Name: using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly
Uploaded: 2019-08-20T12:30:00
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Diese Studie wurde von der National Natural Science Foundation of China (Grant No. 81670451, 81770430), dem Shanghai Rising-Star Program (Grant No. 17QA1403000) und dem Science Technology Committee der Shanghai Municipal Government (Grant No. 14441903002, 15411963700).

Alle Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit experimentellen Protokollen durchgeführt, die vom Committee on Animal Resources der Shanghai Jiao Tong University genehmigt wurden.
1. Perfusion der Maus aorta
<ol><li>Kurz gesagt, anästhet 12 Wochen alte C57BL/6 Mäuse mit intraperitonealen Injektionen von Natriumpentobarbital (50 mg/kg Körpergewicht). Bestätigen Sie die richtige Anästhesie, indem Sie den Schwanz sanft kneifen. HINWEIS: Wenn keine Bewegung beobachtet wird, ist das Tie...

<ol>
	<li>Gimbrone, M. A., Garcia-Cardena, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Cell+Dysfunction+and+the+Pathobiology+of+Atherosclerosis.">Endothelial Cell Dysfunction and the Pathobiology of Atherosclerosis.</a> Circulation Research. 118 (4), 620-636 (2016).</li><li>Zhou, J., Li, Y. S., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress-initiated+signaling+and+its+regulation+of+endothelial+function.">Shear stress-initiated signaling and its regulation of endothelial function.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 34 (10), 2191-2198 (2014).</li><li>Tarbell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+and+the+endothelial+transport+barrier.">Shear stress and the endothelial transport barrier.</a> Cardiovascular Research. 87 (2), 320-330 (2010).</li><li>Warren, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+production+of+&amp;#34;en+face&amp;#34;+preparations+one+cell+in+thickness.">A method for the production of &amp;#34;en face&amp;#34; preparations one cell in thickness.</a> Journal of Microscopy. 85 (4), 407-413 (1965).</li><li>Azuma, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+En+face+method+is+useful+to+quantitate+endothelial+damage+in+vivo.">A new En face method is useful to quantitate endothelial damage in vivo.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 309 (2), 384-390 (2003).</li><li>Son, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+mechanosensitive+microRNA-712+derived+from+pre-ribosomal+RNA+induces+endothelial+inflammation+and+atherosclerosis.">The atypical mechanosensitive microRNA-712 derived from pre-ribosomal RNA induces endothelial inflammation and atherosclerosis.</a> Nature Communications. 4, 3000 (2013).</li><li>Go, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+flow+enhances+inflammatory+signaling+and+atherogenesis+by+increasing+thioredoxin-1+level+in+endothelial+cell+nuclei.">Disturbed flow enhances inflammatory signaling and atherogenesis by increasing thioredoxin-1 level in endothelial cell nuclei.</a> PLOS ONE. 9 (9), e108346 (2014).</li><li>Kundumani-Sridharan, V., Dyukova, E., Hansen, D. E., Rao, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=12/15-Lipoxygenase+mediates+high-fat+diet-induced+endothelial+tight+junction+disruption+and+monocyte+transmigration:+a+new+role+for+15(S)-hydroxyeicosatetraenoic+acid+in+endothelial+cell+dysfunction.">12/15-Lipoxygenase mediates high-fat diet-induced endothelial tight junction disruption and monocyte transmigration: a new role for 15(S)-hydroxyeicosatetraenoic acid in endothelial cell dysfunction.</a> The Journal of Biological Chemistry. 288 (22), 15830-15842 (2013).</li><li>Liu, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q/TNF-related+protein+1+promotes+endothelial+barrier+dysfunction+under+disturbed+flow.">C1q/TNF-related protein 1 promotes endothelial barrier dysfunction under disturbed flow.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 490 (2), 580-586 (2017).</li><li>Wang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioredoxin+interacting+protein+promotes+endothelial+cell+inflammation+in+response+to+disturbed+flow+by+increasing+leukocyte+adhesion+and+repressing+Kruppel-like+factor+2.">Thioredoxin interacting protein promotes endothelial cell inflammation in response to disturbed flow by increasing leukocyte adhesion and repressing Kruppel-like factor 2.</a> Circulation Research. 110 (4), 560-568 (2012).</li><li>Mitra, S., Deshmukh, A., Sachdeva, R., Lu, J., Mehta, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+low-density+lipoprotein+and+atherosclerosis+implications+in+antioxidant+therapy.">Oxidized low-density lipoprotein and atherosclerosis implications in antioxidant therapy.</a> The American Journal of the Medical Sciences. 342 (2), 135-142 (2011).</li><li>Stancel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+CRP,+Atherogenic+LDL,+and+LOX-1+and+Its+Potential+Role+in+the+Pathogenesis+of+Atherosclerosis.">Interplay between CRP, Atherogenic LDL, and LOX-1 and Its Potential Role in the Pathogenesis of Atherosclerosis.</a> Clinical Chemistry. 62 (2), 320-327 (2016).</li><li>Nerem, R. M., Levesque, M. J., Cornhill, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Endothelial+Morphology+as+an+Indicator+of+the+Pattern+of+Blood+Flow.">Vascular Endothelial Morphology as an Indicator of the Pattern of Blood Flow.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 103 (3), 172-176 (1981).</li></ol>

