Name: confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species
Uploaded: 2019-03-29T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Författarna erkänner Purdue Bindley Bioscience Center Imaging anläggning för att komma åt lasern skanning confocal Mikroskop och tekniskt stöd, och författarna uppskattar hjälpen från Andy Schaber i Purdue Bindley Imaging anläggningen. Denna aktivitet finansierades av Purdue University som en del av AgSEED vägskäl finansiering för att stödja Indianas jordbruk och landsbygdens utveckling.

1. Media och imaging rätter förberedelse
<ol><li>MS plattor: Tillsätt 0,5 x Murashige & Skoog MS medium, 1% agar i avjoniserat vatten och sedan justera pH-värdet till 5,8 med kaliumhydroxid (valfritt: Lägg till 1% sackaros för den långsiktiga växt växer). Autoklav och häll plattor.</li>
	<li>Imaging rätter: Fyll petriskålar av plast (6 cm bred, 1,5 cm djup) till 0,5-0,8 cm med 1,5% smält agaros.</li>
</ol>2. växternas tillväxt
<ol><li>
Arabidopsis tillväxt<ol>
<li>Så ...

<ol>
	<li>Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+control+of+cell+division+patterns+in+developing+plants.">Genetic control of cell division patterns in developing plants.</a> Cell. 88 (3), 299-308 (1997).</li><li>Xu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cascade+of+arabinosyltransferases+controls+shoot+meristem+size+in+tomato.">A cascade of arabinosyltransferases controls shoot meristem size in tomato.</a> Nature Genetics. 47 (7), 784-792 (2015).</li><li>Bommert, P., Nagasawa, N. S., Jackson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+variation+in+maize+kernel+row+number+is+controlled+by+the+FASCIATED+EAR2+locus.">Quantitative variation in maize kernel row number is controlled by the FASCIATED EAR2 locus.</a> Nature Genetics. 45 (3), 334-337 (2013).</li><li>Je, B. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+from+maize+organ+primordia+via+FASCIATED+EAR3+regulates+stem+cell+proliferation+and+yield+traits.">Signaling from maize organ primordia via FASCIATED EAR3 regulates stem cell proliferation and yield traits.</a> Nature Genetics. 48 (7), 785-791 (2016).</li><li>Ping, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dt2+is+a+gain-of-function+MADS-domain+factor+gene+that+specifies+semideterminacy+in+soybean.">Dt2 is a gain-of-function MADS-domain factor gene that specifies semideterminacy in soybean.</a> Plant Cell. 26 (7), 2831-2842 (2014).</li><li>Vaughan, J. G., Jones, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+angiosperm+inflorescence+apex.">Structure of the angiosperm inflorescence apex.</a> Nature. 171, 751 (1953).</li><li>Sijacic, P., Liu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+from+live-imaging+in+shoot+meristem+development.">Novel insights from live-imaging in shoot meristem development.</a> Journal of Integrative Plant Biology. 52 (4), 393-399 (2010).</li><li>Tax, F. E., Durbak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meristems+in+the+movies:+live+imaging+as+a+tool+for+decoding+intercellular+signaling+in+shoot+apical+meristems.">Meristems in the movies: live imaging as a tool for decoding intercellular signaling in shoot apical meristems.</a> Plant Cell. 18 (6), 1331 (2006).