Name: material formation of recombinant spider silks through aqueous solvation using heat and pressure
Uploaded: 2019-05-06T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure at JoVE.com

המחברים רוצים לקבל בהכרת תודה מימון של יוטה מדע וטכנולוגיה מחקר (USTAR) יוזמה.

1. רקומביננטי עכביש הכנה תערובת מתוך מניות חלבון ליאופ,
<ol><li>לקבוע את הניסוח הדרוש ונפח הנדרש עבור תצורות חומרים מיועדים. מגוון ניסוחים טיפוסיים מ-3% (w/v) עד 15% (w/v). באמצעות בחירה זו, חשב את ה-rSSp, הריכוזים והיחס המתאימים.<ol>
<li>השתמש בניסוחים המתאימים הבאים כדי להכין כל חומר המתואר בפרוטוקול זה: h...

<ol>
	<li>Huemmerich, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+Structure+Elements+of+Spider+Dragline+Silks+and+Their+Contribution+to+Protein+Solubility.">Primary Structure Elements of Spider Dragline Silks and Their Contribution to Protein Solubility.</a> Biochemistry. 43 (42), 13604-13612 (2004).</li><li>Schacht, K., Scheibel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+Hydrogel+Formation+of+a+Recombinant+Spider+Silk+Protein.">Controlled Hydrogel Formation of a Recombinant Spider Silk Protein.</a> Biomacromolecules. 12 (7), 2488-2495 (2011).</li><li>Jones, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+Than+Just+Fibers:+An+Aqueous+Method+for+the+Production+of+Innovative+Recombinant+Spider+Silk+Protein+Materials.">More Than Just Fibers: An Aqueous Method for the Production of Innovative Recombinant Spider Silk Protein Materials.</a> Biomacromolecules. 16 (4), 1418-1425 (2015).</li><li>Tucker, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+and+Physical+Properties+of+Recombinant+Spider+Silk+Films+Using+Organic+and+Aqueous+Solvents.">Mechanical and Physical Properties of Recombinant Spider Silk Films Using Organic and Aqueous Solvents.</a> Biomacromolecules. 15 (8), 3158-3170 (2014).</li><li>Harris, T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Sticky+Situation:+An+Investigation+of+Robust+Aqueous-Based+Recombinant+Spider+Silk+Protein+Coatings+and+Adhesives.">A Sticky Situation: An Investigation of Robust Aqueous-Based Recombinant Spider Silk Protein Coatings and Adhesives.</a> Biomacromolecules. 17 (11), 3761-3772 (2016).</li><li>Jones, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Importance+of+Heat+and+Pressure+for+Solubilization+of+Recombinant+Spider+Silk+Proteins+in+Aqueous+Solution.">Importance of Heat and Pressure for Solubilization of Recombinant Spider Silk Proteins in Aqueous Solution.</a> International Journal of Molecular Sciences. 17 (11), 1955 (2016).</li><li>Copeland, C. G., Bell, B. E., Christensen, C. D., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+Process+for+the+Spinning+of+Synthetic+Spider+Silk.">Development of a Process for the Spinning of Synthetic Spider Silk.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 1 (7), 557-584 (2015).</li><li>Arcidiacono, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aqueous+Processing+and+Fiber+Spinning+of+Recombinant+Spider+Silks.">Aqueous Processing and Fiber Spinning of Recombinant Spider Silks.</a> Macromolecules. 35 (4), 1262-1266 (2002).</li><li>Work, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Major+Ampullate+Silk+Fiber+Formation+by+Orb-Web-Spinning+Spiders.">Mechanisms of Major Ampullate Silk Fiber Formation by Orb-Web-Spinning Spiders.</a> Transactions of the American Microscopical Society. 96 (2), 170-189 (1977).</li><li>Decker, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+for+the+Destruction+of+Endotoxin+in+Synthetic+Spider+Silk+Proteins.">Method for the Destruction of Endotoxin in Synthetic Spider Silk Proteins.</a> Scientific Reports. 8 (12166), 1-6 (2018).</li></ol>

לאחר רקומביננטי החלבונים משי עכביש מטוהרים הם צריכים אז להיות מוכנים בפתרון כי ניתן להשתמש עבור היווצרות חומר. על-ידי ערבוב חלבון המשי של קורי העכביש עם מים וחשיפת תערובת זו להקרנה מיקרוגל, כדי ליצור חום ולחץ, ניתן להכין פתרון rSSp. ניתן להפיק מגוון רחב של צורות חומריות משיטה פשוטה ויעילה זו ...

