Name: visualizing lymph node structure and cellular localization using ex-vivo confocal microscopy
Uploaded: 2019-08-09T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af NIH (R01 AI43458 til H.L.W.).

Protokollen blev godkendt af den stående Komité for dyr på Harvard Medical School og Brigham and Women's Hospital, protokol 2016N000230.
1. mus, der anvendes til eksperimentet
<ol><li>Brug 8-ugers gamle mandlige og hunmus på B6-baggrund til administration af antistof blandingen.</li>
	<li>Brug CX3CR1Gfp/WTCCR2RFP/WT -mus til at afgøre, om ex vivo-hele LN-billeddannelse også kan anvendes på reporter-mus uden at administrere antistofmix samt undersøge tilstedevær...

<ol>
	<li>Willard-Mack, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+structure,+function,+and+histology+of+lymph+nodes.">Normal structure, function, and histology of lymph nodes.</a> Toxicologic Pathology. 34, 409-424 (2006).</li><li>Tas, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+antibody+affinity+maturation+in+germinal+centers.">Visualizing antibody affinity maturation in germinal centers.</a> Science. 351, 1048-1054 (2016).</li><li>David, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+Mass+Cytometry+and+Imaging+Analysis+Reveals+Origin,+Location,+and+Functional+Repopulation+of+Liver+Myeloid+Cells+in+Mice.">Combination of Mass Cytometry and Imaging Analysis Reveals Origin, Location, and Functional Repopulation of Liver Myeloid Cells in Mice.</a> Gastroenterology. 151, 1176-1191 (2016).</li><li>Rezende, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=gammadelta+T+cells+control+humoral+immune+response+by+inducing+T+follicular+helper+cell+differentiation.">gammadelta T cells control humoral immune response by inducing T follicular helper cell differentiation.</a> Nature Communications. 9, 3151 (2018).</li><li>Nakagaki, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+triple-fluorescent+mouse+strain+allows+a+dynamic+and+spatial+visualization+of+different+liver+phagocytes+in+vivo.">Generation of a triple-fluorescent mouse strain allows a dynamic and spatial visualization of different liver phagocytes in vivo.</a> Anais da Academia Brasileira de Ciencias. 91 (suppl 1), e20170317 (2019).</li><li>Ajami, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+mass+cytometry+reveals+distinct+populations+of+brain+myeloid+cells+in+mouse+neuroinflammation+and+neurodegeneration+models.">Single-cell mass cytometry reveals distinct populations of brain myeloid cells in mouse neuroinflammation and neurodegeneration models.</a> Nature Neuroscience. 21, 541-551 (2018).</li><li>Becher, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-dimensional+analysis+of+the+murine+myeloid+cell+system.">High-dimensional analysis of the murine myeloid cell system.</a> Nature Immunology. 15, 1181-1189 (2014).</li><li>McElroy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+LYVE-1+antibody+to+image+dynamically+lymphatic+trafficking+of+cancer+cells+in+vivo.">Fluorescent LYVE-1 antibody to image dynamically lymphatic trafficking of cancer cells in vivo.</a> Journal of Surgical Research. 151, 68-73 (2009).