Name: confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species
Uploaded: 2019-03-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Les auteurs remercient Purdue Bindley Bioscience Center Imaging Facility pour accéder aux microscope confocal à balayage laser et le support technique, et les auteurs apprécient l’aide de Andy Schaber dans les installations d’imagerie Purdue Bindley. Cette activité a été financée par l’Université de Purdue dans le cadre du carrefour de AgSEED pour soutenir l’Agriculture et du développement Rural de l’Indiana.

1. préparation de plats médias et imagerie
<ol><li>Plaques de MS : ajouter 0,5 x milieu de Murashige et Skoog MS moyen, 1 % d’agar dans l’eau désionisée et ensuite ajuster le pH de 5,8 à l’aide de la solution d’hydroxyde de potassium (facultatif : ajouter 1 % de saccharose pour la culture de plantes à long terme). Plaques d’autoclave et verser.</li>
	<li>Imagerie des plats : remplir des boîtes de pétri en plastique (6 cm de large, 1,5 cm de profondeur) de 0,5 à 0,8 cm avec 1,5 % agarose fondu.</li...

<ol>
	<li>Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+cell+division+patterns+in+developing+plants.">Genetic control of cell division patterns in developing plants.</a> Cell. 88 (3), 299-308 (1997).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+arabinosyltransferases+controls+shoot+meristem+size+in+tomato.">A cascade of arabinosyltransferases controls shoot meristem size in tomato.</a> Nature Genetics. 47 (7), 784-792 (2015).</li><li>Bommert, P., Nagasawa, N. S., Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+variation+in+maize+kernel+row+number+is+controlled+by+the+FASCIATED+EAR2+locus.">Quantitative variation in maize kernel row number is controlled by the FASCIATED EAR2 locus.</a> Nature Genetics. 45 (3), 334-337 (2013).</li><li>Je, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+from+maize+organ+primordia+via+FASCIATED+EAR3+regulates+stem+cell+proliferation+and+yield+traits.">Signaling from maize organ primordia via FASCIATED EAR3 regulates stem cell proliferation and yield traits.</a> Nature Genetics. 48 (7), 785-791 (2016).</li><li>Ping, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dt2+is+a+gain-of-function+MADS-domain+factor+gene+that+specifies+semideterminacy+in+soybean.">Dt2 is a gain-of-function MADS-domain factor gene that specifies semideterminacy in soybean.</a> Plant Cell. 26 (7), 2831-2842 (2014).</li><li>Vaughan, J. G., Jones, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+angiosperm+inflorescence+apex.">Structure of the angiosperm inflorescence apex.</a> Nature. 171, 751 (1953).</li><li>Sijacic, P., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+from+live-imaging+in+shoot+meristem+development.">Novel insights from live-imaging in shoot meristem development.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 52 (4), 393-399 (2010).</li><li>Tax, F. E., Durbak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meristems+in+the+movies:+live+imaging+as+a+tool+for+decoding+intercellular+signaling+in+shoot+apical+meristems.">Meristems in the movies: live imaging as a tool for decoding intercellular signaling in shoot apical meristems.</a> Plant Cell. 18 (6), 1331 (2006).</li><li>Grandjean, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+cell+division,+cell+growth,+and+differentiation+at+the+shoot+apical+meristem+in+Arabidopsis.">In vivo analysis of cell division, cell growth, and differentiation at the shoot apical meristem in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 16 (1), 74-87 (2004).</li><li>Heisler, M. G., Ohno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-imaging+of+the+Arabidopsis+inflorescence+meristem.">Live-imaging of the Arabidopsis inflorescence meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1110, 431-440 (2014).</li><li>Tobin, C. J., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+to+study+cell+division+orientation+in+the+Arabidopsis+shoot+meristem.">Real-time lineage analysis to study cell division orientation in the Arabidopsis shoot meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1370, 147-167 (2016).</li><li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+Imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers.">Live confocal Imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55156 (2017).</li><li>Prunet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds.">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. 419, 114-120 (2016).</li><li>Reddy, G. V., Heisler, M. G., Ehrhardt, D. W., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+reveals+oriented+cell+divisions+associated+with+morphogenesis+at+the+shoot+apex+of+Arabidopsis+thaliana.">Real-time lineage analysis reveals oriented cell divisions associated with morphogenesis at the shoot apex of Arabidopsis thaliana.</a> Development. 131, 4225-4237 (2004).</li><li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment.">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 773 (2017).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HAIRY+MERISTEM+with+WUSCHEL+confines+CLAVATA3+expression+to+the+outer+apical+meristem+layers.">HAIRY MERISTEM with WUSCHEL confines CLAVATA3 expression to the outer apical meristem layers.</a> Science. 361 (6401), 502-506 (2018).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+plant+stem+cell+function+by+conserved+interacting+transcriptional+regulators.">Control of plant stem cell function by conserved interacting transcriptional regulators.</a> Nature. 517 (7534), 377-380 (2015).</li><li>Nimchuk, Z. L., Zhou, Y., Tarr, P. T., Peterson, B. A., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+stem+cell+maintenance+by+transcriptional+cross-regulation+of+related+receptor+kinases.">Plant stem cell maintenance by transcriptional cross-regulation of related receptor kinases.</a> Development. 142 (6), 1043 (2015).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LEAFY+Controls+Auxin+Response+Pathways+in+Floral+Primordium+Formation.">LEAFY Controls Auxin Response Pathways in Floral Primordium Formation.</a> Science Signaling. 6 (270), ra23 (2013).</li><li>Truernit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+whole-mount+imaging+of+three-dimensional+tissue+organization+and+gene+expression+enables+the+study+of+phloem+development+and+structure+in+Arabidopsis.">High-resolution whole-mount imaging of three-dimensional tissue organization and gene expression enables the study of phloem development and structure in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 20 (6), 1494-1503 (2008).</li></ol>