משי עכביש צברה לטובת מדענים חומריים על השילוב המרשים שלהם של חוזק, אלסטיות, ו biocompatibility. משחזר סיבים היתה באופן מסורתי הדחף של המחקר. מאמץ זה הושפע חלבון רקומביננטי עכביש משי (rSSp) חוסר מסיסות במים, כמו גם חוסר יכולת של טכניקות שימור מסורתי (סוכנים chaotropic וחומרי ניקוי) כדי להשיג שימור מימית. עוד, טכניקות שפותחו עבור גירסאות solvating של rssp לא לעבוד על כל משתני rssp וגם דורשים מניפולציה משמעותית זמן שלעיתים קרובות תוצאות אובדן חלבון1,2. זה הביא בעיקר בתחום ניצול 1, 1, 1, 3, 3, 3-hexafluoroגנול (HFIP) כממס שממנו ליצור סיבים, וצורות חומרים מוגבלים אחרים. היתרון הוא כי כל rSSp ידוע מסיסים ב HFIP, מתן אחידות נתונים בין כל קבוצת מחקר. החיסרון הוא כי HFIP היא הממס הרעיל כי הוא יקר ומעשי לקנה מידה עקב חששות בריאותיים ושיקולים סביבתיים.
הגישה הרומן של rSSp שימור פותחה כי גישור את הפער הטכנולוגי בין הממס האורגני הקשה HFIP וטכניקות אחרות שעבדו באופן סלקטיבי עבור rSSp שימור. השילוב של מחמם ולחצים ספציפיים הוחל על השעיות של rSSp ומים. התוצאות היו בקרבת 100% שימור והתאוששות של rSSp, כמו גם ריכוזי חלבונים גבוהים; מגוון של צורות חומרים היו נחושים להיות אפשריים מניסוחים אלה שלא היו כל השגה באמצעות hfip או ממיסים אורגניים אחרים3,4,5,6. המטרה של גישה זו היא ביעילות ובקלות מסיסות מטוהרים ומיובשים רקומביננטי spider חלבונים בפתרון מימית כי יכול להיות מנוצל לייצור של מגוון צורות חומרים.
סיבים, סרטים, ציפויים, דבקים, הידרוג'לים, lyogels, microspheres, וחומרי ספוג הם כל בקלות accomplishable מתוך הפתרון rSSp מימית אותו באמצעות שיטה זו. המשך האבולוציה של שיטה זו, לא רק עם rSSp נוספים אלא עם חלבונים אחרים, יכול להוביל לצורות חומר חדשות ולטיהור חלבון אלטרנטיבי ושדרות מסיסות.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:697px;" width="698">
	<tbody>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">3 mL Syringe with Luer-Lok Tip</td>
			<td style="width:148px;">BD</td>
			<td style="width:119px;">309657</td>
			<td style="width:215px;">Other size syringes can be used but to keep the tips on, it is advised to use luer-lok tips</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">4 mL culture vial, clear with rubber lined cap</td>
			<td style="width:148px;">Wheaton</td>
			<td style="width:119px;">225142</td>
			<td style="width:215px;">Minimum dope volume is 1mL, max is 2mL</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">8 mL culture vial, clear with rubber lined cap</td>
			<td style="width:148px;">Wheaton</td>
			<td style="width:119px;">225144</td>
			<td style="width:215px;">Minimum dope volume is 2mL, max is 4mL</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">99% Isopropyl Alcohol, Reagent ACS/USP Grade</td>
			<td style="width:148px;">Pharmco-Aaper</td>
			<td style="width:119px;">231000099</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Freezone 4.5 Plus</td>
			<td style="width:148px;">Labconco</td>
			<td style="width:119px;">7386030</td>
			<td>Freeze Dryer</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Luer Adapter Female Luer x 10-32 Female, Tefzel (ETFE)</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">P-629</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="60">
			<td height="60" style="height:60px;width:216px;">Microwave</td>
			<td style="width:148px;">Magic Chef</td>
			<td style="width:119px;">HMD1110B</td>
			<td style="width:215px;">120V, 60Hz AC; 1000 watts; 1.1 cu. ft. capacity; with glass turn table</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">One-Piece Fingertight 10-32 Coned, for 1/16&#34; OD</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">F-120X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEEK Tubing 1/16&#34; OD x 0.010&#34; ID</td>
			<td style="width:148px;">IDEX</td>
			<td style="width:119px;">1531B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:216px;">Sprayer: Master Airbrush</td>
			<td style="width:148px;">Master Airbrush</td>
			<td style="width:119px;">TC-60</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

material formation of recombinant spider silks through aqueous solvation using heat and pressure