</li><li>Gerner, M. Y., Casey, K. A., Kastenmuller, W., Germain, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+and+antigen+dispersal+landscapes+regulate+T+cell+immunity.">Dendritic cell and antigen dispersal landscapes regulate T cell immunity.</a> The Journal of Experimental Medicine. 214, 3105-3122 (2017).</li><li>Hauser, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+germinal-center+B+cell+migration+in+vivo+reveals+predominant+intrazonal+circulation+patterns.">Definition of germinal-center B cell migration in vivo reveals predominant intrazonal circulation patterns.</a> Immunity. 26, 655-667 (2007).</li><li>Allen, C. D., Okada, T., Tang, H. L., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+germinal+center+selection+events+during+affinity+maturation.">Imaging of germinal center selection events during affinity maturation.</a> Science. 315, 528-531 (2007).</li><li>Arnon, T. I., Horton, R. M., Grigorova, I. L., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+splenic+marginal+zone+B-cell+shuttling+and+follicular+B-cell+egress.">Visualization of splenic marginal zone B-cell shuttling and follicular B-cell egress.</a> Nature. 493, 684-688 (2013).</li><li>Sipkins, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+specialized+bone+marrow+endothelial+microdomains+for+tumour+engraftment.">In vivo imaging of specialized bone marrow endothelial microdomains for tumour engraftment.</a> Nature. 435, 969-973 (2005).</li><li>Cinamon, G., Zachariah, M. A., Lam, O. M., Foss, F. W., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+shuttling+of+marginal+zone+B+cells+facilitates+antigen+transport.">Follicular shuttling of marginal zone B cells facilitates antigen transport.</a> Nature Immunology. 9, 54-62 (2008).</li><li>Pereira, J. P., An, J., Xu, Y., Huang, Y., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannabinoid+receptor+2+mediates+the+retention+of+immature+B+cells+in+bone+marrow+sinusoids.">Cannabinoid receptor 2 mediates the retention of immature B cells in bone marrow sinusoids.</a> Nature Immunology. 10, 403-411 (2009).</li><li>Nakagaki, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+and+metabolic+shifts+during+neonatal+development+reprogram+liver+identity+and+function.">Immune and metabolic shifts during neonatal development reprogram liver identity and function.</a> Journal of Hepatology. (6), 1294-1307 (2018).</li><li>Wang, H., La Russa, M., Qi, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR/Cas9+in+Genome+Editing+and+Beyond.">CRISPR/Cas9 in Genome Editing and Beyond.</a> Annual Review of Biochemistry. 85, 227-264 (2016).</li><li>Roozendaal, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conduits+mediate+transport+of+low-molecular-weight+antigen+to+lymph+node+follicles.">Conduits mediate transport of low-molecular-weight antigen to lymph node follicles.</a> Immunity. 30, 264-276 (2009).</li><li>Sarder, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-near-infrared+multiphoton+microscopy+interrogates+intact+tissues+at+deeper+imaging+depths+than+conventional+single-+and+two-photon+near-infrared+excitation+microscopes.">All-near-infrared multiphoton microscopy interrogates intact tissues at deeper imaging depths than conventional single- and two-photon near-infrared excitation microscopes.</a> Journal of Biomedical Optics. 18, 106012 (2013).</li></ol>

