Name: visualizing lymph node structure and cellular localization using ex-vivo confocal microscopy
Uploaded: 2019-08-09T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy at JoVE.com

Эта работа была поддержана NIH (R01 AI43458 в H.L.W.).

Протокол был одобрен Постоянным комитетом по животным гарвардской медицинской школы и Бригамской женской больницы, протокол 2016N000230.
1. Мыши, используемые для эксперимента
<ol><li>Используйте 8-недельных мышей мужского и женского пола на фоне B6 для администрирования смеси а...

<ol>
	<li>Willard-Mack, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+structure,+function,+and+histology+of+lymph+nodes.">Normal structure, function, and histology of lymph nodes.</a> Toxicologic Pathology. 34, 409-424 (2006).</li><li>Tas, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualizing+antibody+affinity+maturation+in+germinal+centers.">Visualizing antibody affinity maturation in germinal centers.</a> Science. 351, 1048-1054 (2016).</li><li>David, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combination+of+Mass+Cytometry+and+Imaging+Analysis+Reveals+Origin,+Location,+and+Functional+Repopulation+of+Liver+Myeloid+Cells+in+Mice.">Combination of Mass Cytometry and Imaging Analysis Reveals Origin, Location, and Functional Repopulation of Liver Myeloid Cells in Mice.</a> Gastroenterology. 151, 1176-1191 (2016).</li><li>Rezende, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=gammadelta+T+cells+control+humoral+immune+response+by+inducing+T+follicular+helper+cell+differentiation.">gammadelta T cells control humoral immune response by inducing T follicular helper cell differentiation.</a> Nature Communications. 9, 3151 (2018).</li><li>Nakagaki, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+triple-fluorescent+mouse+strain+allows+a+dynamic+and+spatial+visualization+of+different+liver+phagocytes+in+vivo.">Generation of a triple-fluorescent mouse strain allows a dynamic and spatial visualization of different liver phagocytes in vivo.</a> Anais da Academia Brasileira de Ciencias. 91 (suppl 1), e20170317 (2019).</li><li>Ajami, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+mass+cytometry+reveals+distinct+populations+of+brain+myeloid+cells+in+mouse+neuroinflammation+and+neurodegeneration+models.">Single-cell mass cytometry reveals distinct populations of brain myeloid cells in mouse neuroinflammation and neurodegeneration models.</a> Nature Neuroscience. 21, 541-551 (2018).</li><li>Becher, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-dimensional+analysis+of+the+murine+myeloid+cell+system.">High-dimensional analysis of the murine myeloid cell system.</a> Nature Immunology. 15, 1181-1189 (2014).</li><li>McElroy, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+LYVE-1+antibody+to+image+dynamically+lymphatic+trafficking+of+cancer+cells+in+vivo.">Fluorescent LYVE-1 antibody to image dynamically lymphatic trafficking of cancer cells in vivo.</a> Journal of Surgical Research. 151, 68-73 (2009).</li><li>Gerner, M. Y., Casey, K. A., Kastenmuller, W., Germain, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dendritic+cell+and+antigen+dispersal+landscapes+regulate+T+cell+immunity.">Dendritic cell and antigen dispersal landscapes regulate T cell immunity.</a> The Journal of Experimental Medicine. 214, 3105-3122 (2017).</li><li>Hauser, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Definition+of+germinal-center+B+cell+migration+in+vivo+reveals+predominant+intrazonal+circulation+patterns.">Definition of germinal-center B cell migration in vivo reveals predominant intrazonal circulation patterns.</a> Immunity. 26, 655-667 (2007).</li><li>Allen, C. D., Okada, T., Tang, H. L., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+germinal+center+selection+events+during+affinity+maturation.">Imaging of germinal center selection events during affinity maturation.</a> Science. 315, 528-531 (2007).</li><li>Arnon, T. I., Horton, R. M., Grigorova, I. L., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+splenic+marginal+zone+B-cell+shuttling+and+follicular+B-cell+egress.">Visualization of splenic marginal zone B-cell shuttling and follicular B-cell egress.</a> Nature. 493, 684-688 (2013).</li><li>Sipkins, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+specialized+bone+marrow+endothelial+microdomains+for+tumour+engraftment.">In vivo imaging of specialized bone marrow endothelial microdomains for tumour engraftment.</a> Nature. 435, 969-973 (2005).</li><li>Cinamon, G., Zachariah, M. A., Lam, O. M., Foss, F. W., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Follicular+shuttling+of+marginal+zone+B+cells+facilitates+antigen+transport.">Follicular shuttling of marginal zone B cells facilitates antigen transport.</a> Nature Immunology. 9, 54-62 (2008).</li><li>Pereira, J. P., An, J., Xu, Y., Huang, Y., Cyster, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cannabinoid+receptor+2+mediates+the+retention+of+immature+B+cells+in+bone+marrow+sinusoids.">Cannabinoid receptor 2 mediates the retention of immature B cells in bone marrow sinusoids.</a> Nature Immunology. 10, 403-411 (2009).</li><li>Nakagaki, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+and+metabolic+shifts+during+neonatal+development+reprogram+liver+identity+and+function.">Immune and metabolic shifts during neonatal development reprogram liver identity and function.</a> Journal of Hepatology. (6), 1294-1307 (2018).</li><li>Wang, H., La Russa, M., Qi, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR/Cas9+in+Genome+Editing+and+Beyond.">CRISPR/Cas9 in Genome Editing and Beyond.</a> Annual Review of Biochemistry. 85, 227-264 (2016).</li><li>Roozendaal, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conduits+mediate+transport+of+low-molecular-weight+antigen+to+lymph+node+follicles.">Conduits mediate transport of low-molecular-weight antigen to lymph node follicles.</a> Immunity. 30, 264-276 (2009).</li><li>Sarder, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=All-near-infrared+multiphoton+microscopy+interrogates+intact+tissues+at+deeper+imaging+depths+than+conventional+single-+and+two-photon+near-infrared+excitation+microscopes.">All-near-infrared multiphoton microscopy interrogates intact tissues at deeper imaging depths than conventional single- and two-photon near-infrared excitation microscopes.</a> Journal of Biomedical Optics. 18, 106012 (2013).</li></ol>

