Name: confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species
Uploaded: 2019-03-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

الكتاب تقر "بوردو بندلي العلوم البيولوجية مركز التصوير مرفق" للحصول على ليزر المسح مجهر [كنفوكل]، والدعم التقني، والكتاب نقدر المساعدة من شبير أندي في "مرفق التصوير بندلي بوردو". تم تمويل هذا النشاط بجامعة بوردو كجزء من أجسيد مفترق طرق التمويل لدعم الزراعة والتنمية الريفية في ولاية إنديانا.

1-وسائل الإعلام وتصوير إعداد أطباق
<ol><li>لوحات MS: إضافة 0.5 x Murashige & MS سكوغ أجار 1% متوسطة، إلى المياه. وقم بضبط الأس الهيدروجيني إلى 5.8 باستخدام حل هيدروكسيد البوتاسيوم (اختياري: إضافة السكروز 1% لزراعة النباتات الطويلة الأجل). لوحات اﻷوتوكﻻف وصب.</li>
	<li>تصوير الأطباق: التعبئة البلاستيكية أطباق ...

<ol>
	<li>Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+cell+division+patterns+in+developing+plants.">Genetic control of cell division patterns in developing plants.</a> Cell. 88 (3), 299-308 (1997).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+arabinosyltransferases+controls+shoot+meristem+size+in+tomato.">A cascade of arabinosyltransferases controls shoot meristem size in tomato.</a> Nature Genetics. 47 (7), 784-792 (2015).</li><li>Bommert, P., Nagasawa, N. S., Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+variation+in+maize+kernel+row+number+is+controlled+by+the+FASCIATED+EAR2+locus.">Quantitative variation in maize kernel row number is controlled by the FASCIATED EAR2 locus.</a> Nature Genetics. 45 (3), 334-337 (2013).</li><li>Je, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+from+maize+organ+primordia+via+FASCIATED+EAR3+regulates+stem+cell+proliferation+and+yield+traits.">Signaling from maize organ primordia via FASCIATED EAR3 regulates stem cell proliferation and yield traits.</a> Nature Genetics. 48 (7), 785-791 (2016).</li><li>Ping, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dt2+is+a+gain-of-function+MADS-domain+factor+gene+that+specifies+semideterminacy+in+soybean.">Dt2 is a gain-of-function MADS-domain factor gene that specifies semideterminacy in soybean.</a> Plant Cell. 26 (7), 2831-2842 (2014).</li><li>Vaughan, J. G., Jones, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+angiosperm+inflorescence+apex.">Structure of the angiosperm inflorescence apex.</a> Nature. 171, 751 (1953).</li><li>Sijacic, P., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+from+live-imaging+in+shoot+meristem+development.">Novel insights from live-imaging in shoot meristem development.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 52 (4), 393-399 (2010).</li><li>Tax, F. E., Durbak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meristems+in+the+movies:+live+imaging+as+a+tool+for+decoding+intercellular+signaling+in+shoot+apical+meristems.">Meristems in the movies: live imaging as a tool for decoding intercellular signaling in shoot apical meristems.</a> Plant Cell. 18 (6), 1331 (2006).</li><li>Grandjean, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+cell+division,+cell+growth,+and+differentiation+at+the+shoot+apical+meristem+in+Arabidopsis.">In vivo analysis of cell division, cell growth, and differentiation at the shoot apical meristem in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 16 (1), 74-87 (2004).</li><li>Heisler, M. G., Ohno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-imaging+of+the+Arabidopsis+inflorescence+meristem.">Live-imaging of the Arabidopsis inflorescence meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1110, 431-440 (2014).</li><li>Tobin, C. J., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+to+study+cell+division+orientation+in+the+Arabidopsis+shoot+meristem.">Real-time lineage analysis to study cell division orientation in the Arabidopsis shoot meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1370, 147-167 (2016).</li><li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+Imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers.">Live confocal Imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55156 (2017).</li><li>Prunet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds.">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. 419, 114-120 (2016).</li><li>Reddy, G. V., Heisler, M. G., Ehrhardt, D. W., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+reveals+oriented+cell+divisions+associated+with+morphogenesis+at+the+shoot+apex+of+Arabidopsis+thaliana.">Real-time lineage analysis reveals oriented cell divisions associated with morphogenesis at the shoot apex of Arabidopsis thaliana.</a> Development. 131, 4225-4237 (2004).</li><li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment.">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 773 (2017).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HAIRY+MERISTEM+with+WUSCHEL+confines+CLAVATA3+expression+to+the+outer+apical+meristem+layers.">HAIRY MERISTEM with WUSCHEL confines CLAVATA3 expression to the outer apical meristem layers.</a> Science. 361 (6401), 502-506 (2018).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+plant+stem+cell+function+by+conserved+interacting+transcriptional+regulators.">Control of plant stem cell function by conserved interacting transcriptional regulators.</a> Nature. 517 (7534), 377-380 (2015).</li><li>Nimchuk, Z. L., Zhou, Y., Tarr, P. T., Peterson, B. A., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+stem+cell+maintenance+by+transcriptional+cross-regulation+of+related+receptor+kinases.">Plant stem cell maintenance by transcriptional cross-regulation of related receptor kinases.</a> Development. 142 (6), 1043 (2015).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LEAFY+Controls+Auxin+Response+Pathways+in+Floral+Primordium+Formation.">LEAFY Controls Auxin Response Pathways in Floral Primordium Formation.</a> Science Signaling. 6 (270), ra23 (2013).</li><li>Truernit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+whole-mount+imaging+of+three-dimensional+tissue+organization+and+gene+expression+enables+the+study+of+phloem+development+and+structure+in+Arabidopsis.">High-resolution whole-mount imaging of three-dimensional tissue organization and gene expression enables the study of phloem development and structure in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 20 (6), 1494-1503 (2008).</li></ol>

