Name: studying oxidative stress caused by the mitis group streptococci in caenorhabditis elegans
Uploaded: 2019-03-23T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

אנו מודים ד ר בינג-יאן וואנג, ד ר ג'ינה Tribble (אוניברסיטת טקסס, בית הספר לרפואת שיניים), ד ר ריצ'רד למונט (אוניברסיטת לואיוויל, בית הספר לרפואת שיניים), ד ר סמואל Shelburne (MD Anderson Cancer Center) עבור מתן מעבדה קלינית זנים של מיטיס קבוצת streptococci. אנו מודים גם ד ר קית בלקוול (במחלקה לגנטיקה, הרוורד) עבור זנים C. elegans . לבסוף, אנו מודים ד ר דניאל Garsin, המעבדה שלה (אוניברסיטת טקסס, מבית הספר לרפואה מקגוורן) לאספקת ריאגנטים וללחצים תולעת לערוך את המחקר. כמה זנים תולעת נמסרו על ידי CGC, אשר ממומן על ידי משרד NIH תוכניות תשתית מחקר (P40 OD010440).

1. הכנת את פלטות אגר (תמצית שמרים טוד יואיט)
<ol><li>1 ליטר של מדיה, להוסיף 30 גרם של אבקת טוד יואיט, דור 2 של תמצית שמרים וכ 20 גר' אגר אל בקבוק Erlenmeyer 2 ל'. להוסיף התוכן של הבקבוק 970 מ ל מים יונים, כוללים בר מערבבים. אוטוקלב התקשורת-לטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס ולחץ של 15 ליברות לאינץ2 למשך 30 דקות. לא...

