Name: using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly
Uploaded: 2019-08-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly at JoVE.com

وقد حظيت هذه الدراسة بدعم المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (المنحة رقم 81670451، 81770430)، وبرنامج شنغهاي للنجوم الصاعدين (المنحة رقم 17QA1403000)، ولجنة التكنولوجيا العلمية التابعة لحكومة بلدية شنغهاي (رقم المنحة رقم 17QA1403000)، ولجنة التكنولوجيا العلمية التابعة لحكومة بلدية شنغهاي (رقم المنحة. 14441903002, 15411963700).

وقد أجريت جميع التجارب الحيوانية وفقا للبروتوكولات التجريبية التي وافقت عليها لجنة الموارد الحيوانية في جامعة جياو تونغ في شنغهاي.
1. التسريب من الأبهر الماوس
<ol><li>باختصار، التخدير 12 أسبوعا من العمر C57BL/6 الفئران مع الحقن داخل الستابية من البنتوباربيتال الصوديوم (50 ملغ / كغ ...

<ol>
	<li>Gimbrone, M. A., Garcia-Cardena, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Cell+Dysfunction+and+the+Pathobiology+of+Atherosclerosis.">Endothelial Cell Dysfunction and the Pathobiology of Atherosclerosis.</a> Circulation Research. 118 (4), 620-636 (2016).</li><li>Zhou, J., Li, Y. S., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress-initiated+signaling+and+its+regulation+of+endothelial+function.">Shear stress-initiated signaling and its regulation of endothelial function.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 34 (10), 2191-2198 (2014).</li><li>Tarbell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+and+the+endothelial+transport+barrier.">Shear stress and the endothelial transport barrier.</a> Cardiovascular Research. 87 (2), 320-330 (2010).</li><li>Warren, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+production+of+&amp;#34;en+face&amp;#34;+preparations+one+cell+in+thickness.">A method for the production of &amp;#34;en face&amp;#34; preparations one cell in thickness.</a> Journal of Microscopy. 85 (4), 407-413 (1965).</li><li>Azuma, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+En+face+method+is+useful+to+quantitate+endothelial+damage+in+vivo.">A new En face method is useful to quantitate endothelial damage in vivo.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 309 (2), 384-390 (2003).</li><li>Son, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+mechanosensitive+microRNA-712+derived+from+pre-ribosomal+RNA+induces+endothelial+inflammation+and+atherosclerosis.">The atypical mechanosensitive microRNA-712 derived from pre-ribosomal RNA induces endothelial inflammation and atherosclerosis.</a> Nature Communications. 4, 3000 (2013).</li><li>Go, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+flow+enhances+inflammatory+signaling+and+atherogenesis+by+increasing+thioredoxin-1+level+in+endothelial+cell+nuclei.">Disturbed flow enhances inflammatory signaling and atherogenesis by increasing thioredoxin-1 level in endothelial cell nuclei.</a> PLOS ONE. 9 (9), e108346 (2014).</li><li>Kundumani-Sridharan, V., Dyukova, E., Hansen, D. E., Rao, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=12/15-Lipoxygenase+mediates+high-fat+diet-induced+endothelial+tight+junction+disruption+and+monocyte+transmigration:+a+new+role+for+15(S)-hydroxyeicosatetraenoic+acid+in+endothelial+cell+dysfunction.">12/15-Lipoxygenase mediates high-fat diet-induced endothelial tight junction disruption and monocyte transmigration: a new role for 15(S)-hydroxyeicosatetraenoic acid in endothelial cell dysfunction.</a> The Journal of Biological Chemistry. 288 (22), 15830-15842 (2013).</li><li>Liu, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q/TNF-related+protein+1+promotes+endothelial+barrier+dysfunction+under+disturbed+flow.">C1q/TNF-related protein 1 promotes endothelial barrier dysfunction under disturbed flow.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 490 (2), 580-586 (2017).</li><li>Wang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioredoxin+interacting+protein+promotes+endothelial+cell+inflammation+in+response+to+disturbed+flow+by+increasing+leukocyte+adhesion+and+repressing+Kruppel-like+factor+2.">Thioredoxin interacting protein promotes endothelial cell inflammation in response to disturbed flow by increasing leukocyte adhesion and repressing Kruppel-like factor 2.</a> Circulation Research. 110 (4), 560-568 (2012).</li><li>Mitra, S., Deshmukh, A., Sachdeva, R., Lu, J., Mehta, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+low-density+lipoprotein+and+atherosclerosis+implications+in+antioxidant+therapy.">Oxidized low-density lipoprotein and atherosclerosis implications in antioxidant therapy.</a> The American Journal of the Medical Sciences. 342 (2), 135-142 (2011).</li><li>Stancel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+CRP,+Atherogenic+LDL,+and+LOX-1+and+Its+Potential+Role+in+the+Pathogenesis+of+Atherosclerosis.">Interplay between CRP, Atherogenic LDL, and LOX-1 and Its Potential Role in the Pathogenesis of Atherosclerosis.</a> Clinical Chemistry. 62 (2), 320-327 (2016).</li><li>Nerem, R. M., Levesque, M. J., Cornhill, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Endothelial+Morphology+as+an+Indicator+of+the+Pattern+of+Blood+Flow.">Vascular Endothelial Morphology as an Indicator of the Pattern of Blood Flow.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 103 (3), 172-176 (1981).</li></ol>

