Name: orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach
Uploaded: 2019-05-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach at JoVE.com

تم تمويل هذا العمل من قبل هديه سخية من الحوزة الاسره Bombeck.

لويس (RT11) و أجووتي الظلام (DA) (RT1Aa) تم شراء الفئران من الباعة التجاريين (انظر جدول المواد). وغالبا ما تستخدم هذه السلالات غير متطابقة MHC تماما لدراسة الرفض الحاد لكسب الطعم الكلوي. تم إسكان جميع الكائنات وصيانتها وفقا للمبادئ التوجيهية للمعاهد الوطنية للصحة في منشاه محدد?...

<ol>
	<li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actively+acquired+tolerance+of+foreign+cells.">Actively acquired tolerance of foreign cells.</a> Nature. 172 (4379), 603-606 (1953).</li><li>Murray, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+transplantation+(skin,+kidney,+heart)+and+the+plastic+surgeon.">Organ transplantation (skin, kidney, heart) and the plastic surgeon.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 47 (5), 425-431 (1971).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (6), e238 (2007).</li><li>Ruzza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+rats:+improved+anesthetic+and+surgical+technique.">Heterotopic heart transplantation in rats: improved anesthetic and surgical technique.</a> Transplant Proceedings. 42 (9), 3828-3832 (2010).</li><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e4143 (2012).</li><li>Lang, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoprivileged+status+of+the+liver+is+controlled+by+Toll-like+receptor+3+signaling.">Immunoprivileged status of the liver is controlled by Toll-like receptor 3 signaling.</a> Journal of Clinical Investigation. 116 (9), 2456-2463 (2006).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+of+host+progenitor+cells+in+rat+liver+transplants.">Recruitment of host progenitor cells in rat liver transplants.</a> Hepatology. 49 (2), 587-597 (2009).</li><li>Orlando, G., Soker, S., Wood, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Operational+tolerance+after+liver+transplantation.">Operational tolerance after liver transplantation.</a> Journal of Hepatolgy. 50 (6), 1247-1257 (2009).</li><li>Lodhi, S. A., Lamb, K. E., Meier-Kriesche, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+organ+allograft+survival+improvement+in+the+United+States:+the+long-term+does+not+mirror+the+dramatic+short-term+success.">Solid organ allograft survival improvement in the United States: the long-term does not mirror the dramatic short-term success.</a> American Journal of Transplantation. 11 (6), 1226-1235 (2011).</li><li>Engels, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrum+of+cancer+risk+among+US+solid+organ+transplant+recipients.">Spectrum of cancer risk among US solid organ transplant recipients.</a> Journal of the American Medical Association. 306 (17), 1891-1901 (2011).</li><li>Kasiske, B. L., Snyder, J. J., Gilbertson, D., Matas, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+mellitus+after+kidney+transplantation+in+the+United+States.">Diabetes mellitus after kidney transplantation in the United States.</a> American Journal of Transplantation. 3 (2), 178-185 (2003).</li><li>de Mattos, A. M., Olyaei, A. J., Bennett, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephrotoxicity+of+immunosuppressive+drugs:+long-term+consequences+and+challenges+for+the+future.">Nephrotoxicity of immunosuppressive drugs: long-term consequences and challenges for the future.</a> American Journal of Kidney Diseases. 35 (2), 333-346 (2000).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell-Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+A+Study+in+Rats.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell-Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: A Study in Rats.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2055-2065 (2016).</li><li>Shrestha, B., Haylor, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+rat+models+of+chronic+allograft+nephropathy:+a+review.">Experimental rat models of chronic allograft nephropathy: a review.</a> International Journal of Nephrology and Renovascular Disease. 7, 315-322 (2014).</li><li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+transplantation+of+kidney+allografts+in+sensitized+rats+after+syngeneic+hematopoietic+stem+cell+transplantation+and+fludarabine.">Successful transplantation of kidney allografts in sensitized rats after syngeneic hematopoietic stem cell transplantation and fludarabine.</a> American Journal of Transplantation. 14 (10), 2375-2383 (2014).</li><li>Grau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Complex-Type+Deposits+in+the+Fischer-344+to+Lewis+Rat+Model+of+Renal+Transplantation+and+a+Subset+of+Human+Transplant+Glomerulopathy.">Immune Complex-Type Deposits in the Fischer-344 to Lewis Rat Model of Renal Transplantation and a Subset of Human Transplant Glomerulopathy.</a> Transplantation. 100 (5), 1004-1014 (2016).</li><li>Vogelbacher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bortezomib+and+sirolimus+inhibit+the+chronic+active+antibody-mediated+rejection+in+experimental+renal+transplantation+in+the+rat.">Bortezomib and sirolimus inhibit the chronic active antibody-mediated rejection in experimental renal transplantation in the rat.