<ol>
	<li>Human Microbiome Project, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure,+function+and+diversity+of+the+healthy+human+microbiome.">Structure, function and diversity of the healthy human microbiome.</a> Nature. 486 (7402), 207-214 (2012).</li><li>Mitchell, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+mitis:+walking+the+line+between+commensalism+and+pathogenesis.">Streptococcus mitis: walking the line between commensalism and pathogenesis.</a> Molecular Oral Microbiology. 26 (2), 89-98 (2011).</li><li>Dyson, C., Barnes, R. A., Harrison, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infective+endocarditis:+an+epidemiological+review+of+128+episodes.">Infective endocarditis: an epidemiological review of 128 episodes.</a> Journal of Infection. 38 (2), 87-93 (1999).</li><li>Sahasrabhojane, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Species-level+assessment+of+the+molecular+basis+of+fluoroquinolone+resistance+among+viridans+group+streptococci+causing+bacteraemia+in+cancer+patients.">Species-level assessment of the molecular basis of fluoroquinolone resistance among viridans group streptococci causing bacteraemia in cancer patients.</a> International Journal of Antimicrobial Agents. 43 (6), 558-562 (2014).</li><li>Shelburne, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+mitis+strains+causing+severe+clinical+disease+in+cancer+patients.">Streptococcus mitis strains causing severe clinical disease in cancer patients.</a> Emerging Infectious Diseases. 20 (5), 762-771 (2014).</li><li>van der Meer, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution,+antibiotic+susceptibility+and+tolerance+of+bacterial+isolates+in+culture-positive+cases+of+endocarditis+in+The+Netherlands.">Distribution, antibiotic susceptibility and tolerance of bacterial isolates in culture-positive cases of endocarditis in The Netherlands.</a> European Journal of Clinical Microbiology &amp; Infectious Diseases. 10 (9), 728-734 (1991).</li><li>Han, X. Y., Kamana, M., Rolston, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viridans+streptococci+isolated+by+culture+from+blood+of+cancer+patients:+clinical+and+microbiologic+analysis+of+50+cases.">Viridans streptococci isolated by culture from blood of cancer patients: clinical and microbiologic analysis of 50 cases.</a> Journal of Clinical Microbiology. 44 (1), 160-165 (2006).</li><li>Hoshino, T., Fujiwara, T., Kilian, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+phylogenetic+and+phenotypic+analyses+to+identify+nonhemolytic+streptococci+isolated+from+bacteremic+patients.">Use of phylogenetic and phenotypic analyses to identify nonhemolytic streptococci isolated from bacteremic patients.</a> Journal of Clinical Microbiology. 43 (12), 6073-6085 (2005).</li><li>Kohno, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infectious+complications+in+patients+receiving+autologous+CD34-selected+hematopoietic+stem+cell+transplantation+for+severe+autoimmune+diseases.">Infectious complications in patients receiving autologous CD34-selected hematopoietic stem cell transplantation for severe autoimmune diseases.</a> Transplant Infectious Disease. 11 (4), 318-323 (2009).</li><li>Zhu, L., Kreth, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+hydrogen+peroxide+in+environmental+adaptation+of+oral+microbial+communities.">The role of hydrogen peroxide in environmental adaptation of oral microbial communities.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. , 717843 (2012).</li><li>Okahashi, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogen+peroxide+contributes+to+the+epithelial+cell+death+induced+by+the+oral+mitis+group+of+streptococci.">Hydrogen peroxide contributes to the epithelial cell death induced by the oral mitis group of streptococci.</a> PLoS One. 9 (1), 88136 (2014).</li><li>Stinson, M. W., Alder, S., Kumar, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasion+and+killing+of+human+endothelial+cells+by+viridans+group+streptococci.">Invasion and killing of human endothelial cells by viridans group streptococci.</a> Infection and Immunity. 71 (5), 2365-2372 (2003).</li><li>Rai, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Streptococcus+pneumoniae+secretes+hydrogen+peroxide+leading+to+DNA+damage+and+apoptosis+in+lung+cells.">Streptococcus pneumoniae secretes hydrogen peroxide leading to DNA damage and apoptosis in lung cells.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (26), 3421-3430 (2015).</li><li>Braun, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pneumococcal+pneumolysin+and+H(2)O(2)+mediate+brain+cell+apoptosis+during+meningitis.">Pneumococcal pneumolysin and H(2)O(2) mediate brain cell apoptosis during meningitis.</a> Journal of Clinical Investigation. 109 (2), 19-27 (2002).