Name: cortisol measurement in koala (phascolarctos cinereus) fur
Uploaded: 2019-08-23T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Cortisol Measurement in Koala Phascolarctos cinereus Fur at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado através de financiamento de pesquisa de start-up para Edward Narayan através da Western Sydney University, escola de ciência e saúde. Os autores agradecem Jack Nakhoul pela assistência com o processamento amostral.

Este projeto foi realizado rigorosas diretrizes de cuidado animal e humano. A ética animal foi concedida pela Western Sydney University (A12373). Adicionalmente, uma avaliação de risco laboratorial e uma forma de biossegurança e radiação foram submetidas e aceitas pela Western Sydney University para realizar esta pesquisa com segurança (B12366).
Nota: as amostras de peles de Koala para este projeto foram obtidas do Adelaide Koala and Wildlife hospital, localizado na 282 Anzac Highway, P...

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H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+Hair+Cortisol+Concentrations+to+Assess+the+Effect+of+Anthropogenic+Impacts+on+Wild+Chimpanzees+(Pan+troglodytes).">Measuring Hair Cortisol Concentrations to Assess the Effect of Anthropogenic Impacts on Wild Chimpanzees (Pan troglodytes).</a> PLoS ONE. 11 (4), 0151870 (2016).</li><li>Aderjan, R., Rauh, W., Vecsei, P., Lorenz, U., Ruttgers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+cortisol,+tetrahydrocortisol,+tetrahydrocortisone,+corticosterone,+and+aldosterone+in+human+amniotic+fluid.">Determination of cortisol, tetrahydrocortisol, tetrahydrocortisone, corticosterone, and aldosterone in human amniotic fluid.</a> Journal of Steroid Biochemistry. 8 (1), 525-528 (1977).</li><li>Nejad, J. 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Há uma série de estudos que usam uma série de técnicas para detectar o cortisol na pele de mamíferos. Este estudo apresenta resultados para a detecção de cortisol em peles coletadas de um koala selvagem exposto ao estresse antropogênico atual. Este estudo inovador usou peles para testar qual dos três solventes comumente usados são melhores na extração de cortisol, uma medida de estresse crônico, de peles de coala. Os resultados mostraram que 100% de metanol foi o solvente recomendado para extração de corti...

