Name: implantation of a new micro acoustic tag in juvenile pacific lamprey and american eel
Uploaded: 2019-03-16T14:00:00
Duration: 8 min 36 s
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この研究は、エンジニアの米国陸軍工兵隊 (USACE) と米国エネルギー省 (DOE) 水道電力技術事務所によって賄われていた。次なりスタッフから技術援助お願い申し上げます: コリン ・ Brislawn、エリック ・ フランカヴィッラ ・、ジル ニュージーランド、恵東李、ティム リンリー。デラウェア州谷の魚会社からキャシー Kratchman にありがとうなりとラルフ ・ ランプマン タイラー ビールズ ヤツメウナギを供給するためヤキマ国水産から鰻を供給します。我々 はまた、ブラッド Eppard、スコット ・ フィールディング、リカルド ・ ウォーカー陸軍工兵隊からダナ McCoskey、DOE からティム ・ ウェルチに感謝します。米国エネルギー省の underContractDE AC06 76RL01830 のバテルが運営するなりで実験的研究を行った。

なり、評価・実験動物ケアの認定会の認定を受けてください。ウナギ、ヤツメウナギはケアと実験動物の使用のための連邦政府のガイドラインに従って処理されたと私たちの研究のためのプロトコルがコンプライアンスを行われ、なりの制度的ケアおよび使用委員会によって承認されました。
1. タグ準備 (22 分タイミング)
<ol><li>70% エタノール溶液に 20 分間にタグを配置します。</li>
	<li>プラスチック ピンセットを使用してタグを削除し、滅菌水の入った小さなガラス皿に置きます。</li>
	<li>タグを削除し、滅菌薬一杯に配置します。</li>
</ol>2. 麻酔液の準備 (タイミング 〜 5 分)
<ol><li>小さなプラスチック製のコップ Tricaine の 40 グラム重量を量る。</li>
	<li>ミキサー バーを攪拌板 500 mL ビーカーに粉と水道水を溶解し、80 グラム/L の原液を達成するためにプラスチック製のボトルに転送。</li>
	<li>重炭酸ナトリウムと同じ手順を繰り返します、別の 500 mL のボトルに追加します。</li>
	<li>水 5 L (タグ付けするために魚と同じソース水) 10 L のプラスチック製の浴槽コンテナーを使用して、入力します。</li>
	<li>6.25 mL Tricaine 麻酔液、炭酸水素ナトリウム、浴槽に 100 mg/L の投与量を取得する 500 mL のペットボトルの上部に接続されている測定注ぐゲージを用いての 6.25 mL を追加します。</li>
	<li>水溶液の水を混ぜてかき混ぜます。 注: ヤツメウナギを確保するため浴槽をカバーする利用可能な蓋がある麻酔の液中にエスケープしません。</li>
</ol>3. ヤツメウナギ タグ (タイミング 〜 6 分)
<ol><li>場所少年ヤツメウナギ (> 140 mm) 純小さなディップを使用して麻酔薬の風呂に。</li>
	<li>ヤツメウナギ (もはやソリューションでは、安定したギルの動きによって低速を維持しながら水泳) 完全に除隊になるため 4-5 分を待ちます。</li>
	<li>ディップ ネットを使用して、ヤツメウナギを削除、長さと重量の測定と音響タグのユニークな識別コードを記録します。</li>
	<li>飽和水最初とし、150 μ L/L 保護コーティング 1.3 cm 厚いクローズドセル発泡体パッドを準備 (材料の表を参照してください)。保護コーティングは、手術中に粘液の膜の破壊に対抗するのに役立ちます。</li>
	<li>ヤツメウナギの腹側を準備の泡の上に置きます。手術のプロセス中に河口域を通過する (高架水槽) から水供給管の小さなセクションを配置します。これにより、魚はタグの注入を受けている間呼吸のため。</li>
	<li>切開をされるサイトを検索、20 ミリメートルの鰓の後方が左または右外側側毛穴します。素質と定規を使用または参照のフォーム パッドに配置されたマーカーを使用します。</li>
	<li>滅菌 3.0 mm 顕微鏡視下メス 15 ° 刃 (材料の表を参照してください) 慎重に使えば横方向内側皮膚貫通だけメスを切ることを確実に開く 2.5-3 mm。図 1を参照してください。</li>
	<li>タグに置きます消毒前方体腔に手で。体内に入ったタグが移動したことを確認するタグ サイトにわずかな圧力を適用します。</li>
	<li>新鮮な川の水を含む回収バケットに場所タグ ヤツメウナギには魚タンク酸素ポンプ、チューブ、空気石が付属。</li>
	<li>そのヤツメウナギを確保する今後の研究のためのタンクを保持する麻酔薬と転送から回復しています。</li>
</ol>4. うなぎタグ (タイミング 〜 6 分)
<ol><li>タグ準備をレプリケートし、Tricaine の重炭酸ナトリウム 240 mg/L の濃度の用量で麻酔薬を準備します。</li>
	<li>風呂の水 5 L に 15 mL を追加します。</li>
	<li>ウナギの稚魚を配置 (> 130 mm) 純小さなディップを使用して麻酔薬の風呂に。(もはや維持安定したギルの動きが遅いしながらソリューションに泳ぎに) 完全に除隊になるウナギのため 4-5 分を待ちます。</li>
	<li>ディップ ネットを使用してウナギを削除し、コーティング魚保護にクローズドセル発泡体の腹側を上に置きます。</li>
	<li>切開を行わなければ、左側または右横ずれの胸鰭のベースに 〜 25 mm サイトを検索します。</li>
	<li>15 ° と滅菌 3.0 mm 顕微鏡視下メスを使用してブレードは慎重にメスが内側皮膚貫通だけ切っている確保する横方向に開く 2.5-3 mm を作る。図 2を参照してください。</li>
	<li>タグに置きます消毒前方体腔に手で。タグは体腔に移動しているように、サイトのタグ付けにわずかな圧力を適用されます。</li>
	<li>回復に場所タグうなぎ魚タンク酸素ポンプ、チューブに付属している新鮮な川の水を含んでいるバケット エアコン石。</li>
	<li>そのウナギは、今後の研究のためのタンクを保持する麻酔薬と転送から回復していることを確認します。</li>
</ol>

