Name: identification of orexin and endocannabinoid receptors in adult zebrafish using immunoperoxidase and immunofluorescence methods
Uploaded: 2019-06-25T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification of Orexin and Endocannabinoid Receptors in Adult Zebrafish Using Immunoperoxidase and Immunofluorescence Methods at JoVE.com

Это исследование было поддержано Фонди Ricerca ди Ateneo (FRA)2015-2016, Университет Саннио.

1. Протокол иммунопероксидаза
ПРИМЕЧАНИЕ: Зебрафиш были получены профессором Омид Сафари (Департамент рыболовства, факультет природных ресурсов и окружающей среды, Университет Фердоуси в Мешхиде, Мешхад, Иран)10.
<ol><li>Рассечение тканей
	<ol>
<li>Пожерт?...

Подготовка образцов
Подготовка образцов является первым критическим шагом в IHC. Надежный протокол позволяет обеспечить содержание клеточной морфологии, архитектуры тканей и антигенности. Этот шаг требует правильного сбора тканей, фиксации и секции<sup class="xr...

Иммуногистохимия (IHC) является устоявшейся классический метод, используемый для выявления клеточных или тканевых компонентов (антигенов) антиген-антитела взаимодействия1,2. Он может быть использован для определения локализации и распределения целевых биомолекул в ткани. IHC использует иммунологические и химические реакциидля обнаружения антигенов в разделах тканей 3. Основными маркерами, используемыми для визуализации антиген-антител взаимодействия включают флуоресцентные красители (иммунофлуоресценция) и фермент-субстрат цветовых реакций (иммунопероксидаза), как сопряжены с антителами4. С помощью микроскопического наблюдения можно определить локализацию маркированной ткани, что примерно соответствует локализации целевого антигена в ткани.
Существуют два метода флуоресцентных или хромогенных реакций для обнаружения белка: метод прямого обнаружения, в котором конкретное первичное антитело прямо помечено; и косвенный метод обнаружения, в котором первичное антитело неконъюгировано, в то время как вторичное антитело носит этикетку5,6,7. Косвенный метод имеет некоторые преимущества, которые в основном его усиление сигнала. Кроме того, в отличие от других молекулярных и клеточных методов, с иммунофлуоресценцией, можно визуализироватьраспределение, локализацию и коэкспрессию двух или более белков, дифференциально выраженных в клетках и тканях 7. Выбор используемого метода обнаружения зависит от экспериментальных деталей.
На сегодняшний день IHC широко используется в фундаментальных исследованиях как мощный и важный инструмент для понимания распределения и локализации биомаркеров и общего профилирования различных белков в биологических тканях от человека до беспозвоночных8, 9 До 9 , 10 Лет , 11. Техника помогает отображать карту экспрессии белка в большом количестве нормальных и измененных органов животных и различных типов тканей, показывая возможное вниз или вверх-регуляции экспрессии индуцированных физиологических и патологических изменений. IHC является высокочувствительным методом, который требует точности и правильного выбора методов для получения оптимальных результатов12. Прежде всего, многие различные факторы, такие как фиксация, кросс-реактивность, извлечение антигена и чувствительность антител могут привести к ложноположительным и ложным негативным сигналам13. Выбор антител является одним из наиболее важных шагов в IHC и зависит от антигена специфичность и его сродство к белка и видов под следствием7.
Недавно мы оптимизировали метод IHC для обнаружения членов орексина/гипокретина и эндоканнабиноидов во взрослой ткани зебры. Мы сосредоточились главным образом на фиксации, встраивание тканей с использованием двух различных подходов, секции и монтажа (которые могут повлиять на разрешение и детализацию во время микроскопического анализа), а также блокирование (для предотвращения ложных срабатываний и уменьшения фона)14. Другими важными характеристиками являются специфика антител и избирательность и воспроизводимость отдельных протоколов IHC. Ключом к обеспечению специфики антител является использование отрицательного контроля (в том числе никаких первичных антител или тканей, которые, как известно, не выражают целевых белков), а также положительный контроль (в том числе ткани, которая, как известно, выражают целевые белки)15 . Выбор антител для IHC производится на основе их видовой специфичности (вероятность того, что они реагируют с антигеном интереса) и антиген-антитела связывающих систем обнаружения, который используется4,5,6 ,7. В случае иммунопероксидазы цвет реакции определяется отбором осажденного хромогена, обычно диаминобензидина (коричневого)16. С другой стороны, яmmunofluorescence использует антитела, конъюгированные с фторфором, чтобы визуализировать экспрессию белка в замороженных секциях тканей и позволяет легко анализировать несколько белков по отношению к системе обнаружения хромогенных 5 , 7.
В методе иммунопероксидазы вторичное антитело спрягается с биотином, молекулой связующего, способной завербовать хромогенную молекулу репортера (Avidin-biotin complex (ABC) ", что приводит к усилению сигнала окрашивания. С помощью метода репортера ABC, фермент пероксидазы реагирует с 3,3'-диаминобензидин (DAB), производя интенсивно коричневого цвета окрашивания, где фермент связывается со вторичным антителом, которые затем могут быть проанализированы с обычным световым микроскопом. ABC окрашивания, из-за высокой сродство авидина для биотина, производит быструю и оптимальную реакцию, с несколькими вторичными антителами прилагается к месту первичной реактивности антитела. Этот хромогенный метод обнаружения позволяет денситометрический анализ сигнала, обеспечивая полуколичественные данные на основе корреляции уровня коричневого сигнала с уровнями экспрессии белка18.
