</td>
			<td>BMG Labtech, Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glucose anhydrous</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoechst-33342</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human serum albumin (HSA)</td>
			<td>Irvine Scientific</td>
			<td>9988</td>
			<td>For addition to HTF+</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Immobilizing solution containing 0.6 M NaHCO3 and 0.37% (v/v) formaldehyde in distilled water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnetic stirrer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na-Lactate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaHCO3</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NC-3000 image cytometer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>970-3003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes and piptting tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>propidium iodide (PI)</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-3002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Purified water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rack for placing 50 mL plastic tubes in 45&#176; angle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S100 buffer</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>910-0101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP1-cassette</td>
			<td>ChemoMetec, Denmark</td>
			<td>941-0006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Volumetric flasks of appropriate sizes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vortexer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

medium-throughput screening assays for assessment of effects on ca2+-signaling and acrosome reaction in human sperm

CA2 +-sinyal normal sperm hücre işlevi ve erkek üreme için gerekli. Benzer şekilde, acrosome tepki zona pelusida nüfuz ve yumurtayı döllemek için insan bir sperm hücresi yetenek için çok önemlidir. Bu nedenle büyük ilgi için onların etkisi Ca2 +bileşikleri (örneğin, çevresel kimyasal madde veya ilaç adaylarının) test etmek için-insan sperm sinyal ve acrosome reaksiyon ya insan sperm hücre işlevi üzerinde olası olumsuz etkileri incelemek için veya bir gebelik önleyici olarak olası bir rol araştırmak için. Burada, iki orta-den geçerek deneyleri açıklanmıştır: 1) bir floresan tabanlı tahlil Ca2 +etkileri değerlendirilmesi için-insan sperm ve 2) bir görüntü sitometrik tahlil acrosome tepki insan sperm olarak değerlendirilmesi için sinyal. Bu deneyleri bileşikler üzerinde Ca2 +etkileri için çok sayıda ekran için kullanılabilir-insan sperm sinyal ve acrosome reaksiyon. Ayrıca, deneyleri çok özel doz-yanıt eğrileri bireysel bileşiklerin oluşturmak, iki veya daha fazla bileşikler için potansiyel additivity/synergism belirlemek için ve eylem yoluyla rekabetçi inhibisyon farmakolojik modu çalışmaya kullanılabilir CatSper inhibitörleri ile deneyler.

Temsilcisi sonuçları pozitif (progesteron) ve negatif (arabellek) denetimi [Ca2 +]i ile birlikte 4 bileşikler (A, B, C ve D) etkisini orta-den geçerek Ca2 +kullanarak insan sperm testi bir deneme-sinyal tahlil şekil 4agörülebilir. Şekil 4b', progesteron bir doz yanıt eğrisi, en yüksek ΔF/F0 ile (%) elde gösterilir progesteron, seri olarak seyreltilmiş konsantrasyonları ta...

Watch this Scientific Journal Video about Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm at JoVE.com

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Orta-den geçerek deneyleri Ca2 +etkileri değerlendirilmesi için eleme-sinyal ve insan Sperm Acrosome reaksiyon

Burada, iki orta-den geçerek deneyleri Ca2 +etkileri değerlendirilmesi için-sinyalizasyon ve acrosome tepki insan sperm olarak açıklanmıştır. Bu deneyleri bileşikler üzerinde Ca2 +etkileri için büyük miktarda hızlı ve kolay bir ekran için kullanılabilir-insan sperm sinyal ve acrosome reaksiyon.

Ca2+-signaling is essential to normal sperm cell function and male fertility. Similarly, the acrosome reaction is vital for the ability of a human sperm ...

