Name: in vivo three-dimensional two-photon microscopy to study conducted vascular responses by local atp ejection using a glass micro-pipette
Uploaded: 2019-06-07T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Three-Dimensional Two-Photon Microscopy to Study Conducted Vascular Responses by Local ATP Ejection Using a Glass Micro-Pipette at JoVE.com

इस अध्ययन Lundbeck फाउंडेशन, नोवो-नॉरडिस्क फाउंडेशन, स्वतंत्र अनुसंधान के लिए डेनिश परिषद द्वारा समर्थित किया गया था | चिकित्सा विज्ञान, और NORDEA फाउंडेशन अनुदान स्वस्थ उम्र बढ़ने के लिए केंद्र के लिए.

जानवरों से संबंधित सभी प्रक्रियाओं को डेनिश राष्ट्रीय आचार समिति द्वारा प्रायोगिक और अन्य वैज्ञानिक उद्देश्यों के लिए प्रयुक्त Vertebrate पशुओं के संरक्षण के लिए यूरोपीय परिषद के कन्वेंशन में ?...

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	<li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A., Dolman, D. E., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+Function+of+the+Blood-Brain+Barrier.">Structure and Function of the Blood-Brain Barrier.</a> Neurobiology of Disease. 37 (1), 13-25 (2010).</li><li>Hall, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+Pericytes+Regulate+Cerebral+Blood+Flow+in+Health+and+Disease.">Capillary Pericytes Regulate Cerebral Blood Flow in Health and Disease.</a> Nature. 508 (7494), 55-60 (2014).</li><li>Cai, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation-Induced+Increases+in+Cerebral+Blood+Flow+and+Local+Capillary+Vasoconstriction+Depend+on+Conducted+Vascular+Responses.">Stimulation-Induced Increases in Cerebral Blood Flow and Local Capillary Vasoconstriction Depend on Conducted Vascular Responses.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115 (25), 5796-5804 (2018).</li><li>Stosiek, C., Garaschuk, O., Holthoff, K., Konnerth, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+Vivo+Two-Photon+Calcium+Imaging+of+Neuronal+Networks.">In Vivo Two-Photon Calcium Imaging of Neuronal Networks.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 100 (12), 7319-7324 (2003).</li><li>Mathiesen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-Dependent+Increases+in+Local+Oxygen+Consumption+Correlate+with+Postsynaptic+Currents+in+the+Mouse+Cerebellum+in+Vivo.">Activity-Dependent Increases in Local Oxygen Consumption Correlate with Postsynaptic Currents in the Mouse Cerebellum in Vivo.</a> The Journal of Neuroscience. 31 (50), 18327-18337 (2011).</li><li>Kitamura, K., Judkewitz, B., Kano, M., Denk, W., Hausser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+Patch-Clamp+Recordings+and+Single-Cell+Electroporation+of+Unlabeled+Neurons+in+Vivo.">Targeted Patch-Clamp Recordings and Single-Cell Electroporation of Unlabeled Neurons in Vivo.</a> Nature Methods. 5 (1), 61-67 (2008).</li><li>Norup Nielsen, A., Lauritzen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coupling+and+Uncoupling+of+Activity-Dependent+Increases+of+Neuronal+Activity+and+Blood+Flow+in+Rat+Somatosensory+Cortex.">Coupling and Uncoupling of Activity-Dependent Increases of Neuronal Activity and Blood Flow in Rat Somatosensory Cortex.</a> The Journal of Physiology. 533 (3), 773-785 (2001).</li><li>Wang, X. F., Huang, D. S., Xu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Efficient+Local+Chan-Vese+Model+for+Image+Segmentation.">An Efficient Local Chan-Vese Model for Image Segmentation.</a> Pattern Recognition. 43 (3), 603-618 (2010).</li><li>Chan, T. E., Sandberg, B. Y., Vese, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+Contours+without+Edges+for+Vector-Valued+Images.">Active Contours without Edges for Vector-Valued Images.</a> Journal of Visual Communication and Image Representation. 11 (2), 130-141 (2000).</li><li>Cetin, A., Komai, S., Eliava, M., Seeburg, P. H., Osten, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stereotaxic+Gene+Delivery+in+the+Rodent+Brain.">Stereotaxic Gene Delivery in the Rodent Brain.</a> Nature Protocols. 1 (6), 3166-3173 (2006).</li><li>Chen, B. R., Kozberg, M. G., Bouchard, M. B., Shaik, M. A., Hillman, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Critical+Role+for+the+Vascular+Endothelium+in+Functional+Neurovascular+Coupling+in+the+Brain.">A Critical Role for the Vascular Endothelium in Functional Neurovascular Coupling in the Brain.</a> Journal of the American Heart Association. 3 (3), 000787 (2014).</li><li>Lind, B. L., Brazhe, A. R., Jessen, S. B., Tan, F. C., Lauritzen, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+Stimulus-Evoked+Astrocyte+Ca2++Elevations+and+Hemodynamic+Responses+in+Mouse+Somatosensory+Cortex+in+Vivo.">Rapid Stimulus-Evoked Astrocyte Ca2+ Elevations and Hemodynamic Responses in Mouse Somatosensory Cortex in Vivo.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (48), 4678-4687 (2013).</li><li>Stobart, J. L., Ferrari, K. D., Barrett, M. J. P., Gluck, C., Stobart, M. J., Zuend, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+Circuit+Activity+Evokes+Rapid+Astrocyte+Calcium+Signals+on+a+Similar+Timescale+to+Neurons.">Cortical Circuit Activity Evokes Rapid Astrocyte Calcium Signals on a Similar Timescale to Neurons.</a> Neuron. 98 (4), 726 (2018).</li><li>Bouchard, M. B., Voleti, V., Mendes, C. S., Lacefield, C., Grueber, W. B., Mann, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Swept+Confocally-Aligned+Planar+Excitation+(Scape)+Microscopy+for+High+Speed+Volumetric+Imaging+of+Behaving+Organisms.">Swept Confocally-Aligned Planar Excitation (Scape) Microscopy for High Speed Volumetric Imaging of Behaving Organisms.</a> Nature Photonics. 9 (2), 113-119 (2015).</li></ol>