С иммунофлюоресценции методы, одновременное обнаружение нескольких белков возможно из-за способности различных флюорохромов излучать свет на уникальных длинах волн, но важно тщательно выбирать фторхромы, чтобы свести к минимуму спектральные перекрытия 5. Кроме того, использование первичных антител у различных видов хозяев сводит к минимуму трудности, связанные с перекрестной реактивностью. В этом случае каждый специфический вид вторичных антител распознает только один тип первичных антител. Флуоресцентные репортеры представляют собой небольшие органические молекулы, в том числе коммерческие производные, такие как красители Alexa Fluor.
Многие модели животных используются для понимания конкретных физиологических и патологических состояний. На сегодняшний день установлено, что многие метаболические пути сохраняются в течение эволюции. Таким образом, IHC исследований в модельных организмов, таких как зебрафиш может обеспечить понимание генезиса и поддержания патологических и непатологических условий17. Целью настоящего доклада является иллюстрация протоколов IHC, которые могут быть выполнены на ткани взрослых зебры и использованы для получения подробных изображений распределения и локализации OXA, OX-2R и CB1R на периферийных и центральных уровнях. Также сообщается о протоколах применения двух основных косвенных методов IHC в периферических и центральных тканях взрослых зебр. Описанный является косвенным методом, который позволяет усиливать сигнал в тех случаях, когда вторичное антитело спрягается с флуоресцентным красителем (метод иммунофлуоресценции) или ферментным репортером (метод иммунопероксидазы). Как хромогенные, так и флуоресцентные методы обнаружения обладают преимуществами и недостатками. В этом протоколе сообщается об использовании IHC, главным образом иммунофлуоресценции, у взрослых зебр, модели животных, широко используемой для изучения систем, которые эволюционно сохраняются в различных физиологических и патологических условиях.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti CB1</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab23703</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti OX-2R</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-8074</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-OXA</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc8070</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aquatex</td>
			<td>Merck</td>
			<td>1,085,620,050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotinylated rabbit anti-goat</td>
			<td>Vector Lab</td>
			<td>BA-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>citric acid</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>251275</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>Nikon Eclipse Ti2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryostat</td>
			<td>Leica Biosystem</td>
			<td>CM3050S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>32670</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera</td>
			<td>Leica Biosystem</td>
			<td>DFC320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Camera for confocal microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>DS-Qi2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti goat Alexa fluor 488-conjugated secondary antibodies</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A11055</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti goat Alexa fluor 594-conjugated secondary antibodies</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A11058</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti rabbit Alexa fluor 488-conjugated secondary antibodies</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A21206</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti rabbit Alexa fluor 594-conjugated secondary antibodies</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>A21207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20,821,330</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Frozen section compound</td>
			<td>Leica Biosystem</td>
			<td>FSC 22 Frozen Section Media</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>H2O2</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>31642</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCl</td>
			<td>VWR</td>
			<td>20,252,290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmPACT DAB</td>
			<td>Vector lab</td>
			<td>SK4105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope</td>
			<td>Leica Biosystem</td>
			<td>DMI6000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtome</td>
			<td>Leica Biosystem</td>
			<td>RM2125RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2HPO4</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S9763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S7653</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaH2PO4H2O</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S9638</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaOH</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S8045</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Donkey Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>D9663</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal Rabbit Serum</td>
			<td>Vector lab</td>
			<td>S-5000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraffin wax</td>
			<td>Carlo Erba</td>
			<td>46793801</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraphormaldeyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>P6148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium citrate dihydrate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>W302600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Fluka Analytical</td>
			<td>93420</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trizma</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1503</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VectaStain Elite ABC Kit</td>
			<td>Vector lab</td>
			<td>PK6100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylene Pure</td>
			<td>Carlo Erba</td>
			<td>392603</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification of orexin and endocannabinoid receptors in adult zebrafish using immunoperoxidase and immunofluorescence methods

