Name: method to obtain pattern of breathing in senescent mice through unrestrained barometric plethysmography
Uploaded: 2020-04-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Method to Obtain Pattern of Breathing in Senescent Mice through Unrestrained Barometric Plethysmography at JoVE.com

Yazarlar Angela Le, Sarah Ruby ve Marisa Mickey'e hayvan kolonilerini koruma çalışmaları için teşekkür etmek isterler. Bu çalışma 1R15 HD076379 (L.R.D.), 3R15 HD076379 (CNR'yi desteklemek için L.R.D. ve McDevitt Lisans Araştırma Bursu( BEE) tarafından finanse edilmiştir.

Tüm prosedürler Le Moyne College Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır. Hayvanların tüm kullanımı, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nda açıklanan politikalarla uyum içindedir8.
NOT: (Kritik) Deneyden önce, hayvan kullanımı için gerekli tüm onayları ve eğitimi alın. Deneycilerin uyku, sıkıntı ve/veya hareket objesi ve normal koklama ve nefes alma işaretleri de dahil olm...

<ol>
	<li>DeRuisseau, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+deficits+contribute+to+respiratory+insufficiency+in+Pompe+disease.">Neural deficits contribute to respiratory insufficiency in Pompe disease.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 106 (23), 9419-9424 (2009).</li><li>Ogier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain-derived+neurotrophic+factor+expression+and+respiratory+function+improve+after+ampakine+treatment+in+a+mouse+model+of+Rett+syndrome.">Brain-derived neurotrophic factor expression and respiratory function improve after ampakine treatment in a mouse model of Rett syndrome.</a> Journal of Neuroscience. 27 (40), 10912-10917 (2007).</li><li>Ohshima, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxic+ventilatory+response+during+light+and+dark+periods+and+the+involvement+of+histamine+H1+receptor+in+mice.">Hypoxic ventilatory response during light and dark periods and the involvement of histamine H1 receptor in mice.</a> American Journal of Physiology-Regulatory Integrative and Comparative Physiology. 293 (3), 1350-1356 (2007).</li><li>van Schaik, S. M., Enhorning, G., Vargas, I., Welliver, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+syncytial+virus+affects+pulmonary+function+in+BALB/c+mice.">Respiratory syncytial virus affects pulmonary function in BALB/c mice.</a> Journal of Infectious Diseases. 177 (2), 269-276 (1998).</li><li>Glaab, T., Taube, C., Braun, A., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Invasive+and+noninvasive+methods+for+studying+pulmonary+function+in+mice.">Invasive and noninvasive methods for studying pulmonary function in mice.</a> Respiratory Research. 8, (2007).</li><li>Loeven, A. M., Receno, C. N., Cunningham, C. M., DeRuisseau, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arterial+Blood+Sampling+in+Male+CD-1+and+C57BL/6J+Mice+with+1%+Isoflurane+is+Similar+to+Awake+Mice.">Arterial Blood Sampling in Male CD-1 and C57BL/6J Mice with 1% Isoflurane is Similar to Awake Mice.</a> Journal of Applied Physiology. , (2018).</li><li>Receno, C. N., Eassa, B. E., Reilly, D. P., Cunningham, C., DeRuisseau, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pattern+of+breathing+in+young+wild+type+and+Ts65Dn+mice+during+the+dark+and+light+cycle.">The pattern of breathing in young wild type and Ts65Dn mice during the dark and light cycle.</a> FASEB Journal. 32 (1), (2018).</li><li>Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Inistitute fpr Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , (2011).</li><li>Receno, C. N., Glausen, T. G., DeRuisseau, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saline+as+a+vehicle+control+does+not+alter+ventilation+in+male+CD-1+mice.">Saline as a vehicle control does not alter ventilation in male CD-1 mice.</a> Physiological Reports. 6 (10), (2018).</li><li>Shanksy, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+differences+in+behavioral+strategies:+Avoiding+interpretational+pitfalls.">Sex differences in behavioral strategies: Avoiding interpretational pitfalls.</a> Current Opinion in Neurobiology. 49, 95-98 (2018).</li><li>Kopp, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locomotor+activity+rhythm+in+inbred+strains+of+mice:+implications+for+behavioural+studies.">Locomotor activity rhythm in inbred strains of mice: implications for behavioural studies.</a> Behavioural Brain Research. 125 (1-2), 93-96 (2001).</li><li>Teske, J. A., Perez-Leighton, C. E., Billington, C. J., Kotz, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methodological+considerations+for+measuring+spontaneous+physical+activity+in+rodents.">Methodological considerations for measuring spontaneous physical activity in rodents.</a> American Journal of Physiology-Regulatory Integrative and Comparative Physiology. 306 (10), 714-721 (2014).</li><li>Kabir, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Respiratory+pattern+in+awake+rats:+Effects+of+motor+activity+and+of+alerting+stimuli.">Respiratory pattern in awake rats: Effects of motor activity and of alerting stimuli.</a> Physiology &amp; Behavior. 101 (1), 22-31 (2010).</li><li>Terada, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventilatory+long-term+facilitation+in+mice+can+be+observed+during+both+sleep+and+wake+periods+and+depends+on+orexin.">Ventilatory long-term facilitation in mice can be observed during both sleep and wake periods and depends on orexin.</a> Journal of Applied Physiology. 104 (2), 499-507 (2008).</li><li>Friedman, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventilatory+behavior+during+sleep+among+A/J+and+C57BL/6J+mouse+strains.">Ventilatory behavior during sleep among A/J and C57BL/6J mouse strains.</a> Journal of Applied Physiology. 97 (5), 1787-1795 (2004).</li><li>Drorbaugh, J. E., Fenn, W. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+barometric+method+for+measuring+ventilation+in+newborn+infants.">A barometric method for measuring ventilation in newborn infants.</a> Pediatrics. 16 (1), 81-87 (1955).</li><li>Seifert, E. L., Mortola, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+circadian+pattern+of+breathing+in+conscious+adult+rats.">The circadian pattern of breathing in conscious adult rats.</a> Respiration Physiology. 129 (3), 297-305 (2002).</li><li>Receno, C. N., Roffo, K. E., Mickey, M. C., DeRuisseau, K. C., DeRuisseau, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quiet+breathing+in+hindlimb+casted+mice.">Quiet breathing in hindlimb casted mice.</a> Respiratory Physiology &amp; Neurobiology. , 10 (2018).</li></ol>

