Name: colorimetric analysis of alkaline phosphatase activity in s. aureus biofilm
Uploaded: 2019-04-12T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm at JoVE.com

Мы благодарим Уильям Рэйни Харпер колледж и Университет Иллинойса в Чикаго для объекта для проведения этих экспериментов. Мы также благодарим фонд McGraw Хилл за их щедрую поддержку.

1. Средний подготовка
<ol><li>Подготовка 1 Л Tryptic соевый бульон (БСЭ): В 1 Л дистиллированной воды, добавить 15 g поджелудочной железы дайджест казеина, 5 g papaic дайджест соевого жмыха, 3 g хлорида натрия, 2,5 г декстрозы и 2,5 г калия фосфата. Стерилизуйте перед использованием.</li>
	<li>Для Tryptic соевый ага...

<ol>
	<li>Coleman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+mechanism+of+alkaline+phosphatase.">Structure and mechanism of alkaline phosphatase.</a> Annual Review of Biophysics and Biomolecular Structure. 21, 441-483 (1992).</li><li>Sharma, U., Pal, D., Prasad, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alkaline+Phosphatase:+An+Overview.">Alkaline Phosphatase: An Overview.</a> Indian Journal of Clinical Biochemistry. 29 (3), 269-278 (2014).</li><li>Mitchell, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+frequencies+of+elevated+alkaline+phosphatase+activity+and+rickets+exist+in+extremely+low+birth+weight+infants+despite+current+nutritional+support.">High frequencies of elevated alkaline phosphatase activity and rickets exist in extremely low birth weight infants despite current nutritional support.</a> Boston Medical Center Pediatrics. 9, 47 (2009).</li><li>Fawley, J., Gourlay, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+alkaline+phosphatase:+A+summary+of+its+role+in+clinical+disease.">Intestinal alkaline phosphatase: A summary of its role in clinical disease.</a> Journal of Surgical Research. 202 (1), 225-234 (2016).</li><li>Derman, A. I., Beckwith, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Escherichia+coli+Alkaline+Phosphatase+Localized+to+the+Cytoplasm+Slowly+Acquires+Enzymatic+Activity+in+Cells+Whose+Growth+Has+Been+Suspended:+a+Caution+for+Gene+Fusion+Studies.">Escherichia coli Alkaline Phosphatase Localized to the Cytoplasm Slowly Acquires Enzymatic Activity in Cells Whose Growth Has Been Suspended: a Caution for Gene Fusion Studies.</a> Journal of Bacteriology. 177 (13), 3764-3770 (1995).</li><li>Danikowski, K. M., Cheng, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alkaline+Phosphatase+Activity+of+Staphylococcus+aureus+grown+in+Biofilm+and+Suspension+Cultures.">Alkaline Phosphatase Activity of Staphylococcus aureus grown in Biofilm and Suspension Cultures.</a> Current Microbiology. 75, 1226-1230 (2018).</li><li>Okabayashi, K., Futai, M., Mizuno, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization+of+Acid+and+Alkaline+Phosphatases+in+Staphylococcus+aureus.">Localization of Acid and Alkaline Phosphatases in Staphylococcus aureus.</a> Japanese Journal of Microbiology. 18 (4), 287-294 (1974).</li><li>Cheng, K. J., Costerton, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alkaline+Phosphatase+Activity+of+Rumen+Bacteria.">Alkaline Phosphatase Activity of Rumen Bacteria.</a> Applied and Environmental Microbiology. , 586-590 (1997).</li><li>Berezhetskyy, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatase+conductometric+biosensor+for+heavy-metal+ions+determination.">Phosphatase conductometric biosensor for heavy-metal ions determination.</a> Innovation and Research in Biomedical Engineering. 29 (2-3), 136-140 (2008).</li><li>Park, E. J., Kang, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+bacterial+alkaline+phosphatase+assay+for+rapid+monitoring+of+bacterial+counts+on+spinach.">The use of bacterial alkaline phosphatase assay for rapid monitoring of bacterial counts on spinach.</a> Journal of Food Science. 73 (5), M236-M238 (2008).</li><li>Barber, M., Kuper, S. W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Staphylococcus+pyogenes+by+the+phosphatase+reaction.">Identification of Staphylococcus pyogenes by the phosphatase reaction.