Name: material formation of recombinant spider silks through aqueous solvation using heat and pressure
Uploaded: 2019-05-06T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure at JoVE.com

De auteurs willen dankbaar te erkennen financiering van de Utah Science and Technology Research (USTAR) initiatief.

1. recombinant spin zijde mengsel voorbereiding van gelyofiliseerde eiwit voorraden
<ol><li>Bepaal de noodzakelijke formulering en het volume dat nodig is voor de beoogde materiële formaties. De typische formuleringen variëren van 3% (w/v) tot 15% (w/v). Met deze selectie berekent u de juiste rSSp, concentraties en ratio's.<ol>
<li>Gebruik de volgende respectieve formuleringen om elk materiaal voor te bereiden dat in dit protocol wordt beschreven: hydrogels/sponzen/lyogels% (w/v) 50:50 MaSp1: MaSp2; films/coatings, 5...

<ol>
	<li>Huemmerich, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Structure+Elements+of+Spider+Dragline+Silks+and+Their+Contribution+to+Protein+Solubility.">Primary Structure Elements of Spider Dragline Silks and Their Contribution to Protein Solubility.</a> Biochemistry. 43 (42), 13604-13612 (2004).</li><li>Schacht, K., Scheibel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+Hydrogel+Formation+of+a+Recombinant+Spider+Silk+Protein.">Controlled Hydrogel Formation of a Recombinant Spider Silk Protein.</a> Biomacromolecules. 12 (7), 2488-2495 (2011).</li><li>Jones, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+Than+Just+Fibers:+An+Aqueous+Method+for+the+Production+of+Innovative+Recombinant+Spider+Silk+Protein+Materials.">More Than Just Fibers: An Aqueous Method for the Production of Innovative Recombinant Spider Silk Protein Materials.</a> Biomacromolecules. 16 (4), 1418-1425 (2015).</li><li>Tucker, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+and+Physical+Properties+of+Recombinant+Spider+Silk+Films+Using+Organic+and+Aqueous+Solvents.">Mechanical and Physical Properties of Recombinant Spider Silk Films Using Organic and Aqueous Solvents.</a> Biomacromolecules. 15 (8), 3158-3170 (2014).</li><li>Harris, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Sticky+Situation:+An+Investigation+of+Robust+Aqueous-Based+Recombinant+Spider+Silk+Protein+Coatings+and+Adhesives.">A Sticky Situation: An Investigation of Robust Aqueous-Based Recombinant Spider Silk Protein Coatings and Adhesives.</a> Biomacromolecules. 17 (11), 3761-3772 (2016).</li><li>Jones, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+Heat+and+Pressure+for+Solubilization+of+Recombinant+Spider+Silk+Proteins+in+Aqueous+Solution.">Importance of Heat and Pressure for Solubilization of Recombinant Spider Silk Proteins in Aqueous Solution.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (11), 1955 (2016).</li><li>Copeland, C. G., Bell, B. E., Christensen, C. D., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Process+for+the+Spinning+of+Synthetic+Spider+Silk.">Development of a Process for the Spinning of Synthetic Spider Silk.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 1 (7), 557-584 (2015).</li><li>Arcidiacono, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aqueous+Processing+and+Fiber+Spinning+of+Recombinant+Spider+Silks.">Aqueous Processing and Fiber Spinning of Recombinant Spider Silks.</a> Macromolecules. 35 (4), 1262-1266 (2002).</li><li>Work, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Major+Ampullate+Silk+Fiber+Formation+by+Orb-Web-Spinning+Spiders.">Mechanisms of Major Ampullate Silk Fiber Formation by Orb-Web-Spinning Spiders.</a> Transactions of the American Microscopical Society. 96 (2), 170-189 (1977).</li><li>Decker, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+the+Destruction+of+Endotoxin+in+Synthetic+Spider+Silk+Proteins.">Method for the Destruction of Endotoxin in Synthetic Spider Silk Proteins.</a> Scientific Reports. 8 (12166), 1-6 (2018).</li></ol>

Na recombinant spin zijde eiwitten worden gezuiverd moeten ze dan worden voorbereid in een oplossing die kan worden gebruikt voor de materiële vorming. Door het mengen van gelyofiliseerde Spider Silk Protein met water en het blootstellen van dit mengsel aan magnetron bestraling, om warmte en druk te genereren, het mogelijk om een rSSp oplossing te bereiden. Een grote verscheidenheid van materiële vormen kan worden geproduceerd uit deze eenvoudige en efficiënte methode van rSSp oplosbaar maken. Elk materiaal moet uniek...