Сочетание изображений с другими методами, включая молекулярную биологию и высокомерную иммунофенотипирование, повысило нашу способность исследовать иммунные клетки в их родном контексте. В самом деле, в то время как другие подходы могут потребовать переваривания тканей и изоляции кл...

Лимфатические узлы (LNs) являются яйцевидными органами, широко присутствующими по всему телу с важнейшей функцией преодоления врожденных и адаптивных иммунных реакций. LNs фильтруют лимфу для того, чтобы определить посторонние частицы и раковые клетки, чтобы смонтировать иммунный ответ против них1. Антиген, представляющий клетки (APCs), Т-клетки и В-клетки работают вместе с генерацией антиген-специфических антител (гуморальный иммунитет) и цитотоксических лимфоцитов (клеточный иммунитет) для устранения посторонних частиц и раковых клеток2. Таким образом, понимание динамики иммунных клеток, присутствующих в лимфатической системе, будет иметь важные последствия для разработки вакцины и иммунотерапии рака.
Появление мощных микроскопов - в том числе новых конфокальных и супер разрешение микроскопов - позволило чрезвычайный прогресс в понимании того, как различные популяции иммунных клеток ведут себя в их родной среде3. Теперь можно изображение нескольких одновременных подтипов клеток с помощью комбинации зондов с генетически модифицированными мышами, которые выражают флуоресцентные белки под контролем конкретных целей4,5. В самом деле, высокомерные методы, в том числе массовой цитометрии и мульти-параметрического анализа потока имеют решающее значение для расширения наших знаний о различных иммунных клеток разобщенности и функциональности в области здоровья и болезни6, 7. Однако, для подготовки образцов для этих методов, ткани нуждаются в пищеварении и клетки отделены от их естественной среде для анализа в клеточных суспензий. Чтобы превзойти эти ограничения и позволить лучший перевод в биологии, цель протокола, предложенного здесь, заключается в применении простой методологии изображения ex vivo целые лимфатические узлы с помощью фондовых конфокальных микроскопов с преимуществом улучшенной скорости, ткани сохранение структуры, и жизнеспособность клеток по сравнению с обычными иммунофлуоресцентными окрашивания. Используя этот подход, мы смогли показать, что мыши не хватает для Т-клеток, подтип Т-лимфоцитов, участвующих в принимающей ранней защиты от патогенов4, имеют скомпрометированы фолликулов и Т-клеточных зон по сравнению с дикими мышами типа. Эти выводы позволили нам продолжить исследование, в котором мы показали, что Т-клетки играют важную роль в гомеостазе лимфоидных органов и гуморальный иммунный ответ4. Кроме того, этот протокол обеспечивает физиологические пути для зондов и антител для достижения лимфатических узлов, так как они управляются подкожно и рассеивать через ткани лимфатической циркуляции, опираясь на предыдущие доклады, которые используются в situ маркировки с антителами для визуализации лимфатических ассоциированных структур8,9, динамика зародышевого центра10,11,12,и цели легко доступны для кровотока13 ,14,15.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>BV421 anti-CD4</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>562891</td>
			<td>GK1.5; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 anti-CD19</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>564509</td>
			<td>1D3; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BB515 Rat IgG2a, &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>564418</td>
			<td>R35-95; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BV421 Mouse IgG2b, K Isotype Control</td>