</a> The Journal of Pathology and Bacteriology. 63, 65-68 (1951).</li><li>Wolf, P. L., Von der Muehll, E., Ludwick, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+test+to+differentiate+Serratia+from+Enterobacter.">A new test to differentiate Serratia from Enterobacter.</a> American Journal of Clinical Pathology. 56, 241-243 (1972).</li><li>Rangam, C. M., Katdare, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphatase+activity+of+Staphylococci+as+an+indication+of+their+pathogenicity.">Phosphatase activity of Staphylococci as an indication of their pathogenicity.</a> Indian Journal of Medical Science. 8, 610-613 (1954).</li><li>Flemming, H. -. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms:+an+emergent+form+of+bacterial+life.">Biofilms: an emergent form of bacterial life.</a> Nature Reviews Microbiology. 14, 563-575 (2016).</li><li>Hoiby, N., Bjarnsholt, T., Givskov, M., Molin, S., Ciofu, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibiotic+resistance+of+bacterial+biofilms.">Antibiotic resistance of bacterial biofilms.</a> International Journal of Antimicrobial Agents. 35, 322-332 (2010).</li><li>Ito, A., Taniuchi, A., May, T., Kawata, K., Okabe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+antibiotic+resistance+of+Escherichia+coli+in+mature+biofilms.">Increased antibiotic resistance of Escherichia coli in mature biofilms.</a> Applied and Environmental Microbiology. 75, 4093-4100 (2009).</li><li>Witherow, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Ten-Week+Biochemistry+Lab+Project+Studying+Wild-Type+and+Mutant+Bacterial+Alkaline+Phosphatase.">A Ten-Week Biochemistry Lab Project Studying Wild-Type and Mutant Bacterial Alkaline Phosphatase.</a> Biochemistry and Molecular Biology Education. 44 (6), (2016).</li><li>Henthorn, P., Zervos, P., Raducha, M., Harris, H., Kadesch, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+a+human+placental+alkaline+phosphatase+gene+in+transfected+cells:+Use+as+a+reporter+for+studies+of+gene+expression.">Expression of a human placental alkaline phosphatase gene in transfected cells: Use as a reporter for studies of gene expression.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 85, 6324-6346 (1988).</li><li>Horney, B. S., Farmer, A. J., Honor, D. J., MacKenzie, A., Burton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agarose+gel+electrophoresis+of+alkaline+phosphatase+isoenzymes+in+the+serum+of+hyperthyroid+cats.">Agarose gel electrophoresis of alkaline phosphatase isoenzymes in the serum of hyperthyroid cats.</a> Veterinary Clinical Pathology. 23 (3), 98-102 (1994).</li><li>Farley, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+Skeletal+Alkaline+Phosphatase+in+Osteoporotic+Serum+by+Wheat+Germ+Agglutinin+Precipitation,+Heat+Inactivation,+and+a+Two-Site+Immunoradiometric+Assay.">Quantification of Skeletal Alkaline Phosphatase in Osteoporotic Serum by Wheat Germ Agglutinin Precipitation, Heat Inactivation, and a Two-Site Immunoradiometric Assay.</a> Clinical Chemistry. 40 (9), 1749-1756 (1994).</li><li>O&#8217;Toole, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microtiter+Dish+Biofilm+Formation+Assay.">Microtiter Dish Biofilm Formation Assay.</a> Journal of Visualized Experience. , (2011).</li><li>Nomoto, M., Ohsawa, M., Wang, H. L., Chen, C. C., Yeh, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+and+Characterization+of+Extracellular+Alkaline+Phosphatase+from+an+Alkalophilic+Bacterium.">Purification and Characterization of Extracellular Alkaline Phosphatase from an Alkalophilic Bacterium.</a> Agricultural and Biological Chemistry. 52 (7), 1643-1647 (1988).</li></ol>

В нашем assay мы использовали pNPP как ALP субстрата. Это рабочее решение предназначенных для ELISA и неразбавленный необходим. После гидролиза, ALP, желтый продукт развивается и может быть измерена в 405 нм. В конце ферментативные реакции мы кратко центрифугировали 96 хорошо пластины и переданы св?...