<ol>
	<li>Mueller, R. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retention+and+Effects+of+Miniature+Transmitters+in+Juvenile+American+Eels.">Retention and Effects of Miniature Transmitters in Juvenile American Eels.</a> Fisheries Research. 195, 52-58 (2017).</li><li>Brown, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evaluation+of+the+maximum+tag+burden+for+implantation+of+acoustic+transmitters+in+juvenile+Chinook+salmon.">An evaluation of the maximum tag burden for implantation of acoustic transmitters in juvenile Chinook salmon.</a> North American Journal of Fisheries Management. 30, 499-505 (2010).</li><li>Jepsen, N., Schreck, C., Clement, S., Thorstad, E., Spedicato, M. 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S., Koed, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+tag+and+suture+type+on+survival+and+growth+of+brown+trout+with+surgically+implanted+telemetry+tags+in+the+wild.">Effects of tag and suture type on survival and growth of brown trout with surgically implanted telemetry tags in the wild.</a> Journal of Fish Biology. 72, 594-602 (2008).</li><li>Brown, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+of+seaward-migrating+PIT+and+acoustic-tagged+juvenile+Chinook+salmon+in+the+Snake+and+Columbia+Rivers:+an+evaluation+of+length-specific+tagging+effects.">Survival of seaward-migrating PIT and acoustic-tagged juvenile Chinook salmon in the Snake and Columbia Rivers: an evaluation of length-specific tagging effects.</a> Animal Biotelemetry. 1, 8 (2013).</li><li>Walker, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+novel+acoustic+transmitter+on+swimming+performance+and+predator+avoidance+of+juvenile+Chinook+salmon:+Determination+of+a+size+threshold.">Effects of a novel acoustic transmitter on swimming performance and predator avoidance of juvenile Chinook salmon: Determination of a size threshold.</a> Fisheries Research. 176, 48-54 (2016).</li></ol>