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 25 (11), 3764-3773 (2010).</li><li>Fisher, B., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvascular+surgical+techniques+in+research,+with+special+reference+to+renal+transplantation+in+the+rat.">Microvascular surgical techniques in research, with special reference to renal transplantation in the rat.</a> Surgery. 58 (5), 904-914 (1965).</li><li>Mahabir, R. N., Guttmann, R. D., Lindquist, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+inbred+rat.+X.+A+model+of+"weak+histoincompatibility"+by+major+locus+matching.">Renal transplantation in the inbred rat. X. A model of "weak histoincompatibility" by major locus matching.</a> Transplantation. 8 (4), 369-378 (1969).</li><li>Wang, J. J., Hockenheimer, S., Bickerstaff, A. A., Hadley, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+transplantation+procedure.">Murine renal transplantation procedure.</a> Journal of Visualized Experiments. (29), e1150 (2009).</li><li>Bickerstaff, A. A., Wang, J. J., Pelletier, R. P., Orosz, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+allografts:+spontaneous+acceptance+is+associated+with+regulated+T+cell-mediated+immunity.">Murine renal allografts: spontaneous acceptance is associated with regulated T cell-mediated immunity.</a> Journal of Immunology. 167 (9), 4821-4827 (2001).</li><li>Silber, S. J., Crudop, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+in+inbred+rats.">Kidney transplantation in inbred rats.</a> American Journal of Surgery. 125 (5), 551-553 (1973).</li><li>D'Silva, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+kidney+transplantation+update+with+special+reference+to+vesical+calculi.">Rat kidney transplantation update with special reference to vesical calculi.</a> Microsurgery. 11 (2), 169-176 (1990).</li><li>Yin, M., Booster, M. H., Bogaard, A. E. J. M., Kootstra, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+technique+to+harvest+two+kidneys+from+one+donor+rat+for+transplantation.">A simple technique to harvest two kidneys from one donor rat for transplantation.</a> Lab Animal. 28 (4), 387-390 (1994).</li><li>Lopez-Neblina, F., Toledo-Pereyra, L. H., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrarapid+orthotopic+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">Ultrarapid orthotopic technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 15 (4), 274-278 (1994).</li><li>Blom, D., Orloff, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+more+versatile+and+reliable+method+for+renal+transplantation+in+the+rat.">A more versatile and reliable method for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 18 (4), 267-269 (1998).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Kline, R., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A., Schwartz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+osmolality-low+pH+flush+solutions+improve+renal+transplant+function+in+rats.">High osmolality-low pH flush solutions improve renal transplant function in rats.</a> Urology Research. 19 (2), 81-86 (1991).</li><li>Fray, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+by+which+renin+secretion+from+perfused+rat+kidneys+is+stimulated+by+isoprenaline+and+inhibited+by+high+perfusion+pressure.">Mechanism by which renin secretion from perfused rat kidneys is stimulated by isoprenaline and inhibited by high perfusion pressure.</a> The Journal of Physiology. 308, 1-13 (1980).</li><li>Fry, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+vascular+endothelial+changes+associated+with+increased+blood+velocity+gradients.">Acute vascular endothelial changes associated with increased blood velocity gradients.</a> Circulation Research. 22 (2), 165-197 (1968).</li><li>Pahlavan, P. S., Smallegange, C., Adams, M. A., Schumacher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+procedures+in+rats:+assessments,+complications,+and+management.">Kidney transplantation procedures in rats: assessments, complications, and management.</a> Microsurgery. 26 (5), 404-411 (2006).</li><li>Savas, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat--a+new+simple,+non-suture+technique.">Renal transplantation in the rat--a new simple, non-suture technique.</a> Urology Research. 13 (2), 91-93 (1985).</li><li>Fabre, J., Lim, S. H., Morris, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat:+details+of+a+technique.">Renal transplantation in the rat: details of a technique.</a> The Austalian and New Zealand Journal of Surgery. 41 (1), 69-75 (1971).</li><li>Cameron, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell+Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+II,+Study+in+Miniature+Swine.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: II, Study in Miniature Swine.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2066-2076 (2016).</li></ol>

في هذه المخطوطة ، نقوم بوصف الطريقة الجراحية للمفصل الهجائي في الجرذان بالتفصيل ، بما في ذلك جميع المعدات اللازمة لتنفيذ هذا الاجراء (الشكل 5). في 1965, نشر [فيشر] و ماوي التقرير اولي علي [كت] في فيران, اي أصبح البداية من مثيره تحقيق مجال18. ومنذ ذلك الحين ، أدخلت تعدي...