Nous décrivons ici une méthode d’imagerie simple qui peut être appliquée à l’étude des méristèmes apicaux de différentes plantes avec une modification mineure, ouvrant une nouvelle voie pour étudier la régulation de méristème à des stades végétatifs et reproducteurs de plantes modèles et cultures. Contrairement à la SEM et les méthodes de coloration histologiques, ce protocole peut aider à révéler la surface vue tant les structures cellulaires internes des SAMs, sans la nécessité d’une fixat...

Le méristème de la plante contient un réservoir de cellules souches indifférenciées et maintient en permanence la croissance des organes végétaux et développement1. Pendant le développement post-embryonnaire, presque tous les tissus hors sol d’une plante sont dérivés de méristème apical (SAM). Dans les cultures, l’activité et la taille de la SAM et ses dérivées méristèmes floraux sont étroitement associées aux nombreuses caractéristiques agronomiques telles que shoot architecture, production de fruits et rendement en graines. Par exemple, chez la tomate, un SAM élargi entraîne une augmentation de la pousse et l’inflorescence ramification et donc des résultats dans la production d’appoint fleurs et fruits organes2. Chez le maïs, une augmentation de taille de SAM mène à un plus grand nombre de graines et le rendement total3,4. Chez le soja, l’indétermination de méristème est également étroitement associée à l’architecture de shoot et rendement5.
La morphologie et l’anatomie de SAMs peuvent être caractérisés par plusieurs méthodes différentes, y compris la coupe/coloration histologique et le scanning electron microscopy (SEM)6, qui ont grandement contribué à améliorer la recherche de méristème en fournissant la vue en coupe ou une vue de surface tridimensionnelle (3D) de SAMs. Toutefois, les deux méthodes prennent beaucoup de temps, impliquant plusieurs étapes expérimentales de la préparation de l’échantillon à l’acquisition de données, et ces méthodes dépendent principalement des échantillons fixes. Les progrès récents en microscopie confocale à balayage laser ont réussi à surmonter ces limitations et nous fournissent un outil puissant pour étudier la structure cellulaire et les processus de développement de l’usine tissus et organes7,8. Par optique plutôt que le tissu physique sectionnement, confocale microscopie permet la collecte d’une série d’images de z-pile et la reconstruction 3D subséquente de l’échantillon par le biais de logiciels d’analyse image.
Ici, nous décrivons une procédure efficace pour étudier à l’intérieur et des structures superficielles des vivants SAMs de différents plant des essences à l’aide de laser, microscopie confocale, qui potentiellement permet aux chercheurs d’accomplir tous les expérimentale processus au sein aussi court que 20 minutes. Différente des autres méthodes publiées pour l’imagerie confocale direct d’Arabidopsis inflorescence SAMs9,10,11,12,13,14, 15 et Arabidopsis fleurs12,13, nous démontrons que ce protocole est très efficace pour l’étude non seulement les méristèmes d’inflorescence de l’espèce modèle mais aussi de la pousse végétative méristèmes apicaux de différentes cultures, telles que la tomate et le soja. Cette méthode ne repose pas sur des marqueurs fluorescents transgéniques et peut potentiellement être appliquée afin d’étudier les méristèmes de beaucoup de différentes espèces et cultivars. En outre, nous présentons également l’étapes permettant d’afficher et d’analyser les différentes SAMs dans une vue 3D de traitement d’image simple. Pris ensemble, cette méthode simple facilitera les chercheurs à mieux comprendre la structure et le processus de développement des méristèmes d’organismes modèles et des récoltes.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:968px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:283px;">Agar Phyto</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSA20300-1000</td>
			<td style="width:391px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Agarose</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">AGLE-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:176px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:119px;">RS-4955</td>
			<td>Dumont #5SF Super Fine Forceps Inox Tip Size .025 X .005mm, for dissecting shoot apices.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">LSM 880 Upright Confocal Microscope&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Murashige &#38; Skoog MS medium</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSM10200-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Plan APO 20x/1.1 water dipping lens</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Plastic petri dishes 100 mm X 15 mm</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229694</td>
			<td style="width:391px;">Use as making MS plates</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Plastic petri dishes60 mm X 15</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229665</td>
			<td>Use as imaging dishes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propagation Mix</td>
			<td style="width:176px;">Sungro Horticulture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propidium iodide</td>
			<td style="width:176px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">440300250</td>
			<td>1 mg/mL solution in water, to stain the cell walls</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Razor blade</td>
			<td style="width:176px;">PERSONNA&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62-0179</td>
			<td style="width:391px;">For cutting shoot apex from plants</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:176px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Tissue</td>
			<td style="width:176px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Zen black</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species

Les fonctions de méristème apical (SAM) pousse comme un réservoir des cellules souches conservées et il génère presque tous les tissus hors sol pendant le développement post-embryonnaire. L’activité et la morphologie des SAMs déterminent des caractéristiques agronomiques importants, tels que l’architecture de shoot, taille et nombre d’organes reproducteurs et surtout, le rendement en grain. Ici, nous fournissons un protocole détaillé permettant d’analyser aussi bien la morphologie de la surface et la structure cellulaire interne du vivant SAMs provenant de différentes espèces par le biais de microscope confocal à balayage laser. Tout le processus depuis la préparation de l’échantillon à l’acquisition d’images de haute résolution en trois dimensions (3D) peut être accompli au sein aussi court que 20 minutes. Nous démontrons que ce protocole est très efficace pour l’étude non seulement l’inflorescence SAMs de l’espèce modèle, mais aussi les méristèmes végétatives de différentes cultures, fournissant un outil simple mais puissant pour étudier l’organisation et le développement de méristèmes dans différentes espèces de plantes.

