Name: using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly
Uploaded: 2019-08-20T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly at JoVE.com

מחקר זה היה נתמך על ידי הקרן הלאומית המדע הטבעי של סין (גרנט No. 81670451, 81770430), התוכנית העולה סטאר של שנגחאי (גרנט 171403000), והוועדה לטכנולוגיה מדע של הממשלה העירונית של שנגחאי (גרנט לא. 14441903002, 15411963700).

כל ניסויי החיות נערכו בהתאם לפרוטוקולים הניסיוניים שאושרו על-ידי הוועדה למשאבי בעלי חיים של אוניברסיטת ג'יאו טונג שאנגחאי.
1. perfusion של העורקים של העכבר
<ol><li>בקצרה, להפחית 12-שבוע בן C57BL/6 עכברים עם זריקות תוך הצפק של נתרן פנטוברביטל (50 מ"ג/ק"ג משקל גוף). אשר בעדינות את הזנב מההרדמ...

<ol>
	<li>Gimbrone, M. A., Garcia-Cardena, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+Cell+Dysfunction+and+the+Pathobiology+of+Atherosclerosis.">Endothelial Cell Dysfunction and the Pathobiology of Atherosclerosis.</a> Circulation Research. 118 (4), 620-636 (2016).</li><li>Zhou, J., Li, Y. S., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress-initiated+signaling+and+its+regulation+of+endothelial+function.">Shear stress-initiated signaling and its regulation of endothelial function.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 34 (10), 2191-2198 (2014).</li><li>Tarbell, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+and+the+endothelial+transport+barrier.">Shear stress and the endothelial transport barrier.</a> Cardiovascular Research. 87 (2), 320-330 (2010).</li><li>Warren, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+the+production+of+&amp;#34;en+face&amp;#34;+preparations+one+cell+in+thickness.">A method for the production of &amp;#34;en face&amp;#34; preparations one cell in thickness.</a> Journal of Microscopy. 85 (4), 407-413 (1965).</li><li>Azuma, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+En+face+method+is+useful+to+quantitate+endothelial+damage+in+vivo.">A new En face method is useful to quantitate endothelial damage in vivo.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 309 (2), 384-390 (2003).</li><li>Son, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+atypical+mechanosensitive+microRNA-712+derived+from+pre-ribosomal+RNA+induces+endothelial+inflammation+and+atherosclerosis.">The atypical mechanosensitive microRNA-712 derived from pre-ribosomal RNA induces endothelial inflammation and atherosclerosis.</a> Nature Communications. 4, 3000 (2013).</li><li>Go, Y. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+flow+enhances+inflammatory+signaling+and+atherogenesis+by+increasing+thioredoxin-1+level+in+endothelial+cell+nuclei.">Disturbed flow enhances inflammatory signaling and atherogenesis by increasing thioredoxin-1 level in endothelial cell nuclei.</a> PLOS ONE. 9 (9), e108346 (2014).</li><li>Kundumani-Sridharan, V., Dyukova, E., Hansen, D. E., Rao, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=12/15-Lipoxygenase+mediates+high-fat+diet-induced+endothelial+tight+junction+disruption+and+monocyte+transmigration:+a+new+role+for+15(S)-hydroxyeicosatetraenoic+acid+in+endothelial+cell+dysfunction.">12/15-Lipoxygenase mediates high-fat diet-induced endothelial tight junction disruption and monocyte transmigration: a new role for 15(S)-hydroxyeicosatetraenoic acid in endothelial cell dysfunction.</a> The Journal of Biological Chemistry. 288 (22), 15830-15842 (2013).</li><li>Liu, Z. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=C1q/TNF-related+protein+1+promotes+endothelial+barrier+dysfunction+under+disturbed+flow.">C1q/TNF-related protein 1 promotes endothelial barrier dysfunction under disturbed flow.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 490 (2), 580-586 (2017).</li><li>Wang, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioredoxin+interacting+protein+promotes+endothelial+cell+inflammation+in+response+to+disturbed+flow+by+increasing+leukocyte+adhesion+and+repressing+Kruppel-like+factor+2.">Thioredoxin interacting protein promotes endothelial cell inflammation in response to disturbed flow by increasing leukocyte adhesion and repressing Kruppel-like factor 2.</a> Circulation Research. 110 (4), 560-568 (2012).</li><li>Mitra, S., Deshmukh, A., Sachdeva, R., Lu, J., Mehta, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxidized+low-density+lipoprotein+and+atherosclerosis+implications+in+antioxidant+therapy.">Oxidized low-density lipoprotein and atherosclerosis implications in antioxidant therapy.</a> The American Journal of the Medical Sciences. 342 (2), 135-142 (2011).</li><li>Stancel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interplay+between+CRP,+Atherogenic+LDL,+and+LOX-1+and+Its+Potential+Role+in+the+Pathogenesis+of+Atherosclerosis.">Interplay between CRP, Atherogenic LDL, and LOX-1 and Its Potential Role in the Pathogenesis of Atherosclerosis.</a> Clinical Chemistry. 62 (2), 320-327 (2016).</li><li>Nerem, R. M., Levesque, M. J., Cornhill, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Endothelial+Morphology+as+an+Indicator+of+the+Pattern+of+Blood+Flow.">Vascular Endothelial Morphology as an Indicator of the Pattern of Blood Flow.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 103 (3), 172-176 (1981).</li></ol>