Protokol, farelerde sakin bir solunum taban çizgisi nin yanı sıra merkezi apneler ve artırılmış nefesler hakkında veri toplama hakkında bilgi sağlar. Temsili sonuçlar, 10 dk sessiz bir taban çizgisinin, yaşlı farelerden oluşan bir kohort için ortalama dört 15 s nöbeti ile karşılaştırıldığında benzer bir nefes alma desenine sahip olduğunu göstermektedir. Daha da önemlisi, 15 s nöbetleri istatistiksel olarak farklı değildir, ne de bu grupların Levene testi kullanarak birbirinden varyasyon f...

UBP solunum desenleri1,2,,3,4değerlendirilmesi için ortak bir tekniktir. Bu yöntemde fareler, ana hazne (hayvanın bulunduğu yer) ile referans odası arasındaki basınç farklarının değer elde etmek için pnömonikokografyoluyla filtrelendiği kapalı bir odaya yerleştirilir. Ortaya çıkan UBP kurulumu noninvaziv ve sınırsızdır ve anestezi veya ameliyat şartı olmadan solunum önlemlerinin değerlendirilmesini sağlar. Ayrıca, bu teknik zaman içinde aynı farede birden fazla ölçüm gerektiren çalışmalar için uygundur. Solunum frekansı, gelgit hacmi ve dakika havalandırması gibi değişkenler bu yöntemle, tek bir deneme sırasında veya birkaç denemede ölçülebilir. Tüm vücut UBP de pik akışları ve solunum döngüsü süresi önlemleri sağlar. Birlikte, bu parametreler solunum deseni ölçmek. Kaydedilen solunum izleri, verilerin gözden geçirilmesini ve belirli bir süre içinde görüntülenen merkezi apne lerin sayısını saymayı da mümkün kılar. Bu sayı, nefes alma paternindeki diğer değişiklikleri ölçmek için gelgit hacmi ve inspiratuar zamanların analizi ile birlikte kullanılabilir.
Pulmoner fizyolojik parametrelerin doğrudan değerlendirilmesi için çeşitli noninvaziv pletirmografi teknikleri mevcut olmakla birlikte, tüm vücut UBP fareye en az gereksiz stres ile solunum fonksiyonu için tarama için bir yol sağlar. Gelgit orta ekspiratuar akış ölçütlerini kullanan ve aynı zamanda noninvaziv olan baş-out pletismografi, diğer birçok plethysmografi türünde (örn. çift odalı pletismografi) olduğu gibi kısıtlamaya dayanır. Bu yöntemler hava yolu duyarlılığını ölçmek için kemirgen modellerinde kullanılmış olsa da5,boyun yakalarının veya küçük bağlama tüplerinin kullanımı farelerin (diğer türlere karşı) alışması ve solunumlarını dinlenme seviyelerine döndürmesi için daha uzun sürebilir.
Optimum bir hava soluyan segment elde etmek temel karşılaştırmalar için önemli bir husustur. Ticari olarak mevcut pletismografi sistemlerinin kullanımının artması, birçok laboratuvarda nefes alma deseni verilerinin toplanmasımümkün kılmaktadır. Daha da önemlisi, nefes alma deseni toplama dönemi boyunca, özellikle fareler için değişkendir. Bununla birlikte, deneycilerin eğitim düzeyinin sonuçları şaşırtmamasını sağlamak için temel analizi standartlaştırmak gerekir. Deneysel tasarımlar arasında bir varyasyon alanı olarak hizmet veren, bir hava soluma segmenti toplamak için çeşitli yollar vardır. Bir örnek, oda1içinde daha önce tanımlanmış bir zaman kümesini izleyerek son 10-30 dk veri ortalamaiçerir, başka bir yöntem fare 5-10 dk6için gözle görülür sakin olana kadar bekleme içerir. İkinci ulaşmak için 2-3 saat sürebilir ve bazı durumlarda, fare yeterince uzun süre sakin değilse bir deneme terk edilmesi gerekebilir. Bu endişe, gözlenen davranışların daha endişeli ve heyecan verici olduğu fare suşları için özellikle önemli bir husustur7. Bu farelerin oda ortamına uyum sağlaması daha uzun sürebilir ve sadece kısa bir süre için sakin kalırlar. Taban çizgisi koleksiyonuna ayrılan süreyi sınırlamak, her fareiçin oda süresini standartlaştırır.
