Name: confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species
Uploaded: 2019-03-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Forfatterne anerkender Purdue Bindley Bioscience Center Imaging facilitet for adgang til laser scanning Konfokal mikroskop og den tekniske støtte, og forfatterne sætter pris på hjælp fra Andy Schaber i Purdue Bindley Imaging facilitet. Denne aktivitet blev finansieret af Purdue University som en del af AgSEED korsvej finansiering til støtte for Indianas landbrug og udvikling af landdistrikter.

1. medier og imaging retter forberedelse
<ol><li>MS plader: tilsæt 0,5 x Murashige & Skoog MS medium, 1% agar i deioniseret vand og derefter justere pH 5,8 ved hjælp af kaliumhydroxid-titrervæske (Valgfrit: tilføje 1% saccharose for den langsigtede plante vokser). Autoklave og hæld plader.</li>
	<li>Imaging retter: fylde plastik petriskåle (6 cm lang, 1,5 cm dybde) til 0,5-0,8 cm med 1,5% smeltet agarosegelelektroforese.</li>
</ol>2. planternes vækst
<ol><li>
Arabidopsis vækst...

<ol>
	<li>Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+cell+division+patterns+in+developing+plants.">Genetic control of cell division patterns in developing plants.</a> Cell. 88 (3), 299-308 (1997).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+arabinosyltransferases+controls+shoot+meristem+size+in+tomato.">A cascade of arabinosyltransferases controls shoot meristem size in tomato.</a> Nature Genetics. 47 (7), 784-792 (2015).</li><li>Bommert, P., Nagasawa, N. S., Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+variation+in+maize+kernel+row+number+is+controlled+by+the+FASCIATED+EAR2+locus.">Quantitative variation in maize kernel row number is controlled by the FASCIATED EAR2 locus.</a> Nature Genetics. 45 (3), 334-337 (2013).</li><li>Je, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+from+maize+organ+primordia+via+FASCIATED+EAR3+regulates+stem+cell+proliferation+and+yield+traits.">Signaling from maize organ primordia via FASCIATED EAR3 regulates stem cell proliferation and yield traits.</a> Nature Genetics. 48 (7), 785-791 (2016).</li><li>Ping, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dt2+is+a+gain-of-function+MADS-domain+factor+gene+that+specifies+semideterminacy+in+soybean.">Dt2 is a gain-of-function MADS-domain factor gene that specifies semideterminacy in soybean.</a> Plant Cell. 26 (7), 2831-2842 (2014).</li><li>Vaughan, J. G., Jones, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+angiosperm+inflorescence+apex.">Structure of the angiosperm inflorescence apex.</a> Nature. 171, 751 (1953).</li><li>Sijacic, P., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+from+live-imaging+in+shoot+meristem+development.">Novel insights from live-imaging in shoot meristem development.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 52 (4), 393-399 (2010).</li><li>Tax, F. E., Durbak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meristems+in+the+movies:+live+imaging+as+a+tool+for+decoding+intercellular+signaling+in+shoot+apical+meristems.">Meristems in the movies: live imaging as a tool for decoding intercellular signaling in shoot apical meristems.</a> Plant Cell. 18 (6), 1331 (2006).</li><li>Grandjean, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+cell+division,+cell+growth,+and+differentiation+at+the+shoot+apical+meristem+in+Arabidopsis.">In vivo analysis of cell division, cell growth, and differentiation at the shoot apical meristem in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 16 (1), 74-87 (2004).</li><li>Heisler, M. G., Ohno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-imaging+of+the+Arabidopsis+inflorescence+meristem.">Live-imaging of the Arabidopsis inflorescence meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1110, 431-440 (2014).</li><li>Tobin, C. J., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+to+study+cell+division+orientation+in+the+Arabidopsis+shoot+meristem.">Real-time lineage analysis to study cell division orientation in the Arabidopsis shoot meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1370, 147-167 (2016).</li><li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+Imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers.">Live confocal Imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55156 (2017).</li><li>Prunet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds.">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. 419, 114-120 (2016).</li><li>Reddy, G. V., Heisler, M. G., Ehrhardt, D. W., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+reveals+oriented+cell+divisions+associated+with+morphogenesis+at+the+shoot+apex+of+Arabidopsis+thaliana.">Real-time lineage analysis reveals oriented cell divisions associated with morphogenesis at the shoot apex of Arabidopsis thaliana.</a> Development. 131, 4225-4237 (2004).</li><li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment.">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 773 (2017).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HAIRY+MERISTEM+with+WUSCHEL+confines+CLAVATA3+expression+to+the+outer+apical+meristem+layers.">HAIRY MERISTEM with WUSCHEL confines CLAVATA3 expression to the outer apical meristem layers.</a> Science. 361 (6401), 502-506 (2018).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+plant+stem+cell+function+by+conserved+interacting+transcriptional+regulators.">Control of plant stem cell function by conserved interacting transcriptional regulators.</a> Nature. 517 (7534), 377-380 (2015).</li><li>Nimchuk, Z. L., Zhou, Y., Tarr, P. T., Peterson, B. A., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+stem+cell+maintenance+by+transcriptional+cross-regulation+of+related+receptor+kinases.">Plant stem cell maintenance by transcriptional cross-regulation of related receptor kinases.</a> Development. 142 (6), 1043 (2015).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LEAFY+Controls+Auxin+Response+Pathways+in+Floral+Primordium+Formation.">LEAFY Controls Auxin Response Pathways in Floral Primordium Formation.</a> Science Signaling. 6 (270), ra23 (2013).</li><li>Truernit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+whole-mount+imaging+of+three-dimensional+tissue+organization+and+gene+expression+enables+the+study+of+phloem+development+and+structure+in+Arabidopsis.">High-resolution whole-mount imaging of three-dimensional tissue organization and gene expression enables the study of phloem development and structure in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 20 (6), 1494-1503 (2008).</li></ol>