האנדותל חשוף לגורמים רבים, הכוללים שומנים, מגשרים דלקתיים ונוזלים מדגישים1,11,12. התבוננות ישירה בתאי האנדותל באתרו מספקת את היתרונות המיוחדים לניתוח שינויים במבנה התאים, הצמתים הבינתאיים ודפוסי ביטוי המולקולה בתגובה לגירוי הפציעה.
<p clas...

השינויים המוקדמים בכלי הקיבול מפעילים בעיקר את האנדותל, המתפקד כמכשול סלקטיבי בין הדם לקיר הכלי עם הjunctional מתחמים1. ראיות משמעותיות מצביעות על תפקיד קריטי עבור ההשפעות המכאניות של זרימת הדם בפונקציה אנדותל מודולאל2. נוזל הטיית מתח, כוח מתפורר שנוצר על ידי זרימת הדם, צורות דיפרנציאלי של תא מורפולוגיה ותפקוד, בהתאם לתבניות הזרימה הספציפיות באתרי כלי דם שונים2,3. נגעים טרשת עורקים המועדפת מתרחשים באתרים של זרימת דם מופרעת (d-זרימה), כגון כלי עקמומיות, מפרידי זרימה, נקודות הסתעפות, לעומת אזורים של זרימה יציבה (s-flow), כגון קטע ישר של העורק. לפיכך, התבוננות ישירה בדפוסי הביטוי ובביטויים של המולקולה צריכה לספק תובנות חשובות לפנוטיפים הקונסטרוקטיבי והפונקציונליים של תאי האנדותל באמצעות תבניות זרימה משתנות.
תאים אנדותל מתורבת לא יכול לבטא את הפנוטיפים בפועל כפי שהם עושים ב vivo בחלקו עקב אובדן ההשפעה של מתח להטות את הנוזלים, ציטוקינים המקיפים, תא תא או אינטראקציות תא מטריצה. כדי לסייע בכך, ניתן לחקור את המונאולייר השלם של תא האנדותל בסעיפים רוחבי באמצעות אימונוהיסטוכימיה קלאסית. עם זאת, מונאולייר האנדותל הוא כה דק ושברירי שבדרך כלל לא ניתן להבחין בו בבהירות. En הפנים אימונוהיסטוכימיה שימש להתבונן במשטח הפנימי של האנדותל אבל הוא מסובך או בלתי יציב בתוצאותיה, כי האנדותל הוא הסיר בקלות מן הרקמה הבסיסית, או רק חלק של קיר העורקים של חולדות או ארנבים, הקירות שלהם עבים, מותקן4,5.
לדגמי עכבר יש יתרונות ניכרים על פני בעלי חיים אחרים במובנים רבים. כאן, אנו מעסיקים שונה en הפנים הטכניקה החיסונית לנתח את תאי האנדותל של קשת אבי העורקים ואת בית האבי החזה ב C57BL/6 העכבר. טכניקה כזאת שימש רבות כדי לחקור את האנדותל הפתופסולוגיה בדפוסי זרימה שונים ובפיתוח של טרשת עורקים6,7,8,9,10. שיטה זו מאפשרת למדענים להתבונן בכל פני השטח של האנדותל באופן ברור ולהשוות את דפוסי הביטוי של חלבון מסוים באזורים מתחת למתחים שונים של הטיה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:655px;" width="655">
	<tbody>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Antifade mountant</td>
			<td style="width:126px;">Servicebio</td>
			<td style="width:134px;">G1401</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F11001-11</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Delicate Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S12003-09</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Dissecting Forceps</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">F12005-10</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Mciro Spring Scissors</td>
			<td style="width:126px;">RWD Life Science</td>
			<td style="width:134px;">S11001-08</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polyoxyethylene octyl phenyl ether (Triton X-100)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">M143</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Polysorbate 20 (Tween 20)</td>
			<td style="width:126px;">Amresco</td>
			<td style="width:134px;">0777</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VCAM-1 antibody</td>
			<td style="width:126px;">Abcam</td>
			<td style="width:134px;">ab134047</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">VE-Cadherin antibody</td>
			<td style="width:126px;">BD Biosciences</td>
			<td style="width:134px;">555289</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 555 labeled anti-rabbit IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-31572</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:223px;">Alexa Fluor 488 labeled anti-rat IgG</td>
			<td style="width:126px;">invitrogen</td>
			<td style="width:134px;">A-21208</td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Laser Scanning Microscope&#160;</td>
			<td>Carl Zeiss</td>
			<td style="width:134px;"></td>
			<td style="width:174px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using en face immunofluorescence staining to observe vascular endothelial cells directly