Pour évaluer l’efficacité de notre protocole et d’étudier la morphologie des méristèmes de différentes espèces, nous avons effectué des expériences d’imagerie confocale direct sur le méristème de l’inflorescence de l’Arabidopsis et les méristèmes végétatives de tomate et soja. Dans cette étude, Arabidopsis écotype Landsberg erecta, cultivar de tomate Micro-Tom et le cultivar de soja Williams 82 ont été utilisés comme exemples.
<...

Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species

Imagerie confocale direct des méristèmes apicaux de différentes espèces de plantes

Ce protocole présente comment vivre image et analyser les méristèmes apicaux de différentes espèces de plantes à l’aide de la microscopie confocale à balayage laser.

The shoot apical meristem (SAM) functions as a conserved stem cell reservoir and it generates almost all aboveground tissues during the postembryonic ...

Les mésentèmes apicals contrôlent la croissance et la reproduction des plantes. Cette méthode nous aide à étudier la morphologie et les structures internes des meristems apiques de pousse non seulement dans les espèces modèles, mais aussi dans différentes cultures. Cette technique est une procédure très efficace.Le meristem apical de pousse peut être directement visualisé dans une résolution cellulaire élevée sans n’importe quelle fixation d’échantillon laborieux et étapes de sectionnement de tissu. Pour commencer, cultivez des arabidopsis, des tomates et des plants de soja, comme le détaille le protocole du texte. Coupez l’apex de pousse d’inflorescence des usines boulonnées d’Arabidopsis.Tenez la partie basale de la tige principale et utilisez des forceps pour enlever autant d’organes floraux plus anciens que possible de la tige principale. Continuez à enlever le reste des fleurs dans le champ du microscope stéréo jusqu’à ce que le meristem apical de pousse puisse être vu des oculaires. Pour voir les meristems apical de pousse végétative de tomate ou de soja, disséquez les cotyléons, les feuilles, et les racines de la plante.Maintenez les hypocotyles de la plante sous le microscope stéréo, et utilisez des forceps pour disséquer davantage les feuilles et les primordies foliiques couvrant les mésentèmes apiques de pousse végétative. Pipette 50 microlitres de solution d’iodure de propidium dans une boîte de Pétri propre et vide. Tremper l’ensemble de l’apex de pousse disséqué dans le colorant pendant deux minutes.Pendant le processus de coloration, immerger l’ensemble de l’inflorescence tirer meristem apical ou végétatif pousse meristem apical dans la solution iodure propidium pour atteindre la coloration uniforme. Rincer le sommet de la pousse tachée deux fois dans de l’eau stérile et déionisée. Maintenant, percer un trou au centre d’un plat d’imagerie préparé à l’aide de forceps, et coller la pousse tachée apex droit dans le milieu.Remplissez le plat d’imagerie d’eau stérile et déionisée pour immerger complètement l’échantillon. Visualisez l’échantillon au microscope stéréo. Pipette de haut en bas pour enlever les bulles d’air emprisonnées autour du meristem.Ensuite, ajustez l’angle de la tige dans l’agar pour vous assurer que le meristem apical de pousse est entièrement visible d’en haut. Maintenant, placez le plat d’imagerie sur l’étape de l’échantillon du microscope confocal. Abaissez la