Name: a human blood-brain interface model to study barrier crossings by pathogens or medicines and their interactions with the brain
Uploaded: 2019-04-09T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Human Blood-Brain Interface Model to Study Barrier Crossings by Pathogens or Medicines and Their Interactions with the Brain at JoVE.com

هذه الدراسة وأيد بالمنح الداخلية من معهد باستور، بما في ذلك منحة إينسيتاتيفي (PTR 435) ومنحة قدمت "Contrat de مناصرة à la بحوث" سانوفي باستور لمعهد باستور. ) أ (دا كوستا وأيده منح شركة سانوفي-باستور وفلوريان باكا هو المستفيد منحة الدكتوراه المقدمة من ANRT (الرابطة الوطنية للبحوث وتكنولوجي de la). ونحن مدينون "العلاقات العامة" بيار أوليفييه كورو والدكتور ميلر فلورنسا لإجراء مناقشات مفيدة.

1-خلية ثقافة عمل نتيرا/CL2. D1 إلى إعداد ثقافة المشارك هنيورونس بعد الانقسامية وهاستروسيتيس (NT2-n/A)
ملاحظة: هذا هو مكون مينيبرين (الشكل 1).
<ol><li>استزراع في Ntera/Cl2.D1<ol>
<li>إزالة قنينة خلايا المجمدة من خزان النتروجين السائل. الحفاظ على الجليد.</li>
		<li>ذوبان الجليد الخلاي?...

في هذه المقالة قد دللنا على كيفية بناء سيلولو في الدم/الدماغ واجهة, BBB-مينيبرين، من خلال الجمع بين نموذج BBB وثقافة مختلطة الدماغ الخلايا الدماغية (مينيبرين) في مجموعة واحدة. وهذا النظام بيولوجيا ذات الصلة، من السهل إعداد والمجربون مدربة تدريبا جيدا في خلية ثقافة للتعامل.
أما ...