</li><li>Grandjean, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+analysis+of+cell+division,+cell+growth,+and+differentiation+at+the+shoot+apical+meristem+in+Arabidopsis.">In vivo analysis of cell division, cell growth, and differentiation at the shoot apical meristem in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 16 (1), 74-87 (2004).</li><li>Heisler, M. G., Ohno, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-imaging+of+the+Arabidopsis+inflorescence+meristem.">Live-imaging of the Arabidopsis inflorescence meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1110, 431-440 (2014).</li><li>Tobin, C. J., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+to+study+cell+division+orientation+in+the+Arabidopsis+shoot+meristem.">Real-time lineage analysis to study cell division orientation in the Arabidopsis shoot meristem.</a> Methods in Molecular Biology. 1370, 147-167 (2016).</li><li>Prunet, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+Imaging+of+developing+Arabidopsis+flowers.">Live confocal Imaging of developing Arabidopsis flowers.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55156 (2017).</li><li>Prunet, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds.">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. 419, 114-120 (2016).</li><li>Reddy, G. V., Heisler, M. G., Ehrhardt, D. W., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+lineage+analysis+reveals+oriented+cell+divisions+associated+with+morphogenesis+at+the+shoot+apex+of+Arabidopsis+thaliana.">Real-time lineage analysis reveals oriented cell divisions associated with morphogenesis at the shoot apex of Arabidopsis thaliana.</a> Development. 131, 4225-4237 (2004).</li><li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment.">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 773 (2017).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HAIRY+MERISTEM+with+WUSCHEL+confines+CLAVATA3+expression+to+the+outer+apical+meristem+layers.">HAIRY MERISTEM with WUSCHEL confines CLAVATA3 expression to the outer apical meristem layers.</a> Science. 361 (6401), 502-506 (2018).</li><li>Zhou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Control+of+plant+stem+cell+function+by+conserved+interacting+transcriptional+regulators.">Control of plant stem cell function by conserved interacting transcriptional regulators.</a> Nature. 517 (7534), 377-380 (2015).</li><li>Nimchuk, Z. L., Zhou, Y., Tarr, P. T., Peterson, B. A., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plant+stem+cell+maintenance+by+transcriptional+cross-regulation+of+related+receptor+kinases.">Plant stem cell maintenance by transcriptional cross-regulation of related receptor kinases.</a> Development. 142 (6), 1043 (2015).</li><li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LEAFY+Controls+Auxin+Response+Pathways+in+Floral+Primordium+Formation.">LEAFY Controls Auxin Response Pathways in Floral Primordium Formation.</a> Science Signaling. 6 (270), ra23 (2013).</li><li>Truernit, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+whole-mount+imaging+of+three-dimensional+tissue+organization+and+gene+expression+enables+the+study+of+phloem+development+and+structure+in+Arabidopsis.">High-resolution whole-mount imaging of three-dimensional tissue organization and gene expression enables the study of phloem development and structure in Arabidopsis.</a> Plant Cell. 20 (6), 1494-1503 (2008).</li></ol>