</li><li>Naji, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+activation+of+the+oxidative+stress+response+transcription+factor+SKN-1+in+Caenorhabditis+elegans+by+mitis+group+streptococci.">The activation of the oxidative stress response transcription factor SKN-1 in Caenorhabditis elegans by mitis group streptococci.</a> PLoS One. 13 (8), 0202233 (2018).</li><li>Bolm, M., Jansen, W. T., Schnabel, R., Chhatwal, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hydrogen+peroxide-mediated+killing+of+Caenorhabditis+elegans:+a+common+feature+of+different+streptococcal+species.">Hydrogen peroxide-mediated killing of Caenorhabditis elegans: a common feature of different streptococcal species.</a> Infection and Immunity. 72 (2), 1192-1194 (2004).</li><li>Sifri, C. D., Begun, J., Ausubel, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+worm+has+turned--microbial+virulence+modeled+in+Caenorhabditis+elegans.">The worm has turned--microbial virulence modeled in Caenorhabditis elegans.</a> Trends in Microbiology. 13 (3), 119-127 (2005).</li><li>Irazoqui, J. E., Ausubel, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=99th+Dahlem+conference+on+infection,+inflammation+and+chronic+inflammatory+disorders:+Caenorhabditis+elegans+as+a+model+to+study+tissues+involved+in+host+immunity+and+microbial+pathogenesis.">99th Dahlem conference on infection, inflammation and chronic inflammatory disorders: Caenorhabditis elegans as a model to study tissues involved in host immunity and microbial pathogenesis.</a> Clinical &amp; Experimental Immunology. 160 (1), 48-57 (2010).</li><li>Van Raamsdonk, J. M., Hekimi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactive+Oxygen+Species+and+Aging+in+Caenorhabditis+elegans:+Causal+or+Casual+Relationship.">Reactive Oxygen Species and Aging in Caenorhabditis elegans: Causal or Casual Relationship.</a> Antioxidants &amp; Redox Signaling. 13 (12), 1911-1953 (2010).</li><li>Tissenbaum, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+C.+elegans+for+aging+research.">Using C. elegans for aging research.</a> Invertebrate Reproduction &amp; Development. 59, 59-63 (2015).</li><li>Blackwell, T. K., Steinbaugh, M. J., Hourihan, J. M., Ewald, C. Y., Isik, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SKN-1/Nrf,+stress+responses,+and+aging+in+Caenorhabditis+elegans.">SKN-1/Nrf, stress responses, and aging in Caenorhabditis elegans.</a> Free Radical Biology &amp; Medicine. 88, 290-301 (2015).</li><li>Irazoqui, J. E., Urbach, J. M., Ausubel, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+host+innate+defence:+insights+from+Caenorhabditis+elegans+and+primitive+invertebrates.">Evolution of host innate defence: insights from Caenorhabditis elegans and primitive invertebrates.</a> Nature Reviews Immunology. 10 (1), 47-58 (2010).</li><li>Park, S. K., Tedesco, P. M., Johnson, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidative+stress+and+longevity+in+Caenorhabditis+elegans+as+mediated+by+SKN-1.">Oxidative stress and longevity in Caenorhabditis elegans as mediated by SKN-1.</a> Aging Cell. 8 (3), 258-269 (2009).</li><li>An, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+the+Caenorhabditis+elegans+oxidative+stress+defense+protein+SKN-1+by+glycogen+synthase+kinase-3.">Regulation of the Caenorhabditis elegans oxidative stress defense protein SKN-1 by glycogen synthase kinase-3.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 102 (45), 16275-16280 (2005).</li><li>An, J. H., Blackwell, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SKN-1+links+C.+elegans+mesendodermal+specification+to+a+conserved+oxidative+stress+response.">SKN-1 links C. elegans mesendodermal specification to a conserved oxidative stress response.</a> Genes &amp; Development. 17 (15), 1882-1893 (2003).</li><li>Moy, T. I., Mylonakis, E., Calderwood, S. B., Ausubel, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxicity+of+hydrogen+peroxide+produced+by+Enterococcus+faecium.">Cytotoxicity of hydrogen peroxide produced by Enterococcus faecium.</a> Infection and Immunity. 72 (8), 4512-4520 (2004).</li><li>Pincus, Z., Mazer, T. C., Slack, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autofluorescence+as+a+measure+of+senescence+in+C.+elegans:+look+to+red,+not+blue+or+green.">Autofluorescence as a measure of senescence in C. elegans: look to red, not blue or green.</a> Aging (Albany NY). 8 (5), 889-898 (2016).</li><li>Teuscher, A. C., Ewald, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overcoming+Autofluorescence+to+Assess+GFP+Expression+During+Normal+Physiology+and+Aging+in+Caenorhabditis+elegans.">Overcoming Autofluorescence to Assess GFP Expression During Normal Physiology and Aging in Caenorhabditis elegans.</a> Bio-protocol. 8 (14), (2018).</li></ol>

