Name: confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species
Uploaded: 2019-03-29T15:00:00
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Gli autori riconoscono Purdue Bindley Bioscience centro Imaging Facility per accedere al microscopio confocale a scansione laser e per il supporto tecnico, e gli autori apprezzano l'aiuto da Andy Schaber nella Purdue Bindley Imaging struttura. Questa attività è stata finanziata dalla Purdue University come parte di crocevia di AgSEED fondi per sostenere l'agricoltura e lo sviluppo rurale dell'Indiana.

1. preparazione di piatti Media e imaging
<ol><li>MS Piastre: aggiungere 0,5 x Murashige & Skoog MS medi, 1% agar in acqua deionizzata e poi regolare il pH a 5,8 utilizzando la soluzione di idrossido di potassio (facoltativo: aggiungere 1% di saccarosio per la coltivazione di piante a lungo termine). Piastre di autoclave e versare.</li>
	<li>Piatti di imaging: riempire di plastica di Petri (6 cm di larghezza, profondità 1,5 cm) a 0,5-0,8 cm con 1,5% di agarosio fuso.</li>
</ol>2. pianta crescita<...

<ol>
	<li>Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+cell+division+patterns+in+developing+plants.">Genetic control of cell division patterns in developing plants.</a> Cell. 88 (3), 299-308 (1997).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+arabinosyltransferases+controls+shoot+meristem+size+in+tomato.">A cascade of arabinosyltransferases controls shoot meristem size in tomato.</a> Nature Genetics. 47 (7), 784-792 (2015).</li><li>Bommert, P., Nagasawa, N. S., Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+variation+in+maize+kernel+row+number+is+controlled+by+the+FASCIATED+EAR2+locus.">Quantitative variation in maize kernel row number is controlled by the FASCIATED EAR2 locus.</a> Nature Genetics. 45 (3), 334-337 (2013).</li><li>Je, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+from+maize+organ+primordia+via+FASCIATED+EAR3+regulates+stem+cell+proliferation+and+yield+traits.">Signaling from maize organ primordia via FASCIATED EAR3 regulates stem cell proliferation and yield traits.</a> Nature Genetics. 48 (7), 785-791 (2016).</li><li>Ping, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dt2+is+a+gain-of-function+MADS-domain+factor+gene+that+specifies+semideterminacy+in+soybean.">Dt2 is a gain-of-function MADS-domain factor gene that specifies semideterminacy in soybean.</a> Plant Cell. 26 (7), 2831-2842 (2014).</li><li>Vaughan, J. G., Jones, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+angiosperm+inflorescence+apex.">Structure of the angiosperm inflorescence apex.</a> Nature. 171, 751 (1953).</li><li>Sijacic, P., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+from+live-imaging+in+shoot+meristem+development.">Novel insights from live-imaging in shoot meristem development.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 52 (4), 393-399 (2010).</li><li>Tax, F. E., Durbak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meristems+in+the+movies:+live+imaging+as+a+tool+for+decoding+intercellular+signaling+in+shoot+apical+meristems.">Meristems in the movies: live imaging as a tool for decoding intercellular signaling in shoot apical meristems.</a> Plant Cell. 18 (6), 1331 (2006).</li><li>Grandjean, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+cell+division,+cell+growth,+and+differentiation+at+the+shoot+apical+meristem+in+Arabidopsis.">In vivo analysis of cell division, cell growth, and differentiation at the shoot apical meristem in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 16 (1), 74-87 (2004).</li><li>Heisler, M. G., Ohno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-imaging+of+the+Arabidopsis+inflorescence+meristem.">Live-imaging of the Arabidopsis inflorescence meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1110, 431-440 (2014).</li><li>Tobin, C. J., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+to+study+cell+division+orientation+in+the+Arabidopsis+shoot+meristem.">Real-time lineage analysis to study cell division orientation in the Arabidopsis shoot meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1370, 147-167 (2016).</li><li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+Imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers.">Live confocal Imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55156 (2017).</li><li>Prunet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds.">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. 419, 114-120 (2016).</li><li>Reddy, G. V., Heisler, M. G., Ehrhardt, D. W., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+reveals+oriented+cell+divisions+associated+with+morphogenesis+at+the+shoot+apex+of+Arabidopsis+thaliana.">Real-time lineage analysis reveals oriented cell divisions associated with morphogenesis at the shoot apex of Arabidopsis thaliana.</a> Development. 131, 4225-4237 (2004).</li><li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment.">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 773 (2017).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HAIRY+MERISTEM+with+WUSCHEL+confines+CLAVATA3+expression+to+the+outer+apical+meristem+layers.">HAIRY MERISTEM with WUSCHEL confines CLAVATA3 expression to the outer apical meristem layers.</a> Science. 361 (6401), 502-506 (2018).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+plant+stem+cell+function+by+conserved+interacting+transcriptional+regulators.">Control of plant stem cell function by conserved interacting transcriptional regulators.</a> Nature. 517 (7534), 377-380 (2015).</li><li>Nimchuk, Z. L., Zhou, Y., Tarr, P. T., Peterson, B. A., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+stem+cell+maintenance+by+transcriptional+cross-regulation+of+related+receptor+kinases.">Plant stem cell maintenance by transcriptional cross-regulation of related receptor kinases.</a> Development. 142 (6), 1043 (2015).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LEAFY+Controls+Auxin+Response+Pathways+in+Floral+Primordium+Formation.">LEAFY Controls Auxin Response Pathways in Floral Primordium Formation.</a> Science Signaling. 6 (270), ra23 (2013).</li><li>Truernit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+whole-mount+imaging+of+three-dimensional+tissue+organization+and+gene+expression+enables+the+study+of+phloem+development+and+structure+in+Arabidopsis.">High-resolution whole-mount imaging of three-dimensional tissue organization and gene expression enables the study of phloem development and structure in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 20 (6), 1494-1503 (2008).</li></ol>