Os ecossistemas australianos sustentam a vida humana através da prestação de serviços, incluindo alimentos e fibras, entre muitas outras interações dinâmicas1. Ironicamente, é atividade humana que atua como o condutor dominante da perturbação do ecossistema através da mudança de biodiversidade2. A fragmentação do habitat, conhecida como o processo de divisão de grandes habitats contínuos em pequenas manchas de terra, isoladas umas das outras, é a maior mudança de biodiversidade antropogênica ameaçando os ecossistemas australianos2. A fragmentação do habitat modifica a estrutura e a diversidade da composição de espécies em uma determinada área, reduzindo assim a área de habitat necessária para que essas espécies mantenham populações viáveis2. O resultado disso é o aumento da concorrência entre as espécies de recursos, incluindo alimentos, combustíveis, fibras e água3. A destruição de ecossistemas australianos através da mudança de biodiversidade está tendo conseqüências catastróficas em muitas espécies nativas australianas1.
A espécie marsupial mais emblemática da Austrália, ocoala (Phascolarctos cinereus), depende dos ecossistemas australianos que permanecem saudáveis para sua sobrevivência4. A introdução do assentamento europeu causou um rápido declínio nas populações australianas de coalas, como eles foram abatidos por suas peles em busca de lucro em um grande comércio de exportação5. Esta prática foi proibida na década de 1980 e as populações de coalas foram então capazes de estabilizar5. No entanto, o crescimento exponencial da população humana resultou nesta espécie competindo por grande parte de seu habitat, e sua sobrevivência é novamente ameaça6. De acordo com a União Internacional para a conservação da natureza (IUCN), todas as populações de coalas australianas estão listadas como vulneráveis à extinção com uma tendência populacional decrescente7. Este anúncio é atribuído à incerteza em torno dos parâmetros populacionais relevantes e à variação acentuada das tendências populacionais para esta espécie7. Como os animais mais emblemáticos e endêmicos, coalas em grande parte beneficiam a economia australiana através do turismo (NSW Office of Environment and Heritage 2018). Uma estimativa sugere que o turismo relacionado Koala gerou aproximadamente 9.000 empregos e contribui entre $1.01 e $2500000000 para a economia (NSW escritório de meio ambiente e património 2018). A remoção de qualquer uma das espécies tem o potencial de ser catastrófico, e pode ser visto no declínio constante da vida selvagem australiana nativa6. Adicionalmente, a economia de Austrália sentirá as ramificações se as populações de coalas Australian continuarem a declinar na taxa que são6.
Sugere-se que a prevalência de morte e doença em resposta à fragmentação do habitat é o resultado do estresse crônico8. Já, vinte e quatro espécies marsupiais foram declaradas extintas na Austrália devido à fragmentação do habitat, com coalas seguindo uma tendência semelhante8. A complexidade da fragmentação do habitat e dos sistemas biológicos é sinergética, mas pode ser desempacotada através da análise da resposta ao estresse6. Geralmente, qualquer perturbação em um ambiente natural de animais ativa uma cascata complexa de eventos Neurohormonais, conhecida como uma resposta de "luta ou fuga"9,10. Esta resposta ao stress é um processo que começa no cérebro onde o eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) é ativado11. Um componente do cérebro chamado hipotálamo libera o hormônio liberador de corticotrofina (CRH), que então sinaliza a hipófise anterior para liberar o hormônio adrenocorticotrófico (ACTH)11. Isso, por sua vez, estimula a secreção glicocorticóide da medula adrenal. O corpo circula glicocorticóides através do sangue, que desvia o armazenamento da glicose do glicogênio e mobiliza a glicose do glicogênio armazenado11. Esta cascata de eventos Neurohormonais é a resposta usada pelo animal para lidar com estímulos imprevisíveis11. No entanto, quando os glicocorticóides estão sendo liberados e permanecem elevados por um período prolongado de tempo, o animal é considerado como tendo estresse crônico12,13. Esse processo envolve desviar a energia de outras funções corporais corpóreas, como é necessário para a produção contínua de glicocorticóides13. Como resultado, o estresse crônico pode proibir o crescimento, a reprodução e a imunidade, sendo todos os principais traços de aptidão necessários para a sobrevida14.
Medir a produção de glicocorticóides de um animal é um indicador comum usado para determinar se o animal está ou não experimentando estresse fisiológico15. Para isso, os glicocorticóides podem ser medidos no plasma sanguíneo, soro, saliva, urina ou fezes16. No entanto, evidências sugerem que o cabelo é um indicador muito mais eficaz do estresse crônico, em oposição aos16acima mencionados. Isso é porque o cabelo é pensado para incorporar hormônios transmitidos pelo sangue durante a sua fase de crescimento; é relativamente estável; e todo o cortisol detectado no cabelo reflete o esforço fisiológico experimentado sobre o período de crescimento do cabelo, que pode ser semanas completamente aos meses16. Além disso, qualquer coleta de cortisol deve ser não invasiva, a fim de minimizar o estresse associado à captura e manuseio16. No entanto, qualquer estresse experimentado durante este evento não afetaria os níveis de glicocorticóides no cabelo16. Houve muitos estudos que exploram a proficiência de usar o cabelo para medir o stress a longo prazo em um número de animais, e incluem estudos em Rena, ursos de urso, macacos de rhesus, muskoxen, e ursos marrons17,18, 19 anos de , 20 anos de , o cortisol 21. Hair é extraído geralmente primeiramente lavando a amostra para assegurar o cortisol do suor e do sebo-derivado depositado na superfície do cabelo não é coextraído com cortisol e então pulverizando a amostra em um grânulo-batedor22. Após a lavagem, a amostra precisa de ser secada para assegurar a evaporação completa22. Finalmente, usando um solvente, a amostra pode ser extraída e reconstituída para facilitar o ensaio de cortisol22. O solvente mais comum usado para extrair o cortisol da pele é o metanol21,23; no entanto, existem alguns estudos que usam etanol e isopropanol em suas técnicas de extração de cortisol. Por exemplo, um estudo que utilizou etanol foi bem-sucedido para extrair o cortisol do fluido amniótico humano24. Adicionalmente, um estudo que utilizou isopropanol foi bem-sucedido para extrair o cortisol do cabelo humano e unhas25,26. Por esta razão, este estudo testou todos os três solventes (metanol, etanol e isopropanol) para determinar qual foi o mais bem sucedido para a extração de cortisol de amostras de peles de coala.
O objetivo preliminar deste estudo era usar técnicas atuais para validar uma técnica óptima da extração de hormona a ser usada como uma medida não invasora do cortisol da pele do Koala. Isto foi conseguido testando três solventes da extração (metanol, ethanol, e isopropanol). Nós supor que o metanol será o solvente ideal usado para extrair o cortisol da pele do Koala porque é o solvente recomendado da extração pelos jogos27do cortisol do ensaio da árvore.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:616px;" width="616">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Centrifuge Tubes</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">1.5 mL</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Chrome Steel Beads</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">3.2 mm x 3</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Cortisol Kit</td>
			<td style="width:72px;">Arbor Assays</td>
			<td style="width:119px;">K003-H1W</td>
			<td style="width:211px;">Manufactured in Michigan USA</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">DetectX Cortisol Enzyme Immunoassay Kit</td>
			<td style="width:72px;">Arbor Assays</td>
			<td style="width:119px;">K003-H5</td>
			<td style="width:211px;">Used first-time for cortisol testing in koala fur</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Ethanol</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Isopropanol</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Methanol</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Micro Pipette</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Micro Precision Sieve</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">0.5 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Microplate Reader</td>
			<td style="width:72px;">Bio Radi</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Microplate Washer</td>
			<td style="width:72px;">Bio Radi</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Orbital Shaker</td>
			<td style="width:72px;">Bio Line</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Plastic Weighing Boat</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Plate Sealer</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Precision Balance</td>
			<td style="width:72px;">n/a</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Vortex Mixer</td>
			<td style="width:72px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">n/a</td>
			<td style="width:211px;">n/a</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