Spider Silks hebben garnered het belang van materiële wetenschappers voor hun indrukwekkende combinatie van kracht, elasticiteit, en biocompatibiliteit. Recreëren van vezels is van oudsher de stuwkracht van het onderzoek. Deze inspanning werd belemmerd door de recombinante spin zijde proteïne (rSSp) onoplosbaarheid in water evenals het onvermogen van traditionele solvation technieken (chaotropic agenten en detergentia) om waterige oplosbaarheid te bereiken. Verder, technieken die zijn ontwikkeld voor solvating versies van rSSp werken niet op alle rSSp varianten en vereisen ook aanzienlijke manipulatie en tijd die vaak resulteert in eiwitverlies1,2. Dit heeft grotendeels geresulteerd in het gebied gebruik te maken van 1, 1, 1, 3, 3, 3-hexafluoroisopropanol (HFIP) als een oplosmiddel van waaruit vezels te vormen, en andere beperkte materiële vormen. Het voordeel is dat alle bekende rSSp oplosbaar zijn in HFIP, waardoor de gegevens uniformiteit tussen elke onderzoeksgroep wordt verschaft. Het nadeel is dat HFIP is een giftig oplosmiddel dat is duur en onpraktisch om de schaal als gevolg van gezondheidsproblemen en milieu-overwegingen.
Een nieuwe benadering van rSSp solvation werd ontwikkeld die de technologische kloof overbrugde tussen de harde organische oplosmiddel HFIP en andere technieken die selectief werkte voor rSSp solvation. De combinatie van specifieke warmte en druk werd toegepast op suspensies van rSSp en water. De resultaten waren dichtbij 100% solvation en terugwinning van rSSp, evenals hoge eiwit concentraties; een verscheidenheid van materialen vormen werden bepaald om van deze formuleringen mogelijk te zijn die niet allen haalbaar waren gebruikend HFIP of andere organische oplosmiddelen3,4,5,6. Het doel van deze aanpak is om efficiënt en gemakkelijk solubilize gezuiverde en gedroogde recombinante spin-eiwitten in een waterige oplossing die vervolgens kan worden gebruikt voor de productie van een verscheidenheid van materiële vormen.
Vezels, films, coatings, lijmen, hydrogels, lyogels, microsferen, en spons materialen zijn allemaal gemakkelijk te verwezenlijken uit dezelfde waterige rSSp oplossing met behulp van deze methode. De verdere evolutie van deze methode, niet alleen met extra rSSp maar met andere proteïnen, kon tot nieuwe materiële vormen en alternatieve EiwitReiniging en oplosbaar maken wegen leiden.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:697px;" width="698">
	<tbody>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">3 mL Syringe with Luer-Lok Tip</td>
			<td style="width:148px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309657</td>
			<td style="width:215px;">Other size syringes can be used but to keep the tips on, it is advised to use luer-lok tips</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">4 mL culture vial, clear with rubber lined cap</td>
			<td style="width:148px;">Wheaton</td>
			<td style="width:119px;">225142</td>
			<td style="width:215px;">Minimum dope volume is 1mL, max is 2mL</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">8 mL culture vial, clear with rubber lined cap</td>
			<td style="width:148px;">Wheaton</td>
			<td style="width:119px;">225144</td>
			<td style="width:215px;">Minimum dope volume is 2mL, max is 4mL</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">99% Isopropyl Alcohol, Reagent ACS/USP Grade</td>
			<td style="width:148px;">Pharmco-Aaper</td>
			<td style="width:119px;">231000099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Freezone 4.5 Plus</td>
			<td style="width:148px;">Labconco</td>
			<td style="width:119px;">7386030</td>
			<td>Freeze Dryer</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Luer Adapter Female Luer x 10-32 Female, Tefzel (ETFE)</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">P-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Microwave</td>
			<td style="width:148px;">Magic Chef</td>
			<td style="width:119px;">HMD1110B</td>
			<td style="width:215px;">120V, 60Hz AC; 1000 watts; 1.1 cu. ft. capacity; with glass turn table</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">One-Piece Fingertight 10-32 Coned, for 1/16&#34; OD</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">F-120X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEEK Tubing 1/16&#34; OD x 0.010&#34; ID</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">1531B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Sprayer: Master Airbrush</td>
			<td style="width:148px;">Master Airbrush</td>
			<td style="width:119px;">TC-60</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