संवहनी अध्ययन के लिए एक चुनौती पोत व्यास का सटीक माप है. विधि हम यहाँ का वर्णन एक motorized piezo उद्देश्य दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी द्वारा तेजी से और दोहराव hyperstack इमेजिंग बनाने के लिए इस्तेमाल किया. सबसे पहले, इस विध?...

मस्तिष्क एक उच्च ऊर्जा की खपत दर है. ऑक्सीजन के बारे में 20% और मानव शरीर द्वारा भस्म ग्लूकोज का 25% मस्तिष्क समारोह के लिए समर्पित कर रहे हैं, जबकि मस्तिष्क केवल कुल शरीर द्रव्यमान का 2% रह रहे हैं. सामान्य मस्तिष्क समारोह के रखरखाव के लिए जहाजों के एक जटिल नेटवर्क में रक्त प्रवाह द्वारा ऑक्सीजन और पोषण की पर्याप्त और कुशल आपूर्ति की आवश्यकता होती है। स्थानीय मस्तिष्क गतिविधि और मस्तिष्क रक्त प्रवाह (सीबीएफ) मजबूत युग्मित कर रहे हैं, न्यूरॉन्स के कार्यात्मक गुणों पर निर्भर करता है, astrocytes, pericytes, चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं (SMCs) और endothelial कोशिकाओं (ईसी)1. हाल ही में, मर्मज्ञ धमनी से शाखा के केशिकाओं के पहले कुछ आदेश एक 'हॉटस्पॉट'2के रूप में उभरा है, जो केशिका रक्त प्रवाह के सक्रिय विनियमन को दर्शाता है। एक धीमी गति से आयोजित संवहनी प्रतिक्रिया (सीवीआर) माउस somatosensory प्रांतस्था में इस 'हॉटस्पॉट' पर दोनों whisker उत्तेजना और एक गिलास माइक्रो-पिपेट3के साथ एटीपी के स्थानीय निष्कासन (puffing) के दौरान की खोज की थी.
हालांकि दो-फोटोन लेजर स्कैनिंग फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोपी द्वारा विवो इमेजिंग में व्यापक रूप से सेरेब्रल कॉर्टेक्स में neurovascular प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है, अध्ययन के अधिकांश रक्त वाहिका व्यास मापा और एक में उनके विनियमन की जांच की द्वि-आयामी (2डी) x-y विमान. चुनौतियां हैं: सबसे पहले, सेरेब्रल रक्त वाहिकाओं और उनके गले लगाने एस्ट्रोसाइट्स, pericytes और SMCs तीन आयामों (3 डी) में शाखाओं का निर्माण. इसलिए यह 3 डी में उनकी बातचीत का अध्ययन करने के लिए महत्वपूर्ण है. दूसरे, यहां तक कि ध्यान में बहाव की एक छोटी राशि दोनों पोत व्यास और सेलुलर फ्लोरोसेंट संकेतों का सटीक माप को प्रभावित करेगा. अंत में, CVRs तेजी से और तीन आयामों में दूरगामी हैं. 3 डी मात्रा स्कैनिंग CVRs का पता लगाने और उनके तंत्र का अनावरण करने के लिए इष्टतम है। हम एक दो-फोटोन माइक्रोस्कोप में एक piezo मोटर उद्देश्य लागू करने के लिए vivo में माउस somatosensory प्रांतस्था का अध्ययन, प्राप्त छवियों की अधिकतम तीव्रता अनुमानों द्वारा सटीक व्यास माप की अनुमति.
ग्लास माइक्रो-पिपेट्स का उपयोग विवो मस्तिष्क अध्ययन में अक्सर किया जाता है, उदाहरण के लिए, थोक-लोड कार्बनिक रंगोंकेलिए 4, रिकॉर्ड ईईजी5 और पैच क्लैम्पिंग6के लिए। फिर भी, सीमाएं बनी हुई हैं। आम तौर पर, कांच माइक्रो-पिपेट की नोक को imprecisely रखा जाता है, या स्थानीय हस्तक्षेप के लिए माइक्रो-पिपेट का उपयोग नहीं किया जाता है। यहाँ, हम माइक्रो-पिपेट प्रविष्टि और स्थानीय निष्कासन की प्रक्रिया को अनुकूलित किया है।
इसके अलावा, 3 डी दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी और आनुवंशिक रूप से एनकोडेड फ्लोरोसेंट संकेतक ों का संयोजन 3 डी दायरे में न्यूरोवास्कुलर युग्मन की जांच करने का एक अभूतपूर्व अवसर प्रदान करता है। इस अध्ययन में, हम इस का लाभ उठाया और वायरल वैक्टर इंजेक्शन astrocyte विशिष्ट आनुवंशिक रूप से encoded कैल्शियम संकेतक ों माउस somatosensory प्रांतस्था में ले. Astrocytes के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पोत व्यास विभिन्न फ्लोरोसेंट मार्करों के संयोजन के द्वारा एक साथ छवि थे.
कुल मिलाकर, हम कांच माइक्रो-पिपेट और तेजी से दो-फोटोन हाइपरस्टैक इमेजिंग द्वारा स्थानीय निष्कासन (पफिंग) की एक अनुकूलित विधि पेश करते हैं, जो केशिका व्यास परिवर्तन के सटीक माप की अनुमति देता है। इसके अलावा, हमारी विधि एक साथ एस्ट्रोसाइट्स और संवहनी व्यास प्रतिक्रियाओं में Ca2 + प्रतिक्रियाओं के 3 डी प्रोफाइल का अध्ययन करने के लिए एक उपन्यास उपकरण प्रदान करता है।

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1161px;" width="1162">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Agarose</td>
			<td style="width:263px;">Sigma&#8211;Aldrich</td>
			<td style="width:152px;">A6138</td>
			<td style="width:524px;">Apply upon exposed cortex for protection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Alexa 594</td>
			<td>Life Technologies</td>
			<td>A-10438</td>
			<td>Stain puffing compound to red fluorescent color</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ATP</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9187</td>