Das Endothel ist zahlreichen proatherogen Faktoren ausgesetzt, einschließlich Lipiden, Entzündungsmediatoren und Flüssigkeitsscherspannung1,11,12. Die direkte Beobachtung von Endothelzellen vor Ort bietet die besonderen Vorteile, Veränderungen in der Zellmorphologie, interzellulären Knoten und Molekülexpressionsmustern als Reaktion auf die Verletzungsreize zu analysieren.
Frühere Studien haben ...

Die frühen Veränderungen in der Vaskulatur initiieren vor allem das Endothel, das als selektive Barriere zwischen Blut und Gefäßwand mit seinen interzellulären engen Kreuzungskomplexen1fungiert. Erhebliche Beweise deuten auf eine entscheidende Rolle für die mechanischen Auswirkungen des Blutflusses bei der Modulation der Endothelfunktion2hin. Fluidscherspannung, eine Reibungskraft, die durch den Blutfluss erzeugt wird, formt die Endothelzellmorphologie und -funktion differenziell, abhängig von den spezifischen Strömungsparadigmen an verschiedenen Gefäßstellen2,3. Atherosklerotische Läsionen treten bevorzugt an Stellen gestörten Blutflusses (d-Flow), wie Gefäßkrümmungen, Strömungsteiler und Verzweigungspunkte, im Vergleich zu Regionen mit stetigem Fluss (s-Flow), wie dem geraden Segment der Arterie. Daher sollte die direkte Beobachtung der endotheliaalen Morphologie und Molekülexpressionsmuster wichtige Einblicke in die strukturellen und funktionellen Phänotypen von Endothelzellen unter unterschiedlichen Strömungsparadigmen liefern.
Kultivierte Endothelzellen exprimieren möglicherweise nicht den eigentlichen Phänotyp, wie sie es in vivo tun, teilweise aufgrund des Verlusts von Auswirkungen von Fluidscherspannung, umgebenden Zytokinen und Zellzell- oder Zell-Extrazellmatrix-Wechselwirkungen. Um dies zu unterstützen, kann die intakte Endothelzellmonoschicht mit klassischer Immunhistochemie an Querabschnitten untersucht werden. Die endotheliale Monoschicht ist jedoch so dünn und zerbrechlich, dass sie in der Regel nicht eindeutig beobachtet werden kann. En Face Immunohistochemistry wurde verwendet, um die innere Oberfläche des Endothel zu beobachten, ist aber entweder kompliziert oder erratisch in seinen Ergebnissen, weil das Endothel leicht aus dem darunter liegenden Gewebe entfernt wird, oder nur ein Teil der arteriellen Wand von Ratten oder Kaninchen, deren Wände dick sind, istmontiert 4,5.
Mausmodelle haben in vielerlei Hinsicht erhebliche Vorteile gegenüber anderen Tieren. Hier verwenden wir eine modifizierte En-Face-Immunfluoreszenz-Technik, um Endothelzellen des Aortenbogens und der Thoraxaorta in c57BL/6 Maus zu analysieren. Eine solche Technik wurde weit verbreitet, um die endotheliale Pathophysiologie in verschiedenen Strömungsmustern und in der Entwicklung von Arteriosklerose6,7,8,9,10zu studieren. Diese Methode ermöglicht es Wissenschaftlern, die gesamte Oberfläche des Endothels klar zu beobachten und die Expressionsmuster eines bestimmten Proteins in Regionen unter unterschiedlicher Fluidscherspannung zu vergleichen.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:655px;" width="655">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Antifade mountant</td>
			<td style="width:126px;">Servicebio</td>
			<td style="width:134px;">G1401</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F11001-11</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S12003-09</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Dissecting Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F12005-10</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Mciro Spring Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S11001-08</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polyoxyethylene octyl phenyl ether (Triton X-100)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">M143</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polysorbate 20 (Tween 20)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">0777</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VCAM-1 antibody</td>
			<td style="width:126px;">Abcam</td>
			<td style="width:134px;">ab134047</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VE-Cadherin antibody</td>
			<td style="width:126px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:134px;">555289</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 555 labeled anti-rabbit IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-31572</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 488 labeled anti-rat IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-21208</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laser Scanning Microscope&#160;</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td style="width:134px;"></td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly

Aberrante Veränderungen des endotheliaalen Phänotyps und der Morphologie gelten als Erste in der Pathogenese der Arteriosklerose. Die direkte Beobachtung des intakten Endothels liefert wertvolle Informationen zum Verständnis der zellulären und molekularen Ereignisse in den dysfunktionalen Endothelzellen. Hier beschreiben wir eine modifizierte En-Face-Immunfluoreszenz-Färbungstechnik, die es Wissenschaftlern ermöglicht, klare Bilder der intakten endotheliaalen Oberfläche zu erhalten und die Molekülexpressionsmuster vor Ort zu analysieren. Die Methode ist einfach und zuverlässig für die Beobachtung der gesamten endotheliale Monolayer an verschiedenen Stellen der Aorta. Diese Technik kann ein vielversprechendes Werkzeug sein, um die Pathophysiologie der Arteriosklerose zu verstehen, besonders in einem frühen Stadium.

Eine 12 Wochen alte C57BL/6-Maus wurde eingeschläfert und mit normaler Saline mit 40 Einheiten/ml Heparin durchsetzt und dann 4% Paraformaldehyd vorgechillt. Die Mausaorta wurde unter einem Sezierendes Mikroskop (Abbildung 1) ausgesetzt, seziert und längs aufgeschnitten (Abbildung 2). Die Immunfluoreszenzfärbung der vaskulären Endothelzellen wurde wie in Abbildung 3 und Tabelle 1...

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Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly

Hier stellen wir ein Protokoll zur Immunfluoreszenzfärbung vor, um die Endothelzellen der Mausaorta direkt zu beobachten. Diese Technik ist nützlich, wenn der zelluläre und molekulare Phänotyp von Endothelzellen in verschiedenen Strömungsmustern und bei der Entwicklung von Arteriosklerose untersucht wird.

Verwendung von En Face Immunofluoreszenz Färbung zur direkten Beobachtung von vaskulären Endothelzellen

Aberrant changes in endothelial phenotype and morphology are considered to be initial events in the pathogenesis of atherosclerosis. Direct observation of ...