ניתן להשתמש בשיטות המתוארות חיידקים פתוגניים אחרים כגון Enterococcus faecium, המייצרת גם את2O H2 גדל תחת אנאירובי או microaerophilic תנאים26. בדרך כלל, עבור אורגניזמים פתוגניים ביותר, זה לוקח מספר ימים עד שבועות כדי להשלים את מבחני הישרדות. עם זאת, עקב ייצור חזקות של2O H2</su...

מיטיס קבוצה streptococci הם commensals האנושי של חלל הלוע התחתון1. עם זאת, אורגניזמים אלה ניתן לברוח הנישה הזאת, לגרום למגוון של מחלות פולשניות2. זיהומים הנגרמים על ידי מיקרואורגניזמים אלה כוללים בקטרמיה, דלקת פנים הלב ו צלוליטיס מסלולית2,3,4,5,6. יתר על כן, הם מתגלים סוכנים סיבתי כמו של מחזור הדם זיהומים בתוך neutropenic immunocompromised, ולאחר חולי סרטן שעברו טיפול כימותרפי5,7,8,9 .
מנגנוני פתוגנזה קבוצה מיטיס המשמש כבסיס הוא מעורפל, כי זוהו מספר גורמים התקפה אלימה. הקבוצה מיטיס ידוע לייצר H2O2, אשר הראו לשחק תפקיד חשוב קהילות מיקרוביאלי אוראלי10. לאחרונה, מספר מחקרים הראו תפקיד עבור H2O2 כמו cytotoxin שגורם תאים אפיתל מוות11,12. S. דלקת ריאות, אשר שייך לקבוצה זו, הוכח לייצר רמות גבוהות של2O H2 שגורם נזק לדנ א של אפופטוזיס בתאים מכתשי13. שימוש במודל חיה דלקת ריאות חריפה, אותם חוקרים הראו כי הייצור של2O H2 על ידי החיידקים מקנה יתרון התקפה אלימה. מחקרים על דלקת קרום המוח pneumococcal הראו גם שאת הפתוגן, נגזר H2O2 פועל בסינרגיה עם pneumolysin כדי לעורר דופאמינרגיים המוות14. תצפיות אלה לקבוע בבירור את2O H2 המיוצר על ידי קבוצת חיידקים חשוב עבור פתוגניות שלהם.
מעניין, גם הוכח כי חברי מיטיס הקבוצה מיטיס ס , ס' oralis לגרום למוות של נמטודות C. elegans דרך הייצור של H2O215,16. תולעים נימיות אל-אווירני עצמאי זה שימש כמודל פשוטה, צייתן גנטית ללמוד תהליכים ביולוגיים רבים. לאחרונה, התולעת התפתחה כמודל ללמוד פתוגן-פונדקאי אינטראקציות17,18. בנוסף, מספר מחקרים הדגישו את החשיבות של לימוד לחץ חימצוני באמצעות זה אורגניזם19,20,21. מחזור חיים קצר שלו, היכולת תמונות ציפורים הגנים של עניין על-ידי RNAi, ושימוש של חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP)-הכתבים מאוחה כדי לפקח על ביטוי גנים, חלק תכונות שהופכות אותו מערכת מודל אטרקטיבי. חשוב מכך, המסלולים המסדירים סטרס חמצוני, מולדת חסינות של התולעת מאוד נשמרים עם יונקים20,22.
ב פרוטוקול זה, הוכח כיצד להשתמש C. elegans התירי את פתוגניות נגרם על-ידי streptococcal-derived H2O2. וזמינותו להישרדות ששונה מוצג, חברי הקבוצה מיטיס מסוגלים להרוג את התולעים במהירות דרך הייצור של2O H2. באמצעות חברי הקבוצה מיטיס, מקור ביולוגי מתמשכת של מינים חמצן תגובתי (ROS) מסופק, לעומת מקורות כימי זירוז סטרס חמצוני של התולעים. יתר על כן, החיידקים מסוגלים ליישב את התולעים במהירות, מה שמאפשר עבור2O H2 להיות ממוקד ישירות אל תאי המעי (לעומת מקורות אחרים צריך לחצות את המחסומים מספר). וזמינותו מאומת גם 1) קביעת ההישרדות של המתח מוטציה skn-1 או 2) על-ידי הורסים skn-1 באמצעות RNAi תולעים ביחס N2 פראי-סוג ותולעים שליטה מטופלים וקטור. SKN-1 הוא גורם שעתוק חשובים המסדירה את תגובת לחץ חימצוני ב- C. elegans23,24,25. בנוסף מבחני הישרדות, זן תולעת לבטא כתב מהונדס SKN-1B/C::GFP משמש כדי לפקח על ההפעלה של סטרס חמצוני תגובה דרך הייצור של H-2-O-2 ע י קבוצת מיטיס.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:845px;" width="845">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Media and chemicals</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Agarose&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">A9539-50G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Bacto peptone&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">DF0118-17-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">BD Bacto Todd Hewitt Broth</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">DF0492-17-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">BD BBL Sheep Blood, Defibrinated&#160;&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">B11947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">BD Difco Agar&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">DF0145-17-0</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">BD Difco LB Broth</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">DF0446-17-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Blood agar (TSA with Sheep Blood)</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">R01200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Calcium Chloride</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP510-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Carbenicillin</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP26481</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Catalase&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td>C1345-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Cholesterol</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">ICN10138201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">IPTG</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">MP21021012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Magnesium sulfate</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP213-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Nystatin</td>
			<td style="width:179px;">Acros organics</td>
			<td style="width:119px;">AC455500050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Potassium Phosphate Dibasic</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP363-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Potassium phosphate monobasic</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP362-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Sodium Azide</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">S2002-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Sodium chloride&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP358-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Sodium Hydroxide</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">SS266-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">8.25% Sodium Hypochlorite</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Sodium Phosphate Dibasic&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP332-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Streptomycin Sulfate&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP910-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Tetracyclin</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">87128-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">(&#8722;)-Tetramisole hydrochloride</td>
			<td style="width:179px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">L9756</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Yeast extract</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">BP1422-500&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Consumables&#160;</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">15mL Conical Sterile Polypropylene Centrifuge Tubes&#160;</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">12-565-269</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Disposable Polystyrene Serological Pipettes 10mL</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">07-200-574</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Disposable Polystyrene Serological Pipettes 25mL</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">07-200-575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Falcon Bacteriological Petri Dishes with Lid (35 x 10 mm)</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">08-757-100A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">No. 1.5&#160; 18 mm X 18 mm Cover Slips</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">12-541A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Petri Dish with Clear Lid (60 x 15 mm)</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">FB0875713A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Petri Dishes with Clear Lid (100X15mm)</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">FB0875712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Plain Glass Microscope Slides (75 x 25 mm)</td>
			<td style="width:179px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">12-544-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Software&#160;</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Prism</td>
			<td style="width:179px;">Graphpad</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Bacterial Strains</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">S. oralis ATCC 35037</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">S. mitis ATCC 49456</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">S. gordonii DL1 Challis&#160;&#160;</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">E. coli OP50</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">E. coli HT115</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Worm Strains</td>
			<td style="width:179px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">Strain</td>
			<td style="width:179px;">Genotype</td>
			<td style="width:119px;">Transgene</td>
			<td>Source</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">N2</td>
			<td style="width:179px;">C. elegans wild isolate</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>CGC</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">EU1</td>
			<td style="width:179px;">skn-1(zu67) IV/nT1 [unc-?(n754) let-?] (IV;V)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>CGC</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:381px;">LD002</td>
			<td style="width:179px;">IdIs1</td>
			<td style="width:119px;">SKN-1B/C::GFP + rol-6(su1006)</td>
			<td>Keith Blackwell</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

