Name: 3d analysis of multi-cellular responses to chemoattractant gradients
Uploaded: 2019-05-24T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about 3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door toelagen aan AJE (NSF PD-11-7246, de Stichting van het onderzoek van de borstkanker (BCRF-17-048), en NCI U54 CA210173) en AL (U54CA209992).

Alle dieren werk werd uitgevoerd in overeenstemming met de protocollen beoordeeld en goedgekeurd door de Institutional Animal zorg en het gebruik Comite, Johns Hopkins University, school of Medicine.
1. fabricage van het mesofluidic apparaat
<ol><li>Ontwerp het masker van de mal voor PDMS apparaat met behulp van een 3D-CAD-software.</li>
	<li>Print de mal met behulp van stereolithography apparatuur met een thermisch resistente hars. Opmerking: de hier beschreven procedures werden uitgevoe...

<ol>
	<li>Humphrey, J. D., Dufresne, E. R., Schwartz, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanotransduction+and+extracellular+matrix+homeostasis.">Mechanotransduction and extracellular matrix homeostasis.</a> Nature Reviews: Molecular Cell Biology. 15 (12), 802-812 (2014).</li><li>Schwartz, M. A., Schaller, M. D., Ginsberg, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrins:+emerging+paradigms+of+signal+transduction.">Integrins: emerging paradigms of signal transduction.</a> Annual Review of Cell and Developmental Biology. 11, 549-599 (1995).</li><li>Yin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+Stem+Cell+Organoids.">Engineering Stem Cell Organoids.</a> Cell Stem Cell. 18 (1), 25-38 (2016).</li><li>Doyle, A. D., Carvajal, N., Jin, A., Matsumoto, K., Yamada, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+3D+matrix+microenvironment+regulates+cell+migration+through+spatiotemporal+dynamics+of+contractility-dependent+adhesions.">Local 3D matrix microenvironment regulates cell migration through spatiotemporal dynamics of contractility-dependent adhesions.</a> Nature Communications. 6, 8720 (2015).</li><li>Meyvantsson, I., Beebe, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+culture+models+in+microfluidic+systems.">Cell culture models in microfluidic systems.</a> Annual Review of Analytical Chemistry (Palo Alto, Calif). 1, 423-449 (2008).</li><li>Bhatia, S. N., Ingber, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+organs-on-chips.">Microfluidic organs-on-chips.</a> Nature Biotechnology. 32 (8), 760-772 (2014).</li><li>Zervantonakis, I. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+microfluidic+model+for+tumor+cell+intravasation+and+endothelial+barrier+function.">Three-dimensional microfluidic model for tumor cell intravasation and endothelial barrier function.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (34), 13515-13520 (2012).</li><li>Barkefors, I., Thorslund, S., Nikolajeff, F., Kreuger, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+fluidic+device+to+study+directional+angiogenesis+in+complex+tissue+and+organ+culture+models.">A fluidic device to study directional angiogenesis in complex tissue and organ culture models.</a> Lab on a Chip. 9 (4), 529-535 (2009).</li><li>Hou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+lapse+investigation+of+antibiotic+susceptibility+using+a+microfluidic+linear+gradient+3D+culture+device.">Time lapse investigation of antibiotic susceptibility using a microfluidic linear gradient 3D culture device.</a> Lab on a Chip. 14 (17), 3409-3418 (2014).</li><li>Ellison, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-cell+communication+enhances+the+capacity+of+cell+ensembles+to+sense+shallow+gradients+during+morphogenesis.">Cell-cell communication enhances the capacity of cell ensembles to sense shallow gradients during morphogenesis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 113 (6), E679-E688 (2016).</li><li>Nguyen-Ngoc, K. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+culture+assays+of+murine+mammary+branching+morphogenesis+and+epithelial+invasion.">3D culture assays of murine mammary branching morphogenesis and epithelial invasion.</a> Methods in Molecular Biology. 1189, 135-162 (2015).</li></ol>

De fabricage van PDMS mallen werd uitgevoerd met behulp van een commerciële 3D print service, maar kan ook worden bereikt door een high-end 3D-printer in-House. Onder verschillende 3D fabricagemethoden, stereolithography wordt aanbevolen voor hoge resolutie schimmel generatie. Omdat PDMS uitharding op hoge temperatuur (80 °C) plaatsvindt, moeten de materialen voldoende thermisch resistent zijn, die expliciet moeten worden gespecificeerd, als het afdrukken uitbesteed is. Een thermische post-Cure kan worden besproken met...