الدماغ يفصلها عن الدوران الجهازي بنية غير المسامية التي تحد من التبادل بين حمة المخ، والدم، ويسمى حاجز الدم في الدماغ (BBB). معظمها تتألف من خلايا بطانة الأوعية الدموية الدماغية، بي بي بي بشكل حيوي تتفاعل مع astrocytes وارتشاح microglia والخلايا العصبية من حمة المخ المجاورة. أن المهام الرئيسية الثلاث ل BBB هي إنشاء وصيانة التوازن الأيوني للوظائف العصبية، إمداد الدماغ بالمواد المغذية، والحماية من الإصابات السمية أو دخول مسببات الأمراض1،2، التي تسهم في الحفاظ على التوازن في الدماغ ولها وظائف3. هذا الحاجز كفاءة حتى أن المخدرات قليلة فقط يمكن عبر4،بي بي بي5. وفي الوقت الحاضر، الأساليب المتاحة للتنبؤ بما إذا كان جزيء سيتم تمرير BBB ومنتشر في المخ تتكون من السابقين فيفو الدراسات المتعلقة بتتبع الصورة المادية، تشريح الجثة في دماغ متطوعين من البشر بالتصوير بالرنين المغناطيسي (التصوير بالرنين المغناطيسي) أو الحيوانات الأليفة (الانبعاث المركز التصوير المقطعي) أو الدوائية والدراسات السريرية الحرائك الدوائية في الحيوانات6،،من78. هذه التقنيات ونماذج لها بعض القيود، مثل القرار محدودة من الحيوانات الأليفة وانخفاض حساسية التصوير بالرنين المغناطيسي6،8، صعوبة تحديد حجم الجزيئات (أي جزيئات الأجسام المضادة التي تعتمد على سبيل المثال) أن سوء اختراق الدماغ7، الإكلينيكية دراسات تكلفة مرتفعة، ومنتجع للتجارب الحيوانية.
والنقطة الأخيرة مهم لأنه، حسب 3R القواعد (الاستبدال والحد وصقل التجارب الحيوانية) طلبت الإدارات التنظيمية أن الباحثين على وجه السرعة إيجاد بديل علمياً دقيقا للحيوان التجريب9،10،11،،من1213،،من1415.
على مدى العقود الماضية، واقترحت عدة نماذج في المختبر من بي بي بي16،،من1718 بزراعة على تصفية غشاء إدراج خلايا بطانية من مختلف الأنواع مثل الماوس والفئران والأبقار والخنازير. وبقدر ما يتعلق بالجنس البشري، توافر الخلايا الأولية النادرة والصعبة دفعت الباحثين تطوير نماذج البشرية تستند إلى خلايا الدماغ مخلدة بطانية أو الخلايا الجذعية المشتقة من الإنسان19،20، 21. هذه الحواجز هي البدائل المناسبة في المختبر من BBB شريطة أن يعربون عن علامات خلية بطانية، علامات تقاطع ضيق، والناقلين افلوكس، ذائبة الناقلين، المستقبلات، والاستجابة ل المحفزات غشائي 20. كانت جزيئي عدد قليل من النماذج بي بي بي باستخدام تصفية غشاء إدراجات المغلفة مع خلايا بطانية وأنواع الخلايا الأخرى (أي، أستروسيتيس، والخلايا العصبية أو بيريسيتيس22،23،24). والهدف من هذه الثقافات المشتركة زيادة الخصائص الفيزيائية BBB بالاستفادة من إفراز العوامل القابلة للذوبان astrocytes/الخلايا العصبية أو بيريسيتيس.
ومع ذلك، يتضمن أيا من هذه النماذج حمة الدماغ الدراسة والتنبؤ بمصير مرشح المخدرات بعد أن اجتاز الحاجز. ولذلك، كان هدفنا بناء سيلولو في الدم/الدماغ واجهة, BBB-مينيبرين، بالجمع بين نموذج BBB وثقافة من خلايا المخ المختلطة في مجموعة واحدة. BBB-مينيبرين يستخدم نظام ثقافة يتكون من عامل تصفية مسامية إدراجها في بئر لوحة الثقافة خلية مولتيويل. عامل التصفية فهي مغلفة بالخلايا هكميك/D3، خط خلية غشائي دماغ البشري قد ثبت موثوق بها للغاية لاختبار25،،من2627، لتشكيل BBB المخدرات بي بي بي. مينيبرين، التي هي ثقافة المشاركة متباينة من الخلايا العصبية البشرية و astrocytes المستمدة من28،خط الخلية NTera/Cl2.D129 مختلطة جنبا إلى جنب مع خط الخلية البشرية microglial Cl5 كم/30 بالنسبة المقابلة microglia مقابل نسب astrocytes العصبية ل الدماغ31، يزرع في الجزء السفلي من اللوحة جيدا.
إلى جانب دراسة مرور المخدرات عبر BBB ومصيرهم في حمة، واجهة الدم في الدماغ في طراز سيلولو يمكن أن تكون أداة قوية لمعالجة دخول مسببات الأمراض في الدماغ (نيوروينفاسيفينيس)، التشتت في الدماغ (نيوروتروبيسم) والسمية (الفوعة العصبية) أنها يمكن أن تمارس على خلايا المخ الحشوي. ستستفيد من تطوير الكفاءة في نموذج سيلولو الدراسات الفوعة العصبية ونيوروينفاسيفينيس ويكون مفيداً لتحل محل النماذج الحيوانية. استخدام طقم BBB-مينيبرين32، أثبتنا النمط الظاهري نيوروينفاسيفي من طفرات الفيروسية النادرة التي تراكمت في سلالة الفيروس "تم الفرنسية" من "فيروس الحمى الصفراء" (أي، الهولندي-يفف،من3334) المستخدمة لإعداد وقف لقاح يفف الحي ومرور بيوموليكولي نيوروريجينيراتيفي ومحصن تسمى نيوروفيتا (يشار بولاية نيفادا من الآن فصاعدا في المخطوطة)35. لأن NV بطبيعة الحال لا يعبر غشاء الخلية ولا بي بي بي، نيفادا تنصهر مع الجزء المتغير (فة) من جسم واحد في سلسلة من اللاما تعبر الأغشية البيولوجية بما في ذلك بي بي بي ويعمل كخلية اختراق جزيء (CPM)36. ويبدو ممتلكات CPM فة يتوقف عند نقطة isoelectric وطول فة37.
هذا في اختبار سيلولو يجب أن تجعل من الممكن لفرز الجزيئات التي يمكن أن يحتمل أن تعبر BBB قبل الاضطلاع الحرائك الدوائية وتحليل الدوائية في الحيوانات، ومن الناحية المثالية في نفس الوقت لتكون قادرة على التنبؤ بسلوكهم في الجهاز العصبي حمة. هذا النظام بيولوجيا ذات الصلة ويسهل إعداد والتعامل مع من مهنيين مدربين تدريبا جيدا في خلية ثقافة26،29،،من3038. الفائدة من هذا القبيل في اختبار سيلولو سيكون من شقين هما: خفض تكاليف الاختبارات الإكلينيكية من ناحية، والحد من استخدام اختبار الحيوانات من ناحية أخرى.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>12 well plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-fluoro-2&#8217;deoxyuridine</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>F0503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>85mm Petri Dish</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83-3902-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-Nf200</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>N4142</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#946;-mercapto-ethanol</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>M3148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CHME/Cl5</td>
			<td>Unit&#233; de Neuroimmunologie Virale</td>
			<td>On request to Dr Lafon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CMC</td>
			<td>Calbiochem</td>
			<td>217274</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cytosine &#946;-D-arabinofuranoside</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>C1768</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dark 96 well plates</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3915</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM F12</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>31330-038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMSO</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>D2650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endogro IV</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SCME004</td>
			<td>endothelial cell medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Carlo Erba</td>
			<td>529121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>SV30015-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>252549</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GIEMSA</td>
			<td>RAL Diagnostic</td>
			<td>320310</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat-Anti Mouse</td>
			<td>Jackson Immuno Research</td>
			<td>115-545-003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Goat-Anti Rabbit</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>R37117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS with Ca2+-Mg2+</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>14025-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hCMEC/D3</td>
			<td>Cedarlane</td>
			<td>CLU512</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepes 1M</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>15630-070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hoescht 33342</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>33263</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laminine</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>L6274</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamin</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>25030-024</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lucifer Yellow</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>L0259</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM 10X</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>21430</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MEM 1X</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>42360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ntera/Cl2D.1</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1973</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>15714</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS without Ca2+-Mg2+</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>14190</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS-Ca2+-Mg2+</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>14040-091</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>Eurobio</td>
			<td>CXXPES00-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Poly-d-Lysine</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>P1149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolong Gold</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>P36930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Qiashredder</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>79656</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Collagen I</td>
			<td>Cultrex</td>
			<td>3443-100-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retinoic Acid All-Trans</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>R2625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNA purification kit</td>
			<td>QIAGEN</td>
			<td>74104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SDS</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>L4509</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium bicarbonate 5.6%</td>
			<td>Eurobio</td>
			<td>CXXBIC00-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Pyruvate</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>11360</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 Cell+ Flask</td>
			<td>Sarstedt</td>
			<td>83-1813-302</td>
			<td>Tissue culture polystyrene flask with specific surface treatment (Cell+) for sensitive adherent cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transwell</td>
			<td>Corning</td>
			<td>3460</td>
			<td>polyester porous membrane culture inserts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>T3924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra Pure Water</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>10977-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uridine</td>
			<td>Merck-Sigma Aldrich</td>
			<td>U3750</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Versene</td>
			<td>Thermofisher Scientific</td>
			<td>15040-033</td>
			<td>EDTA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YFV-FNV</td>
			<td>IP Dakar</td>
			<td>Vaccine vial</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a human blood-brain interface model to study barrier crossings by pathogens or medicines and their interactions with the brain