Bizim tahliller insan sperm hücresi fonksiyonu üzerindeki etkileri için bileşikleri test etmek için kullanılabilir. Özellikle, bu yöntemler hızlı ve kolay insan sperm hücrelerinde kalsiyum sinyalizasyon ve akrozom reaksiyonu üzerindeki etkileri için bileşiklerin çok sayıda ekran için kullanılabilir. Bu yöntemin görsel gösterimleri, başkalarının kendi laboratuvarlarında benzer deneyler ayarlamalarını kolaylaştırır.45 derecelik açıyla bir tüp raf içine ham meni numunesi bir mililitre başına 50 mililitrelik tüp yerleştirerek ve her tüp için 37 derece Santigrat İnsan Tubal Sıvı veya HTF pozitif orta dört mililitre ekleyerek başlayın. Daha sonra, dikkatle her tüpün altına sıvılaştırılmış meni örnek bir mililitre pipet ve bir saat boyunca 37 derece santigrat tüpler yerleştirin. Kuluçka sonunda, 45 derecelik açıda tutulan modifiye pipet ucu kullanarak, HTF pozitif ortam içeren hareketli sperm hücresinin üst fraksiyonunun büyük bir kısmını yeni 15 mililitrelik plastik bir tüpe yavaşça aktarın.Toplanan sperm hücrelerini saymak için, 20 mikrolitrelik bir aliquot'u beklenen konsantrasyona göre yuvarlak bir alt iki mililitrelik tüpte S100 tamponundaki 10, 20, 30, 50 veya 90 faktörüne seyreltin. Dakikada 700 dönüşte seyreltilmiş sperm hücrelerini 10 saniye boyunca girdap. Daha sonra, numunenin içine bir SP1 kaseti batırın ve beyaz pistonun baskısını tamamen bastırarak numunenin bir aliquot'unu kasete aspire edin.Daha sonra kaseti görüntü sitometre tepsisine yerleştirin ve PI lekeli insan sperm hücresi titresini uygulanan seyreltme faktörüne göre çalıştırın. Serbest hücre içi kalsiyum konsantrasyonundaki değişiklikleri ölçmek için, sperm örneğini bir kez yukarı ve aşağı hafifçe pipetleyin ve 50 mikrolitre florofor lekeli sperm hücresini 384 mikro kuyunun bir sırasının 24 kuyusuna çıkarmak için otomatik tekrarlayıcı pipet kullanın. Mikro kuyu plakasını floresan plaka okuyucusuna 30 santigrat derecede yerleştirin ve florofor için uygun protokolü seçin.Sperm hücrelerinin sırasına bir kuyu seçin ve kazancı %20'lik bir hedef değere ayarlayın ve ölçümü başlatın. 10 temel döngüden sonra, denemeyi duraklatın ve mikro kuyu plakası ile çekmeceyi atın. 12 kanallı pipet kullanarak, hızlı bir şekilde satırda 12 yinelenen kuyular içine bileşikler ve ilgi kontrolleri hazırlanan çözümler 25 mikrolitre ekleyin ve hemen mümkün olduğunca çabuk ölçüm devam etmek için okuyucuya plaka döndürün.Bileşiklerin veya kontrollerin eklenmesine yanıt olarak floresan herhangi bir değişiklik alet tarafından yakalanır. Akrozom reaksiyon analizi için, kapasitasyonlu sperm hücrelerini uygun floresan boyalar, bileşikler veya kontrollerle kuluçkaya yatırdıktan sonra, numuneleri pipetleme ile karıştırın ve her test numunesinin 50 mikrolitresini 100 mikrolitre immobilize solüsyonuna ekleyin. Numuneleri tekrar karıştırın ve numune başına bir A2 kaydırağının odalarını oda başına yaklaşık 30 mikrolitre numune ile yükleyin.Ardından ilk yüklenen slaydı görüntü sitometresinin tepsisine yerleştirin. FlexiCyte Protokolü'nü seçin ve Çalıştır'a basın. Burada temsili sonuçlar dört bileşiğin etkisini test ederek, pozitif progesteron kontrolü ve orta eldeli kalsiyum sinyal testini kullanarak negatif tampon kontrolü ile gözlemlenebilir.Bu grafikte, progesteron seri seyreltilmiş konsantrasyonu tarafından indüklenen hücre içi serbest kalsiyum konsantrasyonunda pik yüzde değişiklikleri elde progesteron bir doz yanıt eğrisi gösterilmiştir. Bu veriler, bir negatif veya iki pozitif kontrolden birinin orta seviyedeki bir akrozom reaksiyon testinde kapasite edilmiş insan sperm hücrelerinde bir akrozom reaksiyonunun indüksiyonu üzerindeki etkilerini göstermektedir. İndüklenen sinyallerin doruklarını kaçırmamak için, kimyasalları çoğaltma kuyularına hızlı bir şekilde eklemek ve bundan sonra ölçüme hemen devam etmek çok önemlidir.Florofor ve boyaların türünü değiştirerek, tahlillerimiz farklı bilimsel soruları yanıtlamak için kolayca değiştirilebilir. Bu tahliller zaten insan sperm fonksiyonu üzerindeki etkileri için bileşiklerin büyük gruplar test etmek için çeşitli çalışmalarda kullanılmıştır.