Her, vi beskriver en simpel billedbehandling metode, der kan anvendes til studiet af skyde yderste ildens fra forskellige planter med mindre modifikation, åbne en ny avenue for at studere meristem regulering på både vegetative og reproduktive stadier i model planter og afgrøder. I modsætning til SEM og histologiske farvning metoder, kan denne protokol hjælpe afsløre både overflade Se og intern cellulære strukturer af SAMs, uden behov for arbejdskrævende prøve fiksering og/eller væv skæring trin. Denne protok...

Plante meristem indeholder en pulje af udifferentierede stamceller og løbende opretholder orgel plantevækst og udvikling1. Under den postembryonic udvikling stammer næsten alle overjordiske væv af en plante fra skyde yderste meristem (SAM). I afgrøder er aktivitet og størrelsen af SAM og dens afledte floral ildens tæt forbundet med mange agronomiske træk som skyde arkitektur, frugtproduktion og frø udbytte. For eksempel, i tomat forårsager et udvidet SAM en stigning i skuddet og blomsterstand forgrening, og dermed resultaterne i generere ekstra blomst og frugt organer2. I majs fører en stigning i SAM størrelse til en højere frøantal og samlede afkast3,4. I sojabønner, meristem indetermination er også tæt forbundet med skyde arkitektur og give5.
Morfologi og anatomi af SAMs kan være kendetegnet ved flere forskellige metoder, herunder histologiske skæring/farvning og scanning elektronmikroskopi (SEM)6, som begge har meget avancerede meristem forskning gennem at give enten den sektionsvisning eller en tre-dimensionelle (3D) overflade visning af SAMs. Men begge metoder er tidskrævende, der involverer flere eksperimenterende trin fra prøveforberedelsen til dataopsamling, og disse metoder afhænger hovedsagelig af faste prøver. De seneste fremskridt i laser scanning konfokalmikroskopi teknik har overvundet disse begrænsninger og give os et kraftfuldt værktøj til at undersøge de cellulære struktur og udviklingsmæssige proces af plante væv og organer7,8. Gennem optiske snarere end fysisk væv skæring, Konfokal mikroskopi tillader indsamling af en serie af z-stak billeder og den efterfølgende 3D rekonstruktion af prøven gennem billede analyse software.
Her beskriver vi en effektiv procedure for at undersøge både inde og overfladen strukturer af levende SAM'er fra forskellige plantearter ved hjælp af laser scanning Konfokal mikroskopi, som potentielt giver forskere til at udføre alle de eksperimentelle proces inden for så kort som 20 minutter. Forskellige fra andre offentliggjorte metoder til live Konfokal billeddannelse af Arabidopsis blomsterstand SAMs9,10,11,12,13,14, 15 og Arabidopsis blomster12,13, her vi vise, at denne protokol er yderst effektiv til at studere ikke blot blomsterstand ildens model arter, men også den vegetative skyde yderste ildens fra forskellige afgrøder som tomat og sojabønner. Denne metode er ikke afhængig af transgene fluorescerende markører, og potentielt kan anvendes til at studere skyde ildens fra mange forskellige arter og sorter. Derudover introducerer vi også den simple billedbehandling trin til visning og analyse af forskellige SAMs i en 3D-visning. Tilsammen, vil denne simple metode lette forskere bedre forståelse både struktur og udviklingsmæssige proces af ildens fra både modelorganismer og afgrøder.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:968px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:283px;">Agar Phyto</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSA20300-1000</td>
			<td style="width:391px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Agarose</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">AGLE-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:176px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:119px;">RS-4955</td>
			<td>Dumont #5SF Super Fine Forceps Inox Tip Size .025 X .005mm, for dissecting shoot apices.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">LSM 880 Upright Confocal Microscope&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Murashige &#38; Skoog MS medium</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSM10200-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Plan APO 20x/1.1 water dipping lens</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Plastic petri dishes 100 mm X 15 mm</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229694</td>
			<td style="width:391px;">Use as making MS plates</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Plastic petri dishes60 mm X 15</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229665</td>
			<td>Use as imaging dishes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propagation Mix</td>
			<td style="width:176px;">Sungro Horticulture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propidium iodide</td>
			<td style="width:176px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">440300250</td>
			<td>1 mg/mL solution in water, to stain the cell walls</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Razor blade</td>
			<td style="width:176px;">PERSONNA&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62-0179</td>
			<td style="width:391px;">For cutting shoot apex from plants</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:176px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Tissue</td>
			<td style="width:176px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Zen black</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species

