Name: in vivo inhibition of microrna to decrease tumor growth in mice
Uploaded: 2019-08-23T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice at JoVE.com

Wir danken Raquel Arocha Riesco für ihre Unterstützung bei der Behandlung und Pflege von Mäusen. Wir danken Dr. J. Blanco (Catalonian Institute for Advance Chemistry-CSIC) und Dr. E. Mato (Institut de Reserca de l'Hospital de la Santa Creu i Sant Pau) Barcelona (Spanien) für die Schenkung der CMV-Firefly luc- IRES-EGFP bzw. Cal62-Luc Zellen.

Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit dem Gemeinschaftsrecht (86/609/EWG) und dem spanischen Gesetz (R.D. 1201/2005) mit Zustimmung der Ethikkommission des Consejo Superior de Investigaciones Cientéficas (CSIC, Spanien) durchgeführt.
1. Flankenimpfung von Zellen und intratumorale AntagomiR-Behandlung
<ol><li>Zellvorbereitung
	<ol>
<li>Entwickeln Sie eine Cal62-Humanschilddrüsenkrebs-Zelllinie (KRASG12R und p53A161D-Mutationen), um ein transgene...

<ol>
	<li>Lim, H., Devesa, S. S., Sosa, J. A., Check, D., Kitahara, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trends+in+Thyroid+Cancer+Incidence+and+Mortality+in+the+United+States.">Trends in Thyroid Cancer Incidence and Mortality in the United States.</a> Journal of the American Medical Association. 317 (13), 1338-1348 (2017).</li><li>Landa, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+and+transcriptomic+hallmarks+of+poorly+differentiated+and+anaplastic+thyroid+cancers.">Genomic and transcriptomic hallmarks of poorly differentiated and anaplastic thyroid cancers.</a> The Journal of Clinical Investigation. 126 (3), 1052-1066 (2016).</li><li>Gregory, R. I., Shiekhattar, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA+biogenesis+and+cancer.">MicroRNA biogenesis and cancer.</a> Cancer Research. 65 (9), 3509-3512 (2005).</li><li>Lin, S., Gregory, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA+biogenesis+pathways+in+cancer.">MicroRNA biogenesis pathways in cancer.</a> Nature Reviews Cancer. 15 (6), 321-333 (2015).</li><li>Hammond, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs+as+oncogenes.">MicroRNAs as oncogenes.</a> Current Opinion In Genetics &amp; Development. 16 (1), 4-9 (2006).</li><li>Cancer Genome Atlas Reserch Network. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrated+genomic+characterization+of+papillary+thyroid+carcinoma.">Integrated genomic characterization of papillary thyroid carcinoma.</a> Cell. 159 (3), 676-690 (2014).</li><li>Li, Z., Rana, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+targeting+of+microRNAs:+current+status+and+future+challenges.">Therapeutic targeting of microRNAs: current status and future challenges.</a> Nature Reviews. Drug Discovery. 13 (8), 622-638 (2014).</li><li>Pallante, P., Battista, S., Pierantoni, G. M., Fusco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deregulation+of+microRNA+expression+in+thyroid+neoplasias.">Deregulation of microRNA expression in thyroid neoplasias.</a> Nature Reviews. Endocrinology. 10 (2), 88-101 (2014).</li><li>Fuziwara, C. S., Kimura, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNAs+in+thyroid+development,+function+and+tumorigenesis.">MicroRNAs in thyroid development, function and tumorigenesis.