Kombinationen af billeddannelse med andre teknikker, herunder molekylær biologi og højdimensionel immunophenotyping, har forbedret vores evne til at undersøge immunceller i deres oprindelige kontekst. Mens andre tilgange kan kræve vævs fordøjelse og celle isolation – hvilket kan føre til tab af vævs integritet – giver brugen af in vivo-eller ex vivo-billeddannelse en stor fordel i at undersøge forskellige celle undertyper på en geografisk måde3 , 16</sup...

Lymfeknuder (LNs) er ovoid-formede organer bredt til stede i hele kroppen med den afgørende funktion af bridging den medfødte og adaptive immunrespons. LNs filtrerer lymfeknuder for at identificere fremmede partikler og kræftceller til at montere en immunrespons mod dem1. Antigen præsenterer celler (APCs), T-celler og B-celler arbejde sammen for at generere antigen-specifikke antistoffer (humoral immunitet) og cytotoksiske lymfocytter (cellulære immunitet) for at eliminere fremmede partikler og kræftceller2. Således, forstå dynamikken i immuncellerne til stede i lymfesystemet vil have vigtige konsekvenser for vaccine udvikling og kræft immunterapi.
Fremkomsten af kraftfulde mikroskoper-herunder nye konfokale og super resolution mikroskoper-har tilladt en ekstraordinær avancement i forståelsen af, hvordan forskellige immuncelle populationer opfører sig i deres oprindelige miljø3. Det er nu muligt at afbilde flere samtidige celle-undertyper ved hjælp af en kombination af sonder med genetisk modificerede mus, som udtrykker fluorescerende proteiner under kontrol af specifikke mål4,5. Faktisk, høje dimensionelle teknikker, herunder massecytometri og multi-parametrisk flow analyse har været afgørende for at udvide vores viden om forskellige immuncelle opdeling og funktionalitet i sundhed og sygdom6, 7. men for at forberede prøverne til disse teknikker, væv har brug for fordøjelsen og celler adskilles fra deres naturlige miljø, der skal analyseres i celle suspensioner. For at overgå disse begrænsninger og tillade en bedre oversættelse i biologi, er målet med den foreslåede protokol at anvende en enkel metode til at afbilde ex vivo hele lymfeknuder ved hjælp af lager konfokale mikroskoper med fordel for forbedret hastighed, vævs og cellernes levedygtighed i forhold til den konventionelle immunofluorescens farvning. Ved at bruge denne fremgangsmåde, vi var i stand til at vise, at mus mangelfuld for γδ T celler, en under type af T lymfocyt involveret i vært tidligt forsvar mod patogener4, har kompromitteret follikler og T celle zoner i forhold til vildtype mus. Disse fund gjorde det muligt for os at forfølge en undersøgelse, hvor vi påviste, at γδ T-celler spiller en afgørende rolle i homøostase af lymfoide organer og humorale immunrespons4. Endvidere, denne protokol giver en fysiologisk vej for sonder og antistoffer til at nå lymfeknude, da de administreres subkutant og sprede gennem vævs lymfe kredsløb, bygger på tidligere rapporter, der anvendes in situ mærkning med antistoffer til at visualisere lymfe-associerede strukturer8,9, avlsmateriale Center Dynamics10,11,12, og mål let tilgængelige for blodgennemstrømningen13 ,14,15.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BV421 anti-CD4</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>562891</td>
			<td>GK1.5; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 anti-CD19</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>564509</td>
			<td>1D3; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 Rat IgG2a, &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>564418</td>
			<td>R35-95; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV421 Mouse IgG2b, K Isotype Control</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>562603</td>
			<td>R35-38 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellview culture dish</td>
			<td>Greiner-Bio</td>
			<td>627861</td>
			<td>35x10 mm with glass bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>-</td>
			<td>Insulin U-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech Science Brand</td>
			<td>7557</td>
			<td>size 21 x 20 cm / 100 sheets per box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery curved forceps</td>
			<td>WEP Surgical Instruments</td>
			<td>custom made</td>
			<td>12.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery curved scissors</td>
			<td>WEP Surgical Instruments</td>
			<td>custom made</td>
			<td>11.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>-</td>
			<td>30 gauge &#215; &#189; inch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Te + A1R confocal head</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>-</td>
			<td>loaded with main 4 laser lines (405, 488, 543 and 647 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE anti-F4/80</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>565410</td>
			<td>T45-2342; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Rat IgG2a, &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>553930</td>
			<td>R35-95; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM 710 confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>-</td>
			<td>loaded with main 4 laser lines (405, 488, 543 and 647 nm)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualizing lymph node structure and cellular localization using ex-vivo confocal microscopy

Lymfeknuder (LNs) er organer spredt i kroppen, hvor den medfødte immunrespons kan forbinde med den adaptive immunitet. Faktisk er LNS strategisk indskudt i vejen for lymfe skibene, så intim kontakt af vævs antigener med alle residente immunceller i LN. Således, forstå den cellulære sammensætning, fordeling, placering og interaktion ved hjælp af ex vivo hele LN Imaging vil tilføje til viden om, hvordan kroppen koordinerer lokale og systemiske immunrespons. Denne protokol viser en ex vivo-billedbehandlings strategi efter en in vivo-administration af fluorescerende-mærkede antistoffer, der muliggør en meget reproducerbar og let-at-udføre metodologi ved hjælp af konventionelle konfokale mikroskoper og lager reagenser. Ved subkutan injektion af antistoffer er det muligt at mærke forskellige cellepopulationer i dræne LNs uden at påvirke vævsstrukturer, der potentielt kan blive beskadiget af en konventionel immunofluorescens mikroskopi teknik.

Dette manuskript viser teknikker til at fjerne lyske og popliteale lymfeknuder uden at beskadige deres struktur efter injektion af fluorescerende-mærkede antistoffer til at plette specifikke cellepopulationer i disse organer (figur 1 og figur 2 ).
Den kraftfulde kombination af immunolabeling af LN celler med BV421 anti-CD4 og BB515 anti-CD19 og konfokale Imaging analyse defineret lokalisering af T-celler (CD4 +) og B-celler (CD19 +) ...