هنا، يمكننا وصف أسلوب تصوير بسيطة التي يمكن تطبيقها لدراسة الخلايا الإنشائية قمية تبادل لإطلاق النار من نباتات مختلفة مع تعديلات طفيفة، فتح سبيلاً جديداً لدراسة لائحة مماثلة في مراحل الخضري والإنجابية سواء في محطات نموذجية و المحاصيل. يمكن أن يساعد هذا البروتوكول على النقيض من وزارة شؤو...

يحتوي على مجموعة خلايا الجذعية غير متمايزة أرض المصنع وتحافظ باستمرار بمصنّع الجهاز النمو والتنمية1. أثناء تطوير السماني، تستمد تقريبا جميع الأنسجة سطحي للنبات من أرض قمية تبادل لإطلاق النار (SAM). في المحاصيل، بالنشاط والحجم SAM وبه المشتقة من الخلايا الإنشائية الأزهار ترتبط محكم مع العديد من السمات الزراعية مثل الهندسة المعمارية في تبادل لإطلاق النار، وإنتاج الفاكهة، ومحصول البذور. على سبيل المثال، يسبب سام موسع في الطماطم، زيادة في تبادل لإطلاق النار والمتفرعة من نورات، وبالتالي النتائج في توليد إضافية الزهور والفواكه الأجهزة2. في الذرة، وزيادة في حجم سام يؤدي إلى عدد أكبر من البذور والعائد الإجمالي3،4. وفي فول الصويا، عدم أرض يرتبط أيضا ارتباطاً وثيقا ببنية تبادل لإطلاق النار، وتسفر عن5.
ويمكن وصف مورفولوجيا وتشريح سامز قبل عدة أساليب مختلفة، بما في ذلك تقطيع تلطيخ نسيجية والمسح الضوئي المجهر الإلكتروني (SEM)6، اللتين تقدمت إلى حد كبير أرض للبحث من خلال توفير أما عرض الأقسام أو طريقة عرض سطح ثلاثي الأبعاد (3D) من سامز. ولكن كلا الأسلوبين وقتاً طويلاً، التي تنطوي على عدة خطوات تجريبية من إعداد نموذج للحصول على البيانات، وهذه الأساليب تعتمد أساسا على عينات ثابتة. التقدم الذي أحرز مؤخرا في الفحص المجهري [كنفوكل] تقنية الليزر التغلب على هذه القيود وتزودنا بأداة قوية للتحقيق في البنية الخلوية والعملية التنموية لمصنع الأنسجة والأعضاء7،8. من خلال الضوئية بدلاً من الأنسجة الجسدية مجهرية [كنفوكل]، وتقطيع يتيح جمع سلسلة من الصور z-مكدس وإعادة 3D اللاحقة في العينة من خلال برمجيات تحليل الصورة.
هنا، يمكننا وصف إجراء فعال للتحقيق داخل ومصنع هياكل السطحية للمعيشة سامز من مختلف الأنواع باستخدام الليزر الفحص المجهري [كنفوكل]، الذي يحتمل أن يسمح للباحثين لإنجاز جميع التجريبية العملية داخل قصيرة بقدر 20 دقيقة. يختلف عن الأساليب الأخرى المنشورة لتصوير [كنفوكل] حية من نبات نورات سامز9،،من1011،،من1213،14، 15 و نبات الزهور13من12،، وهنا نثبت أن هذا البروتوكول ذات كفاءة عالية لدراسة ليس فقط في الخلايا الإنشائية نورات من الأنواع النموذجية ولكن أيضا تبادل لإطلاق النار الخضري قمية الخلايا الإنشائية من محاصيل مختلفة، مثل الطماطم، وفول الصويا. هذا الأسلوب لا يعتمد على علامات نيون المحورة وراثيا، ويحتمل أن يمكن تطبيقها على دراسة الخلايا الإنشائية تبادل لإطلاق النار من العديد من مختلف الأنواع والأصناف. وبالإضافة إلى ذلك، نقدم أيضا صورة بسيطة تجهيز الخطوات لعرض وتحليل سامز مختلفة في عرض ثلاثي الأبعاد. أخذت معا، سيسهل هذا الأسلوب بسيطة الباحثين فهم كل من الهيكل والعملية التنموية للخلايا الإنشائية من طراز الكائنات الحية والمحاصيل.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:968px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:283px;">Agar Phyto</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSA20300-1000</td>