تاريخيا ، تم اجراء أول دراسات رفض الزراعة من قبل برنت ومدور باستخدام زرع الجلد في القوارض1. سرعان ما أصبح من الواضح ان الجلد له ميزات مناعية متميزة ، مما يجعل من جهاز مناعي للغاية التي تختلف في الرفض من غيرها من الاجهزه الصلبة الاوعيه الدموية2. وعاده ما تقتصر دراسات الفئران لرفض زرع الأعضاء الصلبة علي زرع القلب والكبد والكلي. علي الرغم من ان كل من هذه الاجهزه هي مناسبه لدراسة الرفض ، وهناك مزايا وعيوب لكل منهم. وغالبا ما يتم زرع زرع القلب في البطن والانسام إلى الشريان الابهر والوريد الأجوف ، مع القلب الأصلي للمستلم في المكان3. وهذا لا يعيد الظروف السريرية والتشريحية والفسيولوجية البشرية. بالاضافه إلى ذلك ، قلوب حساسة جدا لنقص التروية الباردة ويجب ان يكون reperfusedها بشكل تفضيلي داخل 1 ح من أجل ان تكون قادره علي استعاده وظيفتها4. تعتبر عمليات زرع الكبد بشكل عام أكثر صعوبة وحساسية من الوقت لأداء الجراحة. بعد أزاله الكبد الام, الكبد المتبرع يجب ان تكون مزروعة وأعاده استخدامها في غضون 30 دقيقه كما المتلقيين لا يمكن ان تستمر لفتره أطول دون الكبد يعمل5. الشريان الكبدي ، الوريد البابي ، وخاصه أعاده بناء القناة الصفراوية يتطلب المهارات الجراحية المكررة. إلى جانب التحديات الجراحية ، ومن المعروف ان الكبد تمتلك خصائص التحمل والقوارض والبشر يمكن ان تصبح متسامحة من الناحية التشغيلية6،7،8. الكلي ، علي عكس الأعضاء المذكورة أنفا ، يمكن زرعها في الأزياء التقويمية ، ومن المعروف ان يكون الجهاز المناعي مع حلقات الرفض متسقة وقابله للتكرار (ان لم يكن المناعي) ، ويسمح لفترات طويلة الباردة نقص التروية مرات من عده ساعات. وهذا يجعل زراعه الكلي الفئران نموذجا مثاليا لدراسة رفض الطعم المخلوط والتسامح.
زراعه الكلي (KT) هو الخيار المفضل لعلاج المرضي الذين يعانون من مرض كلوي في نهاية المرحلة. علي مدي العقود القليلة الماضية ، تحسنت نتائج البقاء علي المدى القصير بعد KT بشكل كبير ، ولكن نتائج البقاء علي المدى الطويل راكدة9. الانظمه التقليدية المثبطة للمناعة تبقي العلاج القياسي المضاد للرفض. ومع ذلك ، فان الاستخدام المزمن للعلاجات المثبطة للمناعة يسبب اعتلالات ووفاات كبيره ، مثل السمية الكلوية ، ومرض السكري ، والأورام الخبيثة الثانوية10،11،12. وعلي المدى الطويل ، يهدد الرفض المزمن للأجسام المضادة والخلايا الخلوية بقاء الكسب غير المرتبط بالطعم ، مع توافر خيارات علاجيه محدوده.
ويتمثل أحد الأهداف الرئيسية لعمليه الزرع في الحث علي تحمل الزراعة من أجل تفادي الحاجة إلى كبت المناعة المزمن. نموذج KT الفئران هو أداه قويه للتحقيق في عمليه الرفض المناعي وتقييم النهج الجديدة للمناعة والتسامح زرع. الجرذ أيضا بمثابه نموذج مناسب لدراسة الخلايا الحاده والمزمنة والرفض بوساطة الأجسام المضادة13،14،15،16،17. وقد اثبت هذا النموذج الجراحي انه أداه موثوقه وقابله للتكرار وفعاله من حيث التكلفة لدراسة مختلف جوانب رفض الكسب غير المزروع والتسامح. وغالبا ما يستخدم لاختبار البروتوكولات الجديدة التي تحفز التسامح قبل القيام بدراسات الحيوانية الكبيرة المكلفة والمرهقة. تنفيذ KT في الفئران يتطلب التدريب الجراحي واسعه النطاق والخبرة للوصول إلى معدلات البقاء علي قيد الحياة من > 90 ٪. في هذه المخطوطة وفي الفيديو التعليمي المصاحب لها ، نقدم لك مخططا تفصيليا لخطوه بخطوه في الفئران ، كما تم تنفيذه بنجاح لسنوات عديده في مؤسستنا.
قبل البدء في اي اجراء ، اختيار المانحين والمتلقيين أمر بالغ الاهميه ويعتمد علي طبيعة التجربة. ومن الناحية المثالية ، ينبغي ان تزن الجهات المانحة والمتلقية ما بين 220 – 260 غ وان تتراوح أعمارهم بين 8 و 12 أسبوعا. الحيوانية تحت 220 g لديها الشرايين الصغيرة القطر ، والاورده ، والحالب ، مما يجعل الانسمام في المتلقي تحديا بشكل خاص. فقدان الدم البسيط يمكن ان يسبب نقص الكالسيوم ويؤدي إلى الموت في الكائنات الصغيرة. الحيوانية أثقل من 260 g عرض المزيد من الدهون حول السفن الخاصة بهم ، وعزل السفينة سوف تتطلب المزيد من الوقت المنطوق وزيادة الوقت الاسكيميه الباردة.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1012px;" width="1011">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Buprenorphine HCL</td>
			<td style="width:167px;">Reckitt Benckiser Healthcare UK</td>
			<td style="width:167px;">NDC12496-0757-5</td>
			<td style="width:463px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dissecting forceps, curved</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">11cm Flat handle&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Heparin sodium injection USP</td>
			<td style="width:167px;">Sagent Pharmaceuticals&#160;</td>
			<td style="width:167px;">NDC25021-400-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro-forceps, straight, smooth</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA3010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA2010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro vessel clamps</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA40120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 1</td>
			<td style="width:167px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:167px;">RS-5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 2</td>
			<td style="width:167px;">F.S.T.</td>
			<td style="width:167px;">91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 3</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">8.5cm Vannas,curved</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Prograf (Tacrolimus/FK506)</td>
			<td style="width:167px;">Astellas</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rats</td>
			<td style="width:167px;">Charles River &#38; Taconic Biosciences&#160;</td>
			<td style="width:167px;">LEW/Crl &#38; DA-M&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Shaver</td>
			<td style="width:167px;">Wahl</td>
			<td>79600-2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture 4-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">J304H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 4-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">683G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 10-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">2820G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Syringes &#38; Needles</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thread, 8-0</td>
			<td style="width:167px;">Ashaway</td>
			<td style="width:167px;">75290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ureteral cuff</td>
			<td style="width:167px;">Microlumen</td>
			<td style="width:167px;">160-1</td>
			<td>Polymide Tubing, Diameter 0.41 mm&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Venous cuff</td>
			<td style="width:167px;">Intramedic BD</td>
			<td style="width:167px;">7441</td>
			<td>PE-200 Non-radiopaque polyethylene tubing ID: 1.4 mm, OD: 1.9 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach

زراعه الكلي يقدم زيادة معدلات البقاء علي قيد الحياة وتحسين نوعيه المعيشة للمرضي الذين يعانون من مرض كلوي في نهاية المرحلة ، بالمقارنة مع اي نوع من العلاج باستبدال الكلي. علي مدي العقود القليلة الماضية ، تم استخدام نموذج زراعه الكلي الفئران لدراسة الظواهر المناعية للرفض والتسامح. وقد أصبح هذا النموذج أداه لا غني عنها لاختبار الادويه المناعية الجديدة والنظم العلاجية قبل المضي قدما في دراسات الحيوانية الكبيرة الباهظة الثمن.
يوفر هذا البروتوكول نظره عامه مفصله حول كيفيه اجراء عمليه زرع الكلي التقويمية بشكل موثوق في الفئران. يتضمن هذا البروتوكول ثلاث خطوات مميزه تزيد من احتماليه النجاح: التروية الكلوية المتبرع بها عن طريق المسح من خلال الوريد المدخل واستخدام نظام الكفة لانسز الاورده الكلوية والحالب ، التالي تقليل البرد والدفء مرات نقص التروية. باستخدام هذه التقنية ، حققنا معدلات البقاء علي قيد الحياة بعد 6 أشهر مع الكرياتينين المصل العادي في الماشية مع عمليات زرع الكلي أو متسامحة. اعتمادا علي الهدف من الدراسة ، يمكن تعديل هذا النموذج عن طريق العلاجات قبل أو بعد الزرع لدراسة الرفض الحاد ، المزمن ، الخلوي ، أو بوساطة الأجسام المضادة. وهو نموذج حيواني قابل للتكرار وموثوق به وفعال من حيث التكلفة لدراسة الجوانب المختلفة لزراعه الكلي.