studying oxidative stress caused by the mitis group streptococci in caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans), תולעים נימיות אל-אווירני עצמאי, התפתחה מודל אטרקטיבי ללמוד אינטראקציות פתוגן-פונדקאי. פרוטוקול הציג משתמשת מודל זה כדי לקבוע את פתוגניות הנגרמת על ידי streptococci קבוצה מיטיס דרך הייצור של2O H2. Streptococci קבוצה מיטיס הם איום המתעוררים הגורמות למחלות רבות כגון בקטרמיה, דלקת פנים הלב, צלוליטיס מסלולית. המתוארים כאן פרוטוקול כדי לקבוע את ההישרדות של תולעים אלה בתגובה2O H2 המיוצר על ידי הקבוצה של פתוגנים. באמצעות קידוד skn-1 ג'ין עבור גורם שעתוק של התגובה סטרס חמצוני, הוא הראה כי מודל זה חשוב לזיהוי גנים המארח החיוניים מפני זיהום streptococcal. יתר על כן, הוא הראה כי ניתן לנטר ההפעלה של התגובה סטרס חמצוני בנוכחות פתוגנים אלה באמצעות זן תולעת כתב מהונדס, שבו SKN-1 היא דבוקה חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP). מבחני אלה מספקים הזדמנות ללמוד את סטרס חמצוני בתגובה2O H2 נגזר על ידי מקור ביולוגי בניגוד exogenously הוסיף מקורות (ROS) מינים חמצן תגובתי.

חברי מיטיס קבוצה מיטיס ס, ס oralis, וס' gordonii במהירות הרג את התולעים, בניגוד mutans ס, ס salivarius, ו פתוגניים שאינם e. coli OP50 (איור 3א). חציון ההישרדות של מיטיס ס, ס oralis, וס' gordonii היה 300 דקות, מינימום 300 ו מין 345, בהתאמה. כדי ?...

Watch this Scientific Journal Video about Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans at JoVE.com

Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans

תולעים נימיות Caenorhabditis elegans הוא מודל מצוינת לנתח פתוגן-פונדקאי אינטראקציות. המתוארים כאן הוא פרוטוקול להדביק את התולעת עם חברי streptococci קבוצה מיטיס ולקבוע ההפעלה של התגובה סטרס חמצוני נגד H2O2 המיוצר על ידי קבוצה זו של אורגניזמים.

לימוד לחץ חימצוני נגרם על-ידי Streptococci קבוצה מיטיס ב Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans (C. elegans), a free-living nematode, has emerged as an attractive model to study host-pathogen interactions. The presented ...