Qui, descriviamo un semplice metodo di imaging che possa essere applicato allo studio dei meristemi apicali di sparare da diverse piante con piccole modifiche, aprendo una nuova strada per studiare la regolazione del meristema in fasi sia vegetativi e riproduttivi in piante modello e colture. In contrasto con il SEM e metodi di colorazione istologici, questo protocollo può aiutare a rivelare sia vista di superficie e interne strutture cellulari di SAMs, senza la necessità di alta intensità di lavoro esempio fissazione...

Il meristema pianta contiene un pool di cellule staminali indifferenziate e continuamente sostiene la crescita delle piante dell'organo e sviluppo1. Durante lo sviluppo postembrionale, quasi tutti i tessuti fuori terra di un impianto sono derivati da sparare meristema apicale (SAM). Nelle colture, l'attività e la dimensione del database SAM e sua derivati meristemi floreali sono strettamente associati con molte caratteristiche agronomiche come sparare architettura, produzione di frutta e il rendimento della semente. Ad esempio, nel pomodoro, una SAM allargato causa un aumento le riprese e la ramificazione di infiorescenza e così risultati nel generare extra fiore e frutta organi2. Nel mais, un aumento nella dimensione di SAM conduce ad un più alto numero di inizializzazione e la resa totale3,4. Nella soia, l'indeterminatezza del meristema è anche strettamente associato con l'architettura di sparare e resa5.
La morfologia e l'anatomia dei Mas può essere caratterizzate da diversi metodi, tra cui sezionamento/colorazione istologica e scansione microscopia elettronica (SEM)6, entrambi i quali notevolmente hanno avanzato la ricerca di meristema fornendo la vista in sezione o una vista tridimensionale (3D) superficie SAMs. Tuttavia, entrambi i metodi sono molto tempo, che coinvolge diversi passaggi sperimentale dalla preparazione del campione per l'acquisizione di dati, e questi metodi dipendono principalmente da campioni fissati. Gli avanzamenti recenti nella tecnica di microscopia confocale a scansione laser hanno superato questi limiti e ci forniscono un potente strumento per indagare la struttura cellulare e il processo di sviluppo di pianta tessuti e organi7,8. Attraverso ottico piuttosto che fisico tessuto microscopia confocale, sezionamento consente la raccolta di una serie di immagini dello stack z e le successive ricostruzioni 3D del campione attraverso software di analisi di immagine.
Qui, descriviamo una procedura efficace per indagare sia all'interno e strutture superficiali del vivente SAMs da diverse piante mediante microscopia confocale, che potenzialmente permette ai ricercatori di compiere la sperimentale di scansione laser processo all'interno di più breve 20 minuti. Diverso da altri metodi pubblicati per live imaging confocale di Arabidopsis infiorescenza SAMs9,10,11,12,13,14, 15 e Arabidopsis fiori12,13, Qui dimostriamo che questo protocollo è altamente efficiente per studiare non solo i meristemi infiorescenza delle specie modello, ma anche la ripresa vegetativa Meristemi apicali da diverse colture, come il pomodoro e soia. Questo metodo non si basa su marcatori fluorescenti transgenici e potenzialmente può essere applicato per studiare i meristemi sparare da molte diverse specie e cultivar. Inoltre, presentiamo anche passaggi per visualizzare e analizzare diverse SAMs in una vista 3D di elaborazione delle immagini semplici. Presi insieme, questo semplice metodo faciliterà i ricercatori a comprendere meglio la struttura e il processo di sviluppo di meristemi da organismi modello e colture.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:968px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:283px;">Agar Phyto</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSA20300-1000</td>
			<td style="width:391px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Agarose</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">AGLE-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:176px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:119px;">RS-4955</td>
			<td>Dumont #5SF Super Fine Forceps Inox Tip Size .025 X .005mm, for dissecting shoot apices.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">LSM 880 Upright Confocal Microscope&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Murashige &#38; Skoog MS medium</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSM10200-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Plan APO 20x/1.1 water dipping lens</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Plastic petri dishes 100 mm X 15 mm</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229694</td>
			<td style="width:391px;">Use as making MS plates</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Plastic petri dishes60 mm X 15</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229665</td>
			<td>Use as imaging dishes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propagation Mix</td>
			<td style="width:176px;">Sungro Horticulture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propidium iodide</td>
			<td style="width:176px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">440300250</td>
			<td>1 mg/mL solution in water, to stain the cell walls</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Razor blade</td>
			<td style="width:176px;">PERSONNA&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62-0179</td>
			<td style="width:391px;">For cutting shoot apex from plants</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:176px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Tissue</td>
			<td style="width:176px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Zen black</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species