material formation of recombinant spider silks through aqueous solvation using heat and pressure

Veel spinnen produceren zeven soorten Silks. Zes van de zijdes zijn vezel in vorm wanneer geproduceerd door de spinnen. Deze vezels zijn niet in water oplosbaar. Om de opmerkelijke mechanische eigenschappen van spin zijdes te reproduceren, moeten zij in heterologe gastheren worden geproduceerd aangezien de spinnen zowel territoriaal als kannibalistische zijn. De synthetische analogen van spin zijde ook de neiging om onoplosbaar zijn in waterige oplossingen. Zo, een groot percentage van het onderzoek in recombinant spin zijdes vertrouwen op organische oplosmiddelen die schadelijk zijn voor grootschalige productie van materialen. De methode van onze groep dwingt de Solvatie van deze recombinante spin zijdes in water. Opmerkelijk is, wanneer deze eiwitten zijn bereid met behulp van deze methode van warmte en druk, een breed scala van materiële vormen kunnen worden bereid uit dezelfde oplossing van recombinant Spider Silk eiwitten (rSSp), waaronder: films, vezels, spons, hydrogel, lyogel, en lijmen. Dit artikel toont de productie van solvated rSSp en materiële vormen op een manier die gemakkelijker dan van geschreven materialen en methodes alleen wordt begrepen.

Van de beschreven methode van oplosbaar maken van rSSp, kan een verscheidenheid van materiële vormen worden bereikt zoals gezien in Figuur 1. De methode van oplosbaar maken is het toepassen van warmte en druk, gegenereerd door een conventionele magnetron, tot een schorsing van rSSp en water. Wanneer kritieke temperaturen en druk worden bereikt, zal het eiwit solubilize. Van deze solubilized rSSp oplossing, worden de vereiste voorwaarden voorgesteld voor zeve...

Watch this Scientific Journal Video about Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure at JoVE.com

Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure

Materiaal vorming van recombinant spin Silks door waterige oplosmiddel met behulp van warmte en druk

Hier presenteren we een protocol voor de productie van water oplosbare recombinant Spider Silk Protein Solutions en de materiële vormen die kunnen worden gevormd uit deze oplossingen.

Many spiders produce seven types of silks. Six of the silks are fiber in form when produced by the spiders. These fibers are not water soluble. In order ...