Här, vi beskriver en enkel bildgivande metod som kan tillämpas på studiet av skjuta apical meristems från olika växter med mindre modifiering, öppnar en ny väg för att studera meristem förordningen vid både vegetativ och reproduktiva faser i modell växter och grödor. I motsats till den SEM och histologiska färgning metoder, kan detta protokoll hjälpa avslöja både ytan och inre cellulära strukturer av SAMs, utan behov av arbetsintensiva prov fixering och/eller vävnad snittning steg. Detta protokoll är o...

Anläggningen meristemen innehåller en pool av odifferentierade stamceller och kontinuerligt upprätthåller växt orgel tillväxt och utveckling1. Under postembryonic utveckling härrör nästan alla aboveground vävnader av en växt som från den skjuta apical meristemen (SAM). I grödor är aktivitet och storlek av SAM och dess härledda blommig meristems tätt associerade med många agronomiska egenskaper såsom skjuta arkitektur, fruktodling och utsäde avkastning. Till exempel i tomat orsakar en utvidgad SAM en ökning av Skjut och Blomställning förgrening, och därmed resultat generera extra blomma och frukt organ2. I majs leder en ökning av SAM storlek till ett högre utsäde antal och totala avkastningen3,4. I sojabönor, den meristem obestämdhet är också nära associerat med shoot arkitekturen ger och5.
De morfologi och anatomi av SAMs kan kännetecknas av flera olika metoder, inklusive histologiska snittning/färgning och scanning electron microscopy (SEM)6, som båda har mycket avancerade meristem forskningen genom att tillhandahålla antingen avsnittsvy eller tredimensionella (3D) yta över SAMs. Men båda metoderna är tidskrävande, som inbegriper flera experimentella steg från provberedningen till dataförvärvet, och dessa metoder är främst beroende av fasta prover. Senaste framstegen inom laserscanning konfokalmikroskopi teknik har övervunnit dessa begränsningar och ger oss ett kraftfullt verktyg för att undersöka cellstruktur och utvecklingsprocess växt vävnader och organ7,8. Genom optisk snarare än fysiska vävnad snittning, confocal microscopy tillåter insamling av en serie z-stack bilder och den efterföljande 3D rekonstruktionen av provet genom bild analys programvara.
Här beskriver vi ett effektivt förfarande för att undersöka både inuti och ytstrukturer levande SAMs från olika växtarter med laserscanning konfokalmikroskopi, som potentiellt tillåter forskare att utföra alla de experimentella process inom så kort som 20 minuter. Skiljer sig från andra publicerade metoder för levande confocal avbildning av Arabidopsis Blomställning SAMs9,10,11,12,13,14, 15 och Arabidopsis blommor12,13, här visar vi att detta protokoll är mycket effektiv för att studera inte bara de Blomställning meristems av modell arter men också den vegetativa skott apical meristems från olika grödor, såsom tomat och sojabönor. Denna metod förlitar sig inte på transgena fluorescerande markörer och potentiellt kan användas för att studera de skjuta meristems från många olika arter och sorter. Dessutom introducerar vi också enkel bildbehandling steg för att visa och analysera olika SAMs i en 3D-vy. Sammantaget kommer den här enkla metoden att underlätta forskare bättre förståelse både struktur och utvecklande process för meristems från både modellorganismer och grödor.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:968px;" width="968">
	<tbody>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:283px;">Agar Phyto</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSA20300-1000</td>
			<td style="width:391px;"></td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Agarose</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">AGLE-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Forceps&#160;</td>
			<td style="width:176px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:119px;">RS-4955</td>
			<td>Dumont #5SF Super Fine Forceps Inox Tip Size .025 X .005mm, for dissecting shoot apices.</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">LSM 880 Upright Confocal Microscope&#160;</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Murashige &#38; Skoog MS medium</td>
			<td style="width:176px;">Dot Scientific Inc.</td>
			<td style="width:119px;">DSM10200-50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Plan APO 20x/1.1 water dipping lens</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:283px;">Plastic petri dishes 100 mm X 15 mm</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229694</td>
			<td style="width:391px;">Use as making MS plates</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:283px;">Plastic petri dishes60 mm X 15</td>
			<td style="width:176px;">CELLTREAT Scientific Products</td>
			<td style="width:119px;">229665</td>
			<td>Use as imaging dishes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propagation Mix</td>
			<td style="width:176px;">Sungro Horticulture</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Propidium iodide</td>
			<td style="width:176px;">Acros Organics</td>
			<td style="width:119px;">440300250</td>
			<td>1 mg/mL solution in water, to stain the cell walls</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Razor blade</td>
			<td style="width:176px;">PERSONNA&#160;</td>
			<td style="width:119px;">62-0179</td>
			<td style="width:391px;">For cutting shoot apex from plants</td>
		</tr>
		<tr height="34">
			<td height="34" style="height:35px;width:283px;">Stereomicroscope</td>
			<td style="width:176px;">Nikon</td>
			<td style="width:119px;">SMZ1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Tissue</td>
			<td style="width:176px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">82003-820</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:283px;">Zen black</td>
			<td style="width:176px;">Zeiss</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

confocal live imaging of shoot apical meristems from different plant species

Den skjuta apical meristem (SAM) fungerar som en reservoar som bevarade stamceller och det genererar nästan alla aboveground vävnader under postembryonic utveckling. Aktivitet och morfologi av SAMs avgöra viktiga agronomiska egenskaper, såsom skjuta arkitektur, storlek och antal reproduktiva organ, och viktigast av allt, korn avkastning. Här, tillhandahåller vi ett detaljerat protokoll för att analysera både ytan morfologi och inre cellstruktur levande SAMs från olika arter genom laserscanning confocal mikroskopet. Hela proceduren från provberedningen till förvärvet av högupplösta tredimensionella (3D) bilder kan åstadkommas inom så kort som 20 minuter. Vi visar att detta protokoll är mycket effektiv för att studera inte bara Blomställningen SAMs modell arter men också de vegetativa meristems från olika grödor, ger ett enkelt men kraftfullt verktyg för att studera organisation och utveckling av meristems över olika växtarter.