Le funzioni del meristema apicale (SAM) di sparare come un serbatoio di cellule staminali conservate ed esso genera aboveground quasi tutti i tessuti durante lo sviluppo postembrionale. L'attività e la morfologia dei Mas determinare importanti caratteristiche agronomiche, quali sparare architettura, dimensioni e numero di organi riproduttivi e soprattutto, la produzione di granella. Qui, forniamo un protocollo dettagliato per analizzare sia la morfologia superficiale e la struttura cellulare interna del vivente SAMs da specie diverse attraverso il microscopio confocale a scansione laser. L'intera procedura dalla preparazione del campione per l'acquisizione di immagini tridimensionali ad alta risoluzione (3D) può essere eseguita entro 20 minuti più breve. Dimostriamo che questo protocollo è altamente efficiente per studiare non solo l'infiorescenza SAMs delle specie modello ma anche meristemi vegetativi da colture diverse, fornendo uno strumento semplice ma potente per studiare l'organizzazione e lo sviluppo di Meristemi attraverso diverse specie vegetali.

Per valutare l'efficienza del nostro protocollo e per esplorare la morfologia dei meristemi da specie diverse, abbiamo effettuato esperimenti dal vivo imaging confocale sul meristema infiorescenza da Arabidopsis e meristemi vegetativi da pomodoro e soia. In questo studio, Arabidopsis ecotipo Landsberg erecta, cultivar di pomodoro Micro-Tom e cultivar di soia 82 Williams sono stati usati come esempi.
Vi...

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Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species

Formazione immagine confocal Live dei meristemi apicali riprese da diverse specie di piante

Questo protocollo presenta come immagine live e analizzare i meristemi apicali di sparare da specie diverse di piante mediante microscopia confocale a scansione laser.

The shoot apical meristem (SAM) functions as a conserved stem cell reservoir and it generates almost all aboveground tissues during the postembryonic ...