</a> Molecular and Cellular Endocrinology. 456, 44-50 (2017).</li><li>Fuziwara, C. S., Kimura, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA+Deregulation+in+Anaplastic+Thyroid+Cancer+Biology.">MicroRNA Deregulation in Anaplastic Thyroid Cancer Biology.</a> International Journal of Endocrinology. 2014, 743450 (2014).</li><li>Riesco-Eizaguirre, G., Santisteban, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocrine+Tumours:+Advances+in+the+molecular+pathogenesis+of+thyroid+cancer:+lessons+from+the+cancer+genome.">Endocrine Tumours: Advances in the molecular pathogenesis of thyroid cancer: lessons from the cancer genome.</a> European Journal of Endocrinology. 175 (5), R203-R217 (2016).</li><li>Riesco-Eizaguirre, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+miR-146b-3p/PAX8/NIS+Regulatory+Circuit+Modulates+the+Differentiation+Phenotype+and+Function+of+Thyroid+Cells+during+Carcinogenesis.">The miR-146b-3p/PAX8/NIS Regulatory Circuit Modulates the Differentiation Phenotype and Function of Thyroid Cells during Carcinogenesis.</a> Cancer Research. 75 (19), 4119-4130 (2015).</li><li>Lima, C. R., Geraldo, M. V., Fuziwara, C. S., Kimura, E. T., Santos, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MiRNA-146b-5p+upregulates+migration+and+invasion+of+different+Papillary+Thyroid+Carcinoma+cells.">MiRNA-146b-5p upregulates migration and invasion of different Papillary Thyroid Carcinoma cells.</a> BMC Cancer. 16, 108 (2016).</li><li>Lee, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-222+and+microRNA-146b+are+tissue+and+circulating+biomarkers+of+recurrent+papillary+thyroid+cancer.">MicroRNA-222 and microRNA-146b are tissue and circulating biomarkers of recurrent papillary thyroid cancer.</a> Cancer. 119 (24), 4358-4365 (2013).</li><li>Deng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MiR-146b-5p+promotes+metastasis+and+induces+epithelial-mesenchymal+transition+in+thyroid+cancer+by+targeting+ZNRF3.+Cellular+Physiology+and+Biochemistry.">MiR-146b-5p promotes metastasis and induces epithelial-mesenchymal transition in thyroid cancer by targeting ZNRF3. Cellular Physiology and Biochemistry.</a> International Journal of Experimental Cellular Physiology, Biochemistry, and Pharmacology. 35 (1), 71-82 (2015).</li><li>Ramirez-Moya, J., Wert-Lamas, L., Santisteban, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-146b+promotes+PI3K/AKT+pathway+hyperactivation+and+thyroid+cancer+progression+by+targeting+PTEN.">MicroRNA-146b promotes PI3K/AKT pathway hyperactivation and thyroid cancer progression by targeting PTEN.</a> Oncogene. , (2018).</li><li>Ramirez-Moya, J., Wert-Lamas, L., Riesco Eizaguirre, G., Santisteban, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impaired+microRNA+processing+by+DICER1+downregulation+endows+thyroid+cancer+with+increased+aggressiveness.">Impaired microRNA processing by DICER1 downregulation endows thyroid cancer with increased aggressiveness.</a> Oncogene. , (2019).</li><li>Xing, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+mechanisms+of+thyroid+cancer.">Molecular pathogenesis and mechanisms of thyroid cancer.</a> Nature Reviews. Cancer. 13 (3), 184-199 (2013).</li></ol>