Watch this Scientific Journal Video about Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy at JoVE.com

Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy

Visualisering af lymfeknude struktur og cellulær lokalisering ved hjælp af ex vivo-Konfokal mikroskopi

Denne protokol beskriver en teknik til at afbilde forskellige cellepopulationer i dræne lymfeknuder uden ændringer i organ strukturen.

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are ...

Denne reproducerbare og let at udføre protokollen bruger en ex-vivo lymfeknude billeddannelse strategi til at spore dræning af in-vivo administreret fluorescerende mærkede antistoffer til lokale sekundære lymfoide organer. Demonstration af denne teknik giver mulighed for en specifik visualisering af proceduren, hvilket kan lette en vellykket udførelse af protokollen. Dette er en meget enkel og ligetil teknik, der kan udføres af alle.Det eneste udfordrende aspekt er musehåndteringen, som kræver en vis træning. Denne teknik har fordel af en forbedret hastighed væv anstrengelse konservering og celle levedygtighed i forhold til de konventionelle fluorescerende farvning metoder. Uddannelsen af proceduren ville være Bruna Tatematsu, en tekniker fra laboratoriet.Fortyndet antistoffer af interesse, konjugeret til de relevante fluorophores, i 100 mikroliter af PBS for inguinal lymfeknude billeddannelse, eller 50 mikroliter af PBS for popliteal lymfeknude billeddannelse. For inguinal lymfeknude billeddannelse, belastning 100 mikroliters af antistof cocktail i en milliliter insulin sprøjte, udstyret med en 30 gauge ved halv tomme nål, og subkutant injicere antistoffer i inderlåret af den eksperimentelle mus. For popliteal lymfeknude billeddannelse, injicere 50 mikroliter af antistof cocktail subkutant i en pote pad af forsøgsdyret.Derefter returnere dyret til sit hjem boks. For inguinal dræning lymfeknude høst, efter at have ventet mindst tre timer fra injektionen, immobilisere musen på akryl fase med tape og anvende mineralsk olie til abdominal hud. Brug standard mikrokirurgi saks og mikrokirurgi buede kraftaffilt til at gøre en midline hud snit i maven fra pubis til fremmedfjendske proces, og adskille abdominal muskulatur fra huden.Gør vandret hud indsnit i toppen og bunden af den lodrette snit linje, for at skabe hud flapper på siden af injektion, og trække huden til at visualisere lymfeknuden. Fastgør huden flap til akryl plade, og bruge de virkræfter til at fjerne den gennemskinnelige, normalt bilobular sfæriske inguinal dræning lymfeknude. For popliteal dræning lymfeknude høst, mindst 12 timer efter injektionen, immobilisere musen i den udsatte position på en akryl fase.Påfør mineralsk olie på kalven og knæet på den injicerede side af dyret. Dernæst lave en midterlinjen snit i kalven fra hælen til knæet, og dissociate kalven muskulatur fra huden. Udsæt poplitealfossaen.Den popliteal lymfeknude vises som en gennemsigtig kugle i fossa. Fjern derefter lymfeknuden med de mikrokirurgi buede saftæt. For at forberede lymfeknude til billeddannelse, placere hele organer i en 35 af 10 millimeter kultur fad med en glasbund, og bruge kraftforkædre til at fjerne fedt omkring vævet.Center orglet i midten af skålen, og dække vævet med et stykke saltvand-gennemblødt delikat opgave visker. For ex vivo billeddannelse, placere skålen i den omvendte konfokale mikroskop slot og bruge det konventionelle lys konfokale mikroskop og 4-10X mål for at opnå den korrekte fokus. Skift fra lysfunktionen til lasertilstanden, og brug en isotopfarvet, ikke-farvet eller ikke-fluorescerende prøve til at justere lasereffekten, forskydningen og forstærkningen for at fjerne den automatiske fluorescens og eventuel uspecificeret farvning.Anskaf billeder under 4, 10- og 20X-målene med fokus på lymfeknudestrukturen og mobildistributionen og ved hjælp af en 1024-definition af 1024 pixel. Brug derefter et passende billedanalysesoftwareprogram til at adskille kanalerne, til at tilføje den interesseskala og de farver, der er relevante, og til at rekonstruere 3D-visningen. Den kraftfulde kombination af immunmærkning af lymfeknudeceller med anti-CD4 og anti-CD19 antistoffer og konfokal billeddannelse analyse giver mulighed for lokalisering af T og B-celler i inguinal lymfeknuder.I popliteal lymfeknuder, som i lyskevæv, B-celle follikler er omgivet af T-celle populationer, et kendetegn for lymfeknude struktur. Som observeret i disse billeder internaliserer fagocytter ikke de injicerede antistoffer, hvilket indikerer, at B- og T-cellefarvning er specifik. Desuden indikerer rekonstruktion af mærkningen, at T- og B-cellefarvningen ikke overlapper hinanden, hvilket yderligere bekræfter farvningens specificitet.Monocellulære celler observeres i hele lyskelymfeknuden, herunder subcapsular sinus. Med de fleste af de mononukleare celler, der udtrykker CX3XR1, efterfulgt af CCR2 og CXCR31CCR2 dobbelt positive celler. Det samme mønster af cellefordeling og celle fænotyper er observeret i popliteal lymfeknude.Begge lymfeknuder også udstille mørke regioner uden mononuklear celle receptor udtryk, der er besat af lymfocytter. Desuden er mononukleare celler knappe inden for det indre område af lymfeknuder, forbliver koncentreret i de ydre områder af vævet, hvilket indikerer, at disse celler primært indtager lymfeknuden subcapsular sinus. Antistofblandingen skal sprøjtes præcist ind i det subkutane væv, så lymfesystemet kan dræne antistofferne korrekt til lymfeknuden.Denne metode kan anvendes på biodistribution af fluorescerende mærkede lægemidler, og til celle målretning undersøgelser af fluorescerende mærkede nanopartikler.