وقت مبكر فحص الأدوية العصبي على صلة وموثوق بها في طراز بي بي بي سيلولو على الاختراق وتفاعلها مع الحاجز ولحمة الدماغ ما زالت حاجة غير ملباة. ولسد هذه الفجوة، قمنا بتصميم 2D في نموذج سيلولو، بي بي بي-مينيبرين، من خلال الجمع بين من بوليستر في الأغشية المسامية الثقافة إدراج البشرية BBB النموذجي مع مينيبرين التي شكلتها ثقافة ثلاثي لخلايا الدماغ البشري (الخلايا العصبية وخلايا microglial astrocytes). BBB-مينيبرين سمح لنا باختبار نقل مرشح المخدرات محصن (على سبيل المثال، نيوروفيتا)، عن طريق بي بي بي، لتحديد استهداف محددة لهذا الجزيء على الخلايا العصبية، وإظهار أنه كان الحفاظ على الممتلكات محصن من المخدرات بعد المخدرات قد عبرت بي بي بي. كما أثبتنا أن BBB-مينيبراين يشكل نموذجا جديرا باهتمام للكشف عن مرور جزيئات الفيروس عبر حاجز غشائي الخلايا ومراقبة العدوى من مينيبراين بجسيمات الفيروس نيوروينفاسيفي. BBB-مينيبرين نظام موثوق به، سهلة للتعامل مع الباحثين المدربين في خلية ثقافة التكنولوجيا والتنبؤيه لتعمل خلايا الدماغ بعد العلاج أو الإهانة. الفائدة من هذا القبيل في اختبار سيلولو ستكون ذات شقين: إدخال ديريسكينج خطوات مبكرة في وضع المخدرات من جهة، والحد من استخدام الحيوانات في التجارب من ناحية أخرى.