עכבישים רבים מייצרים. שבעה סוגי משי שישה מבדי המשי הם סיבים בצורה כאשר מופק על ידי העכבישים. הסיבים האלה אינם מסיסים במים. על מנת לשכפל את תכונות מכני יוצא דופן של משי עכביש, הם חייבים להיות מיוצר הטרוולוגי מארחים כמו עכבישים הם טריטוריאליים ו קניבאלי. האנלוגיות הסינתטית של משי העכביש נוטות גם הם להיות מסיסים בפתרונות מימית. כך, אחוז גדול של מחקר בדי משי רקומביננטי עכביש להסתמך על ממיסים אורגניים כי הם מזיקים ייצור בקנה מידה גדול של חומרים. שיטת הקבוצה שלנו מאלצת את הרקומביננטי של משי העכביש למים. באופן מדהים, כאשר חלבונים אלה מוכנים באמצעות שיטה זו של חום ולחץ, מגוון רחב של צורות חומר ניתן להכין מאותו פתרון של חלבונים משי רקומביננטי עכביש (rSSp) כולל: סרטים, סיבים, ספוג, הידרוג'ל, lyogel, ו דבקים. מאמר זה מדגים את הייצור של rSSp וצורות חומרים באופן שניתן להבינו בקלות רבה יותר מאשר חומרים כתובים ושיטות בלבד.

מתוך השיטה המתוארת של מסיסות rSSp, ניתן להשיג מגוון של צורות חומר כפי שנראה באיור 1. שיטת הפתרון היא להחיל חום ולחץ, שנוצר על ידי מיקרוגל קונבנציונאלי, להשעיה של rSSp ומים. כאשר הטמפרטורות והלחצים הקריטיים מושגת, החלבון יהיה מסיסות. מתוך פתרון rSSp מסיסות זה, התנא...

Watch this Scientific Journal Video about Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure at JoVE.com

Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure

היווצרות חומר של משי רקומביננטי עכביש באמצעות מימית Solvation באמצעות חום ולחץ

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לייצר מסיסים במים רקומביננטי עכביש משי פתרונות חלבון וצורות חומרים שניתן ליצור מאותם פתרונות.

Many spiders produce seven types of silks. Six of the silks are fiber in form when produced by the spiders. These fibers are not water soluble. In order ...