Denemecilerin faredeki dinlenme davranış değerlerini kapsayan ancak aynı zamanda zamanında meydana gelen uygun bir taban çizgisi edinmeleri çok önemlidir. Bu nedenle, bu raporun amacı farelerde solunum parametreleri için kısa sessiz temel değerleri elde etmek için kullanılan yöntemlerin bir açıklamasını sağlamaktır. Ayrıca, apne ve artırılmış nefes odasında ilk saat içinde ölçülebilir rapor.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1331px;" width="1330">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Carbon Dioxide Analyzer</td>
			<td style="width:135px;">AEI Technologies</td>
			<td style="width:119px;">CD-3A&#160;</td>
			<td style="width:727px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Carbon Dioxide Sensor</td>
			<td style="width:135px;">AEI Technologies</td>
			<td style="width:119px;">&#160;P-61B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Computer</td>
			<td style="width:135px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>must be compliant with Ponemah requirements</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Drierite beads</td>
			<td style="width:135px;">PermaPure LLC</td>
			<td style="width:119px;">DM-AR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Flow Control</td>
			<td style="width:135px;">AEI Technologies</td>
			<td style="width:119px;">R-1</td>
			<td>vacuum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Flowmeter</td>
			<td style="width:135px;">TSI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">4100</td>
			<td>need one per chamber and one for vacuum</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Gas Mixer</td>
			<td style="width:135px;">MCQ Instruments</td>
			<td style="width:119px;">GB-103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Gas Tanks</td>
			<td style="width:135px;">Haun</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>100% oxygen, 100% carbon dioxide, 100% nitrogen - food grade, or pre-mixed tanks for nomal room air and gas challenges</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Oxygen Analyzer</td>
			<td style="width:135px;">AEI Technologies</td>
			<td style="width:119px;">S-3A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Oxygen Sensor</td>
			<td style="width:135px;">AEI Technologies</td>
			<td style="width:119px;">&#160;N-22M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Polyurethane Tubing</td>
			<td style="width:135px;">SMC</td>
			<td style="width:119px;">TUS 0604 Y-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Ponemah Software</td>
			<td style="width:135px;">DSI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Small Rodent Chamber</td>
			<td style="width:135px;">Buxco/DSI</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Thermometer (LifeChip System)</td>
			<td style="width:135px;">Destron-Fearing</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any type of thermometer to take accurate body temperatures is appropriate, but the use of implantable chips allows for minimal disturbance to animal for taking several body temperature measurements while the animal is still in the UBP chamber&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:351px;">Transducers</td>
			<td style="width:135px;">Validyne</td>
			<td style="width:119px;">DP45</td>
			<td>need one per chamber&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:351px;">Whole Body Plethysmography System&#160;</td>
			<td style="width:135px;">Data Science International (DSI)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Includes ACQ-7700, pressure/temperature probes, etc.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