			<td style="width:391px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Agarose</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">AGLE-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:176px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:119px;">RS-4955</td>
			<td>Dumont #5SF Super Fine Forceps Inox Tip Size .025 X .005mm, for dissecting shoot apices.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">LSM 880 Upright Confocal Microscope&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Murashige &#38; Skoog MS medium</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSM10200-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Plan APO 20x/1.1 water dipping lens</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Plastic petri dishes 100 mm X 15 mm</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229694</td>
			<td style="width:391px;">Use as making MS plates</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Plastic petri dishes60 mm X 15</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229665</td>
			<td>Use as imaging dishes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propagation Mix</td>
			<td style="width:176px;">Sungro Horticulture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propidium iodide</td>
			<td style="width:176px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">440300250</td>
			<td>1 mg/mL solution in water, to stain the cell walls</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Razor blade</td>
			<td style="width:176px;">PERSONNA&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62-0179</td>
			<td style="width:391px;">For cutting shoot apex from plants</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:176px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Tissue</td>
			<td style="width:176px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Zen black</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species

وظائف قمية أرض (SAM) تبادل لإطلاق النار كخزان خلايا الجذعية مصانة وأنه يولد تقريبا جميع الأنسجة سطحي أثناء تطوير السماني. بنشاط ومورفولوجية سامز تحديد السمات الزراعية الهامة، مثل الهندسة المعمارية تبادل لإطلاق النار، وحجم وعدد من الأعضاء التناسلية، والأهم من ذلك، إنتاج الحبوب. هنا، نحن نقدم بروتوكول مفصل لتحليل مورفولوجية السطحية والبنية الخلوية الداخلية معيشة سامز من الأنواع المختلفة من خلال الليزر المسح مجهر [كنفوكل]. الإجراء بأكمله من إعداد نموذج للحصول على صور عالية الدقة (3D) ثلاثي الأبعاد يمكن أن ينجز في غضون قصيرة بقدر 20 دقيقة. نثبت أن هذا البروتوكول ذات كفاءة عالية لدراسة ليس فقط نورات سامز الأنواع النموذجية ولكن أيضا الخلايا الإنشائية الخضري من المحاصيل المختلفة، وتوفير أداة بسيطة لكنها قوية لدراسة تنظيم وتطوير الخلايا الإنشائية عبر الأنواع النباتية المختلفة.

لتقييم فعالية البروتوكول لدينا واستكشاف مورفولوجية الخلايا الإنشائية من مختلف الأنواع، ونحن أدوا تجارب التصوير الحي [كنفوكل] على أرض نورات من نبات والخلايا الإنشائية الخضري من الطماطم وفول الصويا. قد استخدمت في هذه الدراسة، و نبات اكوتيبي لاندسبرغ قائمة?...

Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species

[كنفوكل] تصوير مباشر من تبادل لإطلاق النار قمية الخلايا الإنشائية من الأنواع النباتية المختلفة

ويقدم هذا البروتوكول كيفية العيش الصورة وتحليل الخلايا الإنشائية قمية تبادل لإطلاق النار من الأنواع النباتية المختلفة باستخدام الليزر الفحص المجهري [كنفوكل].

The shoot apical meristem (SAM) functions as a conserved stem cell reservoir and it generates almost all aboveground tissues during the postembryonic ...

تبادل لاطلاق النار meristems apical السيطرة على نمو النبات والتكاثر. هذه الطريقة تساعدنا على التحقيق في مورفولوجيا والهياكل الداخلية لاطلاق النار meristems apical ليس فقط في الأنواع النموذجية ولكن أيضا في المحاصيل المختلفة. هذه التقنية هي إجراء فعال جدا.يمكن تصوير apical meristem مباشرة في دقة خلوية عالية دون أي تثبيت العينة كثيفة العمالة والخطوات تقسيم الأنسجة. للبدء، تنمو العربية، الطماطم، و فول الصويا النباتات كما هو مفصل في بروتوكول النص. قطع قمة تبادل لاطلاق النار inflorescence من النباتات Arabidopsis انسحب.عقد الجزء القاعدي من الجذعية الرئيسية، واستخدام ملقط لإزالة أكبر عدد من الأعضاء زهرة القديمة ممكن من الجذعية الرئيسية. مواصلة إزالة بقية الزهور في مجال المجهر ستيريو حتى يمكن الاطلاع على meristem تبادل لاطلاق النار apical من العدسة. لعرض اللمباتية تبادل لاطلاق النار apical meristems من الطماطم أو فول الصويا، تشريح كوتيليدونس، والأوراق، والجذور من النبات.عقد hypocotyls من النبات تحت المجهر ستيريو، واستخدام ملقط لمزيد من تشريح الأوراق وورق primordia تغطي الخضرية تبادل لاطلاق النار apical meristems. مايليت 50 ميكرولترات من محلول يوديد بروبديسيوم في طبق بيتري نظيف وفارغ. تراجع كامل تشريح تبادل لاطلاق النار قمة في صبغ لمدة دقيقتين.خلال عملية تلطيخ، تزج في كل inflorescence تبادل لاطلاق النار apical meristem أو الخضرية تبادل لاطلاق النار apical meristem في حل يوديد بروبديسيوم لتحقيق تلطيخ موحدة. شطف قمة تبادل لاطلاق النار الملون مرتين في الماء العقيمة، deionized. الآن، يخترق حفرة في وسط طبق التصوير المعدة باستخدام ملقط، والعصا قمة تبادل لاطلاق النار الملون تستقيم في الوسط.املأ طبق التصوير بالماء المعقم والمؤين لتغمر العينة تمامًا. عرض العينة من خلال المجهر ستيريو. ماصة صعودا وهبوطا لإزالة فقاعات الهواء المحاصرين حول meristem.ثم، ضبط زاوية الجذعية في أجار للتأكد من أن تبادل لاطلاق النار meristem هو واضح تماما من فوق مباشرة. الآن، ضع طبق التصوير على مرحلة العينة من المجهر confocal. خفض عدسة المياه غمس، ورفع مرحلة عينة المجهر للسماح غيض من العدسة تراجع في الماء.فتح برنامج المجهر confocal، واستخدام العدسة لتحديد مكان والتركيز على تبادل لاطلاق النار meristem apical في مجال مشرق. تشغيل وظيفة الاستحواذ في برنامج المجهر confocal. ابدأ تشغيل الوضع المباشر لعرض العينة من شاشة الكمبيوتر، ثم قم بإعداد كافة المعلمات لتجربة المسح الضوئي بالليزر.عند ضبط المعلمات، استخدم وظيفة مؤشر النطاق لتحديد ما إذا كانت الإشارة مشبعة أم لا. ويمكن استخدام نفس البرنامج الذي كان يستخدم لاقتناء الصور لتصور الإسقاط الشفاف ثلاثي الأبعاد. افتح ملف confocal الأصلي، وانقر على القائمة ثلاثية الأبعاد، وحدد شفاف لإنشاء عرض عرض 3D.اختياريًا، حدد الشفافية لضبط ثلاث معلمات للعرض، بما في ذلك العتبة والمنحدر والحد الأقصى لشفافية الصورة ثلاثية الأبعاد. الآن، حدد ضوء لضبط سطوع الصورة ثلاثية الأبعاد. تصدير الصور المسقطة وحفظها كملفات TIFF.لتصور عمق طريقة عرض الترميز من الصور 3D، استخدم نفس البرنامج. مرة أخرى، انقر فوق القائمة 3D، وحدد المظهر. حدد خاص، وحدد ترميز العمق.تصدير الصور المسقطة وحفظها كملفات TIFF. هذه الصورة من القسم المتعامد من خلال منتصف عربدوبسيس تبادل لاطلاق النار meristem apical تبين أن الجدران الأفقية ملطخة مع يوديد بروبيديوم في جميع الخلايا تقريبا في طبقات الخلايا المتعددة. وجهة نظر قسم واحد عرضية من خلال مجموعة من inflorescence تبادل لاطلاق النار apical meristem يظهر أن الخلايا من الطائرة XY هي أيضا صورة واضحة.يكشف عرض الإسقاط ثلاثي الأبعاد أن الريستيم المزهر يشكل بنية تشبه القبة وتحيط به زهرة primordia النامية. هذه الصورة من القسم المتعامد من خلال منتصف الطماطم تبادل لاطلاق النار meristem تبادل لاطلاق النار أيضا يدل على أن الجدران الأفقية ملطخة مع يوديد بروبديسيوم في طبقات متعددة الخلية، على الرغم من أن إشارة يوديد بروبدييوم من المنطقة الداخلية العميقة هو أقل قليلا. صورة من مقطع واحد عرضية من خلال الطبقات العميقة من التصوير النباتي apical meristem يكشف عن الخلايا من طائرات XY والحدود التي تشكلت بين meristem الخضري وورقة primordia.يمكن أن توفر طريقة العرض الإسقاط ثلاثية الأبعاد رؤية شاملة لشكل وتنظيم الزهد الخضري من الطماطم. يظهر هنا هو عرض متعامد من خلال منتصف تصوير فول الصويا meristem و 3D الإسقاط من نفس تبادل لاطلاق النار meristem. وsristem النباتية مثل القبة وprimordia ورقة جديدة مشتقة هي أيضا يمكن ملاحظتها.يمكن أن يلطخ يوديد البروديوم بسهولة الخلايا التالفة أو الميتة ، والتي ستؤثر بشكل كبير على جودة الصور ، لذلك من المهم تجنب أي ضرر مادي أثناء إعداد عينات التصوير السريع.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