lentille qui plonge l’eau et soulevez le stade de l’échantillon du microscope pour laisser la pointe de la lentille plonger dans l’eau.Ouvrez le logiciel de microscope confocal, et utilisez les oculaires pour localiser et se concentrer sur le meristem apique de pousse dans le champ lumineux. Exploitez la fonction Acquisition dans le logiciel de microscope confocal. Démarrez le mode live pour afficher l’échantillon à partir de l’écran de l’ordinateur, et configurez tous les paramètres de l’expérience de balayage laser.Lors de l’ajustement des paramètres, utilisez la fonction Indicateur de plage pour définir si le signal est saturé ou non. Le même logiciel qui a été utilisé pour l’acquisition d’imagerie peut être utilisé pour visualiser une projection transparente tridimensionnelle. Ouvrez le fichier confocal d’origine, cliquez sur le menu 3D et sélectionnez Transparent pour générer une vue de projection 3D.En option, sélectionnez Transparence pour ajuster trois paramètres de la projection, y compris Threshold, Ramp et Maximum pour la transparence de l’image 3D. Maintenant, sélectionnez Lumière pour ajuster la luminosité de l’image 3D. Exportez les images projetées et enregistrez-les sous forme de fichiers TIFF.Pour visualiser la vue de codage en profondeur des images 3D, utilisez le même logiciel. Encore une fois, cliquez sur le menu 3D et sélectionnez Apparence. Sélectionnez Spécial et sélectionnez Codage de profondeur.Exportez les images projetées et enregistrez-les sous forme de fichiers TIFF. Cette image de la section orthogonale au milieu de l’Arabidopsis tirer meristem apical montre que les murs horizontaux sont tachés d’iodure de propidium dans presque toutes les cellules à plusieurs couches cellulaires. Une vue d’une section transversale à travers le corpus de l’inflorescence tirer meristem apical montre que les cellules du plan XY sont également clairement image.La vue de projection 3D révèle que le meristem d’inflorescence forme une structure en forme de dôme et est entouré par la primordia de fleur en développement. Cette image de la section orthogonale au milieu du meristem apique de pousse de tomate montre également que les murs horizontaux sont souillés avec l’iodure de propidium à plusieurs couches cellulaires, bien que le signal d’iodure de propidium de la région intérieure profonde soit légèrement inférieur. Une image d’une section transversale à travers les couches profondes du meristem apical de pousse végétative révèle les cellules des plans XY et la frontière formée entre le meristem végétatif et la primordia de feuille.La vue de projection 3D peut en outre fournir une vue complète de la forme et de l’organisation du meristem végétatif de la tomate. Montré ici est une vue orthogonale à travers le milieu de la pousse de soja meristem apical et une projection 3D de la même pousse meristem apical. Le meristem végétatif en forme de dôme et sa nouvelle primordia de feuilles dérivées sont également observables.L’iodure de propidium peut facilement tacher les cellules endommagées ou mortes, ce qui influencera considérablement la qualité des images, il est donc important d’éviter tout dommage physique lors de la préparation de tirer des échantillons de mésoïsme apical.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imagerie de la<em&gt; Drosophila</em&gt; Nymphe yeux