בפרוטוקול זה אנו מדגימים כיצד להשתמש בשיטת חיים חופשית c. elegans כדי להבהר את הפתוגניות הנגרמת על ידי מי חמצן המיוצר באמצעות סטרפטוקוצ'י קבוצת Mitis. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שאנחנו יכולים ללמוד פתוגניות והפעלת תגובות מתח בתולעת באמצעות מקור ביולוגי בר קיימא של מיני חמצן תגובתי לעומת מקורות כימיים עבור ליטר אחד של מדיה להוסיף 30 גרם של אבקת טוד יואיט, 2 גרם של תמצית שמרים ו 20 גרם של אגר לבקבוק 2 ליטר Erlin מאייר.מוסיפים 970 מ"ל של מים deionized לתוכן של הבקבוק ולשים בבר מערבבים. השתמש בנייר אלומיניום כדי לכסות את הפתח. Autoclave את התקשורת בבקבוק בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס ולחץ של 15 פאונד לאינץ 'מרובע במשך 30 דקות.לאחר מכן מניחים את הבקבוק על צלחת ערבוב כדי להתקרר עם ערבוב עדין. מתחת למכסה המנוע, יוצקים את המדיה למנות פטרי סטריליות בגודל הולם. אפשר לתקשורת להתייבש במשך שעתיים.לאחר מכן לאחסן את הצלחות ב 4 מעלות צלזיוס עד 1 חודש. לפני הכנת סטרפטוקוצ'י קבוצת Mitis, לחמם את צלחות אגר THY באינקובטור ל 37 מעלות צלזיוס. לאחר מכן השתמש בלולאה סטרילית כדי לפסים את הזנים הרצויים של סטרפטיקוצ'י על המקומות.ואז לשים את הצלחות בצנצנת נרות דגירה הצנצנת ב 37 מעלות צלזיוס לילה במשך כ 18 שעות כדי לספק סביבה מיקרורופילית. למחרת, להסיר את הצלחות מן צנצנת הנרות ולהשתמש בלולאה סטרילית כדי לבחור מושבות מבודדות. לחסן 15 מ"ל צינורות חרוט סטרילי המכיל 2 מ"ל של מרק THY.סוגרים את הכובעים בחוזקה ומודרים את הצינורות ב-37 מעלות צלזיוס בתנאים סטטיים. צלחות THY טרום חמימות באינקובטור ל-37 מעלות צלזיוס מוסיפות 50 מיקרוליטרים של פתרון המכילים 1000 יחידות של קטלאז לצלחת THY. השתמש מפזר סטרילי כדי להפיץ את פתרון קטלאז ולאפשר את הצלחות להתייבש על מכסה המנוע לזרום למינאר במשך 30 דקות.כדי לזרוע את הצלחות עם זני סטרפטוקוקוס, השתמש פיפטה להוסיף 80 microliters של תרבויות לילה גדל לצלחת ולהשתמש מפזר סטרילי כדי להפיץ את החיידקים לחלוטין על פני השטח אגר. הדגירה את הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס בצנצנת נרות לילה. כפקד, על שתי צלחות NGM, להוסיף 80 microliters של תרבויות לילה גדל של E.coli OP-50 עבור זריעה.דגירה הצלחות ב 37 מעלות צלזיוס לילה. למחרת, להסיר את הצלחות מצנצנת הנרות ולאפשר את הצלחות להתקרר לטמפרטורת החדר. באמצעות פיק תולעת סטרילי, להעביר 30 זחלים L4 מצלחות האכלה NGM לצלחות ת'י זרעי סטרפטוקוקוס.הדגירה את הצלחות ב 25 מעלות צלזיוס. תחת מיקרוסקופ לנתח, לספור את מספר זחלי L4 חיים ומתים על כל צלחת בכמה נקודות זמן. השתמשו בבחירה של התולעים הסטריליות כדי לדרבן בעדינות את התולעים ולקבוע אם הן חיות או מתות.בתחילה, להבקיע את התולעים כמתים או לחיות כל 30 דקות. כאשר תולעים מתחילות למות במהירות, ציון אותם במרווחים של 15 דקות. ההתדאגה תימשך 5 עד 6 שעות.לאחר מכן, חזור על הניסוי פעמיים נוספות. כדי להכין את כרית agarose, מקל labtape לאורך לאורך שתי שקופיות זכוכית. זה יקבע את עובי רפידות אגרוז.מקם שקופית זכוכית נקייה בין שתי השקופיות המודבקות. ממיסים התעוררו במים deionized כדי להפוך 2 אחוז נפח משקל לחמם את הפתרון במיקרוגל. השתמש פיפטה למקם 100 microliters של אגת מותכת על מרכז השקופית הנקייה.