Research

JoVE Journal

Biology

Medium-throughput Screening Assays for Assessment of Effects on Ca2+-Signaling and Acrosome Reaction in Human Sperm

Monitoring Acupuncture Effects on Human Brain by fMRI

FMRI İnsan Beyninin izlenmesi Akupunktur Etkileri

Functional MRI is used to study the effects of acupuncture on the BOLD response and the functional connectivity of the human brain.  Results demonstrate ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

Floresan In situ İnsan Sperm hibridizasyon (FISH) Protokolü

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Techniques for Imaging Ca2+ Signaling in Human Sperm

Görüntüleme Ca Teknikleri 2 + İnsan Sperm sinyal

Fluorescence microscopy of cells loaded with fluorescent, Ca2+-sensitive dyes is used for measurement of spatial and temporal aspects of Ca2+ signaling in ...

Two Types of Assays for Detecting Frog Sperm Chemoattraction

İki Kurbağa Sperm Chemoattraction saptamak için Tahliller Türleri

Sperm chemoattraction in invertebrates can be sufficiently robust that one can place a pipette containing the attractive peptide into a sperm suspension ...

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Visualization of Vascular Ca2+ Signaling Triggered by Paracrine Derived ROS

Vasküler Ca Görselleştirme 2 + Parakrin Türetilmiş ROS tarafından tetiklenmiş Sinyal

Oxidative stress has been implicated in a number of pathologic conditions including ischemia/reperfusion damage and sepsis. The concept of oxidative ...

Mapping the After-effects of Theta Burst Stimulation on the Human Auditory Cortex with Functional Imaging

Theta sonrası etkileri Haritalama Fonksiyonel Görüntüleme ile İnsan İşitsel korteks üzerine Stimülasyon Burst

Auditory cortex pertains to the processing of sound, which is at the basis of speech or music-related processing1. However, despite considerable recent ...

Toxicological Assays for Testing Effects of an Epigenetic Drug on Development, Fecundity and Survivorship of Malaria Mosquitoes

Sıtma Sivrisinekler Gelişimi, doğurganlık ve Kalma bir Epigenetik İlaç Test Etkileri Toksikolojik Tahliller

Insecticidal resistance poses a major problem for malaria control programs. Mosquitoes adapt to a wide range of changes in the environment quickly, making ...

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Method for the Assessment of Effects of a Range of Wavelengths and Intensities of Red/near-infrared Light Therapy on Oxidative Stress In Vitro

Dalga boyundaki ve Oksidatif Stres Kırmızı / yakın-kızılötesi ışık Terapisi şiddetler bir Range Etkilerinin Değerlendirilmesi için Yöntemi<em&gt; İn Vitro</em

Red/near-infrared light therapy (R/NIR-LT), delivered by laser or light emitting diode (LED), improves functional and morphological outcomes in a range of ...

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Quantitation of Endothelial Cell Adhesiveness In Vitro

Endotel Hücre yapışma miktarının belirlenmesi<em&gt; In Vitro</em

One of the cardinal processes of inflammation is the infiltration of immune cells from the lumen of the blood vessel to the surrounding tissue. This ...

Gap Junctional Intercellular Communication: A Functional Biomarker to Assess Adverse Effects of Toxicants and Toxins, and Health Benefits of Natural Products

Gap Junctional Hücreler arası iletişim: Doğal Ürünler Toksikantların ve Toksinler Yan Etkileri değerlendirmek için Fonksiyonel Biyomarker ve Sağlık Faydaları

This protocol describes a scalpel loading-fluorescent dye transfer (SL-DT) technique that measures intercellular communication through gap junction ...