			<td>BD Horizon</td>
			<td>562603</td>
			<td>R35-38 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cellview culture dish</td>
			<td>Greiner-Bio</td>
			<td>627861</td>
			<td>35x10 mm with glass bottom</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin syringes</td>
			<td>BD Plastipak</td>
			<td>-</td>
			<td>Insulin U-100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kimwipes</td>
			<td>Kimtech Science Brand</td>
			<td>7557</td>
			<td>size 21 x 20 cm / 100 sheets per box</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery curved forceps</td>
			<td>WEP Surgical Instruments</td>
			<td>custom made</td>
			<td>12.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgery curved scissors</td>
			<td>WEP Surgical Instruments</td>
			<td>custom made</td>
			<td>11.5 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle</td>
			<td>BD PrecisionGlide</td>
			<td>-</td>
			<td>30 gauge &#215; &#189; inch</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Te + A1R confocal head</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>-</td>
			<td>loaded with main 4 laser lines (405, 488, 543 and 647 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE anti-F4/80</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>565410</td>
			<td>T45-2342; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE Rat IgG2a, &#954; Isotype Control</td>
			<td>BD Pharmigen</td>
			<td>553930</td>
			<td>R35-95; 0.2 mg mL-1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zeiss LSM 710 confocal microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>-</td>
			<td>loaded with main 4 laser lines (405, 488, 543 and 647 nm)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

visualizing lymph node structure and cellular localization using ex-vivo confocal microscopy

Лимфатические узлы (LNs) являются органами, распространяемыми внутри организма, где врожденные иммунные реакции могут соединиться с адаптивным иммунитетом. В самом деле, LNs стратегически вмешались в пути лимфатических сосудов, что позволяет интимный контакт тканевых антигенов со всеми резидентами иммунных клеток в LN. Таким образом, понимание клеточного состава, распределения, местоположения и взаимодействия с помощью ex vivo всего LN изображений будет добавить к знаниям о том, как тело координирует местные и системные иммунные реакции. Этот протокол показывает стратегию визуализации ex vivo после введения виво флуоресцентных антител с меткой, что позволяет очень воспроизводимую и простую в выполнении методологии с помощью обычных конфокальных микроскопов и фондовых реагентов. С помощью подкожной инъекции антител, можно маркировать различные популяции клеток в слива ЛН, не влияя на структуры тканей, которые могут быть потенциально повреждены с помощью обычной иммунофлуоресцентной микроскопии техники.

Данная рукопись показывает методы удаления паховых и поплитетовых лимфатических узлов, не повреждая их структуру после инъекции флуоресцентных антител для окрашивания конкретных клеточных популяций в этих органах (Рисунок 1 и Рисунок 2 ).
<p class="jove_content...

Watch this Scientific Journal Video about Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy at JoVE.com

Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy

Визуализация структуры лимфатических узлов и клеточной локализации с помощью ex-Vivo Confocal Микроскопии

Этот протокол описывает метод изображения различных популяций клеток в осушении лимфатических узлов без изменений в структуре органа.

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are ...