In fysiologische omgeving, cellen zijn ingebed in een extracellulaire matrix (ECM) en blootgesteld aan een overvloed aan biomoleculen. Interacties tussen cellen en de omliggende omgeving reguleren intracellulaire processen die diverse fenotypes beheersen, waaronder migratie, groei, differentiatie en overleving1,2. Er is veel geleerd over cellulair gedrag in een conventionele 2D-cel cultuur. Echter, met de komst van intravital Imaging en experimenten met cellen ingebed in 3D-hydrogels, belangrijke verschillen in cel gedrag zijn erkend in de vereenvoudigde 2D in vitro culturen versus 3D-weefsel-achtige omgevingen. Terwijl de cellen interageren met ECM vezels en de betekenis van hun mechanische eigenschappen binnen de 3D-matrix, de materiële stijfheid van de gel is niet een volledig onafhankelijke variabele in een 2D in vitro-systeem. De dimensionaliteit verandert focal adhesie vorming, wat resulteert in verschillende cel morfologie en gedrag. Bovendien zijn cellen op een 2D-oppervlak blootgesteld aan minder signalering cues dan cellen open voor alle richtingen in 3D.
Deze beperkingen hebben de belangen verhoogd voor 3D-systemen die de ruimtelijke en chemische complexiteit van levende weefsels vertegenwoordigen en beter voorspellen in vivo weefsel functies. Zij zijn ontwikkeld in vele vormen van organoids als zelf-assembleert cellulaire microstructuren aan cellen die willekeurig in ECM worden gestrooid3,4. Recente ontwikkelingen in de microfabricage technologieën hebben de komst van verschillende soorten 3D-cultuursystemen5,6,7,8,9 voor het bestuderen van fenotypische veranderingen en cellulaire reacties op oplosbare signalen; technologische belemmeringen beperken echter het wijdverbreide gebruik in onderzoekslaboratoria. In veel gevallen, de fabricageprocessen vereisen fotolitho grafie technieken en achtergrondkennis voor zachte lithografie. Bovendien moeten verschillende factoren worden gecontroleerd om met succes een apparaat te bouwen en om een optimale functie van het apparaat te bereiken over een lange periode van tijd.
Onze methode beschrijft hoe een 3D PDMS apparaat te construeren voor de integratie van cellen en multicellulaire organoids in een 3D-omgeving met gedefinieerde chemoattractant gradiënten en vervolgens te analyseren epitheel reacties op EFG10. Uit onze gegevens blijkt dat de capaciteit van organoids om te reageren op ondiepe EFG-gradiënten voortvloeit uit intercellulaire chemische koppeling door gap junctions. Het suggereert het potentieel van organoids voor een nauwkeurigere opsporing van zwakke en lawaaierige ruimtelijk gegradeerde ingangen. Het fabricageproces vereist geen cleanroom installatie, noch fotolitho grafie technieken. Echter, de 3D PDMS apparaat bevat de nodige factoren van 3D fysiologische omgeving. Deze methode zal nuttig zijn om 3D cellulair gedrag te bestuderen en het heeft groot onderzoekpotentieel met verschillende cel types, chemoattractants, en ECM combinaties.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:773px;" width="773">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">22mm x 22mm coverslip&#160;</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:135px;">12-542-B</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Collagen I, Rat</td>
			<td style="width:171px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:135px;">CB-40236</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Collagenease</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">C5138</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">COMSOL Multiphysics 4.2</td>
			<td style="width:171px;">COMSOL Inc</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td>Used for simulating diffusion dynamics</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">10x DMEM</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>D2429</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">DEME/F12</td>
			<td style="width:171px;">Thermo Fisher</td>
			<td>11330032</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">DNase</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">D4623</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">EGF Recombinant Mouse Protein</td>
			<td style="width:171px;">Thermo Fisher</td>
			<td style="width:135px;">PMG8041</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:171px;">Life technologies</td>
			<td>16140-071</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Fiji-ImageJ</td>
			<td style="width:171px;"></td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td>Used for measuring branching length and angles</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Gentamicin</td>
			<td style="width:171px;">GIBCO&#160;</td>
			<td style="width:135px;">5750-060</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">IMARIS</td>
			<td style="width:171px;">Bitplane</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Insulin</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:135px;">19278</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">Insulin-Transferrin-Selenium-X</td>
			<td style="width:171px;">GIBCO&#160;</td>
			<td style="width:135px;">51500</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">Low-lint tissue</td>
			<td style="width:171px;">Kimberly-Clark Professional</td>
			<td style="width:135px;">Kimtech wipe</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Mold Material</td>
			<td style="width:171px;">Proto labs</td>
			<td style="width:135px;">Accura SL5530&#160;</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">Mold printing equipment</td>
			<td style="width:171px;">Proto labs</td>
			<td style="width:135px;">Stereolithogrphy</td>
			<td style="width:269px;">Maximum dimension: 127mm x 127mm x 63.5mm, Layer thnickness: 0.0254mm</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Mold printing Service</td>
			<td style="width:171px;">Proto labs</td>
			<td style="width:135px;">Custom</td>
			<td style="width:269px;">https://www.protolabs.com/</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">NaOH</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>S2770</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:171px;">VWR</td>
			<td>16777-164P</td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">Spinning-disk confocal microscope</td>
			<td style="width:171px;">Solamere Technology Group</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:269px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:34px;width:199px;">Sylgard 184</td>
			<td style="width:171px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT&#160;</td>
			<td style="width:269px;">PDMS kit</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:199px;">Trypsin</td>
			<td style="width:171px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td>T9935</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