أجرينا التوليف (n = 5) وزرع الكلي الخيفيه (n = 5). وقد حققت الماشية ذات الزراعة المتزامنة البقاء علي المدى الطويل دون اي علاج مثبط للمناعة. الحيوانية التي تلقت زرع الجينات دون كبت المناعة رفضت الطعم واستسلمت للفشل الكلوي مع متوسط البقاء علي قيد الحياة من 8 أيام (الشكل 4<s...

Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach at JoVE.com

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

الغرض من هذه المخطوطة والبروتوكول هو شرح وتوضيح بالتفصيل الاجراء الجراحي لزرع الكلي التقويمي في الفئران. يتم تبسيط هذه الطريقة لتحقيق التروية الصحيحة من الكلي المتبرع وتقصير الوقت ضخ باستخدام تقنيه انسموسيس الوريدي والكفة حالب.

زرع الكلي الفئران العظام: نهج الجراحية الجديدة والمبسطة

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

مختبرنا في جونز هوبكنز كان يقوم بزراعة الكلى والكبد الحيوانية الصغيرة مع أكثر من عقدين من الخبرة. يحدد هذا البروتوكول المحدد الخطوات الهامة الضرورية لإجراء زراعة الكلى التقويمية بنجاح في الفئران. لزيادة احتمال النجاح وإمكانية إعادة إنتاجه، يتضمن بروتوكولنا ثلاث خطوات مميزة، وهي ضخ الكلى المتبرعة من خلال الوريد البوّاب واستخدام نظام الكفة في استئصال الأوردة الكلوية والحالب.وسوف يكون إثبات هذا الإجراء الدكتور لي تشي، وهو طالب دراسات عليا في مختبرنا. لبدء هذا الإجراء، تخدير الجرذ المانح كما هو موضح في بروتوكول النص. وضع الفئران في وضعية supine وشل الأطراف مع شريط اخفاء معقمة.تطبيق مواد التشحيم العين وتعقيم المجال الجراحي كما هو موضح في بروتوكول النص. قبل الشق الأول ، تأكد من تخدير الجرذ بشكل كاف عن طريق التحقق من عدم وجود رد فعل سحب قرصة إصبع القدم. باستخدام مقص، تبدأ من خلال جعل الجلد خط الوسط الطولي الكبير والعضلات شق من العانة symphysis إلى xiphoid وأدخل تجويف البريتوني.غطّي الأمعاء بشاش معقم رطب ثم احوله إلى الجانب الجانبي الأيمن من البطن الذي يعرض الشريان الأورطي، الوريدي، والكلى اليسرى. تطبيق ملليلتر واحد من المالحة مسخن مع حقنة واحدة cc للحفاظ على الأمعاء والأعضاء البطن رطبة وعند درجة حرارة طبيعية. تطبيق الشاش رطبة ثانية لتغطية وتعبئة المعدة والطحال إلى الكلى.ثم أضف شاشًا رطبًا صغيرًا لتغطية الكلى المكشوفة. استخدام ملقط تشريح microsurgical لعزل وتعبئة الشريان الكلوي الأيسر والوريد من النسيج الضام وبعضها البعض. عزل الآن الوريد الكلوي الأيسر عن طريق الكي الوريد gonadal اليسار وعزل الشريان الكلوي الأيسر عن طريق الكي الشريان الكظري.بعد ذلك، تعبئة الأبهر وفينا كافا متفوقة وأدنى من البطيخ الكلوي الأيسر عن طريق تشريح النسيج الضام مع ملقط تشريح. تقسيم وتعبئة الحالب من النسيج الضام باستخدام ملقط تشريح، ثم استخدام مقص صغير لجعل شق قطري على طول ما يقرب من سنتيمترين تقاس من الحوض الكلوي. إدراج الكفة البوليميد في منتصف الطريق في الحالب وتأمين الكفة عن طريق وضع عقدة مع 8-0 خياطة الحرير.تعبئة الكلية اليسرى عن طريق فصلها عن الدهون في المناطق الدقيقة باستخدام ملقط تشريح أو مقص صغير. اترك الكبسولة الدهنية للكلى ملتصقة واستخدم هذا الموقع للتعامل مع الكلى. الآن إدارة 200 وحدة من الهيبارين باستخدام حقنة مع إبرة قياس 27 من خلال الوريد القضيب.