שינויים משתנים בעזרת המבנה האנדותל והורפולוגיה נחשבים לאירועים ראשוניים בפתוגנזה של טרשת עורקים. התבוננות ישירה של האנדותל ללא שינוי תספק מידע רב ערך להבנת האירועים הסלולאריים והמולקולריים בתאי האנדותל הלקוי. כאן, אנו מתארים שונה en הפנים אימונוofor, מכתים הטכניקה המאפשרת למדענים לקבל תמונות ברורות של משטח האנדותל שלמים ולנתח את דפוסי ביטוי המולקולה באתרו. השיטה היא פשוטה ואמינה להתבוננות במערך האנדותל השלמה באתרים שונים של העורקים. טכניקה זו עשויה להיות כלי מבטיח להבנת הפתופסולוגיה של טרשת עורקים, במיוחד בשלב מוקדם.

העכבר בן 12 שבועות C57BL/6 מורדמים ומכיל עם תמיסת מלח רגיל המכיל 40 יחידות/mL הפארין ולאחר מכן, מקורר 4% פאראפורמלדהיד. העורקים של העכבר נחשף תחת מיקרוסקופ מבתר (איור 1), גזור, גזור longitudinally פתוח (איור 2). En הפנים אימונוofor, כתמים של התאים כלי הדם האנדות...

Watch this Scientific Journal Video about Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly at JoVE.com

Using En Face Immunofluorescence Staining to Observe Vascular Endothelial Cells Directly

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לצביעת התאים. האנדותל של בית העורקים של העכבר ישירות טכניקה זו שימושית כשאתה לומד את הפנוטיפים הסלולאריים והמולקולריים של תאי האנדותל בדפוסי זרימה שונים ובפיתוח טרשת עורקים.

שימוש בפני הפנים הללו Immunofluorescence כתמים כדי להתבונן בתאי כלי דם אנדותל ישירות

Aberrant changes in endothelial phenotype and morphology are considered to be initial events in the pathogenesis of atherosclerosis. Direct observation of ...