Deze methode van oplosbare recombinante spinrag produceert materiële vormen die niet mogelijk zijn met behulp van traditionele agressieve organische oplosmiddelen. Verder is het proces graan, wat resulteert in een eenvoudige eiwitoplossing in water. Door gebruik te maken van deze methode behouden de gevormde of geproduceerde materialen de gewenste kenmerken van spinrageiwitten.Deze oplostechniek voor recombinant spinrag zorgt voor de oplos van recombinante spinrag in een proces in één stap. Dit is wenselijk omdat deze notoir moeilijk te produceren eiwitten niet verloren gaan door uitgebreide verwerking. Verder, omdat de oplossingen zijn gewoon eiwit in water, andere biologisch actieve verbindingen kunnen worden toegevoegd als dat wenselijk is voor de toepassing.In het bijzonder, de eiwitstructuur functie relatie, dit systeem is memetisch hoe een spin maakt een vezel in dat het gebruik maakt van water en eiwitten in een hoge concentratie. Door gebruik te maken van deze oplosmethode en een daaropvolgende materiaalvorming, moet het mogelijk zijn om inzicht te krijgen in de materialen die worden gevormd, en de structuren die er verantwoordelijk voor zijn. Er wordt gedacht dat het kan zijn, we hebben deze techniek gebruikt voor het oplosen van synthetische peptiden die anders een alkalische of zure omgeving nodig zouden hebben om op te solvaten.Dat kan voordelig zijn in downstream toepassingen voor deze peptiden. Bovendien, een aantal bekende eiwitten wanneer synthetisch uitgedrukt hebben de neiging om te eindigen in de onoplosbare fractie. Resolubiliseren, en vervolgens het opnieuw vouwen van deze eiwitten is vaak een moeizaam proces dat resulteert in grote verliezen.Door gebruik te maken van deze techniek, zou het mogelijk zijn om de efficiëntie van herstelprocessen voor onoplosbare eiwitten te verhogen. Het plaatsen van een verzegelde flacon in een magnetron is een beetje ontmoedigend waardoor het risico van oververhitting en dus over het onder druk zetten van de flacon. Inzicht in de geënsceneerde aanpak van het toepassen van warmte en druk is van cruciaal belang.Ten tweede, voor de recombinant spin zijde in het bijzonder, met zout aanwezig zal niet toestaan dat de techniek te werken of te werken zo effectief, afhankelijk van hoeveel zout aanwezig is. Zoutverwijdering is de sleutel. Wees geduldig en voorzichtig, houd uw magnetrontijden en temperaturen in de flacon nauwlettend in de gaten.Het is van cruciaal belang omdat er een aantal bewegende delen in werking zijn die vaak moeilijk over te brengen zijn door middel van traditionele geschreven materialen en methodesecties. Gezien het feit dat er veel eiwitten zijn die oplosbaarheidsproblemen hebben die adequate studie voorkomen, kan deze methode worden toegepast in een verscheidenheid van eiwitruimten om analytische technieken en karakterisering te verbeteren of zelfs mogelijk te maken. Om te beginnen, selecteer een schone en nieuwe acht milliliter autoclaveable borosilicaat glas cultuur flacon met een rubberen gevoerde schroefdop, en plaats de lege flacon op een analytische balans.Scheur de massa van de lege flacon, zodat de balans leest nul massa. Voeg het gewenste lyophilized recombinant spider silk eiwitpoeder toe aan de lege flacon voor het specifieke materiaal. Voeg vervolgens de gewenste hoeveelheid ultra zuiver water, ten minste twee milliliter, toe aan de flacon.Sluit de flacon dop, en stevig vortex de inhoud om een verspreide en homogene recombinant spin zijde eiwit mengsel te creëren. Voer een laatste controle van de flacon dop uit om ervoor te zorgen dat deze stevig en stevig is aangedraaid. Breng vervolgens het zwevende recombinant spinrag-eiwitmengsel over naar een conventionele magnetron met een vermogensbereik van 700 tot 1500 watt.Begin de werking van de magnetron met vijf seconden uitbarstingen ingesteld volle kracht door handmatig in- en uitschakelen. Na elke uitbarsting, kort open de deur, en zorgvuldig meng de flacon om te voorkomen dat bezinking, en onderhouden van de hangende mengsel. Laat af en toe de flacon en oplossing afkoelen en voorkom dat de oververhitte oplossing de afdichting raakt.Gebruik een infraroodthermometer om de temperatuur van de oplossing met een deel van de flacon te meten. Herhaal het microgolfproces totdat de temperatuur ten minste 130 graden Celsius bereikt, en alle vaste deeltjes zijn volledig opgelost. Laat vervolgens de temperatuur van de oplossing en de flacon dop afkoelen tot onder de 100 graden Celsius.Voordat deze oplossing volledig wordt gekoeld, giet het van de flacon in specifieke geometrieën om een hydrogel te vormen. Nadat de hydrogel is gevormd, plaats het in een waterbad, en breng het naar de vriezer bij min 20 graden Celsius. Wacht tot het bad volledig bevroren is.Voltooi het sponsvormingsproces door de bevroren hydrogel en het waterbad uit de vriezer te halen en te ontdooien bij 25 graden Celsius. Verwijder vervolgens de resulterende spons uit het ontdooide water. Om een lyogel voor