Щелочная фосфатаза (ALP) повсеместно выражается в обеих клеток прокариот и эукариот1. Он может катализировать гидролиз монофосфат от различных молекул, таких как нуклеотидов, белки, алкалоиды, фосфатные эфиры и ангидриды фосфорной кислоты. В организме человека эукариотических ALP присутствует во многих тканях, в том числе печень, кости,2кишечника и плаценты. Она играет важную роль в фосфорилирование белков, рост клеток, апоптоз, стволовых клеток процессов, а также обычных скелетной минерализации. Эукариотические ALP также является показателем ключевых сыворотки на наличие заболеваний костей, печени и других тканей/органов при повышенных3,4.
Прокариот ALP был обнаружен в различных бактериальных клеток, включая E. coli5, S. aureus6,7 и некоторых распространенных бактерий рубца в почвах8. Бактериальной активности ALP был использован как биосенсора для обнаружения пестицидов, тяжелых металлов9 и10бактериального загрязнения. Учредительный выражение ALP был использован для идентификации стафилококков11 и дифференцировать Serratia Enterobacter12. Далее предлагается, что учредительный ALP производства связана с патогенностью стафилококки13. Хотя ALP был изучен в различные параметры3,4, еще мало сообщается, для его деятельности и функции в биопленке культур.
Биопленки были задокументированы, чтобы иметь по-разному функционирования бактериальной жизни по сравнению с его коллегой Свободноживущие бактериальной клетке14. В S. aureusобразование биопленки была выявлена в различных клинических условий и счетам по антибиотикорезистентности и хроническое воспаление15,16. Было сообщено много молекул можно найти в матрицу биопленки например полисахаридов, белков, нуклеиновых кислот и липидов, но механизм биопленки не полностью понял14. Чтобы понять роль ALP в биопленки, мы культивировали S. aureus биопленки в 96 хорошо культуры ткани пластины и измеряли активность ALP, используя пункт nitrophenylphosphate (pNPP).
PNPP молекула является готовым субстрат для ALP и широко используется для измерения ALP деятельности6,17,18. Этот assay колориметрические основывается на преобразование пункт нитрофенил фосфат (pNPP) в пункт нитрофенола результате цветные продукт на 405 нм. По сравнению с другими обычными пробирного ALP, такие как гель агарозы электрофореза19, зародышей пшеницы агглютининов (WGA) осадков, и WGA-ВЭЖХ20, этот assay весьма специфический, чувствительной, легко воспроизвести и, самое главное, позволяет для высокой пропускная способность.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>VWR</td>
			<td>9002-18-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eppendorf Centrifuge</td>
			<td>Thomas Scientific</td>
			<td>5810</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gluose</td>
			<td>VWR</td>
			<td>50-99-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH pellets</td>
			<td>VWR</td>
			<td>SS0550-500GR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Para-nitrophenylphosphate (pNPP)&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P7998-100ML</td>
			<td>Typical concentrations of pNPP liquid substrates, often used in enzyme-linked immunesorbent assays (ELISA), range between 10 to 50 mM. Similar to most ready-to-use pNPP liquid substrates like the one used here, the exact pNPP concentration is not disclosed due to its proprietary nature.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X PBS, pH7.4. 
			173 mM NaCl, 
			2.7 mM KCl, 
			8 mM Na2HPO4, 
			2 mM KH2PO4</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P3288-1VL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plate Reader</td>
			<td>Biotek</td>
			<td>ELx808</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. aureus</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC25923</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic Soy Agar&#160;&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; 15g / L TSB</td>
			<td>VWR</td>
			<td>9002-18-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tryptic Soy Broth:&#160;&#160;&#160;&#160;&#160; g/L 
			Pancreatic Digest of Casein............ 15.0 
			Papaic Digest of Soyben Meal.........5.00 
			Sodium chloride.............................. 3.00 
			Dextrose........................................&#160; 2.50 
			Dipotassium phosphate..................2.50</td>
			<td>VWR</td>
			<td>90006-098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well tissue culture plates</td>
			<td>BD</td>
			<td>6902D09</td>
			<td>U shaped bottom</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