מיד מניחים עוד מגלשת זכוכית נקייה על גבי אגרוז מותך בעדינות לחץ למטה כדי להפוך כרית. אפשר לתעוררות להתגבש ולאחר מכן להסיר את השקופית העליונה. כרית אגרוז מוכנה לשימוש.צלחות THY טרום חום ל 37 מעלות צלזיוס. זרע את הצלחות עם זני סטרפטוקוקוס כפי שנעשה בעבר בהישרדות. זרעים 3 צלחות NGM עם E-coli OP-50 כבקרה ודגירה ב 37 מעלות צלזיוס לילה.למחרת, לקרר את הצלחות לטמפרטורת החדר. השתמשו במאגר M9W לשטיפת זחלי L4 מצלחות הזנה של NGM או NGM RNAi לצינורות חרוטיים של 15 מ"ל. לסובב את הצינורות ב 450 פעמים g, במשך דקה אחת בצנטריפוגה.תפענחו את העל-טבעי ותוסיפו 10 מ"ל של M9W לכל צינור. חזור על הצעד הצנטריפוגלי שלוש פעמים נוספות. להשעות מחדש את התולעים ב 250 microliters של M9W ולה מניחים שלוש 5 טיפות microliter של ההשעיה תולעת על מכסה צלחת פטרי נקי.תחת מיקרוסקופ לנתח, להעריך את מספר התולעים לכל microliter. באמצעות פיפטה, להוסיף כ 100 L4 זחלים לכל זרע סטרפטוקוקוס THY ו NGM E.coli זרע צלחות. השתמש שלוש צלחות לכל זן של חיידקים.הדגירה את הצלחות במשך 2 עד 3 שעות ב 25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, להסיר את הצלחות מהחמה. לשטוף אותם עם M9W ולאסוף את התולעים בצינורות חרוט 15 מ"ל.לשטוף את התולעים שלוש פעמים כפי שנעשה בעבר בשלב הצנטריפוגלי. הסר את רוב M9W על ידי שאיפה. ולהוסיף 500 microliters של M9W המכיל 2 מילימולר נתרן אזיד או הידרוכלוריד tetramisole לכדור התולעת עבור הרדמה.הדגירה את הצינור עם כדורי תולעת בטמפרטורת החדר במשך 15 דקות. לאחר מכן, זרוק 15 microliters של ההשעיה תולעת על כרית אגורוז מוכן. תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי, לדמיין את לוקליזציה של skn-1 ניצול פייסי ומסנן דאפי.תולעי תמונה בהגדלות פי 10 ו-20. ציון התולעים בהתבסס על שלוש רמות של לוקליזציה;לוקליזציה נמוכה, שם לא נצפתה לוקליזציה גרעינית, לוקליזציה בינונית, עם SKN 1 BCGFP בחלק האחורי או האחורי של התולעת, ולוקליזציה גבוהה, שם לוקליזציה גרעינית של skn-1 BCGFP נצפתה בכל תאי המעי. בניסוי זה, חברי קבוצת Mitis הרגו במהירות את התולעים, בניגוד ל- S.mutans, S.salivarius ו- E.coli OP-50 שאינם פתוגניים.כאשר קטלאז תוסף ל- THY ager, הריגת התולעים בוטלה. מותם של התולעים לא נצפה על זן המוטנטים דלתא spxB בהשוואה לזנים מסוג פראי ומחמאה. נתונים אלה מצביעים על כך שהמי חמצן המיוצר על ידי קבוצת Mitis מתווך הרג של התולעים.ירידה משמעותית בהישרדות של תולעי נוקאאוט skn-1 נצפתה בהשוואה לשליטה הווקטורית תולעים מטופלות. פנוטיפ הרג דומה נצפה עם זן המוטנטים skn-1 ותולעים מסוג N2. זה מדגים כי skn-1 להשפיע על ההישרדות של התולעים על קבוצת Mitis.לוקליזציה של skn-1 BCGFP נצפתה בתולעים שנחשפו לזני N-מחמאה מסוג פראי ולא בתגובה לזן המוטנטים דלתא spxB של קורדונה S. לאחר רכיבים של מסלול קינאז מפת P38 הופלו, לוקליזציה מופחתת של skn-1 BCGFP ותולעים מטופלות נוקאאוט, יחסית לשליטה וקטורית תולעים מטופלות, נצפתה. על ידי שימוש בסטרפטוקוצ'י ג.מערכת אלגנס, ההשפעות של מי חמצן על מתח חוליות אנדופלזמי, נזק מיטוכונדריאלי, מיטופופיה, ו tophogy ניתן ללמוד עוד יותר. יתר על כן, ניתן לזהות מנגנונים שבהם מי חמצן פועל כגורם גברי כדי לגרום לתגובות חיסוניות על ידי שיבוש תהליכי הליבה של התא.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Studying Oxidative Stress Caused by the Mitis Group Streptococci in Caenorhabditis elegans