يتعرض البطانة للعديد من العوامل المسببة للإصابة، بما في ذلكالدهون، والوسطاء الالتهابيين، والإجهاد القص السائل 1،11،12. توفر المراقبة المباشرة للخلايا البطانية في الموقع مزايا خاصة لتحليل التغيرات في مورفولوجيا الخلايا، والتقاطعات بين ا...

التغيرات المبكرة في الأوعية الدموية تبدأ في المقام الأول في البطانة ، والتي تعمل كحاجز انتقائي بين الدم وجدار السفينة مع المجمعات التقاطعية الضيقة بين الخلايا1. تشير الأدلة الجوهرية إلى دور حاسم للآثار الميكانيكية لتدفق الدمفي تحوير وظيفة بطانة الرحم 2. السائل القص الإجهاد، وهي قوة الاحتكاك الناجمة عن تدفق الدم، والأشكال بشكل تفاضلي مورفولوجيا الخلايا البطانية وظيفة، اعتمادا على نماذج تدفق محددة في مواقع الأوعية الدموية المختلفة2،3. تحدث الآفات التصلب الشرايين بشكل تفضيلي في مواقع تدفق الدم المضطرب (d-flow)، مثل انحناءات الأوعية الدموية، وفواصل التدفق، ونقاط الفرع، مقارنة بمناطق التدفق المطرد (التدفق s)، مثل الجزء المستقيم من الشريان. ولذلك، فإن المراقبة المباشرة لمورفولوجيا البطانية وأنماط التعبير الجزيءينبغي أن توفر رؤى هامة في الأنماط الظاهرية الهيكلية والوظيفية للخلايا البطانية في إطار نماذج تدفق متفاوتة.
قد لا تعبر الخلايا البطانية المستزرعة عن النمط الظاهري الفعلي كما تفعل في الجسم الحي ويرجع ذلك جزئياإلى فقدان تأثير الإجهاد القص السائل، السيتوكينات المحيطة، وتفاعلات الخلايا الخلوية أو الخلايا خارج الخلية مصفوفة خارج الخلية. للمساعدة في ذلك، يمكن دراسة أحادية الخلية البطانية سليمة على المقاطع العرضية باستخدام الكيمياء المناعية الكلاسيكية. ومع ذلك، فإن الطبقة الأحادية البطانية رقيقة وهشة لدرجة أنه لا يمكن ملاحظتها بوضوح. وقد استخدمت في الوجه الكيمياء المناعية لمراقبة السطح الداخلي للبطانة ولكن إما معقدة أو غير منتظمة في نتائجها لأن البطانة يتم تجريدها بسهولة من الأنسجة الكامنة، أو مجرد جزء من الجدار الشرياني للفئران أو الأرانب، التي هي سميكة الجدران، وشنت4،5.
نماذج الماوس لها مزايا كبيرة على الحيوانات الأخرى في العديد من النواحي. هنا، ونحن نستخدم تعديل في مواجهة تقنية الفلورة المناعية لتحليل الخلايا البطانية من القوس الأبهري والأبهر الصدري في الماوس C57BL/6. وقد استخدمت هذه التقنية على نطاق واسع لدراسة الفيزيولوجيا المرضية البطانية في أنماط تدفق مختلفة وفي تطوير تصلب الشرايين6و7و8و9و10. تسمح هذه الطريقة للعلماء بمراقبة كامل سطح البطانة بوضوح ومقارنة أنماط التعبير لبروتين معين في المناطق التي تخضع لإجهاد القص السوائل المختلفة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:655px;" width="655">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Antifade mountant</td>
			<td style="width:126px;">Servicebio</td>
			<td style="width:134px;">G1401</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F11001-11</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S12003-09</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Dissecting Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F12005-10</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Mciro Spring Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S11001-08</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polyoxyethylene octyl phenyl ether (Triton X-100)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">M143</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polysorbate 20 (Tween 20)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">0777</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VCAM-1 antibody</td>
			<td style="width:126px;">Abcam</td>
			<td style="width:134px;">ab134047</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VE-Cadherin antibody</td>
			<td style="width:126px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:134px;">555289</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 555 labeled anti-rabbit IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-31572</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 488 labeled anti-rat IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-21208</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laser Scanning Microscope&#160;</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td style="width:134px;"></td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly

تعتبر التغيرات الشاذة في النمط الظاهري البطانية والمورفولوجيا أن تكون الأحداث الأولية في مسببات الأمراض من تصلب الشرايين. المراقبة المباشرة للبطانة سليمة سوف توفر معلومات قيمة لفهم الأحداث الخلوية والجزيئية في الخلايا البطانية المختلة وظيفيا. هنا، ونحن نصف تعديل en الوجه تقنية تلطيخ المناعة التي تمكن العلماء من الحصول على صور واضحة للسطح البطانية سليمة وتحليل أنماط التعبير جزيء في الموقع. الطريقة بسيطة وموثوق بها لمراقبة أحادية بطانة كامل في مواقع مختلفة من الأبهر. قد تكون هذه التقنية أداة واعدة لفهم الفيزيولوجيا المرضية لتصلب الشرايين، وخاصة في مرحلة مبكرة.

تم قتل فأر C57BL/6 البالغ من العمر 12 أسبوعًا وملئه بمحلول ملحي عادي يحتوي على 40 وحدة/مليلترين، ثم يكون مثلالبارامالديهايد المبرد بنسبة 4%. تم الكشف عن الأبهر الماوس تحت المجهر تشريح (الشكل1) ، تشريح ، وقطع فتح طوليا (الشكل 2). تم تنفيذ تلطيخ الفلو...

Watch this Scientific Journal Video about Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly at JoVE.com

Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly

هنا، نقدم بروتوكول او تلطيخ مناعة لمراقبة الخلايا البطانية للأبهر الفأر مباشرة. هذه التقنية مفيدة عند دراسة النمط الظاهري الخلوي والجزيئي للخلايا البطانية في أنماط تدفق مختلفة وفي تطوير تصلب الشرايين.

استخدام تلطيخ الفلورة المناعية للوجه لمراقبة الخلايا البطانية الوعائية مباشرة

Aberrant changes in endothelial phenotype and morphology are considered to be initial events in the pathogenesis of atherosclerosis. Direct observation of ...