何を開示する必要があります。

実験的研究の結果は、プロシージャをタグ付けとタグ付け効果が魚の生存または遊泳能力に悪影響を持っていないことを示しています。拡張保持および監視は、最小限のタグ損失が発生し、タグ人生 (30 日) の間に明らかにされなかったことを示した。タグ注入のプロシージャは重大な出血やタグ付けのサイトで真菌感染症を引き起こすことがなく体腔内にタグを配置することで効果的であった。全体のタグ付けの期間の処理 (< 6 分) それ麻酔されている魚に関連するストレスを軽減するという利点があります。これらの調査結果は少年ヤツメウナギやウナギの通路の研究のための新しいツールの特徴し、将来の研究に活用できます。この技術は、アプローチの水力発電ダムや魚の通路を妨げる他の構造川システム内および彼らとしてヤツメウナギやウナギの動きを追跡する研究者になります。ターンでは、結果より良い少年の生活に段階のこれらの種を節約するためにこれらの施設の経営決定を知らせることができます。タグの配置、切開の長さ、深さ麻酔薬の適切な用量を使用していて、使用可能なタンクを保持する適切な回復、札の注入のプロトコルの最も重要な手順が含まれます。この手法には、最小限の制限があります。特に、外科医のトレーニングが効果的にするために必要、< 3 mm 切開し、目的の場所にタグを配置します。また、タグ付けプロセスがより小さい大きさで分類されたウナギ、ヤツメウナギを除外だろう (< 140 mm) タグ負担制限のため。記述されていたプロトコルへの変更はお勧めしません。
ウナギ、ヤツメウナギをタグ付けする方法には、ピットのタグの使用が含まれます。しかし、ピット タグは積極的に信号を送信しません、したがってピット タグ付き魚のみ列挙できる同調し、バイパス設備又は固定器10,11に近い峠に流用します。ヤツメウナギ/うなぎタグの応用タグし、移行するヤツメウナギやウナギの生息する環境での個体群をトラックする機能があります。ヤツメウナギ/うなぎのタグを使用しての追加の利点は、推定生存率、代替率水路をタービンを介して、貯水池内の時間を旅行、遅延を通過する能力が含まれます、アプローチ ダムの魚の動作を関連しました。