Research

JoVE Journal

Biology

Visualizing RNA Localization in Xenopus Oocytes

Visualizing RNA Localization in Xenopus Oocytes

RNA localization is a conserved mechanism of establishing cell polarity.  Vg1 mRNA localizes to the vegetal pole of Xenopus laevis oocytes and acts to ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

Et system til<em&gt; Ex vivo</em&gt; Dyrkning af embryonale Pancreas

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy

Nano-FEM: Protein Localization brug af foto-aktiverede Localization mikroskopi og elektronmikroskopi

Mapping the distribution of proteins is essential for understanding the function of proteins in a cell. Fluorescence microscopy is extensively used for ...

Visualizing Bacteria in Nematodes using Fluorescent Microscopy

Visualisering Bakterier i Nematoder anvendelse af fluorescensmikroskopi

 
Symbioses, the living together of two or more organisms, are widespread throughout all kingdoms of life. As two of the most ubiquitous organisms on ...

Analyzing Craniofacial Morphogenesis in Zebrafish Using 4D Confocal Microscopy

Analyserer kraniofacial Morfogenese i zebrafisk Brug 4D konfokal mikroskopi

Time-lapse imaging is a technique that allows for the direct observation of the process of morphogenesis, or the generation of shape. Due to their optical ...

In vivo Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

In vivo Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

In vivo Klonale Sporing af hæmatopoietisk stamcelletransplantation og progenitorceller Præget af Fem fluorescerende proteiner ved hjælp af konfokal og multiphoton mikroskopi

We developed and validated a fluorescent marking methodology for clonal tracking of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) with high spatial and ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Måling stivheden af<em&gt; Ex vivo</em&gt; Mus Aortas Brug Atomic force mikroskopi

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

Visualisere Stromule Frekvens med Fluorescence Microscopy

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Cellular Redox Profiling Using High-content Microscopy

Cellular Redox Profiling ved hjælp af højindholdsmikroskopi

Reactive oxygen species (ROS) regulate essential cellular processes including gene expression, migration, differentiation and proliferation. However, ...