שיטה זו של מינון משי עכביש רקומביננטי מייצרת צורות חומר שאינן אפשריות באמצעות ממיסים אורגניים קשים מסורתיים. יתר על כן, התהליך הוא דגנים, וכתוצאה מכך פתרון חלבון פשוט במים. על ידי שימוש בשיטה זו, החומרים שנוצרו או יוצרו לשמור על המאפיינים הרצויים של חלבוני משי עכביש.טכניקת מינון זו עבור משי עכביש רקומביננטי מאפשרת מינון של משי עכביש רקומביננטי בתהליך צעד אחד. זה רצוי כי אלה ידוע לשמצה קשה לייצר חלבונים לא הולכים לאיבוד באמצעות עיבוד נרחב. כמו כן, מאז הפתרונות הם רק חלבון במים, תרכובות פעילות ביולוגית אחרות ניתן להוסיף אם זה רצוי עבור היישום.במיוחד, מערכת היחסים תפקוד מבנה החלבון, מערכת זו היא memetic איך עכביש עושה סיבים גם כי הוא מנצל מים וחלבונים בריכוז גבוה. על ידי שימוש בשיטת מינון זו ובהיווצרות חומרים עוקבת, יש להבין את החומרים שנוצרו ואת המבנים האחראים עליהם. הוא חשב שזה יכול להיות, השתמשנו בטכניקה זו עבור מתבודד פפטידים סינתטיים שאחרת ידרוש סביבה בסיסית או חומצית לפתיר.זה יכול להיות יתרון ביישומים במורד הזרם עבור פפטידים אלה. יתר על כן, מספר חלבונים ידועים כאשר בא לידי ביטוי לאכסון נוטים בסופו של דבר בשבר מסיס. Resolubilizing, ולאחר מכן refolding חלבונים אלה הוא לעתים קרובות תהליך מייגע שתוביל להפסדים גדולים.על ידי שימוש בטכניקה זו, ייתכן שניתן יהיה להגביר את היעילות של תהליכי התאוששות עבור חלבונים מסיסים. הצבת בקבוקון אטום במיקרוגל היא קצת מרתיעה נותן את הסיכון של התחממות יתר ובכך מעל לחץ על הבקבוקון. הבנת הגישה המבוימת להחלת חום ולחץ היא קריטית.שנית, עבור משי עכביש רקומביננטי בפרט, לאחר מלח נוכח לא יאפשר את הטכניקה לעבוד או לעבוד ביעילות בהתאם כמה מלח קיים. הסרת מלח היא המפתח. היו סבלניים וזהירים, עקבו מקרוב אחר זמני המיקרוגל והטמפרטורות בתוך הבקבוקון.זה קריטי כי יש מספר חלקים נעים לפעולה כי הם לעתים קרובות קשה להעביר באמצעות חומרים כתובים מסורתיים וקטעי שיטה. בהתחשב בכך שיש חלבונים רבים שיש להם בעיות מבודדות המונעות מחקר הולם, שיטה זו יש פוטנציאל להיות מיושם על פני מגוון רחב של מרחבי חלבון כדי לשפר, או אפילו לאפשר טכניקות אנליטיות ואפיון. כדי להתחיל, בחר בקבוקון תרבות זכוכית אוטומטית 8 מיליליטר נקי וחדש עם כובע בורג מצופה גומי, והצב את הבקבוקון הריק על איזון אנליטי.לקרוע את המסה של הבקבוקון הריק כך האיזון קורא אפס מסה. מוסיפים את אבקת חלבון משי עכביש רקומביננטי lyophilized הרצוי לבקבוקון הריק עבור החומר הספציפי. לאחר מכן, מוסיפים את הכמות הרצויה של מים טהורים במיוחד, לפחות שני מיליליטר, לבקבוקון.לאטום את כובע הבקבוקון, ומערבולת בזריזות את התוכן כדי ליצור תערובת חלבון משי עכביש מפוזר הומוגני. בצע בדיקה סופית של מכסה הבקבוקון כדי לוודא שהוא התהדק בתקיפות ובבטחה. לאחר מכן, להעביר את תערובת חלבון משי עכביש רקומביננטי מושעה למיקרוגל קונבנציונלי עם טווח כוח של 700 עד 1500 וואט.התחל בהפעלה של המיקרוגל עם חמישה צרורות שניות להגדיר כוח מלא על ידי הפעלה והפעלה ידנית. לאחר כל פרץ, פותחים בקצרה את הדלת ומערבבים בזהירות את הבקבוקון כדי למנוע התיישבות, ושומרים על התערובת התלויה. מדי פעם לאפשר את הבקבוקון ואת הפתרון להתקרר, ולמנוע את הפתרון מחומם יתר על המידה מלגעת החותם.השתמש מדחום אינפרא אדום כדי למדוד את הטמפרטורה של הפתרון המכיל חלק של הבקבוקון. חזור על תהליך המיקרוגל עד שהטמפרטורה מגיעה לפחות ל -130 מעלות צלזיוס, וכל החלקיקים המוצקים הומסו לחלוטין. לאחר מכן, לאפשר את הטמפרטורה של הפתרון ואת כובע הבקבוקון להתקרר מתחת 100 מעלות צלזיוס.לפני פתרון זה להיות מקורר לחלוטין, השליך אותו מן הבקבוקון לתוך גיאומטריות ספציפיות כדי ליצור הידרוג'ל. לאחר ההידרוגל נוצר, מניחים אותו באמבט מים, ומעבירים אותו למקפיא במינוס 20 מעלות צלזיוס. חכה עד האמבטיה קפואה לחלוטין.השלם את תהליך היווצרות הספוג על ידי הסרת הידרוג'ל קפוא ואמבט מים מהמקפיא, והפשרה ב 25 מעלות צלזיוס. לאחר מכן, הסר את הספוג שנוצר מהמים המופשרים. כדי להכין ליוגל, להעביר דגימת הידרוג'ל קפואה lyophilizer.