פרוטוקול זה מסייע לאנשים לנתח מורפולוגיה של תאי אנדותל, ואת הביטוי של מולקולות באזורים, תחת לחץ נוזלי שונה. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא שהיא מספקת הערכה ישירה של תאי אנדותל כלי דם תחת לחץ נוזלי שונה. בעת ביצוע הליך זה, צעדים מרכזיים הם להשתמש paraformaldehyde מוכן טרי ולבצע זלבול טוב.התחל הליך זה עם הרדמה של עכבר C57BL/6 בן 12 שבועות, כמתואר בפרוטוקול הטקסט. אשר הרדמה נכונה על ידי צביטה עדין של הזנב. תדביק את כפות העכבר לערימה של מגבות נייר, עם סרט הדבקה.להחזיק את העור של העכבר עם מעצורים, לחתוך את העור עם זוג מספריים מהבטן לראש בית החזה. פתח את חלל הבטן, מתחת לצלעות, עם זוג חד של מספריים. להרים את עצם החזה עם מדפים, לחתוך את הסרעפת.ואז לחתוך את בית החזה כדי לחשוף את חלל בית החזה. חותכים את הנבוב ממש מעל הכבד עם מספריים. הלחץ מפזר את עץ העורקים במשך חמש דקות, עם מלוחים רגילים מצוננים מראש המכילים 40 יחידות לכל הפרין מיליליטר, דרך החדר השמאלי, עד שהריאות והכבד הופכים חיוורים.לאחר מכן התבלבלו עם פרפורמלדהיד מקורר מראש של 4% ב-PBS במשך ארבע דקות. הסר את כל השרירים, האיברים והשומן, עד שהתספורת נחשפת. מקם את העכבר תחת מיקרוסקופ לנתח.השתמש מדפים עדינים זוג מספריים עדינים לחשוף את האאורטה בבירור תחת מיקרוסקופ ניתוח, ולהסיר את רקמת החיבור לאורך בית הדם, בצורה נקייה ככל האפשר. ניתחו את בית החזה מהלב לתא המטען הצליאק עם זוג מספריים עדינים. מניחים את בית הישוריים לתוך צלחת תרבות תאים של שישה סנטימטרים, עם PBS.חותכים את אב העורקים לאורך זמן, תחילה לאורך העקומה הפחותה, ולאחר מכן להשתמש microscissors לחתוך לפתוח את שלושת הענפים של קשת העורקים, כולל innominate, העורק התת-תת-חיים השמאלי לאורך העקומה הגדולה יותר עד הקטע הישר הוא נפגש. Permeabilize אבי האוזן עם 1%פוליוקסיאתילן אוקטיל פניל אתר, ב PBS במשך 10 דקות. לאחר מכן חסום את אבי הישבן עם סרום עיזים רגיל של 10% בתמיסת מלח עם חיץ טריס המכיל 2.5% פוליסורבט 20 למשך שעה בטמפרטורת החדר, בצלחת תרבות תאים של 12 בארות.הדגירה הבאה של בית ההארתא במאגר החסימה המכילה חמישה גרם לארנב מיליליטר נגד VCAM1, וחמישה גרם לחולדה מיליליטר נגד VE-Cadherin, לילה בארבע מעלות צלזיוס. לאחר שטיפה מדגם שלוש פעמים עם פתרון כביסה, להחיל את הפלואורסצנטיות נדנוגדנים משניים במשך שעה אחת בטמפרטורת החדר, שמירה במקום חשוך. יש לשטוף עוד שלוש פעמים בתס הכביסה.יש לנטרל את בית השחי עם DAPI למשך 10 דקות, תוך שמירה על מקום חשוך. לאחר מכן שטפו את בית הדם המוכתם שלוש פעמים בתספורת הכביסה. מניחים את העורקים על פתק כיסוי עם משטח lumenal כלפי מטה, ולהזיז אותו לאט כדי פתרון הרכבה antifade כי כבר ירד בעבר על החלקת הכיסוי.בעדינות למתוח את בית ההאורת כדי לשמור על הדגימה שטוחה. הפוך את החלקת המכסה והניח אותה על מגלשת הזכוכית. יש לדאוג להימנע בועות אוויר בין הדגימה לבין הזכוכית.בחן את בית ההאורטה באמצעות מיקרוסקופ קונפוקל סריקת לייזר. נתח את התעצמות הצבעים בערוצים שונים מהאזור הרצוי בתמונות הפנים en, באמצעות תוכנת Image-Pro Plus. En פנים immunofluorescence הכתמת תמונות של תאי אנדותל כלי הדם מאוסעת העכבר מוצגים.En immunofluorescence של חלבון הידבקות בתאי כלי הדם אחד, והבעה עם VE-Cadherin כסמן אנדותל, מוצגים תחת דפוסי זרימה משתנים מאזורים שונים של aorta העכבר. DAPI היה גם נגדי כדי להראות את גרעיני התא עבור הדמיה טובה יותר. כאשר מסתכלים דרך ערימות Z מתחת למיקרוסקופ, תאי השריר אנדותל וחלק ניתן להבדיל בקלות על ידי מורפולוגיה גרעיני התא שלהם.גרעיני התא ה אנדותל הם בצורת אליפסה, וגדול יותר מאשר ציר בצורת, חלקה תא שריר גרעינים. הביטוי של VCAM-1 היה שופע יותר באזורים תחת זרימה מופרעת, עקמומיות פחותה של קשת בית החזה, בהשוואה לאזורים תחת זרימה יציבה, עקמומיות גדולה יותר של קשת בית החזה, ובאב המעצורים בבית החזה. כאן אזורים של עקמומיות פחותה של aorta העכבר מסומנים כמו אזורי d-זרימה, ואת עקמומיות בית החזה גדול יותר.עם השינוי הנכון, טכניקה זו יכולה להיות מיושמת גם על ניתוח של חדרות כלי הדם, ואת המיקום של macromolecules ב האינטימה התא אנדותל.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Valvular Endothelial Cells