Этот воспроизводимый и простой в использовании протокол использует ex-vivo лимфатических узлов визуализации стратегии для отслеживания слива in-vivo вводят флуоресцентные помечены антитела к местным вторичным лимфоидных органов. Демонстрация этого метода позволяет специфическую визуализацию процедуры, что может способствовать успешному выполнению протокола. Это очень простой и простой метод, который может быть выполнен кем угодно.Единственным сложным аспектом является обработка мыши, которая требует некоторой подготовки. Этот метод имеет преимущество улучшенной скорости ткани напряжения сохранения и жизнеспособности клеток по сравнению с обычными флуоресцентными методами окрашивания. Обучение процедуры будет Бруна Tatematsu, техник из лаборатории.Разбавить антитела интереса, спрягается с соответствующими флюорофорами, в 100 микролитров PBS для визуализации пахового лимфатического узла, или 50 микролитров PBS для popliteal лимфатических узлов изображений. Для визуализации пахнутых лимфатических узлов загрузите 100 микролитров коктейля антител в один миллилитр инсулиновый шприц, оснащенный 30 калибровочных по половине дюйма иглой, и подкожно ввилите антитела во внутреннее бедро экспериментальной мыши. Для popliteal лимфатических узлов изображения, вводить 50 микролитров антитела коктейль подкожно в одну лапу площадку экспериментального животного.Затем верните животное в свою домашнюю коробку. Для сбора инъекционных дренажных лимфатических узлов, после ожидания не менее трех часов после инъекции, обездвижить мышь на акриловой сцене клейкой лентой и применить минеральное масло для брюшной кожи. Используйте стандартные ножницы микрохирургии и микрохирургии изогнутые миппы, чтобы сделать разрез средней линии кожи в брюшной полости от лобка к процессу ксифоида, и отмежеваться от брюшной мускулатуры от кожи.Сделайте горизонтальные разрезы кожи в верхней и нижней части вертикальной линии разреза, чтобы создать лоскуты кожи на стороне инъекции, и втягивать кожу, чтобы визуализировать лимфатический узел. Закрепнешь лоскут кожи к акриловой пластине, и используйте щипец для удаления полупрозрачных, как правило, желчных сферических паховой слива лимфатических узлов. Для поплитального слива лимфатических узлов урожая, по крайней мере 12 часов после инъекции, обездвижить мышь в положении склонны на акриловой стадии.Нанесите минеральное масло на теленка и колено на инъекционной стороне животного. Затем сделайте разрез средней линии в теленка от пятки до колена, и отмежевать мускулатуру теленка от кожи. Разоблачить popliteal fossa.Поплитальный лимфатический узел будет отображаться как полупрозрачная сфера в яме. Затем удалите лимфатический узел с помощью микрохирургии изогнутых типсов. Чтобы подготовить лимфатический узел для визуализации, поместите все органы в 35 на 10 миллиметров культуры блюдо со стеклянным дном, и использовать типсы, чтобы удалить любой жир, окружающий ткани.Центр органа в середине блюдо, и покрыть ткань с куском солевого пропитанной деликатной задачи стеклоочистители. Для визуализации ex vivo распоистите блюдо в перевернутом слоте конфокального микроскопа и используйте обычный свет конфокального микроскопа и цель 4-10X, чтобы получить правильный фокус. Изменение от световой функции к лазерному режиму и использовать окрашенные изотопами, не окрашенные, или не флуоресцентные образца для регулировки лазерной мощности, смещения, и получить, чтобы удалить автоматическую флуоресценцию и любые неопределенные окрашивания.Приобретайте изображения под целями 4, 10 и 20X, фокусируемые на структуре лимфатических узлов и клеточном распределении и используя определение пикселей 1024 к 1024. Затем используйте соответствующую программу анализа изображений, чтобы отделить каналы, добавить масштаб и цвета интереса, а также реконструировать 3D-вид. Мощное сочетание иммунолабеля клеток лимфатических узлов с антителами anti-CD4 и anti-CD19 и конфокальным анализом изображений позволяет локализовать Т и В-клетки в паховых лимфатических узлах.В поплитальных лимфатических узлах, как и в паховой ткани, фолликулы В-клеток окружены популяциями Т-клеток, что является отличительной чертой структуры лимфатических узлов. Как отмечается в этих изображениях, фагоциты не интернализировать вводили антитела, что свидетельствует о том, что B и Т-клеток окрашивания является специфическим. Кроме того, реконструкция маркировки указывает на то, что окрашивание клеток Т и В не перекрывается, что еще больше подтверждает специфику окрашивания.Моноклеточные клетки наблюдаются по всему паховой лимфатический узел, в том числе подкапсулярной пазухи. С большинством моноядерных ячеек, выражают CX3XR1, а затем CCR2 и CXCR31CCR2 двойные положительные клетки. Такая же картина распределения клеток и фенотипов клеток наблюдается в поплитальных лимфатических узлах.Оба лимфатических узла также демонстрируют темные области без экспрессии моноядерных клеточных рецепторов, которые заняты лимфоцитами. Кроме того, моноядерные клетки не хватает во внутренней области лимфатических узлов, оставаясь сосредоточены во внешних областях ткани, что свидетельствует о том, что эти клетки в первую очередь занимают лимфатических узлов подкапсулярной пазухи. Смесь антитела должна быть точно введена в подкожной ткани для лимфатической системы правильно слить антитела к лимфатическому узлу.Этот метод может быть применен к биораспределение флуоресцентных помеченных препаратов, а также к исследованиям клеток флуоресцентных помеченных наночастиц.