魚の行動や水力発電ダム、上流または下流の移動経路を妨げる可能性があるなど、河川構造物付近の動きを理解する継続的な研究が必要です。数多くの研究は、既存の技術を使用して行われている、まだ少年のウナギ、ヤツメウナギの生存と行動について多くの研究の質問があります。対応するため、これらの質問の太平洋の北西国立研究所 (なり) は特に少年ウナギ、ヤツメウナギ、ヤツメウナギ/うなぎタグ1と呼ばれる用に設計された新しい音響マイクロ送信機と開発しました。この開発前に既存の音響タグ少年ウナギ、ヤツメウナギの体腔に効果的に注入するのには大きすぎるが、受け入れ基準を超えるタグ負担になる (体重比にタグの保守的な値は 2% または以下その他の文献には、4-5% が示唆していると)2,3,4。ヤツメウナギ/うなぎタグは、固定構造や川で受信機5,6自律レシーバー (ハイドロ フォン) を介して監視されて 416.7 kHz の周波数で一意のコード化された信号を出力します。
アメリカ合衆国のコロンビア川流域における意識と太平洋ヤツメウナギ (特にゴルジコンプレックス カブトガニ) の全体のライフ サイクルを理解するための懸念エスカレートしている集団が過去 40 年間の7 で大幅減少しているので.水力発電設備の建設と操業に悪影響を及ぼす若年性のヤツメウナギ、主要な水力発電開発8の期間の後に下落が発生しました。死亡率の 1 つの潜在的なソースは、少年太平洋ヤツメウナギ外移行海9ダム通路です。パッシブ統合トランスポンダー (ピット) が使われています転換構造 (例えば、少年バイパス システム) を渡すことがあります移行の魚の種のうち、タグ付け魚列挙10,11になることを可能にします。しかし、少年のヤツメウナギは幼魚より深い水の列に移行すると考えられている、少年バイパス システム12を通過する可能性が低い。低検出確率と孵化場の不足またはピットのタグ付け、少年ヤツメウナギ通路についての少年ヤツメウナギ他源に集中したため、生存や動作は非常に限られました。少年の太平洋ヤツメウナギ行動や生存の知識は、バイパス システム水力発電設備、灌漑の転換構造13で使用するための設計を含む下流の通路の軽減戦略を開発するために重要です。
アメリカのウナギ (アンギラ可能性) は、産卵のため海に向かって淡水から移行する大人の相 catadromous です。彼らの人口レベルは、過去数十年間の劇的な減少を見ています。以前は、彼らが非常に大西洋に流れる主要な川の豊富なと湖オンタリオ; にセント ・ ローレンス川を上流しかし、1980 年以来、アメリカのウナギはチェサピーク湾で 50% から 97% で、オンタリオ湖14,15,16に至るまで在庫豊富に大幅な下落を経験しています。自分の減少の要因は含んでいる;水力発電ダム、断片化と損失の生息地と収穫17商業建設。彼らは現在、オンタリオ (カナダ) の絶滅危惧種法の下で絶滅危惧として表示されます。東米国の州の主要河川の水力発電施設の過去の開発は、少年と大人の両方の河川の移行を妨げる障壁を作成します。
新たに開発したヤツメウナギ/うなぎ音響タグは、この研究で使用されました。タグは、なりの認定生物音響 & フロー研究室18で製造されました。タグ × 2 mm 直径 12 mm、長さを測定し、0.08 グラムの重さは、空気。タグの全体的なサイズが小さい、それ効果的に使える型またはステリ切開、小切開の必要のためを使用して稚魚への注入 (< 3 mm 長い)。ステリ切開の追加の利点があります: 時間の減少量高速治癒率、手術のプロセスに必要な移植サイト19での感染の可能性を減少します。外科的移植効果は種、ライフ ステージ、体腔の長さ、切開の場所に応じて変化、期間、および環境条件20,21,22,23を勉強できます。タグ負荷 (すなわち、魚の重量に対してタグの重量) の測定を提供するので、サイズ以外は、重量は重要な変数です。タグ負担の手術のプロセス (例えば、麻酔、手術を処理する)、他のすべての側面に関連付けられたタグ保存、生存、成長、パフォーマンス、または捕食24を避けるために魚の能力を水泳に直接影響を持つことができます。 25,26,27。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:695px;" width="694">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">10 L plastic tub</td>
			<td style="width:126px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">19 L pail</td>
			<td style="width:126px;">N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">3.00 mm scalpel</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Beaver-Vistec</td>
			<td style="width:166px;">377513</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">500 ml bottle</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Nalgene</td>
			<td style="width:166px;">&#160;2089-0016</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="28">
			<td height="28" style="height:28px;width:223px;">Adam scale</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Certified Material Testing Products</td>
			<td style="width:166px;">&#160;BCL-LBK12A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Air pump</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Amazon</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Air stone</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Pentair</td>
			<td style="width:166px;">&#160;ALS3</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Dip net, 3/32 in mesh</td>
			<td style="width:126px;">N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Ethanol (70%)</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Sigma-Aldrich&#160;</td>
			<td style="width:166px;">24102</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Fish protector</td>
			<td style="width:126px;">Kordon LLC</td>
			<td style="width:166px;">31456</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Foam pad</td>
			<td style="width:126px;">N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Gloves</td>
			<td style="width:126px;">Kimberly Clark&#160;</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Mixer bar</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:166px;">&#160;F37110-1128</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Plastic tweezer</td>
			<td style="width:126px;">N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Pouring dispenser gage&#160;</td>
			<td style="width:126px;">Fischer Scientific</td>
			<td style="width:166px;">&#160;13-683-60C</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Scalpel handle</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Beaver-Vistec</td>
			<td style="width:166px;">371360</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Sodium bicarbonate</td>
			<td style="width:126px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:166px;">&#160;S5761</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Stirrer plate</td>
			<td style="width:126px;">&#160;Corning, PC-351</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="56">
			<td height="56" style="height:56px;width:223px;">Tricaine methanesulfonate, MS-222</td>
			<td style="width:126px;">Western Chemical Inc.</td>
			<td style="width:166px;">515388</td>
			<td style="width:182px;">Treated fish destined for food must be held in fresh water above 10&#176;C (50&#176;F) for 21 days before use</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;">Tubing, 6 mm</td>
			<td style="width:126px;">N/A</td>
			<td style="width:166px;">&#160;N/A</td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:223px;"></td>
			<td style="width:126px;"></td>
			<td style="width:166px;"></td>
			<td style="width:182px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

implantation of a new micro acoustic tag in juvenile pacific lamprey and american eel