3d analysis of multi-cellular responses to chemoattractant gradients

Verschillende beperkingen van de 2D-cel cultuursystemen hebben gevonkt interesse in 3D-cel cultuur en analyse platforms, die beter zou nabootsen van de ruimtelijke en chemische complexiteit van levende weefsels en na te bootsen in vivo weefsel functies. Recente ontwikkelingen in de microfabricage technologieën hebben de ontwikkeling van 3D in vitro omgevingen vergemakkelijkt waarin cellen kunnen worden geïntegreerd in een goed gedefinieerde extracellulaire matrix (ECM) en een gedefinieerde set van oplosbare of matrix geassocieerde biomoleculen. De technologische belemmeringen hebben echter hun wijdverbreide gebruik in onderzoekslaboratoria beperkt. Hier beschrijven we een methode om eenvoudige apparaten te construeren voor 3D-cultuur en experimenten met cellen en multicellulaire organoids in 3D-micromilieus met een gedefinieerde chemoattractant gradiënt. Wij illustreren het gebruik van dit platform voor de analyse van de respons van epitheelcellen en organoids naar gradiënten van groeifactoren, zoals epidermale groeifactor (EFG). EFG gradiënten waren stabiel in de apparaten voor enkele dagen die leiden tot gerichte Branch vorming in de borst organoids. Deze analyse konden we concluderen dat collectieve gradiënt sensing door groepen van cellen is gevoeliger versus enkele cellen. We beschrijven ook de fabricagemethode, die niet nodig fotolitho grafie faciliteiten, noch geavanceerde zachte lithografie technieken. Deze methode zal nuttig zijn om 3D cellulair gedrag te bestuderen in de context van de analyse van de ontwikkeling en pathologische staten, met inbegrip van kanker.

EFG is een essentiële regulator van vertakking morfogenese in de borstklieren en een kritische chemoattractant het begeleiden van de migratie van borst epitheelcellen in invasieve groei van kanker. We gebruikten de mesoscopische vloeibare apparaten hierboven beschreven om de reactie van cellen te bestuderen om gedefinieerde EFG gradiënten (Figuur 1a, B)10. Het apparaat levert een cultuurgebied van 5 mm breed, 10 mm l...

Watch this Scientific Journal Video about 3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients at JoVE.com

3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients

We beschrijven een methode om apparaten te construeren voor 3D-cultuur en experimenten met cellen en multicellulaire organoids. Dit apparaat maakt analyse van cellulaire reacties op oplosbare signalen in 3D-micromilieus met gedefinieerde chemoattractant gradiënten. Organoids zijn beter dan enkele cellen bij de opsporing van zwakke luidruchtige ingangen.

3D-analyse van multi-cellulaire reacties op chemoattractant gradiënten

Various limitations of 2D cell culture systems have sparked interest in 3D cell culture and analysis platforms, which would better mimic the spatial and ...