colorimetric analysis of alkaline phosphatase activity in s. aureus biofilm

Щелочная фосфатаза (ALP) является общим фермент выразил в клетках прокариот и эукариот. Он катализирует гидролиз фосфат monoesters от многих молекул базовых pH и играет незаменимую роль в метаболизме фосфат. В организме человека эукариотических ALP является одним из наиболее часто используемых ферментативные сигналов в диагностики различных заболеваний, таких как холестаза и рахита. В S. золотистого стафилококка, ALP обнаруживается исключительно на клеточной мембраны; также выражается как секреторной формы также. Тем не менее мало что известно о ее функции в биопленки.
Цель этой рукописи заключается в разработке быстрого и надежного анализа для измерения активности ALP биопленки S. aureus , которые не требуют изоляции белка. С помощью p нитрофенил фосфат (pNPP) как субстрат, мы измерили ALP деятельность биопленки S. aureus , образованная в 96-луночных тканевой культуры пластин. Деятельность была основана на образовании продукта растворимых реакции, измеряется 405 нм поглощения. Высокая пропускная способность характер метода 96 хорошо культуры ткани пластины обеспечивает чувствительных и воспроизводимый метод для анализов деятельности ALP. То же экспериментальная Настройка также может распространяться для измерения других внеклеточного молекулярных маркеров, связанных с биопленки.

Рисунок 1 показывает представитель результат деятельности ALP от биопленки культур S. aureus в 96 хорошо культуры ткани пластины. 75 мкл раствора коммерчески доступных pNPP был добавлен в каждый хорошо и инкубируют при комнатной температуре. После инкубац?...

Watch this Scientific Journal Video about Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm at JoVE.com

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

В этой рукописи мы создали метод высокую пропускную способность для количественного определения активности щелочной фосфатазы в S. aureus биопленки культуры от 96-луночных культуры ткани пластины

Колориметрического анализа щелочной фосфатазы деятельность S. aureus биопленки

Alkaline phosphatase (ALP) is a common enzyme expressed in both prokaryotic and eukaryotic cells. It catalyzes the hydrolysis of phosphate monoesters from ...

Этот протокол представил простой и надежный метод измерения алкализованной активности фосфатазы в биопленоченой культуре S.aureus. Это поможет нам понять функцию ALP в формировании биопленки. Основным преимуществом этой техники является высокая пропускная способность.Это очень чувствительный и простой в работе. Демонстрацией процедуры будет Кевин Даниковски, бывший студент колледжа Харпер. Для приготовления TSB добавьте в дистиллированную воду поджелудочной железы кейсин, папаический дайджест соевого шрота, хлорида натрия, декстрозы и фосфата дипотазия.Обложка колбу с алюминиевой фольгой и положить его в автоклав для стерилизации перед использованием. Чтобы подготовить TSA, добавьте агар в TSB и положите его в автоклав для стерилизации. Затем дайте ему остыть до комнатной температуры.Затем вылейте его в чашку Петри в соотношении 20 миллилитров на тарелку. Чтобы подготовить биопленку культуры среды, добавить глюкозы в autoclaved TSB для достижения концентрации 10 граммов на литр. Используя комплект вакуумной фильтрации, фильтруйте раствор фильтром размером с 0,2 микрометра.Чтобы привить, используйте стерилизованную петлю прививки, чтобы выбрать одну индивидуальную колонию золотистого стафилококка из чашки Петри и поместить его в культурную трубку, наполненную 10 миллилитров TSB. Положите трубку в инкубатор, чтобы расти на ночь при 37 градусах по Цельсию. С помощью микропипетта нарисуйте 100 микролитров ночной культуры и перенесите его в культурную трубку, наполненную 10 миллилитров TSB с глюкозой для разбавления соотношения объема 1:100.Vortex осторожно смешивать для последовательной концентрации. Используйте микропипюту для передачи 200 микролитров разбавленной культуры в общей сложности 18 скважин из одной пластины 96 скважин. Инкубировать пластину 96 хорошо при 37 градусах по Цельсию в течение 24 часов для формирования биопленки.Для лучшего формирования биопленки S.aureus, лучше выбрать плоский или круглый нижний 96 хорошо пластины. После этого слегка наклоните пластину, чтобы декантанта стремлением от края каждой хорошо. Вымойте каждый хорошо с 1X PBS.Положите пластину в центрифугу, чтобы вращаться в течение пяти минут при 8000 оборотов в минуту и декантировать супернатант стремлением. Добавьте 75 микролитров буферного субстрата ALP, состоящего из коммерчески доступных PNPP к каждой колодец и используйте таймер для записи каждой точки времени в тройном. После каждой точки инкубации добавьте 75 микролитров пяти гидроксида молярного натрия в каждую из трех скважин, чтобы остановить реакцию.Центрифуга пластины в течение пяти минут при 800 оборотов в минуту. Используйте пипетку для передачи 100 микролитров супернатанта в новую пластину 96 хорошо для калорийного измерения. Используйте 96 хорошо пластины читателя для измерения абсорбтности каждой хорошо на 405 нанометров.Используйте 30-минутные точечные скважины для управления фоновым шумом. Повторите весь эксперимент в трех пластинах 96 хорошо. Этот протокол разрабатывает быстрый и надежный анализ для измерения активности ALP в биопленке S.aureus, которая не требует белковой изоляции.Репрезентативный результат активности ALP показывает повышенную тенденцию на срок до 75 минут. Через 75 минут никакого увеличения активности ALP не наблюдалось. Очень важно создать хорошую культуру биопленки, и это может занять довольно много испытаний, чтобы освоить.Вы можете подтвердить образование биопленки, выполняя кристально фиолетовый анализ, как сообщалось ранее нами и другими, или вы можете предварительно лечить пластину с человеческой плазмы для облегчения формирования биопленки. После его разработки, вы можете экран потенциальных ингибиторов ALP, которые могут помешать формированию биопленки. Результат даст важную информацию для управления биопленкой в медицинской сфере.Пять гидроксида натрия моляра могут быть опасны в случае контакта. Обязательно носите средства индивидуальной защиты при обращении.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Colorimetric Analysis of Alkaline Phosphatase Activity in S. aureus Biofilm