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Recherche

Biologie du développement

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In Vitro Différenciation des myofibres matures pour l&#39; imagerie en direct

Skeletal muscles are composed of myofibers, the biggest cells in the mammalian body and one of the few syncytia. How the complex and evolutionarily ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Vivre imagerie confocale de développement Arabidopsis Fleurs

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

A Simple Chamber for Long-term Confocal Imaging of Root and Hypocotyl Development

Une chambre simple pour l&#39;imagerie confocale à long terme du développement racinaire et hypocotylique

Several aspects of plant development, such as lateral root morphogenesis, occur on time spans of several days. To study underlying cellular and ...

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

À long terme d&#39;imagerie en direct de<em&gt; drosophile</em&gt; Disc Eye

Live imaging provides the ability to continuously track dynamic cellular and developmental processes in real time. Drosophila larval imaginal discs have ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Culture de l’ovule pour vivre-cellule d’imagerie du Zygote polarisation et structuration d’embryon chez Arabidopsis thaliana

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

Imagerie en direct de la souris Fusion de palais secondaire

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Imagerie de cellules vivantes de la ségrégation des chromosomes pendant la mitose

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Imagerie et analyse en direct des contractions musculaires dans l'embryon de Drosophila

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Imagerie cellulaire en direct du cytosquelette microtubule et manipulation micromécanique de l’Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Understanding cell and tissue level regulation of growth and morphogenesis has been at the forefront of biological research for many decades. Advances in ...