少年太平洋ヤツメウナギやアメリカのウナギは、タグ移植からの潜在的な効果を確認する実験室評価のため使用されました。遠隔測定技術は、他の知られている技術と可能であるよりもより広い空間スケールでの動きと行動に関するより詳細な情報を取得する方法として識別されています。このメソッドの目的は、ヤツメウナギとウナギの両方の注入をタグの詳細なステップバイ ステップの説明を提供することです。アクティブに移行中の少年太平洋ヤツメウナギ (120-160 mm) を使用して実験室調査のためタグの存在しなかったないタグ付きとタグなしの個人間の水泳能力を変更または、タグの重要な損失を持ってを調べた (< 3%)。黄色期アメリカのウナギ (113-175 mm) の検査室で同様の結果を調べた。38 日間の開催期間中に死亡はなかったし、最小限のタグ損失 (3.8%) があった。タグの存在は、遊泳能力またはタグなしのコントロールに比べてタグ ウナギの生存に重大な影響を持っていなかったし、最小限のタグが失われました。

少年のヤツメウナギの実験的研究
なりに積極的に移行する場合、ダミー ヤツメウナギ/うなぎタグを注入の可能性を決定する 2015 年に調査した少年太平洋ヤツメウナギ。195 太平洋ヤツメウナギ (macrophthalmia ライフ ステージ) の合計は、フィールド コレクションのサイトからなりに運ばれました。2 つの独立したタスクを行った。初めてのタグ注入する魚の応答を決定します。変数には、含まれているタグ損失、遅延死亡、癒しのタグなし (対照) 群と比較してタグ付け魚の料金が決定されます。2 番目のタスクの泳ぎにタグとタグ付き魚の遊泳能力に関連付けられている任意の副作用を決定する 10 mm サイズ カテゴリ (120-160 mm) から試験を行った。〜 1.8 4.8 〜 1.25 %7.0 g とタグの負担重量を魚します。体腔内のタグの位置を示す x 線は、図 3の1に表示されます。二匹の魚の合計が持株の最初の 2 日間、タグを削除し、28 日保有期間の残りの間追加削除されたタグが見つかりませんでした。タグ ヤツメウナギの 14.3% (7 魚) と対照群の 9.6% (5 魚) はこの期間中に集積死亡率が。タグ付きの個人化とスイミング室に配置されたコントロールの魚 11 cm/s の一定速度で泳いで流量は、前研究室は、遊泳運動の下端に定数を示されたテストに基づいて選ばれた水泳能力9。対照群の平均泳ぐ時間は 3.15 分 (SE 42.5 = s) 移植グループの平均泳ぐ時間は 2.3 分と (SE 30.2 = s)、有意差はなかった (t = 0.958;p = 0.172)。水泳パフォーマンスの結果テスト魚長と泳ぎにタグのいずれかの期間 (すなわち、衝突までの時間) または制御グループ (図 4) と有意な相関を示さなかった。衝突はもはや定数水の速度で泳ぐことができる魚として記述され、ダウン ストリームの画面で休んだ。
アメリカのウナギ研究
重要な遊泳速度を行った水泳パフォーマンスの任意の可能な l タグの効果を調べるには、六つのサイズ グループのUcrit、(長時間水泳パフォーマンスのインデックス) を使用してテストを (n = 120; 113 175 mm)、およびタグ付きのウナギの11.4 x 1.8 mm を測定するダミーのタグを使用して (長さ × 直径)1。Cm/s (図 5) またはタグ付きのすべてのボディの長さ/s の測定平均値で測定としてタグ付きとタグなしのウナギのUクリッツの大きな違いはなく、タグの付いていないグループを結合して (図 6)。また、タグ ウナギ (38 日) の長期保有を実施し、タグ グループと 3.8% (1 のうち 26 魚)1の低タグ損失から死亡率が見つかりません。当社実験結果に基づき、マイクロ音響タグは遊泳能力、長期生存には重要な影響なしで少年アメリカ ウナギで効果的に注入することができ、タグ人生 (30 日) の間に最小限のタグの損失を持っていたと考えられました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig1.jpg"> 図 1. 写真少年太平洋ヤツメウナギでタグを挿入するためのタグ シーケンスを示します。(A)ヤツメウナギ泡パッドに配置されています。(B)顕微鏡視下メスで切開します。(C)タグがつけられています。ポストのタグ付け(D)ヤツメウナギ。すべての写真は、同じヤツメウナギ (148 mm) で撮影されました。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig2.jpg"> 図 2.写真少年アメリカのウナギのタグ付けの手順を説明します。(A)前に切開します。(B)後切開。(C)後タグの前方の挿入。すべての写真は、同じウナギ (138 mm) で撮影されました。 
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig3.jpg"> 図 3.ダミー ヤツメウナギ/うなぎタグ少年太平洋ヤツメウナギの体腔内の x 線像。
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig4.jpg"> 図 4.衝突 (タグなし) コントロールのパフォーマンス テストを泳ぐから料金し、肯定的な標準誤差範囲が 10 mm サイズのカテゴリーに分け、ヤツメウナギをタグします。サンプル サイズは、個々 のバーに表示されます。
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig5.jpg"> 図 5. Cm/s タグ付きとタグなしのウナギ (治療あたり 10) のためにテストしたウナギのサイズ グループの速度を重要な水泳のボックス プロットします。各ボックス内の行を表す中央;上と下の行はそれぞれ 75 と 25 パーセン タイルを表すウィスカーは、トップ 90 と下部 10 パーセン タイル;外れ値が囲まれた円によって描かれています。
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59274/59274fig6.jpg"> 図 6. タグ付きとタグなしのウナギ (治療あたり 10) のボディ長さ/s 速度の重要な水泳のボックス プロットします。各ボックス内の行を表す中央;上と下の行はそれぞれ 75 と 25 パーセン タイルを表すウィスカーは、トップ 90 と下部 10 パーセン タイル;外れ値が囲まれた円によって描かれています。