Skyde yderste meristem (SAM) fungerer som en opbevaret stamceller reservoir og det genererer næsten alle overjordiske væv under den postembryonic udvikling. Aktivitet og morfologi af SAMs bestemme vigtige agronomiske egenskaber, såsom skyde arkitektur, størrelse og antal af reproduktive organer, og vigtigst, korn udbytte. Her give vi en detaljeret protokol til at analysere både overflade morfologi og den interne cellestruktur af levende SAM'er fra forskellige arter gennem laser scanning Konfokal mikroskop. Hele proceduren fra prøveforberedelsen til erhvervelse af billeder i høj opløsning tredimensional (3D) kan opnås inden for så kort som 20 minutter. Vi vise, at denne protokol er yderst effektiv til at studere ikke blot blomsterstand SAMs model arter, men også de vegetative ildens fra forskellige afgrøder, giver en simpel men kraftfulde værktøj til at studere organisation og udvikling af ildens på tværs af forskellige plantearter.

At evaluere effektiviteten af vores protokol og udforske morfologi af ildens fra forskellige arter, har vi udført de Konfokal live imaging eksperimenter på blomsterstand meristem fra Arabidopsis og de vegetative ildens fra både tomat og sojabønner. I denne undersøgelse, Arabidopsis økotype Landsberg erecta, tomat sort Micro-Tom og sojabønner kultivar har Williams 82 været brugt som eksempler.
S...

Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species

Konfokal Live Imaging af skyde apikale ildens fra forskellige plantearter

Denne protokol præsenterer sådan live billede og analysere skyde yderste ildens fra forskellige plantearter ved hjælp af laser scanning Konfokal mikroskopi.

The shoot apical meristem (SAM) functions as a conserved stem cell reservoir and it generates almost all aboveground tissues during the postembryonic ...