Dieser Artikel beschreibt eine Methode zur Untersuchung der In-vivo-Funktion einer miRNA, um ihre Rolle bei der Tumorinitiierung und -progression und ihr Potenzial als therapeutisches Ziel bei Schilddrüsenkrebs besser zu verstehen. Die hier beschriebenen Tumor-Xenograft-Modelle basieren auf der Verwendung von Zellen, die durch ihr Biolumineszenzsignal verfolgt werden können, was die Messung des Tumorwachstums in vivo unter dem Einfluss einer Behandlung ermöglicht. Darüber hinaus beschreiben wir die Verwendung einer m...

Schilddrüsenkrebs ist eine endokrine Malignität mit zunehmender Inzidenz, obwohl sie im Allgemeinen ein gutes Ergebnis hat1. Dennoch entwickeln einige Patienten aggressive Formen der Krankheit, die nicht behandelbar sind und die molekularen Grundlagen sind schlecht verstanden2.
miRNAs sind 22-Nukleotid-lange nicht-kodierende RNAs, die die Genexpression in vielen Geweben regulieren, typischerweise durch Basispaarbindung an die 3' untranslationale Region (3'UTR) von Target Messenger RNAs (mRNAs), die mRNA-Abbau oder translationale Repression auslösen 3 , 4. Es gibt immer mehr Hinweise darauf, dass die Deregulierung der microRNA-Expression ein Kennzeichen von Krebs ist, da diese Moleküle proliferative Signalisierung, Migration, Invasion und Metastasierung modulieren und Resistenzen gegen Apoptose bieten können. 5,6. In den letzten Jahren haben viele Studien miRNAs als potenzielle Biomarker für die Krebsdiagnose und -prognose sowie therapeutische Ziele7identifiziert, die eine neue Dimension für die Krebsbewertung und -behandlung bieten.
miRNAs haben in der humanen molekularen Onkologie als Schlüsseltreiber der menschlichen Schilddrüsenneoplasmen8,9,10,11,12. Unter den miRNAs up-reguliert, miR-146b ist stark überexprimiert in Papillarschildkarzinom (PTC) Tumoren und wurde gezeigt, dass signifikant erhöhen Zellproliferation, und mit Aggressivität und trostlosen Prognose assoziiert werden6, 12 , 13 , 14 , 15. Darüber hinaus reguliert miR-146b mehrere Schilddrüsengene, die an der Differenzierung beteiligt sind12, sowie wichtige Tumorsuppressorgene wie PTEN16 und DICER117. Trotz ihrer Bedeutung in der Krebsbiologie befindet sich die miRNA-basierte Krebstherapie noch in den Anfängen, und nur sehr wenige Studien haben sich mit Schilddrüsenkrebs befasst - der häufigste der endokrinen Tumoren18. Hier beschreiben wir ein Protokoll mit zwei verschiedenen Mausmodellen mit vom Menschen abgeleiteten Tumoren, bei dem die Verabreichung eines synthetischen miRNA-Hemmers (AntagomiR), der speziell eine zelluläre miRNA hemmt, das Tumorwachstum blockieren kann. Wir verwendeten zuerst ein gemeinsames Xenograft-Modell, und die lokale Intratumor-Verabreichung eines AntagomiR verringerte das Tumorwachstum gemessen als eine Reduktion der Tumorbiolumineszenz16. Da die Etablierung robuster Mausmodelle, die die Progression des menschlichen Tumors imitieren, unerlässlich ist, um einzigartige therapeutische Ansätze zu entwickeln, ist die orthotopische Implantation primärer menschlicher Tumoren eine wertvollere Plattform für die klinische Validierung neuer Medikamente als subkutane Implantationsmodelle. Um das therapeutische Potenzial der AntagomiR besser einschätzen zu können, haben wir daher ein orthotopisches Mausmodell mit systemischer Entbindung im Blutstrom verwendet, um die gleichen Ergebnisse zu erzielen.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>AntagomiR: mirVana miRNA inhibitor</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>4464088</td>
			<td>In Vivo Ready</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Basement Membrane Matrix: Matrigel Basement Membrane Matrix High Concentration</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#354248</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DICER antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab14601</td>
			<td>IHQ: 1/100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vivo delivery reagent: Invivofectamine 3.0 Reagent</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>IVF3005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>In vivo imaging software: IVIS-Lumina II Imaging System</td>
			<td>Caliper Life Sciences</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Negative control: mirVana miRNA Inhibitor, Negative Control #1</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>4464077</td>
			<td>In Vivo Ready</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PCNA antibody</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab92552</td>
			<td>WB: 1/2,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PTEN antibody</td>
			<td>Santa Cruz</td>
			<td>sc-7974</td>
			<td>WB: 1/1,000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>XenoLight D-Luciferin - K+ Salt Bioluminescent Substrate</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td>122799</td>
			<td>Diluted in PBS</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo inhibition of microrna to decrease tumor growth in mice