Quantification of Global Diastolic Function by Kinematic Modeling-based Analysis of Transmitral Flow via the Parametrized Diastolic Filling Formalism

Количественная оценка глобальной диастолической функции по кинематическая Моделирование на основе анализа трансмитрального кровотока через Заполнение формализма Параметризованный диастолической

Quantitative cardiac function assessment remains a challenge for physiologists and clinicians.&#160;Although historically invasive methods have comprised ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

Протокол биопленки Streamer формирования в микрожидкостных устройств с Micro-столбов

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Real-time Visualization and Analysis of Chondrocyte Injury Due to Mechanical Loading in Fully Intact Murine Cartilage Explants

В реальном времени визуализации и анализа хондроцитов травмы вследствие механической загрузки в полной сохранности мышиных хряща эксплантов

Homeostasis of articular cartilage depends on the viability of resident cells (chondrocytes). Unfortunately, mechanical trauma can induce widespread ...

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Данио рерио эмбриона модель визуализации Vivo и связанные прижизненной анализ биоматериала стафилококк инфекций

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

High-resolution Patterned Biofilm Deposition Using pDawn-Ag43

Высоким разрешением узорной биопленки осаждения с pDawn-Ag43

Spatial structure and patterning play an important role in bacterial biofilms. Here we demonstrate an accessible method for culturing E. coli biofilms ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Измерение глобального сотовой матрицы металлопротеиназ и метаболической активности в 3D гидрогели

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Home-Based Monitor for Gait and Activity Analysis

Домашний монитор для анализа gait и деятельности

Current outcomes in neuromuscular disorder clinical trials include motor function scales, timed tests, and strength measures performed by trained clinical ...

Substructure Analyzer: A User-Friendly Workflow for Rapid Exploration and Accurate Analysis of Cellular Bodies in Fluorescence Microscopy Images

Анализатор подструктуры: удобный для пользователя рабочий процесс для быстрого исследования и точного анализа клеточных тел в флуоресценции Микроскопия изображения

The last decade has been characterized by breakthroughs in fluorescence microscopy techniques illustrated by spatial resolution improvement but also in ...

Electric and Magnetic Field Devices for Stimulation of Biological Tissues

Электрические и магнитные полевые устройства для стимуляции биологических тканей

Electric fields (EFs) and magnetic fields (MFs) have been widely used by tissue engineering to improve cell dynamics such as proliferation, migration, ...