לאחר 24 שעות, להסיר את החומר הסופי ג'ל lyophilized מה כלי. כדי להפיק סרטים של חלבון משי עכביש רקומביננטי, יצוק 200 microliters של חלבון משי עכביש רקומביננטי מנוזל חם מן הבקבוקון על צורת PDMS של הצורה הרצויה. לאחר שהוא מיובש, לקלף אותו מצע PDMS לבדיקה או טיפול.כדי להכין ציפוי שלא ניתן להסיר מהמצע, השתמש מרסס מברשת אוויר כדי להחיל את חלבון משי עכביש רקומביננטי מנוכר לבצע ציפוי ספריי ראשוני על המצע של בחירה. לאחר שהוא מיובש, להטביע את המצע מצופה לתוך חלבון משי עכביש רקומביננטי מנוכר כדי ליצור ציפוי לטבול. חזור על ציפוי המטבל כדי להשיג את העובי הרצוי.כדי ליצור דבקים, השתמש בפיפטה כדי להוסיף את חלבון משי העכביש המבודד על מצע, ולאחר מכן להחיל מצע שני על החלק העליון של הפתרון. בחוזקה להדק את החלקים יחד, ולאחר מכן לייבש את הדגימות בתנור עם טמפרטורה מינימלית של 25 מעלות צלזיוס לפחות 16 שעות. כדי ליצור סיבים סובבים רטובים, השתמש מחט להחליק 19 מד, טען את פתרון סמים מסיסים לתוך מזרק קונצנטרי עם קצה מנעול לור.להוציא בועות אוויר, ולתת את הסמים לשבת בקצה מנעול לולר של המזרק. הכנס לפחות 25 מילימטרים של צינורות PEEK לתוך אביזרי אצבע אחת של PEEK עבור קוטר חיצוני אחד מעל 16 אינץ ', ו 10 מעל 32 מסרק. החלף את המחט 19 מד עם התקנה זו על המתאם נקבה מנעול לולר של המזרק.לאחר מכן, מניחים כפפות ניטריל בצד החיצוני של godets ביניים, כדי לשמור על הסיבים להיווצר מחליק, כדי למנוע פגיעה במנועים. קבל אמבטיית זכוכית צלולה גבוהה עם 99% isopropanol טהור להשתמש כאמבט קרישה. ממלאים את אמבטיית המתיחה הראשונה ביחס של 80 עד 20 של isopropanol ומים מזוקקים.באמבט המתיחה השני, ממלאים יחס של 20 עד 80 של isopropanol ומים מזוקקים. הגדר את מערכת מתיחת godet במחשב. כדי להתאים את המהירות העיקרית של הסרת הסיבים, להתאים את סרגל ההזזה עבור godet שלישייה מהירות A לערך בין 10 ל 14 מילימטרים לשנייה, תלוי כמה טוב ובמהירות הסיב נוצר.ליזום מתיחה ראשונה על ידי הזזת בר הזזה של godet משולש B למתוח יחס לשניים עבור godet הסופי באמבט למתוח אחד, godet העליון באמצע, ואת godet הראשון באמבט למתוח 2. ליזום את המתיחה השנייה על ידי הזזת בר הזזה של godet משולש C למתוח יחס לשניים עבור godet הסופי באמבט למתוח 2, godet העליון האחרון, ואת הרוח. התקנה זו מבטיחה כי godet הראשון לאחר אמבט קרישה, ואת godet הראשון באמבט מתיחה הראשונה מסתובבים באותה מהירות.לאחר מכן, לטעון את פתרון המשי במזרק של מכשיר קו ספין מותאם אישית. במערכת האוטומטית, להגדיר את שיעור ההבלטה ל 10 מילימטרים לשנייה, על מנת להחצין את תספורת המשי לתוך אמבט קרישת זכוכית מלא isopropanol. אפשר שבלט סיבים להיות אחיד, לפני משיכת הסיבים מהאמבטיה עם וו מתכת דק.ודא שהסרת הסיבים מהאמבטיה יוצרת לולאה בין קצה צינורות PEEK לנתיב הסיבים היוצאים מהאמבטיה. מדריך סיבים מאוחזרים דרך הסדרה של godets, כך הסיבים שקועים באמבטיות למתוח, אבל ייבוש באוויר בין אמבטיות למתוח, ולפני הולך על סליל. בפרוטוקול זה באמצעות מינון של חלבון משי עכביש רקומביננטי, ניתן להשיג מגוון צורות חומר.שבע צורות חומריות מוצגות כאן. הידרוג'לים, ליוגלים, ספוג, דבקים, ציפויים, סרטים וסיבים. סיבים דורשים את העיבוד הנרחב ביותר על ידי הבלטה לאמבט קרישה, ולאחר מכן מתיחה סדרתית של הסיבים הגולמיים באמבטיות מתיחה לאחר סל.בהתחשב בכך שפתרונות החלבון והמים מחוממים לטמפרטורה ולחץ גבוהים יחסית, הניסיון שלנו היה שהפתרונות סטריליים בנקודה שבה החלבון פתיר. זה מאפשר לכל אחד מהצורות החומריות המוצגות כאן להילקח לתרבות התאים, כל עוד הם מטופלים כראוי, כדי ללמוד את התגובה התאית לחומרים. אין ספק שטכניקה זו הובילה לגילוי צורות חומר חדשות, כולל דבקים וחומר ספוג.צורות חומר כי הם לא בהכרח אוריינטציה לקראת היווצרות סיבים, אם כי היווצרות סיבים הוא אחד התחומים כי גם ראה שיפור באמצעות הפיתוח של טכניקה זו. יצירת חום ולחץ בתוך בקבוקון אטום יש סכנה אינהרנטית. תמיד ללבוש ציוד מגן אישי בעת ביצוע הליכים אלה.