MicroRNAs (miRNAs) sind wichtige Regulatoren der Genexpression durch ihre Fähigkeit, mRNA zu destabilisieren und die Translation von Ziel-mRNAs zu hemmen. Eine ständig wachsende Anzahl von Studien hat miRNAs als potenzielle Biomarker für die Krebsdiagnose und -prognose sowie als therapeutische Ziele identifiziert, was der Krebsbewertung und -behandlung eine zusätzliche Dimension hinzufügt. Im Zusammenhang mit Schilddrüsenkrebs resultiert die Tumorgenese nicht nur aus Mutationen in wichtigen Genen, sondern auch aus der Überexpression vieler miRNAs. Dementsprechend entwickelt sich die Rolle von miRNAs bei der Kontrolle der Schilddrüsen-Genexpression als wichtiger Mechanismus bei Krebs. Hierbei stellen wir ein Protokoll vor, um die Wirkung der miRNA-Hemmer-Verabreichung als therapeutische Modalität bei Schilddrüsenkrebs mit menschlichen Tumor-Xenograft- und orthotopischen Mausmodellen zu untersuchen. Nach der Entwicklung stabiler Schilddrüsentumorzellen, die GFP und Luziferase exezieren, werden Zellen in nackte Mäuse injiziert, um Tumore zu entwickeln, denen Biolumineszenz folgen kann. Die In-vivo-Hemmung einer miRNA kann das Tumorwachstum reduzieren und miRNA-Genziele hochregulieren. Diese Methode kann verwendet werden, um die Bedeutung einer bestimmten miRNA in vivo zu bewerten, zusätzlich zur Identifizierung neuer therapeutischer Ziele.

Wir verwendeten zwei verschiedene Mäusemodelle, um zu bestimmen, ob die Neutralisation einer miRNA das Tumorwachstum unterdrücken könnte. Dementsprechend wurden die menschlichen Tumorschild-Cal62-luc-Zellen subkutan in die Flanken von Nacktmäusen injiziert, um ein Xenographenmodell zu erzeugen. Nach zwei Wochen wurden Tumore festgestellt und konnten mit Sätteln gemessen werden. Zu diesem Zeitpunkt wurden Mäuse intratumoral mit dem miR-146b-Hemmer injiziert, oder eine entsprechende Kontrolle, und das Tumorvolumen wu...

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In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

In Vivo Hemmung von MicroRNA zur Verringerung des Tumorwachstums bei Mäusen

Dieses Protokoll beschreibt Xenograft- und orthotopische Mausmodelle der menschlichen Schilddrüsentumorigenese als Plattform, um mikroRNA-basierte Inhibitorbehandlungen zu testen. Dieser Ansatz ist ideal, um die Funktion nicht-kodierender RNAs und ihr Potenzial als neue therapeutische Ziele zu untersuchen.