cortisol measurement in koala (phascolarctos cinereus) fur

Os métodos ideais de extração hormonal utilizados para medir o stress em animais através de tipos de amostras não são sempre os mesmos. A icónica espécie marsupial da Austrália, ocoala (Phascolarctos cinereus), enfrenta a exposição prolongada a estressores antropogênicos-induzidos e a avaliação do estresse crônico em populações selvagens é urgentemente justificada. Uma das maneiras mais eficazes de medir o estresse crônico é através da análise do hormônio glicocorticóide cortisol no cabelo ou pele, uma vez que suporta respostas fisiológicas e comportamentais. Este estudo de validação laboratorial tem como objetivo testar as técnicas atuais para validar um método de extração hormonal ideal para ser usado como uma medida não invasiva de cortisol em peles de coala. Reconhece-se que o uso de técnicas não invasivas para medir os hormônios do estresse é preferível sobre técnicas tradicionais e invasivas devido a seus pontos de vista práticos e éticos ideais. Além disso, é comparativamente mais fácil de adquirir peles de coalas do que é para adquirir amostras de seu sangue. Este estudo utilizou amostras de peles de coala adquiridas do Adelaide Koala and Wildlife hospital para executar uma série de técnicas de extração hormonal na tentativa de validar um método de extração de cortisol ideal. Os resultados mostraram que o metanol de 100% forneceu a extração solvente a mais óptima comparada ao etanol de 100% ou ao isopropanol de 100% baseado em resultados do paralelismo. Em conclusão, este método da extração do cortisol da pele do Koala forneceu um ensaio não invasor de confiança que poderia ser usado para estudar o esforço crônico em koalas.