Иммуногистохимия (IHC) является высокочувствительным и специфическим методом, участвующим в обнаружении целевых антигенов в секциях тканей с помеченными антителами. Это многоступенчатый процесс, в котором оптимизация каждого шага имеет решающее значение для получения оптимального конкретного сигнала. С помощью IHC можно обнаружить распределение и локализацию конкретных биомаркеров, раскрывая информацию об эволюционной консервации. Кроме того, IHC позволяет понимать экспрессии и распределение изменений биомаркеров в патологических условиях, таких как ожирение. IHC, в основном метод иммунофлуоресценции, может быть использован во взрослых зебры для обнаружения организации и распределения филогенетически сохраненных молекул, но стандартный протокол IHC не estasblished. Orexin и эндоканнабиноид две высоко консервированные системы, участвующие в борьбе с потреблением пищи и патологии ожирения. Здесь представлены протоколы, используемые для получения информации о пептид орексина (OXA), orexin рецептор (OX-2R), и каннабиноидных рецепторов (CB1R) локализации и распределения в кишечнике и мозге нормальной и диеты индуцированной ожирением (DIO) взрослых моделей зебры. Также описаны методы иммунопероксидазы и двойной иммунофлуоресценции, а также подготовка реагентов, фиксация, парафина-встраивание, криозащита ткани зебры и подготовка к эндогенной активности-блокированию шага и фона противопоставить. Полный набор параметров получен из предыдущих экспериментов IHC, с помощью которых мы показали, как иммунофлуоресценция может помочь с пониманием OXs, OX-2R и CB1R распределения, локализации и сохранения экспрессии у взрослых зебры Тканей. Полученные изображения с высокой интенсивностью сигнала привели к подтверждению того, что зебрафиш подходит для моделей животных для иммуногистохимических исследований распределения, локализации и эволюционного сохранения конкретных биомаркеров в физиологических и патологических состояний. Представленные здесь протоколы рекомендуются для экспериментов IHC у взрослых зебры.

Репрезентативные данные для окрашивания иммунопероксидаза показаны на рисунке 1 и рисунке2. Иммуногистохимический анализ дистрибуции OX-A и OX-2R в кишечнике взрослых зебр ы показали различные места локализации OX-A и OX-2R и их увеличение экспрессии в клетках ...