te bereiden, breng je een bevroren hydrogelmonster over aan een lyofielieer.Verwijder na 24 uur het laatste gelyofiele gelmateriaal uit het vat. Voor de productie van films van recombinant spin zijde eiwit, gegoten 200 microliters van de hete oplosbare recombinant spin zijde eiwit uit de flacon op een PDMS vorm van de gewenste vorm. Nadat het is gedroogd, pel het van het PDMS-substraat voor het testen of de behandeling.Om een coating te bereiden die niet uit het substraat kan worden verwijderd, gebruikt u een airbrushspuit om het opneembaar recombinant spinrageiwit aan te brengen om een eerste spuitcoating uit te voeren op het substraat naar keuze. Nadat het is gedroogd, dompel het gecoate substraat onder in het opneembaar recombinant spinrag-eiwit om een dipcoating te vormen. Herhaal de dipcoating om de gewenste dikte te bereiken.Om lijmen te vormen, gebruik een pipet om de oplosbare recombinant spin zijde eiwit toe te voegen aan een substraat, en breng vervolgens een tweede substraat over de bovenkant van de oplossing. Klem de stukken stevig aan elkaar en droog de monsters vervolgens in een oven met een minimale temperatuur van 25 graden Celsius gedurende ten minste 16 uur. Om natte gesponnen vezels te genereren, gebruik een 19-metersgeduwaal en laad de oplosbare dopeoplossing in een concentrische spuit met een Luer-sluistip.Uitwerp luchtbellen, en laat de dope zitten aan de Luer lock einde van de spuit. Steek ten minste 25 millimeter PEEK-buizen in de PEEK-buizen uit één stuk vingerdichting voor een van 16 inch buitendiameter, en 10 over 32 kammen. Vervang de 19-meter naald door deze setup op de Luer lock vrouwelijke adapter van de spuit.Plaats vervolgens nitrilhandschoenen aan de buitenkant van de tussenliggende godets, om de vezel te houden die moet worden gegenereerd door uitglijden en om beschadiging van de motoren te voorkomen. Krijg een hoog helder glazen bad met 99% pure isopropanol te gebruiken als stollingsbad. Vul het eerste stretchbad met een 80 tot 20 verhouding van isopropanol en gedestilleerd water.Vul in het tweede stretchbad een verhouding van 20 tot 80 isopropanol en gedestilleerd water. Zet het goet stretch systeem op de computer. Om de hoofdsnelheid van de vezelverwijdering aan te passen, past u de schuifbalk voor godet triplet A-snelheid aan op een waarde tussen 10 en 14 millimeter per seconde, afhankelijk van hoe goed en snel de vezel zich vormt.Start een eerste stuk door het verplaatsen van de schuifbalk van de godet triple B stretch ratio tot twee Voor de laatste godet in stretch bad een, De middelste bovenste godet, en de eerste godet in stretch bad twee. Start het tweede stuk door het verplaatsen van de schuifbalk van de godet triple C stretch ratio tot twee voor de laatste godet in stretch bad twee, de laatste bovenste godet, en de winder. Deze opstelling zorgt ervoor dat de eerste godet na de stolling bad, en de eerste godet in de eerste stretch bad draaien op dezelfde snelheid.Laad vervolgens de zijdeoplossing in de spuit van een aangepast spinlijninstrument. Stel in het geautomatiseerde systeem de extrusiesnelheid in op 10 millimeter per seconde om de zijdeoplossing in het met isopropanol gevulde glazen stollingsbad te extruderen. Laat de vezel extrusie uniform te worden, alvorens de vezels uit het bad met een dunne metalen haak.Controleer of het verwijderen van de vezel uit het bad een lus creëert tussen de PEEK-slangpunt en het pad van de vezel die het bad verlaat. Gids de opgehaalde vezel door de reeks van godets, zodanig dat de vezel wordt ondergedompeld in de stretch baden, maar drogen in de lucht tussen de stretch baden, en voordat je op een spoel. In dit protocol door middel van een oplos van recombinant spinrag eiwit, een verscheidenheid aan materiële vormen kan worden bereikt.Zeven materiële vormen worden hier gepresenteerd. Hydrogels, lyogels, spons, lijmen, coatings, films en vezels. Vezels vereisen de meest uitgebreide verwerking door extruderen in een stolling bad, en vervolgens serieel rekken van de ruwe vezel in post bin stretch baden.Gezien het feit dat de eiwit- en wateroplossingen worden verwarmd tot een relatief hoge temperatuur en druk, is onze ervaring dat de oplossingen steriel zijn op het punt dat het eiwit opgaat. Hierdoor kan een van de hier gepresenteerde materiële vormen worden meegenomen naar de celcultuur, zolang ze op de juiste manier worden behandeld, om de cellulaire reactie op de materialen te bestuderen. Zeker deze techniek heeft geleid tot de ontdekking van nieuwe materiaalvormen, waaronder lijmen en sponsmateriaal.Materiële vormen die niet noodzakelijkerwijs gericht zijn op vezelvorming, hoewel vezelvorming een van de gebieden is die ook verbetering heeft gezien door de ontwikkeling van deze techniek. Het genereren van warmte en druk in een afgesloten flacon heeft inherent gevaar. Draag altijd persoonlijke beschermingsmiddelen bij het uitvoeren van deze procedures.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Chemistry