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

Wir führen die erste Therapie durch, basierend auf einem microRNA-Hemmer in einem Schilddrüsenkrebsmodell. Diese sich entwickelnden Therapien versprechen die Behandlung dieser Krankheit. Diese Art von orthotopischem Modell, das einen systemischen Behandlungsweg nutzt, erleichtert die Validierung eines neuen mikroRNA-basierten Arzneimittels.Obwohl wir ein orthotopisches Modell verwenden, um menschliche Schilddrüsenkrebszellen in Mausschilddrüsen zu implantieren, könnten diese Modelle alle systemisch für andere Krebsarten sein. Mit Julia Ramirez-Moya und Adrian Acuna wird Raquel Arocha Riesco das Prozedere demonstrieren. Sie ist Technikerin unseres Instituts.Nach der Etablierung einer CAL-62 menschlichen Schilddrüsenkrebs-Zelllinie unvollständiges Medium, suspendieren Sie ein 1 mal 10 bis die 6. Zelle aliquot in 50 Mikroliter PBS bei 4 Grad Celsius, und mischen Sie die Zellen mit einem gleichen Volumen der Kellermembranmatrix. Laden Sie die Zellen in eine 1 Milliliter Spritze, ausgestattet mit einer 27 gage Halb-Zoll-Nadel, und subkutan injizieren 100 Mikroliter der Probe in die linke Flanke einer 6 Wochen alten immundeficient valve C Nacktmaus. Zwei Wochen nach der Injektion die AntagomiR- oder kontrollierte Behandlungspufferlösung zu 160 Mikroliterraumtemperatur in vivo-Abgabereagenz in einem 1 Punkt 5 Milliliter Tube hinzufügen.Und sofort wirbeln die Lösung für 10 Sekunden, um die Komplexierung der Mischung zu gewährleisten. Inkubieren Sie die Behandlungslösung 30 Minuten bei 50 Grad Celsius, gefolgt von einer kurzen Zentrifugation in einer Mikrozentrifuge. Anschließend den Sedimentbehandlungskomplex versechsfacht mit frischem PBS und gründlicher Vermischung.Und injizieren Sie das gesamte Volumen von 200 Mikrolitern der Behandlung direkt in den Tumor. Injizieren Sie 50 Mikroliter einer 40 Milligramm pro Liter D-Luciferin Substratlösung subkutan 2 mal pro Woche, in jedes Versuchstier. Achten Sie darauf, einen Mangel an Reaktion auf Zehenkneifung nach Isoflurananästhesie zu bestätigen.Legen Sie das Tier in die Kammer eines In-vivo-Biolumineszenz-Bildgebungssystems und stellen Sie das Biolumineszenzsignal mit der in vivo Bildgebungssoftware nach Standardprotokollen ab. Analysieren Sie dann das Tumorwachstum. Vergleich beider Behandlungen und Bestimmung der Signifikanz und Wachstumsunterschiede mit einem T-Test.Für orthotopische Schilddrüsen-Tumorzell-Impfung suspendieren Sie ein Aliquot von CAL-62-Zellen in 5 Mikroliter PBS, und subkutan injizieren 100 Mikroliter analgetisch und 100 Mikroliter Antibiotikum in eine 7 Wochen alte Ventil C Nacktmaus. Nachdem Sie eine fehlende Reaktion auf Zehenkneifen bestätigt haben, legen Sie das Tier unter ein Sezierendes Mikroskop und desinfizieren Sie den Hals des Tieres mit Iodopovidon. Als nächstes machen Sie einen etwa 2 Zentimeter großen Schnitt in der Haut und verdrängen Sie die Speicheldrüsen, um den Hals freizulegen.Verwenden Sie Sezieren Zangen, und / oder Schere, um die Riemenmuskeln zu sezieren, um die Luftröhre und Schilddrüse zu belichten, und verwenden Sie eine 10-Mikroliter-Spritze, um das 5-Mikroliter Volumen der Tumorzellen in die rechte Schilddrüsenlobule zu injizieren, die sich an der Seite des Cricoid-Knorpels befindet. Wenn alle Zellen geliefert wurden, positionieren Sie die Speicheldrüsen, und verwenden Sie Seidengeflochtene, beschichtete, nicht resorbierbare Nähte, um den Schnitt zu schließen. Dann iodopovidon auf den Wundbereich auftragen und die Maus auf eine thermische Decke mit Überwachung bis zur vollständigen Genesung legen.zwei bis drei Wochen nach der Intrathyroid-Zellinjektion, bereiten Sie die Behandlungslösung wie gezeigt vor und liefern Sie die Lösung intravenös durch retroorbitale Injektion der venösen Sinus des anästhesierten Schilddrüsentumor tragenden Tieres. In diesem repräsentativen Experiment wurde das Wachstum von Tumoren intratumoral ohne microRNA 146B-Inhibitor injiziert, in Bezug auf die Negative Kontrolle signifikant unterdrückt. Intratumorale Expressionsniveaus einiger Proliferationsmarker wurden auch in niedrigen Konzentrationen beobachtet, bei antagomiR behandelten Tumoren, im Vergleich zu kontrollierbaren Tumoren.Darüber hinaus kann die Wiederherstellung der Mikro-RNA-Ziele durch die Analyse von tumorextrahierter RNA oder Protein untersucht werden. Kollektiv enthüllt, dass die In-vivo-Hemmung einzelner Mikro-RNA wirksam ist und therapeutisch für Schilddrüsenkrebsbehandlungen genutzt werden kann. Histologische Analyse von Schilddrüsentumoren, die bei Mäusen nachgewiesen wurden, ermöglicht die Färbung der Epithelzellen, die den Tumor umgeben, und zeigt die Schilddrüsenfollikelarchitektur des Tumorgewebes.Insbesondere führt die intravenöse Injektion von microRNA 146B-Hemmern in Mäuse mit einem etablierten Tumor zu einer signifikanten Abnahme des Tumorvolumens im Vergleich zu kontrollbehandelten Tieren. Darüber hinaus erhöht sich die Expression der neu beschriebenen microRNA 146B Ziel DICER1 im Primärtumor, erhöht sich nach der Anti-Micro-RNA 146B-Behandlung, was das Potenzial der Hemmung der indogenösen Mikro-RNA-Expression und damit die Wiederherstellung ihrer Zielgene als Therapie bei Schilddrüsenkrebs weiter unterstreicht. Diese Technik und die nachfolgenden Lipin-Ergebnisse eröffnen die Möglichkeit, neue Therapien zu erforschen, die auf nicht heilenden RNAs zur Behandlung von Schilddrüsenkrebs basieren.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