Verschillen in vereenvoudigde 2D in vitro culturen versus 3D weefsel-achtige omgevingen hebben de interesse in 3D-systemen om de ruimtelijke en chemische complexiteit van levende weefsels vertegenwoordigen toegenomen. Het fabricageproces vereist geen facilitaire of fotolithografietechnieken. Het 3D PDMS-apparaat bevat echter de nodige vectoren voor 3D-fysiologische omgevingstoepassingen.Voor mesofluidic apparaat voorbereiding, gebruik maken van een passende drie-dimensionale computer-aided ontwerp software programma om het masker van de mal te ontwerpen voor de polydimethylsiloxane of PDMS apparaat en print de mal met behulp van stereo lithografie apparatuur met een thermoresistant hars. Wanneer de mal klaar is, ongeveer meng drie milliliter PDMS monomeer oplossing per mal met een uithardingsmiddel op een 10 tot een verhouding en gebruik een vacuüm om het mengsel te ontgassen in een vacuüm desiccator voor een uur. Gebruik aan het einde van de uitdroging een stuk plakband om stof van het oppervlak van de mal te verwijderen en vul de mal voorzichtig met de ontgasseerde PDMS-oplossing.Vervolgens moet u de PDMS twee uur lang op 80 graden Celsius cureren voordat de mal bij kamertemperatuur kan afkoelen. Wanneer de mal wordt gekoeld aan de aanraking, gebruik een mes om de grens tussen de mal en PDMS snijden en zorgvuldig schil de PDMS uit de mal. Trim de PDMS om een 22 bij 22 millimeter coverslip passen en punch een gat op de inlaat.Veeg met lage pluisweefsels en 70% ethanol het apparaat en de coverslip af en dep het apparaat met een nieuw stuk plakband om grote stofdeeltjes te verwijderen. Dan autoclave de PDMS-apparaat en coverslip op 121 graden Celsius gedurende acht minuten nat en 15 minuten droog en behandel het onderste oppervlak van de PDMS deel en coverslip met een corona ontlading pistool gedurende vijf minuten in een weefsel cultuur kap voor de binding van de stukken samen. Om het apparaat te laden, eerst de cellen van belang opnieuw op te stellen in een passend volume groeimedium aangevuld met 1%penicilline en streptomycine en 1%insuline-transferrine-selenium-x.Vervolgens meng 50 microliters van de borstkliercelsuspensie met 425 microliter vers bereide geneutraliseerde collageenoplossing en vul een pipet van 200 microliter met de collageencelsuspensie. Injecteer de suspensie via de inlaat in het PDMS-apparaat totdat de hele kamer is gevuld en plaats het apparaat in de couveuse op 37 graden Celsius met 5% kooldioxide gedurende een uur om gelatie te induceren voordat ze de reservoirs aan beide zijden vullen met groeimedium en het apparaat terug te brengen naar de couveuse tot confocale beeldvorming. Voor 3D-beeldvorming en kwantificering installeer je een live celbeeldvormingscultuurkamer op een confocale microscoop en stel je de temperatuur en kooldioxide vooraf op respectievelijk 37 graden Celsius en 5%.Voeg water toe aan het reservoir van de beeldkamer om de kamer te bevochtigen, plaats indien nodig natte doekjes in de kamer en plaats het PDMS-apparaat in de kamer. Voeg epidermale groeifactor aan een van de reservoirs als een bron van de factor in de gradiënt vorming waardoor het andere reservoir om te dienen als een gootsteen voor de ontwikkeling van de ruimtelijk gesorteerde epidermale groeifactor verdeling. Stel vervolgens het bereik van de Z-stack in voor het volume van organoïden van belang en start de beeldvorming.Gebruik aan het einde van het experiment een geschikt beeldanalyseprogramma om de lengte en hoek van de takken te meten die zich uitstrekken van de organoïden of de migratie van individuele cellen. Zowel in silico als in vitro tests bleek de vorming van een stabiele lineaire epidermale groeifactor gradiënt over de celcultuur gebied dat duurt ongeveer twee dagen zonder aanvulling van de bron of gootsteen reservoirs wat suggereert dat de epidermale groeifactor, een 6,4 kilodalton eiwit, kan een stabiele diffusie-gebaseerde gradiënt vormen binnen een collageen gel bereid zoals aangetoond over een relatief korte periode van tijd. Borstorganoïden vormen meerdere takken in aanwezigheid van ruimtelijk uniforme 2,5 nanomolar epiderale groeifactor zonder directionele bias gedurende drie dagen als epidermale groeifactor wordt toegevoegd in de lineaire gradiënt om 0,5 nanomolar per milliliter te hebben.De takvorming vertoont echter een significante directionele bias. Van nota, onderdrukt de toevoeging van de remmers van de hiaatverbinding het vermogen van organoïden om op de gradiënt te antwoorden. De pH van collageen oplossing is van cruciaal belang voor de gelatie en de levensvatbaarheid van de cel.Als het collageen niet wordt geneutraliseerd voor het mengen, zal de levensvatbaarheid van de cel laag zijn. Deze methode kan worden uitgebreid om meer realistische weefsel modellering tegemoet te komen en kan vasculaire netwerkvorming van individuele cellen in de gel tegemoet te komen.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Ontwerp van een Cyclic Pressure Bioreactor voor de Ex Vivo Studie van Aorta hartkleppen