method to obtain pattern of breathing in senescent mice through unrestrained barometric plethysmography

Sınırsız barometrik pletirmografi (UBP), solunum sıklığı, gelgit hacmi ve dakika havalandırmasının rutin olarak raporlandığı farelerde solunum paternini ölçmek için kullanılan bir yöntemdir. Ayrıca, merkezi apne ve artırılmış nefes varlığı da dahil olmak üzere, solunum nöral çıkışı ile ilgili bilgi toplanabilir. UBP için önemli bir husus endişeli veya aktif davranışların en az etkisi ile bir nefes segmenti elde etmektir, solunum zorluklarına yanıt açıklamak için. Burada, yaşlı farelerde kısa ve sessiz taban çizgilerinin elde edilmesine olanak tanıyan bir protokol sıyoruz, daha uzun nefes alma nöbetlerini beklemekle karşılaştırılabilir. Farelerin bazı suşları giderek daha heyecanlı veya endişeli olabilir ve sessiz nefes alma uzun süre makul bir zaman dilimi içinde elde olmayabilir gibi kısa zaman segmentleri kullanımı değerlidir. 22 aylık fareleri UBP odasına yerleştirdik ve dakikalar arasında 4 adet 15 s sessiz nefes alma segmentini 60-120 dakika arasında, elde etmek için 2-3 saat süren daha uzun 10 dk sessiz nefes alma periyoduna karşılaştırdık. Ayrıca 30 dk'lık bir alışma dönemini takiben, sessiz nefes segmentlerinden önce merkezi apne ve artırılmış nefes sayımları elde ettik. Biz 10 dakika sessiz nefes çok daha kısa 15 s süresi kullanarak karşılaştırılabilir olduğunu göstermektedir. Ayrıca, bu 15 s sessiz nefes segmentleri kadar önde gelen zaman merkezi kökenli apne ile ilgili veri toplamak için kullanılabilir. Bu protokol, araştırmacıların belirli bir süre içinde nefes alma deseni verilerini toplamasına olanak tanır ve fareler için daha fazla heyecan verici davranış sergileyebilecek sessiz temel önlemleri uygulanabilir kılar. UBP metodolojisi kendisi, nefes alma deseni verilerini toplamak için yararlı ve noninvaziv bir yol sağlar ve farelerin birkaç zaman noktasında test edilmesine olanak tanır.

UBP sonuçları normal hava gazı altında yapılan 16 yaşlı (22 aylık) farelerde (22 aylık) solunum paterninin değerlendirilmesinde (%20.93 O2 dengeli N2)rapor edilmiştir. Analiz ilk olarak daha uzun 10 dk sessiz nefes alma segmentinin (elde etmek için 2 saat üzerinden alınan) dört kısa 15 s segmentinin ortalaması ile karşılaştırılmasını içeriyordu (60-120 dakika içinde ölçüldü). Sakin nefes almanın, aktif solunum davranışları yla tutarlı olmadığı temsili bir akış...

Watch this Scientific Journal Video about Method to Obtain Pattern of Breathing in Senescent Mice through Unrestrained Barometric Plethysmography at JoVE.com

Method to Obtain Pattern of Breathing in Senescent Mice through Unrestrained Barometric Plethysmography

Unrestrained barometrik plethysmography uyanık farelerde solunum paterni ölçmek için kullanılır. Standart bir protokol altında 15 s segmentleri sessiz nefes uzun bir süre benzer değerleri görüntülemek olduğunu göstermektedir. Bu metodoloji aynı zamanda apne ve artırılmış nefeslerin haznedeki ilk saat boyunca ölçülmesine olanak sağlar.