I meristemi apicici controllano la crescita e la riproduzione delle piante. Questo metodo ci aiuta a indagare la morfologia e le strutture interne dei meristemi apicali di germogli non solo nelle specie modello ma anche in diverse colture. Questa tecnica è una procedura molto efficiente.Il meristem apicale shoot può essere visualizzato direttamente in un'alta risoluzione cellulare senza alcuna fissazione del campione ad alta intensità di lavoro e passaggi di sezionamento dei tessuti. Per iniziare, coltiva piante di Arabidopsis, pomodoro e soia come descritto nel protocollo di testo. Tagliare l'apice del germoglio di infiorescenza dalle piante di Arabidopsis imbullonato.Tenere la parte basale del gambo principale e utilizzare le forcep per rimuovere il maggior numero possibile di organi floreali più vecchi dal gambo principale. Continuare a rimuovere il resto dei fiori nel campo del microscopio stereo fino a quando il meristem apicico shoot può essere visualizzato dagli oculari. Per visualizzare i meristemi apicale del germoglio vegetativo dal pomodoro o dalla soia, sezionare i cotiledoni, le foglie e le radici della pianta.Tenere gli ipocotili della pianta al microscopio stereo e utilizzare le forcep per sezionare ulteriormente le foglie e la primordia fogliare che coprono i meristemi apicali del germoglio vegetativo. Pipetta 50 microlitri di soluzione di ioduro di propidio in una piastra di Petri pulita e vuota. Immergere l'intero apice del germoglio sezionato nella tintura per due minuti.Durante il processo di colorazione, immergere l'intero meristem apico del germoglio di infiorescenza o nel meristem apicico del germoglio vegetativo nella soluzione di ioduro propidio per ottenere una colorazione uniforme. Risciacquare l'apice del germoglio macchiato due volte in acqua sterile e deionizzata. Ora, perforare un buco al centro di un piatto di imaging preparato usando le forcep e attaccare l'apice del germoglio macchiato in posizione verticale nel mezzo.Riempire il piatto di imaging con acqua sterile e deionizzata per immergere completamente il campione. Visualizzare il campione attraverso il microscopio stereo. Pipetta su e giù per rimuovere le bolle d'aria intrappolate intorno al meristem.Quindi, regolare l'angolo dello stelo nell'agar per assicurarsi che il meristem apicico di tiro sia completamente visibile dall'alto. Ora, posizionare la scheda di imaging sullo stadio campione del microscopio confocale. Abbassare l'obiettivo di immersione in acqua e sollevare lo stadio del campione del microscopio per lasciare che la punta dell'obiettivo si tuffi nell'acqua.Aprire il software al microscopio confocale e utilizzare gli oculari per individuare e concentrarsi sul meristem apicico shoot nel campo luminoso. Utilizzare la funzione Acquisition nel software al microscopio confocale. Avviare la modalità live per visualizzare l'esempio dallo schermo del computer e impostare tutti i parametri per l'esperimento di scansione laser.Quando si regolano i parametri, utilizzare la funzione Indicatore intervallo per definire se il segnale è saturo o meno. Lo stesso software utilizzato per l'acquisizione di immagini può essere utilizzato per visualizzare una proiezione trasparente tridimensionale. Aprite il file confocale originale, fate clic sul menu 3D e selezionate Trasparente (Transparent) per generare una vista di proiezione 3D.Facoltativamente, selezionate Trasparenza (Transparency) per regolare tre parametri della proiezione, tra cui Soglia, Rampa e Massimo per la trasparenza dell'immagine 3D. Ora, selezionare Luce per regolare la luminosità dell'immagine 3D. Esportare le immagini proiettate e salvarle come file TIFF.Per visualizzare la visualizzazione della codifica di profondità delle immagini 3D, utilizzare lo stesso software. Anche in questo caso, fare clic sul menu 3D e selezionare Aspetto. Selezionate Speciale (Special) e Codifica profondità (Depth Coding).Esportare le immagini proiettate e salvarle come file TIFF. Questa immagine dalla sezione ortogonale attraverso il centro dell'Arabidopsis spara meristem apicale mostra che le pareti orizzontali sono macchiate di ioduro di propidio in quasi tutte le cellule a strati cellulari multipli. Una vista di una sezione trasversale attraverso il corpus dell'infiorescenza spara meristem apicale mostra che anche le cellule del piano XY sono chiaramente immagini.La vista di proiezione 3D rivela che il meristem dell'infiorescenza forma una struttura a cupola ed è circondato dal primordia dei fiori in via di sviluppo. Questa immagine dalla sezione ortogonale attraverso il centro del meristem apicale del germoglio di pomodoro mostra anche che le pareti orizzontali sono macchiate di ioduro di propidio a più strati cellulari, sebbene il segnale di ioduro propidio dalla regione interna profonda sia leggermente inferiore. Un'immagine di una sezione trasversale attraverso gli strati profondi del meristem apicali di tiro vegetativo rivela le cellule dei piani XY e il confine formato tra il meristem vegetativo e il primordia fogliare.La vista di proiezione 3D può inoltre fornire una visione completa della forma e dell'organizzazione del meristem vegetativo dal pomodoro. Qui è mostrata una vista ortogonale attraverso il mezzo del meristem apicale del germoglio di soia e una proiezione 3D dello stesso meristem apicale di ripresa. Sono osservabili anche il meristem vegetativo a cupola e la sua nuova primordia fogliare derivata.Lo ioduro di propidio può facilmente macchiare le cellule danneggiate o morte, il che influenzerà notevolmente la qualità delle immagini, quindi è importante evitare qualsiasi danno fisico durante la preparazione di campioni meristem apicali.

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