			<td>Vasodilator and vasoconstrictor, puffing compound</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate glue and activator</td>
			<td>Loctite</td>
			<td>Adhesives and SF7452</td>
			<td>Glue for metal piece and coverglass</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Eye lubricant</td>
			<td style="width:263px;">Neutral Ophtha, Ophtha A/S, Denmark</td>
			<td style="width:152px;"></td>
			<td>Keep the mouse eyes moisterized</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">FITC-dextran</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:152px;">FD500S</td>
			<td>Blood serum dye, green fluorescent color</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">NG2DsRed mice</td>
			<td style="width:263px;">Jackson Laboratory</td>
			<td style="width:152px;">8241</td>
			<td style="width:524px;">These transgenic mice express an red fluorescent protein variant (DsRed) under the control of the mouse NG2 (Cspg4) promoter</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">pZac2.1 gfaABC1D-lck-GCaMP6f</td>
			<td style="width:263px;">Addgene</td>
			<td style="width:152px;">52924-AAV5</td>
			<td>Astrocyte specific viral vectors carrying genetically encoded calcium indicators</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TRITC-dextran</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:152px;">52194</td>
			<td>Blood serum dye, red fluorescent color</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">List of Equipments</td>
			<td style="width:263px;"></td>
			<td style="width:152px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Air pump</td>
			<td>WPI</td>
			<td>PV830</td>
			<td>Give air pressure to pipette puffing</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Blood gas analyzer</td>
			<td style="width:263px;">Radiometer</td>
			<td>ABL 700</td>
			<td>Measure levels of blood gases&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Blood pressure monitor</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>BP-1</td>
			<td>Monitor aterial blood pressure</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Body temperature controller</td>
			<td>CWE</td>
			<td>Model TC-1000</td>
			<td>Keep the mouse body temperature in physiological range</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:223px;">Capnograph</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>Type 340</td>
			<td>Monitor the end-expiratory CO2 from the mouse</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Electrical stimulator</td>
			<td style="width:263px;">A.M.P.I.</td>
			<td>ISO-flex</td>
			<td>Apply whisker pad stimulation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Mechanical ventilator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>D-79232</td>
			<td>Mechanically ventilate the mouse in physiological range</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Micropipette puller</td>
			<td style="width:263px;">Sutter Instrument</td>
			<td>P-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">Two-photon microscope</td>
			<td>Femtonics Ltd</td>
			<td>Femto3D-RC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:223px;">List of Surgical Instruments</td>
			<td style="width:263px;"></td>
			<td style="width:152px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anatomical tweezer&#160;</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>09-0007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Angled and balanced tweezer</td>
			<td>S&#38;T AG</td>
			<td>00595 FRAS-18 RM-8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Iris scissor</td>
			<td>Lawton</td>
			<td>05-1450</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro vascular clamp</td>
			<td>S&#38;T AG</td>
			<td>462</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Mouse vascular catheters</td>
			<td>Verutech</td>
			<td>100828</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo three-dimensional two-photon microscopy to study conducted vascular responses by local atp ejection using a glass micro-pipette