Watch this Scientific Journal Video about Identification of Orexin and Endocannabinoid Receptors in Adult Zebrafish Using Immunoperoxidase and Immunofluorescence Methods at JoVE.com

Identification of Orexin and Endocannabinoid Receptors in Adult Zebrafish Using Immunoperoxidase and Immunofluorescence Methods

Выявление ортексин и эндоканнабиноидных рецепторов у взрослых зебрафиш с использованием иммунопероксидаза и иммунофлуоресценции Методы

Представлены протоколы для иммуногистохимической характеристики и локализации пептида орексина, рецепторов орексина, и эндоканнабиноидных рецепторов в кишечнике и мозге нормального и диетического ожирения (DIO) взрослых моделей зебры с использованием моделей взрослых зебры иммуноперисидаза и двойные иммунофлуоресценции методы.

Immunohistochemistry (IHC) is a highly sensitive and specific technique involved in the detection of target antigens in tissue sections with labeled ...

В настоящее время иммуногистохимия используется с возрастающей частотой для выявления наличия специфических молекулярных маркеров и их изменений в случае патологий, что дает корни возможности проведения количественного анализа. Иммуногистохимия, в основном иммунофлюоресценция техника, используется в личинки и взрослых зебры животных модели, но мало что известно о хорошем стандартном протоколе иммуногистохимии для зебры. Здесь мы описываем и иллюстрем протокол, который может быть использован для изучения эволюционного сохранения важных белков у взрослых зебр.Хороший протокол для иммуногистохимии у взрослых зебры может помочь лежать в основе полезности этой модели животных для изучения морфологического выражения и распределения высокосхраняемых биомолекул. Этот метод также может помочь проанализировать возможные изменения этих биомолекул из-за патологических состояний, коррелирующих с физиопатологией человека. Демонстрация процедуры будет д-р Леа Tunisi, аспирант из моей лаборатории.Чтобы начать эту процедуру, перенесите подготовленные замороженные блоки ткани в криостат при температуре минус 20 градусов по Цельсию. Вырезать блок в корональных или sagittal разделов 10 микрометров. Затем соберите ткани в альтернативных серийных секциях на клеевые стеклянные слайды, пригодные для иммуногистохимии, и храните их при температуре минус 20 градусов по Цельсию до готовности к работе.Во-первых, используйте растворительно-устойчивую ручку для демаркации области ткани на слайде. Промыть секции три раза в течение пяти минут каждый с помощью 0,1-молярного фосфатного буфера. Затем растворите 0,3 миллилитров triton X-100 в 100 миллилитров 0,1-молярного фосфатного буфера для подготовки Triton X-100 0.3%Растворить 0,1%нормальную сыворотку осла в фосфатном буфере, содержащем 0,3%Triton X-100 для подготовки блокирующего раствора.Инкубировать секции раствором нормальной ослиной сыворотки, растворенной в пермеабилизации буфера PB-Triton X-100 0,3% в течение 30 минут при комнатной температуре для проницаемой клеточной мембраны и блокирования неспецифических связывающих участков. Во-первых, промыть разделы три раза в течение пяти минут каждый с 0,1-молярного фосфатного буфера. Добавьте смесь первичных антител, разбавленных в ПБ-Т, и инкубировать секции на ночь во влажной коробке при комнатной температуре.На следующий день, промыть разделы три раза в течение пяти минут каждый с 0,1-молярного фосфатного буфера. Инкубировать секции при комнатной температуре в течение двух часов в соответствующей смеси вторичных антител, разбавленных в ПБ-Т. Для начала, промыть разделы три раза в течение пяти минут каждый с 0,1-молярного фосфатного буфера.Растворите 1,5 микролитров DAPI в трех миллилитров фосфатного буфера для подготовки ядерного красителя DAPI. Счетчик разделов в краситель. Затем используйте монтажную среду для покрытия слайдов, чтобы стабилизировать ткань и пятно для длительного использования.Флуоресцентные образцы могут храниться в темноте при четырех градусах цельсия. Повторите протокол иммунофлуоресценции, и либо опустить первичное или вторичное антитело, или заменить первичный или вторичный антисерум с фосфатным буфером, чтобы подготовить отрицательный контроль. Затем повторите протокол иммунофторесценции и предварительно усвоите каждое первичное антитело с избытком относительного пептида.