A detecção do ensaio de metabólitos hormonais de interesse é determinada usando paralelismo. Usando uma curva de paralelismo, o ponto de ligação de 50% também determina o fator de diluição da amostra na curva padrão (Figura 1). Como mostrado no gráfico de paralelismo (Figura 1), os extratos de 100% de etanol e 100% de isopropanol não proporcionam deslocamento paralelo contra o padrão de cortisol. No entanto, o extrato de metanol 100% forneceu deslocamento paralelo contra o p...

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Cortisol Measurement in Koala Phascolarctos cinereus Fur

Nós apresentamos um protocolo para determinar o solvente óptimo da extração para medir o cortisol da pele do Koala. Os solventes utilizados neste protocolo são metanol, etanol e isopropanol. Determinar um solvente de extração ideal ajudará na medição de peles de forma confiável para determinar o impacto do estresse crônico em coalas.

Medição de cortisol em Koala (Phascolarctos cinereus) Fur

Optimal methods of hormone extraction used to measure stress in animals across sample types are not always the same. Australia&#39;s iconic marsupial ...

Este é um novo método para a avaliação do hormônio glicocorticoide, cortisol, de pele de coala. Ele fornece um novo biomarcador para a avaliação do estresse crônico em coalas. A principal vantagem desta técnica é que ela é um método altamente sensível e reprodutível com um tempo de reviravolta bastante rápido entre a preparação da amostra e o ensaio hormonal.Esta técnica permite a avaliação quantitativa do estresse crônico em coalas, que é uma ferramenta de gestão clínica altamente útil. Me ajudando com esse procedimento está Dylan Fox, um estudante de pós-graduação do meu laboratório. Para iniciar este procedimento recupere a pele do armazenamento a menos 80 graus Celsius e deixe descongelar à temperatura ambiente.Em seguida, pese a pele em uma balança de precisão analítica de laboratório. Coloque 60 miligramas da pele em um tubo de centrífuga pré-pesado e rotulado de 1,5 mililitro e repita isso até que 18 tubos estejam cheios. Usando uma pipeta, adicione um mililitro de isopropanol de grau 100% HPLC a cada tubo.Vórtice as amostras por 30 segundos. Coe cada amostra com uma peneira de micro-precisão de 0,5 mililitro para alcançar a separação de líquido e pele, e descarte o líquido em um recipiente de resíduos. Coloque cada amostra de pele em um barco de pesagem de plástico rotulado.Em seguida, coloque os barcos de pesagem em um desiccador a vácuo e deixe por três dias para deixar a pele secar. Uma vez que a pele esteja completamente seca, coloque cada amostra em um tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro rotulado. Coloque cada amostra em uma fábrica de contas com três contas de aço cromadas e pulverize por dois minutos a 30 shakes por segundo.Repita esta transferência com metanol de grau 100% analítico e isopropanol de grau 100% analítico até que 18 tubos totais tenham sido preenchidos. Depois disso, use uma pipeta para transferir um mililitro da primeira técnica de extração em seis tubos de centrífuga de 1,5 mililitro contendo a amostra de pele. Tampe cada tubo e use um agitador para incuba-los à temperatura ambiente com pulsação constante por pelo menos 12 horas.Em seguida, coe as amostras com uma peneira de micro-precisão de 0,5 mililitro. Use uma pipeta para transferir o líquido para um novo tubo de microcentrífuga de 1,5 mililitro rotulado, ao mesmo tempo em que garante que a pele seja descartada adequadamente. Em um capô de fumaça, tente completamente o extrato de solvente sob um fluxo de vapor de nitrogênio.Em seguida, reconstituir a amostra seca com 400 microliters de tampão de ensaio e 100 microliters de etanol de grau 100% analítico. Para fazer os controles, selecione primeiro amostras de animais com exposição conhecida ao estressor. Para fazer uma piscina de extratos, pegue 20 microliters de extrato de cada amostra até que um volume total de 200 microlitres seja obtido.Armazene a piscina de extrato a menos 80 graus Celsius até que esteja pronto para executar os ensaios. Quando estiver pronto, obtenha o fator de diluição para os pontos de ligação de 