सामान्य मस्तिष्क समारोह के रखरखाव जहाजों के एक जटिल नेटवर्क द्वारा ऑक्सीजन और पोषण की एक पर्याप्त और कुशल आपूर्ति की आवश्यकता है. हालांकि, मस्तिष्क रक्त प्रवाह (सीबीएफ) के विनियमन को अधूरा समझा जाता है, विशेष रूप से केशिका स्तर पर। दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी एक शक्तिशाली उपकरण है जिसका उपयोग सीबीएफ और इसके विनियमन का अध्ययन करने के लिए व्यापक रूप से किया जाता है। वर्तमान में, इस क्षेत्र में की कमी से सीमित है vivo दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी अध्ययन की जांच (1) तीन-आयामों में CBF प्रतिक्रियाओं, (2) संवहनी प्रतिक्रियाओं का आयोजन किया, और (3) संवहनी नेटवर्क के भीतर स्थानीयकृत हस्तक्षेप. यहाँ, हम एक गिलास माइक्रो-पिपेट के साथ एटीपी के स्थानीय निष्कासन द्वारा प्रकाश में लाया संवहनी प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी का उपयोग कर विवो विधि में एक 3 डी का वर्णन। हमारी विधि प्राप्त छवियों की अधिकतम तीव्रता प्रक्षेपण द्वारा सटीक व्यास माप प्रदान तेजी से और दोहराव hyperstack दो-फोटोन इमेजिंग का उपयोग करता है. इसके अलावा, हम बताते हैं कि इस विधि भी 3 डी astrocytic कैल्शियम प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हम कांच के माइक्रो-पिपेट प्रविष्टि और दो-फोटोन हाइपरस्टैक इमेजिंग के फायदे और सीमाओं पर भी चर्चा करते हैं।

एक बार सर्जरी पूरी हो जाने के बाद चूहों को दो-फोटोन माइक्रोस्कोप में ले जाया गया (चित्र1ए)। लक्ष्य स्थान पर गंतव्य रक्त वाहिका के निकट 1 एम एम एटीपी युक्त एक ग्लास माइक्रो-पिपेट डाला गया ...

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In Vivo Three-Dimensional Two-Photon Microscopy to Study Conducted Vascular Responses by Local ATP Ejection Using a Glass Micro-Pipette

हम एक अनुकूलित स्थानीय निष्कासन प्रक्रिया एक गिलास माइक्रो-पिपेट और एक तेजी से दो-फोटोन हाइपरस्टैक इमेजिंग विधि का उपयोग करके प्रस्तुत करते हैं, जो केशिका व्यास परिवर्तन और तीन आयामों में इसके विनियमन की जांच की सटीक माप की अनुमति देता है।

Vivo में तीन-आयाम दो-फोटो माइक्रोस्कोपी अध्ययन करने के लिए स्थानीय एटीपी इंजेक्शन द्वारा एक ग्लास माइक्रो-पिपेट का उपयोग करके संवहनी जवाब आयोजित

Maintenance of normal brain function requires a sufficient and efficient supply of oxygen and nutrition by a complex network of vessels. However, the ...