يعيش التصوير لل<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; العذراء العين

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

في المختبر تمايز الناضجة Myofibers للتصوير لايف

Skeletal muscles are composed of myofibers, the biggest cells in the mammalian body and one of the few syncytia. How the complex and evolutionarily ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

يعيش متحد البؤر التصوير من تطوير نبات الأرابيدوبسيس الزهور

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

A Simple Chamber for Long-term Confocal Imaging of Root and Hypocotyl Development

غرفة بسيطة للتصوير متحد البؤر على المدى الطويل من تطوير الجذر والهيبوكوتيل

Several aspects of plant development, such as lateral root morphogenesis, occur on time spans of several days. To study underlying cellular and ...

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

طويلة الأجل تصوير لايف<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; القرص العين

Live imaging provides the ability to continuously track dynamic cellular and developmental processes in real time. Drosophila larval imaginal discs have ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

في المختبر زراعة ovule للتصوير خلايا حية من الاستقطاب الزيجوت والزخرفة الجنين في التمويل نبات

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

تصوير لايف من ماوس الثانوي باليت فيوجن

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

تصوير الخلايا الحية لفصل الكروموسومات أثناء الانقسام

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

التصوير الحي وتحليل تقلصات العضلات في جنين دروسوفيلا

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

حية الخلية التصوير من Microtubule Cytoskeleton والتلاعب micromechanical من عربيدوبسيس تبادل لاطلاق النار Apical Meristem

Understanding cell and tissue level regulation of growth and morphogenesis has been at the forefront of biological research for many decades. Advances in ...