الضغط على موقع الحقن بمسحة قطنية لمدة دقيقة واحدة على الأقل لمنع النزيف. تحديد الوريد المدخل و الوريد السفلي فينا كافا. فضح فينا الكافا السفلية.الاستعداد لطرد الكلى عن طريق حقن 50 ملليلتر من المالحة الباردة مختلطة مع 500 وحدة من الهيبارين في الوريد المدخل باستخدام إبرة قياس 16. قبل التنظيف، وقطع الكافا الوريدي السفلي في المستوى الافرهيدية وقطع الكودال الوريدي المدخل في موقع إدخال إبرة للسماح للدم بالخروج من الدورة الدموية. ابدأ في شطف الكلى عن طريق غرس المحلول الملحي تدريجيًا.مراقبة تغير لون الكلى من الأحمر الداكن إلى اللون الرمادي أو الشاحب. بعد التنظيف، ligate الشريان الكلوي والوريد القريب إلى الشريان الأورطي وفينا كافا. ضع الكلى المنظفة في طبق بيتري يحتوي على ملح بارد على الجليد قبل إزالة جسم المتبرع من المجال الجراحي.مرة واحدة في الكلى في المالحة الباردة، وإصلاح وشل مقبض الكفة الوريد وسحب بلطف الوريد الكلوي من خلال الكفة. ثم إصلاح الوريد الكلوي على الكفة عن طريق وضع ثلاث عقدة باستخدام 8-0 خياطة الحرير. لبدء الإجراء المتلقي، كرر الخطوات من إجراء المانحة حتى إدارة الهيبارين.ثم ضع اثنين من المشابك الدقيقة النابية على الشريان الكلوي الأيسر والوريد القريب إلى الشريان الأورطي وفينا كافا. Ligate المتلقي الوريد الكلوي القريب إلى مدخل الكلى. تدفق الوريد الكلوي مع محلول ملحي heparinized لإزالة جميع الدم المتبقية من السفينة.حرك الوريد الكلوي المربط فوق الوريد الكلوي المكبل الذي تم وضعه سابقًا في الكلى المانحة. ثم تأمين الوريد مع 8-0 خياطة الحرير. الحفاظ على نفس التوجه الموضعي عند تأمين الوريد الكلوي على الكفة.Ligate الشريان الكلوي القريب إلى مدخل الكلى المتلقي. دافق مع الملح الملحي heparinized لإزالة أي الدم الزائد في الوعاء. الآن ligate الحالب على مستوى القطب السفلي من الكلية اليسرى.تعبئة الكلى من الدهون في المناطق المُحتَمَرَة وإزالة الكلى الأصلية. إجراء منظار من نهاية إلى نهاية من الشريان الكلوي مع 8-10 انقطاع الغرز باستخدام خياطة النايلون 10-0. مناورة الشريان باستخدام طبقة المغامرة.إزالة المشابك السفينة لإعادة بدء إعادة ضخ الكلى. ابدأ بإزالة المشبك على الوريد متبوعًا بالمشبك على الشريان. استخدم مسحة قطنية معقمة لإضافة ضغط خفيف إلى أي مناطق ناز حول منطقة الأنستوم.وينبغي أن تكون بضع دقائق كافية لتحقيق براءة براءة امكنة. لاحظ لفترة وجيزة الكلى لتقييم ل perfusion كافية. مباشرة بعد إعادة الضخ، يجب أن تغير الكلى لونها وتستعيد تدريجيا لونها الأحمر الداكن الطبيعي بعد بضع دقائق.لوحظ في بعض الأحيان الصدف المرئي لإنتاج البول الحالب وفي الموقع. الانتهاء عن طريق إدراج الطرف المكشوف من الكفة الحالب في الحالب المتلقي وتأمين الحالب المتلقي مع 8-0 ربطة عنق حريرية من أجل الحفاظ على حالة الحالب المانحة والمتلقية في الموقف ، وربط أطراف كل جانب الحالب لبعضها البعض.اختياريا، nephrectomize الكلى الحق عن طريق ابطاء قبالة pedicle الكلى مع خياطة الحرير 3-0. إزالة جميع الشاش من تجويف البطن وإعادة جميع الأجهزة إلى وضعها الطبيعي. ثم بخ واحدة ملليلتر من المالحة فوق الأمعاء للحفاظ على رطبة.