In Vivo Model for Testing Effect of Hypoxia on Tumor Metastasis

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In - vivo - Modell für die Prüfung von Wirkung von Hypoxie auf die Tumormetastasierung

Hypoxia has been implicated in the metastasis of Ewing sarcoma (ES) by clinical observations and in vitro data, yet direct evidence for its pro-metastatic ...

Forschung

Krebsforschung

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

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Das<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginalscheibe Tumormodell: Visualisierung und Quantifizierung von Genexpression und Tumorinvasivität mit Genetischen Mosaiken

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

In Vivo EPR Assessment of pH, pO2, Redox Status, and Concentrations of Phosphate and Glutathione in the Tumor Microenvironment

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In Vivo EPR-Bewertung der pH, pO2, Redox-Status, und Konzentrationen von Phosphat und Glutathion in der Tumor-Mikroumgebung

This protocol demonstrates the capability of low-field electron paramagnetic resonance (EPR)-based techniques in combination with functional paramagnetic ...

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

Verwendung von hochauflösendem Ultraschall zu Monitor Tumor auftreten und Wachstum in gentechnisch Bauchspeicheldrüsenkrebs Modelle

The LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mouse model represents an established and frequently used transgenic model to evaluate novel ...

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Phosphopeptide Bereicherung gepaart mit quantitativen markierungsfreie Massenspektrometrie zu untersuchen, die Phosphoproteome bei Prostatakrebs

Phosphoproteomics involves the large-scale study of phosphorylated proteins. Protein phosphorylation is a critical step in many signal transduction ...

Digital Polymerase Chain Reaction Assay for the Genetic Variation in a Sporadic Familial Adenomatous Polyposis Patient Using the Chip-in-a-tube Format

Digitalen Polymerase-Kettenreaktion-Assay für die genetische Variation bei einem sporadischen familiäre adenomatöse Polyposis Patienten mit dem Chip-in-Rohr-Format

The quantitative analysis of human genetic variation is crucial for understanding the molecular characteristics of serious medical conditions, such as ...

Transfer of Manipulated Tumor-associated Neutrophils into Tumor-Bearing Mice to Study their Angiogenic Potential In Vivo

Transfer von manipulierten Tumor-assoziierten Neutrophilen in tumortragende Mäuse zur Untersuchung ihres angiogenen Potenzials in Vivo

The contribution of neutrophils to the regulation of tumorigenesis is getting increased attention. These cells are heterogeneous, and depending on the ...

Detection of Lung Tumor Progression in Mice by Ultrasound Imaging

Nachweis der Lungentumorprogression bei Mäusen durch Ultraschall-Bildgebung

With ~1.6 million victims per year, lung cancer contributes tremendously to the worldwide burden of cancer. Lung cancer is partly driven by genetic ...

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Ein Mausmodell zur Untersuchung der Rolle krebsassoziierter Fibroblasten beim Tumorwachstum

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) can play an important role in tumor growth by creating a tumor-promoting microenvironment. Models to study the role ...