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Chemistry

Bioengineering

Solutions and Colloids

SCIENTISTS IN ACTION

Visualization of Recombinant DNA and Protein Complexes Using Atomic Force Microscopy

ויזואליזציה של דנ&quot;א רקומביננטי ו קומפלקסים חלבונים באמצעות מיקרוסקופ כוח אטומי

Atomic force microscopy (AFM) allows for the visualizing of individual proteins, DNA molecules, protein-protein complexes, and DNA-protein complexes. On ...

Synthetic Spider Silk Production on a Laboratory Scale

ייצור סינתטי קורי עכביש בקנה מידה מעבדה

As society progresses and resources become scarcer, it is becoming increasingly important to cultivate new technologies that engineer next generation ...

Cell Co-culture Patterning Using Aqueous Two-phase Systems

דפוסי שיתוף תרבות נייד באמצעות מערכות מימיות שני שלבים

Cell patterning  technologies that are fast, easy to use and affordable will be required for the  future development of high throughput cell assays, ...

Air Filter Devices Including Nonwoven Meshes of Electrospun Recombinant Spider Silk Proteins

התקנים כוללים מסנן אוויר משתלב לא ארוג של חלבונים קורי עכביש רקומביננטי electrospun

Based on the natural sequence of Araneus diadematus Fibroin 4 (ADF4), the recombinant spider silk protein eADF4(C16) has been engineered. This highly ...

Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies

Microfabrication של דפוסי זהב Nanoporous לסלולרי מהותי מחקרי אינטראקציה

Nanostructured materials with feature sizes in tens of nanometers have enhanced the performance of several technologies, including fuel cells, biosensors, ...

Protocol for Biofilm Streamer Formation in a Microfluidic Device with Micro-pillars

פרוטוקול ליצירת biofilm Streamer במכשיר microfluidic עם מיקרו עמודים

Several bacterial species possess the ability to attach to surfaces and colonize them in the form of thin films called biofilms. Biofilms that grow in ...

Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

Photopatterning Proteins and Cells in Aqueous Environment Using TiO2 Photocatalysis

Photopatterning חלבונים ותאים בסביבה מימית שימוש Tio<sub&gt; 2</sub&gt; Photocatalysis

Organic contaminants adsorbed on the surface of titanium dioxide (TiO2) can be decomposed by photocatalysis under ultraviolet (UV) light. Here we describe ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

כמו כריך microenvironments לרתום ניידים / חומרי אינטראקציות

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

Automated Lipid Bilayer Membrane Formation Using a Polydimethylsiloxane Thin Film

גיבוש ליפידים אוטומטי bilayer ממברנה באמצעות סרט polydimethylsiloxane רזה

An artificial lipid bilayer, or black lipid membrane (BLM), is a powerful tool for studying ion channels and protein interactions, as well as for ...

Transmission of Multiple Signals through an Optical Fiber Using Wavefront Shaping

העברת אותות מרובים דרך סיב אופטי באמצעות Wavefront לעיצוב

The transmission of multiple independent optical signals through a multimode fiber is accomplished using wavefront shaping in order to compensate for the ...