Comprehensive Assessment of Germline Chemical Toxicity Using the Nematode Caenorhabditis elegans

Comprehensive Assessment of Germline Chemical Toxicity Using the Nematode Caenorhabditis elegans

הערכה מקיפה של תאי מין כימי רעילות שימוש נמטודות<em&gt; Elegans Caenorhabditis</em

Identifying the reproductive toxicity of the thousands of chemicals present in our environment has been one of the most tantalizing challenges in the ...

Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline

Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline

ניתוח במרחב ובזמן של ERK פעיל<em&gt; C. elegans</em&gt; germline

The evolutionarily conserved&#160;extracellular signal transducing RTK-RAS-ERK pathway is an important kinase-signaling cascade that controls multiple ...

Immobilization of Caenorhabditis elegans to Analyze Intracellular Transport in Neurons

Immobilization of Caenorhabditis elegans to Analyze Intracellular Transport in Neurons

קיבעון של Caenorhabditis elegans לנתח להובלה תאיים בנוירונים

Axonal transport and intraflagellar transport (IFT) are essential for axon and cilia morphogenesis and function. Kinesin superfamily proteins and dynein ...

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

Application of RNAi and Heat-shock-induced Transcription Factor Expression to Reprogram Germ Cells to Neurons in C. elegans

היישום של RNAi חום-הלם-induced בביטוי פקטור שעתוק כדי לתכנת בתאי הנבט את הנוירונים C . elegans

Studying the cell biological processes during converting the identities of specific cell types provides important insights into mechanism that maintain ...

Assessing Lysosomal Alkalinization in the Intestine of Live Caenorhabditis elegans

Assessing Lysosomal Alkalinization in the Intestine of Live Caenorhabditis elegans

הערכת Alkalinization Lysosomal ב המעי של חיים Caenorhabditis elegans

The nematode Caenorhabditis elegans (C. elegans) is a model system that is widely used to study longevity and developmental pathways. Such studies are ...

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

Computational Analysis of the Caenorhabditis elegans Germline to Study the Distribution of Nuclei, Proteins, and the Cytoskeleton

ניתוח חישובית של Germline Caenorhabditis elegans ללמוד הפצה של גרעינים, חלבונים ו את שלד התא

The Caenorhabditis elegans (C. elegans) germline is used to study several biologically important processes including stem cell development, apoptosis, and ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

להמחיש את צומת ואת צלחת Notochordal Gastrulating עוברי העכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקה כל הר Immunofluorescence

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

A Mini-Invasive Internal Fixation Technique for Studying Immobilization-Induced Knee Flexion Contracture in Rats

מיני פולשנית שיטה פנימית ללמידה בברך שנגרמה כתוצאה מצמצום בחולדות

Joint contracture, resulting from a prolonged joint immobilization, is a common complication in orthopedics. Currently, utilizing an internal fixation to ...

Isotropic Light-Sheet Microscopy and Automated Cell Lineage Analyses to Catalogue Caenorhabditis elegans Embryogenesis with Subcellular Resolution

איזוטרופי מיקרוסקופ גיליון אור אוטומטי שושלת היוחסין ניתוח לקטלוג Caenorditis הEmbryogenesis עם רזולוציה Subcellular

Caenorhabditis elegans (C. elegans) stands out as the only organism in which the challenge of understanding the cellular origins of an entire nervous ...

Measuring Sperm Guidance and Motility within the Caenorhabditis elegans Hermaphrodite Reproductive Tract

Measuring Sperm Guidance and Motility within the Caenorhabditis elegans Hermaphrodite Reproductive Tract

מדידת הדרכה זרע ותנועתיות בתוך האלגיה של מערכת הרבייה של האנדרוגינוס

Successful fertilization is fundamental to sexual reproduction, yet little is known about the mechanisms that guide sperm to oocytes within the female ...