För att bedöma effektiviteten av våra protokoll och utforska av meristems morfologi från olika arter, har vi utfört de confocal levande imaging experiment på Blomställning meristemen från Arabidopsis och de vegetativa meristems från både tomat och sojabönor. I denna studie, Arabidopsis ekotyp Landsberg erecta, tomat av sorten Micro-Tom och sojaböna sort har Williams 82 använts som exempel.
<p class="jove_content" fo:keep-together.within-page="1"...

Watch this Scientific Journal Video about Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species at JoVE.com

Confocal Live Imaging of Shoot Apical Meristems from Different Plant Species

Confocal levande avbildning av skjuta Apical Meristems från olika växtarter

Detta protokoll presenterar hur live bild och analysera de skjuta apical meristems från olika växtarter med laserscanning konfokalmikroskopi.

The shoot apical meristem (SAM) functions as a conserved stem cell reservoir and it generates almost all aboveground tissues during the postembryonic ...

Skjut apikala meristems kontroll växttillväxt och reproduktion. Denna metod hjälper oss att undersöka morfologi och interna strukturer skjuta apikala meristems inte bara i modellen arter utan också i olika grödor. Denna teknik är ett mycket effektivt förfarande.Skjuta apikala meristem kan direkt visualiseras i en hög cellulär upplösning utan någon arbetsintensiv prov fixering och vävnad sektionering steg. Till att börja med växa Arabidopsis, tomat, och sojabönor växter som beskrivs i textprotokollet. Skär blomställningen skjuta apex från den bultade Arabidopsis växter.Håll den basala delen av huvudstammen, och använd tens för att ta bort så många äldre blomorgan som möjligt från huvudstammen. Fortsätt att ta bort resten av blommorna i fältet av stereomikroskopet tills skjuta apikala meristem kan ses från okularen. För att visa vegetativa skjuta apikala meristems från antingen tomat eller sojabönor, dissekera ut cotyledons, blad och rötter från anläggningen.Håll hypocotyls av anläggningen under stereomikroskop, och använda forceps för att ytterligare dissekera bladen och blad primordia som täcker vegetativa skjuta apical meristems. Pipett 50 mikroliter av propidium iodidlösning i en ren och tom Petriskål. Doppa hela dissekerade skjuta apex i färgämne i två minuter.Under färgningsprocessen, fördjupa hela blomställningen skjuta apikala meristem eller vegetativ skjuta apical meristem i propidium iodid lösning för att uppnå enhetlig färgning. Skölj den färgade skjuta apex två gånger i sterilt, avjoniserat vatten. Nu, genomborra ett hål i mitten av en förberedd bildbehandling skålen med hjälp av tärna, och sticka den färgade skjuta apex upprätt i mediet.Fyll bildbehandlingsfatet med sterilt, avjoniserat vatten för att helt och hållet sänka ned provet. Visa provet genom stereomikroskopet. Pipett upp och ner för att ta bort luftbubblor fångade runt meristem.Justera sedan vinkeln på stjälken i agaren för att se till att skottet apikkalt meristem är fullt synligt från direkt ovanifrån. Placera bildskålen på provstadiet i konfokalmikroskopet. Sänk vattendoppningslinsen och höj mikroskopprovet för att låta linsens spets doppa i vattnet.Öppna konfokalmikroskop programvara, och använda okular för att lokalisera och fokusera på skjuta apikala meristem i det ljusa fältet. Driva förvärvsfunktionen i programvaran confocal mikroskop. Starta live-läget för att visa provet från datorskärmen, och ställ in alla parametrar för laserscanningsexperimentet.När du justerar parametrarna använder du funktionen Räckviddsindikator för att definiera om signalen är mättad eller inte. Samma programvara som användes för bildframställning förvärv kan användas för visualisering av en tredimensionell transparent projektion. Öppna den ursprungliga konfokalfilen, klicka på 3D-menyn och välj Genomskinlig för att generera en 3D-projektionsvy.Välj valfritt, välj Genomskinlighet för att justera tre parametrar för projektionen, inklusive Threshold, Ramp och Maximum för genomskinligheten i 3D-bilden. Nu väljer du Ljus för att justera ljusstyrkan för 3D-bilden. Exportera de projicerade bilderna, och spara dem som TIFF-filer.För visualisering av djupkodningsvyn av 3D-bilderna använder du samma programvara. Klicka igen på 3D-menyn och välj Utseende. Välj Special och välj Djupkodning.Exportera de projicerade bilderna, och spara dem som TIFF-filer. Denna bild från den ortogonala sektionen genom mitten av Arabidopsis skjuta apikala meristem visar att de horisontella väggarna färgas med propidium iodid i nästan alla celler vid flera celllager. En vy över en tvärsektion genom blomställningens korpus visar att cellerna från XY-planet också är tydligt avbildade.3D-projektionsvyn avslöjar att blomställningens meristem bildar en kupolliknande struktur och omges av den utvecklande blomprdomen. Denna bild från den ortogonala sektionen genom mitten av tomatskottet apikala meristem visar också att de horisontella väggarna färgas med propidium-iodid vid flera cellskikt, även om propidium-iodidsignalen från den djupa inre regionen är något lägre. En bild från ett tvärsnitt genom de djupa lagren av vegetativa skjuta apical meristem avslöjar cellerna från XY plan och gränsen bildas mellan vegetativa meristem och blad primordia.3D-projektionen beskådar kan främja att ge ett omfattande beskådar av forma och organisationen av den vegetative meristemen från tomat. Visas här är en ortogonal syn genom mitten av sojabönor skjuta apikala meristem och en 3D-projektion av samma skjuta apikala meristem. Den kupolliknande vegetativa meristem och dess härledda nya blad primordia är också observerbara.Propidium iodid kan lätt fläckskadade eller döda celler, som kommer att i hög grad påverka kvaliteten på bilderna, så det är viktigt att undvika fysisk skada samtidigt förbereda skjuta apikala meristem prover.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-avbildning av<em&gt; Drosophila</em&gt; PUPP Eye