Kontrolsüz Barometrik Plethysmography ile Senescent Farelerde Nefes Alma Şekli Elde Etme Yöntemi

Unrestrained barometric plethysmography (UBP) is a method for quantifying the pattern of breathing in mice, where breathing frequency, tidal volume, and ...

Bu protokol farelerde solunum kalıplarını ölçmek için kullanılabilir. Daha da önemlisi, sonuçları bozabilir genetiği değiştirilmiş suşları aktif davranışların etkisini en aza indirebilirsiniz. Bu tekniğin başlıca avantajları noninvaziv olması ve anestezik veya strese neden olan kısıtlamalar kullanımını gerektirmemesidir.Tüm hortum ların ve tüplerin barometrik plethysmograph odasına bağlı olduğundan emin olarak ve bir gaz giriş tüpü ve vakum çıkış tüpünü doğrudan barometrik pletizografi odasına bağlayarak başlayın. Odaya düşük akışı kalibre etmek için, oda içine ve dışında akışı sıfıra ayarlayın ve oda içine akış tüpü kaldırın. Barometrik plethysmograph yazılımının 7700 amplifikatör kurulumundaki sıfır akışını kaydetmek için vakumu kapatın ve düşük birimli hücreye sıfır girin.Daha sonra giriş tüpünü yeniden takın ve yüksek akışı kalibre etmek ve %20,93 oksijen dengeli azot gazının gaz karıştırıcısından barometrik pletirmografi odasından akmasını sağlamak için vakum akışını açın. Ardından, dakika başına litreden akış ölçerden ölçülen giriş değerini saniyede mililitreye dönüştürün ve değeri saniyede mililitre olarak girmek için yüksek birim hücreyi tıklatın. Yüksek kal'ı çift tıklatın, zamanı üç saniyeye değiştirin ve Ölçü'ye tıklayın.Daha sonra metabolik analizörleri barometrik plethysmography yazılımına kalibre etmek için 7700 amplifikatör kurulum sekmesini açık bırakın. Metabolik analizörü kalibre etmek için, gaz karıştırıcı programında, gaz karıştırıcısını %20,93 oksijen ve %79,07 azot olarak ayarlayın. Ve metabolik analizörde, oksijen kalibrasyon seviyesini %20,93'e ve karbondioksiti %0'a ayarlayın Yüksek oksijen ve düşük karbondioksit yüzdesini ayarlamak için gaz analizörlerine uygun değerler girildikten sonra kadranı numuneye geri çevirin.Barometrik pletirmografi yazılımının ABCD 4 sekmesine tıklayın ve oksijen için C2 hattının yüksek birimi altında 20.93 girin. Yüksek cal altında, üç saniye için zaman değiştirin ve Ölçü'ye tıklayın. Karbondioksit için C3 hattının düşük kalori altında sıfır girin.Daha sonra zamanı üç saniyeye değiştirin ve düşük cal altında Ölçü'ye tıklayın. Gaz karıştırıcı programında, oksijen değerini %10'a, karbondioksit değerini %5'e değiştirin ve gaz akışının bu değerlere uyum sağlaması için birkaç dakika bekleyin. Metabolik analizörlerde, değerler kalibre edildikten sonra kadranı numuneye geri döndürmek için karbondioksiti %5'e kalibre etmek için ayarlama düğümlerini çevirin.Analizör okumalarının kararlı olup olmadığını kontrol ettikten sonra, C3'ün altındaki yüksek üniteyi tıklatın ve karbondioksit için beş girin. Ardından yüksek cal'ı üç saniyeye değiştirin ve Ölçü'ye tıklayın. C2 seçeneğinin altındaki düşük üniteyi tıklatın ve oksijen için 10 girin ve düşük cal'ı tıklatın, üç saniye girin ve Ölçü'ye tıklayın.Gaz karıştırıcısını %20,93 oksijen ve %79,07 nitrojene geri getirin ve odanın bu değerlere uyum sağlaması için birkaç dakika bekleyin. Akış karıştırıcısı ve oksijen-karbondioksit analizörlerinin düzgün performans gösterdiğini doğrulamak için sertifikalı gaz tankları ile düzenli olarak ek kalibrasyonlar çalıştırın. Metabolik analizörler kalibre edildiğinde, barometrik plethysmograph odasına bağlı akış ölçerleri yeniden kontrol edin ve hava akışını deney için uygun hızlara göre odanın içine ve dışına ayarlayın.Tüm ayarlar barometrik pletizmografi yazılımına uygulandığında, Edinme sekmesinde Kapat'ı tıklatın. Sınırsız barometrik pletizografi için fareyi ev kafesine geri döndürmeden önce farenin ağırlığını ve ilk vücut sıcaklığını kaydedin.Fareyi