Skyd apikale meristems kontrol plantevækst og reproduktion. Denne metode hjælper os med at undersøge morfologi og interne strukturer skyde apikale meristems ikke kun i modellen arter, men også i forskellige afgrøder. Denne teknik er en meget effektiv procedure.Skyd apical meristem kan direkte visualiseres i en høj cellulær opløsning uden arbejdskrævende prøve fiksering og væv sektionstrin. Til at begynde, vokse Arabidopsis, tomat, og sojabønner planter som beskrevet i tekstprotokollen. Skær blomsterstand skyde spids fra boltet Arabidopsis planter.Hold den basale del af de vigtigste stilk, og bruge kraftpind til at fjerne så mange ældre blomsterorganer som muligt fra de vigtigste stilk. Fortsæt med at fjerne resten af blomsterne inden for stereomikroskopet, indtil skyde apikale meristem kan ses fra okularer. For at se vegetativ skyde apikale meristems fra enten tomat eller sojabønner, dissekere de cotyledons, blade og rødder fra planten.Hold hypokotyler af anlægget under stereomikroskop, og bruge kraftvipper til yderligere dissekere blade og blade primordia dækker vegetative skyde apikale meristems. Pipette 50 mikroliter propidium iodid opløsning i en ren og tom petriskål. Dyp hele dissekeret skyde spids i farvestof i to minutter.Under farvning proces, nedsænke hele blomsterstand skyde apisk meristem eller vegetativ skyde apikale meristem i propidium iodid opløsning for at opnå ensartet farvning. Skyl den farvede skyde spids to gange i sterilt, deioniseret vand. Nu gennembore et hul i midten af en forberedt billedbehandling fad ved hjælp af snøre, og holde den farvede skyde spids oprejst i mediet.Fyld billedskålen med sterilt, deioniseret vand for helt at nedsænke prøven. Se prøven gennem stereomikroskopet. Pipette op og ned for at fjerne luftbobler fanget omkring meristem.Juster derefter vinklen på stilken i agaren for at sikre, at skydeapika meristem er fuldt synligt direkte ovenfor. Placer nu billedskålen på prøvestadiet af konfokale mikroskop. Sænk vanddypningslinsen, og hæv mikroskopprøvestadiet for at lade spidsen af linsen dyppe i vandet.Åbn konfokale mikroskop software, og bruge okularer til at finde og fokusere på skyde apical meristem i det lyse felt. Betjen funktionen Anskaffelse i konfokale mikroskopsoftware. Start livetilstanden for at få vist eksemplet fra computerskærmen, og konfigurer alle parametre for laserscanningseksperimentet.Når du justerer parametrene, skal du bruge funktionen Områdeindikator til at definere, om signalet er mættet eller ej. Den samme software, der blev brugt til billedbehandling erhvervelse kan bruges til at visualisere en tre-dimensionel gennemsigtig projektion. Åbn den oprindelige konfokale fil, klik på 3D-menuen, og vælg Gennemsigtig for at generere en 3D-projektionsvisning.Vælg eventuelt Gennemsigtighed for at justere tre parametre for projektionen, herunder Tærskel, Rampe og Maksimum for gennemsigtigheden af 3D-billedet. Vælg nu Lys for at justere lysstyrken i 3D-billedet. Eksporter de projicerede billeder, og gem dem som TIFF-filer.Brug den samme software til at visualisere dybdekodningsvisningen af 3D-billederne. Klik igen på 3D-menuen, og vælg Udseende. Vælg Speciel, og vælg Dybdekodning.Eksporter de projicerede billeder, og gem dem som TIFF-filer. Dette billede fra den ortogonale sektion gennem midten af Arabidopsis skyde apikale meristem viser, at de vandrette vægge er plettet med propidium iodid i næsten alle celler på flere cellelag. En visning af en tværgående sektion gennem korpus af blomsterstand skyde apikale meristem viser, at cellerne fra XY flyet er også tydeligt afbildet.3D-projektionsvisningen afslører, at blomsterstanden meristem danner en kuppellignende struktur og er omgivet af den udviklende blomst primordia. Dette billede fra den ortogonale sektion gennem midten af tomat skyde apikale meristem viser også, at de vandrette vægge er plettet med propidium iodid på flere cellelag, selv om propidium iodid signal fra den dybe indre region er lidt lavere. Et billede fra en tværgående sektion gennem de dybe lag af vegetativt skyde apikale meristem afslører cellerne fra XY fly og grænsen dannet mellem vegetativ meristem og blad primordia.3D-projektionsvisningen kan yderligere give et omfattende overblik over formen og tilrettelæggelsen af det vegetative meristem fra tomat. Vist her er en ortogonal udsigt gennem midten af sojabønner skyde apikale meristem og en 3D projektion af samme skyde apikale meristem. Den kuppel-lignende vegetative meristem og dens afledte nye blade primordia er også observerbare.Propidium iodid kan nemt plette beskadigede eller døde celler, hvilket i høj grad vil påvirke kvaliteten af billeder, så det er vigtigt at undgå fysiske skader, mens du forbereder skyde apikale meristem prøver.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Levende-billeddannelse af<em&gt; Drosophila</em&gt; Puppe Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In vitro Differentiering af Ældre -myofibre til Live Imaging

Skeletal muscles are composed of myofibers, the biggest cells in the mammalian body and one of the few syncytia. How the complex and evolutionarily ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Lev Konfokal Imaging af Udvikling Arabidopsis Blomster

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

A Simple Chamber for Long-term Confocal Imaging of Root and Hypocotyl Development

En simpel afdeling til langvarig konfokal billeddannelse af rod- og hypokotyludvikling

Several aspects of plant development, such as lateral root morphogenesis, occur on time spans of several days. To study underlying cellular and ...

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Langsigtet Live-Imaging af<em&gt; Drosophila</em&gt; Disc Eye

Live imaging provides the ability to continuously track dynamic cellular and developmental processes in real time. Drosophila larval imaginal discs have ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule dyrkning for Live-celle Imaging af Zygote polarisering og Embryo mønstre i Arabidopsis thaliana

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Levende celle billeddannelse af kromosom Segregation under mitosen

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Levende billeddannelse og analyse af muskelsammentrækninger i Drosophila embryo

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging af Microtubule Cytoskeleton og mikromekanisk manipulation af Arabidopsis Skyd Apical Meristem

Understanding cell and tissue level regulation of growth and morphogenesis has been at the forefront of biological research for many decades. Advances in ...