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Creating Adhesive and Soluble Gradients for Imaging Cell Migration with Fluorescence Microscopy

Het maken van lijm en Oplosbare verlopen for Imaging Cell Migration met fluorescentie microscopie

Cells can sense and migrate towards higher concentrations of adhesive cues such as the glycoproteins of the extracellular matrix and soluble cues such as ...

Correlative Microscopy for 3D Structural Analysis of Dynamic Interactions

Correlatieve microscopie voor 3D Structural Analysis van Dynamic Interactions

Cryo-electron tomography (cryoET) allows 3D visualization of cellular structures at molecular resolution in a close-to-physiological state1. However, ...

Multi-Scale Modification of Metallic Implants With Pore Gradients, Polyelectrolytes and Their Indirect Monitoring In vivo

Multi-Scale Modification of Metallic Implants With Pore Gradients, Polyelectrolytes and Their Indirect Monitoring In vivo

Multi-Scale modificatie van metalen implantaten Met Pore Verlopen, polyelektrolieten en hun indirecte monitoring<em&gt; In vivo</em

Metallic implants, especially titanium implants, are widely used in  clinical applications. Tissue in-growth and integration to these implants in  the ...

A Method for Evaluating Timeliness and Accuracy of Volitional Motor Responses to Vibrotactile Stimuli

Een methode voor het evalueren van tijdigheid en nauwkeurigheid van Volitional Motor Responses to vibrotactiele Stimuli

Artificial sensory feedback (ASF) systems can be used to compensate for lost proprioception in individuals with lower-limb impairments.  Effective design ...

Polydimethylsiloxane-polycarbonate Microfluidic Devices for Cell Migration Studies Under Perpendicular Chemical and Oxygen Gradients

Polydimethylsiloxaan-polycarbonaat microfluïdische apparaten voor mobiele Migration Studies Onder Perpendicular Chemical en zuurstof verlopen

This paper reports a microfluidic device made of polydimethylsiloxane (PDMS) with an embedded polycarbonate (PC) thin film to study cell migration under ...

Bioprinting of Cartilage and Skin Tissue Analogs Utilizing a Novel Passive Mixing Unit Technique for Bioink Precellularization

Bioprinting van kraakbeen en huid weefsel analogen met behulp van een roman passief mengen eenheid techniek voor Bioink Precellularization

Bioprinting is a powerful technique for the rapid and reproducible fabrication of constructs for tissue engineering applications. In this study, both ...

Four-Dimensional CT Analysis Using Sequential 3D-3D Registration

Vierdimensionale CT-analyse met sequentiële 3D-3D-registratie

Four-dimensional computed tomography (4DCT) provides a series of volume data and visualizes joint motions. However, numerical analysis of 4DCT data ...

Generation of Heterogeneous Drug Gradients Across Cancer Populations on a Microfluidic Evolution Accelerator for Real-Time Observation

Generatie van heterogene drugs gradiënten over kanker populaties op een Microfluïdische evolution Accelerator voor real-time observatie

Conventional cell culture remains the most frequently used preclinical model, despite its proven limited ability to predict clinical results in cancer. ...

Quantification of Oculomotor Responses and Accommodation Through Instrumentation and Analysis Toolboxes

Kwantificering van oculomotorische responsen en accommodatie door middel van instrumentatie- en analysetoolboxen

Through the purposeful stimulation and recording of eye movements, the fundamental characteristics of the underlying neural mechanisms of eye movements ...