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Implantation of a New Micro Acoustic Tag in Juvenile Pacific Lamprey and American Eel

少年太平洋ヤツメウナギやアメリカのウナギの新しいマイクロ音響タグの注入

この記事では、少年の太平洋ヤツメウナギやアメリカのウナギのマイクロ音響タグを移植するための手順を示します。我々 のアプリケーションは、音響タグできる水泳能力や生存と最小限のタグ損失には明らかな影響なしで正常に植えられたことを示す実験室試験に基づいています。

Juvenile Pacific Lamprey and American eels were used for laboratory evaluations to determine potential effects from tag implantation. Telemetry technology ...

この手順の全体的な目標は、若年性太平洋ランプレーとアメリカウナギの体内にミニチュア音響タグを埋め込み、タグ付けプロセス後の行動と物理的な影響を監視することです。水力ダムなどの河川構造物付近での魚の生存、行動、動きを理解するために、上流や下流の移動経路を妨げる可能性のある多くの研究が行われてきました。この継続的な使用ニーズに対処するために、パシフィックノースウエストナショナルラボは、特にランプレーとウナギタグと呼ばれる少年ランプレーとウナギでの使用のために設計された新しいミニチュア音響タグを開発しました。この方法は、許容用量率を使用するためのプロトコルを識別し、魚を怪我なしで扱うか、ストレスを取り消し、タグを埋め込むことができる最適な場所を特定する。このタグ付け技術の主な利点は、縫合線が必要ないため、プロセスの速度です。体腔内のタグの位置は、生理学的ストレスを最小限に抑え、タグの保持を促進し、魚の泳ぐ能力や行動に有害な影響を及ぼしません。まず、タグを消毒して移植用に準備します。20分から70%エタノール溶液にタグを入れます。その後、プラスチック製のピンセットを使用してタグを取り除き、滅菌水を含む小さなガラス皿に入れます。次に、タグを取り除き、無菌ピルカップに入れ。次のステップでは、魚を扱い、タグ付けすることを可能にする麻酔浴を準備する必要があります。小さなプラスチックカップでは、トリカインの重量40グラム。かき混ぜプレートとミキサーバーの水道水の500ミリリットルビーカーに粉末を溶解します。その後、500ミリリットルのペットボトルに移して、80グラム/リットルのストック溶液を達成します。重炭酸ナトリウムで同じ手順を繰り返し、別の500ミリリットルのボトルに追加します。タグ付けする魚と同じソースから水の5リットルで10リットルのプラスチック浴槽を埋めます。500ミリリットルのボトルの上部に取り付けられた測定注ぐゲージを使用して、6.25ミリリットルのトリカイン溶液と6.25ミリリットルの重炭酸ナトリウムを加えます。これは、浴槽に1リットル当たりのミリグラムの線量になります。重炭酸ナトリウムは、トリカインが酸性であるため、pHのバランスを保つためにトリカインに等しい用量で添加される。溶液を十分に混ぜ合わせ、浴槽に入れ、麻酔液中にランプレーが逃げないように浴槽を覆うために蓋を用意します。これで麻酔液の調製が完了します。小さなディップネットを使用して、麻酔浴場に個々のランプレーを入れる。ランプレーが完全に復員され、ゆっくりと安定したギルの動きを維持しながら、水泳を停止するまで4〜5分待ちます。ディップネットを使用してランプレーを取り除きます。