Повторите протокол иммунофлуоресценции на ломтиках мозга мыши, чтобы подготовить положительный контроль. Используя конфокальный микроскоп, оснащенный моторизованной сценой X-Y-Я, цифровой камерой, а также программным обеспечением для приобретения и анализа, наблюдайте и анализируйте иммунолентные секции. Приобретайте цифровые изображения с целями 5x, 20x и 40x.Возьмите изображения каждого раздела при низком увеличении в каждом из доступных каналов, чтобы составить монтаж с низким увеличением. Нормализация изображений флуоресценции до максимального контраста и наложения. По всей области интересов, собирать серийные стеки изображений через шесть фокусных плоскостей с координационными шагами от одного до 1,8 микрометров.Выполните эту коллекцию для каждого канала отдельно. После этого используйте программное обеспечение для деконволюции изображений для деконволюции изображений с помощью 10 итераций и с коллапса серийных изображений плоскости в единое максимальное проекционные изображения. Используйте соответствующее программное обеспечение для редактирования изображений, чтобы настроить микрографы для света и контрастности.Иммуногистохимический анализ распределения OX-A и OX-2R в кишечнике взрослой зебры показывает различные места локализации OX-A и OX-2R и их увеличение экспрессии в кишечных клетках DIO зебры. Интенсивное коричневое окрашивание для OX-A наблюдается в клетках медиальной и передней кишки. Иммуноэкспрессия OX-A дает четкие сигналы в различных отсеках кишечника, уменьшаясь от передней к медиальной кишки.Аналогичные результаты наблюдаются при иммуноэкспрессии OX-2R в кишечнике ДИО и контроля диеты зебры. Повышенный сигнал OX-A в DIO взрослых зебрафиш сопровождается переэкспрессией OX-2R в других кишечных отсеках. Точный анализ иммунофторесцентных изображений показывает увеличение ококализации OX-2R/CB1R в кишечнике взрослой зебры DIO по сравнению с контрольной диетой зебры.Аналогичная ситуация наблюдается в различных областях мозга, таких как спинной теленцефалон, гипоталамус, оптическая тектум, тор позже, и диффузное ядро нижней доли. При двойном иммуностимунизации с помощью ораксина-А и колокализации CB1R наблюдается увеличение колокализации в орегсинергических нейронах гипоталамуса, сопровождаемое увеличением флуоресцентного сигнала ореноксина-А. Эти результаты показывают, как двойная иммунофлуоресценция может помочь определить физиологически сохраненное выражение белка, колокализацию целевых белков, а также изменения их распределения и/или экспрессии в различных патологических состояниях.Используя иммунофлюоресценцию, мы можем лучше понять совместное использование и коэкспрессию биомолекул, их возможные взаимодействия, а также иметь видимое изображение их изменений в случае различных патологий. Кроме того, нейроанатомическое распределение экспрессии метаболических ферментов или рецепторов может еще больше выявить роль белка сигнализации в тканях. Нынешняя техническая работа представила иммунофлуоресценции подход к изучению двух высокосхраняемой системы, orexin и эндоканнабиноидов, в использовании взрослых зебры модели.Используя этот протокол, описанный здесь в первый раз в мозге взрослых зебры, анатомическое распределение и коэкспрессия рецепторов orexin-2 и эндоканнабиноид-CB1 рецепторов не было определено. Мы рекомендуем описанные здесь протоколы для экспериментов с иммуногистохимией и для обнаружения пространственного распределения и организации рецепторов в пептидах у взрослых зебр, чтобы лучше понять их функции.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Identification of Fatty Acids in Bacillus cereus

Identification of Fatty Acids in Bacillus cereus

Определение жирных кислот в<em&gt; Эхиноцереус бациллы</em

The Bacillus species contain branched chain and unsaturated fatty acids (FAs) with diverse positions of the methyl branch (iso or anteiso) and of the ...