BBB-مينيبرين سيلولو في تجريبية النموذجية لواجهة الدم في الدماغ.
يتم إعداد BBB-مينيبرين على نظام إدراج الثقافة غشاء البوليستر لتقليد حجرة دم في الطابق العلوي وحجرة الدماغ في الطابق السفلي من الواجهة الدم في الدماغ (الشكل...

Watch this Scientific Journal Video about A Human Blood-Brain Interface Model to Study Barrier Crossings by Pathogens or Medicines and Their Interactions with the Brain at JoVE.com

A Human Blood-Brain Interface Model to Study Barrier Crossings by Pathogens or Medicines and Their Interactions with the Brain

نقدم هنا بروتوكول وصف الإعداد سيلولو في بي بي بي (حاجز الدم في الدماغ)-إدراج الثقافة البوليستر مسامية الغشاء مينيبرين النظام بغية تقييم نقل الجزيئات الحيوية أو العوامل المعدية عبر BBB بشرية وعلى فسيولوجية تؤثر على خلايا المخ المجاورة.

نموذج واجهة دماغ دم البشري لدراسة نقاط عبور الحاجز بمسببات الأمراض أو الأدوية وتفاعلاتها مع الدماغ

The early screening of nervous system medicines on a pertinent and reliable in cellulo BBB model for their penetration and their interaction with the ...