Research

JoVE Journal

Biology

Visualizing RNA Localization in Xenopus Oocytes

Visualizing RNA Localization in Xenopus Oocytes

Визуализация РНК Локализация в Xenopus Ооцитов

RNA localization is a conserved mechanism of establishing cell polarity.  Vg1 mRNA localizes to the vegetal pole of Xenopus laevis oocytes and acts to ...

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Lentiviral-mediated Knockdown During Ex Vivo Erythropoiesis of Human Hematopoietic Stem Cells

Лентивирусов-опосредованной Нокдаун В Ex Vivo Эритропоэз прав гемопоэтических стволовых клеток

Erythropoiesis is a commonly used model system to study cell differentiation. During erythropoiesis, pluripotent adult human hematopoietic stem cells ...

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

Система<em&gt; Бывших естественных условиях</em&gt; Культивирования эмбриональных поджелудочной железы

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy

Нано-FEM: Белка Локализация с использованием фото-активированного микроскопии локализации и электронная микроскопия

Mapping the distribution of proteins is essential for understanding the function of proteins in a cell. Fluorescence microscopy is extensively used for ...

Visualizing Bacteria in Nematodes using Fluorescent Microscopy

Визуализация Бактерии в Нематоды использованием флуоресцентной микроскопии

 
Symbioses, the living together of two or more organisms, are widespread throughout all kingdoms of life. As two of the most ubiquitous organisms on ...

Analyzing Craniofacial Morphogenesis in Zebrafish Using 4D Confocal Microscopy

Анализируя черепно-лицевой морфогенеза у рыбок данио Использование 4D конфокальной микроскопии

Time-lapse imaging is a technique that allows for the direct observation of the process of morphogenesis, or the generation of shape. Due to their optical ...

In vivo Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

In vivo Clonal Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells Marked by Five Fluorescent Proteins using Confocal and Multiphoton Microscopy

В естественных условиях клоновых Tracking гемопоэтических стволовых и клеток-предшественников оцениваться пятью флуоресцентных белков с помощью конфокальной и многофотонной микроскопии

We developed and validated a fluorescent marking methodology for clonal tracking of hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs) with high spatial and ...

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Measuring the Stiffness of Ex Vivo Mouse Aortas Using Atomic Force Microscopy

Измерение Жесткость<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Аорте при помощи мыши атомно-силовой микроскопии

Arterial stiffening is a significant risk factor and biomarker for cardiovascular disease and a hallmark of aging. Atomic force microscopy (AFM) is a ...

Visualizing Stromule Frequency with Fluorescence Microscopy

Визуальное стромул Частота с флуоресцентной микроскопией

Stromules, or "stroma-filled tubules", are narrow, tubular extensions from the surface of the chloroplast that are universally observed in plant cells but ...

Cellular Redox Profiling Using High-content Microscopy

Сотовая редокс-профилирование с использованием высококонцентрированной микроскопии

Reactive oxygen species (ROS) regulate essential cellular processes including gene expression, migration, differentiation and proliferation. However, ...