長さと重量の測定を取り、音響タグの一意の識別コードを記録します。一方、厚さ1.3センチのクローズドセルフォームパッドを準備し、最初に水で飽和し、次に150マイクロリットル/リットルの保護コーティング溶液を用意します。コーティングは外科的処置の間に粘膜の中断を打ち消すのに役立つ。準備した泡の上にランプレー腹側を上に置きます。高架水タンクからの水の規制供給がランプレーの口の領域を通って流れるよう、チューブの小さなセクションを配置します。これは魚がタグの注入を受けている間呼吸を可能にする。次に、切開が行われる場所を、左右の側面のギル孔に約20ミリメートル後部に位置付ける。定規は、フォームパッドに配置された参照またはマーカーに使用できます。15度の刃を持つ無菌3.0ミリメートルの微小メスを使用して、慎重に2.5〜3ミリメートルの開口部を横方向に作り、メスが内側の皮膚壁を通って切断していることを確認します。その後、慎重に手で、体腔に前に、化毒タグを配置します。タグがボディキャビティに移動したことを確認するために、タグ付け部位にわずかな圧力を加えます。次に、タグ付きランプレーを回復バケツに入れ、酸素ポンプチューブと空気石を備えた新鮮な川の水供給を含みます。ランプレーが麻酔薬から回復し、将来の研究のために保持タンクに移されたことを確認してください。同じ手順に従って、イエローフェーズのアメリカウナギにこれらの違いをタグ付けします。1リットル当たり240ミリグラムの用量を達成するために、前に記載された80グラム/リットルトリケーヌおよび重炭酸ナトリウムの麻酔液を使用する。5リットルの水浴にそれぞれ15ミリリットルを加えます。切開は、両側または右横側の胸部フィンの基部に25ミリメートル、またはウナギの全長の約1/3を作る。魚が回復容器の中で正常に泳いでいることを確認してください。この図は、120〜160ミリメートルの4つのサイズ群について、一定の水速度の水泳チューブに衝突する持続時間を示しています。この結果は、タグ付けされた制御グループとタグなし制御グループの間に統計的な差異は表示されません。この図は、水泳室で行われたテストの1秒間の体長の重要な水泳速度を示しています。サイズグループの範囲は111~120~161~175ミリメートルです。結果は、タグ付けされた制御グループとタグなし制御グループの間に統計的な違いがないことを示しています。この図は、テストされたすべてのサイズグループの1秒あたりの体長の中央値の水泳速度を示しています。速度は、タグ付けされた場合は 1 秒あたり 4.12 ボディ長、コントロール グループの場合は 3.88 です。繰り返しますが、タグ付けグループと制御グループの間に統計的な違いはありません。これらの実験室研究の結果は、タグ付け手順とタグ付け効果が魚の生存性や水泳能力に悪影響を及ぼさないことを示しています。タグ移植手順は、タグ付け部位で有意な出血または感染症を引き起こすことなく、体腔内にタグを配置するのに有効であった。タグ付けプロセスの持続時間は、60秒未満であり、麻酔中の魚に関連するストレスを軽減するという利点がある。これらの知見は、若年性ランプレーとウナギの通路研究のための新しいツールを特徴付け、将来の研究で利用することができる。この技術により、研究者は水力発電ダムや魚の通過を妨げる可能性のある他の構造物に近づくにつれて、川システム内のランプレーやウナギの動きを追跡することができます。さらに、この結果は、少年のライフステージを通じてこれらの種を保全するのに役立つ管理上の決定をより良く知らせることができます。

Research

JoVE Journal

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