يساعد هذا البروتوكول الناس على تحليل مورفولوجيا الخلايا البطانية، والتعبير عن الجزيئات في المناطق، تحت إجهاد القص السائل مختلفة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها توفر تقييمًا مباشرًا للخلايا البطانية الوعائية تحت إجهاد القص السائلي المختلف. عند تنفيذ هذا الإجراء، والخطوات الرئيسية هي استخدام الـ paraformaldehyde المعد حديثاً وإجراء عملية ضخ جيدة.ابدأ هذا الإجراء ب التخدير من ماوس C57BL/6 12 أسبوعًا، كما هو موضح في بروتوكول النص. تأكيد التخدير السليم عن طريق معسر بلطف الذيل. الشريط الكفوف الماوس إلى كومة من المناشف الورقية، مع شريط لاصق.احمل جلد الفأر بالملقط، وقطع الجلد بمقص من البطن إلى أعلى الصدر. افتح تجويف البطن، أسفل القفص الصدري، مع مقص حاد. رفع القص مع ملقط، وقطع الحجاب الحاجز.ثم قطع الصدري لفضح تجويف الصدر. قطع فينا كافا فقط فوق الكبد مع مقص. يُضخ الضغط الشجرة الشريانية لمدة خمس دقائق، مع وجود ملح ملح طبيعي مُبرد مسبقًا يحتوي على 40 وحدة لكل ملليلتر من الهيبارين، من خلال البطين الأيسر، حتى تصبح الرئتين والكبد شاحبتين.ثم تضخ مع ما قبل مبردة 4٪ شبهformaldehyde في برنامج تلفزيوني لمدة أربع دقائق. إزالة جميع العضلات, أعضاء, والدهون, حتى يتعرض الشريان الأورطي. ضع الفأر تحت مجهر تشريح.استخدام ملقط حساسة وزوج من مقص دقيق لفضح الشريان الأورطي بوضوح تحت المجهر تشريح, وإزالة النسيج الضام على طول الشريان الأورطي, نظيفة قدر الإمكان. تشريح الشريان الأورطي الصدري من القلب إلى جذع الاضطرابات الهضمية مع زوج من مقص دقيق. ضع الشريان الأورطي في طبق ثقافة الخلايا ستة سنتيمترات، مع برنامج تلفزيوني.قطع فتح الشريان الأورطي طوليا، أولا على طول المنحنى أقل، ومن ثم استخدام microscissors لقطع فتح الفروع الثلاثة من القوس الأبهر، بما في ذلك السمة، غادر السباتي المشترك، والشريان تحت التلقفي الأيسر على طول منحنى أكبر حتى يتم الوفاء الجزء المستقيم. Permeabilize الشريان الأورطي مع 1٪ البولي أوكسي إيثيلين ثمانيل الفينيل الأثير، في برنامج تلفزيوني لمدة 10 دقائق. ثم كتلة الشريان الأورطي مع مصل الماعز العادي 10٪ في محلول ملحي tris المخزنة يحتوي على 2.5٪ polysorbate 20 لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة، في لوحة ثقافة 12 خلية جيدا.المقبل احتضان الشريان الأورطي في العازلة حظر تحتوي على خمسة غرامات لكل ميليلتر أرنب مضاد VCAM1، وخمسة غرامات لكل ملليلتر الفئران المضادة VE-Cadherin، بين عشية وضحاها في أربع درجات مئوية. بعد شطف العينة ثلاث مرات مع محلول الغسيل ، وتطبيق الأجسام المضادة الثانوية المضاءة لساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة ، مع الحفاظ على مكان مظلم. شطف ثلاث مرات أخرى في محلول الغسيل.ضع الـ Aa Countersing في الشريان الأورطي مع DAPI لمدة 10 دقائق، مع الاحتفاظ في مكان مظلم. ثم شطف الشريان الأورطي الملون ثلاث مرات في محلول الغسيل. ضع الشريان الأبهر على زلة غطاء مع سطح التجويف إلى الأسفل ، واحركه ببطء إلى حل تصاعد antifade الذي تم إسقاطه سابقًا على زلة الغطاء.تمتد بلطف الشريان الأورطي للحفاظ على شقة العينة. عكس زلة الغطاء ووضعها على الشريحة الزجاجية. الحرص على تجنب أي فقاعات الهواء بين العينة والزجاج.فحص الشريان الأورطي مع مجهر ليزر المسح confocal. تحليل كثافة الألوان من قنوات مختلفة من المنطقة المطلوبة في صور الوجه en، مع برنامج Image-Pro Plus. تظهر صور تلوين الفلورات المناعية في الوجه للخلايا البطانية الوعائية من الشريان الأبهر الماوس.En المناعة في مواجهة بروتين التصاق الخلايا الوعائية واحد ، والتعبير مع VE-Cadherin كعلامة بطانة ، تظهر تحت أنماط تدفق مختلفة من مناطق مختلفة من الشريان الأبهر الماوس. كما تم عرض DAPI لإظهار نواة الخلية من أجل رؤية أفضل. عند النظر من خلال مداخن Z تحت المجهر، يمكن تمييز خلايا العضلات البطانية والسلسة بسهولة من قبل مورفولوجيا الخلايا الخلوية.نواة الخلية البطانية بيضاوية الشكل، وأكبر من محور الدوران، نواة الخلية العضلية الملساء. كان التعبير عن VCAM-1 أكثر وفرة في المناطق التي تشهد تدفقًا مضطربًا ، عند انحناء أقل من قوس الشريان الأورطي ، مقارنة بالمناطق التي تشهد تدفقًا ثابتًا ، عند انحناء أكبر في قوس الأبهر ، وفي الشريان الأبهر الصدري. هنا يشار إلى المناطق من انحناء أقل من الشريان الأورطي الماوس كمساحات د التدفق، وأكبر انحناء وصدر.مع التعديل الصحيح ، يمكن تطبيق هذه التقنية أيضًا على تحليل نفاذية الأوعية الدموية ، وموقف الجزيئات في الخلية البطانية.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Valvular Endothelial Cells

عزل الخلايا البطانية صمامي

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

زرع الخلايا مباشرة في الكلى من اسماك الزرد الكبار

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

العزلة وتمايز الخلايا إلى خلايا الأوعية الدموية اللحمية بيج / برايت

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Robust 3D DNA FISH Using Directly Labeled Probes

قوية FISH DNA 3D استخدام مجسات إعتبر مباشرة

3D DNA FISH has become a major tool for  analyzing three-dimensional organization of the nucleus, and several variations  of the technique have been ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

عزل خلايا الفئران صمام غشائي

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

العزلة والثقافة الابتدائية من خلايا الفأر الأورطي غشائي

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

المناعي غير المباشر على أقسام المجمدة من الماوس الغدة الثديية

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

أون كشف الوجه من اكسيد النيتريك وفوق الأكسيد في طبقة بطانة الأوعية الدموية من شرايين سليمة

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

A Simple Bioassay for the Evaluation of Vascular Endothelial Growth Factors

والأحيائي بسيط لتقييم العوامل الأوعية الدموية غشائي النمو

The analysis of receptor tyrosine kinases and their interacting ligands involved in vascular biology is often challenging due to the constitutive ...

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

في إعداد الوجه من ماوس سفن الدم

Sections of paraffin embedded tissues are routinely used for studying tissue histology and histopathology. However, it is difficult to determine what the ...