Bioengineering

Solutions and Colloids

SCIENTISTS IN ACTION

Visualization of Recombinant DNA and Protein Complexes Using Atomic Force Microscopy

Visualisatie van Recombinant DNA en eiwit complexen met behulp van Atomic Force Microscopy

Atomic force microscopy (AFM) allows for the visualizing of individual proteins, DNA molecules, protein-protein complexes, and DNA-protein complexes. On ...

Synthetic Spider Silk Production on a Laboratory Scale

Synthetische Spider Silk Production op laboratoriumschaal

As society progresses and resources become scarcer, it is becoming increasingly important to cultivate new technologies that engineer next generation ...

Cell Co-culture Patterning Using Aqueous Two-phase Systems

Cell Co-cultuur Patterning gebruiken waterige tweefasensysteem Systems

Cell patterning  technologies that are fast, easy to use and affordable will be required for the  future development of high throughput cell assays, ...

Air Filter Devices Including Nonwoven Meshes of Electrospun Recombinant Spider Silk Proteins

Air Filter apparaten Inclusief geweven Netten van Electrospun Recombinant Spider Silk Eiwitten

Based on the natural sequence of Araneus diadematus Fibroin 4 (ADF4), the recombinant spider silk protein eADF4(C16) has been engineered. This highly ...

Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies

Microfabricage van Nanoporeuze Gold Patronen voor Cell-materiaal Interaction Studies

Nanostructured materials with feature sizes in tens of nanometers have enhanced the performance of several technologies, including fuel cells, biosensors, ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

Protocol voor Biofilm Streamer Vorming in een microfluïdische apparaat met micro-pijlers

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

Photopatterning eiwitten en cellen in een waterige omgeving met behulp van TiO<sub&gt; 2</sub&gt; Photocatalysis

Organic contaminants adsorbed on the surface of titanium dioxide (TiO2) can be decomposed by photocatalysis under ultraviolet (UV) light. Here we describe ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

Sandwich-achtige microenvironments Harness Cell / Material Interactions

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

Geautomatiseerde lipidebilaagmembraan Vorming Met behulp van een Polydimethylsiloxane Thin Film

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Transmission of Multiple Signals through an Optical Fiber Using Wavefront Shaping

Transmissie van meerdere signalen door middel van een optische vezel met behulp van Golffront Shaping

The transmission of multiple independent optical signals through a multimode fiber is accomplished using wavefront shaping in order to compensate for the ...