Identification of Plant Ice-binding Proteins Through Assessment of Ice-recrystallization Inhibition and Isolation Using Ice-affinity Purification

Идентификация растений ледово-связывающих белков путем оценки льда рекристаллизации ингибирования и выделение с помощью льда-аффинной очистки

Ice-binding proteins (IBPs) belong to a family of stress-induced proteins that are synthesized by certain organisms exposed to subzero temperatures. In ...

Sample Preparation for Mass Spectrometry-based Identification of RNA-binding Regions

Пробоподготовка для массы на основе спектрометрии идентификации RNA-связывая регионов

Noncoding RNAs play important roles in several nuclear processes, including regulating gene expression, chromatin structure, and DNA repair. In most ...

The Identification of Sea Lamprey Pheromones Using Bioassay-Guided Fractionation

Идентификация Морская минога феромоны, используя Bioassay руководствуясь фракционирования

Bioassay-guided fractionation is an iterative approach that uses the results of physiological and behavioral bioassays to guide the isolation and ...

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture (CARIC) Strategy

Capture and Identification of RNA-binding Proteins by Using Click Chemistry-assisted RNA-interactome Capture CARIC Strategy

Захват и идентификации RNA-связывая протеинов с помощью щелчка при содействии химия РНК interactome захвата (ЦАРСКОЕ) стратегии

A comprehensive identification of RNA-binding proteins (RBPs) is key to understanding the posttranscriptional regulatory network in cells. A widely used ...

Identification of Novel CK2 Kinase Substrates Using a Versatile Biochemical Approach

Идентификация Роман CK2 киназы субстратов, используя универсальный подход биохимические

The study of kinase-substrate relationships is essential to gain a complete understanding of the functions of these enzymes and their downstream targets ...

Nitropeptide Profiling and Identification Illustrated by Angiotensin II

НитропептидНое профилирование и идентификация Иллюстрировано Ангиотензином II

Protein nitration is one of the most important post-translational modifications (PTM) on tyrosine residues and it can be induced by chemical actions of ...

SUMO-Binding Entities (SUBEs) as Tools for the Enrichment, Isolation, Identification, and Characterization of the SUMO Proteome in Liver Cancer

SUMO-Binding Entities SUBEs as Tools for the Enrichment, Isolation, Identification, and Characterization of the SUMO Proteome in Liver Cancer

SUMO-обязательные организации (SUBEs) как инструменты для обогащения, изоляции, идентификации и характеристики ПРОтеоме СУМО при раке печени

Post-translational modification is a key mechanism regulating protein homeostasis and function in eukaryotic cells. Among all ubiquitin-like proteins in ...

Profiling Ubiquitin and Ubiquitin-like Dependent Post-translational Modifications and Identification of Significant Alterations

Профилирование убиквитин и убиквитин-подобных зависимых посттрансляционных модификаций и выявление значительных изменений

Ubiquitin (ub) and ubiquitin-like (ubl) dependent post-translational modifications of proteins play fundamental biological regulatory roles within the ...

Visualization of Estrogen Receptors in Colons of Mice with TNBS-Induced Crohn's Disease using Immunofluorescence

Визуализация рецепторов эстрогена в колонах мышей с TNBS-индуцированной болезнью Крона с использованием иммунофлюоресценции

Crohn&#39;s disease is the most diagnosed type of inflammatory bowel disease. Chronic inflammation developing in the intestine leads to peristalsis ...