30% e 70% do gráfico de paralelismo para o extrato contra o padrão cortisol, e use tampão de ensaio para diluir o pool de amostras adequadamente para criar os controles altos e baixos. O uso de um kit comercial de cortisol configurou uma placa de tira de 96 poços, incluindo amostras, controles, padrões de cortisol, poços de ligação inespecífica e poços de ligação máxima de acordo com as instruções do fornecedor.Use a folha de layout da placa incluída no folheto do kit para listar as posições das amostras, controles e padrões. Em seguida, siga o processo de extração hormonal de pele descrito anteriormente para obter pele de coala extraída de 100% de metanol. Prepare os reagentes do kit de cortisol de acordo com as instruções do fabricante.Pipeta 50 microliters de amostras ou padrões nos poços da placa. Pipeta 75 microliters de tampão de ensaio nos poços de ligação não específica, e 50 microliters de tampão de ensaio nos poços de ligação máxima. Usando uma pipeta repetidor adicione 25 microliters do cortisol conjugado a cada poço.Em seguida, pipeta 25 microliters do anticorpo cortisol em cada poço, exceto os poços de ligação inespecífica. Bata suavemente nas laterais da placa para garantir que os reagentes estejam bem misturados. Cubra a placa com o selador da placa e use um agitador orbital para agitar à temperatura ambiente por uma hora.Depois disso, remova o selo da placa e aspire a placa do poço lavando cada poço com 300 microliters de tampão de lavagem quatro vezes. Em seguida, seque a placa batendo-a em toalhas absorventes limpas. Pipeta 100 microliters de substrato de tetrametilbenzidina para cada poço.Coloque o selador de placa na placa do poço e incubar em temperatura ambiente por 30 minutos. Depois disso, pipetas 50 microliters de solução stop em cada poço. Transfira a placa para um leitor de placas capaz de ler 450 nanômetros e calcule a concentração hormonal final conforme descrito no protocolo de texto.Neste estudo, a detecção de ensaios de metabólitos hormonais de interesse é determinada por meio do paralelismo. Na curva de paralelismo, o ponto de ligação de 50% determina o fator de diluição amostral na curva padrão. Como se pode ver, os extratos de 100% etanol e isopropanol 100% não proporcionaram deslocamento paralelo em relação ao padrão cortisol.No entanto, o extrato de 100% de metanol fornece deslocamento paralelo contra o padrão cortisol. Os coeficientes de variação intra e inter-ensaio são determinados a partir de extratos de amostra de alta e baixa ligação executados em todos os ensaios. Os controles internos de baixa ligação são vistos como um pool de extrato de coala puro, enquanto os controles internos de alta ligação são vistos como uma piscina de extrato de coala diluído de um para dois.A associação entre cada extrato de solvente e padrão de cortisol é então determinada por meio de um plot de regressão. O extrato de 100% de metanol fornece a melhor linha de regressão com o maior valor R-quadrado em comparação com os extratos de 100% etanol e isopropanol de 100%. É importante lembrar que a etapa de lavagem amostral deve ser realizada antes de moer as amostras para evitar a perda de hormônios esteroides.Após este procedimento, podemos medir outros hormônios esteroides, como hormônios reprodutivos para olhar as interações entre estresse e reprodução em coalas. Esta técnica fornece uma nova ferramenta para o campo emergente da fisiologia da conservação, permitindo a avaliação não invasiva do cortisol na pele de coala. O kit comercial de cortisol fornece reagentes em quantidade minuciosa.No entanto, é importante usar equipamentos de proteção individual para minimizar a lesão a si mesmo durante a condução deste procedimento laboratorial.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Cortisol Measurement in Koala (Phascolarctos cinereus) Fur

Measurement of Basal and Forskolin-stimulated Lipolysis in Inguinal Adipose Fat Pads

Medição da lipólise basal e estimulada por Forskolin em almofadas de gordura adiposa inguinal

Lipolysis is a process by which the lipid stored as triglycerides in adipose tissues are hydrolyzed into glycerol and fatty acids. This article describes ...