בידוד של תאים אנדותל valvular

Heart valves are solely responsible for maintaining unidirectional blood flow through the cardiovascular system.  These thin, fibrous tissues are ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

השתלה של תאים ישירות לתוך הכליה של דג הזברה למבוגרים

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Isolation and Differentiation of Stromal Vascular Cells to Beige/Brite Cells

בידוד והתמיינות של תאי כלי דם לתאי סטרומה בז&#39;ים / Brite

Brown adipocytes have the ability to uncouple the  respiratory chain in mitochondria and dissipate chemical energy as heat.  Development of UCP1-positive ...

Robust 3D DNA FISH Using Directly Labeled Probes

דגי ה-DNA 3D חזקים באמצעות בדיקות שכותרתו ישירות

3D DNA FISH has become a major tool for  analyzing three-dimensional organization of the nucleus, and several variations  of the technique have been ...

Isolation of Murine Valve Endothelial Cells

בידוד של תאי Murine Valve האנדותל

Normal valve structures consist of stratified layers of specialized extracellular matrix (ECM) interspersed with valve interstitial cells (VICs) and ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

בידוד והתרבות ראשית של לתאי אנדותל עכבר אב העורקים

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Immunofluorescence עקיף על סעיפים קפואים של עכבר בלוטת החלב

Indirect immunofluorescence is used to detect and locate proteins of interest in a tissue. The protocol presented here describes a complete and simple ...

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

En Face Detection of Nitric Oxide and Superoxide in Endothelial Layer of Intact Arteries

צמודים זיהוי פנים של Nitric Oxide ו Superoxide ב שכבת האנדותל של העורקים Intact

Endothelium-derived nitric oxide (NO) produced from endothelial NO-synthase (eNOS) is one of the most important vasoprotective molecules in cardiovascular ...

A Simple Bioassay for the Evaluation of Vascular Endothelial Growth Factors

מבדק פשוט עבור הערכת גורמי הגדילה של אנדותל כלי דם

The analysis of receptor tyrosine kinases and their interacting ligands involved in vascular biology is often challenging due to the constitutive ...

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

En Face Preparation of Mouse Blood Vessels

הכנת פנים של כלי דם עכבר

Sections of paraffin embedded tissues are routinely used for studying tissue histology and histopathology. However, it is difficult to determine what the ...