Dieses Protokoll hilft Menschen, die Endothelzellmorphologie und die Expression von Molekülen in Regionen unter unterschiedlicher Fluidscherspannung zu analysieren. Der Hauptvorteil dieser Technik ist, dass sie eine direkte Beurteilung der vaskulären Endothelzellen unter unterschiedlicher Fluidscherspannung ermöglicht. Bei der Durchführung dieses Verfahrens sind die wichtigsten Schritte, frisch zubereitetes Paraformaldehyd zu verwenden und eine gute Perfusion durchzuführen.Beginnen Sie dieses Verfahren mit der Anästhesisierung einer 12 Wochen alten C57BL/6-Maus, wie im Textprotokoll beschrieben. Bestätigen Sie die richtige Anästhesie, indem Sie den Schwanz sanft kneifen. Verkleben Sie die Pfoten der Maus mit Klebeband auf einen Stapel Papiertücher.Halten Sie die Haut der Maus mit Zange, und schneiden Sie die Haut mit einer Schere aus dem Bauch bis zur Oberseite des Thorax. Öffnen Sie die Bauchhöhle, unter dem Brustkorb, mit einer scharfen Schere. Heben Sie das Brustbein mit Dereins, und schneiden Sie die Membran.Schneiden Sie dann den Brustkorb ab, um die Brusthöhle freizulegen. Schneiden Sie die Vena cava knapp über der Leber mit der Schere ab. Druck durchdringt den arteriellen Baum für fünf Minuten, mit vorgekühlter normaler Kochchen mit 40 Einheiten pro Milliliter Heparin, durch den linken Ventrikel, bis Lunge und Leber blass werden.Dann mit vorgekühlten 4%Paraformaldehyd in PBS für vier Minuten durchziehen. Entfernen Sie alle Muskeln, Organe und Fett, bis die Aorta ausgesetzt ist. Platzieren Sie die Maus unter ein Sezierendes Mikroskop.Verwenden Sie zarte Zangen und eine zarte Schere, um die Aorta deutlich unter einem Sezierendes Mikroskop zu belichten und das Bindegewebe entlang der Aorta so sauber wie möglich zu entfernen. Sezieren Sie die thorakale Aorta vom Herzen zum Zöliakiestamm mit einer zarten Schere. Legen Sie die Aorta in eine sechs Zentimeter große Zellkulturschale mit PBS.Schneiden Sie die Aorta längs, zuerst entlang der geringeren Kurve, und verwenden Sie dann die Mikroschere, um die drei Zweige des Aortenbogens, einschließlich der Innomin, linken gemeinsamen Karotis, und der linken subklavischen Arterie entlang der größeren Kurve zu schneiden, bis das gerade Segment erreicht ist. Permeabilisieren Sie die Aorta mit 1%Polyoxyethylenoctylphenylether, in PBS für 10 Minuten. Dann blockieren Sie die Aorta mit 10% normalem Ziegenserum in tris-gepufferter Kochsaline, die 2,5%Polysorbat 20 für eine Stunde bei Raumtemperatur enthält, in einer 12 Well-Zell-Kulturplatte.Als nächstes inkubieren die Aorta in der Sperrpuffer enthält fünf Gramm pro Milliliter Kaninchen Anti-VCAM1, und fünf Gramm pro Milliliter Ratte Anti-VE-Cadherin, über Nacht bei vier Grad Celsius. Nachdem Sie die Probe dreimal mit Waschlösung gespült haben, die fluoreszenzkonjugierten Sekundärantikörper eine Stunde bei Raumtemperatur auftragen und an einem dunklen Ort halten. Spülen Sie noch dreimal in der Waschlösung.Counterstain die Aorta mit DAPI für 10 Minuten, an einem dunklen Ort zu halten. Dann spülen Sie die gefärbte Aorta dreimal in Waschlösung. Legen Sie die Aorta auf einen Deckszettel mit der Lumenoberfläche nach unten, und bewegen Sie sie langsam zu einer Antifade-Montagelösung, die zuvor auf dem Deckelschlupf abgelegt wurde.Dehnen Sie die Aorta vorsichtig, um das Exemplar flach zu halten. Invertieren Sie den Deckelschlupf und legen Sie ihn auf die Glasrutsche. Achten Sie darauf, Luftblasen zwischen der Probe und dem Glas zu vermeiden.Untersuchen Sie die Aorta mit einem laserscannenden Konfokalmikroskop. Analysieren Sie farbintensitäten verschiedener Kanäle aus dem gewünschten Bereich in den En-Face-Bildern mit der Image-Pro Plus-Software. Gezeigt werden Immunfluoreszenz-Färbungsbilder von vaskulären Endothelzellen aus der Mausaorta.Die Immunfluoreszenz des Gefäßzelladhäsionsproteins eins und die Expression mit VE-Cadherin als endothelialem Marker werden unter unterschiedlichen Strömungsmustern aus verschiedenen Regionen der Mausaorta gezeigt. DAPI wurde auch konterkariert, um die Zellkerne für eine bessere Visualisierung zu zeigen. Beim Blick durch die Z-Stacks unter dem Mikroskop lassen sich die endotheliale und glatten Muskelzellen leicht durch ihre Zellkernmorphologie unterscheiden.Die endotheliale Zellkerne sind oval geformt und größer als die spindelförmigen, glatten Muskelzellkerne. Der Ausdruck von VCAM-1 war häufiger in Regionen unter gestörtem Fluss, bei geringerer Krümmung des Aortabogens, verglichen mit Regionen unter stetigem Fluss, bei größerer Krümmung des Aortabogens und an der Brustaorta. Hier werden Bereiche mit geringerer Krümmung einer Mausaorta als d-Flow-Bereiche und die größere Krümmung und Brust angezeigt.Mit der richtigen Modifikation kann diese Technik auch auf die Analyse der Gefäßdurchlässigkeit und der Position von Makromolekülen in der Endothelzellintima angewendet werden.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Valvular Endothelial Cells

Isolierung von Valvular Endothelzellen

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Forschung

Biologie

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Die Transplantation von Zellen direkt in die Niere von Adult Zebrafisch

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

Isolation und Differenzierung von Stroma-Vascular Cells Beige / Brite Cells

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Robust 3D DNA FISH Using Directly Labeled Probes

Robust 3D DNA FISH Mit Direkt markierten Sonden

3D DNA FISH has become a major tool for  analyzing three-dimensional organization of the nucleus, and several variations  of the technique have been ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

Isolierung von murinen Ventil Endothelzellen

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

Isolation und Primärkultur von Maus Aortic Endothelial Cells

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Die indirekte Immunfluoreszenz auf Gefrierschnitte von Mäusemilchdrüse

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Gesichtserkennung von Stickstoffmonoxid und Superoxid in Endothelschicht Intact Arterien

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

A Simple Bioassay for the Evaluation of Vascular Endothelial Growth Factors

Eine einfache Bioassay für die Beurteilung von Vascular Endothelial Growth Factors

The analysis of receptor tyrosine kinases and their interacting ligands involved in vascular biology is often challenging due to the constitutive ...

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

En Face Vorbereitung der Maus Blutgefäße

Sections of paraffin embedded tissues are routinely used for studying tissue histology and histopathology. However, it is difficult to determine what the ...