odaya yerleştirmeden önce boş odadan arka plandaki oksijen ve karbondioksit verilerini toplamak için 10 dakika bekleyin. İlk saat boyunca, odanın giriş ve çıkışının belirli değerlerini içeren ayrıntılı notlar alan hayvanın davranışını belgele. Oda alışkanlığının sonunda, implante edilebilir bir cihaz kullanırken her 10 dakikada bir vücut ısısı ölçümleri alarak önümüzdeki 60 dakika boyunca sessiz nefes alma segmentleri için izleyin.Genel fare davranışlarına aşina olmaya özen tutarak, böylece koklama, bakım veya keşfetme olmadan sakin nefes alma örneklerinin uygun şekilde tespit edilebilebilmelidir. Deneyin sonunda fareyi kafesine geri döndürün ve ekipmanı iyice temizleyin ve silin. Bir metabolizma analizi için, yazılımdaki metabolik paneli açın ve odanın boş olduğu andan itibaren oksijen ve karbondioksit seviyelerinin ilk 10 dakikasının ortalamasını alın.Barometrik pletirmografi yazılımının akış panelini görüntüleyin ve uygun parametreleri ayarlamak için Analyze Özniteliği'ni sağ tıklatın. Bir nefes analizi modeli için, hayvan davranışları ve akış paneli izleme hakkında notlar kullanarak sessiz nefes 15 saniye için zaman onaylamak. Ardından, veri parer sekmesinden açık parser diyaloğu altındaki saatleri girin ve yalnızca belirli 15 saniyelik ilgi alan segmentleri göstermek için Parser Görünüm Modu'nu tıklatın.Apneleri ve artırılmış nefesi analiz etmek için, açık inceleme dosyasında, parser görünüm modundan çıkın ve Sayfa Görünümü'nü tür olarak seçmek için Kurulum P3 Kurulumu ve Grafik Kurulumu'nu tıklatın ve bölme sayısı olarak beş. Eksi ikiyi düşük etiketli kutuya, ikisini de saniyede mililitre cinsinden akış ölçüleri için yüksek etiketli kutuya girin ve değişiklikleri uygulayın. Ardından akış izleme panelindeki 30 dakikalık işareti kaydırın ve fare odaya yerleştirildikten sonraki 30 ila 60 dakikalık süre boyunca apneleri ve artırılmış nefesleri elle sayın.Bu analiz için, 0,5 saniyeden daha uzun veya eşit süren askıya alınmış nefes alma süreleri apnenin göstergesidir. Artırılmış nefesler saniyede 1,25 mililitrenin üzerindeki solunum takibindeki keskin bir artışla ve ardından saniyede eksi 0,75 mililitrenin altında keskin bir düşüşle gösterilir. 22 aylık bir farede sessiz nefes almanın bu temsili akışı, nefes almanın aktif nefes alma davranışlarıyla tutarlı olmadığı bir örüntünün tipik bir örneğidir.Bu nefes alma paterni, farelerin oda koklama ve/veya tımarlama yı araştırdığı daha aktif bir segmentten dir ve bu metodoloji için kullanılan nefes alma koleksiyonu türü için ideal değildir. İki zaman noktası arasındaki olası solunum farkı modelinin değerlendirilmesi için seçilen parametre solunum frekansı, gelgit hacmi, dakika havalandırması, gelgit hacmi inspiratuar zaman oranı ve dakika havalandırması karbondioksit oranını düşüren dioksit oranıydı. Daha fazla analiz frekans, gelgit hacmi, dakika havalandırma, gelgit hacmi inspiratuar zaman oranı ve dakika havalandırma karbondioksit oranı ihraç dört 15 saniyelik temel segmentleri her biri ile yapıldı.Herhangi bir zaman noktası arasında anlamlı bir fark ve herhangi bir nefes alma ölçüsü için dört zaman segmentleri arasında değişkenlik fark bulundu. Sınırsız barometrik pletilografi protokolünün 30 ila 60 dakika sında her hayvan için gözlenen apne ve artırılmış nefes sayısının ölçülmesi, yaşlı hayvanların yüksek sayıda apne ve 30 dakikalık bir süre içinde artırılmış nefes varlığını sergilediklerini ortaya koymuştur. Araştırmacılar ayrıca bir müdahale veya tedavi sonucu solunum paterni herhangi bir değişiklik belgelemek için hipoksi veya hiperkapni gibi gaz sorunları istihdam edebilirsiniz.Bu teknik, küçük kemirgenlerde ve farklı davranış farklılıkları sergileyebilecek genetiği değiştirilmiş hayvan türlerinde nefes alma şekillerini karakterize etmek için bir araç sağlar.