यह प्रोटोकॉल एटीपी के स्थानीय इंजेक्शन द्वारा प्राप्त सेरेब्रल केशिकाओं में धीमी गति से आयोजित संवहनी प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए डिज़ाइन किया गया है। इस तकनीक का लाभ स्थानीय पिपेट रिजेक्शन द्वारा स्थानीय सिनैप्टिक गतिविधियों का अनुकरण करना और अल्प पोत को 3 डी दो-फोटॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा ध्यान में रखना है। इस विधि का उपयोग सेरेब्रल न्यूरोमा और ग्लियल गतिविधि का अध्ययन करने के लिए भी किया जा सकता है और तीन आयामों में उत्तेजना पर। प्रक्रिया का प्रदर्शन माइकल एल होगा

Research

JoVE Journal

Neuroscience

In vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord Using Two-photon Microscopy

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माउस रीढ़ की हड्डी दो photon माइक्रोस्कोपी का उपयोग गर्भनाल के vivo इमेजिंग में

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Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI

कार्यात्मक न्यूरोइमेजिंग अल्ट्रासोनिक रक्त मस्तिष्क बाधा विघटन और मैंगनीज बढ़ाकर एमआरआई का उपयोग

Although mice are the dominant model system for studying the genetic and molecular underpinnings of neuroscience, functional neuroimaging in mice remains ...

In Vivo Two-photon Imaging Of Experience-dependent Molecular Changes In Cortical Neurons

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Vivo में दो photon इमेजिंग cortical न्यूरॉन्स में अनुभव पर निर्भर आणविक परिवर्तन

The brain's ability to change in response to experience is essential for healthy brain function, and abnormalities in this process contribute to a variety ...

In Vivo Two-Photon Microscopy of Single Nerve Endings in Skin

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त्वचा में एकल तंत्रिका अंत के vivo दो photon माइक्रोस्कोपी में

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Two-Photon in vivo Imaging of Dendritic Spines in the Mouse Cortex Using a Thinned-skull Preparation

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दो photon<em&gt; में विवो</em&gt; एक पतला खोपड़ी तैयारी का उपयोग माउस प्रांतस्था में वृक्ष के समान spines के इमेजिंग

In the mammalian cortex, neurons form extremely complicated networks and exchange information at synapses. Changes in synaptic strength, as well as ...

The Olfactory System as a Model to Study Axonal Growth Patterns and Morphology In Vivo

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एक मॉडल के रूप घ्राण प्रणाली axonal विकास पैटर्न और आकृति विज्ञान का अध्ययन करने के लिए<em&gt; Vivo</em

The olfactory system has the unusual capacity to generate new neurons throughout the lifetime of an organism. Olfactory stem cells in the basal portion of ...

Quantification of Cerebral Vascular Architecture using Two-photon Microscopy in a Mouse Model of HIV-induced Neuroinflammation

एचआईवी प्रेरित neuroinflammation के एक माउस मॉडल में दो photon माइक्रोस्कोपी का उपयोग मस्तिष्क संवहनी वास्तुकला की मात्रा

Human Immunodeficiency Virus 1 (HIV-1) infection frequently results in HIV-1 Associated Neurocognitive Disorders (HAND), and is characterized by a chronic ...

In Vivo Two-photon Imaging of Cortical Neurons in Neonatal Mice

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वीवो में नवजात चूहों में Cortical न्यूरॉन्स की दो-फोटॉन इमेजिंग

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Two-photon Imaging of Microglial Processes' Attraction Toward ATP or Serotonin in Acute Brain Slices

तीव्र मस्तिष्क स्लाइस में एटीपी या सेरोटोनिन की ओर Microglial प्रक्रियाओं ' आकर्षण के दो-फोटॉन इमेजिंग

Microglial cells are resident innate immune cells of the brain that constantly scan their environment with their long processes and, upon disruption of ...

Visualizing Protein Kinase A Activity In Head-fixed Behaving Mice Using In Vivo Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy

प्रोटीन Kinase कल्पना एक गतिविधि में सिर तय व्यवहार चूहे Vivo दो-फोटोन फ्लोरेसेंस लाइफटाइम इमेजिंग माइक्रोस्कोपी में उपयोग

Neuromodulation exerts powerful control over brain function. Dysfunction of neuromodulatory systems results in neurological and psychiatric disorders. ...