Bioquímica

Preparation of Keratin Hydrolysate from Chicken Feathers and Its Application in Cosmetics

Preparação de hidrolisado de queratina de penas de galinha e sua aplicação em cosméticos

Keratin hydrolysates (KHs) are established standard components in hair cosmetics. Understanding the moisturizing effects of KH is advantageous for ...

Measurement of Mitochondrial Oxygen Consumption in Permeabilized Fibers of Drosophila Using Minimal Amounts of Tissue

Medição do consumo de oxigênio mitocondrial nas fibras Permeabilized da drosófila usando quantidades mínimas de tecido

The fruit fly, Drosophila melanogaster, represents an emerging model for the study of metabolism. Indeed, drosophila have structures homologous to human ...

In Situ Measurement and Correlation of Cell Density and Light Emission of Bioluminescent Bacteria

In Situ Measurement and Correlation of Cell Density and Light Emission of Bioluminescent Bacteria

In Situ Medição e correlação da densidade celular e emissão de luz de bactérias bioluminescentes

There is a considerable number of bacterial species capable of emitting light. All of them share the same gene cluster, namely the lux operon. Despite ...

Measurement of Ion Concentration in the Unstirred Boundary Layer with Open Patch-Clamp Pipette: Implications in Control of Ion Channels by Fluid Flow

Medição da concentração de íons na camada limite Unstirred com pipeta aberto Patch-Clamp: implicações no controle de canais iônicos por fluido fluem

Fluid flow is an important environmental stimulus that controls many physiological and pathological processes, such as fluid flow-induced vasodilation. ...

Affinity Purification of Chloroplast Translocon Protein Complexes Using the TAP Tag

Purificação da afinidade do cloroplasto Translocon proteínas complexos usando a marca de torneira

Chloroplast biogenesis requires the import of thousands of nucleus-encoded proteins into the plastid. The import of these proteins depends on the ...

Direct Measurement of KDM1A Target Engagement Using Chemoprobe-based Immunoassays

Medição direta do KDM1A Target Engagement usando imunoensaios baseados em Quimiosonda

The assessment of the target engagement, defined as the interaction of a drug with the protein it was designed for, is a basic requirement for the ...

Plant Sample Preparation for Nucleoside/Nucleotide Content Measurement with An HPLC-MS/MS

Preparação da amostra de plantas para medição de conteúdo nucleoídeo/nucleotídeo com hplc-MS/MS

Nucleosides/nucleotides are building blocks of nucleic acids, parts of cosubstrates and coenzymes, cell signaling molecules, and energy carriers, which ...

Measurement of Fatty Acid &#946;-Oxidation in a Suspension of Freshly Isolated Mouse Hepatocytes

Measurement of Fatty Acid ÃƒÅ½Ã‚Â²-Oxidation in a Suspension of Freshly Isolated Mouse Hepatocytes

Medição do ácido graxo β-oxidação em uma suspensão de hepatócitos de rato recém-isolados

Fatty acid &#946;-oxidation is a key metabolic pathway to meet the energy demands of the liver and provide substrates and cofactors for additional ...

Time-resolved F&#246;rster Resonance Energy Transfer Assays for Measurement of Endogenous Phosphorylated STAT Proteins in Human Cells

Time-resolved FÃƒÆ’Ã‚Â¶rster Resonance Energy Transfer Assays for Measurement of Endogenous Phosphorylated STAT Proteins in Human Cells

Ensaios de transferência de energia de ressonância de Förster para medição de proteínas STAT fosforilatos endogensas em células humanas

The Janus kinase (JAK)/signal transducer and activator of transcription (STAT) signaling pathway plays a crucial role in mediating cellular responses to ...