Research

JoVE Journal

Behavior

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

Kauçuk El Illusion Paradigma bir Amaç Davranış Tedbir Alınması Aracı Olarak Crossmodal Congruency Görev

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Davranış

Uncovering Beat Deafness: Detecting Rhythm Disorders with Synchronized Finger Tapping and Perceptual Timing Tasks

The Beat Sağırlık Uncovering: Algılama Ritim Bozuklukları Vurma Senkronize Finger ve algısal Zamanlama Görevleri ile

A set of behavioral tasks for assessing perceptual and sensorimotor timing abilities in the general population (i.e., non-musicians) is presented here ...

The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats

Modifiye Delik Kurulu - Fareler ve Sıçanlarda Davranışı, Biliş ve Sosyal Etkileşim Ölçme

This protocol describes the modified hole board (mHB), which combines features from a traditional hole board and open field and is designed to measure ...

Psychophysical Tracking Method to Measure Taste Preferences in Children and Adults

Psikofiziksel İzleme Yöntemi Çocuklarda ve Yetişkinlerde Tat Tercihler Tedbir için

The Monell two-series, forced-choice, paired-comparison tracking method provides a reliable measure of sweet taste preferences from childhood to ...

The Rodent Psychomotor Vigilance Test (rPVT): A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

The Rodent Psychomotor Vigilance Test rPVT: A Method for Assessing Neurobehavioral Performance in Rats and Mice

Kemirgen Psikomotor teyakkuz Testi (rPVT): Sıçan ve Farelerde Nörodavranışsal Performans değerlendirilmesi için bir yöntem

The human Psychomotor Vigilance Test (PVT) is a widely used procedure for measuring changes in fatigue and sustained attention. The present article ...

Evaluating the Anti-depression Effect of Xiaoyaosan on Chronically-stressed Mice

Kronik vurguladı fareler üzerindeki Xiaoyaosan anti-depresyon etkisini değerlendirmek

In addition to the standardized use of antidepressant medications and psychotherapy, the usage of traditional Chinese medicine has lead to an overall ...

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

Drosophila sıcaklık değişiklikler uzay ve zaman içinde performansını belirlemek için otomatik yöntemi

Temperature is a ubiquitous environmental factor that affects how species distribute and behave. Different species of Drosophila fruit flies have specific ...

Modified Blood Collection from Tail Veins of Non-anesthetized Mice with a Vacuum Blood Collection System and Eyeglass Magnifier

Kuyruk damarlar bir vakum kan toplama sistemi ve gözlük büyüteç ile sigara anestezi farelerin koleksiyonundan değiştirilmiş kan

Blood sample collection is the basis of experimental animal research. It is of importance to obtain adequate blood samples for various research purposes. ...

A Laboratory Method to Measure Contagious Yawning in Rats

Rats içinde bulaşıcı esneme ölçmek için bir laboratuar yöntemi

Communication is an essential aspect of animal social life. Animals may influence one another and come together in schools, flocks, and herds. ...

Investigation into Deep Breathing through Measurement of Ventilatory Parameters and Observation of Breathing Patterns

Ventilasyon Parametrelerinin Ölçülmesi ve Solunum Paternlerinin Gözlemi Yoluyla Derin Solunumun Araştırılması

In this protocol, two deep breathing patterns were shown to 15 participants to determine an easy yet effective method of breathing exercise for future ...