أغلق البطن باستخدام خياطة قابلة للامتصاص 4-0 على عضلة المستقيم وخياطة حريرية 4-0 لإغلاق طبقة الجلد بطريقة متقطعة. وضع الحيوان في قفص نظيف مع الوصول إلى الماء والغذاء libitum الإعلانية والسماح للانتعاش على وسادة التدفئة 37 درجة مئوية. مراقبة الانتعاش لمدة ساعة إلى ساعتين قبل إعادة الحيوان إلى منشأة الحيوان.حققت الحيوانات التي لديها زرع الكلى السينيجيني البقاء على قيد الحياة على المدى الطويل دون أي علاج مثبط للمناعة. وعلى العكس من ذلك، رفضت الحيوانات التي تلقت زراعة الكلى الالجينية دون ضغط المناعة الكسب غير المشروع والاستسلام للفشل الكلوي مع متوسط البقاء على قيد الحياة لمدة ثمانية أيام. متوسط الكرياتينين المصل زيادة متواضعة في المجموعة syngeneic في حين أنها زادت بنسبة 14 أضعاف في المجموعة الجينية.عند الزرع ، لم تظهر الرؤية العيانية لكلية الوصمة السينيجينية أي تشوهات. ظل لون الكلى والهياكل الداخلية سليمة. في المقابل ، قدمت allographs الكلى من الحيوانات المرفوضة بقع نزفية حمراء مع تدمير الهياكل الداخلية.هيماتيوكسيلين وOsin البقع من الطعوم syngeneic أظهرت حلقات شعرية الكبيئية رقيقة مع الأعداد العادية من الخلايا البطانية و mesangial. رفضت allographs عرض الهياكل الكبيّة المدمرة مع علامات الالتهاب والتهاب الأنبوب. تم تنفيذ تلطيخ CD8 إيجابية لتأكيد رفض خلية T بوساطة.في حين أظهرت الغرافيك السينيجينية عدد قليل جدا من خلايا T-إيجابية CD8، أظهرت allographs المرفوضة عددا أكبر بكثير من الخلايا الإيجابية CD8 في وحول كبيباتولي والتبولي تأكيد تي خلية توسطت الرفض. يقدم هذا النموذج نظرة ثاقبة كبيرة في الظواهر المناعية للرفض والتسامح والتفاعلات التي يقوم بها المانحون مما يمهد الطريق لتطوير التدخلات السريرية العلاجية في زراعة الأعضاء الصلبة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

زرع مثلي الأورطي : نموذج الفأر لدراسة تطوير المزمنة اعتلال وعائي

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

وسيلة جديدة لإدارة الجراحية داخل الرغامى وكلاء الحيويه في نموذج الفأر الجنينية

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

العمليات الجراحية لنموذج الفئران من الجزئي زرع الكبد orthotopic مع إعادة الإعمار الكبدي الشرياني

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

تجاوز القلبي في طراز ماوس: نهج جديد

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

نموذج الفئران من أورثوتوبيك زرع الكبد استخدام تقنية رواية ملامسة مغناطيسي للتعمير الوريد الأجوف سوبراهيباتيك

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

نموذج بورسين ما قبل السريرية لزراعة القلب التقويمي

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

مضاعفات مخفضة بعد إعادة الاتصال الشرياني في نموذج الجرذ من زرع الكبد العظام

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

عملية زرع الكلى التلقائية في نموذج بورسين باستخدام 24 ساعة لحفظ الأعضاء والقياس المستمر عن بعد

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

زراعة الكلى بمساعدة الروبوت

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...