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In Vitro Differentiation of Mature Myofibers for Live Imaging

In vitro-differentiering av mogna Myofibers för Live Imaging

Skeletal muscles are composed of myofibers, the biggest cells in the mammalian body and one of the few syncytia. How the complex and evolutionarily ...

Live Confocal Imaging of Developing Arabidopsis Flowers

Live Confocal Imaging för att utveckla Arabidopsis blommor

The study of plant growth and development has long relied on experimental techniques using dead, fixed tissues and lacking proper cellular resolution. ...

A Simple Chamber for Long-term Confocal Imaging of Root and Hypocotyl Development

En enkel kammare för långsiktig konfokalbildning av rot- och hypokotylutveckling

Several aspects of plant development, such as lateral root morphogenesis, occur on time spans of several days. To study underlying cellular and ...

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Långsiktig Live avbildning av<em&gt; Drosophila</em&gt; Ögon Disc

Live imaging provides the ability to continuously track dynamic cellular and developmental processes in real time. Drosophila larval imaginal discs have ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Fröämnet odling för Live-cell Imaging av zygot polarisering och Embryo mallning i Arabidopsis thaliana.

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

Live Cell Imaging of Chromosome Segregation During Mitosis

Levande cellen avbildning av kromosomsegregering under Mitos

Chromosomes must be reliably and uniformly segregated into daughter cells during mitotic cell division. Fidelity of chromosomal segregation is controlled ...

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Levande avbildning och analys av muskelsammandragningar i Drosophila embryo

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging of Microtubule Cytoskeleton and Micromechanical Manipulation of the Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Live Cell Imaging av Microtubule Cytoskelett och mikromekanisk manipulation av den Arabidopsis Shoot Apical Meristem

Understanding cell and tissue level regulation of growth and morphogenesis has been at the forefront of biological research for many decades. Advances in ...