هذا الدم البشري في الدماغ نموذج واجهة مفيدة لدراسة نقل الجزيئات في النظام العصبي. وكذلك لدراسة الميكروبات تصل إلى ورم ألم الدماغ المصاب. إضافة الدماغ المصغرة إلى هذا حاجز الدم في الدماغ أو نموذج BBB يسمح لدراسة مسببات الأمراض لدينا والجزيئات التي تسبب BBB تتصرف في الدماغ.سيكون إجراء الدكتوراه هو فلوريان باكاو، طالب الدكتوراه لمختبري. لإعداد BBB مصغرة غشاء البوليستر الدماغ ثقافة إدراج الجهاز، وتمييع الخلايا إلى خمس مرات 10 إلى الخلايا الرابعة لكل إدراج تركيز الخلايا البطانية غير مكتملة المتوسطة وإضافة الحجم المناسب من الخلايا إلى كل ثقافة غشاء البوليستر إدراج في لوحة 12 بئر. ثم ضع إدراج وحاضنة ثقافة الخلية حتى تصل الخلايا إلى 100٪ التقاء.عقد لوحة 12 جيدا مع ملليلتر واحد من بولي دي ليسين لها جيدا لمدة أربع ساعات في درجة حرارة الغرفة. تليها ملليلتر واحد من اللامينين في كل ليلة. استبدال laminin مع ملليلتر واحد من متوسطة الخلية البطانية تكملها 5٪ مصل البقر الجنين، أو FBS.ضع المكان في حاضنة لمدة ساعة واحدة. لإعداد الحبوب المصغرة برفق تبسينيزي الخلايا العصبية البشرية في استنساخ CHME خمس خلايا. إقران الكريات الخلية مع خلية بطانةية كاملة المتوسطة.بعد عد في 3.6 مرات 10 إلى الخلايا العصبية الخامسة والخلايا الفلكية إلى 0.4 مرات 10 إلى استنساخ CHME الخامس خمس خلايا في بئر لديها 12 لوحة جيدا. وبذر لوحة 12 جيدا. لبناء الدماغ مصغرة BBB 24 ساعة بعد البذر استبدال المتوسطة المستخدمة مع خلية بطانة كاملة جديدة المتوسطة ونقل الخلايا البطانية الأوعية الدموية الدقيقة الدماغية المغلفة البوليستر ثقافة الغشاء إدراج على خلايا الدماغ المصغرة.ثم، ضع جهاز الدماغ BBB العديد في الحاضنة. للتحقق من صحة نفاذية الدماغ البطانية مصغرة BBB إضافة 1.5 ملليلتر من مخزن النقل في بئر إلى لوحة جديدة 12 جيدا. والوجه كل مرشح رأسا على عقب لإزالة بعناية المتوسطة دون التأثير على حاجز الخلية البطانية.ضع كل مرشح في بئر واحد من لوحة النقل العازلة المملوءة، وإضافة 0.5 ملليلتر من لوسيفر الصفراء في كل بئر. ثم ضع اللوحة في الحاضنة لمدة 10 دقائق قبل نقل المرشحات إلى مخزن نقل مؤقت جديد ملأ 12 لوحة جيدة. بعد إعداد جهاز الدماغ BBB كثيرة كما هو موضح، إضافة 3500 وحدات platforming من سلالة الفيروس العصبي الفرنسية من فيروس الحمى الصفراء المخفف و 50 ميكرولترات من 2٪ FPS بطانة الخلايا المتوسطة، بعناية فائقة، على رأس المقصورة اللمب.تلقيح السيطرة BBB الدماغ المصغرة مع 50 ميكرولترات من 2٪ FBS بطانة الخلايا المتوسطة دون فيروس. ثم وضع الفيروس كشف BBB العديد من أجهزة الدماغ في الحاضنة لمدة 24 ساعة. في اليوم التالي، قم بإزالة إدراج لتحديد نفاذية الخلية البطانية ورفيق كذلك كما أظهرت تماما.حفظ ملليلتر واحد من عينة من كل بئر لتحديد titer الفيروس في المقصورة الوسطى. تحت إدراج بلطف لتجنب تسرب المقصورة الإنارة في المقصورات abluminal. لدراسة نقل الخلايا العصبية التي تستهدف الجزيئات الحيوية عبر حاجز الدم في الدماغ، إضافة جزيء الحيوي من الفائدة إلى إدراج وإعادة لوحة إلى الحاضنة ثقافة الخلية.بعد 24 ساعة إدراج عن بعد وتحديد نفاذية البطانية. ثم وصمة عار العديد من خلايا الدماغ مع الجسم المضاد المناسب للكشف عن وجود جزيء الحيوي من الفائدة داخل الدماغ مصغرة. الخلايا الدموية الوعائية الدقيقة الدماغية البشرية تعبر عن جميع المجموعات الفرعية من rececptors، الناقلين Efflux أو الناقلين التي هي البروتينات الرئيسية ذات الصلة لوظائفها البيولوجية.بعض سلالة الفيروس المداري العصبي الفرنسي من فيروس الحمى الصفراء يمكن أن تعبر حاجز الدم في الدماغ في 24 ساعة. ثم تضخّم الفيروسات خلال اليومين القادمين من خلال تكاثر الفيروس داخل خلايا الدماغ. وعلاوة على ذلك، يتم تحفيز التعبير عن المؤشرات الحيوية الفيروسية محددة عندما يتم تمرير هذه السكان الفيروسية الغازية العصبية تسلسليا على خلايا الدماغ المصغرة ويرتبط بدقة إلى الحمل الفيروسي.بعد إضافتها إلى حد الخلية المقصورة اختراق جزيء Neuro-Tag Neurovita يعبر حاجز الدم في الدماغ وقادرة على استهداف الخلايا العصبية البشرية. الخلية اختراق جزيء العصبية علامة دلتا neurovita يعبر حاجز الخلايا البطانية، ولكن يستهدف أقل كفاءة الخلايا العصبية البشرية. بعد إضافته إلى المقصورة الوسطى الصغيرة ، تخترق الخلية جزيء Neuro-Tag Neurovita يعبر حاجز الدم في الدماغ وقادرة على تجديد محاور الخلايا العصبية البشرية ، بعد إصابتها.على النقيض من الخلية اختراق جزيء العصبية الوسمة العصبية دلتا، شكل غير نشط من Neurovita. عند تطبيقها بعد خلية الخدش محور عصبي اختراق جزيء Neuro-Tag Neurovita يؤدي إلى الحماية العصبية من الخلايا العصبية الجرحى وتجديد x المناطق. بدقة من أجل الممارسات الجيدة.لا أكثر من استخدام الممرات الخلية I. في محاولة للحفاظ على بعض مظاهر المتوسط والمناطق والتحقق من عدم وجود mycoplasma. التفاعلات بين الدماغ المصغر والأدوية هي الميكروبات ذات الأهمية يمكن دراسة المزيد من قبل النص الذي يُسمّى هذا علم الأحياء أو الكلاسيكي الذي يُسمى التقنيات.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Generation of an Immortalized Murine Brain Microvascular Endothelial Cell Line as an In Vitro Blood Brain Barrier Model

Generation of an Immortalized Murine Brain Microvascular Endothelial Cell Line as an In Vitro Blood Brain Barrier Model

جيل من الاوعية الدموية الدقيقة في الدماغ الفئران مخلد الخط الخلية البطانية باعتبارها<em&gt; في المختبر</em&gt; حاجز الدم في الدماغ الموديل

Epithelial and endothelial cells (EC) are building paracellular barriers which protect the tissue from the external and internal environment. The ...

Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

تصوير الأعصاب وظيفية عن طريق الموجات فوق الصوتية تعطيل حاجز الدم في الدماغ والتصوير بالرنين المغناطيسي المنغنيز معززة لل

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

Assessment of Blood-brain Barrier Permeability by Intravenous Infusion of FITC-labeled Albumin in a Mouse Model of Neurodegenerative Disease

تقييم نفاذية حاجز الدم في الدماغ بالتسريب الوريدي الزلال المسمى فيتك في نموذج ماوس لأمراض الأعصاب

Disruption of blood-brain barrier (BBB) integrity is a common feature for different neurological and neurodegenerative diseases. Although the interplay ...

High-resolution Confocal Imaging of the Blood-brain Barrier: Imaging, 3D Reconstruction, and Quantification of Transcytosis

تصوير [كنفوكل] عالية الدقة لحاجز الدم في الدماغ: التصوير، وإعادة البناء ثلاثي الأبعاد، والتقدير الكمي ترانسسيتوسيس

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic multicellular interface that regulates the transport of molecules between the circulation and the brain. ...

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

An In Vivo Assessment of Blood-Brain Barrier Disruption in a Rat Model of Ischemic Stroke

تقييم في فيفو لتعطيل حاجز الدم في الدماغ في نموذج الفئران من السكتة الدماغية

Ischemic stroke leads to vasogenic cerebral edema and subsequent primary brain injury, which is mediated through destruction of the blood-brain barrier ...

A Benchtop Approach to the Location Specific Blood Brain Barrier Opening using Focused Ultrasound in a Rat Model

نهج Benchtop لموقع محدد فتح حاجز الدم الدماغ باستخدام الموجات فوق الصوتية المركزة في نموذج الفئران

Stereotaxic surgery is the gold standard for localized drug and gene delivery to the rodent brain. This technique has many advantages over systemic ...

Measuring Post-Stroke Cerebral Edema, Infarct Zone and Blood-Brain Barrier Breakdown in a Single Set of Rodent Brain Samples

قياس الوذمة الدماغية بعد السكتة الدماغية، منطقة إنفاركت وانهيار حاجز الدم والدماغ في مجموعة واحدة من عينات الدماغ القوارض

One of the most common causes of morbidity and mortality worldwide is ischemic stroke. Historically, an animal model used to stimulate ischemic stroke ...

Focused Ultrasound Induced Blood-Brain Barrier Opening for Targeting Brain Structures and Evaluating Chemogenetic Neuromodulation

الموجات فوق الصوتية المركزة التي تحفز فتح الحاجز الدموي الدماغي لاستهداف هياكل الدماغ وتقييم التعديل العصبي الكيميائي الوراثي

Acoustically Targeted Chemogenetics (ATAC) allows for the noninvasive control of specific neural circuits. ATAC achieves such control through a ...

Transendothelial Resistance Measurement to Assess Cell Barrier Integrity

Barrier Functional Integrity Recording on bEnd.3 Vascular Endothelial Cells via Transendothelial Electrical Resistance Detection

Applications of TEER Detection to Assess Cell Barrier Integrity (Video) | JoVE

تسجيل السلامة الوظيفية للحاجز على bEnd.3 الخلايا البطانية الوعائية عبر اكتشاف المقاومة الكهربائية عبر بطانة الرحم

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic physiological structure composed of microvascular endothelial cells, astrocytes, and pericytes. By coordinating ...

A 3D Blood-Brain Barrier Model Derived from Human Pluripotent Stem-Cells

Reconstruction of the Blood-Brain Barrier In Vitro to Model and Therapeutically Target Neurological Disease

A Personalized Approach Towards Investigating Alzheimer's Disease Using an In Vitro Blood-Brain Barrier Model (Video) | JoVE

إعادة بناء الحاجز الدموي الدماغي في المختبر لنمذجة الأمراض العصبية واستهدافها علاجيا

The blood-brain barrier (BBB) is a key physiological component of the central nervous system (CNS), maintaining nutrients, clearing waste, and protecting ...